JP2021524851A - ブドウ膜黒色腫の治療に使用するためのｅｃｈｏ−７腫瘍溶解性ウイルス - Google Patents

Abstract

本明細書では、ブドウ膜黒色腫を治療するためのＥＣＨＯ−７クラス腫瘍溶解性ウイルスの使用、およびブドウ膜黒色腫を治療するためのＥＣＨＯ−７ウイルスと薬学的に許容される担体とを含む組成物が提供される。

Description

本発明は、ＥＣＨＯ−７クラス腫瘍溶解性ウイルスと薬学的に許容される担体とを含む組成物を投与することによってブドウ膜黒色腫を治療するための方法および組成物に関する。

ブドウ膜黒色腫は転移を発生させることが多く、不治であるため、ブドウ膜黒色腫の治療は腫瘍学において未解決の問題である（Ｓｉｎｇｈ ＡＤ，Ｔｕｒｅｌｌ ＭＥ，Ｔｏｐｈａｍ ＡＫ．「Ｕｖｅａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ：ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ，ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ａｎｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ（ブドウ膜黒色腫：発生率、治療および生存の傾向）」Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ ２０１１；１１８：１８８１−５）。皮膚黒色腫の治療におけるいくつかの取組にもかかわらず、皮膚黒色腫に対して承認された医薬品をブドウ膜黒色腫の治療に使用する試みは、非常に残念な結果になった（Ｐｅｒｅｉｒａ ＰＲ，Ｏｄａｓｈｉｒｏ ＡＮ，Ｌｉｍ ＬＡら「Ｃｕｒｒｅｎｔ ａｎｄ ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｐｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｕｖｅａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ（ブドウ膜黒色腫の現在および新たな治療選択肢）」Ｃｌｉｎ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ ２０１３；７：１６６９−８２）。皮膚黒色腫とブドウ膜黒色腫は生物学的に実質的に異なるため、これは理解できる（レビューについては、Ｃａｒｖａｊａｌ ＲＤら、Ｂｒ Ｊ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ ２０１７；１０１：３８−４４．ｄｏｉ：１０．１１３６／ｂｊｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ−２０１６−３０９０３４を参照）。

いくつかの局所療法の開発にもかかわらず、ブドウ膜黒色腫の５年生存率（約８０％）は過去３０年間変化しておらず（Ｓｉｎｇｈ ＡＤ，Ｔｕｒｅｌｌ ＭＥ，Ｔｏｐｈａｍ ＡＫ．「Ｕｖｅａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ：ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ，ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ａｎｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ（ブドウ膜黒色腫：発生率、治療および生存の傾向）」Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ ２０１１；１１８：１８８１−５）、最大５０％の患者に転移が発生する（Ｋｕｊａｌａ Ｅ，Ｍａｋｉｔｉｅ Ｔ，Ｋｉｖｅｌａ Ｔ「Ｖｅｒｙ ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｕｖｅａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ（ブドウ膜黒色腫患者の非常に長期的な予後）」Ｉｎｖｅｓｔ Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ Ｖｉｓ Ｓｃｉ ２００３；４４：４６５１）。

転移のリスクを低減する効果的な補助全身療法は実証されていない（Ｔｒｉｏｚｚｉ ＰＬ，Ｓｉｎｇｈ ＡＤ「Ａｄｊｕｖａｎｔ ｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ｕｖｅａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ：ｃｕｒｒｅｎｔ ｓｔａｔｕｓ（ブドウ膜黒色腫の補助療法：現状）」Ｏｃｕｌ Ｏｎｃｏｌ Ｐａｔｈｏｌ ２０１５；１：５４−５）。転移のある患者の１年生存率は１５％であると報告されており、生存の中央値は４〜１５ヶ月の範囲であると報告されている（Ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｉｖｅ Ｏｃｕｌａｒ Ｍｅｌａｎｏｍａ Ｓｔｕｄｙ Ｇｒｏｕｐ「Ｔｈｅ ＣＯＭＳ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ ｔｒｉａｌ ｏｆ ｉｏｄｉｎｅ １２５ ｂｒａｃｈｙｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ｃｈｏｒｏｉｄａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ：Ｖ．Ｔｗｅｌｖｅ−ｙｅａｒ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｒａｔｅｓ ａｎｄ ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ ｆａｃｔｏｒｓ：ＣＯＭＳ ｒｅｐｏｒｔ Ｎｏ．２８（脈絡膜黒色腫に対するヨウ素１２５近接照射療法の無作為化試験ＣＯＭＳ：Ｖ．１２年死亡率と予後因子：ＣＯＭＳレポートＮｏ．２８）」Ａｒｃｈ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ ２００６；１２４：１６８４−９３）。

転移性疾患を発症する患者について、証明された標準治療はまだない（Ｃａｒｖａｊａｌ ＲＤ，Ｓｃｈｗａｒｔｚ ＧＫ，Ｔｅｚｅｌ Ｔら「Ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｄｉｓｅａｓｅ ｆｒｏｍ ｕｖｅａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ：ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｐｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｆｕｔｕｒｅ ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ（ブドウ膜黒色腫からの転移性疾患：治療の選択肢と将来の展望）」Ｂｒ Ｊ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ ２０１７；１０１：３８−４４）。

皮膚黒色腫を治療するための化学療法の選択肢であるダカルバジンは、これらの異なる疾患間の固有の違いにもかかわらず、ブドウ膜黒色腫に使用されてきた（Ｎａｔｈａｎ Ｐ，Ｃｏｈｅｎ Ｖ，Ｃｏｕｐｌａｎｄ Ｓら「Ｕｖｅａｌ Ｍｅｌａｎｏｍａ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ．２０１５（ブドウ膜黒色腫国内ガイドライン２０１５）」ｈｔｔｐ：／／ｍｅｌａｎｏｍａｆｏｃｕｓ．ｃｏｍ／ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ−２／ｕｍ−ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ−ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ／．Ｄｕｍｍｅｒ，Ｒ．，Ｈａｕｓｃｈｉｌｄ，Ａ．，Ｌｉｎｄｅｎｂｌａｔｔ，Ｎ．，Ｐｅｎｔｈｅｒｏｕｄａｋｉｓ，Ｇ．，Ｋｅｉｌｈｏｌｚ，Ｕ．，２０１５．「Ｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｍｅｌａｎｏｍａ：ＥＳＭＯ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｒａｃｔｉｃｅ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ，ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ａｎｄ ｆｏｌｌｏｗ−ｕｐ（皮膚黒色腫：診断、治療およびフォローアップのためのＥＳＭＯ臨床診療ガイドライン）」Ａｎｎ．Ｏｎｃｏｌ．２６ Ｓｕｐｐｌ ５，ｖ１２６−ｖ１３２．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０９３／ａｎｎｏｎｃ／ｍｄｖ２９７．４２ ＮＣＣＮ．ＮＣＣＮ，２０１８．Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｎｅｔｗｏｒｋ「Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｐｒａｃｔｉｃｅ ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｉｎ ｏｎｃｏｌｏｇｙ．Ｍｅｌａｎｏｍａ（腫瘍学の臨床診療ガイドライン。黒色腫）」Ｖ．２．Ｆｅｂ．２１（ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｎｃｃｎ．ｏｒｇ／ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌｓ／ｐｈｙｓｉｃｉａｎ＿ｇｌｓ／ｐｄｆ／ｍｅｌａｎｏｍａ＿ｂｌｏｃｋｓ．ｐｄｆ）．１−１７３．）。

予想されるように、ブドウ膜黒色腫の治療におけるダカルバジンの活性は限られている（Ｄｕｍｍｅｒ，Ｒ．，Ｈａｕｓｃｈｉｌｄ，Ａ．，Ｌｉｎｄｅｎｂｌａｔｔ，Ｎ．，Ｐｅｎｔｈｅｒｏｕｄａｋｉｓ，Ｇ．，Ｋｅｉｌｈｏｌｚ，Ｕ．，２０１５「Ｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｍｅｌａｎｏｍａ：ＥＳＭＯ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｒａｃｔｉｃｅ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ，ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ａｎｄ ｆｏｌｌｏｗ−ｕｐ（皮膚黒色腫：診断、治療およびフォローアップのためのＥＳＭＯ臨床診療ガイドライン）」Ａｎｎ．Ｏｎｃｏｌ．２６ Ｓｕｐｐｌ ５，ｖ１２６−ｖ１３２．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０９３／ａｎｎｏｎｃ／ｍｄｖ２９７．Ｃａｒｖａｊａｌ ＲＤ，Ｓｏｓｍａｎ ＪＡ，Ｑｕｅｖｅｄｏ ＪＦら「Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｓｅｌｕｍｅｔｉｎｉｂ ｖｓ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｎ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ−ｆｒｅｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｉｎ ｕｖｅａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ：ａ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｒｉａｌ（ブドウ膜黒色腫の無増悪生存におけるセルメチニブと化学療法の効果の比較：無作為化臨床試験）」ＪＡＭＡ ２０１４；３１１：２３９７−４０５．Ｓａｃｃｏ ＪＪ，Ｎａｔｈａｎ ＰＤ，Ｄａｎｓｏｎ Ｓら、「Ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ ｖｅｒｓｕｓ ｄａｃａｒｂａｚｉｎｅ ａｓ ｆｉｒｓｔ−ｌｉｎｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｕｖｅａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ（転移性ブドウ膜黒色腫患者の第一選択治療としてのスニチニブとダカルバジンの比較）」Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２０１３；３１（Ｓｕｐｐｌ）：Ａｂｓｔｒ９０３１）。

テモゾロミド、シスプラチン、トレオスルファン、フォテムスチンおよびそれらの組み合わせを含む他の化学療法レジメンがブドウ膜黒色腫において調査されているが、これまでのところ期待外れの結果が出ている（Ａｕｇｓｂｕｒｇｅｒ ＪＪ，Ｃｏｒｒｅａ ＺＭ，Ｓｈａｉｋｈ ＡＨ「Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓ ｏｆ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ ｆｏｒ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｕｖｅａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ（転移性ブドウ膜黒色腫に対する治療の有効性）」Ａｍ Ｊ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ ２００９；１４８：１１９−２７．Ｐｅｒｅｉｒａ ＰＲ，Ｏｄａｓｈｉｒｏ ＡＮ，Ｌｉｍ ＬＡら「Ｃｕｒｒｅｎｔ ａｎｄ ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｐｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｕｖｅａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ（ブドウ膜黒色腫の現在および新たな治療選択肢）」Ｃｌｉｎ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ ２０１３；７：１６６９−８２．Ｓｐａｇｎｏｌｏ Ｆ，Ｇｒｏｓｓｏ Ｍ，Ｐｉｃａｓｓｏ Ｖら「Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｕｖｅａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ ｗｉｔｈ ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ ｆｏｔｅｍｕｓｔｉｎｅ（静脈内フォテムスチンによる転移性ブドウ膜黒色腫の治療）」Ｍｅｌａｎｏｍａ Ｒｅｓ ２０１３；２３：１９６−８）。

細胞毒性Ｔリンパ球関連抗原４（ＣＴＬＡ−４）をブロックするヒトモノクローナル抗体であるイピリムマブは、進行した切除不能な黒色腫の治療薬として米国および欧州で承認されている（Ｄｕｍｍｅｒ，Ｒ．，Ｈａｕｓｃｈｉｌｄ，Ａ．，Ｌｉｎｄｅｎｂｌａｔｔ，Ｎ．，Ｐｅｎｔｈｅｒｏｕｄａｋｉｓ，Ｇ．，Ｋｅｉｌｈｏｌｚ，Ｕ．，２０１５．「Ｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｍｅｌａｎｏｍａ：ＥＳＭＯ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｒａｃｔｉｃｅ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ，ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ａｎｄ ｆｏｌｌｏｗ−ｕｐ（皮膚黒色腫：診断、治療およびフォローアップのためのＥＳＭＯ臨床診療ガイドライン）」Ａｎｎ．Ｏｎｃｏｌ．２６ Ｓｕｐｐｌ ５，ｖ１２６−ｖ１３２．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０９３／ａｎｎｏｎｃ／ｍｄｖ２９７）。

転移性ブドウ膜黒色腫の評価から、約５％〜１０％の奏効率が報告されている（Ｄｅｏ ＭＡ「Ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｂｅｎｅｆｉｔ ｆｒｏｍ ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｉｎ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｕｖｅａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ ｐａｔｉｅｎｔｓ（転移性ブドウ膜黒色腫患者におけるイピリムマブ治療による長期生存の利益）」Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２０１４；３２（Ｓｕｐｐｌ）：Ａｂｓｔｒａｃｔ ３０６０．Ｋｈａｎ ＳＡ，Ｃａｌｌａｈａｎ Ｍ，Ｐｏｓｔｏｗ ＭＡら「Ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ ｉｎ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｕｖｅａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ：ｔｈｅ Ｍｅｍｏｒｉａｌ Ｓｌｏａｎ−Ｋｅｔｔｅｒｉｎｇ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｎｔｅｒ ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅ（ブドウ膜黒色腫の治療におけるイピリムマブ：メモリアルスローンケタリング癌センターの経験）」Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２０１２；３０（Ｓｕｐｐｌ）：Ａｂｓｔｒａｃｔ ８５４９．Ｌｕｋｅ ＪＪ，Ｃａｌｌａｈａｎ ＭＫ，Ｐｏｓｔｏｗ ＭＡら「Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ ｆｏｒ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｕｖｅａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ：ａ ｒｅｔｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ ｔｈｅ Ｄａｎａ−Ｆａｒｂｅｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｍｅｍｏｒｉａｌ Ｓｌｏａｎ−Ｋｅｔｔｅｒｉｎｇ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｎｔｅｒ，ａｎｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｌａｕｓａｎｎｅ ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅ（転移性ブドウ膜黒色腫に対するイピリムマブの臨床活性：ダナファーバー癌研究所、マサチューセッツ総合病院、メモリアルスローンケタリング癌センター、およびローザンヌ大学病院の経験の遡及的レビュー）」Ｃａｎｃｅｒ ２０１３；１１９：３６８７−９５．Ｍａｉｏ Ｍ，Ｄａｎｉｅｌｌｉ Ｒ，Ｃｈｉａｒｉｏｎ−Ｓｉｌｅｎｉ Ｖら「Ｅｆｆｉｃａｃｙ ａｎｄ ｓａｆｅｔｙ ｏｆ ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｐｒｅ−ｔｒｅａｔｅｄ，ｕｖｅａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ（前治療されたブドウ膜黒色腫患者におけるイピリムマブの有効性と安全性）」Ａｎｎ Ｏｎｃｏｌ ２０１３；２４：２９１１−１５）。

これらの試験の結果でも、皮膚黒色腫およびブドウ膜黒色腫が同じ治療法に同じようには反応しないことが確認された。したがって、これらの試験における全生存期間（ＯＳ）の中央値が６．０〜９．７ヶ月であるという証拠は、少数の患者でのみ反応が遅延し、持続する可能性があることを示唆している（Ｋｈａｎ ＳＡ，Ｃａｌｌａｈａｎ Ｍ，Ｐｏｓｔｏｗ ＭＡら「Ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ ｉｎ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｕｖｅａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ：ｔｈｅ Ｍｅｍｏｒｉａｌ Ｓｌｏａｎ−Ｋｅｔｔｅｒｉｎｇ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｎｔｅｒ ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅ（ブドウ膜黒色腫の治療におけるイピリムマブ：メモリアルスローンケタリング癌センターの経験）」Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２０１２；３０（Ｓｕｐｐｌ）：Ａｂｓｔｒａｃｔ ８５４９．Ｌｕｋｅ ＪＪ，Ｃａｌｌａｈａｎ ＭＫ，Ｐｏｓｔｏｗ ＭＡら「Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ ｆｏｒ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｕｖｅａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ：ａ ｒｅｔｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ ｔｈｅ Ｄａｎａ−Ｆａｒｂｅｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｍｅｍｏｒｉａｌ Ｓｌｏａｎ−Ｋｅｔｔｅｒｉｎｇ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｎｔｅｒ，ａｎｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｌａｕｓａｎｎｅ ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅ（転移性ブドウ膜黒色腫に対するイピリムマブの臨床活性：ダナファーバー癌研究所、マサチューセッツ総合病院、メモリアルスローンケタリング癌センター、およびローザンヌ大学病院の経験の遡及的レビュー）」Ｃａｎｃｅｒ ２０１３；１１９：３６８７−９５）。

皮膚黒色腫の治療に別のクラスの生物学的医薬品であるニボルマブとペンブロリズマブを使用する試みがなされた。これらの薬剤は、プログラムされた細胞死１（ＰＤ−１）受容体を標的とする完全ヒトモノクローナル抗体であり、進行性皮膚黒色腫に対して米国と欧州で承認されている。しかし、ブドウ膜黒色腫におけるＰＤ−１阻害の活性は、治療の結果を実質的に改善しなかった。（Ｒｏｂｅｒｔ Ｃ、Ｒｉｂａｓ Ａ、Ｗｏｌｃｈｏｋ ＪＤら「Ａｎｔｉ−ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ−ｄｅａｔｈ−ｒｅｃｅｐｔｏｒ−１ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ ｉｎ ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ−ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ ａｄｖａｎｃｅｄ ｍｅｌａｎｏｍａ：ａ ｒａｎｄｏｍｉｓｅｄ ｄｏｓｅ−ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｃｏｈｏｒｔ ｏｆ ａ ｐｈａｓｅ １ ｔｒｉａｌ（ニボルマブ抗療性の進行した黒色腫でペンブロリズマブを用いた非プログラム細胞死受容体１治療：フェーズ１試験の無作為化用量比較コホート）」Ｌａｎｃｅｔ ２０１４；３８４：１１０９−１７；Ｒｏｂｅｒｔ Ｃ，Ｌｏｎｇ ＧＶ，Ｂｒａｄｙ Ｂら「Ｎｉｖｏｌｕｍａｂ ｉｎ ｐｒｅｖｉｏｕｓｌｙ ｕｎｔｒｅａｔｅｄ ｍｅｌａｎｏｍａ ｗｉｔｈｏｕｔ ＢＲＡＦ ｍｕｔａｔｉｏｎ（ＢＲＡＦ変異のない未治療の黒色腫におけるニボルマブ）」Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２０１５；３７２：３２０−３０．５５ Ｗｅｂｅｒ ＪＳ，Ｄ’Ａｎｇｅｌｏ ＳＰ，Ｍｉｎｏｒ Ｄら「Ｎｉｖｏｌｕｍａｂ ｖｅｒｓｕｓ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａｄｖａｎｃｅｄ ｍｅｌａｎｏｍａ ｗｈｏ ｐｒｏｇｒｅｓｓｅｄ ａｆｔｅｒ ａｎｔｉ−ＣＴＬＡ−４ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ（ＣｈｅｃｋＭａｔｅ ０３７）：ａ ｒａｎｄｏｍｉｓｅｄ，ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ，ｏｐｅｎ−ｌａｂｅｌ，ｐｈａｓｅ ３ ｔｒｉａｌ（抗ＣＴＬＡ−４治療（ＣｈｅｃｋＭａｔｅ ０３７）後に進行した進行性黒色腫患者におけるニボルマブと化学療法の比較：無作為化、対照、非盲検、フェーズ３試験）」Ｌａｎｃｅｔ Ｏｎｃｏｌ ２０１５；１６：３７５−８４）。

最近、ブドウ膜黒色腫治療のためのいくつかの新規選択肢が開示された。（「Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ２−ｍｅｔｈｏｘｙｅｓｔｒａｄｉｏｌ ｔｏ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｆｏｒ ｔｒｅａｔｉｎｇ ｕｖｅａｌ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｍｅｌａｎｏｍａ（ブドウ膜悪性黒色腫を治療するための医薬品の調製への２−メトキシエストラジオールの適用）」中国特許第１０７３７５３０１号明細書２０１７年１１月２４日、「Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ＣＴＣＦ ｓｎａｒｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ａｎｔｉ−ｕｖｅａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ ｍｅｄｉｃｉｎｅ（抗ブドウ膜黒色腫薬の調製におけるＣＴＣＦ ＳＮＡＲＥタンパク質の適用）」中国特許第１０６９１３８６１号明細書２０１７年７月４日、「Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｐａｎ−ＨＤＡＣ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｔｏ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｒｕｇ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｔｒｅａｔｉｎｇ ｕｖｅａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ（ブドウ膜黒色腫の治療に使用される薬剤の調製への汎ＨＤＡＣ阻害剤の適用）」中国特許第１０６９０２１０６号明細書２０１７年６月３０日、「Ｍｅｔｈｏｄ Ｆｏｒ Ｔｈｅ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ Ｏｆ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ Ｏｆ Ｔｈｅ Ｅｙｅ（眼の増殖性障害の治療方法）」米国特許第２０１１２００６６２号明細書）。それにもかかわらず、これらのアプローチは、ヒトでの臨床使用のための規制機関によって承認されていない。

一本鎖および二本鎖ＲＮＡおよびＤＮＡウイルスの両方が、癌治療のための有望な腫瘍溶解剤として最近認識されている（Ｆｏｕｎｔｚｉｌａｓ Ｃｈ．，Ｐａｔｅｌ Ｓ．，Ｍａｈａｌｉｎｇａｍ Ｄ．「Ｒｅｖｉｅｗ：Ｏｎｃｏｌｙｔｉｃ ｖｉｒｏｔｈｅｒａｐｙ，ｕｐｄａｔｅｓ ａｎｄ ｆｕｔｕｒｅ ｄｉｒｅｃｔｉｏｎｓ（レビュー：腫瘍溶解性ウイルス療法、最新情報および将来の方向性）」Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ．２０１７；８：１０２６１７−１０２６３９．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１８６３２／ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ．１８３０９）。

一本鎖ＲＮＡウイルスの中で、コクサッキーウイルスＡ２１およびＢ３が、ＤＡＦ受容体に結合する抗癌剤として試験された（Ｈａｒｒｉｎｇｔｏｎ ＫＪ、Ｋａｒａｐａｎａｇｉｏｔｏｕ ＥＭ、Ｒｏｕｌｓｔｏｎｅ Ｖ、Ｔｗｉｇｇｅｒ ＫＲ、Ｗｈｉｔｅ ＣＬ、Ｖｉｄａｌ Ｌ、Ｂｅｉｒｎｅ Ｄ、Ｐｒｅｓｔｗｉｃｈ Ｒ、Ｎｅｗｂｏｌｄ Ｋ、Ａｈｍｅｄ Ｍ、Ｔｈｗａｙ Ｋ、Ｎｕｔｔｉｎｇ ＣＭ、Ｃｏｆｆｅｙ Ｍら「Ｔｗｏ−ｓｔａｇｅ ｐｈａｓｅ Ｉ ｄｏｓｅ−ｅｓｃａｌａｔｉｏｎ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｉｎｔｒａｔｕｍｏｒａｌ ｒｅｏｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ ３ ｄｅａｒｉｎｇ ａｎｄ ｐａｌｌｉａｔｉｖｅ ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａｄｖａｎｃｅｄ ｃａｎｃｅｒｓ（進行癌患者を対象とした腫瘍内レオウイルス３型Ｄｅａｒｉｎｇおよび緩和的放射線療法の２段階フェーズ１用量漸増試験）」Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２０１０；１６：３０６７−７７．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１５８／１０７８−０４３２．ＣＣＲ−１０−００５４；Ｃｈｅｕｎｇ ＮＫ，Ｗａｌｔｅｒ ＥＩ，Ｓｍｉｔｈ−Ｍｅｎｓａｈ ＷＨ，Ｒａｔｎｏｆｆ ＷＤ，Ｔｙｋｏｃｉｎｓｋｉ ＭＬ，Ｍｅｄｏｆ ＭＥ「Ｄｅｃａｙ−ａｃｃｅｌｅｒａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ ｐｒｏｔｅｃｔｓ ｈｕｍａｎ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌｓ ｆｒｏｍ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ ｉｎ ｖｉｔｒｏ（崩壊促進因子はｉｎｖｉｔｒｏで補体を介した細胞毒性からヒト腫瘍細胞を保護する）」Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．１９８８；８１：１１２２−２８．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１７２／ＪＣＩ１１３４２６；Ｌｉ Ｌ，Ｓｐｅｎｄｌｏｖｅ Ｉ，Ｍｏｒｇａｎ Ｊ，Ｄｕｒｒａｎｔ ＬＧ「ＣＤ５５ ｉｓ ｏｖｅｒ−ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｔｕｍｏｒ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ（ＣＤ５５は腫瘍環境で過剰発現する）」Ｂｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ．２００１；８４：８０−８６．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０５４／ｂｊｏｃ．２０００．１５７０；Ｓｈａｆｒｅｎ ＤＲ，Ｄｏｒａｈｙ ＤＪ，Ｉｎｇｈａｍ ＲＡ，Ｂｕｒｎｓ ＧＦ，Ｂａｒｒｙ ＲＤ「Ｃｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓ Ａ２１ ｂｉｎｄｓ ｔｏ ｄｅｃａｙ−ａｃｃｅｌｅｒａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ ｂｕｔ ｒｅｑｕｉｒｅｓ ｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｍｏｌｅｃｕｌｅ １ ｆｏｒ ｃｅｌｌ ｅｎｔｒｙ（コクサッキーウイルスＡ２１は崩壊促進因子に結合するが細胞侵入には細胞間接着分子１が必要である）」Ｊ Ｖｉｒｏｌ．１９９７；７１：４７３６−４３）。

コクサッキーウイルスＡ２１が血管悪性ヒト黒色腫腫瘍の腫瘍溶解を誘発するといういくつかの証拠がある（Ａｕ ＧＧ、Ｌｉｎｄｂｅｒｇ ＡＭ、Ｂａｒｒｙ ＲＤ、ＳｈａｆｒｅｎＤＲ「Ｏｎｃｏｌｙｓｉｓ ｏｆ ｖａｓｃｕｌａｒ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｈｕｍａｎ ｍｅｌａｎｏｍａ ｔｕｍｏｒｓ ｂｙ Ｃｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓ Ａ２１（コクサッキーウイルスＡ２１による血管悪性ヒト黒色腫腫瘍の腫瘍溶解）」Ｉｎｔ Ｊ Ｏｎｃｏｌ．２００５；２６：１４７１−７６；Ａｎｄｔｂａｃｋａ ＲＨ，Ｃｕｒｔｉ ＢＤ，Ｋａｕｆｍａｎ Ｈ，Ｄａｎｉｅｌｓ ＧＡ，Ｎｅｍｕｎａｉｔｉｓ ＪＪ，Ｓｐｉｔｌｅｒ ＬＥ，Ｈａｌｌｍｅｙｅｒ Ｓ，Ｌｕｔｚｋｙ Ｊ，Ｓｃｈｕｌｔｚ ＳＭ，Ｗｈｉｔｍａｎ ＥＤ，Ｚｈｏｕ Ｋ，Ｋａｒｐａｔｈｙ Ｒ，Ｗｅｉｓｂｅｒｇ ＪＩら「Ｆｉｎａｌ ｄａｔａ ｆｒｏｍ ＣＡＬＭ：Ａ ｐｈａｓｅ ＩＩ ｓｔｕｄｙ ｏｆ Ｃｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓ Ａ２１（ＣＶＡ２１）ｏｎｃｏｌｙｔｉｃ ｖｉｒｕｓ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａｄｖａｎｃｅｄ ｍｅｌａｎｏｍａ（ＣＡＬＭの最終データ：進行性黒色腫患者を対象としたコクサッキーウイルスＡ２１（ＣＶＡ２１）腫瘍溶解性ウイルス免疫療法のフェーズ２試験）」ＡＳＣＯ Ｍｅｅｔｉｎｇ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ．２０１５；３３：９０３０）。

他の腫瘍溶解性ＲＮＡ、一本鎖ウイルス（水疱性口内炎ウイルス、セネカバレーウイルス）は、今日まで黒色腫癌で試験されていない。どのウイルスもブドウ膜黒色腫で試験されていない。

エコーウイルスは一本鎖ＲＮＡウイルスであり、ヒト卵巣癌およびヒト前立腺癌に対して抗癌活性を示す（Ｓｈａｆｒｅｎ ＤＲ、Ｓｙｌｖｅｓｔｅｒ Ｄ、Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ ＥＳ、Ｃａｍｐｂｅｌｌ ＩＧ、ＢａｒｒｙＲＤ「Ｏｎｃｏｌｙｓｉｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒｓ ｂｙ ｅｃｈｏｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ １（エコーウイルス１型によるヒト卵巣癌の腫瘍溶解）」Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ．２００５；１１５：３２０−２８．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１００２／ｉｊｃ．２０８６６；．Ｂｅｒｒｙ ＬＪ，Ａｕ ＧＧ，Ｂａｒｒｙ ＲＤ，Ｓｈａｆｒｅｎ ＤＲ「Ｐｏｔｅｎｔ ｏｎｃｏｌｙｔｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓｅｓ ａｇａｉｎｓｔ ｈｕｍａｎ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ（ヒト前立腺癌に対するヒトエンテロウイルスの強力な腫瘍溶解活性）」Ｐｒｏｓｔａｔｅ．２００８；６８：５７７−８７．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１００２／ｐｒｏｓ．２０７４１）。

ＥＣＨＯ−７ウイルスは、皮膚黒色腫において腫瘍溶解活性を有することが知られている。例えば、欧州特許第１５３７８７２号明細書、ならびに国際公開第２０１５／００７７８８号パンフレットおよびそれに対応する欧州特許第２８２６８５６号明細書を参照されたい。

非病原性ウイルスのピコルナウイルス科、エンテロウイルス属、腸内細胞病原性ヒトオーファングループ、７型（ＥＣＨＯ−７）グループＶＩＩの腫瘍溶解性、腫瘍親和性および免疫調節性を有する黒色腫に適応したプラス鎖一本鎖ＲＮＡウイルスは、Ｄｏｎｉｎａ Ｓ，Ｓｔｒｅｌｅ Ｉ，Ｐｒｏｂｏｋａ Ｇら「Ｍｅｌａｎｏｍａ（黒色腫）」Ｒｅｓ．２０１５；２５（５）：４２１−４２６．Ｂｒｕｖｅｒｅ Ｒ，Ｈｅｉｓｅｌｅ Ｏ，Ｆｅｒｄａｔｓ Ａ，Ｒｕｐａｉｓ Ａ，Ｍｕｃｅｎｉｅｃｅ Ａ．Ａｃｔａ Ｍｅｄｉｃａ Ｌｉｔｕａｎｉｃａ Ｓｕｐｐｌ．２００２；９：９７−１００．Ａｌｂｅｒｔｓ Ｐ，Ｔｉｌｇａｓｅ Ａ，Ｒａｓａ Ａ，Ｂａｎｄｅｒｅ Ｋ，Ｖｅｎｓｋｕｓ Ｄ．Ｅｕｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ ２０１８；８３７：１１７−１２６．Ｇｌｉｎｋｉｎａ ＬＳ，Ｂｒｕｖｅｒｅ ＲＺ，Ｖｅｎｓｋｕｓ ＤＲ，Ｇａｒｋｌａｖａ ＲＲ，Ｍｕｃｅｎｉｅｃｅ ＡＪ．．Ｖｏｐｒ Ｏｎｋｏｌ．１９９２；３８（５）：５４０−５４７．Ｇｌｉｎｋｉｎａ ＬＳ，Ｈｅｉｓｅｌｅ ＯＧ，Ｇａｒｋｌａｖａ ＲＲ，Ｍｕｃｅｎｉｅｃｅ ＡＪ．．Ｖｏｐｒ Ｏｎｋｏｌ．１９９２；３８（５）：５３４−５４０．Ｇｌｉｎｋｉｎａ ＬＳ，Ｂｒｕｖｅｒｅ ＲＺ．．Ｖｏｐｒ Ｏｎｋｏｌ．１９９２；３８（６）：６５９−６６６に記載されている。

ＥＣＨＯ−７は、ヒト皮膚黒色腫細胞株ＦＭ−９、ＥＣＡＣＣ １３０１２４１６など、インビトロで多くの癌細胞株に対して活性がある（Ｔｉｌｇａｓｅ Ａ．、Ｐａｔｅｔｋｏ Ｌ．、ＢｌａｋｅＩ．、Ｒａｍａｔａ−Ｓｔｕｎｄａ Ａ．、ＢｏｒｏｄｕｓｋｉｓＭ．、Ａｌｂｅｒｔｓ Ｐ．、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ ２０１８；９（６）：１０３３−１０４９。ｄｏｉ：１０．７１５０／ｊｃａ．２３２４２）。

ＥＣＨＯ−７は、進行した皮膚黒色腫、小細胞肺癌、およびヒトの組織球性肉腫に対しても活性があり得るといういくつかの証拠がある（Ａｌｂｅｒｔｓ Ｐ、Ｏｌｍａｎｅ Ｅ、ＢｒｏｋａｎｅＬら．ＡＰＭＩＳ．２０１６；１２４（１０）：８９６−９０４；ＤｏｎｉｎａＳ、ＳｔｒｅｌｅＩ、Ｐｒｏｂｏｋａ Ｇ、ＡｕｚｉｎｓＪ、Ａｌｂｅｒｔｓ Ｐ、Ｊｏｎｓｏｎ Ｂ、Ｖｅｎｓｋｕｓ Ｄ、Ｍｕｃｅｎｉｅｃｅ Ａ．Ｍｅｌａｎｏｍａ Ｒｅｓ．２０１５；２５：４２１−２６．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０９７／ＣＭＲ．０００００００００００００１８０）。

それにもかかわらず、皮膚型黒色腫とは生物学的に異なるブドウ膜黒色腫におけるＥＣＨＯ−７または他の腫瘍溶解性ウイルスの活性については何も知られていない。したがって、これまでのところ、皮膚黒色腫の治療法でブドウ膜黒色腫の治療に成功することは示されていない。

転移性ブドウ膜黒色腫の治療における、進行性黒色腫に対して現在承認されている薬剤の活性が限られているため、この管理が困難な疾患に冒された患者の転帰を改善するために特別に承認された治療法および専用の管理戦略が実際に必要とされている。アドリアマイシン、シスプラチン、タキソール、ビンクリスチン、マイトマイシン、ブスルファン、アクチノマイシン−Ｄ、およびホスホルアミドマスタードなどの従来の抗増殖薬は細胞毒性が高く、増殖細胞だけでなく非増殖細胞も殺し、局所投与後に組織損傷を引き起こす。さらに、そのような薬剤は細胞に損傷を与え、細胞機能を損なう可能性がある。ブドウ膜黒色腫の局所治療のために以前に開発された方法は、肝臓または他の臓器および組織に転移がない初期段階のブドウ膜黒色腫にのみ適用することができる。したがって、効果的で非毒性かつ全身性の活性薬物が、医学的に非常に必要とされている。

予期せぬことに、本発明者らは、欧州特許第２８２６８５６号明細書の対象である非病原性腫瘍溶解性ＥＣＨＯ−７型ウイルスが、ブドウ膜黒色腫の治療に有効であることを見出した。本発明の目的のために、ＥＣＨＯ−７型ウイルスは、欧州特許第２８２６８５６号明細書に開示されているような安定したゲノム配列を有し、かつ欧州特許第２８２６８５６号明細書に開示されている方法に従って入手可能である、ＥＣＨＯ ７型の改変エンテロウイルスを意味する。本発明の文脈において本明細書で使用される「ＥＣＨＯ−７型ウイルス」という用語は、欧州特許第２８２６８５６号明細書に開示されているような非病原性腫瘍溶解性ＥＣＨＯ−７型ウイルスを意味する。

図１Ａは、９２−１細胞への影響がＥＣＨＯ−７型ウイルス（１％）では４４時間（Ｐ＝０．０４５９）、ＥＣＨＯ−７型ウイルス（１０％）では１４時間（Ｐ＝０．００３６）から観察されたことを示す図である。 図１Ｂは、Ｍｅｌ２０２細胞への影響がＥＣＨＯ−７型ウイルス（１％）では２３時間（Ｐ＝０．０２６０）、ＥＣＨＯ−７型ウイルス（１０％）では１１時間（Ｐ＝０．００８３）から観察されたことを示す図である。 図１Ｃは、ＭＰ−４１細胞への影響がＥＣＨＯ−７型ウイルス（１％）では２７時間（Ｐ＝０．０３６２）、ＥＣＨＯ−７型ウイルス（１０％）では２３時間（Ｐ＝０．０２４１）から観察されたことを示す図である。

本発明による「ＴＣＩＤ５０／ｍｌ」という用語は、ＭＲＣ−５細胞（ＡＴＣＣ、ＣＣＬ １７１（商標））またはＲＤ細胞（ＡＴＣＣ、ＣＣＬ １３６（商標））に関する１ミリリットルあたり５０の組織培養半数感染量、すなわち１ミリリットルあたりの組織培養感染量の中央値を意味する。

実施例
ＥＣＨＯ−７型ウイルスは、ＲＩＧＶＩＲ（登録商標）の商標で販売されているとおりにＳＩＡ Ｌａｔｉｍａ（リガ、ラトビア）から入手した。「％」は、特に明記されていない限り、％（ｖ／ｖ）を意味する。

実施例１．ブドウ膜黒色腫細胞の生存能力に対するＥＣＨＯ−７の細胞溶解効果
まず、実施例１、図１に記載されているようにＥＣＨＯ−７型ウイルスがインビトロでブドウ膜黒色腫細胞を非常に効果的に殺すことがわかった。実験は、以前に記載された方法に従って実施した（Ｔｉｌｇａｓｅ Ａ．，Ｐａｔｅｔｋｏ Ｌ．，Ｂｌａｋｅ Ｉ．，Ｒａｍａｔａ−Ｓｔｕｎｄａ Ａ．，Ｂｏｒｏｄｕｓｋｉｓ Ｍ．，Ａｌｂｅｒｔｓ Ｐ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ ２０１８；９（６）：１０３３−１０４９．ｄｏｉ：１０．７１５０／ｊｃａ．２３２４２）。

細胞培養条件
ヒトブドウ膜黒色腫の細胞株は、シグマアルドリッチ製９２−１細胞、シグマアルドリッチ製Ｍｅｌ２０２、およびＡＴＣＣ（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）製ＭＰ４１を入手した。

細胞単層が約１０％のコンフルエンシー（ｃｏｎｆｌｕｅｎｃｙ）に達したときに、ＥＣＨＯ−７型ウイルス（ストック力価１０６−１０７ＴＣＩＤ５０／ｍｌ）を最終濃度１％および１０％で細胞培養培地に添加した。不活化ＥＣＨＯ−７型ウイルスを陰性対照として使用した。等量の培地（ＥＣＨＯ−７型ウイルスを含まない）を対照細胞に加え、その後、細胞を９６時間観察した。

細胞生存能力に対するＥＣＨＯ−７の細胞溶解効果の計算
生存細胞数に対するＥＣＨＯ−７型ウイルスの阻害効果は、１００−（１００ｘＡ／Ｂ）＝減少（％）の式を使用して計算し、ここで、ＡはＥＣＨＯ−７型ウイルスの細胞数、Ｂは対照細胞数である。

統計学
治療群間の統計的差異は、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ７．０２ソフトウェアを使用して計算した。二元配置分散分析を細胞生存能力実験に適用した。

細胞生存能力に対するＥＣＨＯ−７の細胞溶解効果
細胞株９２−１、Ｍｅｌ２０２およびＭＰ４１の細胞をＥＣＨＯ−７型ウイルス（１０％）とインキュベーションした後、生存細胞は９６時間までほぼ観察されなかった。ＥＣＨＯ−７型ウイルス（１％）の効果は、ＥＣＨＯ−７型ウイルス１０％よりも開始が遅かった。

図１は、０から９６時間までの生存細胞数におけるＥＣＨＯ−７型ウイルスの影響を示す。ＥＣＨＯ−７型ウイルス処理と対照との間の細胞生存能力の統計的差異は、以下の時点から観察された。

対照に対する統計的に有意な差Ｐ＜０．０５（＊）、統計的に差異なし（ｎ．ｓ．）。データは平均±Ｓ．Ｅ．Ｍとして示されている。
対照（●）、ＥＣＨＯ−７型ウイルス（１％）（■）、ＥＣＨＯ−７型ウイルス（１０％）（▲）。

ブドウ膜黒色腫患者の治療
本発明は、ＥＣＨＯ−７型ウイルスと適切な担体とを含む医薬製剤を選択するステップと、薬物を注射または注入によって、または局所適用によって、眼に直接または皮下、皮内、筋肉内、腹腔内、鼻腔内または静脈内に、有効量で、有効な回数で、およびＥＣＨＯ−７が癌細胞に侵入するのに十分な期間投与するステップとで構成される、眼のブドウ膜黒色腫および転移の治療および予防のための方法を含む。

本発明は、眼のブドウ膜黒色腫およびその転移の治療および予防に使用するためのさらなるＥＣＨＯ−７型ウイルスを含む。

所望の治療目的を達成するための適切な製剤を皮下、筋肉内、鼻腔内、皮内、腹腔内または静脈内に注射、または眼に直接の局所投与することは、十分な量または有効量のＥＣＨＯ−７型ウイルスを標的空間に送達するために使用される。好ましくは、本発明によれば、ＥＣＨＯ−７型ウイルスを含む医薬組成物は、非経口の眼球後方または硝子体内注射によって投与される。

本明細書で使用される場合、「局所投与」は、全身経路または血管内経路または点眼薬またはゲルによるその部位への薬物送達とは対照的に、部位（例えば、眼の標的空間）への薬物の直接投与を指す。本明細書で使用される場合、「物理的担体」は、薬物が物理的担体の表面に吸収される担体を指す。薬学的に許容される物理的担体の例には、眼科用グレードのスポンジ、ガーゼ、セルローススポンジおよびゲルが含まれるが、これらに限定されない。眼に使用することができる生体適合性の物理的担体は、当業者によく知られている（Ｒａｕｔｉｏ，Ｊら、Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ．，７（３）：２５５−７０（Ｍａｒｃｈ ２００８）；Ｙａｓｕｋａｗａ，Ｔら、Ａｄｖ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ Ｒｅｖ，５７（１４）：２０３３−４６（Ｄｅｃ．１３，２００５）；およびＢｏｕｒｇｅｓ，Ｊ．Ｌら、Ａｄｖ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ Ｒｅｖ，５８（１１）：１１８２−２０２（Ｎｏｖ．１５，２００６））。

本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される」とは、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、またはその他の問題や合併症なしにヒトおよび動物の組織と接触して使用するのに適した、合理的な利益／リスク比に見合った、化合物、材料、組成物、および／または剤形を指す。

「医薬組成物」という用語は本明細書では、ヒトを含む温血動物に影響を与えるブドウ膜黒色腫を予防または治療するために温血動物（例えば、哺乳類またはヒト）に投与される、ＥＣＨＯ−７型ウイルスを含有する混合物または溶液、懸濁液または乳濁液を指すように定義される。

眼への注射の方法は当業者によく知られており、硝子体空間に挿入された針またはカテーテルを用いて行われる。マイクロ注入技術、マイクロニードルおよびマイクロカテーテルも使用することができ、当業者によく知られている。

ＥＣＨＯ−７型ウイルスは、有効量の薬物と非経口投与または局所投与の両方のための薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物で製剤化することができる。

担体は、医薬で使用される量においてそのレシピエントに有害ではないという点で「薬学的に許容される」。本発明の方法で使用され得る薬学的に許容される担体、アジュバントおよびビヒクルには、緩衝物質、例えばリン酸塩、グリシン、水、塩または電解質、例えば硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、ポリビニルピロリドン、セルロースベースの物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよび羊毛脂が含まれるが、これらに限定されない。

製剤は、溶液、懸濁液、乳濁液、ゲル、ポリマーペーストであり得る。薬物は、一般的に使用される薬理学的賦形剤と組み合わせて投与することができ、賦形剤には、生理食塩水、水性緩衝液、シクロデキストリン、ヒアルロン酸ナトリウム、および安定剤が含まれるがこれらに限定されず、当業者にはよく知られている。ＥＣＨＯ−７型ウイルスは、滅菌生理食塩水、水、または緩衝塩溶液に溶解できる。硝子体内注射の好ましい実施形態では、ウイルスは、１％ヒアルロン酸ナトリウムの眼科用製剤に溶解される。好ましい実施形態では、製剤に有機溶媒は使用されず、むしろ薬物は乾燥粉末として製剤化され、投与前に生理食塩水または眼科グレードの１％ヒアルロン酸ナトリウムなどの水溶液が添加される。

筋肉内または静脈内投与の場合、ＥＣＨＯ−７型ウイルスは、注射用溶液または乾燥粉末として製剤化され、それに蒸留水または生理食塩水の水溶液が添加される。

薬物の濃度、量、および総投与量は、治療される臨床状態および所望の薬理学的効果に依存する。硝子体内注射の場合、注射量は通常１μｌ〜１００μｌの範囲内である。好ましい実施形態では、硝子体内注射の注射量は５０μｌである。臨床薬物の用量および濃度を決定するための技術は、当業者によく知られている。薬物は、１または複数の局所注射によって、または眼内に配置されて微量注入ポンプに接続されたカテーテルによって投与され得る。適切なカテーテルおよび微量注入ポンプ、ならびに注射技術は、当業者によく知られている。

筋肉内または静脈内投与の場合、ＥＣＨＯ−７型ウイルスは通常２ｍｌ（１０６〜１０８ＴＣＩＤ５０／ｍｌ）の用量で投与される。

治療は、最初の３ヶ月間、４週間ごとに３日間連続してＥＣＨＯ−７を注射することを含み得るが、これに限定されない。その後、治療は、１年目は毎月、２年目の前半は６週間ごと、２年目の後半は２ヶ月ごと、３年目は３ヶ月ごとに続ける必要がある。治療は、患者の臨床反応と全体的な状態に応じて変えることができる。

実施例２．ＥＣＨＯ−７の筋肉内投与によるブドウ膜黒色腫患者の治療の予備的結果
後ろ向き研究で、ＥＣＨＯ−７型ウイルス含有組成物の用量２ｍｌ（１０６〜１０８ＴＣＩＤ５０／ｍｌ）を、以前に局所放射線療法を受けたブドウ膜黒色腫患者６人（女性４人と男性２人、３１〜６１歳）に筋肉内投与した。ＥＣＨＯ−７型ウイルスの注射は、最初の３ヶ月間、４週間ごとに３日間連続して筋肉内に行われた。その後、治療は、１年目は毎月、２年目の前半は６週間ごと、２年目の後半は２ヶ月ごと、３年目は３ヶ月ごとに続けられている。

治療期間中に、原発性黒色腫の進行および転移の発生についてすべての患者を調査した。患者６人のうち４人（６７％）では、病気の進行の兆候は見られなかった。ＥＣＨＯ−７型ウイルスで治療された患者の副作用は報告されていない。患者６人のうち２人（３３％）は、肝臓に転移を発症した。そのうちの１人は、ＥＣＨＯ−７型ウイルスによる治療を開始してから２年目に病気が致命的になった。

実施例３
以前に局所照射を受けた別の５人のブドウ膜黒色腫患者群（男性１人と女性４人、４９〜６１歳）に、（上記の投与経路および投与量に従って）ＥＣＨＯ−７型ウイルスを筋肉内注射で１年間投与した。続く２年間に、これらの患者にＥＣＨＯ−７型ウイルスを局所投与した。治療のすべての期間中に、原発性黒色腫の進行および転移の発生について患者を調査した。３６ヶ月の治療期間の終わりまでの無増悪生存は、患者６人のうち５人（８３％）で認められた。患者１人は肝臓への転移を発症し、２９ヶ月後に死亡した。

実施例４
ブドウ膜黒色腫患者の長期ＥＣＨＯ−７治療
５６歳女性は、２００７年にブドウ膜黒色腫と診断された。放射線治療後、ブドウ膜黒色腫の寛解が認められた。２０１０年に、局所的に病気の進行が認められた。眼の局所放射線治療が実施されたが、悪性プロセスの進行は止まらなかった。そのため、２０１６年１０月に視神経とともに眼球の摘出術が実施された。手術後、ＥＣＨＯ−７型ウイルスの筋肉内投与が、実施例１で最初の群の患者について記載したプロトコルに従って開始された。３年間の治療の後、病気の進行は観察されなかった。治療はいかなる副作用も引き起こさなかった。

要約すると、実験的証拠は、ＥＣＨＯ−７型ウイルスがブドウ膜黒色腫患者の治療に効果的で非常に安全な薬物であることを示している。ＥＣＨＯ−７型ウイルスは、局所的および非経口的に投与される医薬組成物の調製に適しており、ブドウ膜黒色腫の原発腫瘍および転移の予防および治療に使用することができる。

Claims (15)

1. 原発性および転移性ブドウ膜黒色腫から選択されるブドウ膜黒色腫の治療における組成物を含む
   ＥＣＨＯ−７型ウイルスの使用。
2. 前記ブドウ膜黒色腫は、前記組成物を含むＥＣＨＯ−７型ウイルスの非経口投与によって治療される
   請求項１に記載の使用。
3. 前記ブドウ膜黒色腫は、前記組成物を含むＥＣＨＯ−７型ウイルスの眼内投与によって治療される
   請求項１に記載の使用。
4. 前記ブドウ膜黒色腫は、前記組成物を含むＥＣＨＯ−７型ウイルスの眼球後方投与によって治療される
   請求項２に記載の使用。
5. 前記組成物を含むＥＣＨＯ−７型ウイルスは、硝子体内注射によって投与される
   請求項３に記載の使用。
6. 前記組成物を含むＥＣＨＯ−７型ウイルスは、局所投与される
   請求項２に記載の使用。
7. ＥＣＨＯ−７型ウイルスの量は、単回投与あたり２×１０^６から２×１０^８ＴＣＩＤ_５０／ｍｌの範囲内である
   請求項１から６のいずれか一項または複数項に記載の使用。
8. 原発性および転移性ブドウ膜黒色腫から選択される
   ブドウ膜黒色腫の治療のためのＥＣＨＯ−７型ウイルス。
9. 請求項８に記載のＥＣＨＯ−７型ウイルスを含む
   ブドウ膜黒色腫の治療のための医薬組成物。
10. ＥＣＨＯ−７型ウイルスの量を単回投与あたり２×１０^６から２×１０^８ＴＣＩＤ_５０／ｍｌの範囲内で含む
    請求項９に記載の医薬組成物。
11. 非経口投与のための
    請求項９または１０に記載の医薬組成物。
12. 眼内投与のための
    請求項１１に記載の医薬組成物。
13. 眼球後方投与のための
    請求項１１に記載の医薬組成物。
14. 硝子体内注射による投与のための
    請求項１１に記載の医薬組成物。
15. 局所投与のための
    請求項９または１０に記載の医薬組成物。

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