JP2021521203A - 長鎖ジカルボン酸脂肪酸(lcdfa)産生性微生物及びその使用 - Google Patents

長鎖ジカルボン酸脂肪酸(lcdfa)産生性微生物及びその使用 Download PDF

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Abstract

哺乳動物対象における胃管酸(GTA)産生を増加させるための方法。この方法は、治療有効量の、ブラウティア属、フィーカリバクテリウム・プラウスニッツィ種、バクテロイデス属、ルミノコッカス科、ラクノスピラ科、コプロコッカス属、ロゼブリア属、オシロスピラ属、ルミノコッカス・ブロミ種、ルミノコッカス属、クロストリジウム科、ドレア・フォルミシゲネランス種、バクテロイデス・ユニフォルミス種、ドレア属、レンサ球菌属、クロストリジウム目、アナエロスティペス属、ディアリスター属、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス種、コリオバクテリウム科、フィーカリバクテリウム属、ステレラ属、バクテロイデス・オバツス種、パラバクテロイデス属、ルミノコッカス属、バクテロイデス・フェシス種、ユウバクテリウム・ビフォルメ種、ファスコラルクトバクテリウム属、及び腸内細菌科から選択される微生物種の少なくとも1つの生培養物若しくは弱毒化培養物を含む組成物;又は腸における微生物種の増殖及び/若しくは生存度を増加させるプレバイオティクス組成物を投与するステップを含む。この組成物を投与するステップは、対象における少なくとも1つのGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物の合成を増加させる。胃腸炎症状態を決定するための方法並びに胃管酸(GTA)不全を検出及び治療するためのキットもまた記載される。

Description

本発明は、腸マイクロバイオームの操作を介した胃腸炎症及び胃管酸(GTA,gastric tract acid)長鎖脂肪酸欠乏の治療に関する。本発明は、哺乳動物対象における胃管酸(GTA)産生を増加させる組成物及び方法にも関する。
慢性炎症は、結腸直腸がん、膵がん、胃がん、食道がん、卵巣がんなどを含む胃腸(GI,gastrointestinal)がんの、根底にある主原因として広く受容されている(Marusawa, H. & B. J. Jenkins (2014) Inflammation and gastrointestinal cancer: an overview. Cancer Lett, 345, 153-6、Hussain, S. P. & C. C. Harris (2007) Inflammation and cancer: an ancient link with novel potentials. Int J Cancer, 121, 2373-80、Chapkin, R., D. McMurray & J. Lupton (2007) Colon cancer, fatty acids and anti-inflammatory compounds. Curr Opin Gastroenterol, 23, 48-54、Demaria, S., E. Pikarsky, M. Karin, L. Coussens, Y. Chen, E. El-Omar, G. Trinchieri, S. Dubinett, J. Mao, E. Szabo, A. Krieg, G. Weiner, B. Fox, G. Coukos, E. Wang, R. Abraham, M. Carbone & M. Lotze (2010) Cancer and inflammation: promise for biologic therapy. J Immunother, 33, 335-351、Itzkowitz, S. & X. Yio (2004) Inflammation and cancer IV. Colorectal cancer in inflammatory bowel disease: the role of inflammation. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol, 287, G7-17、Maccio, A. & C. Madeddu (2012) Inflammation and ovarian cancer. Cytokine, 58, 133-47、Schwartsburd, P. (2004) Age-promoted creation of a pro-cancer microenvironment by inflammation: pathogenesis of dyscoordinated feedback control. Mech Ageing Dev, 125, 581-590、Terzic, J., S. Grivennikov, E. Karin & M. Karin (2010) Inflammation and colon cancer. Gastroenterology, 138, 2101-2114 e5、Wu, Y., S. Antony, J. L. Meitzler & J. H. Doroshow (2014) Molecular mechanisms underlying chronic inflammation-associated cancers. Cancer Lett, 345, 164-73)。慢性炎症は、酸化ストレスをもたらし得、これが引き続いて、細胞の悪性形質転換を駆動する発癌事象及び遺伝子変異を生じ得る(Mannick et al及びZhang et al)。引き続いて、がん増殖が、微小環境におけるサイトカイン及び血管新生因子の炎症促進性環境によって駆動される。
GIがんを慢性炎症と関連付ける証拠が優勢であるにもかかわらず、がん(例をとると、結腸直腸がん)の早期検出を強調する場合は常に、腫瘍由来マーカー又は前がん性病変の検出の改善にばかり焦点を当てており、根底にある代謝性又は炎症性のリスク因子には焦点を当ててこなかった。結腸直腸がんの場合、主要なスクリーニングモダリティは、内視鏡によるがん増殖若しくは前がん性病変の直接的可視化、大便中の潜血の検出、又はより最近では、糞便若しくは血液のいずれか中のメチル化腫瘍DNAのいずれかである。これらのモダリティの各々が有効であるためには、病変を物理的に調査する若しくは生検するのに十分な大きさの最小限の腫瘍負荷が存在するか、又は糞便若しくは血液のいずれか中の検出可能なレベルの腫瘍由来バイオマーカーを産生するのに十分な腫瘍量が存在する必要がある。したがって、かかるアプローチは、疾患の発生が開始するのを予防することについて希望を与えなず、むしろ、治療が一般により有効である初期段階での検出の形態でのみ希望を与える。
腸の炎症状態の重要な構成要素は、無疾患対象由来の、結腸直腸がん、膵がん、及び卵巣がんを分化させた小分子の非標的化メタボロミック分析を介して、Ritchieらによって同定された(Ritchie, S., P. Ahiahonu, D. Jayasinghe, D. Heath, J. Liu, Y. Lu, W. Jin, A. Kavianpour, Y. Yamazaki, A. Khan, M. Hossain, K. Su-Myat, P. Wood, K. Krenitsky, I. Takemasa, M. Miyake, M. Sekimoto, M. Monden, H. Matsubara, F. Nomura & D. Goodenowe (2010a) Reduced levels of hydroxylated, polyunsaturated ultra long-chain fatty acids in the serum of colorectal cancer patients: implications for early screening and detection. BMC medicine, 8、Ritchie, S. A., D. Heath, Y. Yamazaki, B. Grimmalt, A. Kavianpour, K. Krenitsky, H. Elshoni, I. Takemasa, M. Miyake, M. Sekimoto, M. Monden, T. Tomonaga, H. Matsubara, K. Sogawa, K. Matsushita, F. Nomura & D. B. Goodenowe (2010c) Reduction of novel circulating long-chain fatty acids in colorectal cancer patients is independent of tumor burden and correlates with age. BMC Gastroenterol, 10, 140、Ritchie, S., D. Heath, Y. Yamazaki, B. Grimmalt, A. Kavianpour, K. Krenitsky, H. Elshoni, I. Takemasa, M. Miyake, M. Sekimoto, M. Monden, T. Tomonaga, H. Matsubara, K. Sogawa, K. Matsushita, F. Nomura & D. Goodenowe (2010b) Reduction of novel circulating long-chain fatty acids in colorectal cancer patients is independent of tumor burden and correlates with age. BMC gastroenterology, 10、Ritchie, S. A., D. Jayasinghe, G. F. Davies, P. Ahiahonu, H. Ma & D. B. Goodenowe (2011) Human serum-derived hydroxy long-chain fatty acids exhibit anti-inflammatory and anti-proliferative activity. J Exp Clin Cancer Res, 30, 59、Ritchie, S. A., J. Tonita, R. Alvi, D. Lehotay, H. Elshoni, S. Myat, J. McHattie & D. B. Goodenowe (2013b) Low-serum GTA-446 anti-inflammatory fatty acid levels as a new risk factor for colon cancer. Int J Cancer, 132, 355-62、Ritchie, S. A., H. Akita, I. Takemasa, H. Eguchi, E. Pastural, H. Nagano, M. Monden, Y. Doki, M. Mori, W. Jin, T. T. Sajobi, D. Jayasinghe, B. Chitou, Y. Yamazaki, T. White & D. B. Goodenowe (2013a) Metabolic system alterations in pancreatic cancer patient serum: potential for early detection. BMC Cancer, 13, 416、Ritchie, S. A., B. Chitou, Q. Zheng, D. Jayasinghe, W. Jin, A. Mochizuki & D. B. Goodenowe (2015) Pancreatic cancer serum biomarker PC-594: Diagnostic performance and comparison to CA19-9. World J Gastroenterol, 21, 6604-12)。最初、ビタミンE代謝物であると提唱されたが、引き続いて、サイズが28〜36炭素であり、およそ446〜596Daの分子量を有する新規長鎖ポリ不飽和ジカルボン酸脂肪酸(胃管酸の意味で、GTAと呼ばれる)であることが示された代謝物の新規ファミリーは、対照と比較して、これらのがんを有する対象の血清中で一貫して低減されることが示された。
GTAは、種々の細胞系における、半精製されたGTA含有抽出物及びGTA欠乏抽出物とLPSとの共投与を介して、インビトロで抗炎症活性並びに抗増殖活性を保有することが示された(Ritchie, S. A., D. Jayasinghe, G. F. Davies, P. Ahiahonu, H. Ma & D. B. Goodenowe (2011) Human serum-derived hydroxy long-chain fatty acids exhibit anti-inflammatory and anti-proliferative activity. J Exp Clin Cancer Res, 30, 59)。抗炎症活性は、TNF−アルファ及びインターロイキン−1βを含むいくつかの炎症促進性サイトカインの活性化に関与する転写因子であるNF−κBを介して媒介されることが示された。具体的には、GTAは、NF−κBを不活性化する阻害性タンパク質IκBαを顕著に上方調節した。NF−κBの過剰発現は、慢性炎症の複数の局面と関連付けられており、合成及び天然産物による治療的下方調節の標的になってきた(Ben-Neriah, Y. & M. Karin (2011) Inflammation meets cancer, with NF-kappaB as the matchmaker. Nat Immunol, 12, 715-23、Spehlmann, M. & L. Eckmann (2009) Nuclear factor-kappa B in intestinal protection and destruction. Curr Opin Gastroenterol, 25, 92-99、Surh, Y., K. Chun, H. Cha, S. Han, Y. Keum, K. Park & S. Lee (2001) Molecular mechanisms underlying chemopreventive activities of anti-inflammatory phytochemicals: down-regulation of COX-2 and iNOS through suppression of NF-kappa B activation. Mutat Res, 480-481, 243-268、Xu, C., G. Shen, C. Chen, C. Gelinas & A. Kong (2005) Suppression of NF-kappaB and NF-kappaB-regulated gene expression by sulforaphane and PEITC through IkappaBalpha, IKK pathway in human prostate cancer PC-3 cells. Oncogene, 24, 4486-4495、Freitas, R. & C. A. M. Fraga (2018) NF-kappaB-IKKbeta pathway as a target for drug development: realities, challenges and perspectives. Curr Drug Targets)。
これらのGTAは、炎症及び疾患、例えばがんを治療することにおけるそれらの作用機構及び潜在的役割をよりよく理解するための関心及び研究の源であり続けている。
Marusawa, H. & B. J. Jenkins (2014) Inflammation and gastrointestinal cancer: an overview. Cancer Lett, 345, 153-6 Hussain, S. P. & C. C. Harris (2007) Inflammation and cancer: an ancient link with novel potentials. Int J Cancer, 121, 2373-80 Chapkin, R., D. McMurray & J. Lupton (2007) Colon cancer, fatty acids and anti-inflammatory compounds. Curr Opin Gastroenterol, 23, 48-54 Demaria, S., E. Pikarsky, M. Karin, L. Coussens, Y. Chen, E. El-Omar, G. Trinchieri, S. Dubinett, J. Mao, E. Szabo, A. Krieg, G. Weiner, B. Fox, G. Coukos, E. Wang, R. Abraham, M. Carbone & M. Lotze (2010) Cancer and inflammation: promise for biologic therapy. J Immunother, 33, 335-351 Itzkowitz, S. & X. Yio (2004) Inflammation and cancer IV. Colorectal cancer in inflammatory bowel disease: the role of inflammation. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol, 287, G7-17 Maccio, A. & C. Madeddu (2012) Inflammation and ovarian cancer. Cytokine, 58, 133-47 Schwartsburd, P. (2004) Age-promoted creation of a pro-cancer microenvironment by inflammation: pathogenesis of dyscoordinated feedback control. Mech Ageing Dev, 125, 581-590 Terzic, J., S. Grivennikov, E. Karin & M. Karin (2010) Inflammation and colon cancer. Gastroenterology, 138, 2101-2114 e5 Wu, Y., S. Antony, J. L. Meitzler & J. H. Doroshow (2014) Molecular mechanisms underlying chronic inflammation-associated cancers. Cancer Lett, 345, 164-73 Ritchie, S., P. Ahiahonu, D. Jayasinghe, D. Heath, J. Liu, Y. Lu, W. Jin, A. Kavianpour, Y. Yamazaki, A. Khan, M. Hossain, K. Su-Myat, P. Wood, K. Krenitsky, I. Takemasa, M. Miyake, M. Sekimoto, M. Monden, H. Matsubara, F. Nomura & D. Goodenowe (2010a) Reduced levels of hydroxylated, polyunsaturated ultra long-chain fatty acids in the serum of colorectal cancer patients: implications for early screening and detection. BMC medicine, 8 Ritchie, S. A., D. Heath, Y. Yamazaki, B. Grimmalt, A. Kavianpour, K. Krenitsky, H. Elshoni, I. Takemasa, M. Miyake, M. Sekimoto, M. Monden, T. Tomonaga, H. Matsubara, K. Sogawa, K. Matsushita, F. Nomura & D. B. Goodenowe (2010c) Reduction of novel circulating long-chain fatty acids in colorectal cancer patients is independent of tumor burden and correlates with age. BMC Gastroenterol, 10, 140 Ritchie, S., D. Heath, Y. Yamazaki, B. Grimmalt, A. Kavianpour, K. Krenitsky, H. Elshoni, I. Takemasa, M. Miyake, M. Sekimoto, M. Monden, T. Tomonaga, H. Matsubara, K. Sogawa, K. Matsushita, F. Nomura & D. Goodenowe (2010b) Reduction of novel circulating long-chain fatty acids in colorectal cancer patients is independent of tumor burden and correlates with age. BMC gastroenterology, 10 Ritchie, S. A., D. Jayasinghe, G. F. Davies, P. Ahiahonu, H. Ma & D. B. Goodenowe (2011) Human serum-derived hydroxy long-chain fatty acids exhibit anti-inflammatory and anti-proliferative activity. J Exp Clin Cancer Res, 30, 59 Ritchie, S. A., J. Tonita, R. Alvi, D. Lehotay, H. Elshoni, S. Myat, J. McHattie & D. B. Goodenowe (2013b) Low-serum GTA-446 anti-inflammatory fatty acid levels as a new risk factor for colon cancer. Int J Cancer, 132, 355-62 Ritchie, S. A., H. Akita, I. Takemasa, H. Eguchi, E. Pastural, H. Nagano, M. Monden, Y. Doki, M. Mori, W. Jin, T. T. Sajobi, D. Jayasinghe, B. Chitou, Y. Yamazaki, T. White & D. B. Goodenowe (2013a) Metabolic system alterations in pancreatic cancer patient serum: potential for early detection. BMC Cancer, 13, 416 Ritchie, S. A., B. Chitou, Q. Zheng, D. Jayasinghe, W. Jin, A. Mochizuki & D. B. Goodenowe (2015) Pancreatic cancer serum biomarker PC-594: Diagnostic performance and comparison to CA19-9. World J Gastroenterol, 21, 6604-12 Ben-Neriah, Y. & M. Karin (2011) Inflammation meets cancer, with NF-kappaB as the matchmaker. Nat Immunol, 12, 715-23 Spehlmann, M. & L. Eckmann (2009) Nuclear factor-kappa B in intestinal protection and destruction. Curr Opin Gastroenterol, 25, 92-99 Surh, Y., K. Chun, H. Cha, S. Han, Y. Keum, K. Park & S. Lee (2001) Molecular mechanisms underlying chemopreventive activities of anti-inflammatory phytochemicals: down-regulation of COX-2 and iNOS through suppression of NF-kappa B activation. Mutat Res, 480-481, 243-268 Xu, C., G. Shen, C. Chen, C. Gelinas & A. Kong (2005) Suppression of NF-kappaB and NF-kappaB-regulated gene expression by sulforaphane and PEITC through IkappaBalpha, IKK pathway in human prostate cancer PC-3 cells. Oncogene, 24, 4486-4495 Freitas, R. & C. A. M. Fraga (2018) NF-kappaB-IKKbeta pathway as a target for drug development: realities, challenges and perspectives. Curr Drug Targets
本発明の目的は、対象における胃腸(GI)炎症を検出するため及び低減させるための新たな方法を提供することである。
したがって、血液中の長鎖ジカルボン酸脂肪酸(LCDFA:long-chain dicarboxylic fatty acid)即ちGTAのレベルを測定することによって、GI炎症を有する対象を同定し、その後、これらのGTAレベルを回復又は増大させるために化学薬剤又は微生物によって治療するためのアプローチが、本明細書で提供される。
ある特定の実施形態では、微生物は、長鎖脂肪酸産生性細菌、特に、ブラウティア(Blautia)属及びフィーカリバクテリウム・プラウスニッツィ(Faecalibacterium prausnitzii)種由来のものである。
特定の微生物種もまた、これらのGTAレベルと関連することが示されており、したがって、GI炎症を低減させることを目的としてこれらの微生物種を増大させるための戦略が提供される。
結腸直腸がん、膵がん、及び卵巣がんが含まれるがこれらに限定されない種々のGI関連がんの発症と関連する根底にある代謝性炎症状態を同定するためのアプローチと、その後の、根底にある炎症の治療を介してリスクを低減させるためのアプローチもまた提供される。
したがって、哺乳動物対象における胃管酸(GTA)産生を増加させるための方法が提供される。この方法は、治療有効量の、ブラウティア属、フィーカリバクテリウム・プラウスニッツィ種、バクテロイデス(Bacteroides)属、ルミノコッカス科(Ruminococcaceae)、ラクノスピラ科(Lachnospiraceae)、コプロコッカス(Coprococcus)属、ロゼブリア(Roseburia)属、オシロスピラ(Oscillospira)属、ルミノコッカス・ブロミ(Ruminococcus bromii)種、ルミノコッカス(Ruminococcus)属、クロストリジウム(Clostridiaceae)科、ドレア・フォルミシゲネランス(Dorea formicigenerans)種、バクテロイデス・ユニフォルミス(Bacteroides uniformis)種、ドレア(Dorea)属、レンサ球菌(Streptococcus)属、クロストリジウム目(Clostridiales)、アナエロスティペス(Anaerostipes)属、ディアリスター(Dialister)属、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス(Bifidobacterium adolescentis)種、コリオバクテリウム科(Coriobacteriaceae)、フィーカリバクテリウム(Faecalibacterium)属、ステレラ(Sutterella)属、バクテロイデス・オバツス(Bacteroides ovatus)種、パラバクテロイデス(Parabacteroides)属、ルミノコッカス属、バクテロイデス・フェシス(Bacteroides faecis)種、ユウバクテリウム・ビフォルメ(Eubacterium biforme)種、ファスコラルクトバクテリウム(Phascolarctobacterium)属、及び腸内細菌科(Enterobacteriaceae)から選択される微生物種の少なくとも1つの生若しくは弱毒化培養物を含む組成物;又は腸における微生物種の増殖及び/若しくは生存度を増加させるプレバイオティクス組成物を投与するステップを含み;この組成物は、対象における少なくとも1つのGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物の合成を増加させる。
ある特定の実施形態では、この方法は、対象における1又は2以上のGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物の循環レベルを測定するステップをさらに含む。したがって、対象における1又は2以上のGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物のレベルが、所定の対照レベル、その対象について得られたより早期の試験値、又は健康な対象についての正常レベルよりも低いことが見出される場合に、組成物が投与され得る。例えば、限定することは望まないが、対照は、健康な個体に典型的な、少なくとも1つのGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物についての所定の閾値を含み得る。
さらなる実施形態では、この組成物は、ブラウティア属由来の微生物種の生若しくは弱毒化培養物、フィーカリバクテリウム・プラウスニッツィの生若しくは弱毒化培養物、又はそれらの組み合わせを含み得る。典型的には、かかる培養物は、対象の胃腸管への投与に適切な薬学的に許容される賦形剤又は担体内に製剤化される。
なおさらなる実施形態では、GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物は、単結合又は二重結合によって連結された、14〜18炭素長の範囲の2つのより短い鎖のダイマー性脂肪酸構造を含む炭素数28〜36のジカルボン酸脂肪酸である。さらなる実施形態では、GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物は、以下のうち1つであり得る:GTA−446、GTA−448、GTA−450、GTA−452、GTA−464、GTA−466、GTA−468、GTA−474、GTA−476、GTA−478、GTA−484、GTA−490、GTA−492、GTA−494、GTA−502、GTA−504、GTA−512、GTA−518、GTA−520、GTA−522、GTA−524、GTA−530、GTA−532、GTA−536、GTA−538、GTA−540、GTA−550、GTA−574、GTA−576、GTA−580、GTA−590、GTA−592、GTA−594、及びGTA−596。
非限定的な実施形態では、GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物は、446.3396(GTA−446)、448.3553(GTA−448)、450.3709(GTA−450)、452.3866(GTA−452)、464.3522(GTA−464)、466.3661(GTA−466)、468.3814(GTA−468)、474.3736(GTA−474)、476.3866(GTA−476)、478.4022(GTA−478)、484.3764(GTA−484)、490.3658(GTA−490)、492.3815(GTA−492)、494.3971(GTA−494)、502.4022(GTA−502)、504.4195(GTA−504)、512.4077(GTA−512)、518.3974(GTA−518)、520.4128(GTA−520)、522.4284(GTA−522)、524.4441(GTA−524)、530.4335(GTA−530)、532.4492(GTA−532)、536.4077(GTA−536)、538.4233(GTA−538)、540.4389(GTA−540)、550.4597(GTA−550)、574.4597(GTA−574)、576.4754(GTA−576)、580.5067(GTA−580)、590.4546(GTA−590)、592.4703(GTA−592)、594.4859(GTA−594)、又は596.5016(GTA−596)の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量(neutral mass)を有し得る。
さらなる非限定的な実施形態では、GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物は、C2846(GTA−446)、C2848(GTA−448)、C2850(GTA−450)、C2852(GTA−452)、464.3522(GTA−464)、466.3661(GTA−466)、C2852(GTA−468)、C3050(GTA−474)、C3052(GTA−476)、C3054(GTA−478)、C2852(GTA−484)、C3050(GTA−490)、C3052(GTA−492)、C3054(GTA−494)、C3254(GTA−502)、C3256(GTA−504)、C3056(GTA−512)、C3254(GTA−518)、C3256(GTA−520)、C3258(GTA−522)、C3260(GTA−524)、C3458(GTA−530)、C3460(GTA−532)、C3256(GTA−536)、C3258(GTA−538)、C3260(GTA−540)、C3462(GTA−550)、C3662(GTA−574)、C3664(GTA−576)、C3668(GTA−580)、C3662(GTA−590)、C3664(GTA−592)、C3666(GTA−594)、又はC3668(GTA−596)の分子式を有し得る。
さらなる非限定的な実施形態では、GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物は、衝突誘起解離(CID,collision induced dissociation)タンデム質量分析を使用して測定され得る。GTAは、以下に列挙されるGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物のうち1又は2以上であり得る:
446.3396の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2846の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI,atmospheric pressure chemical ionization)において分析した、親[M−H]質量445の娘イオン:427、409、401、及び383を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−446、
448.3553の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2848の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量447の娘イオン:429、411、403、及び385を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−448、
450.3709の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2850の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量449の娘イオン:431、413、405、及び387を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−450、
452.3866の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2852の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量451の娘イオン:433、407、及び389を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−452、
464.3522の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2848の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量463の娘イオン:445、419、401、及び383を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−464、
466.3661の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2850の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量465の娘イオン:447、421、及び403を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−466、
468.3814の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C2852の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量467の娘イオン:449、423、及び405を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−468、
474.3736の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3050の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量473の娘イオン:455、429、及び411を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−474、
476.3866の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3052の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量475の娘イオン:457、431、439及び413を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−476、
478.4022の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3054の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量477の娘イオン:459、433、441及び415を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−478、
484.3764の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C2852の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量483の娘イオン:465、315、439 483、421、及び447を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−484、
490.3658の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3050の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量489の娘イオン:445、471、427及び319を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−490、
492.3815の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3052の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量491の娘イオン:241、249、267、473、及び447を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−492、
494.3971の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3054の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量493の娘イオン:475、215、及び449を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−494、
502.4022の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3254の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量501の娘イオン:483、457、465及び439を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−502、
504.4195の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3256の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量503の娘イオン:485、459、467及び441を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−504、
512.4077の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3056の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量511の娘イオン:493、315、及び467を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−512、
518.3974の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3254の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量517の娘イオン:499、473、499、481及び445を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−518、
520.4128の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3256の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量519の娘イオン:501、457、475、459、447及び483を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−520、
522.4284の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3258の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量521の娘イオン:503、459、477、504、441及び485を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−522、
524.4441の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3260の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量523の娘イオン:505、461、479、506、443及び487を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−524、
530.4335の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3458の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量529の娘イオン:467、511及び485を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−530、
532.4492の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3460の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量531の娘イオン:513、469、487及び495を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−532、
536.4077の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3256の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量535の娘イオン:473を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−536、
538.4233の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3258の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量537の娘イオン:519、475、493、501及び457を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−538、
540.4389の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3260の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量539の娘イオン:315、521、495及び477を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−540、
550.4597の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3462の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量549の娘イオン:487、531、251、253、513、469及び506を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−550、
574.4597の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3662の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量573の娘イオン:295、223、555及び511を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−574、
576.4754の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3664の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量575の娘イオン:277、297、557、513及び495を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−576、
580.5067の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3668の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量579の娘イオン:561、543、535、517及び499を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−580、
590.4546の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3662の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量589の娘イオン:545を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−590、
592.4703の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3664の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量591の娘イオン:555及び113を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−592、
594.4859の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3666の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量593の娘イオン:557 371、315及び277を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−594、並びに
596.5016の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3668の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量595の娘イオン:279、315、297、577及び559を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−596。
例えば、GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物は、式C2846及び構造:
Figure 2021521203
を有するGTA−446であり得る。
哺乳動物対象の身体内の胃腸炎症状態を決定するための方法もまた、本明細書で提供される。この方法は、1又は2以上のGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物の循環レベルを測定するステップを含み、GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物は、単結合又は二重結合によって連結された、14〜18炭素長の範囲の2つのより短い鎖のダイマー性脂肪酸構造を含む炭素数28〜36のジカルボン酸脂肪酸であり、これらのGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物のうち1又は2以上のレベルが、所定の対照レベル、その対象についてのより早期の試験値、又は健康な対象についての正常レベルよりも低いことが検出される場合に、その対象は、胃腸炎症を有する又は胃腸炎症のリスクがあると評価される。
この方法のさらなる実施形態では、GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物は、以下のうち1つであり得る:GTA−446、GTA−448、GTA−450、GTA−452、GTA−464、GTA−466、GTA−468、GTA−474、GTA−476、GTA−478、GTA−484、GTA−490、GTA−492、GTA−494、GTA−502、GTA−504、GTA−512、GTA−518、GTA−520、GTA−522、GTA−524、GTA−530、GTA−532、GTA−536、GTA−538、GTA−540、GTA−550、GTA−574、GTA−576、GTA−580、GTA−590、GTA−592、GTA−594、及びGTA−596。
非限定的な実施形態では、GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物は、446.3396(GTA−446)、448.3553(GTA−448)、450.3709(GTA−450)、452.3866(GTA−452)、464.3522(GTA−464)、466.3661(GTA−466)、468.3814(GTA−468)、474.3736(GTA−474)、476.3866 GTA−476、478.4022(GTA−478)、484.3764(GTA−484)、490.3658(GTA−490)、492.3815(GTA−492)、494.3971(GTA−494)、502.4022(GTA−502)、504.4195(GTA−504)、512.4077(GTA−512)、518.3974(GTA−518)、520.4128(GTA−520)、522.4284(GTA−522)、524.4441(GTA−524)、530.4335(GTA−530)、532.4492(GTA−532)、536.4077(GTA−536)、538.4233(GTA−538)、540.4389(GTA−540)、550.4597(GTA−550)、574.4597(GTA−574)、576.4754(GTA−576)、580.5067(GTA−580)、590.4546(GTA−590)、592.4703(GTA−592)、594.4859(GTA−594)、又は596.5016(GTA−596)の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し得る。
さらなる非限定的な実施形態では、GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物は、C2846(GTA−446)、C2848(GTA−448)、C2850(GTA−450)、C2852(GTA−452)、464.3522(GTA−464)、466.3661(GTA−466)、C2852(GTA−468)、C3050(GTA−474)、C3052GTA−476、C3054(GTA−478)、C2852(GTA−484)、C3050(GTA−490)、C3052(GTA−492)、C3054(GTA−494)、C3254(GTA−502)、C3256(GTA−504)、C3056(GTA−512)、C3254(GTA−518)、C3256(GTA−520)、C3258(GTA−522)、C3260(GTA−524)、C3458(GTA−530)、C3460(GTA−532)、C3256(GTA−536)、C3258(GTA−538)、C3260(GTA−540)、C3462(GTA−550)、C3662(GTA−574)、C3664(GTA−576)、C3668(GTA−580)、C3662(GTA−590)、C3664(GTA−592)、C3666(GTA−594)、又はC3668(GTA−596)の分子式を有し得る。
さらなる非限定的な実施形態では、GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物は、衝突誘起解離(CID)タンデム質量分析を使用して測定され得る。GTAは、以下に列挙されるGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物のうち1又は2以上であり得る:
446.3396の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2846の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量445の娘イオン:427、409、401、及び383を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−446、
448.3553の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2848の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量447の娘イオン:429、411、403、及び385を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−448、
450.3709の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2850の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量449の娘イオン:431、413、405、及び387を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−450、
452.3866の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2852の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量451の娘イオン:433、407、及び389を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−452、
464.3522の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2848の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量463の娘イオン:445、419、401、及び383を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−464、
466.3661の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2850の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量465の娘イオン:447、421、及び403を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−466、
468.3814の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C2852の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量467の娘イオン:449、423、及び405を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−468、
474.3736の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3050の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量473の娘イオン:455、429、及び411を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−474、
476.3866の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3052の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量475の娘イオン:457、431、439及び413を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−476、
478.4022の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3054の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量477の娘イオン:459、433、441及び415を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−478、
484.3764の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C2852の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量483の娘イオン:465、315、439 483、421、及び447を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−484、
490.3658の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3050の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量489の娘イオン:445、471、427及び319を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−490、
492.3815の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3052の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量491の娘イオン:241、249、267、473、及び447を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−492、
494.3971の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3054の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量493の娘イオン:475、215、及び449を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−494、
502.4022の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3254の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量501の娘イオン:483、457、465及び439を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−502、
504.4195の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3256の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量503の娘イオン:485、459、467及び441を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−504、
512.4077の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3056の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量511の娘イオン:493、315、及び467を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−512、
518.3974の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3254の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量517の娘イオン:499、473、499、481及び445を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−518、
520.4128の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3256の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量519の娘イオン:501、457、475、459、447及び483を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−520、
522.4284の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3258の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量521の娘イオン:503、459、477、504、441及び485を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−522、
524.4441の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3260の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量523の娘イオン:505、461、479、506、443及び487を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−524、
530.4335の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3458の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量529の娘イオン:467、511及び485を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−530、
532.4492の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3460の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量531の娘イオン:513、469、487及び495を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−532、
536.4077の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3256の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量535の娘イオン:473を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−536、
538.4233の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3258の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量537の娘イオン:519、475、493、501及び457を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−538、
540.4389の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3260の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量539の娘イオン:315、521、495及び477を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−540、
550.4597の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3462の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量549の娘イオン:487、531、251、253、513、469及び506を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−550、
574.4597の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3662の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量573の娘イオン:295、223、555及び511を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−574、
576.4754の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3664の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量575の娘イオン:277、297、557、513及び495を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−576、
580.5067の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3668の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量579の娘イオン:561、543、535、517及び499を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−580、
590.4546の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3662の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量589の娘イオン:545を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−590、
592.4703の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3664の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量591の娘イオン:555及び113を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−592、
594.4859の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3666の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量593の娘イオン:557 371、315及び277を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−594、並びに
596.5016の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3668の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量595の娘イオン:279、315、297、577及び559を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−596。
特定の一実施形態では、GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物は、式C2846及び構造:
Figure 2021521203
を有するGTA−446であり得る。
哺乳動物対象における胃管酸(GTA)不全(insufficiency)を検出及び治療するためのキットもまた、本明細書で提供される。このキットは、
哺乳動物対象から血液試料を収集するための血液検体収集デバイス、
血液試料中の1又は2以上のGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物のレベルを試験するために、血液試料を中央処理施設に提出するための包装及び使用説明書であって、GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物が、単結合又は二重結合によって連結された、14〜18炭素長の範囲の2つのより短い鎖のダイマー性脂肪酸構造を含む炭素数28〜36のジカルボン酸脂肪酸である、包装及び使用説明書;並びに
中央処理施設から血液試料の試験結果を取得するための使用説明書であって、低いGTAレベルの検出を含む陽性試験結果の場合に、GTA増大性抗炎症性プレバイオティクス、プロバイオティクス、又は合成GTA製品が提供される使用説明書
を含む。
キットのある特定の実施形態では、GTA増大性抗炎症性プレバイオティクス、プロバイオティクス、又は合成GTA製品は、ブラウティア属、フィーカリバクテリウム・プラウスニッツィ種、バクテロイデス属、ルミノコッカス科、ラクノスピラ科、コプロコッカス属、ロゼブリア属、オシロスピラ属、ルミノコッカス・ブロミ種、ルミノコッカス属、クロストリジウム科、ドレア・フォルミシゲネランス種、バクテロイデス・ユニフォルミス種、ドレア属、レンサ球菌属、クロストリジウム目、アナエロスティペス属、ディアリスター属、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス種、コリオバクテリウム科、フィーカリバクテリウム属、ステレラ属、バクテロイデス・オバツス種、パラバクテロイデス属、ルミノコッカス属、バクテロイデス・フェシス種、ユウバクテリウム・ビフォルメ種、ファスコラルクトバクテリウム属、及び腸内細菌科から選択される微生物種を含む少なくとも1つの生若しくは弱毒化培養物を含む組成物;又は腸における微生物種の増殖及び/若しくは生存度を増加させるプレバイオティクス組成物であり;対象に投与されると、この組成物は、対象における少なくとも1つのGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物の合成を増加させる。
さらなる実施形態では、対象における1又は2以上のGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物のレベルが、所定の対照レベル、その対象についてのより早期の試験値、又は健康な対象についての正常レベルよりも低いと決定される場合に、組成物が提供される。特定の一例では、対照は、少なくとも1つのGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物についての所定の閾値であり得る。
なおさらなる実施形態では、この組成物は、対象の胃腸管への投与に適切な薬学的に許容される担体内に、ブラウティア属由来の微生物種の生若しくは弱毒化培養物、フィーカリバクテリウム・プラウスニッツィの生若しくは弱毒化培養物、又はそれらの組み合わせを含み得る。
キットのさらなる実施形態では、GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物は、以下のうち1つであり得る:GTA−446、GTA−448、GTA−450、GTA−452、GTA−464、GTA−466、GTA−468、GTA−474、GTA−476、GTA−478、GTA−484、GTA−490、GTA−492、GTA−494、GTA−502、GTA−504、GTA−512、GTA−518、GTA−520、GTA−522、GTA−524、GTA−530、GTA−532、GTA−536、GTA−538、GTA−540、GTA−550、GTA−574、GTA−576、GTA−580、GTA−590、GTA−592、GTA−594、及びGTA−596。
非限定的な実施形態では、GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物は、446.3396(GTA−446)、448.3553(GTA−448)、450.3709(GTA−450)、452.3866(GTA−452)、464.3522(GTA−464)、466.3661(GTA−466)、468.3814(GTA−468)、474.3736(GTA−474)、476.3866(GTA−476)、478.4022(GTA−478)、484.3764(GTA−484)、490.3658(GTA−490)、492.3815(GTA−492)、494.3971(GTA−494)、502.4022(GTA−502)、504.4195(GTA−504)、512.4077(GTA−512)、518.3974(GTA−518)、520.4128(GTA−520)、522.4284(GTA−522)、524.4441(GTA−524)、530.4335(GTA−530)、532.4492(GTA−532)、536.4077(GTA−536)、538.4233(GTA−538)、540.4389(GTA−540)、550.4597(GTA−550)、574.4597(GTA−574)、576.4754(GTA−576)、580.5067(GTA−580)、590.4546(GTA−590)、592.4703(GTA−592)、594.4859(GTA−594)、又は596.5016(GTA−596)の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し得る。
さらなる非限定的な実施形態では、GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物は、C2846(GTA−446)、C2848(GTA−448)、C2850(GTA−450)、C2852(GTA−452)、464.3522(GTA−464)、466.3661(GTA−466)、C2852(GTA−468)、C3050(GTA−474)、C3052(GTA−476)、C3054(GTA−478)、C2852(GTA−484)、C3050(GTA−490)、C3052(GTA−492)、C3054(GTA−494)、C3254(GTA−502)、C3256(GTA−504)、C3056(GTA−512)、C3254(GTA−518)、C3256(GTA−520)、C3258(GTA−522)、C3260(GTA−524)、C3458(GTA−530)、C3460(GTA−532)、C3256(GTA−536)、C3258(GTA−538)、C3260(GTA−540)、C3462(GTA−550)、C3662(GTA−574)、C3664(GTA−576)、C3668(GTA−580)、C3662(GTA−590)、C3664(GTA−592)、C3666(GTA−594)、又はC3668(GTA−596)の分子式を有し得る。
さらなる非限定的な実施形態では、GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物は、衝突誘起解離(CID)タンデム質量分析を使用して測定され得る。GTAは、以下に列挙されるGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物のうち1又は2以上であり得る:
446.3396の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2846の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量445の娘イオン:427、409、401、及び383を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−446、
448.3553の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2848の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量447の娘イオン:429、411、403、及び385を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−448、
450.3709の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2850の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量449の娘イオン:431、413、405、及び387を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−450、
452.3866の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2852の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量451の娘イオン:433、407、及び389を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−452、
464.3522の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2848の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量463の娘イオン:445、419、401、及び383を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−464、
466.3661の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2850の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量465の娘イオン:447、421、及び403を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−466、
468.3814の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C2852の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量467の娘イオン:449、423、及び405を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−468、
474.3736の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3050の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量473の娘イオン:455、429、及び411を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−474、
476.3866の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3052の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量475の娘イオン:457、431、439及び413を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−476、
478.4022の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3054の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量477の娘イオン:459、433、441及び415を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−478、
484.3764の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C2852の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量483の娘イオン:465、315、439 483、421、及び447を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−484、
490.3658の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3050の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量489の娘イオン:445、471、427及び319を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−490、
492.3815の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3052の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量491の娘イオン:241、249、267、473、及び447を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−492、
494.3971の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3054の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量493の娘イオン:475、215、及び449を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−494、
502.4022の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3254の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量501の娘イオン:483、457、465及び439を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−502、
504.4195の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3256の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量503の娘イオン:485、459、467及び441を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−504、
512.4077の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3056の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量511の娘イオン:493、315、及び467を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−512、
518.3974の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3254の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量517の娘イオン:499、473、499、481及び445を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−518、
520.4128の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3256の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量519の娘イオン:501、457、475、459、447及び483を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−520、
522.4284の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3258の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量521の娘イオン:503、459、477、504、441及び485を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−522、
524.4441の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3260の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量523の娘イオン:505、461、479、506、443及び487を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−524、
530.4335の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3458の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量529の娘イオン:467、511及び485を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−530、
532.4492の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3460の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量531の娘イオン:513、469、487及び495を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−532、
536.4077の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3256の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量535の娘イオン:473を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−536、
538.4233の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3258の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量537の娘イオン:519、475、493、501及び457を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−538、
540.4389の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3260の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量539の娘イオン:315、521、495及び477を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−540、
550.4597の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3462の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量549の娘イオン:487、531、251、253、513、469及び506を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−550、
574.4597の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3662の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量573の娘イオン:295、223、555及び511を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−574、
576.4754の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3664の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量575の娘イオン:277、297、557、513及び495を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−576、
580.5067の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3668の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量579の娘イオン:561、543、535、517及び499を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−580、
590.4546の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3662の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量589の娘イオン:545を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−590、
592.4703の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3664の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量591の娘イオン:555及び113を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−592、
594.4859の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3666の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量593の娘イオン:557 371、315及び277を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−594、並びに
596.5016の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3668の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量595の娘イオン:279、315、297、577及び559を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−596。
このキットの特定の一例では、GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物は、式C2846及び構造:
Figure 2021521203
を有するGTA−446である。
上記方法及びキットのさらなる実施形態によれば、胃管酸(GTA)不全は、胃腸(GI)炎症状態の指標であり得る。
本発明のこれら及び他の特色は、添付の図面を参照して、以下の説明からより明らかとなる。
マイクロバイオーム組成の変更の結果としてのGTAレベルが損なわれ、それが炎症及びがんの発症をもたらし得る、本明細書で提供される機構を示す図である。 本明細書に記載される個別化されたGTA試験及び治療方法の模式図である。 低いGTAレベル又は高いGTAレベルと関連する特定の属及び種レベルの微生物を示す操作的分類単位(OTU,operational taxonomic unit)のグラフである。 ヒト及び動物(イヌ及びブタ)における腸微生物によるGTA 445.4/383.4(本明細書でGTA 446とも記載される)の産生を示すグラフである。 ヒト及び動物(イヌ及びブタ)における腸微生物によるGTA 447.4/385.4(本明細書でGTA 448とも記載される)の産生を示すグラフである。 ヒト及び動物(イヌ及びブタ)における腸微生物によるGTA 449.4/405.4(本明細書でGTA 450とも記載される)の産生を示すグラフである。 ヒト及び動物(イヌ及びブタ)における腸微生物によるGTA 463.4/419.4(本明細書でGTA 464とも記載される)の産生を示すグラフである。 ヒト及び動物(イヌ及びブタ)における腸微生物によるGTA 465.4/403.4(本明細書でGTA 466とも記載される)の産生を示すグラフである。 ヒト及び動物(イヌ及びブタ)における腸微生物によるGTA 467.4/423.4(本明細書でGTA 468とも記載される)の産生を示すグラフを示す図である。
胃管酸(GTA)は、特定の腸微生物によって産生されることが、本明細書で示される。したがって、経時的なマイクロバイオームにおける変化は、GTAを産生する能力を損ない得る。
図1に示されるように、GTA代謝物は、左側のパネルに示されるように、NFκBの下方調節を介した慢性炎症に対する保護に関与する。この状態の下では、比較的低いレベルのNF−κB発現は、最適なマイクロバイオーム組成の結果としての身体中の適正なGTAレベルによって維持される。GTAのレベルが欠乏すると(右パネル)、マイクロバイオーム組成の変更、特定の微生物種の相対的存在量における変化、又は多様性における変化に起因して、NFκB発現はもはや抑制されず、複数の炎症促進性タンパク質の誘導を生じる。これは、細胞におけるDNA変異をもたらし得、最終的にがんのリスクを増加させ得る、胃腸管中の酸化的環境を生み出す。したがって、GTA欠乏は、潜血又はメチル化DNAのように腫瘍マーカーなのではない;しかしむしろ、身体内のがん促進性環境を生じる疾患前代謝欠損である。
GTA産生における腸微生物の役割についてのこの新たな理解に基づいて、プレ若しくはプロバイオティクスアプローチによる特定の株の増大、又は純粋に合成のGTAの投与のいずれかを介して身体中のGTAレベルを増加させる方法が、本明細書で提供される。
GTAレベルを増加させるために、記載された方法を使用することはまた、胃腸管内の炎症を低減させるための新規アプローチを提示し得る。
特に、ブラウティア属、フィーカリバクテリウム・プラウスニッツィ種、バクテロイデス属、ルミノコッカス科、ラクノスピラ科、コプロコッカス属、ロゼブリア属、オシロスピラ属、ルミノコッカス・ブロミ種、ルミノコッカス属、クロストリジウム科、ドレア・フォルミシゲネランス種、バクテロイデス・ユニフォルミス種、ドレア属、レンサ球菌属、クロストリジウム目、アナエロスティペス属、ディアリスター属、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス種、コリオバクテリウム科、フィーカリバクテリウム属、ステレラ属、バクテロイデス・オバツス種、パラバクテロイデス属、ルミノコッカス属、バクテロイデス・フェシス種、ユウバクテリウム・ビフォルメ種、ファスコラルクトバクテリウム属、及び腸内細菌科由来の微生物種が、腸におけるGTA生合成にとって重要であることが見出されている。したがって、治療有効量の、これらの微生物種のうち少なくとも1つの、少なくとも1つの生若しくは弱毒化培養物を含む組成物、又は腸における微生物種の増殖及び/若しくは生存度を増加させるプレバイオティクス組成物を投与することは、個体におけるGTA合成を増加させる手段を提供する。対象は、哺乳動物、特に、ヒト対象であり得る。
ほとんどの実施形態では、GTAは、単結合又は二重結合によって連結された、炭素数14〜18の範囲の2つのより短い鎖のダイマー性脂肪酸構造を含む炭素数28〜36のジカルボン酸脂肪酸である。例えば、GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物は、式C2846及び構造:
Figure 2021521203
を有するGTA−446であり得る。
これらのGTAの他の例には、GTA−448、GTA−450、GTA−452、GTA−464、GTA−466、GTA−468、GTA−474、GTA−476、GTA−478、GTA−484、GTA−490、GTA−492、GTA−494、GTA−502、GTA−504、GTA−512、GTA−518、GTA−520、GTA−522、GTA−524、GTA−530、GTA−532、GTA−536、GTA−538、GTA−540、GTA−550、GTA−574、GTA−576、GTA−580、GTA−590、GTA−592、GTA−594、及びGTA−596が含まれる。
これらのGTAのレベルは、質量分析法を含む種々の方法で測定され得る。例えば、これらは各々、衝突誘起解離(CID)タンデム質量分析から生じる1又は2以上の娘イオンフラグメントの検出に基づいて、同定又は測定され得る。上に列挙した各GTAについてのフラグメントは、以下の表中に列挙される。
以下に記載される完全CIDフラグメンテーションパターンは、これらの標的分析物の独自のフィンガープリントを示すが、記載された方法を実施するために、全ての娘フラグメントイオンが検出される必要があるわけではないことが理解される。実際、任意の数又は組み合わせの娘イオン質量を、試料中の親分析物のレベルを特異的に検出及び測定することを目的として選択することができることが理解される。妥当な娘イオンの選択が、複数の基準、例えば、シグナル・ノイズ比、選択された分析物についての遷移の特異性、シグナルの再現性、種々のマトリックスを横断する干渉、親構造に対するニュートラルロスの複雑性及び予想される特異性などに依存することが、さらに理解される。多くの場合、単一の娘フラグメントイオンが、これらの基準に基づいて選択され得、対応する親分析物を定量するために使用され得る。
GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物:
446.3396(GTA−446):
Figure 2021521203
代謝物446.3396(GTA−446)は、分子式C2846を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。しかし、検出及び測定を目的とすると、これらのフラグメントのサブセット又はさらには1つが、はるかに実用的である。したがって、衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量445の、以下の娘イオンが含まれる:427、409、401、及び383。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量(nominal parent/daughter mass)445/401又は445/383が、GTA−446レベルを測定するために使用され得る。
448.3553(GTA−448):
Figure 2021521203
代謝物448.3553(GTA−448)は、分子式C2848を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。しかし、検出及び測定を目的とすると、これらのフラグメントのサブセット又はさらには1つが、はるかに実用的である。したがって、衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量447の、以下の娘イオンが含まれる:429、411、403、及び385。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量447/385が、GTA−448レベルを測定するために使用され得る。
450.3709(GTA−450):
Figure 2021521203
代謝物450.3709(GTA−450)は、分子式C2850を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量449の、以下の娘イオンが含まれる:431、413、405、及び387。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量449/405が、GTA−450レベルを測定するために使用され得る。
452.3866(GTA−452):
Figure 2021521203
代謝物452.3866(GTA−452)は、分子式C2852を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量451の、以下の娘イオンが含まれる:433、407、及び389。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量451/407が、GTA−452レベルを測定するために使用され得る。
464.3522(GTA−464):
Figure 2021521203
代謝物464.3522(GTA−464)は、分子式C2848を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量463の、以下の娘イオンが含まれる:445、419、401、及び383。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量463/419が、GTA−464レベルを測定するために使用され得る。
466.3661(GTA−466):
Figure 2021521203
代謝物466.3661(GTA−466)は、分子式C2850を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量465の、以下の娘イオンが含まれる:447、421、及び403。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量465/403が、GTA−466レベルを測定するために使用され得る。
468.3814(GTA−468):
Figure 2021521203
代謝物468.3814(GTA−468)は、分子式C2852を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量467の、以下の娘イオンが含まれる:449、423、及び405。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量467/423が、GTA−468レベルを測定するために使用され得る。
474.3736(GTA−474):
Figure 2021521203
代謝物474.3736(GTA−474)は、分子式C3050を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量473の、以下の娘イオンが含まれる:455、429、及び411。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量473/429が、GTA−474レベルを測定するために使用され得る。
476.3866(GTA−476):
Figure 2021521203
代謝物476.3866(GTA−476)は、分子式C3052を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量475の、以下の娘イオンが含まれる:457、431、439及び413。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量475/431が、GTA−476レベルを測定するために使用され得る。
478.4022(GTA−478):
Figure 2021521203
代謝物478.4022(GTA−478)は、分子式C3054を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量477の、以下の娘イオンが含まれる:459、433、441及び415。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量477/433が、GTA−478レベルを測定するために使用され得る。
484.3764(GTA−484):
Figure 2021521203
代謝物484.3764(GTA−484)は、分子式C2852を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量483の、以下の娘イオンが含まれる:465、315、439、483、421、及び447。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量483/315が、GTA−484レベルを測定するために使用され得る。
490.3658(GTA−490):
Figure 2021521203
代謝物490.3658(GTA−490)は、分子式C3050を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量489の、以下の娘イオンが含まれる:445、471、427及び319。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量489/445が、GTA−490レベルを測定するために使用され得る。
492.3815(GTA−492):
Figure 2021521203
代謝物492.3815(GTA−492)は、分子式C3052を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量491の、以下の娘イオンが含まれる:241、249、267、473、及び447。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量491/241が、GTA−492レベルを測定するために使用され得る。
494.3971(GTA−494):
Figure 2021521203
代謝物494.3971(GTA−494)は、分子式C3054を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量493の、以下の娘イオンが含まれる:475、215、及び449。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量493/449が、GTA−494レベルを測定するために使用され得る。
502.4022(GTA−502):
Figure 2021521203
代謝物502.4022(GTA−502)は、分子式C3254を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量501の、以下の娘イオンが含まれる:483、457、465及び439。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量501/457が、GTA−502レベルを測定するために使用され得る。
504.4195(GTA−504):
Figure 2021521203
代謝物504.4195(GTA−504)は、分子式C3256を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量503の、以下の娘イオンが含まれる:485、459、467及び441。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量503/459が、GTA−504レベルを測定するために使用され得る。
512.4077(GTA−512):
Figure 2021521203
代謝物512.4077(GTA−512)は、分子式C3056を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量511の、以下の娘イオンが含まれる:493、315、及び467。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量511/315が、GTA−512レベルを測定するために使用され得る。
518.3974(GTA−518):
Figure 2021521203
代謝物518.3974(GTA−518)は、分子式C3254を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量517の、以下の娘イオンが含まれる:499、473、499、481及び445。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量517/473が、GTA−518レベルを測定するために使用され得る。
520.4128(GTA−520):
Figure 2021521203
代謝物520.4128(GTA−520)は、分子式C3256を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量519の、以下の娘イオンが含まれる:501、457、475、459、447及び483。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量519/475が、GTA−520レベルを測定するために使用され得る。
522.4284(GTA−522):
Figure 2021521203
代謝物522.4284(GTA−522)は、分子式C3258を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量521の、以下の娘イオンが含まれる:503、459、477、504、441及び485。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量521/477が、GTA−522レベルを測定するために使用され得る。
524.4441(GTA−524):
Figure 2021521203
代謝物524.4441(GTA−524)は、分子式C3260を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量523の、以下の娘イオンが含まれる:505、461、479、506、443及び487。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量523/461が、GTA−524レベルを測定するために使用され得る。
530.4335(GTA−530):
Figure 2021521203
代謝物530.4335(GTA−530)は、分子式C3458を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量529の、以下の娘イオンが含まれる:467、511及び485。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量529/467が、GTA−530レベルを測定するために使用され得る。
532.4492(GTA−532):
Figure 2021521203
代謝物532.4492(GTA−532)は、分子式C3460を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量531の、以下の娘イオンが含まれる:513、469、487及び495。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量531/469が、GTA−532レベルを測定するために使用され得る。
536.4077(GTA−536):
MS/MS遷移535/473
代謝物536.4077(GTA−536)は、分子式C3256を有し、上に示されるMS/MS遷移によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、観察された娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある:これらには、親[M−H]質量535の、以下の娘イオンが含まれる:473。好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量535/573が、GTA−590レベルを測定するために使用され得る。
538.4233(GTA−538):
Figure 2021521203
代謝物538.4233(GTA−538)は、分子式C3258を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量537の、以下の娘イオンが含まれる:519、475、493、501及び457。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量537/475が、GTA−538レベルを測定するために使用され得る。
540.4389(GTA−540):
Figure 2021521203
代謝物540.4389(GTA−540)は、分子式C3260を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量539の、以下の娘イオンが含まれる:315、521、495及び477。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量539/315が、GTA−540レベルを測定するために使用され得る。
550.4597(GTA−550):
Figure 2021521203
代謝物550.4597(GTA−550)は、分子式C3462を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量549の、以下の娘イオンが含まれる:487、531、251、253、513、469及び506。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量549/487が、GTA−550レベルを測定するために使用され得る。
574.4597(GTA−574):
Figure 2021521203
代謝物574.4597(GTA−574)は、分子式C3662を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量573の、以下の娘イオンが含まれる:295、223、555及び511。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量573/223が、GTA−574レベルを測定するために使用され得る。
576.4754(GTA−576):
Figure 2021521203
代謝物576.4754(GTA−576)は、分子式C3664を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量575の、以下の娘イオンが含まれる:277、297、557、513及び495。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量575/513が、GTA−576レベルを測定するために使用され得る。
580.5067(GTA−580):
Figure 2021521203
代謝物580.5067(GTA−580)は、分子式C3668を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量579の、以下の娘イオンが含まれる:561、543、535、517及び499。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量579/517が、GTA−580レベルを測定するために使用され得る。
590.4546(GTA−590):
MS/MS遷移589/545
代謝物590.4546(GTA−590)は、分子式C3662を有し、上に示されるMS/MS遷移によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、観察された娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある:これらには、親[M−H]質量589の、以下の娘イオンが含まれる:545。好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量589/545が、GTA−590レベルを測定するために使用され得る。
592.4703(GTA−592):
Figure 2021521203
代謝物592.4703(GTA−592)は、分子式C3664を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量591の、以下の娘イオンが含まれる:555及び113。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量591/555が、GTA−592レベルを測定するために使用され得る。
594.4859(GTA−594):
Figure 2021521203
代謝物594.4859(GTA−594)は、分子式C3666を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量593の、以下の娘イオンが含まれる:557、371、315及び277。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量593/557又は593/371が、GTA−594レベルを測定するために使用され得る。
596.5016(GTA−596):
Figure 2021521203
代謝物596.5016(GTA−596)は、分子式C3668を有し、上記表に示されるCID MS/MSフラグメンテーションパターン全体によって特徴付けることができる。衝突ガスとしてのN及び負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)を使用する分析のある特定の実施形態では、上記表中で太字の娘イオン(ノミナル質量)のうち1又は2以上を利用することが好ましい場合がある。これらには、親[M−H]質量595の、以下の娘イオンが含まれる:279、315、297、577及び559。ある特定の好ましい実施形態では、ノミナル親/娘質量595/559が、GTA−596レベルを測定するために使用され得る。
本明細書に記載される方法によれば、対象由来の生物学的試料は、記載されたGTAバイオマーカーのレベルにおける差異を同定するために、正常集団から採取された同じ型の試料と比較され得る。試料は、フーリエ変換イオンサイクロトロン共鳴質量分析(FTMS,Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry)及び液体クロマトグラフィー質量分析(LC−MS,liquid chromatography mass spectrometry)が含まれるがこれらに限定されない種々の分析プラットフォームを使用して、抽出及び分析され得る。
生物学的試料は、身体内のいかなる場所にも、例えば、限定なしに、血液(血清/血漿)、大便、又は腫瘍、隣接正常、平滑筋及び骨格筋、脂肪組織、肝臓、皮膚、髪、脳、腎臓、膵臓、肺、結腸、胃などを含むいかなる固形組織の生検にも起源し得る。血液又は血清試料が、特に所望される。用語「血液」又は「血清」が本明細書で使用され得るが、当業者は、血漿又は全血若しくは全血の副画分もまた使用され得ることを認識する。
血液試料が患者から引き出される場合、試料を処理できるいくつかの方法が存在する。処理の範囲は、なし程度の取るに足りないもの(即ち、冷凍全血)又は特定の細胞型の単離程度の複雑なものまでであり得る。ほとんどの一般的かつ慣用的な手順は、全血からの血清又は血漿のいずれかの調製を含む。固相支持体、例えば、濾紙又は他の不動材料上への血液試料のスポッティングを含む全ての血液試料処理方法もまた企図される。
限定することは望まないが、上記処理された血液又は血漿試料は、次いで、処理された血液試料内に含まれる代謝物の検出及び測定において使用される系統的分析技術と適合性になるように、さらに処理され得る。処理の型は、さらなる処理なし程度の取るに足りないものから、示差的抽出及び化学的誘導体化程度の複雑なものまでの範囲であり得る。抽出方法には、一般的な溶媒、例えば、メタノール、エタノール、アルコール及び水の混合物、又は有機溶媒、例えば、酢酸エチル若しくはヘキサン中での、超音波処理、ソックレー抽出、マイクロ波支援抽出(MAE,microwave assisted extraction)、超臨界流体抽出(SFE,supercritical fluid extraction)、高速溶媒抽出(ASE,accelerated solvent extraction)、加圧液体抽出(PLE,pressurized liquid extraction)、加圧熱水抽出(PHWE,pressurized hot water extraction)及び/又は界面活性剤支援抽出(PHWE,surfactant assisted extraction)が含まれ得る。FTMS分析のため及びフローインジェクションLC−MS/MS分析のために代謝物を抽出するための特に所望される方法は、非極性代謝物が有機溶媒中に溶解し、極性代謝物が水性溶媒中に溶解する、液体/液体抽出を実施することである。
抽出された試料は、当該分野で公知のものを含むいかなる適切な方法を使用しても分析することができる。例えば、限定することは望まないが、生物学的試料の抽出物は、直接的インジェクションによる、又はクロマトグラフィー分離後の、本質的にいかなる質量分析プラットフォームでの分析にも適している。典型的な質量分析計は、試料内の分子をイオン化する源及びイオン化された分子若しくは分子のフラグメントを検出するための検出器を含む。一般的な源の非限定的な例には、電子衝撃、エレクトロスプレーイオン化(ESI,electrospray ionization)、大気圧化学イオン化(APCI)、大気圧光イオン化(APPI,atmospheric pressure photo ionization)、マトリックス支援レーザー脱離イオン化(MALDI,matrix assisted laser desorption ionization)、表面増強脱離イオン化(SELDI,surface enhanced laser desorption ionization)、及びそれらの派生物が含まれる。一般的な質量分離及び検出のシステムには、四重極、四重極イオントラップ、リニアイオントラップ、飛行時間型(TOF,time-of-flight)、磁場型、イオンサイクロトロン(FTMS)、Orbitrap、並びにそれらの派生物及び組み合わせが含まれ得る。他のMSベースのプラットフォームを超えるFTMSの利点は、その多くがより低い分解能の機器によっては失われる、わずか100分の1ダルトンだけ異なる代謝物の分離を可能にするその高い分解能である。
用語「代謝物」は、試料中のそのレベル又は強度が測定され、疾患状態を診断するためのマーカーとして使用され得る、特定のGTA小分子を意味する。これらの小分子は、本明細書で「代謝物マーカー」、「代謝物構成要素」、「バイオマーカー」、又は「生化学的マーカー」とも呼ばれ得る。
代謝物は一般に、質量分析技術によって測定されるような、その正確な質量によって特徴付けられる。正確な質量は、「正確な中性質量」又は「中性質量」とも呼ばれ得る。代謝物の正確な質量は、本明細書で、ダルトン(Da,Dalton)、又はそれと実質的に等価な質量で与えられる。「それと実質的に等価な」とは、正確な質量における+/−5ppmの差異が、同じ代謝物を示すことを意味する。正確な質量は、中性代謝物の質量として与えられる。試料の分析の間に生じる代謝物のイオン化の間に、代謝物は、1又は2以上の水素原子の喪失又は獲得及び電子の喪失又は獲得を引き起こす。これは、正確な質量を「イオン化質量」に変化させ、「イオン化質量」は、イオン化の間に喪失又は獲得された水素原子及び電子の質量だけ、正確な質量とは異なる。特記しない限り、正確な中性質量が本明細書で言及される。
同様に、代謝物がその分子式によって記載される場合、中性代謝物の分子式が与えられる。当然、イオン化代謝物の分子式は、イオン化の間に喪失若しくは獲得された水素原子の数だけ、又は非水素付加イオンの付加に起因して、中性分子式とは異なる。
データは、分析の間に収集され、1又は1よりも多くの代謝物についての定量データが取得される。「定量データ」は、試料中に存在する特定の代謝物のレベル又は強度を測定することによって取得される。
定量データは、1又は1よりも多くの参照試料からの対応するデータと比較される。「参照試料」は、特定の疾患状態についてのいかなる適切な参照試料でもある。例えば、いかなる方法によっても限定することは望まないが、参照試料は、対照個体、即ち、GI炎症及び/又はがんの家族歴を有する又は有さない、GI炎症及び/又はがんに罹患していない人由来の試料であり得る(本明細書で「「正常」カウンターパート」とも呼ばれる);参照試料はまた、GI炎症及び/又はがんと臨床的に診断された患者から取得された試料であり得る。当業者に理解されるように、1よりも多くの参照試料が、定量データとの比較のために使用され得る。例えば、限定することは望まないが、1又は1よりも多くの参照試料は、対照個体から取得された第1の参照試料であり得る。対象の疾患状態における変化をモニタリングする場合、参照試料には、療法の結果としての疾患状態における変化を比較するために、療法前又は療法の間のいずれかのより早期の期間において取得された試料が含まれ得る。
「内部対照代謝物」は、患者中に天然に存在する内因性代謝物を指す。疾患状態にわたって変動しないいかなる適切な内因性代謝物も、内部対照代謝物として使用することができる。
GTA代謝物マーカーの内部対照代謝物に対する比の使用は、代謝物マーカーの絶対的レベルの測定よりも安定かつ再現性のある測定を提供し得る。内部対照代謝物は全ての試料中に天然に存在し、疾患状態にわたって顕著には変動しないように見えるので、試料毎の変動性(取り扱い、抽出などに起因する)は、最小化される。
本明細書に記載される方法に従うGTA代謝物マーカーの測定は、ある特定の実施形態では、質量分析法以外のアッセイプラットフォームを使用して実施され得る。検出される分子に依存して、複数の型のアッセイプラットフォーム選択肢が、現在利用可能である。これらには、比色化学アッセイ(UV、又は他の波長)、抗体ベースの酵素結合免疫吸着アッセイ(ELISA, enzyme-linked immunosorbent assay)、ディップスティック化学アッセイ、画像分析、例えば、MRI、petスキャン、CTスキャン、及び種々の代替的質量分析ベースのシステムが含まれるがこれらに限定されない。
非限定的な実施形態では、ハイスループットスクリーニング(HTS,high throughput screening)アッセイは、従来の三連四重極質量分析テクノロジーを使用して実行され得る。HTSアッセイは、三連四重極質量分析計中に血清抽出物を直接注入することによって作用し、これは次いで、単一イオンモニタリング(SIM,single-ion monitoring)によって、親分子の各々を個々に単離する。これの後に、不活性ガス、例えば、N(衝突ガスとも呼ばれる)を使用した各分子のフラグメンテーション(衝突誘起解離即ちCIDと集合的に呼ばれる)が続く。次いで、各親GTAバイオマーカーからの特定のフラグメントの強度が、多重反応モニタリング(MRM,multiple-reaction monitoring)と呼ばれるプロセスを介して、測定及び記録される。さらに、内部標準分子もまた、各試料に添加され、同様にフラグメンテーションに供される。この内部標準フラグメントは、方法及び計装が正しく動作している場合、各試料において同じ強度を有するはずである。全てのバイオマーカーフラグメント強度、並びに内部標準フラグメント強度が収集される場合、バイオマーカーのISフラグメント強度に対する比が計算され、この比は、log変換される。次いで、各対象試料についての値は、その人が疾患状態について陽性又は陰性である相対的な尤度を決定するために、疾患陽性及び対照の以前に決定された分布と比較される。
本発明のさらなる実施形態では、試験キットが、GI炎症状態の指標としてのGTA代謝物レベルを試験するために中央処理施設によって分析され得る少量の血液検体、例えば、指プリック乾燥血液スポット又は血清試料を収集するために、対象に提供される。次いで、中央処理施設は、種々の機構、例えば、印刷された報告書、クラウドベースの電子記録、又は他のワイヤレス型の連絡のうち1つを介して、結果を対象に報告し返す。陽性の試験結果(低いGTAレベル)の場合、対象は、GTA増大性抗炎症性プレバイオティクス、プロバイオティクス、又は合成GTA製品を購入する機会を有する。図2は、この個別化された試験及び治療アプローチの模式図を示す。
中央処理施設は、GTA代謝物試験アッセイの配置のための多数の選択肢を伴い得る。これらには、以下が含まれ得るがこれらに限定されない:1、世界中のいくつかの実験室に容易に配置される現行の実験室計装及び三連四重極質量分析計と適合性のMS/MS法の開発、並びに/又は2、試料が1つの場所で発送及び分析され得、結果が患者又は患者の担当医に送り返される、試験施設の設立。
身体内の内因性GTAレベルを増加させるための人工、天然、又は合成の活性薬剤を含む治療的組成物もまた、本明細書に記載される。
かかる治療的組成物は、身体内のGTAレベルを増加させるのに有効なプロバイオティクス非病原性細菌集団を含み得る。これらの治療的組成物は、胃腸(GI)炎症並びに/又は結腸直腸がん、膵がん、及び卵巣がんが含まれるがこれらに限定されないGI関連がんと関連する疾患、障害及び状態の予防、制御、及び/又は治療のためにも有用であり得る。
一部の実施形態では、治療的組成物は、微生物集団と併せて、プレバイオティクス、例えば、炭水化物を含む。
上述の方法、キット及び組成物の実施形態では、プロバイオティクス非病原性細菌集団は、ブラウティア属、フィーカリバクテリウム・プラウスニッツィ種、バクテロイデス属、ルミノコッカス科、ラクノスピラ科、コプロコッカス属、ロゼブリア属、オシロスピラ属、ルミノコッカス・ブロミ種、ルミノコッカス属、クロストリジウム科、ドレア・フォルミシゲネランス種、バクテロイデス・ユニフォルミス種、ドレア属、レンサ球菌属、クロストリジウム目、アナエロスティペス属、ディアリスター属、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス種、コリオバクテリウム科、フィーカリバクテリウム属、ステレラ属、バクテロイデス・オバツス種、パラバクテロイデス属、ルミノコッカス属、バクテロイデス・フェシス種、ユウバクテリウム・ビフォルメ種、ファスコラルクトバクテリウム属、及び/又は腸内細菌科のうち1又は2以上の細菌種を含み得る。
さらなる実施形態では、プロバイオティクス組成物は、薬学的に許容される賦形剤又は担体を含む。一部の実施形態では、薬学的に許容される賦形剤又は担体は、哺乳動物対象への経口又は直腸投与による投与に適切であり得る。
適切な賦形剤及び担体の非限定的な例には、緩衝剤、防腐剤、安定剤、結合剤、圧縮剤(compaction agent)、滑沢剤、分散増強剤、崩壊剤、香味剤、甘味料、及び着色剤が含まれる。
適切な緩衝剤の非限定的な例には、クエン酸ナトリウム、炭酸マグネシウム、重炭酸マグネシウム、炭酸カルシウム、及び重炭酸カルシウムが含まれる。
適切な防腐剤の非限定的な例には、抗酸化剤、例えば、アルファ−トコフェロール及びアスコルベート、並びに抗菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、及びフェノールが含まれる。
プロバイオティクス製剤が嫌気性細菌株を含む場合、医薬製剤及び賦形剤は、酸素への細菌株の曝露を防止するように選択され得る。
適切な結合剤の非限定的な例には、デンプン、アルファ化デンプン、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、セルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、ポリアクリルアミド、ポリビニルオキソアゾリドン(polyvinyloxoazolidone)、ポリビニルアルコール、C12−C18脂肪酸アルコール、ポリエチレングリコール、ポリオール、サッカリド、オリゴ糖、及びそれらの組み合わせが含まれる。
適切な滑沢剤の非限定的な例には、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸亜鉛、水素化植物油、sterotex、ポリオキシエチレンモノステアレート、タルク、ポリエチレングリコール、安息香酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム、及び軽油が含まれる。
適切な分散剤の非限定的な例には、デンプン、アルギン酸、ポリビニルピロリドン、グアーガム、カオリン、ベントナイト、精製木材セルロース、デンプングリコール酸ナトリウム、イソアモルファスシリケート(isoamorphous silicate)、及び高HLB乳化剤界面活性剤としての微結晶セルロースが含まれる。
一部の実施形態では、組成物は、崩壊剤を含む。他の実施形態では、崩壊剤は、非発泡性崩壊剤である。適切な非発泡性崩壊剤の非限定的な例には、デンプン、例えば、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、それらのアルファ化及び加工デンプン、甘味料、クレイ、例えば、ベントナイト、微結晶セルロース、アルギネート、デンプングリコール酸ナトリウム、ガム、例えば、寒天、グアー、ローカストビーン、カラヤ、ペクチン、及びトラガントが含まれる。別の実施形態では、崩壊剤は、発泡性崩壊剤である。適切な発泡性崩壊剤の非限定的な例には、クエン酸と組み合わせた重炭酸ナトリウム、及び酒石酸と組み合わせた重炭酸ナトリウムが含まれる。
香味剤は、合成香味油及び香味芳香物;天然油;植物、葉、花、及び果実由来の抽出物;並びにそれらの組み合わせから選択され得る。一部の実施形態では、香味剤は、ケイヒ油;ウィンターグリーン油;ペパーミント油;クローバー油;干し草油(hay oil);アニス油;ユーカリ;バニラ;かんきつ油、例えば、レモン油、オレンジ油、ブドウ及びグレープフルーツ油;並びにリンゴ、モモ、西洋ナシ、イチゴ、ラズベリー、サクランボ、プラム、パイナップル、及びアプリコットを含む果実精から選択される。
適切な甘味料の非限定的な例には、グルコース(コーンシロップ)、デキストロース、転化糖、フルクトース、及びそれらの混合物(担体として使用しない場合);サッカリン及びその種々の塩、例えば、ナトリウム塩;ジペプチド甘味料、例えば、アスパルテーム;ジヒドロカルコン化合物、グリチルリチン;ステビア(Stevia Rebaudiana)(ステビオシド);スクロースのクロロ誘導体、例えば、スクラロース;並びに糖アルコール、例えば、ソルビトール、マンニトール、キシリトールなどが含まれる。水素化デンプン加水分解物、並びに合成甘味料3,6−ジヒドロ−6−メチル−1,2,3−オキサチアジン−4−オン−2,2−ジオキシド、特に、そのカリウム塩(アセスルファム−K)並びにナトリウム及びカルシウム塩もまた企図される。
適切な着色剤の非限定的な例には、食品・医薬品・化粧品顔料(FD&C,food, drug and cosmetic colors不明)、食品・化粧品顔料(D&C,drug and cosmetic colors)、及び外部医薬品・化粧品顔料(Ext.D&C,external drug and cosmetic colors)が含まれる。
製剤中の賦形剤又は賦形剤の組み合わせの重量分率は、通常、組成物の総重量の約99%以下、例えば、約95%以下、約90%以下、約85%以下、約80%以下、約75%以下、約70%以下、約65%以下、約60%以下、約55%以下、50%以下、約45%以下、約40%以下、約35%以下、約30%以下、約25%以下、約20%以下、約15%以下、約10%以下、約5%以下、約2%以下、又は約1%以下である。
本明細書で開示される組成物は、種々の形態へと製剤化され得、いくつかの異なる手段によって投与され得る。これらの組成物は、所望に応じて、従来から許容される担体、補助剤、及び媒体を含む製剤中で、経口、又は直腸投与され得る。例示的な実施形態では、組成物は、経口投与される。
経口投与のための固体投薬量形態には、カプセル、錠剤、カプレット、丸剤、トローチ、薬用キャンディー剤、粉末、及び顆粒が含まれる。カプセルは、典型的には、細菌組成物を含むコア材料及びコア材料をカプセル封入するシェルを含む。一部の実施形態では、コア材料は、固体、液体、及びエマルジョンのうち少なくとも1つを含む。他の実施形態では、シェル壁材料は、軟ゼラチン、硬ゼラチン、及びポリマーのうち少なくとも1つを含む。適切なポリマーには、以下が含まれるがこれらに限定されない:セルロース系ポリマー、例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(HPMC,hydroxypropyl methyl cellulose)、メチルセルロース、エチルセルロース、酢酸セルロース、酢酸フタル酸セルロース、酢酸トリメリト酸セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースサクシネート及びカルボキシメチルセルロースナトリウム;アクリル酸ポリマー及びコポリマー、例えば、アクリル酸、メタクリル酸、メチルアクリレート、アンモニオメチルアクリレート、エチルアクリレート、メチルメタクリレート及び/又はエチルメタクリレートから形成されるもの(例えば、商標「Eudragit」の下で販売されるコポリマー);ビニルポリマー及びコポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン、ポリ酢酸ビニル、ポリ酢酸ビニルフタレート、酢酸ビニルクロトン酸コポリマー、及びエチレン−酢酸ビニルコポリマー;並びにシェラック(精製ラック(lac))。なお他の実施形態では、少なくとも1つのポリマーは、味覚マスキング剤として機能する。
錠剤、丸剤などは、打錠、多重打錠、多重重層、及び/又は被覆され得る。被覆は、単一又は複数であり得る。一実施形態では、被覆材料は、植物、真菌、及び微生物のうち少なくとも1つから抽出されたサッカリド、多糖、及び糖タンパク質のうち少なくとも1つを含む。非限定的な例には、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、ジャガイモデンプン、タピオカデンプン、セルロース、ヘミセルロース、デキストラン、マルトデキストリン、シクロデキストリン、イヌリン、ペクチン、マンナン、アラビアゴム、ローカストビーンガム、メスキートガム、グアーガム、カラヤガム、ガティガム、トラガントガム、フノリ、カラゲニン、寒天、アルギネート、キトサン、又はジェランガムが含まれる。一部の実施形態では、被覆材料は、タンパク質を含む。別の実施形態では、被覆材料は、脂肪及び油のうち少なくとも1つを含む。他の実施形態では、脂肪及び油のうち少なくとも1つは、高温融解性である。なお別の実施形態では、脂肪及び油のうち少なくとも1つは、水素化される又は部分的に水素化される。一実施形態では、脂肪及び油のうち少なくとも1つは、植物に由来する。他の実施形態では、脂肪及び油のうち少なくとも1つは、グリセリド、遊離脂肪酸、及び脂肪酸エステルのうち少なくとも1つを含む。一部の実施形態では、被覆材料は、少なくとも1つの食用ワックスを含む。食用ワックスは、動物、昆虫、又は植物に由来し得る。非限定的な例には、ミツロウ、ラノリン、ヤマモモワックス、カルナバワックス、及び米ぬかワックスが含まれる。錠剤及び丸剤は、腸溶性被覆を用いてさらに調製され得る。
或いは、本明細書で開示される細菌組成物を具体化する粉末又は顆粒は、食品製品中に取り込まれ得る。一部の実施形態では、食品製品は、経口投与のための飲み物(drink)である。適切な飲み物の非限定的な例には、果実ジュース、果実飲み物、人工的に香味付けした飲み物、人工的に甘味付けした飲み物、炭酸飲料(carbonated beverage)、スポーツ飲み物、液体乳製品、シェイク、アルコール飲料、カフェイン含有飲料、調製粉乳などが含まれる。経口投与のための他の適切な手段には、適切な溶媒、防腐剤、乳化剤、懸濁化剤、希釈剤、甘味料、着色剤、及び香味剤のうち少なくとも1つを含む、水性及び非水性の溶液、エマルジョン、懸濁物、並びに非発泡性顆粒から復元された溶液及び/又は懸濁物が含まれる。
一部の実施形態では、食品製品は、固形食糧であり得る。固形食糧の適切な例には、フードバー、スナックバー、クッキー、ブラウニー、マフィン、クラッカー、アイスクリームバー、フローズンヨーグルトバーなどが含まれるがこれらに限定されない。
他の実施形態では、本明細書で開示される組成物は、治療的食品中に取り込まれる。一部の実施形態では、治療的食品は、一部の又は全ての必須主要栄養素及び微量栄養素を含んでいてもよい、すぐに食べられる食品である。別の実施形態では、本明細書で開示される組成物は、既存の食事中にブレンドされるように設計された補助食品中に取り込まれる。一実施形態では、補助食品は、一部の又は全ての必須主要栄養素及び微量栄養素を含む。別の実施形態では、本明細書で開示される細菌組成物は、食品のタンパク質栄養を高めるために、既存の食品とブレンドされる又は既存の食品に添加される。例には、主食(穀類、塩、糖、料理用油、マーガリン)、飲料(コーヒー、茶、炭酸水、ビール、酒、スポーツ飲み物)、スナック、スイーツ及び他の食品が含まれる。
1又は2以上のプレバイオティクスを伴う又は伴わない微生物組成物は、一般に、典型的には哺乳動物対象への、経口又は胃投与のために製剤化される。特定の実施形態では、組成物は、固体、半固体、ゲル、又は液体形態として、例えば、丸剤、錠剤、カプセル、又は薬用キャンディー剤の形態で、経口投与のために製剤化される。一部の実施形態では、かかる製剤は、胃及び小腸を通じて細菌を保護するための腸溶性被覆を含む又はかかる腸溶性被覆によって被覆されるが、胞子は一般に、胃及び小腸に対して抵抗性である。他の実施形態では、1又は2以上のプレバイオティクスを伴う又は伴わない微生物組成物は、生着、又は効力を増強するために、発芽誘起物質(germinant)と共に製剤化され得る。なお他の実施形態では、細菌組成物は、生着又は効力を増強するために、プレバイオティクス物質と共に共製剤化又は共投与され得る。一部の実施形態では、細菌組成物は、生着又は効力を増強するために、プレバイオティクス物質と共に共製剤化又は共投与され得る。
本発明は、限定と解釈すべきはない以下の実施例を参照して、さらに定義される。
[実施例]
1.GTAレベルと関連する腸微生物の同定
方法:微生物16S rRNA遺伝子の微生物V4可変領域のハイスループットアンプリコン配列決定を、Illumina Miseq機器を使用して、405のヒト結腸粘膜及び糞便試料から抽出された総DNAに対して実施した。各試料からのデータを、8,700の合計配列へと希薄化(rarefy)した。操作的分類単位(OTU)を、合計へのパーセント寄与によってフィルタリングし、血清レベルに対する比較のために上位90%を選択した。35のGTAの血清GTAレベルを、フローインジェクションタンデム質量分析によって、同じ対象について決定した。次いで、GTAレベルを、OTU−レベル配列データと整列させ、その後、GTAレベルに基づいて五分位分析して、最も高いGTA五分位と最も低いGTA五分位との間で統計的に有意に異なるOTUを同定した。
結果:複数のGTAにわたる最も低い血清GTA五分位と最も高い血清GTA五分位との間でのOTUの比較により、特定の微生物、特に、ブラウティア属及びフィーカリバクテリウム・プラウスニッツィ種由来の短鎖脂肪酸産生性細菌を示すいくつかのOTUの相対的存在量における有意差(E−4未満のp)が明らかになった(表1〜34)。これらの微生物の予備的文献調査により、結腸がん、脂肪酸代謝及び炎症における役割が明らかになった。さらに、本発明者らは、最も低いGTA五分位の68%が、潰瘍性大腸炎、クローン病、及びがんを含み、25%のみが、健康な対照又は非GI関連疾患を含んだことを観察した。最も高いGTA五分位は、健康な個体又は非GI関連疾患個体から主に構成され、クローン病及びがんを有する個体は2%だけであり、潰瘍性大腸炎を有する個体は存在しなかった。これらの結果は、GI関連炎症性障害及びがんにおける、GTA及び特定の微生物の両方の関与を示唆している。本発明者らが知る限り、これは、これらのプロセスにおいてGTA代謝物をブラウティア及びフィーカリバクテリウム・プラウスニッツィと関連付ける最初の報告である。
全ての操作的分類単位(OTU;RNA配列の類似性に基づく生物の群)にわたり、GTA産生と最も高頻度で関連した(E−4未満のp)腸微生物(表1〜34に示される34全てのGTAにわたる)は、ブラウティア属(24%)、プラウスニッツィ種(19%)、バクテロイデス属(12%)、ルミノコッカス科(7%)、ラクノスピラ科(7%)に属した。残りのOTUカテゴリー及びそれらのパーセント頻度は、図3に示される。
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表28:高いGTA−574レベル及び低いGTA−574レベルに対応する腸微生物:
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2.腸微生物試料中のGTAレベルを測定する
3つのヒト、1つのイヌ及び1つのブタ糞便試料を、好気性及び嫌気性条件下で24、48、72及び96時間にわたって、ブレインハートインフュージョン(BHI,brain heart infusion)培地中でインキュベートした。細胞ペレットを、有機溶媒中での機械的溶解及び超音波処理によって抽出し、その後、タンデム質量分析によって溶媒を分析して、GTAレベルを決定した。
選択されたGTAは、ほとんどの試料において、バックグラウンドレベルを上回って検出された。例えば、GTA−445.4/383.4及びGTA 447.4/385.4は、ヒト血清試料と比較して相対的に低いレベルで検出されたが、なおもバックグラウンドレベルを上回った。GTA 449.4/405.4、463.4/419.4、465.4/403.4は全て、バックグラウンドを十分に上回るレベルで検出され、特に、分析した全ての条件にわたって、72時間の時点で、ヒト血清試料の50%に接近した。これらの結果は、図4〜9に示される。
これらの結果は、GTAが腸微生物の産物であるように見える最初の証拠を提供する。したがって、本発明は、GTA産生性微生物の組み合わせを含むプロバイオティクスを提供することによって、対象においてGTAを産生するため又は対象におけるGTAレベルを増大させるための、微生物供給源の使用を提供する。これは、工業発酵システムを使用したGTAの商業的産生、並びにGTA産生に関与する微生物株を単離、選択及び/又は強化する方法を含み得る。
1又は2以上の現在好ましい実施形態が例として記載されてきた。特許請求の範囲において定義される本発明の範囲から逸脱することなしにいくつかのバリエーション及び改変がなされ得ることは、当業者に明らかである。
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上に列挙した刊行物は各々、それらの全体が参照によって本明細書に取り込まれる。

Claims (27)

  1. 哺乳動物対象における胃管酸(GTA)産生を増加させるための方法であって、治療有効量の、ブラウティア属、フィーカリバクテリウム・プラウスニッツィ種、バクテロイデス属、ルミノコッカス科、ラクノスピラ科、コプロコッカス属、ロゼブリア属、オシロスピラ属、ルミノコッカス・ブロミ種、ルミノコッカス属、クロストリジウム科、ドレア・フォルミシゲネランス種、バクテロイデス・ユニフォルミス種、ドレア属、レンサ球菌属、クロストリジウム目、アナエロスティペス属、ディアリスター属、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス種、コリオバクテリウム科、フィーカリバクテリウム属、ステレラ属、バクテロイデス・オバツス種、パラバクテロイデス属、ルミノコッカス属、バクテロイデス・フェシス種、ユウバクテリウム・ビフォルメ種、ファスコラルクトバクテリウム属、及び腸内細菌科から選択される微生物種を含む少なくとも1つの生培養物若しくは弱毒化培養物を含む組成物;又は腸における前記微生物種の増殖及び/若しくは生存度を増加させるプレバイオティクス組成物を投与するステップを含み;前記組成物が、前記対象における少なくとも1つのGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物の合成を増加させる、前記方法。
  2. 対象における1又は2以上のGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物の循環レベルを測定するステップ、及び前記対象における前記1又は2以上のGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物の前記レベルが、所定の対照レベル、前記対象についてのより早期の試験値、又は健康な対象についての正常レベルよりも低い場合に、前記組成物を投与するステップをさらに含む、請求項1に記載の方法。
  3. 対照が、少なくとも1つのGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物についての所定の閾値を含む、請求項2に記載の方法。
  4. 組成物が、対象の胃腸管への投与に適切な薬学的に許容される担体内に、ブラウティア属由来の微生物種の生培養物若しくは弱毒化培養物、フィーカリバクテリウム・プラウスニッツィの生培養物若しくは弱毒化培養物、又はそれらの組み合わせを含む、請求項1に記載の方法。
  5. GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物が、単結合又は二重結合によって連結された、14〜18炭素長の範囲の2つのより短い鎖のダイマー性脂肪酸構造を含む炭素数28〜36のジカルボン酸脂肪酸である、請求項1に記載の方法。
  6. GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物が、GTA−446、GTA−448、GTA−450、GTA−452、GTA−464、GTA−466、GTA−468、GTA−474、GTA−476、GTA−478、GTA−484、GTA−490、GTA−492、GTA−494、GTA−502、GTA−504、GTA−512、GTA−518、GTA−520、GTA−522、GTA−524、GTA−530、GTA−532、GTA−536、GTA−538、GTA−540、GTA−550、GTA−574、GTA−576、GTA−580、GTA−590、GTA−592、GTA−594、及びGTA−596からなる群から選択される、請求項1に記載の方法。
  7. GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物が、446.3396(GTA−446)、448.3553(GTA−448)、450.3709(GTA−450)、452.3866(GTA−452)、464.3522(GTA−464)、466.3661(GTA−466)、468.3814(GTA−468)、474.3736(GTA−474)、476.3866(GTA−476)、478.4022(GTA−478)、484.3764(GTA−484)、490.3658(GTA−490)、492.3815(GTA−492)、494.3971(GTA−494)、502.4022(GTA−502)、504.4195(GTA−504)、512.4077(GTA−512)、518.3974(GTA−518)、520.4128(GTA−520)、522.4284(GTA−522)、524.4441(GTA−524)、530.4335(GTA−530)、532.4492(GTA−532)、536.4077(GTA−536)、538.4233(GTA−538)、540.4389(GTA−540)、550.4597(GTA−550)、574.4597(GTA−574)、576.4754(GTA−576)、580.5067(GTA−580)、590.4546(GTA−590)、592.4703(GTA−592)、594.4859(GTA−594)、又は596.5016(GTA−596)の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有する、請求項1に記載の方法。
  8. GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物が、C2846(GTA−446)、C2848(GTA−448)、C2850(GTA−450)、C2852(GTA−452)、464.3522(GTA−464)、466.3661(GTA−466)、C2852(GTA−468)、C3050(GTA−474)、C3052(GTA−476)、C3054(GTA−478)、C2852(GTA−484)、C3050(GTA−490)、C3052(GTA−492)、C3054(GTA−494)、C3254(GTA−502)、C3256(GTA−504)、C3056(GTA−512)、C3254(GTA−518)、C3256(GTA−520)、C3258(GTA−522)、C3260(GTA−524)、C3458(GTA−530)、C3460(GTA−532)、C3256(GTA−536)、C3258(GTA−538)、C3260(GTA−540)、C3462(GTA−550)、C3662(GTA−574)、C3664(GTA−576)、C3668(GTA−580)、C3662(GTA−590)、C3664(GTA−592)、C3666(GTA−594)、又はC3668(GTA−596)の分子式を有する、請求項1に記載の方法。
  9. GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物が、衝突誘起解離(CID)タンデム質量分析を使用して測定され、以下に列挙される前記GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物のうち1又は2以上から選択される、請求項2に記載の方法:
    446.3396の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2846の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量445の娘イオン:427、409、401、及び383を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−446、
    448.3553の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2848の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量447の娘イオン:429、411、403、及び385を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−448、
    450.3709の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2850の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量449の娘イオン:431、413、405、及び387を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−450、
    452.3866の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2852の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量451の娘イオン:433、407、及び389を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−452、
    464.3522の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2848の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量463の娘イオン:445、419、401、及び383を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−464、
    466.3661の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C2850の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量465の娘イオン:447、421、及び403を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−466、
    468.3814の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C2852の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量467の娘イオン:449、423、及び405を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−468、
    474.3736の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3050の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量473の娘イオン:455、429、及び411を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−474、
    476.3866の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3052の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量475の娘イオン:457、431、439及び413を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−476、
    478.4022の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3054の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量477の娘イオン:459、433、441及び415を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−478、
    484.3764の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C2852の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量483の娘イオン:465、315、439 483、421、及び447を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−484、
    490.3658の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3050の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量489の娘イオン:445、471、427及び319を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−490、
    492.3815の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3052の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量491の娘イオン:241、249、267、473、及び447を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−492、
    494.3971の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3054の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量493の娘イオン:475、215、及び449を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−494、
    502.4022の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3254の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量501の娘イオン:483、457、465及び439を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−502、
    504.4195の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3256の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量503の娘イオン:485、459、467及び441を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−504、
    512.4077の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3056の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量511の娘イオン:493、315、及び467を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−512、
    518.3974の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3254の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量517の娘イオン:499、473、499、481及び445を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−518、
    520.4128の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3256の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量519の娘イオン:501、457、475、459、447及び483を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−520、
    522.4284の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3258の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量521の娘イオン:503、459、477、504、441及び485を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−522、
    524.4441の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3260の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量523の娘イオン:505、461、479、506、443及び487を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−524、
    530.4335の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3458の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量529の娘イオン:467、511及び485を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−530、
    532.4492の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3460の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量531の娘イオン:513、469、487及び495を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−532、
    536.4077の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3256の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量535の娘イオン:473を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−536、
    538.4233の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3258の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量537の娘イオン:519、475、493、501及び457を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−538、
    540.4389の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3260の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量539の娘イオン:315、521、495及び477を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−540、
    550.4597の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3462の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量549の娘イオン:487、531、251、253、513、469及び506を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−550、
    574.4597の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3662の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量573の娘イオン:295、223、555及び511を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−574、
    576.4754の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3664の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量575の娘イオン:277、297、557、513及び495を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−576、
    580.5067の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3668の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量579の娘イオン:561、543、535、517及び499を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−580、
    590.4546の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3662の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量589の娘イオン:545を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−590、
    592.4703の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3664の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量591の娘イオン:555及び113を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−592、
    594.4859の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3666の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量593の娘イオン:557 371、315及び277を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−594、並びに
    596.5016の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3668の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量595の娘イオン:279、315、297、577及び559を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−596。
  10. GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物が、式C2846及び構造:
    Figure 2021521203

    を有するGTA−446である、請求項1に記載の方法。
  11. 1又は2以上のGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物の循環レベルを測定することによって、身体内の胃腸炎症状態を決定するための方法であって、前記GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物が、単結合又は二重結合によって連結された、14〜18炭素長の範囲の2つのより短い鎖のダイマー性脂肪酸構造を含む炭素数28〜36のジカルボン酸脂肪酸であり、
    前記対象における前記GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物のうち1又は2以上のレベルが、所定の対照レベル、前記対象についてのより早期の試験値、又は健康な対象についての正常レベルよりも低い場合に、前記対象が、胃腸炎症を有する又は胃腸炎症のリスクがあると評価される、前記方法。
  12. GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物が、GTA−446、GTA−448、GTA−450、GTA−452、GTA−464、GTA−466、GTA−468、GTA−474、GTA−476、GTA−478、GTA−484、GTA−490、GTA−492、GTA−494、GTA−502、GTA−504、GTA−512、GTA−518、GTA−520、GTA−522、GTA−524、GTA−530、GTA−532、GTA−536、GTA−538、GTA−540、GTA−550、GTA−574、GTA−576、GTA−580、GTA−590、GTA−592、GTA−594、及びGTA−596からなる群から選択される、請求項11に記載の方法。
  13. GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物が、446.3396(GTA−446)、448.3553(GTA−448)、450.3709(GTA−450)、452.3866(GTA−452)、464.3522(GTA−464)、466.3661(GTA−466)、468.3814(GTA−468)、474.3736(GTA−474)、476.3866 GTA−476、478.4022(GTA−478)、484.3764(GTA−484)、490.3658(GTA−490)、492.3815(GTA−492)、494.3971(GTA−494)、502.4022(GTA−502)、504.4195(GTA−504)、512.4077(GTA−512)、518.3974(GTA−518)、520.4128(GTA−520)、522.4284(GTA−522)、524.4441(GTA−524)、530.4335(GTA−530)、532.4492(GTA−532)、536.4077(GTA−536)、538.4233(GTA−538)、540.4389(GTA−540)、550.4597(GTA−550)、574.4597(GTA−574)、576.4754(GTA−576)、580.5067(GTA−580)、590.4546(GTA−590)、592.4703(GTA−592)、594.4859(GTA−594)、又は596.5016(GTA−596)の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有する、請求項12に記載の方法。
  14. GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物が、C2846(GTA−446)、C2848(GTA−448)、C2850(GTA−450)、C2852(GTA−452)、464.3522(GTA−464)、466.3661(GTA−466)、C2852(GTA−468)、C3050(GTA−474)、C3052(GTA−476)、C3054(GTA−478)、C2852(GTA−484)、C3050(GTA−490)、C3052(GTA−492)、C3054(GTA−494)、C3254(GTA−502)、C3256(GTA−504)、C3056(GTA−512)、C3254(GTA−518)、C3256(GTA−520)、C3258(GTA−522)、C3260(GTA−524、C3458(GTA−530)、C3460(GTA−532)、C3256(GTA−536)、C3258(GTA−538)、C3260(GTA−540)、C3462(GTA−550)、C3662(GTA−574)、C3664(GTA−576)、C3668(GTA−580)、C3662(GTA−590)、C3664(GTA−592)、C3666(GTA−594)、又はC3668(GTA−596)の分子式を有する、請求項12に記載の方法。
  15. GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物が、衝突誘起解離(CID)タンデム質量分析を使用して測定され、以下に列挙される前記GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物のうち1又は2以上から選択される、請求項11に記載の方法:
    446.3396の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2846の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量445の娘イオン:427、409、401、及び383を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−446、
    448.3553の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2848の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量447の娘イオン:429、411、403、及び385を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−448、
    450.3709の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2850の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量449の娘イオン:431、413、405、及び387を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−450、
    452.3866の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2852の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量451の娘イオン:433、407、及び389を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−452、
    464.3522の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2848の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量463の娘イオン:445、419、401、及び383を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−464、
    466.3661の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2850の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量465の娘イオン:447、421、及び403を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−466、
    468.3814の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C2852の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量467の娘イオン:449、423、及び405を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−468、
    474.3736の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3050の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量473の娘イオン:455、429、及び411を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−474、
    476.3866の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3052の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量475の娘イオン:457、431、439及び413を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−476、
    478.4022の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3054の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量477の娘イオン:459、433、441及び415を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−478、
    484.3764の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C2852の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量483の娘イオン:465、315、439 483、421、及び447を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−484、
    490.3658の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3050の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量489の娘イオン:445、471、427及び319を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−490、
    492.3815の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3052の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量491の娘イオン:241、249、267、473、及び447を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−492、
    494.3971の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3054の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量493の娘イオン:475、215、及び449を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−494、
    502.4022の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3254の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量501の娘イオン:483、457、465及び439を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−502、
    504.4195の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3256の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量503の娘イオン:485、459、467及び441を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−504、
    512.4077の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3056の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量511の娘イオン:493、315、及び467を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−512、
    518.3974の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3254の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量517の娘イオン:499、473、499、481及び445を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−518、
    520.4128の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3256の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量519の娘イオン:501、457、475、459、447及び483を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−520、
    522.4284の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3258の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量521の娘イオン:503、459、477、504、441及び485を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−522、
    524.4441の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3260の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量523の娘イオン:505、461、479、506、443及び487を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−524、
    530.4335の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3458の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量529の娘イオン:467、511及び485を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−530、
    532.4492の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3460の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量531の娘イオン:513、469、487及び495を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−532、
    536.4077の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3256の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量535の娘イオン:473を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−536、
    538.4233の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3258の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量537の娘イオン:519、475、493、501及び457を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−538、
    540.4389の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3260の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量539の娘イオン:315、521、495及び477を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−540、
    550.4597の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3462の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量549の娘イオン:487、531、251、253、513、469及び506を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−550、
    574.4597の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3662の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量573の娘イオン:295、223、555及び511を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−574、
    576.4754の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3664の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量575の娘イオン:277、297、557、513及び495を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−576、
    580.5067の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3668の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量579の娘イオン:561、543、535、517及び499を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−580、
    590.4546の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3662の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量589の娘イオン:545を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−590、
    592.4703の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3664の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量591の娘イオン:555及び113を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−592、
    594.4859の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3666の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量593の娘イオン:557 371、315及び277を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−594、並びに
    596.5016の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3668の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量595の娘イオン:279、315、297、577及び559を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−596。
  16. GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物が、式C2846及び構造:
    Figure 2021521203
    を有するGTA−446である、請求項11に記載の方法。
  17. 哺乳動物対象における胃管酸(GTA)不全を検出及び治療するためのキットであって、
    前記哺乳動物対象から血液試料を収集するための血液検体収集デバイス、
    前記血液試料中の1又は2以上のGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物のレベルを試験するために、前記血液試料を中央処理施設に提出するための包装及び使用説明書であって、前記GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物が、単結合又は二重結合によって連結された、炭素数14〜18の範囲の2つのより短い鎖のダイマー性脂肪酸構造を含む炭素数28〜36のジカルボン酸脂肪酸である、包装及び使用説明書;並びに
    前記中央処理施設から前記血液試料の試験結果を取得するための使用説明書であって、低いGTAレベルの検出を含む陽性試験結果の場合に、GTA増大性抗炎症性プレバイオティクス、プロバイオティクス、又は合成GTA製品が提供される使用説明書
    を含むキット。
  18. GTA増大性抗炎症性プレバイオティクス、プロバイオティクス、又は合成GTA製品が、ブラウティア属、フィーカリバクテリウム・プラウスニッツィ種、バクテロイデス属、ルミノコッカス科、ラクノスピラ科、コプロコッカス属、ロゼブリア属、オシロスピラ属、ルミノコッカス・ブロミ種、ルミノコッカス属、クロストリジウム科、ドレア・フォルミシゲネランス種、バクテロイデス・ユニフォルミス種、ドレア属、レンサ球菌属、クロストリジウム目、アナエロスティペス属、ディアリスター属、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス種、コリオバクテリウム科、フィーカリバクテリウム属、ステレラ属、バクテロイデス・オバツス種、パラバクテロイデス属、ルミノコッカス属、バクテロイデス・フェシス種、ユウバクテリウム・ビフォルメ種、ファスコラルクトバクテリウム属、及び腸内細菌科から選択される微生物種を含む少なくとも1つの生培養物若しくは弱毒化培養物を含む組成物;又は腸における前記微生物種の増殖及び/若しくは生存度を増加させるプレバイオティクス組成物であり;前記組成物が、前記対象における少なくとも1つのGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物の合成を増加させる、請求項17に記載のキット。
  19. 対象における1又は2以上のGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物のレベルが、所定の対照レベル、前記対象についてのより早期の試験値、又は健康な対象についての正常レベルよりも低い場合に、組成物が提供される、請求項17に記載のキット。
  20. 対照が、少なくとも1つのGTAジカルボン酸脂肪酸代謝物についての所定の閾値を含む、請求項19に記載のキット。
  21. 組成物が、対象の胃腸管への投与に適切な薬学的に許容される担体内に、ブラウティア属由来の微生物種の生培養物若しくは弱毒化培養物、フィーカリバクテリウム・プラウスニッツィの生培養物若しくは弱毒化培養物、又はそれらの組み合わせを含む、請求項17に記載のキット。
  22. GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物が、GTA−446、GTA−448、GTA−450、GTA−452、GTA−464、GTA−466、GTA−468、GTA−474、GTA−476、GTA−478、GTA−484、GTA−490、GTA−492、GTA−494、GTA−502、GTA−504、GTA−512、GTA−518、GTA−520、GTA−522、GTA−524、GTA−530、GTA−532、GTA−536、GTA−538、GTA−540、GTA−550、GTA−574、GTA−576、GTA−580、GTA−590、GTA−592、GTA−594、及びGTA−596からなる群から選択される、請求項17に記載のキット。
  23. GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物が、446.3396(GTA−446)、448.3553(GTA−448)、450.3709(GTA−450)、452.3866(GTA−452)、464.3522(GTA−464)、466.3661(GTA−466)、468.3814(GTA−468)、474.3736(GTA−474)、476.3866(GTA−476)、478.4022(GTA−478)、484.3764(GTA−484)、490.3658(GTA−490)、492.3815(GTA−492)、494.3971(GTA−494)、502.4022(GTA−502)、504.4195(GTA−504)、512.4077(GTA−512)、518.3974(GTA−518)、520.4128(GTA−520)、522.4284(GTA−522)、524.4441(GTA−524)、530.4335(GTA−530)、532.4492(GTA−532)、536.4077(GTA−536)、538.4233(GTA−538)、540.4389(GTA−540)、550.4597(GTA−550)、574.4597(GTA−574)、576.4754(GTA−576)、580.5067(GTA−580)、590.4546(GTA−590)、592.4703(GTA−592)、594.4859(GTA−594)、又は596.5016(GTA−596)の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有する、請求項22に記載のキット。
  24. GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物が、C2846(GTA−446)、C2848(GTA−448)、C2850(GTA−450)、C2852(GTA−452)、464.3522(GTA−464)、466.3661(GTA−466)、C2852(GTA−468)、C3050(GTA−474)、C3052O(GTA−476)、C3054(GTA−478)、C2852(GTA−484)、C3050(GTA−490)、C3052(GTA−492)、C3054(GTA−494)、C3254(GTA−502)、C3256(GTA−504)、C3056(GTA−512)、C3254(GTA−518)、C3256(GTA−520)、C3258(GTA−522)、C3260(GTA−524)、C3458(GTA−530)、C3460(GTA−532)、C3256(GTA−536)、C3258(GTA−538)、C3260(GTA−540)、C3462(GTA−550)、C3662(GTA−574)、C3664(GTA−576)、C3668(GTA−580)、C3662(GTA−590)、C3664(GTA−592)、C3666(GTA−594)、又はC3668(GTA−596)の分子式を有する、請求項22に記載のキット。
  25. GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物が、衝突誘起解離(CID)タンデム質量分析を使用して測定され、以下に列挙される前記GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物のうち1又は2以上から選択される、請求項17に記載のキット:
    446.3396の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2846の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量445の娘イオン:427、409、401、及び383を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−446、
    448.3553の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2848の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量447の娘イオン:429、411、403、及び385を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−448、
    450.3709の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2850の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量449の娘イオン:431、413、405、及び387を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−450、
    452.3866の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2852の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量451の娘イオン:433、407、及び389を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−452、
    464.3522の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2848の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量463の娘イオン:445、419、401、及び383を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−464、
    466.3661の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量、C2850の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量465の娘イオン:447、421、及び403を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−466、
    468.3814の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C2852の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量467の娘イオン:449、423、及び405を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−468、
    474.3736の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3050の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量473の娘イオン:455、429、及び411を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−474、
    476.3866の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3052の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量475の娘イオン:457、431、439及び413を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−476、
    478.4022の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3054の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量477の娘イオン:459、433、441及び415を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−478、
    484.3764の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C2852の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量483の娘イオン:465、315、439 483、421、及び447を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−484、
    490.3658の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3050の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量489の娘イオン:445、471、427及び319を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−490、
    492.3815の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3052の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量491の娘イオン:241、249、267、473、及び447を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−492、
    494.3971の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3054の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量493の娘イオン:475、215、及び449を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−494、
    502.4022の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3254の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量501の娘イオン:483、457、465及び439を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−502、
    504.4195の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3256の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量503の娘イオン:485、459、467及び441を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−504、
    512.4077の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3056の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量511の娘イオン:493、315、及び467を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−512、
    518.3974の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3254の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量517の娘イオン:499、473、499、481及び445を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−518、
    520.4128の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3256の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量519の娘イオン:501、457、475、459、447及び483を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−520、
    522.4284の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3258の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量521の娘イオン:503、459、477、504、441及び485を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−522、
    524.4441の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3260の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量523の娘イオン:505、461、479、506、443及び487を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−524、
    530.4335の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3458の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量529の娘イオン:467、511及び485を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−530、
    532.4492の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3460の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量531の娘イオン:513、469、487及び495を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−532、
    536.4077の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3256の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量535の娘イオン:473を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−536、
    538.4233の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3258の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量537の娘イオン:519、475、493、501及び457を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−538、
    540.4389の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3260の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量539の娘イオン:315、521、495及び477を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−540、
    550.4597の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3462の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量549の娘イオン:487、531、251、253、513、469及び506を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−550、
    574.4597の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3662の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量573の娘イオン:295、223、555及び511を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−574、
    576.4754の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3664の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量575の娘イオン:277、297、557、513及び495を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−576、
    580.5067の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3668の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量579の娘イオン:561、543、535、517及び499を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−580、
    590.4546の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3662の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量589の娘イオン:545を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−590、
    592.4703の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3664の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量591の娘イオン:555及び113を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−592、
    594.4859の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3666の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量593の娘イオン:557 371、315及び277を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−594、並びに
    596.5016の1PPMのダルトン質量精度以内の正確な中性質量を有し、C3668の分子式を有し、Nを衝突ガスとして使用し、負イオン化の下での大気圧化学イオン化(APCI)において分析した、親[M−H]質量595の娘イオン:279、315、297、577及び559を含むCID MS/MSフラグメンテーションパターンを特徴とする、GTA−596。
  26. GTAジカルボン酸脂肪酸代謝物が、式C2846及び構造:
    Figure 2021521203
    を有するGTA−446である、請求項17に記載のキット。
  27. 胃管酸(GTA)不全が、胃腸(GI)炎症状態の指標である、請求項17に記載のキット。
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