JP2021075483A - 化合物又はその塩 - Google Patents

Abstract

【課題】生体内の活性酸素種を感度よく検出することができる化合物を提供する。【解決手段】下記一般式（１）で表される化合物又はその塩。［一般式（１）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、水素原子、置換基を有していてもよいアルキル基等を、Ｒ１及びＲ２とＲ３及びＲ４は、互いに結合して環を形成していてもよい。Ｒ１及び／又はＲ２は、−ＮＲ１Ｒ２が結合する６員環と結合して環を形成していてもよい。Ｒ３及び／又はＲ４は、−ＮＲ３Ｒ４が結合する６員環と結合して環を形成していてもよい。Ｒ５は、−１１ＣＨ３、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキル基等を示す。Ｒ６は、−Ｆ、−１８Ｆ等を示す。Ｘ、Ｙ及びＺは、それぞれ独立に、炭素原子、酸素原子等を示す。ｎは、０又は１である。〕【選択図】なし

Description

本発明は、活性酸素種のイメージング用途に適した化合物又はその塩に関する。

生体内に取り込まれた酸素は、代謝系によりエネルギー産生のために消費されるが、数％はスーパーオキシドアニオン、ヒドロキシラジカル、過酸化水素等の活性酸素種（ＲＯＳ）に変化している。ＲＯＳの主な産生源としてミトコンドリアの電子伝達系が挙げられる。生体内で発生したＲＯＳは、通常スーパーオキシドディスムターゼ、カタラーゼといった酵素により水に変換され無毒化される。一方、ＲＯＳの発生が増加すると、タンパク質の変性、脂質の酸化、ＤＮＡ損傷を誘導し得る。

生体内のＲＯＳを検出するプローブとして、例えば、特許文献１には、哺乳動物組織におけるＲＯＳ分布をポジトロン断層法（ＰＥＴ）でイメージングするのに適した化合物が開示されている。

国際公開第２０１１／０８４５８５号

パーキンソン病、アルツハイマー病等の多くの神経変性疾患による神経細胞障害は、ミトコンドリア機能障害によって発生するＲＯＳが原因と考えられており、ＲＯＳの発生はこれらの疾患の発症よりも早い段階で引き起こっていると考えられる。アミロイドβタンパク質、リン酸化タウタンパク質等の異常タンパク質の集積を計測できるＰＥＴプローブがアルツハイマー病診断に使われているが、これらの異常タンパク質の脳内蓄積は必ずしも症状を反映しておらず、またこれらの異常タンパク質を抗体で除去しても症状は改善しないため、治療を考慮した場合は異常タンパク質の集積を計測する方法では、遅すぎることが明らかになっている。そこで、神経細胞障害の初期に発生するＲＯＳを計測できる活性酸素種イメージング剤（例えば、ＰＥＴプローブ等）が開発できれば、より早期に正確に診断及び治療に貢献できることが期待される。

本発明は、生体内の活性酸素種（ＲＯＳ）を感度よく検出することができる化合物又はその塩を提供することを目的とする。

本発明の第１の態様は、下記一般式（１）で表される化合物又はその塩に関する。

［一般式（１）中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３及びＲ^４は、それぞれ独立に、水素原子、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルケニル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキニル基、置換基を有していてもよいシクロアルキル基、置換基を有していてもよい芳香族炭化水素基、又は置換基を有していてもよい複素環基を示す。Ｒ^１及びＲ^２は、互いに結合して環を形成していてもよい。Ｒ^３及びＲ^４は、互いに結合して環を形成していてもよい。Ｒ^１及び／又はＲ^２は、−ＮＲ^１Ｒ^２が結合する６員環と結合して環を形成していてもよい。Ｒ^３及び／又はＲ^４は、−ＮＲ^３Ｒ^４が結合する６員環と結合して環を形成していてもよい。Ｒ^５は、−^１１ＣＨ_３、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルケニル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキニル基、置換基を有していてもよいシクロアルキル基、置換基を有していてもよい芳香族炭化水素基、又は置換基を有していてもよい複素環基を示す。Ｒ^６は、−Ｆ、−ＣＨ_３、−^１８Ｆ又は−^１１ＣＨ_３を示す。Ｘ、Ｙ及びＺは、それぞれ独立に、炭素原子、酸素原子、硫黄原子又は窒素原子を示す。ｎは、０又は１である。〕

第１の態様に係る化合物又はその塩は、生体内の活性酸素種（ＲＯＳ）を感度よく検出することができる。

本発明の第２の態様は、一般式（１）において、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３及びＲ^４が同時に水素原子ではない化合物又はその塩に関する。第２の態様の化合物又はその塩は、Ｒ^１及びＲ^３が水素原子ではないものがより好ましい。

生体内に投与した化合物は、ＤＮＡへインターカレーションする場合がある。化合物がＤＮＡへインターカレーションした場合、変異原性（遺伝情報に不可逆的な変化を引き起こす性質）を示すおそれがある。本発明の第２の態様に係る化合物又はその塩は、生体内のＲＯＳを感度よく検出するという課題と共に、このＤＮＡへのインターカレーションに関する課題を解決できるものである。すなわち、本発明の第２の態様に係る化合物又はその塩は、ＤＮＡへのインターカレーションが生じにくいものであり、生体内のＲＯＳを感度よく検出することができると共に、生体への安全性により優れる。

本発明はまた、上述した本発明に係る化合物又はその塩を有効成分として含有する、活性酸素種イメージング剤にも関する。

本発明は更に、下記一般式（２）で表される化合物又はその塩にも関する。

［一般式（２）中、Ｑ^１、Ｑ^２、Ｑ^３及びＱ^４は、それぞれ独立に、水素原子、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルケニル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキニル基、置換基を有していてもよいシクロアルキル基、置換基を有していてもよい芳香族炭化水素基、又は置換基を有していてもよい複素環基を示す。Ｑ^１及びＱ^２は、互いに結合して環を形成していてもよい。Ｑ^３及びＱ^４は、互いに結合して環を形成していてもよい。Ｑ^１及び／又はＱ^２は、−ＮＱ^１Ｑ^２が結合する６員環と結合して環を形成していてもよい。Ｑ^３及び／又はＱ^４は、−ＮＱ^３Ｑ^４が結合する６員環と結合して環を形成していてもよい。Ｑ^５は、−^１１ＣＨ_３、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルケニル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキニル基、置換基を有していてもよいシクロアルキル基、置換基を有していてもよい芳香族炭化水素基、又は置換基を有していてもよい複素環基を示す。Ｑ^６は、ボロン酸基、ボロン酸エステル基、トリフルオロボレート塩基又はトリオールボレート塩基を示す。Ｘ、Ｙ及びＺは、それぞれ独立に、炭素原子、酸素原子、硫黄原子又は窒素原子を示す。ｎは、０又は１である。〕

一般式（２）で表される化合物又はその塩は、一般式（１）で表される化合物又はその塩を製造する際の前駆体化合物として有用である。

本発明によれば、生体内の活性酸素種（ＲＯＳ）を感度よく検出することができる化合物又はその塩の提供が可能となる。

［^１８Ｆ］ＦＨＭ又は［^１１Ｃ］ＨＭを投与したＳＮＰモデルラットの脳のＣＴ画像にＰＥＴ集積画像を重ね合わせた画像である。 ［^１８Ｆ］ＦＨＭ又は［^１１Ｃ］ＨＭを投与したラット（ＳＮＰモデルラット、及びコントロールラット）の右線条体及び左線条体への［^１８Ｆ］ＦＨＭ又は［^１１Ｃ］ＨＭの集積量（放射能集積量（ＳＵＶ））を測定した結果を示すグラフである。 ［^１８Ｆ］ＦＨＭ又は［^１８Ｆ］ＦＰＨＭを投与したＳＮＰモデルラットの脳のＣＴ画像にＰＥＴ集積画像を重ね合わせた画像（図３（Ａ）及び（Ｂ））、並びに右線条体及び左線条体への［^１８Ｆ］ＦＨＭ又は［^１１Ｃ］ＨＭの集積量（放射能集積量（ＳＵＶ））を測定した結果を示すグラフ（図３（Ｃ）〜（Ｅ））である。 試験例４において、各種化合物と各種濃度のＤＮＡとを混合して蛍光強度を測定した結果を表すグラフである。 式（Ａ２３）で表される化合物又はジヒドロエチジン（ＤＨＥ）を投与したラット（ＳＮＰモデルラット、及びコントロールラット）の脳の蛍光画像である。

以下、本発明を実施するための形態について詳細に説明する。ただし、本発明は以下の実施形態に限定されるものではない。

〔化合物又はその塩〕
本実施形態に係る化合物は、下記一般式（１）で表される。

一般式（１）中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３及びＲ^４は、それぞれ独立に、水素原子、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルケニル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキニル基、置換基を有していてもよいシクロアルキル基、置換基を有していてもよい芳香族炭化水素基、又は置換基を有していてもよい複素環基を示す。

一般式（１）中、Ｒ^５は、−^１１ＣＨ_３、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルケニル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキニル基、置換基を有していてもよいシクロアルキル基、置換基を有していてもよい芳香族炭化水素基、又は置換基を有していてもよい複素環基を示す。

一般式（１）中、Ｒ^６は、−Ｆ、−ＣＨ_３、−^１８Ｆ又は−^１１ＣＨ_３を示す。Ｒ^６は、生体内の活性酸素種の検出感度がより高くなることから、−Ｆ又は−^１８Ｆであることが好ましい。

一般式（１）中、Ｘ、Ｙ及びＺは、それぞれ独立に、炭素原子、酸素原子、硫黄原子又は窒素原子を示す。

一般式（１）中、ｎは、０又は１である。

Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４及びＲ^５における直鎖状又は分岐状のアルキル基としては、例えば、炭素原子数１〜２０の直鎖状又は分岐状のアルキル基であってよく、炭素原子数１〜１２の直鎖状又は分岐状のアルキル基であってよく、炭素原子数１〜６の直鎖状又は分岐状のアルキル基であってよい。

Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４及びＲ^５における直鎖状又は分岐状のアルキル基の具体例としては、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、２−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、２−メチルプロピル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、１−メチルブチル基、１−エチルプロピル基、１，１−ジメチルプロピル基、１，２−ジメチルプロピル基、ｎ−ヘキシル基、１−メチルペンチル基、２−メチルペンチル基、３−メチルペンチル基、４−メチルペンチル基、１−エチルブチル基、２−エチルブチル基、１，１−ジメチルブチル基、１，２−ジメチルブチル基、１，３−ジメチルブチル基、１，４−ジメチルブチル基、２，２−ジメチルブチル基、２，３−ジメチルブチル基、３，３−ジメチルブチル基、１−エチル−２−メチル−プロピル基、１，１，２−トリメチルプロピル基、ｎ−ヘプチル基、２−メチルヘキシル基、ｎ−オクチル基、イソオクチル基、ｔｅｒｔ−オクチル基、２−エチルヘキシル基、３−メチルヘプチル基、ｎ−ノニル基、イソノニル基、１−メチルオクチル基、２−エチルヘプチル基、ｎ−デシル基、１−メチルノニル基、ｎ−ウンデシル基、１，１−ジメチルノニル基、ｎ−ドデシル基、ｎ−テトラデシル基、ｎ−ヘプタデシル基、ｎ−オクタデシル基が挙げられる。

Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４及びＲ^５における直鎖状又は分岐状のアルケニル基としては、例えば、炭素原子数２〜２０の直鎖状又は分岐状のアルケニル基であってよく、炭素原子数２〜１２の直鎖状又は分岐状のアルケニル基であってよく、炭素原子数２〜６の直鎖状又は分岐状のアルケニル基であってよい。

Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４及びＲ^５における直鎖状又は分岐状のアルケニル基の具体例としては、例えば、ビニル基、１−プロペニル基、２−プロペニル基、２−ブテニル基、３−ブテニル基、３−ペンテニル基、４−ペンテニル基、１−ヘキセニル基、５−ヘキセニル基、７−オクテニル基が挙げられる。

Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４及びＲ^５における直鎖状又は分岐状のアルキニル基としては、例えば、炭素原子数２〜２０の直鎖状又は分岐状のアルキニル基であってよく、炭素原子数２〜１２の直鎖状又は分岐状のアルキニル基であってよく、炭素原子数２〜６の直鎖状又は分岐状のアルキニル基であってよい。

Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４及びＲ^５における直鎖状又は分岐状のアルキニル基の具体例としては、例えば、エチニル基、１−プロピニル基、２−プロピニル基、２−ブチニル基、３−ブチニル基、３−ペンチニル基、４−ペンチニル基、１−ヘキシニル基、５−ヘキシニル基が挙げられる。

Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４及びＲ^５におけるシクロアルキル基としては、例えば、炭素原子数３〜２０のシクロアルキル基であってよく、炭素原子数４〜１０のシクロアルキル基であってよい。

Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４及びＲ^５におけるシクロアルキル基の具体例としては、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、シクロオクチル基、シクロデシル基、シクロドデシル基が挙げられる。

Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４及びＲ^５における芳香族炭化水素基は、単環式又は多環式の芳香族炭化水素から環を構成する炭素原子に結合する水素原子を１個除いた基を意味する。Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４及びＲ^５における芳香族炭化水素基としては、例えば、炭素原子数６〜６０の芳香族炭化水素基であってよく、炭素原子数６〜３０の芳香族炭化水素基であってよく、炭素原子数６〜１８の芳香族炭化水素基であってよい。

Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４及びＲ^５における芳香族炭化水素基の具体例としては、フェニル基、ナフチル基、ビフェニル基、アントリル基、フェナントリル基、ピレニル基、トリフェニレニル基、インデニル基、フルオレニル基が挙げられる。

Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４及びＲ^５における複素環基は、複素環式化合物から環を構成する炭素原子又はヘテロ原子に結合する水素原子を１個除いた基を意味する。Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４及びＲ^５における複素環基としては、例えば、環構成原子（環を構成する炭素原子及びヘテロ原子）数３〜３０の複素環基であってよく、環構成原子数４〜２０の複素環基であってよく、環構成原子数５〜１０の複素環基であってよい。

Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４及びＲ^５における複素環基の具体例としては、ピリジル基、ピリミジニル基、トリアジニル基、ピロリル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、トリアゾリル基、キノリル基、イソキノリル基、ナフチリジニル基、インドリル基、ベンゾイミダゾリル基、カルバゾニル基、カルボリニル基、アクリジニル基、フェナントロリニル基、ヒダントイン基、フラニル基、ベンゾフラニル基、ジベンゾフラニル基、チエニル基、ベンゾチエニル基、ジベンゾチエニル基、オキサゾリル基、ベンゾオキサゾリル基、チアゾリル基、ベンゾチアゾリル基が挙げられる。

上述した直鎖状若しくは分岐状のアルキル基、直鎖状若しくは分岐状のアルケニル基、直鎖状若しくは分岐状のアルキニル基、シクロアルキル基、芳香族炭化水素基及び複素環基は、置換基を有していてもよい。

置換基としては、例えば、フッ素原子、塩素原子、臭素原子及びヨウ素原子等のハロゲン原子、アジ基、スルホ基、ニトロ基、ニトロソ基、シアノ基、水酸基、カルボキシ基、チオール基、無置換アミノ基、炭素原子数１〜２０の直鎖状又は分岐状のアルキル基、炭素原子数２〜２０の直鎖状又は分岐状のアルケニル基、炭素原子数２〜２０の直鎖状又は分岐状のアルキニル基、炭素原子数３〜２０のシクロアルキル基、炭素原子数６〜６０の芳香族炭化水素基、環構成原子数３〜３０の複素環基が挙げられる。

置換基における炭素原子数１〜２０の直鎖状又は分岐状のアルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、２−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、２−メチルプロピル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、１−メチルブチル基、１−エチルプロピル基、１，１−ジメチルプロピル基、１，２−ジメチルプロピル基、ｎ−ヘキシル基、１−メチルペンチル基、２−メチルペンチル基、３−メチルペンチル基、４−メチルペンチル基、１−エチルブチル基、２−エチルブチル基、１，１−ジメチルブチル基、１，２−ジメチルブチル基、１，３−ジメチルブチル基、１，４−ジメチルブチル基、２，２−ジメチルブチル基、２，３−ジメチルブチル基、３，３−ジメチルブチル基、１−エチル−２−メチル−プロピル基、１，１，２−トリメチルプロピル基、ｎ−ヘプチル基、２−メチルヘキシル基、ｎ−オクチル基、イソオクチル基、ｔｅｒｔ−オクチル基、２−エチルヘキシル基、３−メチルヘプチル基、ｎ−ノニル基、イソノニル基、１−メチルオクチル基、２−エチルヘプチル基、ｎ−デシル基、１−メチルノニル基、ｎ−ウンデシル基、１，１−ジメチルノニル基、ｎ−ドデシル基、ｎ−テトラデシル基、ｎ−ヘプタデシル基、ｎ−オクタデシル基等が挙げられる。

置換基における炭素原子数２〜２０の直鎖状又は分岐状のアルケニル基としては、例えば、ビニル基、１−プロペニル基、２−プロペニル基、２−ブテニル基、３−ブテニル基、３−ペンテニル基、４−ペンテニル基、１−ヘキセニル基、５−ヘキセニル基、７−オクテニル基が挙げられる。

置換基における炭素原子数２〜２０の直鎖状又は分岐状のアルキニル基としては、例えば、エチニル基、１−プロピニル基、２−プロピニル基、２−ブチニル基、３−ブチニル基、３−ペンチニル基、４−ペンチニル基、１−ヘキシニル基、５−ヘキシニル基が挙げられる。

置換基における炭素原子数３〜２０のシクロアルキル基としては、例えば、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、シクロオクチル基、シクロデシル基、シクロドデシル基が挙げられる。

置換基における炭素原子数６〜６０の芳香族炭化水素基としては、例えば、フェニル基、ナフチル基、ビフェニル基、アントリル基、フェナントリル基、ピレニル基、トリフェニレニル基、インデニル基、フルオレニル基が挙げられる。

置換基における環構成原子数３〜３０の複素環基としては、例えば、ピリジル基、ピリミジニル基、トリアジニル基、ピロリル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、トリアゾリル基、キノリル基、イソキノリル基、ナフチリジニル基、インドリル基、ベンゾイミダゾリル基、カルバゾニル基、カルボリニル基、アクリジニル基、フェナントロリニル基、ヒダントイン基、フラニル基、ベンゾフラニル基、ジベンゾフラニル基、チエニル基、ベンゾチエニル基、ジベンゾチエニル基、オキサゾリル基、ベンゾオキサゾリル基、チアゾリル基、ベンゾチアゾリル基が挙げられる。

これらの置換基は、１つのみ含まれてもよく、複数含まれてもよく、複数含まれる場合は互いに同一でも異なっていてもよい。また、これら置換基は上で例示した置換基を有していてもよく、さらに、これらの置換基同士が単結合、置換若しくは無置換のメチレン基、酸素原子又は硫黄原子を介して互いに結合して環を形成していてもよい。

一般式（１）中、Ｒ^１及びＲ^２は、互いに結合して環を形成していてもよい。同様に、一般式（１）中、Ｒ^３及びＲ^４は、互いに結合して環を形成していてもよい。また、一般式（１）中、Ｒ^１及び／又はＲ^２は、−ＮＲ^１Ｒ^２が結合する６員環と結合して環を形成していてもよい。同様に、一般式（１）中、Ｒ^３及び／又はＲ^４は、−ＮＲ^３Ｒ^４が結合する６員環と結合して環を形成していてもよい。

一般式（１）で表される化合物は、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３及びＲ^４が同時に水素原子ではないことが好ましく、Ｒ^１及びＲ^３が水素原子ではないことがより好ましい。すなわち、一般式（１）で表される化合物は、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３及びＲ^４の少なくとも一つが、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルケニル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキニル基、置換基を有していてもよいシクロアルキル基、置換基を有していてもよい芳香族炭化水素基、又は置換基を有していてもよい複素環基であることが好ましく、Ｒ^１及びＲ^３が、それぞれ独立に、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルケニル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキニル基、置換基を有していてもよいシクロアルキル基、置換基を有していてもよい芳香族炭化水素基、又は置換基を有していてもよい複素環基であることがより好ましい。この構成を採用した化合物は、ＤＮＡへのインターカレーションが生じにくくなる。化合物のＤＮＡへのインターカレーションが生じると、当該化合物が変異原性を示すおそれがある。したがって、上記構成を採用した化合物は、生体に対してより安全性が高いものと考えられる。

一般式（１）で表される化合物は、例えば、下記一般式（１−１）又は一般式（１−２）で表される化合物であってよい。

一般式（１−１）及び一般式（１−２）中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｎは、一般式（１）のものと同義である。

一般式（１）で表される化合物の具体例として、これらに限られるものではないが、式（Ａ１）〜式（Ａ２２）で表される化合物が挙げられる。

一般式（１）で表される化合物の塩としては、薬理学的に許容されるものであれば、特に制限されない。一般式（１）で表される化合物の塩としては、例えば、有機酸との塩、無機酸との塩、有機塩基との塩、無機塩基との塩が挙げられる。

有機酸との塩としては、例えば、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、メタンスルホン酸塩等が挙げられる。無機酸との塩としては、例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩等が挙げられる。有機塩基との塩としては、例えば、トリエタノールアミンとの塩等が挙げられる。無機塩基との塩としては、例えば、アンモニウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等が挙げられる。

〔前駆体化合物〕
一般式（１）で表される化合物又はその塩は、例えば、下記一般式（２）で表される化合物又はその塩（前駆体化合物）と、ＫＦ又はＫ^１８Ｆとを、Ｃｕ（ＯＴｆ）_２（Ｐｙ）_４触媒下で反応させることで得ることができる。また、一般式（１）で表される化合物又はその塩は、例えば、下記一般式（２）で表される化合物又はその塩（前駆体化合物）と、ＣＨ_３Ｉ又は^１１ＣＨ_３ＩとをＰｄ_２（ｄｂａ）_３触媒下で反応させることで得ることができる。

一般式（２）中、Ｑ^１、Ｑ^２、Ｑ^３及びＱ^４は、それぞれ独立に、水素原子、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基（Ｂｏｃ基）、ベンジルオキシカルボニル基（Ｃｂｚ基）、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルケニル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキニル基、置換基を有していてもよいシクロアルキル基、置換基を有していてもよい芳香族炭化水素基、又は置換基を有していてもよい複素環基を示す。

一般式（２）中、Ｑ^５は、−^１１ＣＨ_３、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基（Ｂｏｃ基）、ベンジルオキシカルボニル基（Ｃｂｚ基）、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルケニル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキニル基、置換基を有していてもよいシクロアルキル基、置換基を有していてもよい芳香族炭化水素基、又は置換基を有していてもよい複素環基を示す。

Ｑ^１、Ｑ^２、Ｑ^３、Ｑ^４及びＱ^５における置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルケニル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキニル基、置換基を有していてもよいシクロアルキル基、置換基を有していてもよい芳香族炭化水素基、及び置換基を有していてもよい複素環基の具体的な態様は、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４及びＲ^５で説明した態様と同じである。

一般式（２）中、Ｑ^６は、ボロン酸基、ボロン酸エステル基、トリフルオロボレート塩基又はトリオールボレート塩基を示す。ボロン酸基、ボロン酸エステル基、トリフルオロボレート塩基又はトリオールボレート塩基としては、特に限定はないが、例えば、下記構造式で表されるものが例示される。

一般式（２）中、Ｘ、Ｙ及びＺは、それぞれ独立に、炭素原子、酸素原子、硫黄原子又は窒素原子を示す。

一般式（２）中、ｎは、０又は１である。

一般式（２）中、Ｑ^１及びＱ^２は、互いに結合して環を形成していてもよい。同様に、一般式（２）中、Ｑ^３及びＱ^４は、互いに結合して環を形成していてもよい。また、一般式（２）中、Ｑ^１及び／又はＱ^２は、−ＮＱ^１Ｑ^２が結合する６員環と結合して環を形成していてもよい。同様に、一般式（２）中、Ｑ^３及び／又はＱ^４は、−ＮＱ^３Ｑ^４が結合する６員環と結合して環を形成していてもよい。

一般式（２）で表される化合物の具体例として、これらに限られるものではないが、式（Ｂ１）又は式（Ｂ２２）で表される化合物が挙げられる。

前駆体化合物の塩としては、薬理学的に許容されるものであれば、特に制限されない。前駆体化合物の塩としては、例えば、有機酸との塩、無機酸との塩、有機塩基との塩、無機塩基との塩が挙げられる。

有機酸との塩としては、例えば、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、メタンスルホン酸塩等が挙げられる。無機酸との塩としては、例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩等が挙げられる。有機塩基との塩としては、例えば、トリエタノールアミンとの塩等が挙げられる。無機塩基との塩としては、例えば、アンモニウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等が挙げられる。

前駆体化合物又はその塩は、例えば、後述の実施例に記載した合成スキームに準じて、製造することができる。

〔活性酸素種イメージング剤／活性酸素種イメージング方法〕
一般式（１）で表される化合物又はその塩は、活性酸素種と反応して一般式（１Ｒ）で表される化合物又はその塩に変換される。

一般式（１）で表される化合物又はその塩は、細胞膜を比較的自由に通過できる一方、一般式（１Ｒ）で表される化合物又はその塩は、細胞膜をほとんど通過できない。故に、一般式（１）で表される化合物又はその塩が細胞内で活性酸素種と反応すると、一般式（１Ｒ）で表される化合物又はその塩として細胞内に留まることになる。したがって、一般式（１）で表される化合物又はその塩（正確には、一般式（１Ｒ）で表される化合物又はその塩）を検出することにより、活性酸素種が発生している部位（細胞）をイメージングすることができる。また、一般式（１）で表される化合物又はその塩（正確には、一般式（１Ｒ）で表される化合物又はその塩）の集積量は、活性酸素種の量と相関することから、集積量を定量することで、発生している活性酸素種の量を定量することもできる。

したがって、一般式（１）で表される化合物又はその塩は、活性酸素種のイメージング用途に好適に使用することができる。すなわち、本発明の一実施形態として、一般式（１）で表される化合物又はその塩を有効成分として含有する活性酸素種イメージング剤が提供される。本実施形態に係る活性酸素種イメージング剤の具体的態様としては、ＰＥＴプローブ、蛍光プローブであってよい。

本実施形態に係る活性酸素種イメージング剤は、例えば、一般式（１）で表される化合物又はその塩を任意の緩衝液に溶解することによって製造することができる。この場合、本実施形態に係る活性酸素種イメージング剤は、溶液として提供され、緩衝成分の他、界面活性剤、防腐剤、安定化剤等のその他の成分を含有してもよい。

イメージングできる活性酸素種に特に制限はなく、例えば、スーパーオキシドアニオン、ヒドロキシラジカル、過酸化水素が挙げられる。

本実施形態に係る活性酸素種イメージング剤を使用した活性酸素種のイメージング方法は、例えば、本発明に係る活性酸素種イメージング剤をそれを必要とする対象に投与する工程と、生体内で活性酸素種と反応した一般式（１）で表される化合物又はその塩を検出する工程と、を含む。当該イメージング方法は、更に、生体内の関心部位における、生体内で活性酸素種と反応した一般式（１）で表される化合物又はその塩の集積量を定量解析する工程を含んでいてもよい。

対象としては、例えば、ヒト、サル、マウス及びラットが挙げられるがこれらに限定されるものではない。

活性酸素種イメージング剤を対象に投与する方法は、一般式（１）で表される化合物又はその塩が生体内の関心部位に到達する限りにおいて特に制限されないが、通常、静脈内投与である。

生体内の関心部位は、活性酸素種をイメージングしたい部位を任意に設定することができる。生体内の関心部位の具体例として、例えば、脳、心臓、膵臓、筋肉等のミトコンドリア含有量の多い臓器が挙げられる。

活性酸素種イメージング剤の投与量としては、生体内の関心部位において、活性酸素種と反応した一般式（１）で表される化合物又はその塩を検出するのに充分な投与量であれば特に制限されず、投与する対象、及び生体内で活性酸素種と反応した一般式（１）で表される化合物又はその塩を検出する方法に応じて適宜設定すればよい。

例えば、ポジトロン断層法（ＰＥＴ）に用いられる装置で検出する場合、活性酸素種イメージング剤の投与量（以下、「投与放射能量」ともいう。）は、１ＭＢｑ／ｋｇ体重〜１０００ＭＢｑ／ｋｇ体重であってもよい。一般式（１）で表される化合物又はその塩の比放射能は、１０〜１０，０００ＧＢｑ／μｍｏｌであってもよい。また、活性酸素種イメージング剤の投与放射能量は、使用するＰＥＴカメラの感度と対象個体の体積に依存するが、げっ歯類（マウス、ラット）ではおおよそ２００〜５００ＭＢｑ／ｋｇ体重を０．１〜０．５ｍＬの生理食塩水溶液として投与する。ヒト以外の霊長類（サル類）の場合、４０〜２００ＭＢｑ／ｋｇ体重を０．５〜２ｍＬの生理食塩水で投与し、ヒトの場合、２〜１０ＭＢｑ／ｋｇ体重を１〜５ｍＬの生理食塩水溶液として投与する。

また例えば、蛍光検出に用いられる装置で検出する場合、活性酸素種イメージング剤の投与量は、１ｍｇ／ｋｇ体重〜１０ｍｇ／ｋｇ体重であってもよい。

生体内で活性酸素種と反応した一般式（１）で表される化合物又はその塩の集積量を測定する方法は、一般式（１）で表される化合物又はその塩の具体的構造に応じて、適宜選択することができる。例えば、一般式（１）で表される化合物又はその塩が、^１８Ｆ又は^１１Ｃを含む場合、ＰＥＴ法によって、生体内で活性酸素種と反応した一般式（１）で表される化合物又はその塩を検出することが可能である。ＰＥＴ法における測定方法は特に制限されず、公知の方法に準じて実施することができる。また例えば、ＰＥＴ法で計測する方法としては、活性酸素種イメージング剤の投与直後から６０分間のダイナミック計測をしてもよいし、エミッション計測をしてもよいし、活性酸素種イメージング剤を投与して３０〜４０分間待って、活性酸素種が発生している部位（細胞）に生体内で活性酸素種と反応した一般式（１）で表される化合物又はその塩を充分集積させてから、１０〜２０分間のＰＥＴ計測をしてもよい。

また、一般式（１）で表される化合物又はその塩、及び一般式（１Ｒ）で表される化合物又はその塩は、蛍光（励起波長３５５〜５３６ｎｍ、蛍光波長４２０〜６０５ｎｍ）を発するため、蛍光検出により、生体内で活性酸素種と反応した一般式（１）で表される化合物又はその塩を検出することもできる。蛍光検出における測定方法は特に制限されず、公知の方法に準じて実施することができる。

生体内の関心部位における、生体内で活性酸素種と反応した一般式（１）で表される化合物又はその塩の集積量を定量解析する方法としては、特に制限されず、公知の方法に準じて実施することができる。例えば、以下の方法が挙げられる。まず、ＰＥＴ法によって得られた活性酸素種と反応した一般式（１）で表される化合物又はその塩の集積画像と、ＣＴ計測等によって得られた生体内の関心部位の形態画像を重ねあわせ、生体内の関心部位のＰＥＴ画像を同定する。次に生体内の関心部位のＰＥＴ画像上に関心領域を設定して、対象となる個体の体重と投与放射能量とで正規化した値を、生体内の関心部位への活性酸素種と反応した一般式（１）で表される化合物又はその塩の集積量とする。

測定された集積量を、例えば、基準値と比較することにより、生体内の関心部位において活性酸素種の発生が増加しているか否かを判定することもできる。基準値は、方法を実施する目的等に応じて適宜設定してよい。例えば、脳神経変性疾患の発症前診断及び早期診断を目的とする場合、対象個体に対して定期的に脳（線条体等）における活性酸素種と反応した一般式（１）で表される化合物又はその塩の集積量を測定しておき、所定期間（例えば、１か月〜１年前）の平均値を基準値として設定してもよい。また、例えば、定期健康診断等において不特定多数の被験者から得た活性酸素種と反応した一般式（１）で表される化合物又はその塩の集積量データに基づき、年齢等でグループ化した被験者の平均値を基準値とすることもできる。さらに、例えば、健常者及び脳神経変性疾患の患者から得た活性酸素種と反応した一般式（１）で表される化合物又はその塩の集積量データから、両者を識別可能な集積量を基準値としてもよい。

例えば、上述した基準値と比べて、活性酸素種と反応した一般式（１）で表される化合物又はその塩の集積量の値が大きい場合、対象においてＲＯＳの発生が亢進しており、脳神経変性疾患を発症するリスクが高い、又は発症していると判定することができる。

例えば、パーキンソン病、アルツハイマー病等の多くの神経変性疾患による神経細胞障害は、ミトコンドリア機能障害によって発生するＲＯＳが原因と考えられており、ＲＯＳの発生はこれらの疾患の発症よりも早い段階で引き起こっていると考えられる。本発明に係る活性酸素種イメージング剤によれば、神経細胞障害の初期に発生するＲＯＳを計測することができるため、より早期にこれらの疾患を診断することができる。

上述した本発明に係る活性酸素種イメージング剤／活性酸素種イメージング方法は、活性酸素種のイメージングに使用するための一般式（１）で表される化合物又はその塩と捉えることもでき、また活性酸素種イメージング剤の製造における一般式（１）で表される化合物又はその塩の使用と捉えることもできる。

以下、本発明を実施例に基づいてより具体的に説明する。ただし、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。

〔試験例１：前駆体化合物の合成〕
式（Ａ１）で表される化合物（以下、「［^１８Ｆ］ＦＰＨＭ」ともいう。）の前駆体（式（Ｂ１）で表される化合物）、及び式（Ａ２２）で表される化合物（以下、「［^１８Ｆ］ＦＨＭ」ともいう。）の前駆体（式（Ｂ２２）で表される化合物）を合成した。

［^１８Ｆ］ＦＰＨＭ及び［^１８Ｆ］ＦＨＭの前駆体の合成スキームを以下に示す。

［［^１８Ｆ］ＦＨＭの前駆体の合成］
（工程１：化合物１の合成）
アルゴン雰囲気下、４，４’−ジニトロビフェニルアミン（１０．３７ｇ）をトルエン（１００ｍＬ）に溶解させ、４−メトキシベンゾイルクロリド（８．５ｇ）を加えた。１２５℃にて２４時間還流撹拌した。得られた固体を濾取し、エーテル、温メタノール（５０℃）で洗浄した。得られた固体を真空で十分に乾燥させ、黄土色固体の化合物１（１３．８ｇ）を得た。化合物１のＮＭＲの測定結果は以下に示すとおりである。
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ＝１０．２６（ｓ，１Ｈ），８．４９（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），８．３２（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ），２．２６（ｄｄ，Ｊ＝２．３，８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．８３−７．７７（ｍ，５Ｈ），７．０５（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ）
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ＝１６６．１，１６３．１，１４８．３，１４８．０，１４５．６，１４２．４，１３７．６，１３２．７，１３０．８，１３０．６，１２６．７，１２４．６，１２２．９，１２１．８，１１４．７，５６．４

（工程２：化合物２の合成）
化合物１（３．９ｇ）をエタノール（５０ｍＬ）に溶解させ、１０％パラジウム炭素（１９０ｍｇ）を加えた。この溶液を０℃に冷却し、ヒドラジン一水和物（５００ｍｇ）を滴下した。その後、９０℃で３時間加熱還流した。反応液をセライトろ過し、減圧濃縮した。得られた固体を酢酸エチルに溶解させ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水、飽和食塩水で分液ロートを用いて洗浄した。得られた有機層に硫酸ナトリウムを加え乾燥後、濾過により乾燥剤を取り除いた。濾液の溶媒を減圧除去し、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）にて精製し、黄色固体の化合物２（２．９ｇ）を得た。化合物２のＮＭＲの測定結果は以下に示すとおりである。
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ＝９．２０（ｓ，１Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．０６−６．９８（ｍ，５Ｈ），６．８７（ｂｒｓ，１Ｈ），６．５５（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），６．５３（ｄｄ，Ｊ＝２．３，８．６Ｈｚ，１Ｈ），５．１０（ｂｒｓ，４Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ）
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ＝１６５．６，１６２．６，１４８．４，１４７．９，１３６．０，１３１．０，１３０．１，１３０．０，１２８．０，１２７．８，１２６．４，１１４．７，１１４．５，１１３．３，１１３．０，５６．３

（工程３：化合物３の合成）
化合物２（２．６０ｇ）に炭酸ナトリウム（３．４ｇ）、ジクロロメタン（８０ｍＬ）と水（８０ｍＬ）、ギ酸メチルクロリド（３．０ｇ）を加え、室温にて２４時間撹拌した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムを加え乾燥した。乾燥剤をろ過により除去したのち、溶媒を減圧留去し、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）にて精製し、白色固体の化合物３（３．３４ｇ）を得た。化合物３のＮＭＲの測定結果は以下に示すとおりである。
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ＝９．８３（ｂｒｓ，１Ｈ），９．７０（ｂｒｓ，１Ｈ），９．６９（ｂｒｓ，１Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ），７．６１（ｓ，１Ｈ），７．５０−７．４４（ｍ，３Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．３２（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．０３（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ），３．７２（ｓ，３Ｈ），３．６８（ｓ，３Ｈ）
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ＝１６６．１，１６２．８，１５５．０，１３９．５，１３８．９，１３６．２，１３４．０，１３３．０，１３１．３，１３０．４，１２９．９，１２７．５，１１８．９，１１７．４，１１４．６，５６．４，５２．７，５２．６

（工程４：化合物４の合成）
化合物３（９７０ｍｇ）と塩化ホスホリル（９ｍＬ）を混合し、１２０℃で６時間加熱還流撹拌を行った。その後、反応溶液を冷却しながら水酸化ナトリウムと炭酸ナトリウムを用いてｐＨ８．０となるように中和し、有機物を酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で洗浄後、得られた有機層に硫酸ナトリウムを加え乾燥した。乾燥剤をろ過により除去したのち、溶媒を減圧除去し、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）にて精製し、黄色固体の化合物４（８６０ｍｇ）を得た。化合物４のＮＭＲの測定結果は以下に示すとおりである。
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ＝１０．１０（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０８（ｂｒｓ，１Ｈ），８．７６（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），８．６５（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），８．４０（ｓ，１Ｈ），８．２４（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．９９（ｄｄ，Ｊ＝２．０，９．２Ｈｚ，１Ｈ），７．８１（ｄｄ，Ｊ＝２．０．９．２Ｈｚ，１Ｈ），７．７１（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．１８（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），３．９２（ｓ，３Ｈ），３．７７（ｓ，３Ｈ），３．７１（ｓ，３Ｈ）
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ＝１６１．１，１６０．７，１５５．１，１４４．４，１４０．２，１３８．８，１３２．９，１３２．１，１２９．３，１２５．５，１２４．２，１２３．８，１２３．７，１１９．７，１１９．４，１１７．４，１１６．２，１１４．７，５６．３，５２．９，５２．９

（工程５：化合物５の合成）
化合物４（８６０ｍｇ）と４８％臭化水素酸を混合し、１４０℃で２４時間加熱還流した。その後、反応溶液を冷却しながら水酸化ナトリウムと炭酸ナトリウムを用いてｐＨ８．０となるように中和し、有機物を酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で洗浄後、得られた有機層に硫酸ナトリウムを加え乾燥した。乾燥剤をろ過により除去したのち、溶媒を減圧除去し、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）にて精製し、茶色固体の化合物５（５４０ｍｇ）を得た。化合物５のＮＭＲの測定結果は以下に示すとおりである。
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ＝９．７７（ｓ，１Ｈ），８．３４（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），８．２４（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．４８（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．１８（ｄｄ，Ｊ＝２．３，８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．０９（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），７．０６（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），６．９９（ｄｄ，Ｊ＝２．３，９．０Ｈｚ，１Ｈ），６．９６（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），５．４２（ｂｒｓ，２Ｈ），５．３８（ｂｒｓ，２Ｈ）
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ＝１６０．１，１５８．５，１４８．７，１４７．３，１４４．５，１３２．３，１３１．８，１２５．８，１２５．７，１２３．３，１２２．８，１２１．７，１１７．９，１１５．９，１１５．８，１１１．１，１０９．４

（工程６：化合物６の合成）
化合物５（４０９ｍｇ）と二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｂｏｃ_２Ｏ，９１６ｍｇ）をｔｅｒｔ−ブチルアルコール（２５ｍＬ）に溶解させ、４０℃で２４時間撹拌させた。室温に戻した後、減圧濃縮し、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）にて精製し、白色固体の化合物６（５７４ｍｇ）を得た。化合物６のＮＭＲの測定結果は以下に示すとおりである。
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ＝９．８７（ｂｒｓ，１Ｈ），９．７６（ｂｒｓ，１Ｈ），９．７４（ｂｒｓ，１Ｈ），８．７１（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），８．６０（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），８．３４（ｓ，１Ｈ），８．１９（ｓ，１Ｈ），８．０２（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），７．８０（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），７．５９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），６．９９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），１．５６（ｓ，９Ｈ），１．５０（ｓ，９Ｈ）
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ＝１６１．１，１５８．９，１５３．８，１４４．３，１４０．４，１３９．０，１３２．１，１３１．３，１２９．１，１２５．４，１２３．９．１２３．６，１２３．５，１１９．５，１１９．１，１１７．２，１１５．９，８０．４，２９．１，２９．１

（工程７：化合物７の合成）
アルゴン雰囲気下、化合物６（５７４ｍｇ）をジクロロメタン（１１．４ｍＬ）に溶解させ、０℃にてＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（５８８ｍｇ）を滴下した。室温で３０分撹拌したのち、再び０℃に冷却し、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（Ｔｆ_２Ｏ，６４３ｍｇ）を滴下した。室温にて１８時間撹拌したのち、飽和塩化アンモニウム水溶液で反応を停止した。ジクロロメタンを用いて抽出後、飽和食塩水で洗浄し、集めた有機層に硫酸ナトリウムを加えて乾燥させた。乾燥剤をろ過により除去し、ろ液を減圧濃縮し、残った残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製し、黄色固体の化合物７（５８０ｍｇ）を得た。化合物７のＮＭＲ、ＩＲ、ＭＳの測定結果は以下に示すとおりである。
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝８．５２−８．４９（ｍ，１Ｈ），８．４３−８．４０（ｍ，１Ｈ），８．０３（ｂｒｓ，１Ｈ），７．９４−７．９２（ｍ，２Ｈ），７．８２−７．８０（ｍ，２Ｈ），７．７６（ｓ，１Ｈ），７．４６−７．４４（ｍ，２Ｈ），６．８１（ｂｒｍ，２Ｈ），１．５６（ｓ，９Ｈ），１．５１（ｓ，９Ｈ）
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝１５８．８，１５２．７，１４９．７，１４３．４，１３９．９，１３８．６，１３７．１，１３１．６，１２９．０，１２４．５，１２３．２，１２２．９，１２２．４，１２１．３，１１９．６，１１９．３，１１８．７（ｑ，Ｊ＝３２１．１Ｈｚ），１１７．６，１１５．７，８１．０，８０．９，２８．３，２８．２
^１９Ｆ−ＮＭＲ（４７０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝−７２．６（ｓ，３Ｆ）
ＩＲ（ｎｅａｔ）；１６９９，１６２２，１４９９，１４２３，１２１１，１１３８，８８３ｃｍ^−１
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ^＋）：Ｃａｌｃｄ．ｆｏｒ［Ｃ_３０Ｈ_３０Ｆ_３Ｎ_３Ｏ_７Ｓ＋Ｈ］^＋：ｍ／ｚ＝６３４．１８２９，Ｆｏｕｎｄ：６３４．１８３７

（工程８：化合物８の合成）
化合物７（２１３ｍｇ）をテトラヒドロフラン（３．５ｍＬ）に溶解させ、ヨードメタン（３．５ｍＬ）を滴下した。１２０℃で３日間攪拌したのち、室温まで冷却し、減圧濃縮した。残った残渣を酢酸エチルで洗浄し、黄土色固体の化合物８を得た。化合物８は、更なる精製は行わずに、次の工程に使用した。

（工程９：化合物９の合成）
化合物８をメタノール（７．５ｍＬ）に溶解させ、水素化ホウ素ナトリウム（２７ｍｇ）を滴下した。室温で３０分間攪拌したのち、エバポレーターで溶媒を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトクロマトグラフィー（ジクロロメタン：エーテル＝２０：１）にて精製し、黄土色固体の化合物９（１４３ｍｇ）を得た。化合物９のＮＭＲ、ＩＲ、ＭＳの測定結果は以下に示すとおりである。
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝７．６５−７．６１（ｍ，３Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），７．１９−７．１２（ｍ，４Ｈ），６．７２（ｍ，２Ｈ），６．４８（ｂｒｓ，１Ｈ），６．４５（ｂｒｓ，１Ｈ），５．３０（ｓ，１Ｈ），２．８４（ｓ，３Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ），１．２８（ｓ，９Ｈ）
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝１５２．６，１４８．８，１４４．４，１４１．５，１３９．４，１３７．２，１３４．６，１３１．７，１２８．５，１２５．４，１２３．２，１２２．９，１２１．３，１１８．６（ｑ，Ｊ＝３２１．１Ｈｚ），１１８．２，１１６．７，１１６．２，１０７．９，１０２．４，８０．７，８０．５，６７．０，３７．３，２８．３，２８．３
^１９Ｆ−ＮＭＲ（４７０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝−７２．８（ｓ，３Ｆ）
ＩＲ（ｎｅａｔ）：２１５８，２０２７，１９７７，１６９７，１６１０，１５１０，１１３８ｃｍ^−１
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ^＋）：Ｃａｌｃｄ．ｆｏｒ［Ｃ_３１Ｈ_３４Ｆ_３Ｎ_３Ｏ_７Ｓ＋Ｈ］^＋：ｍ／ｚ＝６５０．２１４２，Ｆｏｕｎｄ：６５０．２１５６

（工程１０：化合物１０の合成）
フラスコに化合物９（４２０ｍｇ）、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）ジクロリド ジクロロメタン付加物（ＰｄＣｌ_２（ｄｐｐｆ）・ＣＨ_２Ｃｌ_２，１０８ｍｇ）、酢酸カリウム（１９５ｍｇ）、ビスピナコールボラン（ＰｉｎＢ−ＢＰｉｎ，１８５ｍｇ）を量り入れ、そこにジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ，７ｍＬ）を加えた。凍結脱気（３回）を行ったあと、８５℃で１２時間撹拌した。室温に冷却した後、酢酸エチルを加えた。得られた懸濁液を短く積んだシリカゲルに通し、シリカゲルを酢酸エチルで洗浄した。集めた有機溶媒を水と飽和食塩水で洗浄し、有機層に硫酸ナトリウムを加えた。乾燥剤をろ過により除去し、ろ液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）にて精製し、黄土色固体の化合物１０（式（Ｂ２２）で表される化合物，３８１ｍｇ）を得た。化合物１０のＮＭＲ、ＩＲ、ＭＳの測定結果は以下に示すとおりである。
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝７．６５−７．６１（ｍ，３Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．１９−７．１２（ｍ，４Ｈ），６．７２−６．７１（ｍ，２Ｈ），６．４７（ｂｒｓ，１Ｈ），６．４４（ｂｒｓ，１Ｈ），５．３０（ｓ，１Ｈ），２．８４（ｓ，３Ｈ），１．５０（ｓ，９Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ）
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝１５２．５，１５２．５，１４４．９，１４４．１，１３９．１，１３７．０，１３５．３，１３５．０，１２６．２，１２５．６，１２３．１，１２２．７，１１７．９，１１６．９，１１６．５，１０７．５，１０２．２，８３．６，８０．４，８０．３，６７．９，３７．２，２８．３，２８．３，２４．８
ＩＲ（ＣＨＣｌ_３）：１７２４，１６１１，１５０６，１３６０，１１５５ｃｍ^−１
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ^＋）：Ｃａｌｃｄ．ｆｏｒ［Ｃ_３６Ｈ_４６ＢＮ_３Ｏ_６＋Ｈ］^＋：ｍ／ｚ＝６２８．３５５１，Ｆｏｕｎｄ：６２８．３５７９

［［^１８Ｆ］ＦＨＭの前駆体の合成］
（工程１１：化合物１１の合成）
化合物６（５００ｍｇ）と炭酸カリウム（１６０ｍｇ）をフラスコに量りとり、アルゴン置換した後、脱水アセトン（１０ｍＬ）を加えた。室温にてベンジルブロミド（２０５ｍｇ）を滴下し、８０℃で６時間撹拌した。その後、エバポレーターで溶媒を減圧濃縮し、得られた固体を酢酸エチルに溶解させた。その溶液を水、飽和食塩水で洗浄し、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥剤をろ過により除去した後、溶媒を減圧濃縮し、シリカゲルフラッシュカラムクロマトクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）にて精製し、黄土色固体の化合物１１（６６０ｍｇ）を得た。化合物１１のＮＭＲ、ＩＲ、ＭＳの測定結果は以下に示すとおりである。
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝８．５０（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），８．４１（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），８．１０（ｂｒｓ，１Ｈ），７．９５（ｂｒｓ，１Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），７．８０（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），７．６５（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．４８（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．４１（ｄｄ，Ｊ＝７．５，７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），６．７９（ｂｒｓ，２Ｈ），５．１５（ｓ，２Ｈ），１．５６（ｓ，９Ｈ），１．５１（ｓ，９Ｈ）
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝１６０．７，１５９．３，１５２．７，１４３．８，１３８．５，１３６．９，１３６．８，１３２．４，１３１．０，１２９．３，１２８．６，１２８．０，１２７．４，１２７．０，１２５．２，１２２．９，１２２．８，１２２．４，１１９．３，１１８．８，１１７．５，１１６．５，１１４．８，８０．９，８０．８，７０．０，２８．３，２８．３
ＩＲ（ｎｅａｔ）：２１５８，２０２９，１９７７，１６８７，１６０４，１３２３，１１６６，１０８３ｃｍ^−１
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ^＋）：Ｃａｌｃｄ．ｆｏｒ［Ｃ_３６Ｈ_３７Ｎ_３Ｏ_５＋Ｈ］^＋：ｍ／ｚ＝５９２．２８０６，Ｆｏｕｎｄ：５９２．２８０３

（工程１２：化合物１２の合成）
アルゴン雰囲気下、化合物１１（６６０ｍｇ）をテトラヒドロフラン（ＴＨＦ，６．０ｍＬ）に溶解させ、ヨードメタン（１１ｍＬ）を加え、１２０℃にて２４時間加熱還流した。反応後、減圧濃縮し、得られた個体をメタノール（１０ｍＬ）に溶解させ、水素化ホウ素ナトリウム（８５ｍｇ）を加えた。室温にて３０分撹拌した。反応溶液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトクロマトグラフィー（ジクロロメタン：エーテル＝２０：１）にて精製し、黄土色固体の化合物１２（５４１ｍｇ）を得た。化合物１２のＮＭＲ、ＩＲ、ＭＳの測定結果は以下に示すとおりである。
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝７．６６（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），７．５８（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．３８−７．２８（ｍ，５Ｈ），７．１８−７．０２（ｍ，２Ｈ），７．０３（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），６．７７−６．７０（ｍ，４Ｈ），６．４３（ｂｒｓ，１Ｈ），６．４０（ｂｒｓ，１Ｈ），５．２５（ｓ，１Ｈ），４．９５（ｓ，２Ｈ），２．８７（ｓ，３Ｈ），１．５０（ｓ，９Ｈ），１．４９（ｓ，９Ｈ）
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝１５８．２，１５２．６，１５２．５，１４４．９，１３９．１，１３７．０，１３６．９，１３５．８，１３３．８，１２８．５，１２８．０，１２７．９，１２７．４，１２５．５，１２３．０，１２２．６，１１７．８，１１７．０，１１６．３，１１４．６，１０７．４，１０２．３，８０．４，８０．３，６９．８，６７．２，３７．０，２８．３，２８．３
ＩＲ（ｎｅａｔ）：１２５９，２０３１，１９７７，１６９９，１６０７，１５０６，１２２９，１１４８ｃｍ^−１
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ^＋）：Ｃａｌｃｄ．ｆｏｒ［Ｃ_３７Ｈ_４１Ｎ_３Ｏ_５＋Ｈ］^＋：ｍ／ｚ＝６０８．３１１９，Ｆｏｕｎｄ：６０８．３１１７

（工程１３：化合物１３の合成）
アルゴン雰囲気下、化合物１２（２８０ｍｇ）及びカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（５２０ｍｇ）をＴＨＦ（５．０ｍＬ）に溶解させ、２−ヨードプロパン（７８０ｍｇ）を加え、９０℃にて２４時間加熱還流した。カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（２６０ｍｇ）と２−ヨードプロパン（３９０ｍｇ）を追加し、さらに２４時間加熱還流させた。室温まで冷却した後、減圧濃縮し、得られた固体を酢酸エチルに溶解させた。その溶液を水で洗浄し、得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥剤をろ過により除去した後、溶媒を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）にて精製し、赤色固体の化合物１３（１５０ｍｇ）を得た。化合物１３のＮＭＲ、ＩＲ、ＭＳの測定結果は以下に示すとおりである。
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝７．７５（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．６９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３８−７．２８（ｍ，５Ｈ），７．０４−６．９９（ｍ，３Ｈ），７．７６−６．７４（ｍ，３Ｈ），６．５６（ｄｄ，Ｊ＝１．７，８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．３１（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ），５．３０（ｓ，１Ｈ），４．９５（ｓ，２Ｈ），４．５３−４．４５（ｍ，２Ｈ），２．８７（ｓ，３Ｈ），１．３５（ｓ，９Ｈ），１．２４（ｓ，９Ｈ），１．１５−１．１２（ｍ，６Ｈ），１．０７−１．０４（ｍ，６Ｈ）
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝１５８．２，１５４．８，１５４．７，１４４．９，１４０．５，１３８．２，１３６．９，１３６．０，１３３．９，１２８．８，１２８．７，１２８．５，１２８．２，１２７．９，１２７．８，１２７．３，１２３．１，１２２．５，１２０．２，１１９．２，１１４．６，１１４．３，７９．６，７９．４，６９．９，６７．０，４８．３，３７．１，２８．３，２８．２，２１．６，２１．６，２１．４，２１．３
ＩＲ（ｎｅａｔ）：２１５９，２０３１，１９７７，１６９７，１５０６，１４８３，１２３３，１１５０ｃｍ^−１
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ^＋）：Ｃａｌｃｄ．ｆｏｒ［Ｃ_４３Ｈ_５３Ｎ_３Ｏ_５＋Ｈ］^＋：ｍ／ｚ＝６９２．４０５８，Ｆｏｕｎｄ：６９２．４０５５

（工程１４：化合物１４の合成）
アルゴン雰囲気下、化合物１３（１５０ｍｇ）をメタノール（５．０ｍＬ）に溶解させ、１０％パラジウム炭素（１５ｍｇ）を加えた。フラスコ内を水素で置換し、室温にて２４時間撹拌した。反応液をセライトろ過し、ろ液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）にて精製し、赤色固体の化合物１４（１４０ｍｇ）を得た。化合物１４のＮＭＲ、ＩＲ、ＭＳの測定結果は以下に示すとおりである。
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝７．７５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．０１−６．９７（ｍ，３Ｈ），６．７５（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ），６．６０（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），６．５６（ｄｄ，Ｊ＝１．７，８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．３０（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ），５．２９（ｓ，１Ｈ），４．５２−４．４５（ｍ，１Ｈ），２．８６（ｓ，３Ｈ），１．３６（ｓ，９Ｈ），１．２６（ｓ，９Ｈ），１．１４−１．１２（ｍ，６Ｈ），１．０６−１．０３（ｍ，６Ｈ）
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝１５５．６，１５５．０，１５４．８，１４４．９，１４０．４，１３８．２，１３６．１，１３３．２，１２８．８，１２８．７，１２８．３，１２７．９，１２３．１，１２２．５，１２０．２，１１９．１，１１５．２，１１４．３，７９．７，７９．６，６７．０，４８．４，３７．０，２８．４，２８．２，２１．６，２１．６，２１．４，２１．３
ＩＲ（ｎｅａｔ）：２１５８，２０３１，１９７７，１６６７，１０５，１４８９，１３２１，１１６３ｃｍ^−１
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ^＋）：Ｃａｌｃｄ．ｆｏｒ［Ｃ_３６Ｈ_４７Ｎ_３Ｏ_５＋Ｈ］^＋：ｍ／ｚ＝６０２．３５８８，Ｆｏｕｎｄ：６０２．３５６５

（工程１５：化合物１５の合成）
アルゴン雰囲気下、化合物１４（１５０ｍｇ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解させ、０℃にてＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１３０ｍｇ）を滴下した。室温で３０分撹拌したのち、再び０℃に冷却し、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（Ｔｆ_２Ｏ，１４１ｍｇ）を滴下した。室温にて２４時間撹拌したのち、飽和塩化アンモニウム水溶液で反応を停止した。ジクロロメタンを用いて抽出後、飽和食塩水で洗浄し、集めた有機層に硫酸ナトリウムを加えて乾燥させた。乾燥剤をろ過により除去し、ろ液を減圧濃縮し、残った残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製し、黄色固体の化合物１５（１３５ｍｇ）を得た。化合物１５のＮＭＲ、ＩＲ、ＭＳの測定結果は以下に示すとおりである。
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝７．７８（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．７１（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．２１（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．０７−７．０４（ｍ，３Ｈ），６．７７（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ），６．６０（ｄｄ，Ｊ＝１．７，８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．３３（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ），５．３９（ｓ，１Ｈ），４．５３−５．４６（ｍ，２Ｈ），２．９０（ｓ，３Ｈ），１．３６（ｓ，９Ｈ），１．２４（ｓ，９Ｈ），１．１５−１．１２（ｍ，６Ｈ），１．０７−１．０４（ｍ，６Ｈ）
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝１５４．７，１５４．６，１４８．９，１４４．２，１４１．６，１４０．８，１３８．５，１３４．７，１２９４，１２８．７，１２８．３，１２８．２，１２３．３，１２２．９，１２１．３，１２０．０，１１９．７，１１８．６（ｑ，Ｊ＝３１９．９Ｈｚ），１１４．５，７９．７，７９．５，６６．７，４８．４，３７．３，２８．３，２８．２，２１．６，２１．６，２１．４，２１．３
^１９Ｆ−ＮＭＲ（４７０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝−７２．８（ｓ，３Ｆ）
ＩＲ（ｎｅａｔ）：２９８０，１６９０，１６０７，１４９３，１４２５，１３４２，１１７１，１１４０，１０１７ｃｍ^−１
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ^＋）：Ｃａｌｃｄ．ｆｏｒ［Ｃ_３７Ｈ_４６Ｆ_３Ｎ_３Ｏ_７Ｓ＋Ｈ］^＋：ｍ／ｚ＝７３４．３０８１，Ｆｏｕｎｄ：７３４．３０８０

（工程１６：化合物１６の合成）
フラスコに化合物１５（１３５ｍｇ）、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）ジクロリド ジクロロメタン付加物（ＰｄＣｌ_２（ｄｐｐｆ）・ＣＨ_２Ｃｌ_２，３０ｍｇ）、酢酸カリウム（５５ｍｇ）、ビスピナコールボラン（ＰｉｎＢ−ＢＰｉｎ，５２ｍｇ）を量り入れ、そこにジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ，７ｍＬ）を加えた。凍結脱気（３回）を行ったあと、８５℃で１２時間撹拌した。室温に冷却した後、酢酸エチルを加えた。得られた懸濁液を短く積んだシリカゲルに通し、シリカゲルを酢酸エチルで洗浄した。集めた有機溶媒を水と飽和食塩水で洗浄し、有機層に硫酸ナトリウムを加えた。乾燥剤をろ過により除去し、ろ液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）にて精製し、黄土色固体の化合物１６（式（Ｂ１）で表される化合物，４３ｍｇ）を得た。化合物１６のＮＭＲ、ＩＲ、ＭＳの測定結果は以下に示すとおりである。
^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝７．７３（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．６７（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．１３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．００（ｄｄ，Ｊ＝１．７，８．６Ｈｚ，１Ｈ），６．７９（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ），６．５６（ｄｄ，Ｊ＝１．７，８．６Ｈｚ，１Ｈ），６．３２（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ），５．３７（ｓ，１Ｈ），４．５４−４．４４（ｍ，２Ｈ），２．８８（ｓ，３Ｈ），１．３６（ｓ，９Ｈ），１．２９（ｓ，１２Ｈ），１．２６（ｓ，９Ｈ），１．１５−１．１３（ｍ，６Ｈ），１．０５−１．０２（ｍ，６Ｈ）
^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝１５４．８，１５４．７，１４４．９，１４４．４，１４０．５，１３８．２，１３５．４，１３５．０，１２９．０，１２８．８，１２８．２，１２５．８，１２３．２，１２２．６，１２０．０，１１９．２，１１４．１，８３．７，７９．６，７９．４，６７．６，４８．３，３７．３，２８．４，２８．２，２４．８，２１．６，２１．５，２１．３
ＩＲ（ｎｅａｔ）：１６８４，１６０７，１４９１，１３９２，１３６２，１３４４，１１６８，１０９０ｃｍ^−１
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ^＋）：Ｃａｌｃｄ．ｆｏｒ［Ｃ_４２Ｈ_５９ＢＮ_３Ｏ_６＋Ｈ］^＋：ｍ／ｚ＝７１２．４４９１，Ｆｏｕｎｄ：７１２．４４８８

〔試験例２：ＰＥＴプローブの合成〕
［［^１８Ｆ］ＦＨＭの合成］
前駆体化合物（式（Ｂ２２）で表される化合物）から、下記スキームに従って［^１８Ｆ］ＦＨＭを合成した。

サイクロトロン（ＨＭ−１８，住友重機械工業製）にて１８ＭｅＶに加速した陽子を２０μＡの電流値で、^１８Ｏ−Ｈ_２Ｏおよそ２ｍＬを封入したターゲットに照射して、^１８Ｏ（ｐ，ｎ）^１８Ｆ核反応により［^１８Ｆ］を製造した。ターゲット内では［^１８Ｆ］は［^１８Ｆ］Ｆ⁻の化学形で存在する。照射後、製造された［^１８Ｆ］Ｆ⁻を含むターゲット水を自動合成装置に導入した。

［^１８Ｆ］Ｆ⁻を含むターゲット水をイオン交換樹脂（ＡＧ１−Ｘ８，バイオラッドラボラトリーズ製）にトラップし、その後４０ｍＭ ＴｆＯＫ（０．５ｍＬ）で反応器に溶出した。アセトニトリル（２．０ｍＬ）を加え、ヘリウム気流下１１０℃で溶媒を留去した。残渣にアセトニトリル（１．０ｍＬ）を加え共沸脱水を２回行い、さらに減圧乾燥し、フッ素化に用いる［^１８Ｆ］ＫＦを得た。

減圧乾燥後、前駆体化合物（式（Ｂ２２）で表される化合物）（２．０ｍｇ）、Ｃｕ（ＯＴｆ）_２（Ｐｙ）_４（１５．０ｍｇ）、ピリジン（４０．０μＬ）、ＤＭＡ−ＥｔＯＨ（９／１，０．５ｍＬ）を［^１８Ｆ］ＫＦに加え、１３５℃で２０分間、フッ素化反応を行った。その後、室温まで冷却し、６Ｍ ＨＣｌ−ＥｔＯＨ（１／１，１．０ｍＬ）を加え、１３５℃で５分間、脱保護反応を行った。室温まで冷却した後、ＮａＢＨ_４（２０．０ｍｇ）を含む３Ｍ ＮａＯＨ（１．０ｍＬ）溶液を加え６０℃で５分間、中和と還元反応を行った。反応液をＭｅＣＮ−Ｈ_２Ｏ（３／７，１．０ｍＬ）で希釈し、高速液体クロマトグラフィーで精製した。移動相にＣＨ_３ＣＮ／Ｈ_２Ｏ＝４５０／５５０を用い、カラムにＩｎｅｒｔｓｉｌ ＯＤＳ−３（１０×２５０ｍｍ）を用い、流速６ｍＬ／分、検出波長２５４ｎｍで分取を行った。標識化合物（［^１８Ｆ］ＦＨＭ）の画分を分取し、加熱減圧下で溶媒を留去した。さらに残渣を注射用生理食塩水に再溶解した後、無菌バイアルに標識化合物を回収した。回収した溶液にＮａＢＨ_４を５ｍｇ／ｍＬとなるように加え、最終製剤とした。

最終製剤を高速液体クロマトグラフィー（カラム；Ｌ−Ｃｏｌｕｍｎ２（３μｍ，４．６×１００ｍｍ）、移動相；Ａ：Ｂ＝５５：４５（Ａ＝０．１％ＡｃＯＨ，３０ｍＭ ＡｃＯＮＨ_４，Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ）、流速；２ｍＬ／分、検出波長；２５４ｎｍ）にて分析した（ｎ＝４）。結果は以下のとおりであった。
生産量：０．８８±０．５２ＧＢｑ（ＥＯＳ）
平均比放射能：２４．３±８．９ＧＢｑ／μｍｏｌ（ＥＯＳ）
平均合成時間：８５．４±４．６分

［［^１８Ｆ］ＦＰＨＭの合成］
前駆体化合物（式（Ｂ１）で表される化合物）から、下記スキームに従って［^１８Ｆ］ＦＰＨＭを合成した。

サイクロトロン（ＨＭ−１８，住友重機械工業製）にて１８ＭｅＶに加速した陽子を２０μＡの電流値で、^１８Ｏ−Ｈ_２Ｏおよそ２ｍＬを封入したターゲットに照射して、^１８Ｏ（ｐ，ｎ）^１８Ｆ核反応により［^１８Ｆ］を製造した。ターゲット内では［^１８Ｆ］は［^１８Ｆ］Ｆ⁻の化学形で存在する。照射後、製造された［^１８Ｆ］Ｆ⁻を含むターゲット水を自動合成装置に導入した。

［^１８Ｆ］Ｆ⁻を含むターゲット水をイオン交換樹脂（ＡＧ１−Ｘ８，バイオラッドラボラトリーズ製）にトラップし、その後４０ｍＭ ＴｆＯＫ（０．５ｍＬ）で反応器に溶出した。アセトニトリル（２．０ｍＬ）を加え、ヘリウム気流下１１０℃で溶媒を留去した。残渣にアセトニトリル（１．０ｍＬ）を加え共沸脱水を２回行い、さらに減圧乾燥し、フッ素化に用いる［^１８Ｆ］ＫＦを得た。

減圧乾燥後、前駆体化合物（式（Ｂ１）で表される化合物）（２．０ｍｇ）、Ｃｕ（ＯＴｆ）_２（Ｐｙ）_４（１５．０ｍｇ）、ピリジン（４０．０μＬ）、ＤＭＡ−ＥｔＯＨ（９／１，０．５ｍＬ）を［^１８Ｆ］ＫＦに加え、１３５℃で２０分間、フッ素化反応を行った。その後、室温まで冷却し、６Ｍ ＨＣｌ−ＥｔＯＨ（１／１，１．０ｍＬ）を加え、１３５℃で５分間、脱保護反応を行った。室温まで冷却した後、ＮａＢＨ_４（２０．０ｍｇ）を含む３Ｍ ＮａＯＨ（１．０ｍＬ）溶液を加え６０℃で５分間、中和と還元反応を行った。反応液をＭｅＣＮ−Ｈ_２Ｏ（３／７，１．０ｍＬ）で希釈し、高速液体クロマトグラフィーで精製した。移動相にＣＨ_３ＯＨ／Ｈ_２Ｏ／ＨＣＯＯＨ＝４５０／５５０／１を用い、カラムにＹＭＣ−Ｐａｃ Ｐｒｏ Ｃ１８（５μｍ，１０×２５０ｍｍ）を用い、流速４．５ｍＬ／分、検出波長２５４ｎｍで分取を行った。標識化合物（［^１８Ｆ］ＦＰＨＭ）の画分を分取し、加熱減圧下で溶媒を留去した。さらに残渣を注射用生理食塩水に再溶解した後、無菌バイアルに標識化合物を回収した。回収した溶液にＮａＢＨ_４を５ｍｇ／ｍＬとなるように加え、最終製剤とした。

最終製剤を高速液体クロマトグラフィー（カラム；Ｌ−Ｃｏｌｕｍｎ２（３μｍ，４．６×１００ｍｍ）、移動相；Ａ：Ｂ＝５５：４５（Ａ＝０．１％ＡｃＯＨ，３０ｍＭ ＡｃＯＮＨ_４，Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ）、流速；２ｍＬ／分、検出波長；２５４ｎｍ）にて分析した（ｎ＝４）。結果は以下のとおりであった。
生産量：０．１９ＧＢｑ（ＥＯＳ）
平均合成時間：８３．４±３．８分

［［^１１Ｃ］ＨＭの合成］
比較のためのＰＥＴプローブとして、式（Ｃ１）で表される化合物（以下、「［^１１Ｃ］ＨＭ」ともいう。）を合成した。

［^１１Ｃ］ＨＭは、下記スキームに従って合成した。

サイクロトロン（ＨＭ−１８、住友重機械工業製）にて１８ＭｅＶに加速した陽子を、純窒素ガス（Ｇグレード、ジャパンファインプロダクツ製）を封入したターゲットにおよそ２０μＡの電流値で照射した。^１４Ｎ（ｐ，α）^１１Ｃ核反応により製造した［^１１Ｃ］ＣＯ_２を、自動合成装置（住友重機械工業製）に回収し、冷却した０．１Ｍ ＬｉＡｌＨ_４／テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）溶液（ＡＢＸ ａｄｖａｎｃｅｄ ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ製）５００μＬに導入した。ＴＨＦを留去後、ヨウ化水素酸（ナカライテスク製）０．５ｍＬを加え、生成した［^１１Ｃ］ヨウ化メチルを蒸留し、２００℃に加熱した銀トリフレートカラムを通過させることにより［^１１Ｃ］メチルトリフレートに変換した。

前駆体（化合物Ｃ１−１）１．５ｍｇをメチルエチルケトン０．２ｍＬに溶解し、上記の［^１１Ｃ］メチルトリフレートを導入して、５０℃で３分メチル化し、化合物Ｃ１−２を合成した。次いで、６Ｎ塩酸／エタノール＝１３３μＬ／３２０μＬを添加し、８０℃で４分間脱保護反応を行い、化合物Ｃ１−３を合成した。次いで、水素化ホウ素ナトリウム／１Ｎ 水酸化ナトリウム＝８ｍｇ／８２０μＬを添加し、化合物Ｃ１を合成した。

反応液を高速液体クロマトグラフィー（カラム；ＹＭＣ Ｐａｃｋ Ｐｒｏ Ｃ１８、１０＊２５０ｍｍ、５μｍ（ＹＭＣ、ＵＳＡ）、移動相；２０ｍＭリン酸緩衝液 ｐＨ２．８（０．５％アスコルビン酸＋０．０５％ＮａＨＳＯ_３）／アセトニトリル＝５００／５００、流速；６ｍＬ／分、検出波長；２５４ｎｍ）にて分取した。溶媒を留去し、残渣に０．１％ Ｔｗｅｅｎ８０／生理食塩を加えて最終製剤とした。

最終製剤の放射能をキュリーメータ（ＩＧＣ−７、日立アロカ株式会社製）で測定し、その一部を分析用高速液体クロマトグラフィー（カラム；Ｆｉｎｅｐａｋ Ｃ１８−Ｓ、４．６＊１５０ｍｍ（日本分光株式会社製）、移動相；アセトニトリル（和光純薬工業株式会社製）／３０ｍＭ 酢酸アンモニウム（ナカライテスク株式会社製）／酢酸（和光純薬工業株式会社製）＝５００／５００／２、流速；２ｍＬ／分、検出波長；２５４ｎｍ）にて分析した（ｎ＝４）。結果は以下のとおりであった。
生産量：２．５４±１．１８ＧＢｑ（ＥＯＳ）
平均比放射能：５０．４±１６．９ＧＢｑ／μｍｏｌ（ＥＯＳ）
平均合成時間：３０．１±３．８分

〔試験例３：ＰＥＴ計測〕
ニトロプルシドナトリウム（ＳＮＰ）の投与により脳（右線条体）で活性酸素種を発生させたラットを使用して、［^１８Ｆ］ＦＨＭ、［^１８Ｆ］ＦＰＨＭ及び［^１１Ｃ］ＨＭの集積を解析した。

ラットを１．５−２．０％のイソフルラン（希釈ガス：酸素）で麻酔しながら、２０ｎｍｏｌ／μＬのＳＮＰ溶液（生理食塩水）４μＬをハミルトンシリンジ（２６ゲージ）を使用して０．８μＬ／分の速度でラットの右線条体に注入した。左線条体には、同様の方法で生理食塩水４μＬを注入した。ＳＮＰを投与したラット（ＳＮＰモデルラット）に対し、ＳＮＰ投与から６０分後にＰＥＴ計測を実施した。

吸収補正のために１５分間のトランスミッション計測を実施した後、ラットの尾静脈から２０ＭＢｑの［^１８Ｆ］ＦＨＭ、［^１８Ｆ］ＦＰＨＭ又は［^１１Ｃ］ＨＭをボーラス投与して、９０分間のエミッション計測を実施した。ＰＥＴ計測終了後、［^１８Ｆ］ＦＨＭ、［^１８Ｆ］ＦＰＨＭ又は［^１１Ｃ］ＨＭ投与０−１５分後、１５−３０分後、３０−４５分後、４５−６０分後、６０−７５分後及び７５−９０分後の脳のＰＥＴ集積画像を、脳のＣＴ画像に重ね合わせた。Ｘ−ＣＴ画像から同定した右線条体及び左線条体のＰＥＴ画像上に関心領域を設定して、各個体の体重と投与放射能量で正規化した値を、各部位への［^１８Ｆ］ＦＨＭ、［^１８Ｆ］ＦＰＨＭ又は［^１１Ｃ］ＨＭの集積量（放射能集積量（ＳＵＶ））とした（各群、ラット５匹）。

また、コントロールとして、右線条体及び左線条体共に生理食塩水のみを投与したラット（コントロールラット）に対して、上記と同様の方法でＰＥＴ計測を実施した。

ＰＥＴ計測の結果を図１〜図３に示す。図１は、［^１８Ｆ］ＦＨＭ又は［^１１Ｃ］ＨＭを投与したＳＮＰモデルラットの脳のＣＴ画像にＰＥＴ集積画像を重ね合わせた画像である。図１（Ａ）は、［^１８Ｆ］ＦＨＭを投与したＳＮＰモデルラットにおける画像である。左から順に［^１８Ｆ］ＦＨＭ投与０−１５分後、１５−３０分後、３０−４５分後、４５−６０分後、６０−７５分後及び７５−９０分後の画像となっている。図１（Ｂ）は、［^１１Ｃ］ＨＭを投与したＳＮＰモデルラットにおける画像である。左から順に［^１１Ｃ］ＨＭ投与０−１５分後、１５−３０分後、３０−４５分後、４５−６０分後、６０−７５分後及び７５−９０分後の画像となっている。図１に示すように、いずれのプローブとも、ＳＮＰを投与した右線条体に高い集積を示した。

図２は、［^１８Ｆ］ＦＨＭ又は［^１１Ｃ］ＨＭを投与したラットの右線条体及び左線条体への［^１８Ｆ］ＦＨＭ又は［^１１Ｃ］ＨＭの集積量（放射能集積量（ＳＵＶ））を測定した結果を示すグラフである。図２（Ａ）及び（Ｂ）は、ＳＮＰモデルラットにおける結果を示すグラフである。図２（Ｃ）及び（Ｄ）は、コントロールラットにおける結果を示すグラフである。また、図２（Ａ）及び（Ｃ）は、［^１１Ｃ］ＨＭを投与したときの結果を示すグラフであり、図２（Ｂ）及び（Ｄ）は、［^１８Ｆ］ＦＨＭを投与したときの結果を示すグラフである。図２（Ｅ）は、図２（Ａ）及び（Ｃ）中の投与３０−４５分後の集積量を示すグラフである。図２（Ｆ）は、図２（Ｂ）及び（Ｄ）中の投与３０−４５分後の集積量を示すグラフである。

コントロールラットにおける結果（図２（Ｃ）及び（Ｄ））から、いずれのプローブも放射能が線条体より速やかに消失したことが分かる。ＳＮＰモデルラットにおける結果（図２（Ａ）及び（Ｂ））から、ＳＮＰを投与した右線条体で放射能集積量が増加したことが分かる。また、右線条体での放射能集積量は、［^１８Ｆ］ＦＨＭの方が［^１１Ｃ］ＨＭよりも高かった。図２（Ｅ）及び（Ｆ）から、対照となる左線条体の放射能集積量に対して、ＳＮＰを投与した右線条体の放射能集積量は、［^１１Ｃ］ＨＭは約３倍であり、［^１８Ｆ］ＦＨＭは、約５倍であった。すなわち、［^１８Ｆ］ＦＨＭをＰＥＴプローブとすることで、従来の［^１１Ｃ］ＨＭをＰＥＴプローブとした場合と比較して、活性酸素種（ＲＯＳ）の発生をより感度よく捉えることができる。

図３は、［^１８Ｆ］ＦＨＭ又は［^１８Ｆ］ＦＰＨＭを投与したＳＮＰモデルラットにおける結果を示す。図３（Ａ）及び（Ｂ）は、^１８Ｆ］ＦＨＭ又は［^１８Ｆ］ＦＰＨＭを投与したＳＮＰモデルラットの脳のＣＴ画像にＰＥＴ集積画像を重ね合わせた画像（投与７５−９０分後）である。図３（Ｃ）及び（Ｄ）は、［^１８Ｆ］ＦＨＭ又は［^１８Ｆ］ＦＰＨＭを投与したＳＮＰモデルラットの右線条体及び左線条体への［^１８Ｆ］ＦＨＭ又は［^１１Ｃ］ＨＭの集積量（放射能集積量（ＳＵＶ））を測定した結果を示すグラフである。図３（Ｅ）は、図３（Ｃ）及び（Ｄ）中の投与３０−４５分後の集積量を示すグラフである。

図３から、［^１８Ｆ］ＦＰＨＭをＰＥＴプローブとした場合でも充分な集積比を示すことが分かる。

〔試験例４：ＤＮＡインターカレーションの解析〕
下記式（Ｅ４）で表される化合物において、Ｒ^１１、Ｒ^１２、Ｒ^１３及びＲ^１４の置換基の種類とＤＮＡへのインターカレーションとの関係を解析した。

ＤＮＡの塩基対間に化合物がインターカレートすることで蛍光強度が増強するため、ＤＮＡと化合物を混合して蛍光強度を測定した。まず、表１に示す化合物を１０μｇ／ｍＬとなるように０．１Ｍ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．５）に溶解し、これにウシ胸腺ＤＮＡを０μｇ／ｍＬ、５μｇ／ｍＬ、１０μｇ／ｍＬ又は２０μｇ／ｍＬとなるように添加して測定サンプルを調製した。次いで、各測定サンプルの蛍光強度を測定した（励起波長３５５〜５３６ｎｍ、蛍光波長４２０〜６０５ｎｍ）。結果を図４及び表１に示す。表１中、蛍光強度比は、ＤＮＡ濃度２０μｇ／ｍＬのときの蛍光強度（ＤＮＡ２０）と、ＤＮＡ濃度０μｇ／ｍＬのときの蛍光強度（ＤＮＡ０）との比（ＤＮＡ２０／ＤＮＡ０）である。

また、ＤＮＡの塩基対間に化合物がインターカレートすることで吸光スペクトルが長波長側へとシフトする（深色効果）ため、ＤＮＡと化合物を混合して吸光波長のシフトを測定した。具体的には、表２に示す化合物を１０μｇ／ｍＬとなるように０．１Ｍ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液に溶解し、これにウシ胸腺ＤＮＡを０μｇ／ｍＬ又は３０μｇ／ｍＬとなるように添加して測定サンプルを調製した。次いで、各測定サンプルの吸光スペクトルを測定し、吸光波長（ピークトップの波長）を求めた。結果を表２に示す。

図４及び表１に示すとおり、Ｒ^１１、Ｒ^１２、Ｒ^１３及びＲ^１４が全て水素原子であるＭｅｔｈｉｄｉｕｍは、ＤＮＡ濃度に比例して蛍光強度が増強しており、ＤＮＡにインターカレーションしていることが分かる。一方、他の誘導体（Ｉｓｏｐｒｏｐｙｌ体、Ｃｙｃｌｏｂｕｔｙｌ体、Ｉｓｏｂｕｔｙｌ体、Ｄｉ−ｉｓｏｐｒｏｐｙｌ体）は、蛍光強度の増強は見られず、ＤＮＡへのインターカレーションがほとんど生じていないことが分かる。同様に、表２に示すとおり、Ｍｅｔｈｉｄｉｕｍは、吸光波長が大きくシフトしており、ＤＮＡにインターカレーションしていることが分かる。一方、他の誘導体（Ｉｓｏｐｒｏｐｙｌ体、Ｃｙｃｌｏｂｕｔｙｌ体、Ｉｓｏｂｕｔｙｌ体、Ｄｉ−ｉｓｏｐｒｏｐｙｌ体）は、吸光波長の変化が小さく、ＤＮＡへのインターカレーションがほとんど生じていないことが分かる。これらの結果から、Ｒ^１１、Ｒ^１２、Ｒ^１３又はＲ^１４が嵩高い置換基を有することで、ＤＮＡの２重らせん内に侵入しにくくなり、ＤＮＡへのインターカレーションが生じにくくなると考えられる。

〔試験例５：蛍光計測〕
前駆体化合物（式（Ｂ１）で表される化合物）から下記式（Ａ２３）で表される化合物（以下、「イソプロピル還元体」ともいう。）を合成した。

イソプロピル還元体は、下記スキームに従って合成した。

（工程１７：化合物１７の合成）
アルゴン雰囲気下、４，４’−ジニトロビフェニルアミン（３．１１ｇ）をトルエン（６０ｍＬ）に溶解させ、４−フルオロベンゾイルクロリド（２．４ｇ）を加えた。１２５℃にて２４時間還流撹拌した。得られた固体を濾取し、エーテル、温メタノール（５０℃）で洗浄した。得られた固体を真空で十分に乾燥させ、黄土色固体の化合物１７（４．３ｇ）を得た。

（工程１８：化合物１８の合成）
化合物１７（４．２９ｇ）をエタノール（５０ｍＬ）に溶解させ、１０％パラジウム炭素（１９１ｍｇ）を加えた。この溶液を０℃に冷却し、ヒドラジン水溶液（５．６ｇ）を滴下した。その後、９０℃で３時間加熱還流した。反応液を室温まで冷却し、セライトろ過し、減圧濃縮した。得られた固体を酢酸エチルに溶解させ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水、飽和食塩水で分液ロートを用いて洗浄した。得られた有機層に硫酸ナトリウムを加え乾燥後、濾過により乾燥剤を取り除いた。濾液の溶媒を減圧除去し、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）にて精製し、黄色固体の化合物１８（３．５５ｇ）を得た。

（工程１９：化合物１９の合成）
化合物１８（３．５５ｇ）に炭酸カリウム（４．７ｇ）、ジクロロメタン（８０ｍＬ）と水（８０ｍＬ）、ギ酸メチルクロリド（４．１６ｇ）を加え、室温にて２４時間撹拌した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムを加え乾燥した。乾燥剤をろ過により除去したのち、溶媒を減圧留去し、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）にて精製し、白色固体の化合物１９（２．３ｇ）を得た。

（工程２０：化合物２０の合成）
化合物１９（１．３ｇ）と塩化ホスホリル（１５ｍＬ）を混合し、１２０℃で６時間加熱還流撹拌を行った。その後、反応溶液を冷却しながら水酸化ナトリウムと炭酸ナトリウムを用いてｐＨ８．０となるように中和し、有機物を酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で洗浄後、得られた有機層に硫酸ナトリウムを加え乾燥した。乾燥剤をろ過により除去したのち、溶媒を減圧除去し、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）にて精製し、黄色固体の化合物２０（９４０ｍｇ）を得た。

（工程２１：化合物２１の合成）
化合物２０（８９０ｍｇ）と４８％臭化水素酸（２０ｍＬ）を混合し、１４０℃で２４時間加熱還流した。その後、反応溶液を冷却しながら水酸化ナトリウムと炭酸ナトリウムを用いてｐＨ８．０となるように中和し、有機物を酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で洗浄後、得られた有機層に硫酸ナトリウムを加え乾燥した。乾燥剤をろ過により除去したのち、溶媒を減圧除去し、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）にて精製し、茶色固体の化合物２１（５４０ｍｇ）を得た。

（工程２２：化合物２２の合成）
化合物２１（３１０ｍｇ）と二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｂｏｃ_２Ｏ，５４０ｍｇ）をｔｅｒｔ−ブチルアルコール（２５ｍＬ）に溶解させ、４０℃で２４時間撹拌させた。室温に戻した後、減圧濃縮し、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）にて精製し、白色固体の化合物２２（５６６ｍｇ）を得た。

（工程２３：化合物２３の合成）
化合物２２（４４３ｍｇ）をテトラヒドロフラン（６ｍＬ）に溶解させ、ヨードメタン（６ｍＬ）を滴下した。１２０℃で３日間攪拌したのち、室温まで冷却し、減圧濃縮した。残った残渣を酢酸エチルで洗浄し、黄土色固体の化合物２３を得た。化合物２３は、更なる精製は行わずに、次の工程に使用した。

（工程２４：化合物２４の合成）
化合物２３をメタノール（２．０ｍＬ）に溶解させ、水素化ホウ素ナトリウム（４６ｍｇ）を滴下した。室温で３０分間攪拌したのち、エバポレーターで溶媒を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトクロマトグラフィー（ジクロロメタン：エーテル＝２０：１）にて精製し、黄土色固体の化合物２４（１６５ｍｇ）を得た。

（工程２５：化合物２５の合成）
アルゴン雰囲気下、化合物２４（１５０ｍｇ）及びカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（３２５ｍｇ）をＴＨＦ（５．０ｍＬ）に溶解させ、２−ヨードプロパン（４９０ｍｇ）を加え、９０℃にて２４時間加熱還流した。カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１６０ｍｇ）と２−ヨードプロパン（２５０ｍｇ）を追加し、さらに２４時間加熱還流させた。室温まで冷却した後、減圧濃縮し、得られた固体を酢酸エチルに溶解させた。その溶液を水、飽和食塩水で洗浄し、得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥剤をろ過により除去した後、溶媒を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）にて精製し、赤色固体の化合物２５（８０ｍｇ）を得た。化合物２５を脱保護して、イソプロピル還元体を得た。

比較のため、下記式（Ｃ２）で表される化合物（ジヒドロエチジン（ＤＨＥ））を用意した。

２０ｎｍｏｌ／μＬのＳＮＰ溶液（リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）溶液）４μＬをハミルトンシリンジ（２６ゲージ）を使用して０．８μＬ／分の速度でラットの右線条体に注入した。左線条体には、同様の方法でＰＢＳ４μＬを注入した。ＳＮＰを投与したラット（ＳＮＰモデルラット）に対し、ＳＮＰ投与から６０分後にラットの尾静脈から５ｍｇ／ｋｇのＤＨＥ又はイソプロピル還元体をボーラス投与した。投与１時間後に脳を摘出し、２０μｍ厚の凍結切片を作成した。脳の蛍光画像をスキャナータイプ画像解析装置(ＦＬＡ７００：励起波長５３２ｎｍ、フィルター５８０ｎｍ)で得た。

図５は、脳の蛍光画像である。図５（Ａ）及び（Ｂ）は、ＤＨＥを投与したときの結果を示す蛍光画像である。図５（Ｃ）及び（Ｄ）は、イソプロピル還元体を投与したときの結果を示す蛍光画像である。図５（Ａ）及び（Ｃ）は、ＳＮＰモデルラットにおける結果を示す蛍光画像である。図５（Ｂ）及び（Ｄ）は、コントロールラットにおける結果を示す蛍光画像である。

図５に示すとおり、従来技術であるＤＨＥを使用した場合と比較し、本発明に係るイソプロピル還元体を使用した場合は、ＳＮＰを投与した右線条体に高い集積を示した。また、この結果から、活性酸素種の発生を蛍光で画像化できることも分かる。

Claims (5)

1. 下記一般式（１）で表される化合物又はその塩。
   

   

   
   ［一般式（１）中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３及びＲ^４は、それぞれ独立に、水素原子、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルケニル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキニル基、置換基を有していてもよいシクロアルキル基、置換基を有していてもよい芳香族炭化水素基、又は置換基を有していてもよい複素環基を示す。Ｒ^１及びＲ^２は、互いに結合して環を形成していてもよい。Ｒ^３及びＲ^４は、互いに結合して環を形成していてもよい。Ｒ^１及び／又はＲ^２は、−ＮＲ^１Ｒ^２が結合する６員環と結合して環を形成していてもよい。Ｒ^３及び／又はＲ^４は、−ＮＲ^３Ｒ^４が結合する６員環と結合して環を形成していてもよい。Ｒ^５は、−^１１ＣＨ_３、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルケニル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキニル基、置換基を有していてもよいシクロアルキル基、置換基を有していてもよい芳香族炭化水素基、又は置換基を有していてもよい複素環基を示す。Ｒ^６は、−Ｆ、−ＣＨ_３、−^１８Ｆ又は−^１１ＣＨ_３を示す。Ｘ、Ｙ及びＺは、それぞれ独立に、炭素原子、酸素原子、硫黄原子又は窒素原子を示す。ｎは、０又は１である。〕
2. 前記一般式（１）において、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３及びＲ^４が同時に水素原子ではない、請求項１に記載の化合物又はその塩。
3. 前記一般式（１）において、Ｒ^１及びＲ^３が水素原子ではない、請求項１に記載の化合物又はその塩。
4. 請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物又はその塩を有効成分として含有する、活性酸素種イメージング剤。
5. 下記一般式（２）で表される化合物又はその塩。
   

   

   
   ［一般式（２）中、Ｑ^１、Ｑ^２、Ｑ^３及びＱ^４は、それぞれ独立に、水素原子、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルケニル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキニル基、置換基を有していてもよいシクロアルキル基、置換基を有していてもよい芳香族炭化水素基、又は置換基を有していてもよい複素環基を示す。Ｑ^１及びＱ^２は、互いに結合して環を形成していてもよい。Ｑ^３及びＱ^４は、互いに結合して環を形成していてもよい。Ｑ^１及び／又はＱ^２は、−ＮＱ^１Ｑ^２が結合する６員環と結合して環を形成していてもよい。Ｑ^３及び／又はＱ^４は、−ＮＱ^３Ｑ^４が結合する６員環と結合して環を形成していてもよい。Ｑ^５は、−^１１ＣＨ_３、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルケニル基、置換基を有していてもよい直鎖状若しくは分岐状のアルキニル基、置換基を有していてもよいシクロアルキル基、置換基を有していてもよい芳香族炭化水素基、又は置換基を有していてもよい複素環基を示す。Ｑ^６は、ボロン酸基、ボロン酸エステル基、トリフルオロボレート塩基又はトリオールボレート塩基を示す。Ｘ、Ｙ及びＺは、それぞれ独立に、炭素原子、酸素原子、硫黄原子又は窒素原子を示す。ｎは、０又は１である。〕

Images