JP2021019574A - 記憶・学習能維持および/または向上用組成物及び組成物を含む食品、医薬品、飼料 - Google Patents
記憶・学習能維持および/または向上用組成物及び組成物を含む食品、医薬品、飼料 Download PDFInfo
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Landscapes
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Abstract
Description
(1)ラクトバチルス属、ビフィドバクテリウム属、ストレプトコッカス属、ロイコノストック属、ペディオコッカス属のいずれかに属する1つ以上の微生物の菌体または培養物を含む記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
(2)前記ラクトバチルス属がラクトバチルス・アシドフィルス(Lactobacillus acidophilus)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)、ラクトバチルス・ガリナラム(Lactobacillus gallinarum)、ラクトバチルス・ジョンソニィ(Lactobacillus johnsonii)、ラクトバチルス・デルブルッキィ亜種デルブルッキィ(Lactobacillus delbruekii subsp. delbruekii)から選択される1つ以上であることを特徴とする(1)に記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
(3)前記ビフィドバクテリウム属がビフィドバクテリウム・カテヌラータム(Bifidobacterium catenulatum)、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム(Bifidobacterium pseudolongum)、ビフィドバクテリウム・ビフィダム(Bifidobacterium bifidum)、ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)から選択される1つ以上であることを特徴とする(1)に記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
(4)前記ストレプトコッカス属がストレプトコッカス・サーモフィルス(Streptococcus thermophilus)であることを特徴とする(1)に記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
(5)前記ロイコノストック属がロイコノストック・メセンテロイデス亜種デキストラニカム(Leuconostoc mesenteroides subsp. dextranicum)、ロイコノストック・ラクティス(Leuconostoc lactis)から選択される1つ以上であることを特徴とする(1)に記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
(6)前記ペディオコッカス属がペディオコッカス・アシディラクティシ(Pediococcus acidilactici)、ペディオコッカス・ペントサセウス(Pediococcus pentosaceus)から選択される1つ以上であることを特徴とする(1)に記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
(7)前記ラクトバチルス属がラクトバチルス・アシドフィルスSBT1921株、ラクトバチルス・ガセリSBT2056株、ラクトバチルス・ガリナラムSBT0316株、ラクトバチルス・ジョンソニィSBT0307株、ラクトバチルス・デルブルッキィ亜種デルブルッキィSBT0413株から選択される1つ以上であることを特徴とする(2)に記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
(8)前記ビフィドバクテリウム属がビフィドバクテリウム・カテヌラータムSBT11114株、ビフィドバクテリウム・シュードロンガムSBT2922株、ビフィドバクテリウム・ビフィダムSBT10550株、ビフィドバクテリウム・ブレーベSBT10532株、ビフィドバクテリウム・ロンガムSBT10527株から選択される1つ以上であることを特徴とする(3)に記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
(9)前記ストレプトコッカス属がストレプトコッカス・サーモフィルスSBT0118株であることを特徴とする(4)に記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
(10)前記ロイコノストック属がロイコノストック・メセンテロイデス亜種デキストラニカムSBT0096株、ロイコノストック・ラクティスSBT2561株から選択される1つ以上であることを特徴とする(5)に記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
(11)前記ペディオコッカス属がペディオコッカス・アシディラクティシSBT3331株、ペディオコッカス・ペントサセウスSBT2229株から選択される1つ以上であることを特徴とする(6)に記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
(12)(1)乃至(11)のいずれかに記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物を含むことを特徴とする記憶・学習能維持および/または向上用食品、記憶・学習能維持および/または向上用医薬品、記憶・学習能維持および/または向上用飼料。
(13)受託番号がNITE P−02980であるラクトバチルス・アシドフィルスSBT1921株、受託番号がNITE P−02981であるラクトバチルス・ガリナラムSBT0316株、受託番号がNITE P−02982であるラクトバチルス・ジョンソニィSBT0307株、受託番号がNITE P−02983であるビフィドバクテリウム・カテヌラータムSBT11114株、受託番号がNITE P−02984であるビフィドバクテリウム・シュードロンガムSBT2922株、受託番号がNITE P−02985であるビフィドバクテリウム・ビフィダムSBT10550株、受託番号がNITE P−02986であるビフィドバクテリウム・ブレーベSBT10532株、受託番号がNITE P−02987であるビフィドバクテリウム・ロンガムSBT10527株、受託番号がNITE P−02988であるストレプトコッカス・サーモフィルスSBT0118株、受託番号がNITE P−02989であるロイコノストック・メセンテロイデス亜種デキストラニカムSBT0096株、受託番号がNITE P−02990であるロイコノストック・ラクティスSBT2561株、受託番号がNITE P−02991であるペディオコッカス・アシディラクティシSBT3331株、又は受託番号がNITE P−02992であるペディオコッカス・ペントサセウスSBT2229株。
本明細書で用いるC.elegansは野生型であるN2株を用い、「線虫ラボマニュアル」に従って飼育した。
1.試験方法
(1)供試菌
表1に示した菌株をスクリーニングに供した。
(i) 評価サンプルの準備
上記(1)の各供試菌を表2の条件で培養した。培養菌体を遠心分離(7,000×g、4℃、15分)し、上清を廃棄した。菌体は生理食塩水で洗浄した後、菌体の湿重量を求め、0.05g/mlになるようにNGバッファー(0.3% NaCl、1mM CaCl2、1mM MgSO4、25mMリン酸緩衝液[pH6.0])に再懸濁し、C.elegans飼育用プレート(NGMプレート)に200μlずつ播種したものをサンプルプレートとした。コントロールとして、C.elegansの食餌として一般的に用いられている大腸菌OP50株を用いた。
ブリーチ処理により回収したC.elegansの卵を、OP50を播種したプレートに播き、23℃で3日間静置し、若齢成虫を得た。この成虫をNGバッファーで回収し、乳酸菌を播種したプレートもしくはOP50を播種したプレートに移し、23℃で4日間飼育し、加齢成虫を得た。
温度走性試験は、Ito H.ら(J. Neurosci. Methods, 154, 45-52 (2006))に記載の方法に従い以下の通り実施した。二つの恒温槽を準備し、コの字型のアルミ台(21.5cm×60cm×1.5cm厚)の片方の足を低温側(5℃)に、もう片方を高温側(35℃)の恒温槽に浸すことで、アルミ台におよそ5℃から35℃までの直線状温度勾配を形成した。角型シャーレに入れた寒天プレートを20℃が中心となるようにアルミ台の上に置き、上述した若齢成虫もしくは加齢成虫をプレートの中央に放ち、一時間後の温度勾配上のC.elegansの分布を評価した。記憶・学習能は、プレートを温度勾配方向に8等分したときの飼育温度(23℃)近辺の2区画に位置したC.elegansの割合を記憶指数(Memory index)として評価した(図1)。また、ダネット型多重検定により、OP50を摂取した加齢成虫を対照としたときの有意差の有無を評価した(p<0.05を有意差ありと判定した)。
図2にスクリーニング結果を示す。若齢成虫に比べて加齢成虫で記憶指数が低下した。
ラクトバチルス・アシドフィルスSBT1921株、ラクトバチルス・ガセリSBT2056株、ラクトバチルス・ガリナラムSBT0316株、ラクトバチルス・ジョンソニィSBT0307株、ラクトバチルス・デルブルッキィ亜種デルブルッキィSBT0413株、ビフィドバクテリウム・カテヌラータムSBT11114株、ビフィドバクテリウム・シュードロンガムSBT2922株、ビフィドバクテリウム・ビフィダムSBT10550株、ビフィドバクテリウム・ブレーベSBT10532株、ビフィドバクテリウム・ロンガムSBT10527株、ストレプトコッカス・サーモフィルスSBT0118株、ロイコノストック・メセンテロイデス亜種デキストラニカムSBT0096株、ロイコノストック・ラクティスSBT2561株、ペディオコッカス・アシディラクティシSBT3331株、ペディオコッカス・ペントサセウスSBT2229株を摂取した加齢成虫ではOP50を摂取したものと比べて記憶指数が有意に増加した。すなわち、上記菌体を摂取することにより、加齢(老化)に伴って発生する記憶・学習能の低下を予防および/または改善させることができることがわかった
ラクトバチルス・ガリナラムSBT0316株を食用可能な合成培地(0.5%酵母エキス、0.1%トリプチケースペプトン添加)に5重量%摂取し、38℃で15時間培養後、遠心分離で菌体を回収した。回収した菌体を凍結乾燥し、前期菌体の凍結乾燥粉末を得た。この凍結乾燥粉末1gを乳糖5gと混合し、顆粒状に成形して本発明の記憶・学習能維持および/または向上用剤を得た。
第13改正日本薬局方解説書製剤総則「散剤」の規定に準拠し、上記実施例1で得られたラクトバチルス・ガリナラムSBT0316株の凍結乾燥粉末10gに乳糖(日局)400g、バレイショデンプン(日局)600gを加えて均一に混合し、本発明の記憶・学習能維持および/または向上用剤を製造した。
ラクトバチルス・ガリナラムSBT0316株を食用可能な合成培地(0.5%酵母エキス、0.1%トリプチケースペプトン添加)に5重量%摂取し、38℃で15時間培養後、遠心分離で菌体を回収し、回収した菌体を凍結乾燥した。ビタミンC40gまたはビタミンCとクエン酸の等量混合物40g、グラニュー糖100g、コーンスターチと乳糖の等量混合物60gに、この凍結乾燥粉末の凍結乾燥粉末40gを加えて混合した。混合物を袋に詰め、本発明の記憶・学習能維持および/または向上用栄養組成物を製造した。
上記実施例3で得られたラクトバチルス・ガリナラムSBT0316株1gを699gの脱イオン水に溶解した後、40℃まで加熱後、ウルトラディスパーサー(ULTRA−TURRAX T−25;IKAジャパン社製)にて、9,500rpmで20分間撹拌混合した。マルチトール100g、酸味料2g、還元水飴20g、香料2g、脱イオン水176gを添加した後、100mlのガラス瓶に充填し、95℃、15秒間殺菌後、密栓し、本発明の記憶・学習能維持および/または向上用飲料10本(100ml入り)を製造した。
大豆粕12kg、脱脂粉乳14kg、大豆油4kg、コーン油2kg、パーム油23.2kg、トウモロコシ澱粉14kg、小麦粉9kg、ふすま2kg、ビタミン混合物5kg、セルロース2.8kg、ミネラル混合物2kgを配合し、120℃、4分間殺菌して、実施例3で得られたラクトバチルス・ガリナラムSBT0316株10kgを配合して、本発明の記憶・学習能維持および/または向上用飼料を製造した。
ラクトバチルス・ガリナラムSBT0316株を食用可能な合成培地(0.5%酵母エキス、0.1%トリプチケースペプトン添加)に5重量%摂取し、37℃で17時間培養後、遠心分離で菌体を回収し、凍結乾燥した。この凍結乾燥菌体5g、脱脂粉乳1700g、グルコース300g、脱イオン水7695gを混合し、95℃で2時間保持することで加熱殺菌した。これを37℃まで冷却し、乳酸菌スターター(Lb.casei)を300g植菌し、撹拌混合後、37℃に保持したインキュベーター内でpH4.0まで発酵させた。pH4.0到達後、10℃以下まで冷却し、本発明の記憶・学習能維持および/または向上用発酵乳10kgを製造した。
(2)ラクトバチルス・ガリナラムSBT0316株(受託番号:NITE P−02981、受託日:2019年6月26日)、受託先:〒292−0818 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足2−5−8、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター(NPMD)。
(3)ラクトバチルス・ジョンソニィSBT0307株(受託番号:NITE P−02982、受託日:2019年6月26日)、受託先:〒292−0818 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足2−5−8、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター(NPMD)。
(4)ビフィドバクテリウム・カテヌラータムSBT11114株(受託番号:NITE P−02983、受託日:2019年6月26日)、受託先:〒292−0818 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足2−5−8、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター(NPMD)。
(5)ビフィドバクテリウム・シュードロンガムSBT2922株(受託番号:NITE P−02984、受託日:2019年6月26日)、受託先:〒292−0818 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足2−5−8、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター(NPMD)。
(6)ビフィドバクテリウム・ビフィダムSBT10550株(受託番号:NITE P−02985、受託日:2019年6月26日)、受託先:〒292−0818 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足2−5−8、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター(NPMD)。
(7)ビフィドバクテリウム・ブレーベSBT10532株(受託番号:NITE P−02986、受託日:2019年6月26日)、受託先:〒292−0818 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足2−5−8、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター(NPMD)。
(8)ビフィドバクテリウム・ロンガムSBT10527株(受託番号:NITE P−02987、受託日:2019年6月26日)、受託先:〒292−0818 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足2−5−8、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター(NPMD)。
(9)ストレプトコッカス・サーモフィルスSBT0118株(受託番号:NITE P−02988、受託日:2019年6月26日)、受託先:〒292−0818 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足2−5−8、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター(NPMD)。
(10)ロイコノストック・メセンテロイデス亜種デキストラニカムSBT0096株(受託番号:NITE P−02989、受託日:2019年6月26日)、受託先:〒292−0818 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足2−5−8、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター(NPMD)。
(11)ロイコノストック・ラクティスSBT2561株(受託番号:NITE P−02990、受託日:2019年6月26日)、受託先:〒292−0818 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足2−5−8、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター(NPMD)。
(12)ペディオコッカス・アシディラクティシSBT3331株(受託番号:NITE P−02991、受託日:2019年6月26日)、受託先:〒292−0818 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足2−5−8、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター(NPMD)。
(13)ペディオコッカス・ペントサセウスSBT2229株(受託番号:NITE P−02992、受託日:2019年6月26日)、受託先:〒292−0818 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足2−5−8、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター(NPMD)。
Claims (13)
- ペディオコッカス属、ストレプトコッカス属、ロイコノストック属、ビフィドバクテリウム属、ラクトバチルス属のいずれかに属する1つ以上の微生物の菌体または培養物を含む記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
- ペディオコッカス属がペディオコッカス・アシディラクティシ(Pediococcus acidilactici)、ペディオコッカス・ペントサセウス(Pediococcus pentosaceus)から選択される1つ以上であることを特徴とする請求項1に記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
- ストレプトコッカス属がストレプトコッカス・サーモフィルス(Streptococcus thermophilus)であることを特徴とする請求項1に記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
- ロイコノストック属がロイコノストック・メセンテロイデス亜種デキストラニカム(Leuconostoc mesenteroides subsp. dextranicum)、ロイコノストック・ラクティス(Leuconostoc lactis)から選択される1つ以上であることを特徴とする請求項1に記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
- ビフィドバクテリウム属がビフィドバクテリウム・カテヌラータム(Bifidobacterium catenulatum)、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム(Bifidobacterium pseudolongum)、ビフィドバクテリウム・ビフィダム(Bifidobacterium bifidum)、ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)から選択される1つ以上であることを特徴とする請求項1に記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
- ラクトバチルス属がラクトバチルス・アシドフィルス(Lactobacillus acidophilus)、ラクトバチルス・ガセリ(Lactobacillus gasseri)、ラクトバチルス・ガリナラム(Lactobacillus gallinarum)、ラクトバチルス・ジョンソニィ(Lactobacillus johnsonii)、ラクトバチルス・デルブルッキィ亜種デルブルッキィ(Lactobacillus delbruekii subsp. delbruekii)から選択される1つ以上であることを特徴とする請求項1に記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
- ペディオコッカス属がペディオコッカス・アシディラクティシSBT3331株、ペディオコッカス・ペントサセウスSBT2229株から選択される1つ以上であることを特徴とする請求項2に記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
- ストレプトコッカス属がストレプトコッカス・サーモフィルスSBT0118株であることを特徴とする請求項3に記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
- ロイコノストック属がロイコノストック・メセンテロイデス亜種デキストラニカムSBT0096株、ロイコノストック・ラクティスSBT2561株から選択される1つ以上であることを特徴とする請求項4に記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
- ビフィドバクテリウム属がビフィドバクテリウム・カテヌラータムSBT11114株、ビフィドバクテリウム・シュードロンガムSBT2922株、ビフィドバクテリウム・ビフィダムSBT10550株、ビフィドバクテリウム・ブレーベSBT10532株、ビフィドバクテリウム・ロンガムSBT10527株から選択される1つ以上であることを特徴とする請求項5に記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
- ラクトバチルス属がラクトバチルス・アシドフィルスSBT1921株、ラクトバチルス・ガセリSBT2056株、ラクトバチルス・ガリナラムSBT0316株、ラクトバチルス・ジョンソニィSBT0307株、ラクトバチルス・デルブルッキィ亜種デルブルッキィSBT0413株から選択される1つ以上であることを特徴とする請求項6に記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物。
- 請求項1から請求項11のいずれかに記載の記憶・学習能維持および/または向上用組成物を含むことを特徴とする記憶・学習能維持および/または向上用食品、記憶・学習能維持および/または向上用医薬品、記憶・学習能維持および/または向上用飼料。
- 受託番号がNITE P−02991であるペディオコッカス・アシディラクティシSBT3331株、又は受託番号がNITE P−02992であるペディオコッカス・ペントサセウスSBT2229株、受託番号がNITE P−02988であるストレプトコッカス・サーモフィルスSBT0118株、受託番号がNITE P−02989であるロイコノストック・メセンテロイデス亜種デキストラニカムSBT0096株、受託番号がNITE P−02990であるロイコノストック・ラクティスSBT2561株、受託番号がNITE P−02983であるビフィドバクテリウム・カテヌラータムSBT11114株、受託番号がNITE P−02984であるビフィドバクテリウム・シュードロンガムSBT2922株、受託番号がNITE P−02985であるビフィドバクテリウム・ビフィダムSBT10550株、受託番号がNITE P−02986であるビフィドバクテリウム・ブレーベSBT10532株、受託番号がNITE P−02987であるビフィドバクテリウム・ロンガムSBT10527株、受託番号がNITE P−02980であるラクトバチルス・アシドフィルスSBT1921株、受託番号がNITE P−02981であるラクトバチルス・ガリナラムSBT0316株、受託番号がNITE P−02982であるラクトバチルス・ジョンソニィSBT0307株。
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