JP2020535817A - バイオリアクターシステムにおいて使用するための灌流装置 - Google Patents

Abstract

バイオリアクター内のマイクロキャリアにおける細胞培養物の増殖中にバイオリアクターから流体培地を回収するための灌流装置が開示される。バイオリアクター内で、マイクロキャリア上に含有される細胞を培養するための方法も開示される。灌流装置は、フィルター部材に取り付けられた中空管状部材を備える。フィルター部材は、流体培地をバイオリアクターから比較的高い流量で回収することが可能な孔サイズ及び容積を有する。【選択図】図１

Description

関連出願
[0001]本出願は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれている、２０１７年９月２９日出願の米国仮特許出願シリアル番号第６２／５６５，１８７号に基づき、その優先権を主張する。

[0002]生物学的反応又は過程が実験室又は工業規模で実施できる装置であるバイオリアクターは、バイオ医薬品産業内で広く使用されている。バイオリアクターは、バイオリアクターに供給された生体物質が、反応時間の終了までバイオリアクター内に留まるバッチ用途で使用できる。代替的に、バイオリアクターは、流体培地内に含有される栄養素を補充し、場合によっては、過程中に生成される損傷による副生成物を除去するために、バイオリアクター内に含有される流体培地が周期的に又は連続して除去され、バイオリアクターに再供給される、灌流用途で使用できる。

[0003]いくつかのバイオリアクターシステムにおいて、マイクロキャリアは、細胞増殖を促進するためにバイオリアクターに付加される。例えば、細胞は、更なる増殖及び繁殖のためにマイクロキャリアの表面に接着することができる。このようにして、マイクロキャリアは、リアクター内での細胞培養物増殖のためのより大きな表面積を提供することができる。実際は、ある動物細胞等のいくつかの付着依存性細胞は、増殖及び分裂するために表面に付着する必要がある。

[0004]マイクロキャリアは、ポリマーを含む様々な異なる材料から作製することができる。マイクロキャリアは、任意の適した形状を有することができ、いくつかの用途では丸いビーズを含むことができる。マイクロキャリアは、一般的に、約２００ミクロン（２００マイクロメートル）〜約３５０ミクロン（３５０マイクロメートル）の粒子サイズを有することができる。いくつかのシステムにおいて、マイクロキャリアは、バイオリアクターシステム内の増殖条件を最適化及び最大化する全体撹拌（ｇｅｎｅｒａｌ ａｇｉｔａｔｉｏｎ）によって生じる培養培地内に懸濁される。

[0005]マイクロキャリアを含有するバイオリアクターシステムにおいて過去にあった１つの問題は、マイクロキャリアも除去することも、マイクロキャリア又はマイクロキャリア上で増殖している細胞を損傷することもなくバイオリアクターから流体を高速に除去する能力である。マイクロキャリアを含有するバイオリアクターシステムから出る流量を増大させる試みの結果として、不適切にサイズ設定された浸漬管、マイクロキャリアによって生じた詰まり、及び／又は吸引ヘッドが流れを駆動するポンプから上流に作成されたことに起因して潰されたチューブに起因して、流れが妨げられるか又は遮断される可能性がある。上記に鑑みて、マイクロキャリアを含有するバイオリアクターから流体培養培地を高速に除去するための装置及び方法に対する需要が存在する。

[0006]一般的に、本開示は、バイオリアクター又はリアクター内で増殖している細胞を損傷することなく、バイオリアクターから比較的高い流量で流体培養培地を除去することが可能な灌流装置を対象とする。より具体的には、本開示は、マイクロキャリアを含有するバイオリアクターから、比較的高い流量で培養流体培地を除去するように特に設計された灌流装置を対象とする。以下でより詳細に説明されるように、灌流装置は、マイクロキャリア又はマイクロキャリアに付着した細胞を除去することも害することもなく流体を除去するために特に良好に適合されている。本開示は、バイオリアクターシステムにおける細胞増殖を促進するための方法も対象とし、この方法では、細胞の補充及び更なる増殖のために培養流体培地を除去するのに灌流装置が使用される。

[0007]１つの実施形態では、例えば、本開示は、バイオリアクターから流体を灌流するための中空管状部材を備える灌流装置を対象とする。中空管状部材は、バイオリアクター内に挿入するのに十分な長さを有することができる。例えば、中空管状部材は、バイオリアクターの底部に向かって延びるのに十分な長さを有することができる。中空管状部材は、バイオリアクターの頂部又は側面におけるポートを通じて延びることができる。中空管状部材は、第１の開口部を画定する第１の端部及び第２の開口部を画定する第２の反対側の端部を有する。第２の開口部は、バイオリアクター内の流体培地への挿入、及び流体培地の回収のためのものである。中空管状部材の第２の開口部は、バイオリアクターから望ましい容積流量を回収することが可能であるように設計された断面積を有することができる。

[0008]本開示によれば、灌流装置は、中空管状部材の第２の端部に配置され、第２の端部に取り付けられたフィルター部材を更に備える。フィルター部材は、第２の開口部を完全に取り囲み包囲する。フィルター部材は、中空管状部材の第２の端部を越えて延びる長さを有し、包囲された容積を画定する。包囲された容積は、バイオリアクターがマイクロキャリアを含有するときであっても望ましい流体流量に適したサイズである。例えば、１つの実施形態では、第２の開口部の断面積とフィルター部材の表面積との間の比は約１：５〜約１：２００、例えば約１：１５〜約１：１００である。本明細書で使用する場合、フィルター部材の表面積とは、流体が中空管状部材に入ることを可能にするフィルター部材の多孔部分の総表面積である。

[0009]１つの実施形態では、フィルター部材は多孔メッシュを含む。多孔メッシュは、例えば、ステンレススチールスクリーン又はポリマーメッシュ等のスクリーンを含むことができる。１つの実施形態では、メッシュは、約６０ミクロン（６０マイクロメートル）超、例えば約７０ミクロン（７０マイクロメートル）超、例えば約８０ミクロン（８０マイクロメートル）超の平均孔サイズを有する。例えば、メッシュの平均孔サイズは、約６０ミクロン（６０マイクロメートル）〜約１５０ミクロン（１５０マイクロメートル）であり得る。１つの実施形態では、メッシュ上の孔は、すべて概ね一様なサイズを有する。１つの実施形態では、メッシュの孔サイズは、約６０ミクロン（６０マイクロメートル）〜約１５０ミクロン（１５０マイクロメートル）である。

[0010]中空管状部材及び第２の開口部は、一般的に、約２ｍｍ超、例えば約４ｍｍ超、例えば約８ｍｍ超、例えば約１０ｍｍ超、例えば約１２ｍｍ超、例えば約１４ｍｍ超、例えば約１６ｍｍ超、例えば約１８ｍｍ超、例えば約２０ｍｍ超の直径を有することができる。中空管状部材の直径は、一般的に、約５０ｍｍ未満、例えば約３０ｍｍ未満、例えば約２０ｍｍ未満、例えば約１４ｍｍ未満である。中空管状部材は、ステンレススチール又はポリマー等の様々な異なる材料から作製することができる。１つの実施形態では、中空管状部材は、第１の端部から第２の端部まで直線状である。代替的な実施形態では、中空管状構造は、第２の端部が、バイオリアクター内で回転している可能性があるインペラと干渉しないような形状を有することができる。例えば、１つの実施形態では、中空管状部材は、第１の直線状のセクション、第２の直線状のセクション、並びに第１の直線状のセクション及び第２の直線状のセクションの間に位置決めされた角セクションを含む。角度付きセクションは、第１の直線状のセクションから、約２５°〜約４５°の角度で延びることができる。同様に、角度付きセクションは、第２の直線状のセクションから、約２５°〜約４５°の角度で延びることができる。１つの実施形態では、第１の直線状のセクション及び第２の直線状のセクションは、バイオリアクターを通って延びる垂直軸に平行である。

[0011]１つの実施形態では、中空管状部材は、第２の端部に配置された角部材も含むことができる。中空管状部材は、角部材に遷移する直線状の部材を含むことができる。角部材は、直線状のセクションに対し、約５０°〜約９０°の角度にあることができる。例えば、１つの実施形態では、角部材は、中空管状部材の端部において直角を形成する。これに関して、灌流装置がバイオリアクター内に延びるとき、角部材は、バイオリアクターの底部に向かって位置決めすることができ、バイオリアクターの底面と概ね平行にすることができる。例えば、１つの実施形態では、角部材は、バイオリアクター内に含有されるインペラの下にフィルター部材を設置するように設計することができる。

[0012]１つの実施形態では、中空管状部材及びフィルター部材は、バイオリアクターのポートへの無菌閉鎖式接続のために完全に包囲することができる。プラスチックの可撓性ベローズは、中空管状部材及びフィルター部材を包囲することができる。無菌接続ポートをベローズの一方の端部に取り付けることができる。バイオリアクターポートは、適合する無菌コネクターを有することができる。バイオリアクターの適合する無菌コネクターとベローズとが接続されると、ベローズを潰すことができ、フィルター部材及び中空管状部材をバイオリアクターポート内に挿入することができる。

[0013]１つの実施形態では、灌流装置は、バイオリアクターの側壁又は底壁におけるフィルター部材を含むことができる。フィルター部材は、バイオリアクターの側壁又は底壁におけるメッシュパッチであり得る。可撓性円錐部は、バイオリアクターからの流体の出力のために、メッシュパッチを中空管状部材に接続することができる。

[0014]本開示はまた、バイオリアクター内で細胞培養物を増殖させるための方法を対象とする。本方法は、マイクロキャリアを含有するバイオリアクター内で細胞を接種することを含む。生体細胞は、連続した細胞増殖のためにマイクロキャリアに付着することができる。バイオリアクターは、増殖している細胞培養物に栄養素及び栄養物（ｆｏｏｄ）を提供するための流体培地を含有することができる。

[0015]本開示によれば、本方法は、上記灌流装置を使用してバイオリアクターから流体培地を連続的又は周期的に除去するステップを更に含む。１つの実施形態では、例えば、灌流装置は、一日あたり約２０Ｌ超、例えば一日あたり約２５Ｌ超、例えば一日あたり約３０Ｌ超、例えば一日あたり約３５Ｌ超、例えば一日あたり約４０Ｌ超、例えば一日あたり約４５Ｌ超、例えば一日あたり約５０Ｌ超の速度で流体培地を除去するように設計することができる。

[0016]流体培地がバイオリアクターから除去される際、マイクロキャリアに付着した生体細胞の増殖を更に促進するために、新たな流体培地がバイオリアクターに加えられる。望ましい量の細胞増殖の後、バイオリアクターに離型剤を加え、細胞をマイクロキャリアから分離させることができる。次に、細胞を採取し、所望に応じて使用することができる。

[0017]本開示のその他の特徴及び態様は、下記においてより詳細に議論される。

[0018]本開示の完全かつ有効な開示は、添付図面の参照を含め、本明細書の残りの部分においてより具体的に記載される。

[0019]本開示によるバイオリアクターシステムの１つの実施形態の断面図である。 [0020]本開示に従って作製された灌流装置の１つの実施形態の側面図である。 [0021]本開示に従って作製された灌流装置の別の実施形態の側面図である。 [0022]本開示による、灌流装置に取り付けられたフィルター部材の１つの実施形態の斜視図である。 [0023]図４Ａで例証するフィルター部材の側面図である。 [0024]本開示に従って作製された灌流装置の別の実施形態の側面図である。 [0025]本開示によるバイオリアクターシステムの別の実施形態の斜視図である。 [0026]バイオリアクターと灌流装置との間に無菌閉鎖式接続を有するバイオリアクターシステムの１つの実施形態の斜視図である。 バイオリアクターと灌流装置との間に無菌閉鎖式接続を有するバイオリアクターシステムの１つの実施形態の斜視図である。 バイオリアクターと灌流装置との間に無菌閉鎖式接続を有するバイオリアクターシステムの１つの実施形態の斜視図である。 [0027]本開示によるバイオリアクターシステムの別の実施形態の斜視図である。 [0028]図８Ａで例証するバイオリアクターシステムと共に使用できる灌流装置の側面図である。 [0029]本開示によるバイオリアクターシステムの別の実施形態の側面図である。 [0030]本発明に従って作製された灌流装置の精度試験の結果として得られるデータを例証する。 本発明に従って作製された灌流装置の精度試験の結果として得られるデータを例証する。

[0031]本明細書及び図面における参照符号の使用の繰返しは、本発明の同じ又は類似の特徴又は要素を表すことが意図される。

[0032]本考察は、代表的な実施形態の説明に過ぎず、本開示のより広い態様を制限するようには意図されないものと当業者には理解されるであろう。

[0033]一般的に、本開示は、バイオリアクター内で細胞及び／又は細胞産物を培養し繁殖させるための方法及びシステムを対象とする。本開示によれば、哺乳動物細胞等の生体細胞が、バイオリアクター内の適したマイクロキャリアと組み合わされる。細胞増殖を促進するために、細胞はマイクロキャリアに付着する。バイオリアクターは、流体増殖培地等の流体培地を含有する。生体細胞は、バイオリアクターから望ましい量の細胞を採取することができるまで、細胞再生及び増殖を促進するのに適した条件下及び適した培養培地内で培養される。

[0034]本開示によれば、１つ又は複数のマイクロキャリアを含有することに加えて、バイオリアクターは、細胞培養工程中、灌流モードで実行されるように設計される。特に、バイオリアクター内に含有される流体培地は、連続的に又は少なくとも周期的に除去され、補充される。過去には、リアクター内の最適な増殖条件を維持するのに十分な流量でマイクロキャリアを含有するバイオリアクターから液体培地を除去することに問題があった。これに関して、本開示は、マイクロキャリアも除去することなく、マイクロキャリアを損傷することなく、かつ／又はバイオリアクター内の細胞培養物を損傷することなく、バイオリアクターから流体培地を高速に除去することが可能な灌流装置を対象とする。

[0035]図１を参照すると、本開示によるバイオリアクターシステムの１つの実施形態が示される。バイオリアクターシステムは、バイオリアクター１０を含む。バイオリアクター１０は、流体増殖培地内で懸濁されたマイクロキャリアに付着した細胞培養物を受けるためのバイオリアクター容積１２を含む中空容器又はコンテナを含む。図１に示すように、バイオリアクターシステムは、インペラ１６等の撹拌機に結合された回転可能シャフト１４を更に含むことができる。

[0036]バイオリアクター１０は、様々な異なる材料から作製することができる。１つの実施形態では、例えば、バイオリアクター１０は、ステンレススチール等の金属から作製することができる。金属バイオリアクターは、通常、再利用されるように設計される。

[0037]代替的に、バイオリアクター１０は、可撓性ポリマーフィルムから作製された使い捨てバイオリアクターを含むことができる。フィルム又は形状適合材料は、液体不透過性とすることができ、親水性の内面を有することができる。１つの実施形態では、バイオリアクター１０は、望ましい形状を想定するために、金属コンテナ等の剛体構造内に挿入されるように設計された可撓性ポリマーフィルムから作製することができる。可撓性ポリマーフィルムを作製するのに使用可能なポリマーは、ポリオレフィンポリマー、例えば、ポリプロピレン及びポリエチレン等を含む。代替的に、可撓性ポリマーフィルムは、ポリアミドから作製することができる。更に別の実施形態では、可撓性ポリマーフィルムは、異なるポリマー材料の複数の層から形成することができる。１つの実施形態では、可撓性ポリマーフィルムは、ガンマ線照射することができる。

[0038]バイオリアクター１０は、任意の適切な容積を有することができる。例えば、バイオリアクター１０の容積は、約１００ｍｌ〜約１０，０００Ｌ以上であり得る。例えば、バイオリアクター１０の容積１２は、約０．５Ｌ超、例えば約１Ｌ超、例えば約２Ｌ超、例えば約３Ｌ超、例えば約４Ｌ超、例えば約５Ｌ超、例えば約６Ｌ超、例えば約７Ｌ超、例えば約８Ｌ超、例えば約１０Ｌ超、例えば約１２Ｌ超、例えば約１５Ｌ超、例えば約２０Ｌ超、例えば約２５Ｌ超、例えば約３０Ｌ超、例えば約３５Ｌ超、例えば約４０Ｌ超、例えば約４５Ｌ超であり得る。バイオリアクター１０の容積は、一般的に、約２０，０００Ｌ未満、例えば約１５，０００Ｌ未満、例えば約１０，０００Ｌ未満、例えば約５，０００Ｌ未満、例えば約１，０００Ｌ未満、例えば約８００Ｌ未満、例えば約６００Ｌ未満、例えば約４００Ｌ未満、例えば約２００Ｌ未満、例えば約１００Ｌ未満、例えば約５０Ｌ未満、例えば約４０Ｌ未満、例えば約３０Ｌ未満、例えば約２０Ｌ未満、例えば約１０Ｌ未満である。１つの実施形態では、例えば、バイオリアクターの容積は、約１Ｌ〜約５Ｌであり得る。代替的な実施形態では、バイオリアクターの容積は、約２５Ｌ〜約７５Ｌであり得る。更に別の実施形態では、バイオリアクターの容積は、約１，０００Ｌ〜約５，０００Ｌであり得る。

[0039]インペラ１６に加えて、バイオリアクター１０は、バッフル、スパージャー、ガス供給部、ポート等の、生体細胞の培養及び繁殖を可能にする様々な追加の機器を含むことができる。更に、バイオリアクターシステムは、圧力、泡沫、ｐＨ、溶存酸素、溶存二酸化炭素等を測定及び監視するための様々なプローブを含むことができる。

[0040]１つの実施形態では、バイオリアクター１０は、複数のポートを画定する頂部を含む。ポートは、流体及びその他の材料を追加及び除去するための、バイオリアクター１２に入る、及びバイオリアクター１２から出る供給ライン及びフィードラインを含むことができる。加えて、バイオリアクターシステムは、バイオリアクター１０内の培養物の質量を測定するためにロードセルと関連付けて設置することができる。

[0041]代替的な実施形態では、複数のポートは、バイオリアクター１０上の様々な場所に配置することができる。例えば、１つの実施形態では、ポートは、図６〜図８に示すように、バイオリアクターの側壁上に配置することができる。別の実施形態では、図９に示すように、ポートは、バイオリアクターの底部に配置することができる。例えば、可撓性ポリマーフィルムから作製されたバイオリアクターは、容器の底部に配置されたポートを含むことができる。

[0042]図１に示すように、バイオリアクター１０は、少なくとも１つのインペラ１６に取り付けられた回転可能シャフト１４を含むことができる。回転可能シャフト１４は、シャフト１４及びインペラ１６を回転させるためのモーターに結合することができる。インペラ１６は、金属又は生体適合性ポリマー等の任意の適切な材料から作製することができる。バイオリアクターシステムにおける使用に適したインペラの例は、水中翼インペラ、高ソリディティのピッチブレードインペラ、高ソリディティの水中翼インペラ、Ｒｕｓｈｔｏｎインペラ、ピッチブレードインペラ、穏やかなマリンブレードインペラ等を含む。加えて、回転可能シャフト１４は、図１に示すように単一のインペラ１６に結合することができるか、又は２つ以上のインペラに結合することができる。２つ以上のインペラを含有するとき、インペラは、回転シャフト１４に沿って離隔することができる。１つの実施形態では、インペラ１６は、マイクロキャリアに付着した生体細胞を損傷することなく、バイオリアクター１０に含有されるマイクロキャリアを流体培地内に懸濁した状態に維持するのに十分な量回転される。

[0043]１つの実施形態では、バイオリアクターシステムは、１つ又は複数のプログラマブルデバイス又はマイクロプロセッサを備えることができるコントローラーも含むことができる。コントローラーは、細胞増殖を促進するために、バイオリアクター１０内で最適な状態を維持するのに使用できる。コントローラーは、例えば、熱循環器、ロードセル、制御ポンプと通信し、これらを制御し、様々なセンサ及びプローブから情報を受信することができる。例えば、コントローラーは、ｐＨ、溶存酸素圧、溶存二酸化炭素、温度、撹拌条件、アルカリ条件、流体増殖培地条件、圧力、泡沫レベル等を制御及び／又は監視することができる。例えば、ｐＨ読み値に基づいて、コントローラーは、酸又はアルカリの必要量を加えることによって、ｐＨレベルを調節するように構成することができる。コントローラーは、二酸化炭素ガス供給を使用してｐＨを下げることもできる。同様に、コントローラーは、温度情報を受信し、温度を上下させるためにバイオリアクターを取り囲むウォータージャケットに供給される流体を制御することができる。

[0044]本開示によれば、図１に示すように、バイオリアクター１０は、灌流装置２０と連通することもできる。灌流装置２０は、ポートを通じてバイオリアクター１０の頂部内を延びることができる。示すように、灌流装置２０は、バイオリアクター１０内に延び、インペラ１６と干渉することなくバイオリアクターの底部に隣接して設置することができる。灌流装置２０は、バイオリアクター内に含有されるマイクロキャリアを回収することなく、バイオリアクター１０から液体培地を連続的に又は周期的に回収するためのものである。本開示の灌流装置２０は、例えば、マイクロキャリアも除去することも、マイクロキャリアに付着した細胞を損傷することもなく、比較的高い流量で流体を回収することができる。マイクロキャリアは、例えば、生体適合性のビーズ又は小粒子を含むことができ、生体細胞を繁殖させるための付着部位を提供することができる。１つの実施形態では、例えば、マイクロキャリアは、多糖等のポリマーから作製することができる。１つの特定の実施形態では、例えば、マイクロキャリアはデキストランから作製することができる。マイクロキャリアは、約１５０ミクロン（１５０マイクロメートル）〜約４００ミクロン（４００マイクロメートル）の粒子サイズ又は直径を有することができる。

[0045]図２、図４Ａ及び図４Ｂを参照すると、本開示に従って使用できる灌流装置２０の１つの実施形態が示される。図２を参照すると、灌流装置２０は、中空管状部材２２を含む。中空管状部材２２は、第１の開口部を画定する第１の端部２４及び第２の開口部を画定する第２の反対側の端部２６を含むことができる。中空管状部材２２は、細胞培養物と生体適合性のある任意の適した材料から作製することができる。例えば、中空管状部材２２は、ステンレススチール等の金属から作製することができる。

[0046]代替的な実施形態では、中空管状部材はポリマーから作製することができる。１つの実施形態では、例えば、灌流装置２０は、１回使用後に破棄されるように設計することができる。この実施形態では、中空管状部材２２は、ポリマー材料から作製することができる。例えば、中空管状部材は、ポリオレフィン、例えばポリプロピレン又はポリエチレン等から作製することができる。代替的に、中空管状部材２２はポリアミドから作製することができる。そうでない場合、中空管状部材２２は、ガンマ照射することができるプラスチック材料から作製することができる。

[0047]中空管状部材２２は、可撓性又は剛体であり得る。中空管状部材２２、第１の開口部及び第２の開口部は、一般的に、特定の用途、及びバイオリアクター１０から回収される必要がある流体量のためにサイズ設定された直径を有することができる。例えば、中空管状部材２２の直径は、一般的に、約２ｍｍ超、例えば約４ｍｍ超、例えば約６ｍｍ超、例えば約８ｍｍ超、例えば約１０ｍｍ超であり得る。中空管状部材２２の直径は、一般的に、約４０ｍｍ未満、例えば約３０ｍｍ未満、例えば約２０ｍｍ未満、例えば約１５ｍｍ未満、例えば約１１ｍｍ未満、例えば約１０ｍｍ未満、例えば約８ｍｍ未満である。

[0048]中空管状部材２２の第１の端部２４は、中空管状部材２２をプラスチックチューブに接続するためのチューブ接続部を含むことができる。チューブ接続部は、様々な溶接可能なチューブタイプのうちの任意のものであり得る。第１の端部２４のチューブ接続部の外径は、一般的に、特定の用途、及びバイオリアクターから回収される必要がある流体量のためにサイズ設定された外径を有することができる。例えば、チューブ接続部の外径は、一般的に、約３ｍｍ以上、例えば約６ｍｍ以上、例えば約１３ｍｍ以上、例えば約１９ｍｍ以上、例えば約２６ｍｍ以上であり得る。チューブ接続部の外径は、一般的に、約２６ｍｍ以下である。

[0049]中空管状部材２２は、単一の材料片から作製することができるか、又は共に接続された複数の片から作製することができる。中空管状部材２２は、第１の端部２４から第２の端部２６まで直線状であり得る。代替的に、中空管状部材２２は、図２に示すように角部材２８を含むことができる。図２で例証する実施形態では、角部材２８は、バイオリアクターから出る流体の流れを望ましい方向に向けるためにバイオリアクター１０から延びる。図に示す角部材２８は、一般的に、中空管状部材２２の直線状のセクション３０と直角を成す。しかしながら、角部材２８は、中空管状部材２２の直線状の又は垂直のセクション３０に対し任意の適した角度にあり得る。

[0050]灌流装置は、バイオリアクター１０から流体を除去するために使用されるとき、中空管状部材２２の第２の端部２６がバイオリアクター１０の底面に隣接するように十分な長さを有するべきである。これに関して、灌流装置２０の直線状のセクション３０は、一般的に、バイオリアクター１０の長さ（又は奥行き）よりも長い長さを有する。例えば、直線状のセクション３０の長さは、バイオリアクター１０の長さの約１１０％超、例えば約１２０％超、例えば約１５０％超であり得る。一般的に、直線状のセクション３０は、バイオリアクター１０の長さの約５００％未満、例えば３００％未満、例えば約２００％未満である。

[0051]本開示によれば、灌流装置２０は、中空管状部材２２の第２の端部２６に位置決めされたフィルター部材３２を更に含む。フィルター部材３２は、図４Ａ及び図４Ｂに更に詳細に示される。フィルター部材３２は、マイクロキャリアの流れを許容することも、マイクロキャリアをその他の形で損傷することもなく、灌流装置２０を通る流体培地の比較的高い流量を可能にするために十分多孔性である。例えば、１つの実施形態では、フィルター部材３２は、ステンレススチールスクリーン等の多孔メッシュから作製することができる。代替的に、フィルター部材３２は、ポリマー材料から作製することができる。例えば、１つの実施形態では、フィルター部材３２は、ポリアミドスクリーンメッシュから作製することができる。例えば、ポリマーメッシュは、より可撓性にし、金属から作製されたフィルター要素よりも損傷を受けにくくすることができる。ポリマー中空管状部材２２及びフィルター部材３２を有する灌流装置２０は、フィルター部材３２を取り囲むポリマーシェル（図示せず）を更に含むことができる。

[0052]メッシュは望ましい孔サイズを有することができる。孔サイズは、メッシュにわたって均一にすることもでき、又は不均一にすることもできる。１つの実施形態では、メッシュは、約６０ミクロン（６０マイクロメートル）超、例えば約７０ミクロン（７０マイクロメートル）超、例えば約８０ミクロン（８０マイクロメートル）超、例えば約９０ミクロン（９０マイクロメートル）超の孔サイズを有する。孔サイズは、一般的に、約１５０ミクロン（１５０マイクロメートル）未満、例えば約１３０ミクロン（１３０マイクロメートル）未満、例えば約１２０ミクロン（１２０マイクロメートル）未満、例えば約１１０ミクロン（１１０マイクロメートル）未満である。上記の孔サイズは、非破壊的方式で流体流を最適化することがわかっている。例えば、より小さな孔サイズは、十分な流量を可能にせず、閉塞に関する問題を被る可能性がある。しかしながら、その他の実施形態では、より小さな孔サイズが望ましい場合がある。例えば、その他の実施形態では、孔サイズは、約５０ミクロン（５０マイクロメートル）未満にすることができる。例えば、ポリマーから作製されたフィルター要素は、より小さな孔サイズを有することができる。ポリマーから作製される場合、例えば、孔サイズは、約１８ミクロン（１８マイクロメートル）〜約５０ミクロン（５０マイクロメートル）、例えば約２０ミクロン（２０マイクロメートル）〜約３０ミクロン（３０マイクロメートル）であり得る。

[0053]図４Ａ及び図４Ｂ図を参照すると、フィルター部材３２がより詳細に例証されている。図示のように、フィルター部材３２は、中空管状部材２２の第２の端部２６に取り付けられる。例えば、例証される実施形態では、フィルター部材３２は、中空管状部材２２の第２の端部２６に配置された開口部を完全に取り囲み包囲する。フィルター部材３２は、任意の適した方法又は技法を用いて中空管状部材２２に取り付けることができる。例えば、フィルター部材３２は、中空管状部材２２に溶接することができるか、中空管状部材２２に接着することができるか、又は中空管状部材に機械的に取り付けることができる。１つの特定の実施形態では、例えば、フィルター部材３２は中空管状部材２２に樹脂溶着することができる。

[0054]図４Ｂに示すように、１つの実施形態では、フィルター部材３２は、中空管状部材２２の第２の端部２６を越えて延びる長さＬを有する。このようにして、フィルター部材３２は包囲された容積３４を画定する。包囲された容積３４のサイズは、システムの流れ要件に依拠することができ、第２の端部２６の開口部の断面積に比例することができる。例えば、包囲された容積３４は、特定の用途に望ましい場合がある、十分な流体がフィルター部材を通り中空管状部材２２内へ流れることを可能にするのに十分なサイズであり得る。包囲された容積３４は、例えば、フィルター部材３２の表面積を増大させ、これにより、流体がフィルター部材に入るための更なるエリアを提供し、中空管状部材２２を通る流量を高めることを可能にする。

[0055]例えば、１つの実施形態では、第２の端部２６における開口部の断面積とフィルター部材３２の表面積との比は、約１：５超、例えば約１：１０超、例えば約１：１５超、例えば約１：２０超、例えば約１：２５超、例えば約１：３０超、例えば約１：３５超、例えば約１：４０超であり得る。第２の端部２６における開口部の断面積とフィルター部材３２の表面積３４との比は、一般的に、約１：１０００未満、例えば約１：５００未満、例えば約１：２００未満、例えば約１：１５０未満、例えば約１：１００未満、例えば約１：８０未満であり得る。例えば、第２の端部２６の第２の開口部が、約２ｍｍ〜約２０ｍｍの直径を有するとき、フィルター部材３２は、一般的に、約２０ｍｍ超、例えば約３０ｍｍ超、例えば約４０ｍｍ超、例えば約５０ｍｍ超、かつ一般的に、約５００ｍｍ未満、例えば約３００ｍｍ未満、例えば約１００ｍｍ未満の長さＬを有することができる。

[0056]図４Ａ及び図４Ｂで例証する実施形態では、フィルター部材３２は、傾斜した端部３８において終端する細長い形状を有する。しかしながら、フィルター部材３２は任意の適した形状を有することができることが理解されるべきである。フィルター部材３２の形状は、例えば、バイオリアクター１０内に簡便に設置することが可能でありながら表面積を最大にする形状に依拠することができる。

[0057]本開示によれば、中空管状部材２２の断面積、フィルター部材３２の包囲された容積３４、及びフィルター部材３２の孔サイズは、すべて、流量を最適化するように選択される。特に、本開示の灌流装置２０は、バイオリアクター１０から出る比較的高い流量を可能にするように設計される。１つの実施形態では、例えば、灌流装置２０を通る流量は、バイオリアクター１０の容積に依拠することができる。例えば、灌流装置２０は、一日（２４時間）あたり、バイオリアクターの容積の約５０％超、例えばバイオリアクターの容積の約６０％超、例えばバイオリアクターの容積の約７０％超、例えばバイオリアクターの容積の約８０％超、例えばバイオリアクターの容積の約９０％超、例えばバイオリアクターの容積の約１００％超、例えばバイオリアクターの容積の約１１０％超、例えばバイオリアクターの容積の約１２０％超、例えばバイオリアクターの容積の約１３０％超、例えばバイオリアクターの容積の約１４０％超、例えばバイオリアクターの容積の約１５０％超を回収するように設計することができる。一般的に、灌流装置２０を通る流量は、一般的に、一日あたりバイオリアクターの容積の約５００％未満、例えば一日あたりバイオリアクターの容積の約２００％未満である。

[0058]１つの特定の例では、灌流装置２０は、バイオリアクター１０から、一日あたり約２０Ｌ超の流体、例えば一日あたり約３０Ｌ超の流体、例えば一日あたり約４０Ｌ超の流体、かつ一般的に、一日あたり約１００Ｌ未満の流体を回収するように設計される。

[0059]図２に示す灌流装置２０の実施形態は、バイオリアクター１０内に挿入されるように意図される直線状の又は垂直のセクション３０を含む。直線状の又は垂直のセクション３０は、バイオリアクター１０内に挿入されると、バイオリアクター１０の垂直軸及び／又は回転可能シャフト１４に実質的に平行なままとなる。このため、直線状の又は垂直のセクション３０は、バイオリアクター１０の長さ又は奥行きと少なくとも同じ長さを有する。しかしながら、１つの実施形態では、直線状の又は垂直のセクション３０は、バイオリアクター１０に含有されるインペラ１６と干渉する場合がある。このため、その他の実施形態では、灌流装置２０の形状は、バイオリアクター内でのより良好なフィット性を提供するために変更することができる。

[0060]例えば、図３を参照すると、灌流装置１２０の別の実施形態が示される。灌流装置１２０は、第１の端部１２４及び第２の反対側の端部１２６を含む中空管状部材１２２を含む。第２の端部１２６には、本開示に従って作製されたフィルター部材１３２が取り付けられる。中空管状部材１２２は、第１の端部１２４に位置決めされた角部材１２８を更に含む。

[0061]図３で例証する実施形態では、灌流装置１２０は、第１の直線状のセクション１４０、第２の直線状のセクション１４２及び角セクション１４４を含む。角セクション１４４は、第１の直線状のセクション１４０と第２の直線状のセクション１４２との間に位置決めされる。図１に示すように、角セクション１４４は、灌流装置１２０が、バイオリアクター１０内に含有されたインペラ１６と干渉することを防ぐために、中空管状部材２２に含めることができる。特に、角セクション１４４は、中空管状部材１２２の第２の端部１２６をバイオリアクター１０の壁に隣接して位置決めする。１つの実施形態では、角セクション１４４は、第１の直線状のセクション１４０に対し、約１０°〜約８０°、例えば約２５°〜約４５°の角度を形成することができる。例えば、角セクション１４４と第１の直線状のセクション１４０との間の角度は、一般的に、約２０°超、例えば約３０°超、例えば約４０°超、かつ一般的に、約６０°未満、例えば約５０°未満であり得る。同様に、角セクション１４４と第２の直線状のセクション１４２との間の角度は、約１０°〜約８０°、例えば約２５°〜約４５°であり得る。

[0062]直線状のセクション１４０及び１４２の長さ、並びに角セクション１４４の長さは、バイオリアクター１０の幾何学的形状及び様々なその他の要因に依拠して変動することもできる。１つの実施形態では、例えば、角セクション１４４は、第１の直線状のセクション１４０、第２の直線状のセクション１４２、及び角セクション１４４を合わせた総長の約５％超、例えば約１０％超、例えば約１５％超、例えば約２０％超、かつ一般的に、約５０％未満、例えば約４０％未満、例えば約３０％未満、例えば約２０％未満であり得る。

[0063]図５を参照すると、本開示に従って作製された灌流装置２２０の更に別の実施形態が示される。灌流装置２２０は、第１の端部２２４及び第２の反対側の端部２２６を含む中空管状部材２２２を含む。フィルター部材２３２は、中空管状部材２２２の第２の端部２２６に取り付けられる。中空管状部材２２２は、第１の直線状のセクション２５０、第２の直線状のセクション２４２、並びに第１の直線状のセクション２４０及び第２の直線状のセクション２４２の間に位置決めされた角セクション２４４を含む。灌流装置２２０は、中空管状部材２２２の第１の端部２２４に位置決めされた第１の角部材２２８を更に含む。

[0064]図５で例証する実施形態では、灌流装置２２０は、中空管状部材２２２の第２の端部２２６に位置決めされた第２の角部材２５０を更に含む。第２の角部材２５０は、バイオリアクター１０の底部に隣接してフィルター部材２３２を位置決めするためのものである。例えば、第２の角部材２５０は、第１の直線状のセクション２４０に対し、一般的に、約４０°超、例えば約５０°超、例えば約６０°超、例えば約７０°超、例えば約８０°超、かつ一般的に、約１２０°未満、例えば約１００°未満の角度を形成することができる。例えば、図５に示すように、１つの実施形態では、第２の角部材２５０は、中空管状部材２２２の第１の直線状のセクション２４０と直角を形成する。このようにして、灌流装置２２０は、インペラとの干渉を回避するためにバイオリアクター内に設置することができる。他方で、第２の角部材２５０は、フィルター部材２３２が、特定の用途に応じて、バイオリアクターの底部に沿ってバイオリアクターの中心に向かって又はバイオリアクターの壁に向かって延びることを可能にする。このため、第２の角部材２５０は、望ましい場所にフィルター部材２３２を設置するのに適した長さを有することができる。第２の角部材２５０の長さは、例えば１つの実施形態では、一般的に、約２０ｍｍ超、例えば約３０ｍｍ超、例えば約４０ｍｍ超、例えば約５０ｍｍ超、例えば約６０ｍｍ超、例えば約７０ｍｍ超、例えば約８０ｍｍ超、例えば約９０ｍｍ超、例えば約１００ｍｍ超、かつ一般的に、約５００ｍｍ未満、例えば約３００ｍｍ未満、例えば約２００ｍｍ未満、例えば約１８０ｍｍ未満、例えば約１６０ｍｍ未満、例えば約１４０ｍｍ未満であり得る。しかしながら、第２の角部材２５０の長さは、バイオリアクター１０のサイズ及び容積に依拠することができる。このため、長さは、上記で与えた寸法より大きくすることもでき、又は小さくすることもできる。

[0065]図６を参照すると、本開示に従って作製されたバイオリアクターシステムの更に別の実施形態が示されている。バイオリアクターシステムは、バイオリアクターの側壁上に配置されたポート３１８を有するバイオリアクター３１０を含む。バイオリアクターシステムは、中空管状部材３２２及びフィルター部材３３２を有する灌流装置３２０を更に含む。灌流装置３２０は、ポート３１８に挿入することができる。フィルター部材３３２は、図４Ａ及び図４Ｂにより詳細に示されるものと類似している。灌流装置３２０は、バイオリアクター内で占有される空間量を最小限にすることができ、これにより、いくつかの実施形態では、フィルター部材３３２がより大きな表面積を有するより長いメッシュを含むことを可能にすることができる。例えば図１に示すように、バイオリアクターの頂部におけるポートを通じて挿入される灌流装置の実施形態と比較して、図６に示すように、灌流装置３２０が底部側壁においてバイオリアクター３１０内にアクセスすることを可能にすることによって、バイオリアクター３１０内に貫入する材料の総量が低減する。

[0066]ここで図７Ａ〜図７Ｃを参照すると、本開示に従って作製されたバイオリアクターシステムの更なる実施形態が示される。バイオリアクターシステムは、バイオリアクターの下側側壁に配置されたポート４１８を有するバイオリアクター４１０を含む。図７Ａ〜図７Ｃの実施形態は、中空管状部材４２２及びフィルター部材４３２を有する灌流装置４２０を更に含む。

[0067]図７Ａ〜図７Ｃに示す実施形態では、灌流装置４２０は、完全に閉じた無菌の進入のための潰れ可能なベローズ構造４４０を更に含む。ベローズ４２０はプラスチックであり得る。中空管状構造４２２及びフィルター部材４３２は、ベローズ４４０内に完全に収納される。ベローズ４４０は、中空管状構造４２２及びフィルター部材４３２を含有するために滅菌することができる包囲された環境を形成する。灌流装置４２０は、無菌接続ポート４４２につながるベローズ４４０内の剛体トンネル４４６を更に含む。無菌接続ポート４４２は、バイオリアクター４１０と互換性のある任意の市販の無菌接続ポートであり得る。例えば、無菌接続ポートは、Ｐａｌｌ Ｂｉｏｔｅｃｈ社によって製造されたＫｌｅｅｎｐａｋ（商標）Ｓｔｅｒｉｌｅ Ｃｏｎｎｅｃｔｏｒ、Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ社によって製造されたＯｐｔａ（登録商標）無菌コネクター、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社によって製造されたＲｅａｄｙＭａｔｅ使い捨てコネクター、又はその他の市販の無菌コネクターであり得る。バイオリアクター４１０は、バイオリアクターの壁のポート４１８内に適合する無菌コネクター４４４を含む。

[0068]図７Ｂに示すように、灌流装置４２０及びバイオリアクター４１０の無菌接続部４４２及び４４４は、まず互いに接続される。無菌接続部４４２及び４４４の間に封止が形成される。次に、図７Ｃに示すように、無菌接続部４４２及び４４４の間に開口部が形成される。次に、ベローズ４４０を潰すことができ、中空管状部材４２２を、バイオリアクター４１０内に通して押し込み、フィルター部材４３２をバイオリアクター４１０内に延ばすことができる。中空管状部材４２２及びフィルター部材４３２がバイオリアクター内に押し込まれるとき、ベローズ４４０は潰れる。

[0069]図８Ａ及び図８Ｂを参照すると、本開示に従って作製されたバイオリアクターシステムの更に別の実施形態が示される。バイオリアクターシステムは、円錐形状の灌流装置５２０を有するバイオリアクター５１０を含む。灌流装置５２０のフィルター部材５３２は、バイオリアクター５１０の壁５１１上のメッシュパッチとして形成される。メッシュパッチは、図８Ｂに示すようにバイオリアクター５１０の側壁５１１に配置することができる。灌流装置５２０は、フィルター部材５３２からアウトレット中空管状部材５２２まで至る円錐部５３６によって形成される包囲された容積５３４を有する。いくつかの実施形態では、円錐部５３６は可撓性であり得る。

[0070]図９を参照すると、本開示に従って作製されたバイオリアクターシステムの更なる実施形態が示される。バイオリアクターシステムは、バイオリアクター６１０のための濾過式排水管としての役割を果たすことができる円錐形状の灌流装置６２０を有するバイオリアクター６１０を含む。灌流装置６２０のフィルター部材６３２は、バイオリアクター６１０の底壁におけるメッシュパッチとして形成される。灌流装置６２０は、フィルター部材６３２からアウトレット中空管状部材６２２に至る円錐部６３６によって形成される包囲された容積６３４を有する。いくつかの実施形態では、円錐部６３６は可撓性であり得る。図９に示す実施形態の設計は、バイオリアクター内にマイクロキャリアのみを残して、最大量の液体がバイオリアクターから外に排水されることを可能にする。マイクロキャリアがメッシュパッチ上に沈殿し、フィルター部材６３２を詰まらせることを防ぐために、図１に示すようなインペラ１６等の撹拌機をバイオリアクター６１０に含めることができる。

実施例
[0071]本開示の実施形態に従って作製されたバイオリアクターシステムにおいて灌流装置を使用して行われる灌流の精度を実証するために、以下の試験が行われた。各試験において、流体培地、マイクロキャリア及び間葉系幹細胞を含有するバイオリアクター内に挿入される灌流装置を含むバイオリアクターシステムが設けられた。無菌フード内で、ポートを通じてバイオリアクター内に灌流装置が挿入された。灌流装置のためのコントローラーが、所定の期間にわたって目標灌流量で灌流装置に接続されたポンプを制御するように設定され、灌流が開始された。試験期間の終了時に、バイオリアクターから灌流された流体培地を含有する廃棄物袋が測定され、目標灌流量が達成されているか否かが判断された。灌流装置の性能が、目標灌流量に対する灌流量のパーセンテージとして測定された。ｙ軸において、目標灌流量に対する１００％の灌流量は、灌流が厳密に目標通りであったことを示す。目標灌流量未満の流体培地の灌流は、例えば、フィルター部材がマイクロキャリアによって詰まっていることを示し得る。データから見てとることができるように、灌流装置は、小スケール（３Ｌのバイオリアクター容積）及び大スケール（５０Ｌのバイオリアクター容積）の双方において１０％以内の精度を一貫して達成した。

[0072]図１０Ａは、図２で例証されるような灌流装置、及び３Ｌのバイオリアクター容積を有するバイオリアクターを用いて行われた試験の結果を示す。この試験は７回実行された。各試験実行からの個々の結果が図１０Ａに示されている。図１０Ａから見てとることができるように、灌流装置は、各試験実行において、設定点の約１０％以内を達成した。

[0073]図１０Ｂは、図３で例証されるような灌流装置、及び５０Ｌのバイオリアクター容積を有するバイオリアクターを用いて行われた試験の結果を示す。この試験は３回実行された。各試験実行からの個々の結果が図１０Ｂに示されている。図１０Ｂから見てとることができるように、灌流装置は、各試験実行において、設定点（５０Ｌ）の１０％以内を達成した。

[0074]本明細書に記載するデバイス、設備、及び方法は、原核細胞系及び／又は真核細胞系を含む任意の望ましい細胞系の培養の際に、及びこの培養と共に使用するのに適する。更に、複数の実施形態では、デバイス、設備、及び方法は、懸濁細胞又は付着依存性（接着性）の細胞の培養に適し、また医薬製品及びバイオ医薬製品−例えばポリペプチド製品、核酸製品（例えば、ＤＮＡ又はＲＮＡ）等、或いは細胞及び／又はウイルス、例えば細胞療法及び／又はウイルス療法で使用されるもの等を製造するように構成された製造業務に適する。

[0075]複数の実施形態では、細胞は、組換え治療薬又は診断薬等の製品を発現又は産生する。下記でより詳細に記載するように、細胞により産生される製品の例として、抗体分子（例えば、モノクロナール抗体、二重特異性抗体）、抗体模倣体（抗原と特異的に結合するが、しかし抗体と構造的に関連しないポリペプチド分子、例えばＤＡＲＰｉｎ、アフィボディ（Ａｆｆｉｂｏｄｙ）、アドネクチン、又はＩｇＮＡＲ等）、融合タンパク質（例えば、Ｆｃ融合タンパク質、キメラサイトカイン）、その他の組換えタンパク質（例えば、グリコシル化されたタンパク質、酵素、ホルモン）、ウイルス治療薬（例えば、腫瘍溶解性抗がんウイルス、遺伝子療法及びウイルス免疫療法用のウイルスベクター）、細胞治療薬（例えば、多能性幹細胞、間葉系幹細胞、及び成人幹細胞）、ワクチン又は脂質カプセル化粒子（例えば、エキソソーム、ウイルス様粒子）、ＲＮＡ（例えばｓｉＲＮＡ等）若しくはＤＮＡ（例えばプラスミドＤＮＡ等）、抗生物質、又はアミノ酸が挙げられるが、但しこれらに限定されない。複数の実施形態では、デバイス、設備、及び方法は、後発生物製剤を製造するのに使用可能である。

[0076]記載の通り、複数の実施形態では、デバイス、設備、及び方法は、真核細胞、例えば哺乳動物細胞、又は下等真核細胞、例えば酵母菌細胞若しくは糸状菌細胞等、又は原核細胞、例えばグラム陽性細胞若しくはグラム陰性細胞等、及び／或いは真核細胞又は原核細胞の生成物、例えば、大規模なスケールで真核細胞により合成されるタンパク質、ペプチド、抗生物質、アミノ酸、核酸（例えばＤＮＡ又はＲＮＡ等）の製造を可能にする。本明細書において別途記載しない限り、デバイス、設備、及び方法は、ベンチスケール、パイロットスケール、及びフル製造スケールの能力を含む、但しこれらに限定されない、任意の望ましい容積又は製造能力を含み得る。

[0077]更に、本明細書において別途記載しない限り、デバイス、設備、及び方法は、撹拌タンク、エアリフト、ファイバー、マイクロファイバー、中空ファイバー、セラミックマトリックス、流動床、固定床、及び／又は噴流床バイオリアクターを含む、但しこれらに限定されない任意の適するリアクター（複数可）を含み得る。本明細書で使用する場合、「リアクター」には、発酵装置若しくは発酵ユニット、又は任意のその他の反応槽が含まれ得るが、また用語「リアクター」は、「発酵装置」と交換可能に使用される。例えば、いくつかの態様では、バイオリアクターユニットの一つの例は、下記事項：栄養素及び／又は炭素源の供給、適する気体（例えば、酸素）の注入、発酵又は細胞培養培地のインレット及びアウトレット流動、気相と液相の分離、温度の維持、酸素及びＣＯ２レベルの維持、ｐＨレベルの維持、撹拌（ａｇｉｔａｔｉｏｎ）（例えば、撹拌（ｓｔｉｒｒｉｎｇ））、並びに／或いは洗浄／滅菌のうちの１つ若しくは複数、又はすべてを実施することができる。いくつかのリアクターユニットの例、例えば発酵ユニット等はユニット内に複数のリアクターを含有することができ、例えばユニットは、１、２、３、４、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、若しくは１００個、又はそれ超のバイオリアクターを各ユニット内に有することができ、及び／或いは設備は単一又は複数のリアクターをその設備内に有する複数のユニットを含有し得る。様々な実施形態では、バイオリアクターは、バッチ、セミフェドバッチ、フェドバッチ、灌流、及び／又は連続発酵プロセスに適し得る。任意の適するリアクター径が使用可能である。複数の実施形態では、バイオリアクターは、約１００ｍＬ〜約５０，０００Ｌの間の容積を有し得る。非限定的な例として、１００ｍＬ、２５０ｍＬ、５００ｍＬ、７５０ｍＬ、１リットル、２リットル、３リットル、４リットル、５リットル、６リットル、７リットル、８リットル、９リットル、１０リットル、１５リットル、２０リットル、２５リットル、３０リットル、４０リットル、５０リットル、６０リットル、７０リットル、８０リットル、９０リットル、１００リットル、１５０リットル、２００リットル、２５０リットル、３００リットル、３５０リットル、４００リットル、４５０リットル、５００リットル、５５０リットル、６００リットル、６５０リットル、７００リットル、７５０リットル、８００リットル、８５０リットル、９００リットル、９５０リットル、１０００リットル、１５００リットル、２０００リットル、２５００リットル、３０００リットル、３５００リットル、４０００リットル、４５００リットル、５０００リットル、６０００リットル、７０００リットル、８０００リットル、９０００リットル、１０，０００リットル、１５，０００リットル、２０，０００リットル、及び／又は５０，０００リットルの容積が挙げられる。更に、適するリアクターは、複数回使用、使い捨て、ディスポーザブル、又は非ディスポーザブルであり得るが、またステンレススチール等の合金（例えば、３１６Ｌ又は任意のその他の適するステンレススチール）、及びインコネル（Ｉｎｃｏｎｅｌ）、プラスチック、及び／又はガラスを含む任意の適する材料から形成され得る。

[0078]複数の実施形態では、本明細書において別途記載しない限り、本明細書に記載するデバイス、設備、及び方法には、別途記載されない任意の適するユニットオペレーション及び／又は機器、例えばそのような製品を分離、精製、及び単離するためのオペレーション及び／又は機器等も含まれ得る。任意の適する設備及び環境、例えば従来型の現地組み立て設備、モジュール式の可動的及び一時的な設備、又は任意のその他の適する構築物、設備、及び／又はレイアウト等が使用可能である。例えば、いくつかの実施形態では、モジュール式のクリーンルームが使用可能である。更に、別途記載がなければ、本明細書に記載するデバイス、システム、及び方法は、１つの場所又は設備に収容され、及び／又はそこで実施され得る、或いは分離した又は複数の場所及び／又は設備において収容及び／又は実施され得る。

[0079]非限定的な例として、参照によりその全体が本明細書に組み込まれている、米国特許公開第２０１３／０２８０７９７号；同第２０１２／００７７４２９号；同第２０１１／０２８０７９７号；同第２００９／０３０５６２６号；及び米国特許第８，２９８，０５４号；同第７，６２９，１６７号；及び同第５，６５６，４９１号が、これらに限定せずに、適すると考えられる設備、機器、及び／又はシステムの例について記載する。

[0080]複数の実施形態では、細胞は、真核細胞、例えば、哺乳動物細胞である。哺乳動物細胞は、例えば、ヒト又は齧歯類又はウシの細胞系又は細胞系統であり得る。そのような細胞、細胞系、又は細胞系統の例は、例えば、マウスミエローマ（ＮＳＯ）−細胞系、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）−細胞系、ＨＴ１０８０、Ｈ９、ＨｅｐＧ２、ＭＣＦ７、ＭＤＢＫ Ｊｕｒｋａｔ、ＮＩＨ３Ｔ３、ＰＣ１２、ＢＨＫ（ベビーハムスター腎臓細胞）、ＶＥＲＯ、ＳＰ２／０、ＹＢ２／０、Ｙ０、Ｃ１２７、Ｌ細胞、ＣＯＳ、例えば、ＣＯＳ１及びＣＯＳ７、ＱＣ１−３、ＨＥＫ−２９３、ＶＥＲＯ、ＰＥＲ．Ｃ６、ＨｅＬＡ、ＥＢ１、ＥＢ２、ＥＢ３、腫瘍溶解性又はハイブリドーマ−細胞系である。好ましくは、哺乳動物細胞は、ＣＨＯ細胞系である。１つの実施形態では、細胞は、ＣＨＯ細胞である。１つの実施形態では、細胞は、ＣＨＯ−Ｋ１細胞、ＣＨＯ−Ｋ１ ＳＶ細胞、ＤＧ４４ＣＨＯ細胞、ＤＵＸＢ１１ＣＨＯ細胞、ＣＨＯＳ、ＣＨＯ ＧＳノックアウト細胞、ＣＨＯ ＦＵＴ８ＧＳノックアウト細胞、ＣＨＯＺＮ、又はＣＨＯ由来の細胞である。ＣＨＯ ＧＳノックアウト細胞（例えば、ＧＳＫＯ細胞）は、例えば、ＣＨＯ−Ｋ１ ＳＶ ＧＳノックアウト細胞である。ＣＨＯ ＦＵＴ８ノックアウト細胞は、例えば、Ｐｏｔｅｌｌｉｇｅｎｔ（登録商標）ＣＨＯＫ１ＳＶ（Ｌｏｎｚａ Ｂｉｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．社）である。真核細胞は、鳥類の細胞、細胞系又は細胞系統、例えば、ＥＢｘ（登録商標）細胞、ＥＢ１４、ＥＢ２４、ＥＢ２６、ＥＢ６６、又はＥＢｖｌ３等であり得る。

[0081]１つの実施形態では、真核細胞は幹細胞である。幹細胞は、例えば、胚性幹細胞（ＥＳＣ）、成人幹細胞、誘導多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）、組織特異的幹細胞（例えば、造血幹細胞）、及び間葉系幹細胞（ＭＳＣ）を含む多能性幹細胞であり得る。

[0082]１つの実施形態では、細胞は、本明細書に記載する細胞のいずれかの分化した形態である。１つの実施形態では、細胞は、培養物中の任意の初代細胞に由来する細胞である。

[0083]複数の実施形態では、細胞は、肝細胞、例えばヒト肝細胞、動物肝細胞、又は非実質細胞等である。例えば、細胞は、プレーティング可能な代謝機能のあるヒト肝細胞、プレーティング可能な誘導機能のあるヒト肝細胞、プレーティング可能なＱｕａｌｙｓｔ Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ Ｃｅｒｔｉｆｉｅｄ（商標）ヒト肝細胞、懸濁機能のあるヒト肝細胞（１０ドナー及び２０ドナーがプールされた肝細胞を含む）、ヒト肝臓のクッパー細胞、ヒト肝臓の星状細胞、イヌ肝細胞（単一及びプールされたビーグル犬肝細胞を含む）、マウス肝細胞（ＣＤ−１及びＣ５７ＢＩ／６肝細胞を含む）、ラット肝細胞（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ系、Ｗｉｓｔａｒ Ｈａｎ系、及びＷｉｓｔａｒ系肝細胞を含む）、サル肝細胞（カニクイザル又はアカゲザル肝細胞を含む）、ネコ肝細胞（ドメスティック・ショートヘア肝細胞を含む）、及びウサギ肝細胞（ニュージランドホワイト種肝細胞を含む）であり得る。肝細胞の例は、Ｔｒｉａｎｇｌｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂｓ，ＬＬＣ社（６ Ｄａｖｉｓ Ｄｒｉｖｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｔｒｉａｎｇｌｅ Ｐａｒｋ、Ｎｏｒｔｈ Ｃａｒｏｌｉｎａ、米国 ２７７０９）から市販されている。

[0084]１つの実施形態では、真核細胞は、下等真核細胞、例えば、酵母菌細胞（例えば、ピキア属（例えば、ピキア・パストリス（Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ）、ピキア・メタノリカ（Ｐｉｃｈｉａ ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃａ）、ピキア・クルイベリ（Ｐｉｃｈｉａ ｋｌｕｙｖｅｒｉ）、及びピキア・アングスタ（Ｐｉｃｈｉａ ａｎｇｕｓｔａ））、Ｋｏｍａｇａｔａｅｌｌａ属（例えば、コマガタエラ・パストリス（Ｋｏｍａｇａｔａｅｌｌａ ｐａｓｔｏｒｉｓ）、コマガタエラ・シュードパストリス（Ｋｏｍａｇａｔａｅｌｌａ ｐｓｅｕｄｏｐａｓｔｏｒｉｓ）、又はコマガタエラ・ファフィ（Ｋｏｍａｇａｔａｅｌｌａ ｐｈａｆｆｉｉ））、サッカロミセス属（例えば、サッカロミセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓａｅ）、セレビシエ（ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）、サッカロミセス・クルイベリ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｋｌｕｙｖｅｒｉ）、サッカロミセス・ウバルム（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｕｖａｒｕｍ））、クルイベロミセス属（例えば、クルイベロミセス・ラクチス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ ｌａｃｔｉｓ）、クルイベロミセス・マルキサヌス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ ｍａｒｘｉａｎｕｓ））、カンジダ属（例えば、カンジダ・ユチリス（Ｃａｎｄｉｄａ ｕｔｉｌｉｓ）、カンジダ・カカオイ（Ｃａｎｄｉｄａ ｃａｃａｏｉ）、カンジダ・ボイジニイ（Ｃａｎｄｉｄａ ｂｏｉｄｉｎｉｉ））、ゲオトリクム属（例えば、ゲオトリクム・ファーメンタンス（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ ｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ））、ハンゼヌラ・ポリモルファ（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈａ）、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）、又はシゾサッカロミセス・ポンベ（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｐｏｍｂｅ）等である。ピキア・パストリス種が好ましい。ピキア・パストリス系統の例は、Ｘ３３、ＧＳ１１５、ＫＭ７１、ＫＭ７１Ｈ；及びＣＢＳ７４３５である。

[0085]１つの実施形態では、真核細胞は、真菌細胞（例えば、アスペルギルス属（例えばＡ．ニガー（Ａ．ｎｉｇｅｒ）、Ａ．フミガーツス（Ａ．ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）、Ａ．オジエ（Ａ．ｏｒｚｙａｅ）、Ａ．ニドゥラ（Ａ．ｎｉｄｕｌａ）等）、アクレモニウム属（例えばＡ．テルモピルム（Ａ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｍ）等）、ケトミウム属（例えばＣ．テルモピルム（Ｃ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｍ）等）、クリソスポリウム属（例えばＣ．テルモフィル（Ｃ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｅ）等）、コルディセプス属（例えばＣ．ミリタリス（Ｃ．ｍｉｌｉｔａｒｉｓ）等）、コリナスカス属、テノマイセス属、フサリウム属（例えばＦ．オキシスポルム（Ｆ．ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）等）、グロメレラ属（例えばＧ．グラミニコラ（Ｇ．ｇｒａｍｉｎｉｃｏｌａ）等）、ヒポクレア属（例えばＨ．ジェコリナ（Ｈ．ｊｅｃｏｒｉｎａ）等）、マグナポルテ属（例えばＭ．オジエ（Ｍ．ｏｒｚｙａｅ）等）、マイセリオフトラ属（例えばＭ．テルモフィル（Ｍ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｅ）等）、ネクトリア属（例えばＮ．ヘマトコッカ（Ｎ．ｈｅａｍａｔｏｃｏｃｃａ）等）、ニューロスポラ属（例えばＮ．クラッサ（Ｎ．ｃｒａｓｓａ）等）、ペニシリウム属、スポロトリクム属（例えば、Ｓ．テルモフィル（Ｓ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｅ）等）、チラビア属（、例えばＴ．テレストリス（Ｔ．ｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ）、Ｔ．ヘテロタリカ（Ｔ．ｈｅｔｅｒｏｔｈａｌｌｉｃａ）等）、トリコデルマ属（例えばＴ．リーゼイ（Ｔ．ｒｅｅｓｅｉ）等）、又はベルチシリウム属（例えばＶ．ダリア（Ｖ．ｄａｈｌｉａ）等）である。

[0086]１つの実施形態では、真核細胞は、昆虫細胞（例えば、Ｓｆ９、Ｍｉｍｉｃ（商標）Ｓｆ９、Ｓｆ２１、Ｈｉｇｈ Ｆｉｖｅ（商標）（ＢＴ１−ＴＮ−５Ｂ１−４）、又はＢＴ１−Ｅａ８８細胞）、藻類細胞（例えば、アンフォラ属（Ａｍｐｈｏｒａ）、珪藻類（Ｂａｃｉｌｌａｒｉｏｐｈｙｃｅａｅ）、ドナリエラ（Ｄｕｎａｌｉｅｌｌａ）、クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、クラミドモナス（Ｃｈｌａｍｙｄｏｍｏｎａｓ）、藍藻類（Ｃｙａｎｏｐｈｙｔａ）（シアノバクテリア）、ナンノクロロプシス（Ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｏｐｓｉｓ）、スピルリナ属（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ）、又はオクロモナス属（Ｏｃｈｒｏｍｏｎａｓ））、或いは植物細胞（例えば、単子葉植物（例えば、トウモロコシ、米、小麦、若しくはセタリア属（Ｓｅｔａｒｉａ））、又は双子葉植物（例えば、キャッサバ、ジャガイモ、大豆、トマト、タバコ、アルファルファ、ニセツリガネゴケ（Ｐｈｙｓｃｏｍｉｔｒｅｌｌａ ｐａｔｅｎｓ）、若しくはシロイヌナズナ属（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ）由来の細胞）である。

[0087]１つの実施形態では、細胞は細菌細胞又は原核細胞である。

[0088]複数の実施形態では、原核細胞は、グラム陽性細胞、例えば桿菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、ストレプトミセス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）、連鎖球菌属（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、スタフィロコッカス属（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、又は乳酸杆菌属（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）等である。使用可能である桿菌は、例えば、Ｂ．サブチリス（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、Ｂ．アミロリケファシエンス（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、Ｂ．リケニフォルミス（Ｂ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、納豆菌（Ｂ．ｎａｔｔｏ）、又はＢ．メガテリウム（Ｂ．ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）である。複数の実施形態では、細胞は、Ｂ．サブチリス、例えばＢ．サブチリス３ＮＡ及びＢ．サブチリス１６８等である。桿菌は、例えば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｓｔｏｃｋ Ｃｅｎｔｅｒ、Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ５５６（４８４ Ｗｅｓｔ １２ｔｈ Ａｖｅｎｕｅ、Ｃｏｌｕｍｂｕｓ ＯＨ ４３２１０−１２１４）から取得可能である。

[0089]１つの実施形態では、原核細胞は、グラム陰性細胞、例えばサルモネラ属菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）等、又は大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）、例えば、ＴＧ１、ＴＧ２、Ｗ３１１０、ＤＨ１、ＤＨＢ４、ＤＨ５ａ、ＨＭＳ１７４、ＨＭＳ１７４（ＤＥ３）、ＮＭ５３３、Ｃ６００、ＨＢ１０１、ＪＭ１０９、ＭＣ４１００、ＸＬ１−Ｂｌｕｅ及びＯｒｉｇａｍｉ等、並びに大腸菌Ｂ系統細胞、例えば、ＢＬ−２１又はＢＬ２１（ＤＥ３）等であり、これらのすべてが市販されている。

[0090]適する宿主細胞が、例えば、培養物コレクション、例えばＤＳＭＺ（Ｄｅｕｔｓｃｈｅ Ｓａｍｍｌｕｎｇ ｖｏｎ Ｍｉｋｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｎ、及びＺｅｌｌｋｕｌｔｕｒｅｎ ＧｍｂＨ、Ｂｒａｕｎｓｃｈｗｅｉｇ、ドイツ）又はアメリカ合衆国培養細胞系統保存機関（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、ＡＴＣＣ）等から市販されている。

[0091]複数の実施形態では、培養された細胞が、治療用途のタンパク質、例えば抗体、例えばモノクロナール抗体及び／又は組換えタンパク質を製造するのに使用される。複数の実施形態では、培養された細胞は、ペプチド、アミノ酸、脂肪酸、又はその他の有用な生化学的中間体又は代謝物を生成する。例えば、複数の実施形態では、約４０００ダルトン〜約１４０，０００ダルトンを超える分子量を有する分子が製造可能である。複数の実施形態では、このような分子は、ある範囲の複雑性を有する可能性があり、またグリコシル化を含む翻訳後修飾を含み得る。

[0092]複数の実施形態では、タンパク質は、例えば、ＢＯＴＯＸ、Ｍｙｏｂｌｏｃ、Ｎｅｕｒｏｂｌｏｃ、Ｄｙｓｐｏｒｔ（又はボツリヌス神経毒素のその他の血清型）、アルグルコシダーゼアルファ、ダプトマイシン、ＹＨ−１６、絨毛性ゴナドトロピンアルファ、フィルグラスチム、セトロレリックス、インターロイキン−２、アルデスロイキン、テセロイキン（ｔｅｃｅｌｅｕｌｉｎ）、デニロイキンジフチトクス、インターフェロンアルファ−ｎ３（注射剤）、インターフェロンアルファ−ｎｌ、ＤＬ−８２３４、インターフェロン、サントリー（ガンマ−１ａ）、インターフェロンガンマ、サイモシンアルファ１、タソネルミン、ＤｉｇｉＦａｂ、ＶｉｐｅｒａＴＡｂ、ＥｃｈｉＴＡｂ、ＣｒｏＦａｂ、ネシリチド、アバタセプト、アレファセプト、Ｒｅｂｉｆ、エプトテルミンアルファ、テリパラチド（骨粗鬆症）、カルシトニン注射用（骨疾患）、カルシトニン（鼻腔、骨粗鬆症）、エタネルセプト、ヘモグロビングルタマー２５０（ウシ）、ドロトレコギンアルファ、コラゲナーゼ、カルペリチド、組換えヒト上皮増殖因子（局所用ゲル、創傷治癒）、ＤＷＰ４０１、ダルベポエチンアルファ、エポエチンオメガ、エポエチンベータ、エポエチンアルファ、デシルジン、レピルジン、ビバリルジン、ノナコグアルファ、モノニン（Ｍｏｎｏｎｉｎｅ）、エプタコグアルファ（活性化）、組換え第ＶＩＩＩ因子＋ＶＷＦ、リコンビナート（Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｅ）、組換え第ＶＩＩＩ因子、第ＶＩＩＩ因子（組換え）、アルフマート、オクトコグアルファ、第ＶＩＩＩ因子、パリフェルミン、インジキナーゼ、テネクテプラーゼ、アルテプラーゼ、パミテプラーゼ、レテプラーゼ、ナテプラーゼ、モンテプラーゼ、フォリトロピンアルファ、ｒＦＳＨ、ｈｐＦＳＨ、ミカファンギン、ペグフィルグラスチム、レノグラスチム、ナルトグラスチム、セルモレリン、グルカゴン、エキセナチド、プラムリンチド、イミグルセラーゼ（ｉｎｉｇｌｕｃｅｒａｓｅ）、ガルスルファーゼ、ロイコトロピン、モルグラモスチム（ｍｏｌｇｒａｍｏｓｔｉｒｎ）、トリプトレリンアセテート、ヒストレリン（皮下移植、ハイドロン（Ｈｙｄｒｏｎ））、デスロレリン、ヒストレリン、ナファレリン、ロイプロリド持続放出型デポ（アトリゲル（ＡＴＲＩＧＥＬ））、ロイプロリドインプラント（デュロス（ＤＵＲＯＳ））、ゴセレリン、ユートロピン、ＫＰ−１０２プログラム、ソマトロピン、メカセルミン（増殖不全）、エンルファビルチド（ｅｎｌｆａｖｉｒｔｉｄｅ）、Ｏｒｇ−３３４０８、インスリングラルギン、インスリングルリジン、インスリン（吸入式）、インスリンリスプロ、インスリンデテミル（ｉｎｓｕｌｉｎｄｅｔｅｒｎｉｒ）、インスリン（バッカル、ＲａｐｉｄＭｉｓｔ）、メカセルミンリンファバート、アナキンラ、セルモロイキン、９９ｍＴｃ−アプシタイド注射剤、ミエロピド、ベタセロン（Ｂｅｔａｓｅｒｏｎ）、酢酸グラチラマー、ゲポン（Ｇｅｐｏｎ）、サルグラモスチム、オプレルベキン、ヒト白血球由来のアルファインターフェロン、ビリブ（Ｂｉｌｉｖｅ）、インスリン（組換え）、組換えヒトインスリン、インスリンアスパルト、メカセルミン（ｍｅｃａｓｅｎｉｎ）、ロフェロン−Ａ（Ｒｏｆｅｒｏｎ−Ａ）、インターフェロン−アルファ２、アルファフェロン（Ａｌｆａｆｅｒｏｎｅ）、インターフェロンアルファコン−１、インターフェロンアルファ、Ａｖｏｎｅｘ社の組換えヒト黄体形成ホルモン、ドルナーゼアルファ、トラフェルミン、ジコノチド、タルチレリン、ジボテルミンアルファ、アトシバン、ベカプレルミン、エプチフィバチド、ゼマイラ（Ｚｅｍａｉｒａ）、ＣＴＣ−１１１、シャンバック−Ｂ（Ｓｈａｎｖａｃ−Ｂ）、ＨＰＶワクチン（四価）、オクトレオチド、ランレオチド、アンセスチム（ａｎｃｅｓｔｉｒｎ）、アガルシダーゼベータ、アガルシダーゼアルファ、ラロニダーゼ、酢酸プレザチド銅（局所用ゲル）、ラスブリカーゼ、ラニビズマブ、アクティミューン（Ａｃｔｉｍｍｕｎｅ）、ＰＥＧ−イントロン、トリコミン（Ｔｒｉｃｏｍｉｎ）、組換えチリダニアレルギー脱感作注射剤、組換えヒト副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）１−８４（ｓｃ、骨粗鬆症）、エポエチンデルタ、トランスジェニックアンチトロンビンＩＩＩ、グランジトロピン（Ｇｒａｎｄｉｔｒｏｐｉｎ）、ビトラーゼ（Ｖｉｔｒａｓｅ）、組換えインスリン、インターフェロンアルファ（口腔ロゼンジ）、ＧＥＭ−２１Ｓ、バプレオチド、イデュルスルファーゼ、オマパトリラート（ｏｍｎａｐａｔｒｉｌａｔ）、組換え血清アルブミン、セルトリズマブペゴル、グルカルピダーゼ、ヒト組換えＣ１エステラーゼ阻害剤（血管性浮腫）、ラノテプラーゼ、組換えヒト成長ホルモン、エンフビルチド（針を使用しない注射、Ｂｉｏｊｅｃｔｏｒ２０００）、ＶＧＶ−１、インターフェロン（アルファ）、ルシナクタント、アビプタジル（吸入式、肺疾患）、イカチバント、エカランチド、オミガナン、オーログラブ（Ａｕｒｏｇｒａｂ）、ペキシガナンアセテート、ＡＤＩ−ＰＥＧ−２０、ＬＤＩ−２００、デガレリクス、シントレデキンベスドトクス（ｃｉｎｔｒｅｄｅｌｉｎｂｅｓｕｔｏｄｏｘ）、Ｆａｖｌｄ、ＭＤＸ−１３７９、ＩＳＡｔｘ−２４７、リラグルチド、テリパラチド（骨粗鬆症）、チファコギン、ＡＡ４５００、Ｔ４Ｎ５リポソームローション、カツマキソマブ、ＤＷＰ４１３、ＡＲＴ−１２３、クリサリン（Ｃｈｒｙｓａｌｉｎ）、デスモテプラーゼ、アメジプラーゼ、コリフォリトロピンアルファ、ＴＨ−９５０７、テデュグルチド、ディアミド（Ｄｉａｍｙｄ）、ＤＷＰ−４１２、成長ホルモン（持続放出型注射剤）、組換えＧ−ＣＳＦ、インスリン（吸入式、ＡＩＲ）、インスリン（吸入式、Ｔｅｃｈｎｏｓｐｈｅｒｅ）、インスリン（吸入式、ＡＥＲｘ）、ＲＧＮ−３０３、ＤｉａＰｅｐ２７７、インターフェロンベータ（Ｃ型肝炎ウイルス性感染症（ＨＣＶ））、インターフェロンアルファ−ｎ３（口腔用）、ベラタセプト、経皮インスリンパッチ、ＡＭＧ−５３１、ＭＢＰ−８２９８、キセレセプト（Ｘｅｒｅｃｅｐｔ）、オペバカン、ＡＩＤＳＶＡＸ、ＧＶ−１００１、リンホスキャン（ＬｙｍｐｈｏＳｃａｎ）、ランピルナーゼ、リポキシサン（Ｌｉｐｏｘｙｓａｎ）、ルスプルチド、ＭＰ５２（ベータ−リン酸三カルシウム担体、骨再生）、メラノーマワクチン、シプリューセル−Ｔ、ＣＴＰ−３７、インセジア（Ｉｎｓｅｇｉａ）、ビテスペン、ヒトトロンビン（凍結品、外科的出血）、トロンビン、ＴｒａｎｓＭＩＤ、アルフィメプラーゼ、プリカーゼ（Ｐｕｒｉｃａｓｅ）、テルリプレシン（静脈内、肝腎症候群）、ＥＵＲ−１００８Ｍ、組換えＦＧＦ−Ｉ（注入型、血管疾患）、ＢＤＭ−Ｅ、ロチガプチド、ＥＴＣ−２１６、Ｐ−１１３、ＭＢＩ−５９４ＡＮ、デュラマイシン（吸入式、嚢胞性繊維症）、ＳＣＶ−０７、ＯＰＩ−４５、エンドスタチン（Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ）、アンジオスタチン（Ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ）、ＡＢＴ−５１０、ボーマン−バークインヒビター濃縮品、ＸＭＰ−６２９、９９ｍＴｃ−Ｈｙｎｉｃ−アネキシンＶ、カハラリドＦ、ＣＴＣＥ−９９０８、テベレリクス（徐放型）、オザレリクス、ロミデプシン（ｒｏｒｎｉｄｅｐｓｉｎ）、ＢＡＹ−５０４７９８、インターロイキン４、ＰＲＸ−３２１、ペプスキャン（Ｐｅｐｓｃａｎ）、イボクタデキン、ｒｈラクトフェリン、ＴＲＵ−０１５、ＩＬ−２１、ＡＴＮ−１６１、シレンギチド、アルブフェロン（Ａｌｂｕｆｅｒｏｎ）、ビファジックス（Ｂｉｐｈａｓｉｘ）、ＩＲＸ−２、オメガインターフェロン、ＰＣＫ−３１４５、ＣＡＰ−２３２、パシレオチド、ｈｕＮ９０１−ＤＭＩ、卵巣がん免疫療法ワクチン、ＳＢ−２４９５５３、オンコバックス−ＣＬ（Ｏｎｃｏｖａｘ−ＣＬ）、オンコバックス−Ｐ（ＯｎｃｏＶａｘ−Ｐ）、ＢＬＰ−２５、セルバックス（ＣｅｒＶａｘ）−１６、マルチエピトープペプチド・メラノーマワクチン（ＭＡＲＴ−１、ｇｐ１００、チロシナーゼ）、ネミフィチド、ｒＡＡＴ（吸入式）、ｒＡＡＴ（皮膚科学）、ＣＧＲＰ（吸入式、喘息）、ペグスネルセプト、サイモシンベータ４、プリチデプシン、ＧＴＰ−２００、ラモプラニン、グラスパ（ＧＲＡＳＰＡ）、ＯＢＩ−１、ＡＣ−１００、サケカルシトニン（口腔、エリゲン）、カルシトニン（口腔用、骨粗鬆症）、エキサモレリン、カプロモレリン、カルデバ（Ｃａｒｄｅｖａ）、ベラフェルミン、１３１Ｉ−ＴＭ−６０１、ＫＫ−２２０、Ｔ−１０、ウラリチド、デペレスタット、ヘマタイド、クリサリン（Ｃｈｒｙｓａｌｉｎ）（局所用）、ｒＮＡＰｃ２、組換え第ＶＩＩＩ因子（ペグ化されたリポソーム）、ｂＦＧＦ、ペグ化された組換えスタフィロキナーゼバリアント、Ｖ−１０１５３、ソノリシスプロリーゼ（ＳｏｎｏＬｙｓｉｓ Ｐｒｏｌｙｓｅ）、ニューロバックス（ＮｅｕｒｏＶａｘ）、ＣＺＥＮ−００２、島細胞新生治療、ｒＧＬＰ−１、ＢＩＭ−５１０７７、ＬＹ−５４８８０６、エキセナチド（制御放出、Ｍｅｄｉｓｏｒｂ）、ＡＶＥ−００１０、ＧＡ−ＧＣＢ、アボレリン、ＡＣＭ−９６０４、リナクロチドアセテート（ｌｉｎａｃｌｏｔｉｄ ｅａｃｅｔａｔｅ）、ＣＥＴｉ−１、ヘモスパン（Ｈｅｍｏｓｐａｎ）、ＶＡＬ（注入型）、速効性インスリン（注射用、Ｖｉａｄｅｌ）、鼻腔内インスリン、インスリン（吸入式）、インスリン（口腔用、エリゲン）、組換えメチオニルヒトレプチン、ピトラキンラ（皮下注射剤、湿疹）、ピトラキンラ（吸入式乾燥粉末、喘息）、マルチカイン（Ｍｕｌｔｉｋｉｎｅ）、ＲＧ−１０６８、ＭＭ−０９３、ＮＢＩ−６０２４、ＡＴ−００１、ＰＩ−０８２４、Ｏｒｇ−３９１４１、Ｃｐｎ１０（自己免疫疾患／炎症）、タラクトフェリン（局所用）、ｒＥＶ−１３１（眼科用）、ｒＥＶ−１３１（呼吸器系疾患）、口腔用組換えヒトインスリン（糖尿病）、ＲＰＩ−７８Ｍ、オプレルベキン（口腔用）、ＣＹＴ−９９００７ ＣＴＬＡ４−ｌｇ、ＤＴＹ−００１、バラテグラスト、インターフェロンアルファ−ｎ３（局所用）、ＩＲＸ−３、ＲＤＰ−５８、タウフェロン（Ｔａｕｆｅｒｏｎ）、胆汁酸塩刺激リパーゼ、メリスパーゼ（Ｍｅｒｉｓｐａｓｅ）、アルカリホスファターゼ（ａｌａｌｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ）、ＥＰ−２１０４Ｒ、メラノタン（Ｍｅｌａｎｏｔａｎ）−ＩＩ、ブレメラノチド、ＡＴＬ−１０４、組換えヒトマイクロプラスミン、ＡＸ−２００、ＳＥＭＡＸ、ＡＣＶ−１、Ｘｅｎ−２１７４、ＣＪＣ−１００８、ダイノルフィンＡ、ＳＩ−６６０３、ＬＡＢ ＧＨＲＨ、ＡＥＲ−００２、ＢＧＣ−７２８、マラリアワクチン（ビロソーム、ＰｅｖｉＰＲＯ）、ＡＬＴＵ−１３５、パルボウイルスＢ１９ワクチン、インフルエンザワクチン（組換えノイラミニダーゼ）、マラリア／ＨＢＶワクチン、炭疽病ワクチン、Ｖａｃｃ−５ｑ、Ｖａｃｃ−４ｘ、ＨＩＶワクチン（口腔用）、ＨＰＶワクチン、Ｔａｔトキソイド（Ｔａｔ Ｔｏｘｏｉｄ）、ＹＳＰＳＬ、ＣＨＳ−１３３４０、ＰＴＨ（１−３４）リポソームクリーム（Ｎｏｖａｓｏｍｅ）、オスタボリン−Ｃ（Ｏｓｔａｂｏｌｉｎ−Ｃ）、ＰＴＨ類似体（局所用、乾癬）、ＭＢＲＩ−９３．０２、ＭＴＢ７２Ｆワクチン（結核）、ＭＶＡ−Ａｇ８５Ａワクチン（結核）、ＦＡＲＡ０４、ＢＡ−２１０、組換えペストＦＩＶワクチン、ＡＧ−７０２、ＯｘＳＯＤｒｏｌ、ｒＢｅｔＶＩ、Ｄｅｒ−ｐ１／Ｄｅｒ−ｐ２／Ｄｅｒ−ｐ７アレルゲン標的ワクチン（塵性ダニアレルギー）、ＰＲ１ペプチド抗原（白血病）、突然変異体ｒａｓワクチン、ＨＰＶ−１６Ｅ７リポペプチドワクチン、ラビリンチンワクチン（腺癌）、ＣＭＬワクチン、ＷＴ１−ペプチドワクチン（がん）、ＩＤＤ−５、ＣＤＸ−１１０、ペントリス（Ｐｅｎｔｒｙｓ）、ノレリン（Ｎｏｒｅｌｉｎ）、ＣｙｔｏＦａｂ、Ｐ−９８０８、ＶＴ−１１１、イクロカプチド、テルベルミン（皮膚科学用、糖尿病の足部潰瘍）、ルピントリビル、レティキュロース、ｒＧＲＦ、ＨＡ、アルファ−ガラクトシダーゼＡ、ＡＣＥ−０１１、ＡＬＴＵ−１４０、ＣＧＸ−１１６０、アンジオテンシン治療ワクチン、Ｄ−４Ｆ、ＥＴＣ−６４２、ＡＰＰ−０１８、ｒｈ
ＭＢＬ、ＳＣＶ−０７（口腔用、結核）、ＤＲＦ−７２９５、ＡＢＴ−８２８、ＥｒｂＢ２特異的免疫毒素複合体（抗がん）、ＤＴ３ＳＳＩＬ−３、ＴＳＴ−１００８８、ＰＲＯ−１７６２、コンボトックス（Ｃｏｍｂｏｔｏｘ）、コレシストキニン−Ｂ／ガストリン受容体結合ペプチド、１１１Ｉｎ−ｈＥＧＦ、ＡＥ−３７、トラスツズマブ（ｔｒａｓｎｉｚｕｍａｂ）−ＤＭ１、アンタゴニストＧ、ＩＬ−１２（組換え）、ＰＭ−０２７３４、ＩＭＰ−３２１、ｒｈｌＧＦ−ＢＰ３、ＢＬＸ−８８３、ＣＵＶ−１６４７（局所用）、Ｌ−１９に基づく放射免疫療法（がん）、Ｒｅ−１８８−Ｐ−２０４５、ＡＭＧ−３８６、ＤＣ／１５４０／ＫＬＨワクチン（がん）、ＶＸ−００１、ＡＶＥ−９６３３、ＡＣ−９３０１、ＮＹ−ＥＳＯ−１ワクチン（ペプチド）、ＮＡ１７．Ａ２ペプチド、メラノーマワクチン（パルス式抗原治療）、前立腺がんワクチン、ＣＢＰ−５０１、組換えヒトラクトフェリン（ドライアイ）、ＦＸ−０６、ＡＰ−２１４、ＷＡＰ−８２９４Ａ（注入用）、ＡＣＰ−ＨＩＰ、ＳＵＮ−１１０３１、ペプチドＹＹ［３−３６］（肥満、鼻腔内）、ＦＧＬＬ、アタシセプト、ＢＲ３−Ｆｃ、ＢＮ−００３、ＢＡ−０５８、ヒト副甲状腺ホルモン１−３４（鼻腔用、骨粗鬆症）、Ｆ−１８−ＣＣＲ１、ＡＴ−１１００（セリアック病／糖尿病）、ＪＰＤ−００３、ＰＴＨ（７−３４）リポソームクリーム（Ｎｏｖａｓｏｍｅ）、デュラマイシン（眼科用、ドライアイ）、ＣＡＢ−２、ＣＴＣＥ−０２１４、グリコペグ化エリスロポエチン、ＥＰＯ−Ｆｃ、ＣＮＴＯ−５２８、ＡＭＧ−１１４、ＪＲ−０１３、第ＸＩＩＩ因子、アミノカンジン、ＰＮ−９５１、７１６１５５、ＳＵＮ−Ｅ７００１、ＴＨ−０３１８、ＢＡＹ−７３−７９７７、テベレリクス（即時放出）、ＥＰ−５１２１６、ｈＧＨ（制御放出、Ｂｉｏｓｐｈｅｒｅ）、ＯＧＰ−Ｉ、シフビルチド、ＴＶ４７１０、ＡＬＧ−８８９、Ｏｒｇ−４１２５９、ｒｈＣＣ１０、Ｆ−９９１、チモペンチン（肺疾患）、ｒ（ｍ）ＣＲＰ、肝臓選択性インスリン、スバリン、Ｌ１９−ＩＬ−２融合タンパク質、エラフィン、ＮＭＫ−１５０、ＡＬＴＵ−１３９、ＥＮ−１２２００４、ｒｈＴＰＯ、トロンボポイエチン受容体アゴニスト（血小板減少性疾患）、ＡＬ−１０８、ＡＬ−２０８、神経成長因子アンタゴニスト（疼痛）、ＳＬＶ−３１７、ＣＧＸ−１００７、ＩＮＮＯ−１０５、経口テリパラチド（エリゲン）、ＧＥＭ−ＯＳ１、ＡＣ−１６２３５２、ＰＲＸ−３０２、ＬＦｎ−ｐ２４融合ワクチン（Ｔｈｅｒａｐｏｒｅ）、ＥＰ−１０４３、Ｓ肺炎小児ワクチン、マラリアワクチン、髄膜炎菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）Ｂ群ワクチン、新生児用Ｂ群連鎖球菌ワクチン、炭疽病ワクチン、ＨＣＶワクチン（ｇｐＥ１＋ｇｐＥ２＋ＭＦ−５９）、中耳炎の治療、ＨＣＶワクチン（コア抗原＋ＩＳＣＯＭＡＴＲＩＸ）、ｈＰＴＨ（１−３４）（経皮用、ＶｉａＤｅｒｍ）、７６８９７４、ＳＹＮ−１０１、ＰＧＮ−００５２、アビスクムミン、ＢＩＭ−２３１９０、結核ワクチン、マルチエピトープ・チロシナーゼペプチド、がんワクチン、エンカスチム、ＡＰＣ−８０２４、ＧＩ−５００５、ＡＣＣ−００１、ＴＴＳ−ＣＤ３、血管標的ＴＮＦ（固形腫瘍）、デスモプレシン（バッカル制御放出型）、オネルセプト、及びＴＰ−９２０１である。

[0093]いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、アダリムマブ（ＨＵＭＩＲＡ）、インフリキシマブ（ＲＥＭＩＣＡＤＥ（商標））、リツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ（商標）／ＭＡＢ ＴＨＥＲＡ（商標））、エタネルセプト（ＥＮＢＲＥＬ（商標））、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（商標））、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（商標））、ペグフィルグラスチム（ｐｅｇｒｉｌｇｒａｓｔｉｍ）（ＮＥＵＬＡＳＴＡ（商標））、又は後発生物製剤及びバイオベターを含む任意のその他の適するポリペプチドである。

[0094]その他の適するポリペプチドとして下記、及び米国特許第２０１６／００９７０７４号の表１に掲載されるものが挙げられる。

[0095]複数の実施形態では、ポリペプチドは、表２に示すように、ホルモン、血液凝固（ｃｌｏｔｔｉｎｇ）／凝固（ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ）因子、サイトカイン／増殖因子、抗体分子（ａｎｔｉｂｏｄｙｍｏｌｅｌｃｕｌｅ）、融合タンパク質、タンパク質ワクチン、又はペプチドである。

[0096]複数の実施形態では、タンパク質は、表３に示すように多重特異性タンパク質、例えば二重特異性抗体である。

[0097]本発明に対するこれら及びその他の改変形態及び変化形態は、添付の特許請求の範囲においてより具体的に定める本発明の趣旨及び範囲から逸脱せずに、当業者により実践され得る。更に、様々な実施形態の側面は、全体又は一部において交換され得るものと理解すべきである。更に、上記説明は例示目的に限定されること、及びかかる添付の特許請求の範囲に更に記載されるような本発明に制限を設けるように意図されないことを当業者は認識するであろう。

Claims (28)

1. バイオリアクターから流体を灌流するための中空管状部材であって、第１の開口部を画定する第１の端部及び第２の開口部を画定する第２の反対側の端部を有し、前記第２の開口部は断面積を有する、中空管状部材と、
   前記中空管状部材の前記第２の端部に配置され、前記第２の端部に取り付けられたフィルター部材であって、前記第２の開口部を完全に取り囲み包囲し、包囲された容積及び表面積を画定し、前記第２の開口部の前記断面積と前記フィルター部材の前記表面積との間の比は約１：５〜約１：２００である、フィルター部材と
   を備える灌流装置。
2. 前記フィルター部材は多孔メッシュを含み、前記メッシュは、約６０ミクロン（６０マイクロメートル）超の平均孔サイズを有する、請求項１に記載の灌流装置。
3. 前記フィルター部材は多孔メッシュを含み、前記メッシュは、約８０ミクロン（８０マイクロメートル）超の平均孔サイズを有する、請求項１に記載の灌流装置。
4. 前記フィルター部材は多孔メッシュを含み、前記メッシュは、約６０ミクロン（６０マイクロメートル）〜約１５０ミクロン（１５０マイクロメートル）の平均孔サイズを有する、請求項１に記載の灌流装置。
5. 前記第２の開口部の前記断面積と前記フィルター部材の前記表面積との間の比は約１：１５〜約１：１００である、請求項１から４のいずれか一項に記載の灌流装置。
6. 前記中空管状部材はステンレススチールから作製される、請求項１から５のいずれか一項に記載の灌流装置。
7. 前記灌流装置は使い捨て灌流装置を含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の灌流装置。
8. 前記中空管状部材は、熱可塑性ポリマーから作製され、前記フィルター部材はポリアミドメッシュを含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の灌流装置。
9. 前記中空管状部材は、前記第１の端部から前記第２の端部まで直線状である、請求項１から８のいずれか一項に記載の灌流装置。
10. 前記中空管状部材は、第１の直線状のセクション、第２の直線状のセクション、並びに前記第１の直線状のセクション及び前記第２の直線状のセクションの間に位置決めされた角度付きセクションを含み、前記角度付きセクションは、前記第２の開口部及び前記フィルター部材を、回転インペラと接触することなくバイオリアクター内の場所に配置するためのものである、請求項１から８のいずれか一項に記載の灌流装置。
11. 前記角度付きセクションは、前記第１の直線状のセクションに対し、約２５°〜約４５°の角度にあり、前記第２の直線状のセクションに対し、約２５°〜約４５°の角度にある、請求項１０に記載の灌流装置。
12. 前記中空管状部材は、約２ｍｍ〜約２０ｍｍの直径を有する、請求項１から１１のいずれか一項に記載の灌流装置。
13. 前記中空管状部材は、前記第２の端部に隣接して配置された角部材を含み、前記中空管状部材は、前記角部材に遷移する直線状のセクションを含み、前記角部材は、前記直線状のセクションに対し、約５０°〜約９０°の角度にある、請求項１から１２のいずれか一項に記載の灌流装置。
14. 前記中空管状部材及び前記フィルター部材は、潰れ可能なベローズ内に移動可能に包囲され、前記潰れ可能なベローズは、一方の端部に、前記バイオリアクターの適合する無菌接続ポートに接続するための無菌接続ポートを含む、請求項１から８のいずれか一項に記載の灌流装置。
15. 前記フィルター部材は、バイオリアクターの側壁又は底壁におけるメッシュパッチを含み、前記フィルター部材は、前記メッシュパッチを前記中空管状部材に接続する円錐部を更に含む、請求項１から８のいずれか一項に記載の灌流装置。
16. バイオリアクターから流体を灌流するための中空管状部材であって、第１の開口部を画定する第１の端部及び第２の開口部を画定する第２の端部を有し、前記第２の開口部は断面積を有する、中空管状部材と、
    前記中空管状部材の前記第２の端部に配置され、前記第２の端部に取り付けられたフィルター部材であって、前記第２の開口部を完全に取り囲み包囲し、多孔メッシュを含み、前記多孔メッシュは、約６０ミクロン（６０マイクロメートル）以上〜約１５０ミクロン（１５０マイクロメートル）以下の平均孔サイズを有する、フィルター部材と
    を備える灌流装置。
17. 前記フィルター部材は、包囲された容積及び表面積を画定し、前記第２の開口部の前記断面積と前記フィルター部材の前記表面積との間の比は約１：５〜約１：２００であり、例えば約１：１５〜約１：１００である、請求項１６に記載の灌流装置。
18. 前記フィルター部材の前記メッシュは均一の孔サイズを有する、請求項１６又は１７に記載の灌流装置。
19. 前記メッシュはステンレススチールスクリーンを含む、請求項１６から１８のいずれか一項に記載の灌流装置。
20. 前記中空管状部材は、第１の直線状のセクション、第２の直線状のセクション、並びに第１の直線状のセクション及び第２の直線状のセクションの間に位置決めされた角度付きセクションを含み、前記角度付きセクションは、前記第２の開口部及び前記フィルター部材を、回転インペラと接触することなくバイオリアクター内の場所に配置するためのものである、請求項１６から１９のいずれか一項に記載の灌流装置。
21. 前記角度付きセクションは、前記第１の直線状のセクションに対し、約２５°〜約４５°の角度にあり、前記第２の直線状のセクションに対し、約２５°〜約４５°の角度にある、請求項２０に記載の灌流装置。
22. 前記中空管状部材は、前記第２の端部に隣接して配置された角部材を含み、前記中空管状部材は、前記角部材に遷移する直線状のセクションを含み、前記角部材は、前記直線状のセクションに対し、約５０°〜約９０°の角度にある、請求項１６から２１のいずれか一項に記載の灌流装置。
23. 前記中空管状部材及び前記フィルター部材は、潰れ可能なベローズ内に移動可能に包囲され、前記潰れ可能なベローズは、一方の端部に、前記バイオリアクターの適合する無菌接続ポートに接続するための無菌接続ポートを含む、請求項１６から２２のいずれか一項に記載の灌流装置。
24. 前記フィルター部材は、バイオリアクターの側壁又は底壁におけるメッシュパッチを含み、前記フィルター部材は、前記メッシュパッチを前記中空管状部材に接続する円錐部を更に含む、請求項１６から１９のいずれか一項に記載の灌流装置。
25. バイオリアクター容積を有するバイオリアクターを備えるバイオリアクターシステムであって、前記バイオリアクターは、前記バイオリアクターにおける細胞増殖を促すためのマイクロキャリアを含有し、前記バイオリアクターは、頂部を有し、ポートを画定し、前記バイオリアクターシステムは、請求項１６から２３のいずれか一項に記載の灌流装置を更に備え、前記灌流装置は前記ポート内に受けられる、バイオリアクターシステム。
26. バイオリアクター容積を有するバイオリアクターを備えるバイオリアクターシステムであって、前記バイオリアクターは、前記バイオリアクターにおける細胞増殖を促すためのマイクロキャリアを含有し、前記バイオリアクターシステムは、請求項２４に記載の灌流装置を更に備え、前記バイオリアクターは前記灌流装置と連通する、バイオリアクターシステム。
27. 細胞増殖を培養するための方法であって、
    生体細胞をバイオリアクター内に接種するステップであって、前記バイオリアクターは、細胞増殖のための流体培地を含有し、前記生体細胞は、前記バイオリアクター内に含有されるマイクロキャリアに付着する、ステップと、
    前記バイオリアクター内に灌流装置を挿入することによって、前記バイオリアクター内に含有される前記流体培地を灌流させるステップであって、前記灌流装置は、第１の開口部を画定する第１の端部と、第２の開口部を画定する第２の反対側の端部とを有する中空管状部材を備え、前記灌流装置は、前記中空管状部材の前記第２の端部に配置され、前記第２の端部に取り付けられたフィルター部材を更に備え、前記フィルター部材は前記第２の開口部を完全に取り囲み包囲し、前記流体培地は、前記灌流装置を通じて前記バイオリアクターから回収され、前記フィルター部材は、前記マイクロキャリアが前記バイオリアクターから回収されることを防ぐ、ステップと、
    細胞増殖を促進するために、前記バイオリアクター内の前記流体培地を補充するステップと、
    を含む、方法。
28. 細胞増殖を培養するための方法であって、
    生体細胞をバイオリアクター内に接種するステップであって、前記バイオリアクターは、細胞増殖のための流体培地を含有し、前記生体細胞は、前記バイオリアクター内に含有されるマイクロキャリアに付着する、ステップと、
    前記バイオリアクターを灌流装置と連通させて設置して、前記バイオリアクター内に含有される前記流体培地を灌流させるステップであって、前記灌流装置は、第１の開口部を画定する第１の端部及び第２の開口部を画定する第２の反対側の端部を有する中空管状部材を備え、前記灌流装置は、前記バイオリアクターの壁にメッシュパッチとして形成されたフィルター部材を更に備え、前記灌流装置は、前記メッシュパッチから前記中空管状部材の前記第２の開口部まで接続する可撓性円錐部を更に備え、前記流体培地は、前記灌流装置を通じて前記バイオリアクターから回収され、前記フィルター部材は、前記マイクロキャリアが前記バイオリアクターから回収されることを防ぐ、ステップと、
    細胞増殖を促進するために、前記バイオリアクター内の前記流体培地を補充するステップと、
    を含む、方法。