JP2020504816A - 適応ナノ細孔信号圧縮 - Google Patents
適応ナノ細孔信号圧縮 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2020504816A JP2020504816A JP2019531973A JP2019531973A JP2020504816A JP 2020504816 A JP2020504816 A JP 2020504816A JP 2019531973 A JP2019531973 A JP 2019531973A JP 2019531973 A JP2019531973 A JP 2019531973A JP 2020504816 A JP2020504816 A JP 2020504816A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- data
- frames
- cell
- cells
- digest
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 title description 5
- 238000007906 compression Methods 0.000 title description 3
- 230000006835 compression Effects 0.000 title description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 claims abstract description 156
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 118
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims abstract description 111
- 238000007781 pre-processing Methods 0.000 claims abstract description 53
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 49
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims abstract description 33
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 18
- 206010021033 Hypomenorrhoea Diseases 0.000 claims description 53
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 claims 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 abstract description 12
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 abstract description 12
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 abstract description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 438
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 78
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 76
- 239000003990 capacitor Substances 0.000 description 75
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 57
- 230000008569 process Effects 0.000 description 53
- 239000000232 Lipid Bilayer Substances 0.000 description 51
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 46
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 44
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 43
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 41
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 41
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 40
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 40
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 37
- 230000008859 change Effects 0.000 description 34
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 28
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 27
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 27
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 24
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 23
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 19
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 15
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 14
- 230000006870 function Effects 0.000 description 13
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 11
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 10
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 9
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 230000005684 electric field Effects 0.000 description 8
- 238000007672 fourth generation sequencing Methods 0.000 description 8
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 7
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 6
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 239000008151 electrolyte solution Substances 0.000 description 5
- 239000010408 film Substances 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 5
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 5
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 4
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 4
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 4
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M potassium acetate Chemical compound [K+].CC([O-])=O SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 4
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 3
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 3
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 3
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 3
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 239000003989 dielectric material Substances 0.000 description 3
- 238000007599 discharging Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 239000004065 semiconductor Substances 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 3
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 3
- KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 0.000 description 2
- RYCNUMLMNKHWPZ-SNVBAGLBSA-N 1-acetyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CC(=O)OC[C@@H](O)COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C RYCNUMLMNKHWPZ-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 2
- 238000012935 Averaging Methods 0.000 description 2
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 2
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910021380 Manganese Chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- GLFNIEUTAYBVOC-UHFFFAOYSA-L Manganese chloride Chemical compound Cl[Mn]Cl GLFNIEUTAYBVOC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 101100496858 Mus musculus Colec12 gene Proteins 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 108091093037 Peptide nucleic acid Proteins 0.000 description 2
- 229920000388 Polyphosphate Polymers 0.000 description 2
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- NRTOMJZYCJJWKI-UHFFFAOYSA-N Titanium nitride Chemical compound [Ti]#N NRTOMJZYCJJWKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 2
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- 238000000151 deposition Methods 0.000 description 2
- BBQKXICLDJHVSR-QTNFYWBSSA-L dilithium;(2s)-2-aminopentanedioate Chemical compound [Li+].[Li+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O BBQKXICLDJHVSR-QTNFYWBSSA-L 0.000 description 2
- WDRWZVWLVBXVOI-QTNFYWBSSA-L dipotassium;(2s)-2-aminopentanedioate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O WDRWZVWLVBXVOI-QTNFYWBSSA-L 0.000 description 2
- PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L disodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L 0.000 description 2
- 238000011143 downstream manufacturing Methods 0.000 description 2
- 230000008713 feedback mechanism Effects 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006317 isomerization reaction Methods 0.000 description 2
- 239000013554 lipid monolayer Substances 0.000 description 2
- XIXADJRWDQXREU-UHFFFAOYSA-M lithium acetate Chemical compound [Li+].CC([O-])=O XIXADJRWDQXREU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M lithium chloride Chemical compound [Li+].[Cl-] KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000011565 manganese chloride Substances 0.000 description 2
- 235000002867 manganese chloride Nutrition 0.000 description 2
- 229940099607 manganese chloride Drugs 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 235000013919 monopotassium glutamate Nutrition 0.000 description 2
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 description 2
- -1 oxide Substances 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 2
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 2
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 2
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 2
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 2
- 239000001205 polyphosphate Substances 0.000 description 2
- 235000011176 polyphosphates Nutrition 0.000 description 2
- 210000003429 pore cell Anatomy 0.000 description 2
- 235000011056 potassium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000026280 response to electrical stimulus Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 238000012776 robust process Methods 0.000 description 2
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 2
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 2
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 229940073490 sodium glutamate Drugs 0.000 description 2
- 229910001631 strontium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- AHBGXTDRMVNFER-UHFFFAOYSA-L strontium dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Sr+2] AHBGXTDRMVNFER-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycerol-3-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 0.000 description 1
- MWRBNPKJOOWZPW-NYVOMTAGSA-N 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine zwitterion Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCCN)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC MWRBNPKJOOWZPW-NYVOMTAGSA-N 0.000 description 1
- UKDDQGWMHWQMBI-UHFFFAOYSA-O 1,2-diphytanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)CC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C UKDDQGWMHWQMBI-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 1
- VGONTNSXDCQUGY-RRKCRQDMSA-N 2'-deoxyinosine Chemical group C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(N=CNC2=O)=C2N=C1 VGONTNSXDCQUGY-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000860173 Myxococcus xanthus C-factor Proteins 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 239000004642 Polyimide Substances 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical class OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NMRGXROOSPKRTL-SUJDGPGCSA-N [(2r)-2,3-bis(3,7,11,15-tetramethylhexadecoxy)propyl] 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate Chemical compound CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCOC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C NMRGXROOSPKRTL-SUJDGPGCSA-N 0.000 description 1
- ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N [1-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] (9e,12e)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 125000002015 acyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 1
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003851 biochemical process Effects 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- 239000004566 building material Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 238000005260 corrosion Methods 0.000 description 1
- 230000007797 corrosion Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 1
- 238000013480 data collection Methods 0.000 description 1
- 238000013144 data compression Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000012631 diagnostic technique Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 230000005669 field effect Effects 0.000 description 1
- 238000007667 floating Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- QPJBWNIQKHGLAU-IQZHVAEDSA-N ganglioside GM1 Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC[C@H](NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)[C@H](O)\C=C\CCCCCCCCCCCCC)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@]2(O[C@H]([C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)C2)[C@H](O)[C@H](O)CO)C(O)=O)[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](CO)O1 QPJBWNIQKHGLAU-IQZHVAEDSA-N 0.000 description 1
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N glycerol Substances OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910002804 graphite Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010439 graphite Substances 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 239000011810 insulating material Substances 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 239000012464 large buffer Substances 0.000 description 1
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 1
- 230000005055 memory storage Effects 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 229910044991 metal oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000004706 metal oxides Chemical class 0.000 description 1
- 238000005555 metalworking Methods 0.000 description 1
- YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N methylphosphonic acid Chemical class CP(O)(O)=O YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003032 molecular docking Methods 0.000 description 1
- 239000002052 molecular layer Substances 0.000 description 1
- 150000004767 nitrides Chemical class 0.000 description 1
- 238000003203 nucleic acid sequencing method Methods 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003905 phosphatidylinositols Chemical class 0.000 description 1
- 150000008300 phosphoramidites Chemical class 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001721 polyimide Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 238000013139 quantization Methods 0.000 description 1
- 238000002444 silanisation Methods 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical group 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
- G16B—BIOINFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR GENETIC OR PROTEIN-RELATED DATA PROCESSING IN COMPUTATIONAL MOLECULAR BIOLOGY
- G16B30/00—ICT specially adapted for sequence analysis involving nucleotides or amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6869—Methods for sequencing
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/483—Physical analysis of biological material
- G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
- G01N33/48707—Physical analysis of biological material of liquid biological material by electrical means
- G01N33/48721—Investigating individual macromolecules, e.g. by translocation through nanopores
-
- H—ELECTRICITY
- H03—ELECTRONIC CIRCUITRY
- H03M—CODING; DECODING; CODE CONVERSION IN GENERAL
- H03M7/00—Conversion of a code where information is represented by a given sequence or number of digits to a code where the same, similar or subset of information is represented by a different sequence or number of digits
- H03M7/30—Compression; Expansion; Suppression of unnecessary data, e.g. redundancy reduction
- H03M7/3084—Compression; Expansion; Suppression of unnecessary data, e.g. redundancy reduction using adaptive string matching, e.g. the Lempel-Ziv method
Abstract
Description
[0029]「核酸」は、デオキシリボヌクレオチドまたはリボヌクレオチド、および一本鎖または二本鎖の形態のデオキシリボヌクレオチドまたはリボヌクレオチドのポリマーを指すことがある。この用語は、合成、天然および非天然であり、基準核酸と同様の結合特性を有し、基準ヌクレオチドと同様に代謝される、知られているヌクレオチド類似体または修飾された骨格鎖残基(modified backbone residue)もしくは連鎖(linkage)を含む、核酸を包含することがある。このような類似体の例には、限定はされないが、ホスホロチオアート、ホスホラミダイト、メチルホスホナート、キラル−メチルホスホナート、2−O−メチルリボヌクレオチド、ペプチド−核酸(PNA)が含まれる。
[0038]本明細書に開示された技法は、ナノ細孔ベースのDNA配列決定に関し、より詳細には、多数の並列配列決定センサセルを含むナノ細孔ベースの配列決定センサチップによって生成されたデータの圧縮に関する。
[0041]ナノ細孔センサチップ内のナノ細孔セルは、多くの異なる手法で実施することができる。例えば、いくつかの実施形態では、配列決定する対象の核酸分子中の異なるヌクレオチドに、異なるサイズおよび/または異なる化学構造のタグが取り付けられる。いくつかの実施形態では、配列決定する対象の核酸分子の鋳型に対して相補的な相補鎖が、異なるポリマータグが取り付けられたヌクレオチドをその鋳型とハイブリダイズさせることによって合成される。いくつかの実施態様では、核酸分子と取り付けられたタグの両方がナノ細孔の中を移動し、ナノ細孔を通り抜けるイオン電流が、ヌクレオチドに取り付けられたタグの具体的なサイズおよび/または構造により、ナノ細孔の中にあるヌクレオチドを示す。いくつかの実施態様では、タグだけをナノ細孔の中に移動させる。さらに、ナノ細孔内の異なるタグを検出する多くの異なる手法が存在することがある。
[0042]図1は、ある種の実施形態に基づく、ナノ細孔ベースの配列決定チップ内のナノ細孔セル100の一実施形態を示す簡略化された構造である。ナノ細孔セル100は、酸化物106などの誘電体材料によって形成されたウェルを含むことができる。ウェルを覆うため、ウェルの表面に膜102を形成することができる。いくつかの実施形態では、膜102が脂質2分子層である。セルの表面には、バルク電解液(bulk electrolyte)114が配置されており、バルク電解液114は例えば、可溶性タンパク質ナノ細孔膜貫通分子複合体(soluble protein nanopore transmembrane molecular complex:PNTMC)と、関心の分析物とを含むことができる。エレクトロポレーション(electroporation)によって膜102に単一のPNTMC104を挿入することができる。アレイ内の個々の膜は、化学的にもまたは電気的にも互いに接続されていない。したがって、アレイ内のそれぞれのセルは、PNTMCに結合された単一のポリマー分子に固有のデータを生成する、独立した配列決定マシンである。PNTMC104は、分析物に対して動作し、通常は不透過性である2分子層を通り抜けるイオン電流を変調する。
[0055]ナノ細孔センサチップ内のナノ細孔セルは、単一分子ナノ細孔ベースの配列決定を使用した、合成(Nano−SBS)技法による並列配列決定を可能にすることができる。
[0072]図6Aは、脂質膜または脂質2分子層612を示し、脂質膜または脂質2分子層612は、セル作用電極614と対電極616との間に、脂質膜/2分子層612を横切って電圧が印加されるような態様で位置する。脂質2分子層は、脂質分子の2つの層でできた薄い膜である。脂質膜は、脂質分子数個分(3つ以上)の厚さを有する膜である。脂質膜/2分子層612はさらにバルク液体/電解液618と接触している。図1の作用電極、脂質2分子層および対電極と比べると、作用電極614、脂質膜/2分子層612および対電極616は上下が逆に描かれていることに留意されたい。いくつかの実施形態では、複数のセル間で対電極が共用されており、したがって対電極は共通電極とも呼ばれる。この共通電極を電圧源Vliq620に接続することにより、この共通電極を、測定セル内の脂質膜/2分子層と接触したバルク液体に共通の電位を印加するように構成することができる。この共通電位および共通電極は、全ての測定セルに対して共通である。それぞれの測定セル内にはセル作用電極があり、作用セル作用電極614は、共通電極とは対照的に、他の測定セル内のセル作用電極から独立して明確に異なる電位を印加するように構成可能である。
[0094]図8は、ある種の実施形態に基づく、ナノ細孔配列決定セルを形成および較正する例示的な方法を示す流れ図である。較正の一部として、配列決定セルの製作中にさまざまな検査を実施することができる。例えば所望のとおりの機能を有する(例えばそのセルに1つのナノ細孔がある)配列決定セルを識別するため、セルが製作された後に、さらなる較正ステップを実行することができる。これらの較正ステップが完了した後、正規化および配列決定を実行することができる。
[0104]乾式検査は、配列決定チップ内に緩衝液(例えば電解質溶液)が流される前、およびウェルの上に膜(例えば脂質2分子層)が形成される前に実行することができる。乾式検査では、配列決定チップの(例えばそれぞれの配列決定セルの)電気構成要素を検査して、それらの構成要素が適正に機能していること、例えば(例えば特定の範囲内の)予想される値を有する信号がそれぞれのウェルから受け取られることを確認する。この時点ではウェル内または試料チャンバ内に電解質溶液がないため、電極間(例えば電極202と210の間)には接続がないはずである。したがって、「開」状態が予想されるであろう。接続(すなわち短絡状態)が存在する場合には、測定される電圧が予想される範囲の外にあることになり(例えば電圧測定値が基準電圧と同じであり)、それによってセルに何か誤りがあることが示される。いくつかの実施形態では、乾式検査が、ウィグルポイントデルタ(WPD)またはステップポイントデルタ(SPD)を使用して実行される。上で定義したとおり、ステップポイントデルタ(SPD)は、明期の最後のデータ点と次の暗期の最初のデータ点との差(すなわちSPDpos/neg)、または暗期の最後のデータ点と次の明期の最初のデータ点との差(SPDneg/pos)とすることができる。ウィグルポイントデルタ(WPD)は、ウィグル波形が印加されたときの明期の最後のデータ点と次の暗期の最初のデータ点との差とすることができる。したがって、しきい値よりも大きなWPDまたはSPDは、セルが短絡状態にあることを示していることがある。その場合、2つの電極間に電解質溶液がない場合でも、それらの2つの電極が電気的に接続されており、したがって、セルの一部の電気構成要素に欠陥(例えば短絡)がある可能性がある。いくつかの実施形態では、乾式検査に、ファーストポイントデルタ(FPD)またはラストポイントデルタ(LPD)などの他のパラメータが使用される。
[0112]異なる電圧に対してシステムを較正するため、それぞれのセルのゼロ点電圧(本明細書ではVMzeroとも称する)を決定することができる。電子工学的な理由から、それぞれのセルは異なるDCオフセットを有することがある。例えば、チップ内の異なるセルのアナログ回路間には、製造不完全部または製造変動が存在しうる。さらに、電気化学的理由から、システム内にバイアスが構築されることがある。このような製造可変性のため、1つの電極は、別の電極とはわずかに異なることがある。このことはセル間にオフセットを導入しうる。加えて、電極の表面化学によって電極が電池として機能することがあり、したがって、それぞれのセルがわずかに異なる電位を有することがある。このことは、それぞれのセルのVMzeroに寄与しうる。ある種の実施形態によれば、正味の効果が、VMzeroの値によって、測定されるADC信号が押し上げられたりまたは押し下げられたりすることである。実施形態は、セル間のこのような変動を考慮するために較正を実行することができる。
[0127]ナノ細孔は、いくつかの異なる手法で脂質2分子層に挿入することができる。例えば、チップ内の圧力に依存して膜の中に細孔をランダムに拡散させる場合、その割合は二項分布によって支配されるであろう。そのような状況では、多くのセルがナノ細孔を持たず、一部のセルが1つのナノ細孔を有し、一部のセルが2つのナノ細孔を有し、大多数のセルが1以外の数のナノ細孔を有するであろう。しかしながら、ある種の実施形態によれば、配列決定のためにはそれぞれのセルが1つのナノ細孔だけを有することが最も有利である。それぞれのセルが1つよりも多くのナノ細孔、例えば2つのナノ細孔を有する場合、その細孔からの信号は、2つの細孔からの2つの信号のある組合せとなり、それによって信号レベルは誤差を有しうる。そのため、システムは、単一細孔セルとは異なる等価回路を有する。さらに、組み合わされた信号は、異なる時刻にナノ細孔に入ったタグに由来するものとなり、このことは、所与の時刻にどの塩基であると宣言すべきかを知ることを難しくする。
[0131]エレクトロポレーションの後、タグがその場にないセルの出力電圧を測定して、そのセルの初期電圧を決定することができる。図6A〜7を参照して上で説明したとおり、この測定ADC値は開チャネル電圧と呼ばれる。後に説明するように、この開チャネル電圧の値は正規化の際に使用することができる。加えて、次のセクションで説明するように、開チャネルの値を使用して、単一のナノ細孔を有するセルを識別することもできる。
[0137]上で述べたとおり、配列決定チップのそれぞれのセルが1つのナノ細孔だけを有することが望ましい。ある種の実施形態によれば、開チャネル電圧(例えば明モードまたは暗モード中に、ナノ細孔の中にタグが存在しない状態で測定されたADC値)の大きさの統計的分析によって、1つのナノ細孔を有するセルを識別することができる。測定された電圧をビン(bin)に区分けし、特定の電圧ビンに含まれる電圧を有するセルの数を数えることによって、測定電圧のヒストグラム(または分布)を計算することができる。このヒストグラムを分析して、最大振幅ピークを決定することができる。すなわち、チップのセルの中で最も一般的な電圧を決定することができる。ある予想される範囲内に入るようにこの最大振幅ピークを拘束することができ、これは、指定された値よりも高い全ての測定電圧を含むヒストグラムの最後のビンを排除することによって実行することができる。
[0152]チップの使用可能なセルを識別した後、生成モード(production mode)を実行して、使用可能なセルごとに1つの核酸の配列を決定することができる。配列決定を実行するために、タグ付きヌクレオチドが核酸に付加されている間の積分コンデンサ(例えば積分コンデンサCint608(ncap)またはコンデンサCbilayer626)の電圧レベルを、ADC(例えばADC610)によってサンプリングおよび変換することができる。例えば対電極および作用電極を通して加えられたナノ細孔を横切る電場が、Vliqの方がVpreよりも高いような電場であるときには、加えられたその電場によって、ヌクレオチドのタグをナノ細孔の筒の中に押し込むことができる。
[0153]挿通事象は、タグ付きヌクレオチドが鋳型(例えば核酸断片)に取り付けられているときの事象であり、タグは、ナノ細孔の筒に出入りする。この筒への出入りは、挿通事象中に多数回、起こりうる。タグがナノ細孔の筒の中にあるときには、ナノ細孔の抵抗がより高くなることがあり、ナノ細孔を流れる電流がより小さくなることがある。
[0155]ACサイクル中に、積分コンデンサ上の電圧をADCによって多数回、サンプリングすることができる。例えば、一実施形態では、システムを横切って例えば約100HzのAC電圧信号が印加され、ADCの取得率をセルあたり約2000Hzとすることができる。したがって、1ACサイクル(AC波形のサイクル)あたり約20個のデータ点(電圧測定値)が捕捉されうる。AC波形の1つのサイクルに対応するデータ点は、セットと呼ばれることがある。ACサイクルに対するデータ点のセットには、例えばVliqの方がVpreよりも低いときに捕捉されたサブセットが存在することがあり、このサブセットは、タグがナノ細孔の筒の中に押し込まれる明モード(明期)に対応することがある。別のサブセットは、例えばVliqの方がVpreよりも高いときに、加えられた電場によってタグがナノ細孔の筒から押し出される暗モード(暗期)に対応することがある。
[0156]それぞれのデータ点に関して、スイッチ601が開いているとき、積分コンデンサ(例えば積分コンデンサCint608(ncap)またはコンデンサCbilayer626)における電圧は、Vliqによる充電/放電の結果として、例えば、Vliqの方がVpreよりも高いときにはVpreからVliqへの増大として、またはVliqの方がVpreよりも低いときにはVpreからVliqへの低下として、減衰的に変化する。最終的な電圧値は、作用電極が充電するためVliqから外れることがある。積分コンデンサ上の電圧レベルの変化率は、ナノ細孔を含むことがある2分子層の抵抗の値によって支配されることがあり、ナノ細孔は、ナノ細孔の中に分子(例えばタグ付きヌクレオチドのタグ)を含むことがある。この電圧レベルは、スイッチ601が開いた後の所定の時刻に測定することができる。
[0159]正確さをより高めるために、配列決定中に捕捉されたADC出力データを正規化することができる。正規化は、サイクル内減衰サイクル形状(intracycle decay cycle shape)、ゲインドリフトおよびベースラインシフトなどのオフセットの影響を考慮することができる。上述のとおり、正規化は、測定された開チャネル電圧を使用して実行することができる。例えば、いくつかの状況では、明モード開チャネル電圧が一定であり、したがって、全ての明モードデータを同じ正規化係数で割って、正規化を実行することができる。
[0170]正規化後、実施形態は、挿通チャネルの電圧のクラスタを決定することができる。それぞれのクラスタは、異なるタグ種、したがって異なるヌクレオチド(または塩基)に対応する。それらのクラスタを使用して、所与のヌクレオチドに対応する所与の電圧の確率を決定することができる。別の例として、それらのクラスタを使用して、異なるヌクレオチド(塩基)を区別するためのカットオフ電圧を決定することもできる。いくつかの実施形態では、正規化されたデータから、または配列決定セルの動作が経時的に十分に安定している場合には未処理のデータから、ヒストグラムが作成される。次いで、このヒストグラムに基づき、ラプラシアン混合モデル(Laplacian mixture model:LMM)を使用して、異なるヌクレオチド(塩基)を区別するためのカットオフ電圧を決定することができる。このラプラシアンの幅は、フィッティング(fitting)手順の一部として決定することができる。正の開チャネルに対する1つのラプラシアン関数と、4つのそれぞれのヌクレオチドに対する1つのラプラシアン関数の、合わせて5つのラプラシアン関数が存在しうる。クラスタはセルごとに決定することができる。
[0174]図13は、本発明の実施形態に基づく、ナノ細孔ベースの配列決定センサチップ1310によって捕捉されたデータを処理するための例示的なシステムのブロック図を示す。センサチップ1310は、数千個もしくは数百万個またはそれよりも多くのセルを含むことができる。上述のとおり、このデータは、センサチップ1310のセルによって、セル形成および配列決定のさまざまな段階中に捕捉されたものとすることができ、このデータは、例えば、(例えば電気回路の開路/短絡を検査するために)脂質層の形成前に、厚い脂質層の形成後に、脂質層の薄化中に、2分子層の形成後に、(例えばそれぞれのセルのナノ細孔の数を決定するため、または正規化のための開チャネルデータを測定するために)ナノ細孔の形成後に、および(例えば正規化のために)試料の配列決定中に捕捉されたものを含む。
[0182]図14は、本発明のいくつかの実施形態に基づく、図13のセンサチップ1310などの例示的なナノ細孔ベースの配列決定チップによって捕捉された未処理のデータフレームの例を示す。図14に示されているように、第1のナノ細孔セルからの検出信号は、波形1410によって示すことができる。波形1410は、複数のACサイクルを含むことがある。それぞれのACサイクルは、図7に関して上で説明したように暗期1412および明期1418を含むことがある。示されているように、1412および1414における信号は、ナノ細孔の中にタグがないときの、例えば挿通がないときの開チャネル値である。明期1418は、挿入期1416を含むことがあり、その間は、この間にナノ細孔の中にタグが挿通された結果として、検出信号の値が異なることがある。図14は、暗期1412の検出信号の方が明期1418の検出信号よりも高いことを示しているが、セル電圧基準(例えば電圧源Vpre605)がどのように構成されているのかによっては、暗期の検出信号の方が明期の検出信号よりも低いこともある。
[0186]転送および記憶されるデータの量を減らすため、図13のFPGA1320などの前処理装置(preprocessor)は、いくつかのフレームを落とす(drop)ことができる。例えば、1つのACサイクル内の10個(例えば明期6個、暗期4個)の全ての未処理データフレームを送るのではなしに、そのACサイクル内の7つの未処理データフレームを落とし、残りの3つの未処理データフレームを送ることができる。一実施態様では、この3つの未処理データフレームが、暗期中に捕捉された1つの未処理データフレーム、および明期中に捕捉された2つの未処理データフレーム(挿入期中に捕捉された1つの未処理データフレームを含む)を含む。そのため、転送されるデータの量を、配列決定チップによって捕捉された未処理データの約30%に減らすことができる。
[0190]本開示のある種の態様によれば、前処理装置(例えばFPGA1320)は、ナノ細孔ベースの配列決定チップ(例えばセンサチップ1310)によって捕捉された未処理のデータを処理してさまざまな関連情報を抽出し、その関連情報を、配列決定する対象の核酸分子中の塩基をリアルタイムで決定するために処理装置(例えばGPU1330)に送る。
[0204]上述のとおり、さまざまな実施形態において、対応するダイジェストデータフレームおよび/または未処理データフレームを識別するためにフレームマップが使用され、フレームマップは、処理装置が、どのデータフレームを受け取ったのかを知ることができ、したがってそれらのデータフレームを使用して塩基を決定することができるように、前処理装置によって処理装置に送られる。例えば、いくつかの実施形態では、サイクルごとにフレームマップが生成され、そのフレームマップは、それぞれのサイクルに含まれるフレームに関する情報を含む。いくつかの実施形態では、多数のサイクルに対して1つのフレームマップが生成され、そのフレームマップは、多数のサイクルを横切って生成されたフレームに関する情報を含む。いくつかの実施形態では、100サイクルごとに、1秒ごとに、または塩基を決定するのに十分な情報を含む未処理データフレームに対して、フレームマップが生成される。
[0206]図15は、本発明のいくつかの実施形態に基づく、例示的なナノ細孔ベースの配列決定チップによって捕捉された未処理のデータフレームを前処理することによって生成された例示的なダイジェストデータフレームを示す。図15に示されているように、配列決定検定において捕捉された複数の未処理データフレーム1510を前処理し、はるかに少数のダイジェストデータフレーム1520に変換することができる。ダイジェストデータフレーム1520は次いで、核酸分子中の塩基を識別するリアルタイム並列処理のために、1つまたは複数のサイクルのダイジェストデータフレームのタイプを識別するフレームマップとともに、GPUなどの多数のコアを有する処理装置に送られる。例えば、図15に示されているように、サイクル1の未処理データフレームを前処理し、例えば上述の15個以上の未処理データフレームではなしに、ファーストポイントデータフレームF、中間データ点フレームMおよび減衰情報フレームDを含む3つのダイジェストデータフレームに変換することができる。
[0213]図17は、ある種の実施形態に基づく、複数(例えば100,000個以上)のDNA分子の配列を並列に決定するように構成された配列決定システムを操作する例示的な方法を示す流れ図1700である。この方法は、図13のFPGA1320などの前処理装置によって実行することができる。
[0219]上述のとおり、データ処理システムの前処理装置は、未処理データフレームをダイジェストデータフレームに変換して、システム内のさまざまなバスを介して送られるデータの量をかなり減らすことができる。このデータ量の低減は、さらなる処理をリアルタイムで実行することを可能にし、それによって、試験下の核酸分子中の塩基をリアルタイムで決定することを可能にしうる。したがって、システムは、少なくともある時期に、余分の帯域幅および/または処理パワーを有することができる。
[0231]本明細書に記載されたコンピュータシステムはいずれも、適当な数のサブシステムを利用することができる。このようなサブシステムの例が図19のコンピュータシステム10に示されている。いくつかの実施形態では、コンピュータシステムが単一のコンピュータ装置を含み、その場合には、上記サブシステムを、そのコンピュータ装置の構成要素とすることができる。別の実施形態では、コンピュータシステムが、内部構成要素を含む多数のコンピュータ装置を含むことができ、それらのコンピュータ装置はそれぞれがサブシステムである。コンピュータシステムは、デスクトップおよびラップトップコンピュータ、タブレット、携帯電話ならびに他の携帯型装置を含むことができる。
Claims (16)
- 少なくとも100,000個のDNA分子の配列を並列に決定するように構成された配列決定システムを操作する方法であって、前記方法が、前処理回路において、
複数のセルを含むセンサチップからデータフレームの第1のセットを受け取るステップであり、前記複数のセルのうちのそれぞれのセルが、そのセルの状態を決定するための検出信号を経時的に生成するように構成されており、それぞれのデータフレームが、前記複数のセルからの検出信号を含み、異なる1つの時刻に対応する、前記ステップと、
データフレームの前記第1のセットの中の前記複数のセルの前記検出信号から情報を抽出して、前記複数のセルの前記状態を決定する際に使用する第1のダイジェスト情報を取得するステップと、
データフレームの前記第1のセットから抽出された前記第1のダイジェスト情報を含む1つまたは複数のダイジェストフレームの第1のグループを生成するステップであり、1つまたは複数のダイジェストフレームの前記第1のグループにおけるダイジェストフレームの数が、データフレームの前記第1のセットにおけるデータフレームの数よりも少ない、前記ステップと、
1つまたは複数のダイジェストフレームの前記第1のグループを、前記複数のセルの前記状態を決定する際に使用する処理装置に送るステップと
を実行することを含む、前記方法。 - 1つまたは複数のダイジェストフレームの前記第1のグループが、データフレームの前記第1のセットからの1つまたは複数のデータフレームを含む、請求項1に記載の方法。
- セルの前記状態が、
前記セルの開放状態もしくは短絡状態、
前記セル内の2分子層の存在もしくは不在、
前記セル内のナノ細孔の存在もしくは不在、
前記セルに関連づけられた塩基、または
これらの任意の組合せ
からなる群から選択された、請求項1に記載の方法。 - データフレームの前記第1のセットが、前記複数のセルの形成中に生成された、前記センサチップからのデータフレームを含む、請求項1に記載の方法。
- データフレームの前記第1のセットが、前記複数のセルの較正中に生成された、前記センサチップからのデータフレームを含む、請求項1に記載の方法。
- データフレームの前記第1のセットが、配列決定サイクルにおいて生成された、前記センサチップからのデータフレームを含む、請求項1に記載の方法。
- データフレームの前記第1のセットが、多数の配列決定サイクルにおいて生成された、前記センサチップからのデータフレームを含む、請求項1に記載の方法。
- 1つまたは複数のダイジェストフレームの前記第1のグループの特性を識別するフレームマップを生成するステップをさらに含む、請求項1に記載の方法。
- 前記センサチップからのデータフレームの第2のセットを使用して1つまたは複数のダイジェストフレームの第2のグループを生成するよう求めるリクエストを受け取るステップと、
前記リクエストに基づいて、データフレームの前記第2セットの中の前記複数のセルの前記検出信号から情報を抽出して、前記複数のセルの前記状態を決定する際に使用する第2のダイジェスト情報を取得するステップと、
データフレームの前記第2のセットから抽出された前記第2のダイジェスト情報を含む1つまたは複数のダイジェストフレームの前記第2のグループを生成するステップと、
1つまたは複数のダイジェストフレームの前記第2のグループを前記処理装置に送るステップと
をさらに含む、請求項1に記載の方法。 - 前記検出信号が、1つまたは複数のAC信号サイクル内のデータ点を含み、それぞれのAC信号サイクルが明期および暗期を含み、前記検出信号が、前記1つまたは複数のAC信号サイクルのうちのそれぞれのAC信号サイクルの明期内の1つまたは複数のデータ点と、前記1つまたは複数のAC信号サイクルのうちのそれぞれのAC信号サイクルの暗期内の1つまたは複数のデータ点とを含み、
前記1つまたは複数のダイジェストフレームのうちのそれぞれのダイジェストフレームが、前記複数のセルのうちのそれぞれのセルについて、
AC信号サイクルの前記明期内の最初のデータ点と前記AC信号サイクルの前記暗期内の第1のデータ点との差、
AC信号サイクルの前記明期内の最後のデータ点と前記AC信号サイクルの前記暗期内の最後のデータ点との差、
明期内の最後のデータ点と次の暗期内の最初のデータ点との差、
暗期内の最後のデータ点と次の明期内の最初のデータ点との差、または
AC信号サイクルの暗期内の2つのデータ点間の差
を含む、
請求項1に記載の方法。 - センサチップからの出力データを処理するための装置であって、前記装置が、
前処理回路と、
前記前処理回路に結合されたメモリと
を備え、
前記前処理回路が、前記センサチップからデータフレームの第1のセットを受け取るように構成されており、前記センサチップが複数のセルを含み、前記複数のセルのうちのそれぞれのセルが、そのセルの状態を決定するための検出信号を経時的に生成するように構成されており、それぞれのデータフレームが、前記複数のセルからの検出信号を含み、異なる1つの時刻に対応し、
前記前処理回路がさらに、データフレームの前記第1のセットのうちの少なくともいくつかを前記メモリに記憶するように構成されており、
前記前処理回路がさらに、データフレームの前記第1のセットの中の前記複数のセルの前記検出信号から情報を抽出して、前記複数のセルの前記状態を決定するための第1のダイジェスト情報を取得するように構成されており、
前記前処理回路がさらに、データフレームの前記第1のセットから抽出された前記第1のダイジェスト情報を含む1つまたは複数のダイジェストフレームの第1のグループを生成するように構成されており、1つまたは複数のダイジェストフレームの前記第1のグループにおけるダイジェストフレームの数が、データフレームの前記第1のセットにおけるデータフレームの数よりも少なく、
前記前処理回路がさらに、1つまたは複数のダイジェストフレームの前記第1のグループを、前記複数のセルの前記状態を決定する際に使用する処理装置に送るように構成されている、
前記装置。 - 前記前処理回路が、フィールドプログラマブルゲートアレイ(FPGA)、システムオンチップ(SoC)、特定用途向け集積回路(ASIC)、プログラマブルアレイロジック(PAL)、またはコンプレックスプログラマブルロジックデバイス(CPLD)を含む、請求項11に記載の装置。
- 前記前処理回路がさらに、1つまたは複数のダイジェストフレームの前記第1のグループの特性を識別するフレームマップを生成するように構成された、請求項11に記載の装置。
- セルの前記状態が、
前記セルの開放状態もしくは短絡状態、
前記セル内の2分子層の存在もしくは不在、
前記セル内のナノ細孔の存在もしくは不在、
前記セルに関連づけられた塩基、または
これらの任意の組合せ
から選択された、請求項11に記載の装置。 - データフレームの前記第1のセットが、前記複数のセルの形成中または1つもしくは複数の配列決定サイクル中に生成された、前記センサチップからのデータフレームを含む、
請求項11に記載の装置。 - 前記検出信号が、1つまたは複数のAC信号サイクル内のデータ点を含み、それぞれのAC信号サイクルが明期および暗期を含み、前記検出信号が、前記1つまたは複数のAC信号サイクルのうちのそれぞれのAC信号サイクルの明期内の1つまたは複数のデータ点と、前記1つまたは複数のAC信号サイクルのうちのそれぞれのAC信号サイクルの暗期内の1つまたは複数のデータ点とを含み、
前記1つまたは複数のダイジェストフレームのうちのそれぞれのダイジェストフレームが、前記複数のセルのうちのそれぞれのセルについて、
AC信号サイクルの前記明期内の最初のデータ点と前記AC信号サイクルの前記暗期内の第1のデータ点との差、
AC信号サイクルの前記明期内の最後のデータ点と前記AC信号サイクルの前記暗期内の最後のデータ点との差、
明期内の最後のデータ点と次の暗期内の最初のデータ点との差、
暗期内の最後のデータ点と次の明期内の最初のデータ点との差、または
AC信号サイクルの暗期内の2つのデータ点間の差
を含む、請求項11に記載の装置。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201662435033P | 2016-12-15 | 2016-12-15 | |
US62/435,033 | 2016-12-15 | ||
PCT/EP2017/082872 WO2018109102A1 (en) | 2016-12-15 | 2017-12-14 | Adaptive nanopore signal compression |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2020504816A true JP2020504816A (ja) | 2020-02-13 |
JP6770197B2 JP6770197B2 (ja) | 2020-10-14 |
Family
ID=60935809
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019531973A Active JP6770197B2 (ja) | 2016-12-15 | 2017-12-14 | 適応ナノ細孔信号圧縮 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US11139047B2 (ja) |
EP (1) | EP3555306B1 (ja) |
JP (1) | JP6770197B2 (ja) |
CN (2) | CN116515973A (ja) |
WO (1) | WO2018109102A1 (ja) |
Families Citing this family (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2017223515A1 (en) * | 2016-06-23 | 2017-12-28 | F. Hoffman-La Roche Ag | Formation and calibration of nanopore sequencing cells |
WO2018029108A1 (en) * | 2016-08-08 | 2018-02-15 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Basecalling for stochastic sequencing processes |
CN116515973A (zh) * | 2016-12-15 | 2023-08-01 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 自适应纳米孔信号压缩 |
US11580413B2 (en) | 2017-09-01 | 2023-02-14 | Seagate Technology Llc | Recovering timing information from DNA encoded data |
WO2020002516A1 (en) | 2018-06-27 | 2020-01-02 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Multiplexing analog component in biochemical sensor arrays |
WO2020103126A1 (zh) * | 2018-11-23 | 2020-05-28 | 深圳华大智造科技有限公司 | 基因测序反应平台、测序芯片及相关方法、系统 |
EP3894056A2 (en) * | 2018-12-11 | 2021-10-20 | F. Hoffmann-La Roche AG | Systems and methods for self-limiting protein pore insertion in a membrane |
CN112731254B (zh) * | 2021-03-31 | 2021-07-13 | 北京齐碳科技有限公司 | 电流测量电路校准参数的确定方法、装置、系统及设备 |
US20240017061A1 (en) * | 2022-02-25 | 2024-01-18 | Inovio Pharmaceuticals, Inc. | Handheld Electroporation Devices, And Related Systems And Methods |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH08292062A (ja) * | 1995-04-21 | 1996-11-05 | Syst Design K:Kk | 測定装置 |
JP2013519088A (ja) * | 2010-02-08 | 2013-05-23 | ジニア・テクノロジーズ・インコーポレーテッド | ナノ細孔内の分子を操作するためのシステムおよび方法 |
JP2016504019A (ja) * | 2012-11-09 | 2016-02-12 | ジェニア・テクノロジーズ・インコーポレイテッド | タグを用いた核酸の配列決定 |
JP2016504593A (ja) * | 2013-02-05 | 2016-02-12 | ジェニア・テクノロジーズ・インコーポレイテッド | ナノポアアレイ |
WO2016073318A1 (en) * | 2014-11-05 | 2016-05-12 | Genia Technologies, Inc. | Exporting measurements of nanopore arrays |
WO2016099673A1 (en) * | 2014-12-19 | 2016-06-23 | Genia Technologies, Inc. | Nanopore-based sequencing with varying voltage stimulus |
Family Cites Families (24)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6936433B2 (en) * | 2000-11-27 | 2005-08-30 | The Regents Of The University Of California | Methods and devices for characterizing duplex nucleic acid molecules |
US6853444B2 (en) * | 2002-08-30 | 2005-02-08 | Waleed S. Haddad | Non-contact optical imaging system for biometric identification |
US7298293B2 (en) * | 2005-06-03 | 2007-11-20 | Sarukkai R. Narayanan | Method for encoding data |
US20110008775A1 (en) * | 2007-12-10 | 2011-01-13 | Xiaolian Gao | Sequencing of nucleic acids |
CN102132495B (zh) * | 2008-05-15 | 2015-04-29 | 皇家飞利浦电子股份有限公司 | 用于压缩和解压缩图像数据组的方法、设备 |
CN102282586B (zh) * | 2009-01-19 | 2017-05-10 | 诺基亚技术有限公司 | 用于减少图像数据的大小的方法和装置 |
US8926904B2 (en) * | 2009-05-12 | 2015-01-06 | Daniel Wai-Cheong So | Method and apparatus for the analysis and identification of molecules |
JP5428835B2 (ja) * | 2009-12-21 | 2014-02-26 | 富士通株式会社 | 署名装置、署名方法、および署名プログラム |
US8965076B2 (en) * | 2010-01-13 | 2015-02-24 | Illumina, Inc. | Data processing system and methods |
US9605307B2 (en) * | 2010-02-08 | 2017-03-28 | Genia Technologies, Inc. | Systems and methods for forming a nanopore in a lipid bilayer |
JP5621675B2 (ja) * | 2011-03-18 | 2014-11-12 | 富士通株式会社 | 署名装置、署名方法、および署名プログラム |
JP6573899B2 (ja) * | 2013-11-17 | 2019-09-11 | クアンタム−エスアイ インコーポレイテッドQuantum−Si Incorporated | 分子をプローブし、検出し、及び分析するための、外部光源を備えた集積デバイス |
US9965586B2 (en) * | 2014-03-20 | 2018-05-08 | The Regents Of The University Of California | Noise reduction methods for nucleic acid and macromolecule sequencing |
US10006899B2 (en) * | 2014-03-25 | 2018-06-26 | Genia Technologies, Inc. | Nanopore-based sequencing chips using stacked wafer technology |
GB2530012A (en) * | 2014-08-05 | 2016-03-16 | Illumina Cambridge Ltd | Methods and systems for data analysis and compression |
US9863904B2 (en) | 2014-12-19 | 2018-01-09 | Genia Technologies, Inc. | Nanopore-based sequencing with varying voltage stimulus |
US10935512B2 (en) | 2015-09-24 | 2021-03-02 | Roche Sequencing Solutions, Inc. | Encoding state change of nanopore to reduce data size |
CN105695318B (zh) * | 2016-02-24 | 2018-10-23 | 严媚 | 一种纳米孔基因检测传感器芯片 |
US10155979B2 (en) | 2016-03-30 | 2018-12-18 | Roche Molecular Systems, Inc. | Non-destructive bilayer monitoring using measurement of bilayer response to electrical stimulus |
US10465240B2 (en) | 2016-03-30 | 2019-11-05 | Roche Sequencing Solutions, Inc. | Electrical enhancement of bilayer formation |
US11124827B2 (en) * | 2016-06-23 | 2021-09-21 | Roche Sequencing Solutions, Inc. | Period-to-period analysis of AC signals from nanopore sequencing |
WO2017223515A1 (en) | 2016-06-23 | 2017-12-28 | F. Hoffman-La Roche Ag | Formation and calibration of nanopore sequencing cells |
CN116515973A (zh) * | 2016-12-15 | 2023-08-01 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 自适应纳米孔信号压缩 |
US10921284B2 (en) * | 2017-04-19 | 2021-02-16 | Roche Sequencing Solutions, Inc. | Phased nanopore array |
-
2017
- 2017-12-14 CN CN202310089401.8A patent/CN116515973A/zh active Pending
- 2017-12-14 EP EP17825453.8A patent/EP3555306B1/en active Active
- 2017-12-14 CN CN201780086481.4A patent/CN110268045B/zh active Active
- 2017-12-14 JP JP2019531973A patent/JP6770197B2/ja active Active
- 2017-12-14 WO PCT/EP2017/082872 patent/WO2018109102A1/en unknown
- 2017-12-15 US US15/844,244 patent/US11139047B2/en active Active
-
2021
- 2021-09-15 US US17/475,709 patent/US20220005549A1/en active Pending
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH08292062A (ja) * | 1995-04-21 | 1996-11-05 | Syst Design K:Kk | 測定装置 |
JP2013519088A (ja) * | 2010-02-08 | 2013-05-23 | ジニア・テクノロジーズ・インコーポレーテッド | ナノ細孔内の分子を操作するためのシステムおよび方法 |
JP2016504019A (ja) * | 2012-11-09 | 2016-02-12 | ジェニア・テクノロジーズ・インコーポレイテッド | タグを用いた核酸の配列決定 |
JP2016504593A (ja) * | 2013-02-05 | 2016-02-12 | ジェニア・テクノロジーズ・インコーポレイテッド | ナノポアアレイ |
WO2016073318A1 (en) * | 2014-11-05 | 2016-05-12 | Genia Technologies, Inc. | Exporting measurements of nanopore arrays |
WO2016099673A1 (en) * | 2014-12-19 | 2016-06-23 | Genia Technologies, Inc. | Nanopore-based sequencing with varying voltage stimulus |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US11139047B2 (en) | 2021-10-05 |
EP3555306A1 (en) | 2019-10-23 |
WO2018109102A1 (en) | 2018-06-21 |
US20220005549A1 (en) | 2022-01-06 |
JP6770197B2 (ja) | 2020-10-14 |
EP3555306B1 (en) | 2023-01-18 |
CN116515973A (zh) | 2023-08-01 |
CN110268045B (zh) | 2023-02-21 |
US20180173844A1 (en) | 2018-06-21 |
CN110268045A (zh) | 2019-09-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2020504816A (ja) | 適応ナノ細孔信号圧縮 | |
US11892444B2 (en) | Formation and calibration of nanopore sequencing cells | |
CN109952382B (zh) | 随机测序方法的碱基识别 | |
JP7366073B2 (ja) | バイオケミカルセンサアレイの多重化アナログ構成要素 | |
JP2019527819A (ja) | ナノポア配列決定からのac信号の定期分析 | |
CN109791138B (zh) | 纳米孔电压方法 | |
US20200283844A1 (en) | Normalization and baseline shift removal by rotation in added data dimensions | |
CN111212919B (zh) | 纳米孔测序单元中的双电层电容的测量 | |
CN115485553A (zh) | 用于使用捕获的电荷形成双层以及以纳米孔阵列插入孔的系统和方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20190807 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20200729 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20200902 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20200924 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6770197 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |