JP2020158486A - 高い遊離アミノ酸含有量を有する組成物、ならびに動物飼料用の完全飼料及び原材料としての使用 - Google Patents

高い遊離アミノ酸含有量を有する組成物、ならびに動物飼料用の完全飼料及び原材料としての使用 Download PDF

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Abstract

【課題】高い遊離アミノ酸含有量を有する組成物、並びに動物飼料用の完全飼料及び原材料の提供。【解決手段】加水分解物のアミノ酸の総重量に対して、少なくとも９４重量％、好ましくは少なくとも９６重量％、より好ましくは１００重量％の遊離アミノ酸を含み、少なくとも以下のアミノ酸を含むことを特徴とするケラチン加水分解物：加水分解物中のバリンの総重量に対して、少なくとも９３重量％、好ましくは少なくとも９５重量％の遊離形態のバリン、加水分解物中のイソロイシンの総重量に対して、少なくとも９０重量％、好ましくは少なくとも９５重量％の遊離形態のイソロイシン、及び加水分解物中のロイシンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のロイシン。【選択図】なし

Description

本発明は、特にケラチン加水分解物から得られる高い遊離アミノ酸含有量を有する組成物の分野、ならびに動物飼料のための完全飼料及び原材料（starting material）としてのその使用に関する。
アミノ酸系組成物（amino acid-based composition）は、栄養補助食品（nutraceutics）、化粧品、ならびにヒト及び動物の栄養などの非常に多様な分野において、これらの各分野における非常に様々な特定の用途のために使用される。特に言及することができるのは、毛髪の成長及び光沢、睡眠の改善ならびにストレスの軽減を目的とする使用であり、また必須アミノ酸のリバランス（re-balance）を目的とする使用、ならびに乳児の栄養やイヌ及びネコの栄養におけるタンパク質の供給源としての使用である。
アミノ酸系組成物を得る方法の１つは、ケラチン材料（物質）（material）の加水分解物を生成することである。
天然ケラチン材料は、主に、酵素へのアクセスを困難にする高度に架橋された構造を有する高分子量ポリペプチドを含む。この天然ケラチン材料は消化が悪い。しかしながら、ケラチン材料のアミノ酸への加水分解は、前記ケラチン材料の消化率を改善することを可能にすることが知られている。
特に、栄養補助食品（food supplement）として、動物栄養のレシピ配合成分として、又は動物飼料の原材料として、販売が提案されているケラチン加水分解物は、通常、非常に部分的な加水分解によって得られる。これらの加水分解物は、通常、ペプチドを形成する高レベル（level）の「結合」アミノ酸の存在のために、高分子量を有する。典型的には、市販の組成物の分子量は、少なくとも５０００ダルトンである。これらのケラチン加水分解物は、比較的難消化性で、遊離アミノ酸をほとんど含まないか、又は全く含まない。実際に、非常に高レベルの遊離アミノ酸を有するケラチン加水分解物を得ることは、工業的観点から技術的に困難であり、かつ高価である。さらに、加水分解が広範囲すぎると、アミノ酸が変性して破壊される危険がある。
このような加水分解物を得るためには、濃縮された化学物質（chemical entrant）の使用及び制御、ならびに化学工学の分野に属するプロセスの使用及び制御に基づくノウハウが必要となる。市場に存在するタンパク質加水分解物の大部分が、部分的で不完全な加水分解の結果、遊離アミノ酸の割合が低くなっているのは、このように高レベルな技術要件があるからである。
しかしながら、記事「Extensive protein hydrolyzation is indispensable to prevent IgE-mediated poultry allergen recognition in dogs and cats」Olivryら、BMC Veterinary Research(2017)13:251に示されているように、所望の用途に応じて、遊離アミノ酸含有量が非常に高い組成物を有することが有利であるか、又は必要でさえあり得る。
特開平３−１１０９９号公報は、以下の２工程（step）で得られるケラチン加水分解物、及び毛髪化粧品におけるその使用を記載している：全てのアミノ酸に対して、シスチンレベルが５〜１８ｍｏｌ％であり、分子量が３００〜５０００Ｄａである加水分解物を得る、酸及び／又は酵素加水分解工程と、続く、全てのアミノ酸に対して、システインレベルが５〜１８ｍｏｌ％であり、分子量が２００〜３０００Ｄａである加水分解物を得る、電気分解による還元工程。本発明における加水分解物は、システインを含まない。また、シスチンレベルもそれほど高くない。
驚くべきことに、そして有利なことに、本発明の著者らは、先行技術の問題を克服することに成功し、ほとんど全てのアミノ酸が遊離アミノ酸であるケラチン加水分解物を得た。特に、バリン、ロイシン、イソロイシンなどの、加水分解プロセス中に遊離形態で得ることが最も難しいアミノ酸が、遊離形態で得られる。さらに、本発明により得られる遊離アミノ酸、特にバリン、ロイシン、イソロイシンは、損傷を受けたり変性したりしない。
本発明の他の態様、利点及び特性は、以下の説明及び例において示されている。
本発明の主題は、加水分解物のアミノ酸の総重量に対して、少なくとも９４重量％、好ましくは少なくとも９６重量％、より好ましくは１００重量％の遊離アミノ酸を含むケラチン加水分解物であり、前記加水分解物は、少なくとも以下のアミノ酸を含む：加水分解物中のバリンの総重量に対して、少なくとも９３重量％、好ましくは少なくとも９５重量％の遊離形態のバリン、加水分解物中のイソロイシンの総重量に対して、少なくとも９０重量％、好ましくは少なくとも９５重量％の遊離形態のイソロイシン、及び加水分解物中のロイシンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のロイシン。
好ましくは、本発明における加水分解物は、加水分解物のアミノ酸の総モル数に対して、シスチンを２モル％未満、好ましくは１モル％未満、より好ましくは０．５モル％未満含む。より好ましくは、加水分解物はシスチンを含まない。
好ましい一実施形態によれば、ケラチン加水分解物は、家禽ケラチン材料加水分解物である。
本発明の第２の主題は、ケラチン材料が家禽ケラチン材料である、本発明による加水分解物の製造（prepare）方法に関し、少なくとも以下の工程をこの順序で含む：
−加水分解物のアミノ酸の総重量に対して、少なくとも８８重量％の遊離アミノ酸を含み、加水分解物のアミノ酸の残部が８００ダルトン以下の分子量を有するペプチドの形態である、加水分解物を得るのに適した条件下で、ケラチン材料を酸による少なくとも１つの化学的加水分解に供する工程；
−好ましくは塩基を用いて、前記加水分解物から、チロシン及びシスチンを抽出する工程；
−前記加水分解物を脱塩する工程；
−最大口径３００Ｄａのろ過膜により、圧力１５〜４０ｂａｒ及び流量（flow rate）３００〜９００ｌ／ｈの範囲で、ろ過、有利にはナノろ過を行う工程；
−必要に応じて乾燥する工程。
本発明はまた、組成物のアミノ酸の総重量に対して、少なくとも９４重量％、好ましくは少なくとも９６重量％、より好ましくは１００重量％の遊離アミノ酸を含む組成物に関し、前記組成物は、少なくとも以下のアミノ酸を含む：
組成物中のバリンの総重量に対して、少なくとも９３重量％、好ましくは少なくとも９５重量％の遊離形態のバリン；
組成物中のイソロイシンの総重量に対して、少なくとも９０重量％、好ましくは少なくとも９５重量％の遊離形態のイソロイシン；
組成物中のロイシンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のロイシン；
組成物中のトレオニン（threonine）の総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のトレオニン；
組成物中のセリンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のセリン；
組成物中のグリシンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のグリシン；
組成物中のアラニンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のアラニン；
組成物中のフェニルアラニンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のフェニルアラニン；
組成物中のリジンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のリジン；
組成物中のアルギニンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のアルギニン；
組成物中のプロリンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のプロリン。
本発明に係る前記組成物は、遊離アミノ酸を混合することによって得ることができる。
本発明はまた、動物飼料用の原材料に関し、前記原材料は、前記原材料の総重量に対して、本発明に係る加水分解物又は本発明に係る組成物を８０〜１００重量％含む。
本発明はまた、動物飼料用の完全飼料に関し、前記完全飼料は、前記完全飼料の総重量に対して、本発明に係る加水分解物又は本発明に係る組成物を５〜４０重量％含む。
本発明に係る組成物は、有利にはケラチン加水分解物であり、特異的特性、特に有利な栄養特性、高い又はさらに非常に高いバイオアベイラビリティ、非アレルギー（anallergic）特性、ならびに陸生及び水生動物種に対する嗜好性（palatability capacity）を与える非常に高い遊離アミノ酸含有量を有する。
本発明に係る組成物の１つの利点は、消化率が高いことである。本発明に係る組成物は、Cozannet P.，Primot Y.，Gady C.，Metayer J.P.，Lessire M.，Skiba F.，Noblet J.によって、「Standardised amino acid digestibility of wheat distillers’ dried grains with solubles in force-fed cockerels」 British Poultry Science, Feb. 2011; 52(1): 72−81に記載された方法に従って測定した、可能な最大値（１００％）に極めて近い実際のアミノ酸消化率を有する。この高い消化率により、本発明の組成物を食品及び食品加工分野で使用することが可能になる。本発明の組成物はまた、水溶性である；具体的には、本発明の組成物１ｇは、水５ｍｌに溶解する。この溶解性は、最終生成物中での加工及び官能特性の発達に有利な特性、特に高い嗜好性を与える。特に、加水分解物中のシスチンレベルが非常に低いため、それは非常に水溶性となる。
本発明に係る加水分解物は、その高レベルの遊離型アミノ酸により際立っている：本発明に係る加水分解物中に存在するアミノ酸の少なくとも９４重量％、好ましくは９６重量％、有利には１００重量％が、遊離形態である。
本発明に係る加水分解物はまた、以下のものを含む：
加水分解物中のバリンの総重量に対して、少なくとも９３重量％、好ましくは少なくとも９５重量％の遊離形態のバリン、
加水分解物中のイソロイシンの総重量に対して、少なくとも９０重量％、好ましくは少なくとも９５重量％の遊離形態のイソロイシン、
加水分解物中のロイシンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のロイシン。
有利には、本発明に係る加水分解物は、天然ケラチン材料、特に家禽から、有利には家禽の羽毛から得られる。家禽については、めんどり（hen）、ひな鳥（chicken）、七面鳥、アヒル、ガチョウなどが挙げられる。
特に、本発明に係る加水分解物は、毛髪などのヒトのケラチンからは得られない。
有利には、本発明に係る加水分解物のアミノ酸含有量は、加水分解物の総重量に対して、４０重量％〜９０重量％、好ましくは４５重量％〜８７重量％の範囲であり、加水分解物はまた、ミネラル材料及び水を含む。既に述べたように、本発明に係る加水分解物のアミノ酸は本質的に遊離アミノ酸である。
本発明に係る加水分解物は、加水分解物のアミノ酸の総重量に対して、少なくとも９４重量％、好ましくは９６重量％、有利には１００重量％の遊離アミノ酸を含む。遊離アミノ酸は変性しない。さらに、本発明に係る加水分解物は、高レベルの遊離分岐アミノ酸、すなわちバリン、ロイシン及びイソロイシンを有する。
実際に、これらの分岐アミノ酸は、同一の処理条件下で放出することがより困難であることが知られている。
有利には、本発明に係る加水分解物は、以下の遊離アミノ酸を含む：
加水分解物中のトレオニンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のトレオニン；
加水分解物中のセリンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のセリン；
加水分解物中のグリシンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のグリシン；
加水分解物中のアラニンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のアラニン；
加水分解物中のフェニルアラニンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のフェニルアラニン；
加水分解物中のリジンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のリジン；
加水分解物中のアルギニンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のアルギニン；
加水分解物中のプロリンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のプロリン。
有利には、加水分解物中に存在するアミノ酸の少なくとも９４重量％、好ましくは９６重量％、有利には１００重量％は、２５０ダルトン以下のモル質量を有し、好ましくは加水分解物中に存在するアミノ酸の少なくとも９８重量％は、１８５ダルトン以下のモル質量を有する。
好ましくは、本発明に係る加水分解物は、前記加水分解物のアミノ酸の総重量に対して、重量で、以下の遊離アミノ酸を含む：
１．００〜７．５０重量％の範囲、好ましくは１．００〜３．００重量％の範囲、好ましくは１．８９重量％の含有量のアスパラギン酸；
３．５０〜６．５０重量％の範囲、好ましくは４．００〜６．００重量％の範囲、好ましくは５．３６重量％の含有量のトレオニン；
１０．００〜２５．００重量％の範囲、好ましくは２０．００〜２３．００重量％の範囲、好ましくは２２．０８重量％の含有量のセリン；
２．００〜１０．５０重量％の範囲、好ましくは２．００〜４．００重量％の範囲、好ましくは２．８４重量％の含有量のグルタミン酸；
６．００〜２５．００重量％の範囲、好ましくは２０．００〜２３．００重量％の範囲、好ましくは２２．０８重量％の含有量のグリシン；
３．５０〜１２．００重量％の範囲、好ましくは８．００〜１０．５０重量％の範囲、好ましくは９．４６重量％の含有量のアラニン；
４．００〜８．５０重量％の範囲、好ましくは４．００〜５．００重量％の範囲、好ましくは４．４２重量％の含有量のバリン；
０．１０〜２．００重量％の範囲、好ましくは０．２０〜１．００重量％の範囲、好ましくは０．３２重量％の含有量のメチオニン；
１．００〜５．５０重量％の範囲、好ましくは１．５０〜３．００重量％の範囲、好ましくは２．２１重量％の含有量のイソロイシン；
４．５０〜８．５０重量％の範囲、好ましくは５．００〜６．００重量％の範囲、好ましくは５．３６重量％の含有量のロイシン；
０．２〜２．０重量％の範囲、好ましくは０．３〜１．００重量％の範囲、好ましくは０．３２重量％の含有量のチロシン；
３．５０〜８．００重量％の範囲、好ましくは５．００〜７．００重量％の範囲、好ましくは５．９９重量％の含有量のフェニルアラニン；
０．３０〜３．００重量％の範囲、好ましくは０．５０〜１．５０重量％の範囲、好ましくは０．６３重量％の含有量のリジン；
０．２〜５．０重量％の範囲、好ましくは０．５０〜１．５０重量％の範囲、好ましくは０．６３重量％の含有量のヒスチジン；
２．５０〜６．５０重量％の範囲、好ましくは３．００〜４．００重量％の範囲、好ましくは３．７９重量％の含有量のアルギニン；
９．００〜１５．００重量％の範囲、好ましくは１０．００〜１３．００重量％の範囲、好ましくは１２．６２重量％の含有量のプロリン。
本発明に係るケラチン加水分解物の製造方法は、加水分解物のアミノ酸の総重量に対して、少なくとも８８重量％の遊離アミノ酸を含み、加水分解物のアミノ酸の残部が８００ダルトン以下の分子量を有するペプチドの形態である、加水分解物を得るのに適した条件下で、酸による少なくとも１つの化学的加水分解を行う。
ケラチンの化学的加水分解は、酸、好ましくは塩酸、リン酸及び硫酸から選ばれる強酸、好ましくは塩酸を用いて行われる。
酸濃度は、１４〜３４重量％の範囲であることが好ましい。
羽毛に対する酸の重量比は、３〜５の範囲であることが好ましい。
化学的加水分解は、通常、１１０〜１１５℃の範囲の温度で、１時間〜２４時間の範囲、好ましくは２時間〜２４時間の範囲、さらに好ましくは６〜２０時間の範囲の期間行われる。
ある特定の変形（variant）によれば、化学的加水分解は以下の２工程で行われる：
− ６０〜８０℃の範囲の温度で４〜５時間の範囲の期間で行う第１の化学的加水分解工程、続く、
− １００〜１１５℃の範囲の温度で５〜８時間の範囲の期間行う第２の化学的加水分解工程、
２つの加水分解は、中間休止工程なしに、又は１時間〜７日間の中間休止工程を行うことによって行うことができる。
より具体的には、第１の化学的加水分解を、７２℃で４．５時間行い、第２の化学的加水分解を１０７℃で６時間行い、２つの化学的加水分解の間に、２４〜８０時間の中間休止を行う。
有利には、１つ以上の工程で行われる化学的加水分解の最後に得られる加水分解物は、加水分解物のアミノ酸の総モル数に対して、３．５モル％未満のシスチンを含む。
化学的加水分解は、１つ以上の工程で行われ、その後に、以下の工程の少なくとも１つがこの順序で続く：
シスチン及びチロシンを抽出する工程、
脱塩工程、
ろ過工程。
シスチン及びチロシンを抽出する工程は、塩基、好ましくは水酸化ナトリウム及び水酸化カリウムから選択される塩基、好ましくは水酸化ナトリウムを用いて行われる。シスチン及びチロシンを抽出する工程は、従来の工程であり、その実施は当業者の能力の範囲内である。
化学的加水分解工程、並びにシスチン及びチロシンの抽出工程に続いて、得られた加水分解物を精製する工程を任意で行うことができる。
脱塩工程は、塩酸に、水酸化ナトリウム又は水酸化カリウムを添加することによってチロシンを抽出する工程中に生成した塩化ナトリウム又は塩化カリウムを除去することを目的とする。この脱塩工程は、電気透析により行うことが好ましい。電気透析は、従来、加水分解物に対して純水を使用し、陰イオン及び陽イオン膜の交互積層体（stack）に電流を印加することによって行われる。
好ましくは、本発明に係る加水分解物は、加水分解物のアミノ酸の総モル数に対して、チロシンを、２モル％未満、好ましくは１モル％未満含有する；より好ましくは、加水分解物は、チロシンを含まない。
好ましくは、本発明に係る加水分解物は、加水分解物のアミノ酸の総モル数に対して、シスチンを、２モル％未満、好ましくは１モル％未満、さらに好ましくは０．５モル％未満含有する；より好ましくは、加水分解物は、シスチンを含まない。
有利には、本発明に係る加水分解物は、チロシンもシスチンも含まず、これらのアミノ酸の唯一の痕跡は、抽出工程中に使用される材料及び操作条件の制限によるものである。また、本発明に係る加水分解物が、電気分解による還元後に得られない限り、システインを含まない。
驚くべきことに、そして有利なことに、本発明の著者らは、本発明の特定の条件下でのろ過の実施により、前記アミノ酸の破壊又は変性なしに高レベルの遊離アミノ酸を達成できることを示した。
有利には、ろ過は、最大口径３００Ｄａのろ過膜、好ましくは最大口径２５０Ｄａのろ過膜、及び有利には、口径１００〜２５０Ｄａの膜を用いて行われる。
有利には、ろ過は１５〜４０ｂａｒの間の圧力で行われる。
有利には、ろ過は、３００〜９００ｌ／ｈの範囲、好ましくは４００〜８００ｌ／ｈの範囲の流量で行われる。
特に好ましい一実施形態によれば、ろ過は、最大口径３００Ｄａのろ過膜、好ましくは最大口径２５０Ｄａのろ過膜、さらに有利には口径１００〜２５０Ｄａの範囲の膜を用いて、１５〜４０ｂａｒの間の圧力で、３００〜９００ｌ／ｈの範囲、好ましくは４００〜８００ｌ／ｈの範囲の流量で行われる。
有利には、ろ過は、ナノろ過である。
ろ過又はナノろ過は、高圧ポンプを用いて、慎重に較正された膜を通して脱塩された加水分解物を循環させることから構成される。透過する画分は、透過画分（permeate）とよばれ、目的の遊離アミノ酸を含み、保持される画分は、保持画分（retentate）とよばれ、ペプチドと残りのアミノ酸を含む。この方法は、再循環ポンプを備えたタンクを用いて、透過画分中に安定したアミノ酸含有量が得られるまで実施される。
本発明に従って実施される方法は、加水分解物のアミノ酸の総重量に対して、少なくとも９４重量％、好ましくは少なくとも９６重量％、有利には１００重量％の遊離アミノ酸を含む加水分解物を得ることができ、それは、以下のものを含む：加水分解物中のバリンの総重量に対して、少なくとも９３重量％、好ましくは少なくとも９５重量％の遊離形態のバリン、加水分解物中のイソロイシンの総重量に対して、少なくとも９０重量％、好ましくは少なくとも９５重量％の遊離形態のイソロイシン、加水分解物中のロイシンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のロイシン。
さらに、アミノ酸の大部分、特に以下のアミノ酸：トレオニン、セリン、グリシン、アラニン、フェニルアラニン、リジン、アルギニン及びプロリンは、加水分解物中の前記アミノ酸の総重量に対して、少なくとも９５％が遊離形態である。
すでに述べたように、本発明は、本発明の、又は、本発明に係る製造方法に従って得られた、組成物、特にケラチン加水分解物の、動物飼料用の原材料としての、経口使用に関する。
本発明はまた、組成物、好ましくは本発明に係る加水分解物、及び任意に追加の成分、例えば追加の遊離アミノ酸、特にシスチン、アルギニン、グルタミン酸及びアスパラギン酸から選択される少なくとも１つのアミノ酸を含む原材料に関する。
有利には、追加の成分として、Ｌ−シスチン、あるいはナノろ過中に膜によって部分的に保持される、アルギニン、グルタミン酸及びアスパラギン酸などの他のアミノ酸を添加することができる。
用語「原材料」とは、天然、新鮮又は保存状態の植物又は動物起源の任意の生成物（product）、それらの工業的形質転換に由来するもの、並びに任意に添加物を含む、有機又は無機物質を意味することを意図しており、これらは、そのまま、又は形質転換後に、複合動物飼料の調製のため、又はプレミックスの担体として、経口的に動物に給餌するために使用することを意図したものである（１９９６年４月２９日の理事会指令（Council Directive）９６／２５／ＥＣ）。
本発明に係る原材料は、完全でバランスのとれた飼料に配合されること、又は栄養補助食品として使用されることを意図したアミノ酸混合物である。したがって、それは、陸生動物及び／又は海洋動物及び／又はヒトに経口投与することが意図されている。前記原材料は、治療分野に属さない。
本発明は、より具体的には、組成物、特に加水分解物の、動物飼料中での使用に関し、より具体的には、複雑な（complex）分子構造及び高分子量を有する植物及び／又は動物起源の食物タンパク質を不要にすることを可能にする遊離アミノ酸源である原材料としての使用に関する。
好ましくは、動物飼料用の原材料はまた、シスチンを含む。
好ましくは、動物飼料用の原材料は、加水分解物のアミノ酸に加えて、アルギニン、グルタミン酸及びアスパラギン酸から選択される少なくとも１つの追加のアミノ酸を含む。
好ましくは、本発明に係る動物飼料用の原材料は、前記組成物のアミノ酸の総重量に対して、重量で、以下のアミノ酸を含む：
６．００〜８．００重量％の範囲、好ましくは６．８９重量％の含有量のアスパラギン酸；
３．５０〜５．５０重量％の範囲、好ましくは４．５０重量％の含有量のトレオニン；
１７．００〜１９．００重量％の範囲、好ましくは１７．９１重量％の含有量のセリン；９．００〜１１．００重量％の範囲、好ましくは９．８４重量％の含有量のグルタミン酸；
１７．００〜１９．００重量％の範囲、好ましくは１７．９０重量％の含有量のグリシン；
７．００〜９．００重量％の範囲、好ましくは７．９５重量％の含有量のアラニン；
３．００〜５．００重量％の範囲、好ましくは３．７１重量％の含有量のバリン；
１．００〜３．００重量％の範囲、好ましくは２．００重量％の含有量のシスチン；
０．１０〜１．００重量％の範囲、好ましくは０．２５重量％の含有量のメチオニン；
１．００〜３．００重量％の範囲、好ましくは１．８５重量％の含有量のイソロイシン；
３．５０〜５．５０重量％の範囲、好ましくは４．５３重量％の含有量のロイシン；
０．１０〜１．００重量％の範囲、好ましくは０．２５重量％の含有量のチロシン；
４．００〜６．００重量％の範囲、好ましくは５．０３重量％の含有量のフェニルアラニン；
０．３０〜１．００重量％の範囲、好ましくは０．５０重量％の含有量のリジン；
０．３０〜１．００重量％の範囲、好ましくは０．５０重量％の含有量のヒスチジン；
５．００〜７．００重量％の範囲、好ましくは５．７９重量％の含有量のアルギニン；
１０．００〜１２．００重量％の範囲、好ましくは１０．６０重量％の含有量のプロリン。
本発明に係る動物飼料用の原材料の配合（formulation）は、当業者の通常の能力の範囲内である従来の方法を使用する。
すでに述べたように、本発明はまた、動物飼料用の完全飼料に関するものであり、それは、前記完全飼料の総重量に対して、本発明の組成物、または好ましくは加水分解物を、５〜４０重量％含む。
この完全飼料は、極めて非アレルギー性である。
本発明に係る動物飼料用の完全飼料は、経口投与を意図した組成物に通常使用される賦形剤、特に保湿剤、増粘剤、テクスチャー化剤、香料、コーティング剤、防腐剤、酸化防止剤、着色剤、植物抽出物、澱粉、植物繊維、ミネラル、及びビタミンなどの非タンパク質成分を配合することができる。
もちろん、当業者は、動物飼料用の完全飼料の特性を損なわないように、これらの賦形剤を選択するように注意するであろう。
本発明に係る動物飼料用の完全飼料は、以下の提示形態のうちの１つに製剤化することができる：ペレット、ゲルカプセル、ドラジェ（dragee）、錠剤、ソフトもしくはハードカプセル、あるいは懸濁液、溶液、ゲル、１５重量％未満の水を含む乾燥製剤、又は少なくとも５０重量％の水及び多くとも８５重量％の水を含む湿潤製剤。
本発明に係る動物飼料用の完全飼料の配合は、当業者の通常の能力の範囲内にある従来の方法を実施する。
本発明はまた、動物飼料用の完全飼料又は原材料を製造するための、本発明に係る組成物又は本発明に係る加水分解物の使用に関する。
以下の例は、本発明の範囲を限定することなく、本発明を説明することを目的とする。
例
例１−加水分解物１
加水分解物１の調製
４５００ｋｇの家禽の羽を２００００リットルの反応器／加水分解器に入れる。第１の化学的加水分解工程は、１８０００リットルの塩酸（２４％）を加えることによって行われる；加水分解は、７２℃で４，５時間行う。得られた生成物を、周囲温度（ambient temperature）で４８時間保存する（中間休止）。次に、酸を添加せずに、１０７℃で６時間加熱することにより、第２の化学加水分解を行う。得られた生成物を放冷する。シスチン及びチロシンを、ｐＨ４〜５で、水酸化ナトリウムを用いた沈殿により抽出する。加水分解物を電気透析により脱塩する。２２０００ｋｇの液状の加水分解物１が得られる。
例２−加水分解物２
加水分解物２の調製
１ｋｇの脱塩加水分解物１を、１９．２ｋｇの精製水で希釈し、２０ｂａｒの圧力下、流量４００ｌ／ｈで、１００〜２５０Ｄａで較正したナノろ過膜を通して搬送する。回収した保持画分の重量は５．２ｋｇ、透過画分は１４．５５ｋｇである。流入する脱塩加水分解物は、９３％の遊離アミノ酸（すなわち、０．１９ｋｇ）を含み、流出する透過画分は、９９．０６％の遊離アミノ酸、すなわち０．０５ｋｇを含む。したがって、遊離アミノ酸の収率は、２６．４％である。
例３−加水分解物３
加水分解物３の調製
１ｋｇの脱塩加水分解物１を１２．６ｋｇの精製水で希釈し、３６ｂａｒの圧力下、流量８００ｌ／ｈで、１００〜２５０Ｄａで較正したナノろ過膜を通して搬送する。回収した保持画分の重量は５．２ｋｇ、透過画分は８．５５ｋｇである。流入する脱塩加水分解物は、９３％の遊離アミノ酸（すなわち、０．１９ｋｇ）を含み、流出する透過画分は、９７．８７％の遊離アミノ酸、すなわち０．０４ｋｇを含む。したがって、遊離アミノ酸の収率は、２２．４％である。
結果
表１は、存在する各アミノ酸について、遊離アミノ酸／総アミノ酸重量分率を示す。
Figure 2020158486
＊加水分解物中の遊離形態のアミノ酸の割合が０．００２％未満。
加水分解物２の組成の決定
加水分解物２のアミノ酸を、ＥＣ規則１５２／２００９に適合する方法に従ってアッセイする。
アミノ酸を、イオン交換カラムを用いたクロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により分離し、ニンヒドリンとの反応及び５７０ｎｍにおける光度検出によりアッセイする。
アミノ酸の総重量に対する遊離アミノ酸含有量は、加水分解物２の各アミノ酸について、表２に示されている。
Figure 2020158486
例４
−動物飼料用の原材料
Ｌ−シスチン、グルタミン酸、アルギニン及びアスパラギン酸を添加した表２の組成物から、動物栄養用の原材料を調製し、表３に示す以下の組成物を得た。
動物飼料用の原材料のアミノ酸の総重量に対するアミノ酸含有量を、各アミノ酸について、表３に示す。
Figure 2020158486
この組成物は、極めて非アレルギー性である。
さらに、ネコ及びイヌに対する嗜好性が観察された。

Claims (12)

  1. 加水分解物のアミノ酸の総重量に対して、少なくとも９４重量％、好ましくは少なくとも９６重量％、より好ましくは１００重量％の遊離アミノ酸を含み、
    少なくとも以下のアミノ酸を含むことを特徴とするケラチン加水分解物：
    加水分解物中のバリンの総重量に対して、少なくとも９３重量％、好ましくは少なくとも９５重量％の遊離形態のバリン、
    加水分解物中のイソロイシンの総重量に対して、少なくとも９０重量％、好ましくは少なくとも９５重量％の遊離形態のイソロイシン、及び
    加水分解物中のロイシンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のロイシン。
  2. 以下の遊離アミノ酸を含むことを特徴とする請求項１に記載の加水分解物：
    加水分解物中のトレオニンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のトレオニン；
    加水分解物中のセリンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のセリン；
    加水分解物中のグリシンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のグリシン；
    加水分解物中のアラニンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のアラニン；
    加水分解物中のフェニルアラニンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のフェニルアラニン；
    加水分解物中のリジンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のリジン；
    加水分解物中のアルギニンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のアルギニン；
    加水分解物中のプロリンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のプロリン。
  3. 前記加水分解物のアミノ酸の総モル数に対して、シスチンを、２モル％未満、好ましくは１モル％未満、より好ましくは０．５モル％未満、含有することを特徴とする請求項１または２に記載の加水分解物。
  4. 前記加水分解物のアミノ酸の総重量に対して、重量で、以下のアミノ酸を含むことを特徴とする請求項１〜３のいずれか一項に記載の加水分解物：
    含有量が、１．００〜７．５０重量％、好ましくは１．００〜３．００重量％、さらに好ましくは１．８９重量％のアスパラギン酸；
    含有量が、３．５０〜６．５０重量％、好ましくは４．００〜６．００重量％、さらに好ましくは５．３６重量％のトレオニン；
    含有量が、１０．００〜２５．００重量％、好ましくは２０．００〜２３．００重量％、さらに好ましくは２２．０８重量％のセリン；
    含有量が、２．００〜１０．５０重量％、好ましくは２．００〜４．００重量％、さらに好ましくは２．８４重量％のグルタミン酸；
    含有量が、６．００〜２５．００重量％、好ましくは２０．００〜２３．００重量％、さらに好ましくは２２．０８重量％のグリシン；
    含有量が、３．５０〜１２．００重量％、好ましくは８．００〜１０．５０重量％、さらに好ましくは９．４６重量％のアラニン；
    含有量が、４．００〜８．５０重量％、好ましくは４．００〜５．００重量％、さらに好ましくは４．４２重量％のバリン；
    含有量が、０．１０〜２．００重量％、好ましくは０．２０〜１．００重量％、さらに好ましくは０．３２重量％のメチオニン；
    含有量が、１．００〜５．５０重量％、好ましくは１．５０〜３．００重量％、さらに好ましくは２．２１重量％のイソロイシン；
    含有量が、４．５０〜８．５０重量％、好ましくは５．００〜６．００重量％、さらに好ましくは５．３６重量％のロイシン；
    含有量が、０．２〜２．０重量％、好ましくは０．３〜１．００重量％、さらに好ましくは０．３２重量％のチロシン；
    含有量が、３．５０〜８．００重量％、好ましくは５．００〜７．００重量％、さらに好ましくは５．９９重量％のフェニルアラニン；
    含有量が、０．３０〜３．００重量％、好ましくは０．５０〜１．５０重量％、さらに好ましくは０．６３重量％のリジン；
    含有量が、０．２〜５．０重量％、好ましくは０．５０〜１．５０重量％、さらに好ましくは０．６３重量％のヒスチジン；
    含有量が、２．５０〜６．５０重量％、好ましくは３．００〜４．００重量％、さらに好ましくは３．７９重量％のアルギニン；
    含有量が、９．００〜１５．００重量％、好ましくは１０．００〜１３．００重量％、さらに好ましくは１２．６２重量％のプロリン。
  5. ケラチン材料が家禽ケラチン材料であり、少なくとも以下の工程をこの順序で含むことを特徴とする、請求項１〜４のいずれか一項に記載の加水分解物の製造方法：
    −前記加水分解物のアミノ酸の総重量に対して、少なくとも８８重量％の遊離アミノ酸を含み、前記加水分解物のアミノ酸の残部が８００ダルトン以下の分子量を有するペプチドの形態である、加水分解物を得るのに適した条件下で、ケラチン材料を、酸を用いた少なくとも１つの化学的加水分解に供する工程、
    −好ましくは塩基を用いて、前記加水分解物からチロシン及びシスチンを抽出する工程；
    −前記加水分解物を脱塩する工程；
    −最大口径３００Ｄａのろ過膜を用いて、圧力１５〜４０ｂａｒ、流量３００〜９００ｌ／ｈでろ過を行う工程；
    −必要に応じて乾燥する工程。
  6. 前記化学的加水分解を、以下の２工程で行う、請求項５に記載の加水分解物の製造方法：
    − ６０〜８０℃の温度で、４〜５時間かけて行う第１の化学的加水分解工程、続いて、
    − １００〜１１５℃の温度で、５〜８時間かけて行う第２の化学的加水分解工程、
    ２つの加水分解は、中間休止工程なしで、または１時間〜７日間の中間休止工程を行うことによって行うことができる。
  7. 組成物のアミノ酸の総重量に対して、少なくとも９４重量％、好ましくは少なくとも９６重量％、より好ましくは１００重量％の遊離アミノ酸を含み、
    少なくとも以下のアミノ酸を含むことを特徴とする組成物：
    組成物中のバリンの総重量に対して、少なくとも９３重量％、好ましくは少なくとも９５重量％の遊離形態のバリン；
    組成物中のイソロイシンの総重量に対して、少なくとも９０重量％、好ましくは少なくとも９５重量％の遊離形態のイソロイシン；
    組成物中のロイシンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のロイシン；
    組成物中のトレオニンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のトレオニン；
    組成物中のセリンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のセリン；
    組成物中のグリシンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のグリシン；
    組成物中のアラニンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のアラニン；
    組成物中のフェニルアラニンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のフェニルアラニン；
    組成物中のリジンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のリジン；
    組成物中のアルギニンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のアルギニン；
    組成物中のプロリンの総重量に対して、少なくとも９５重量％、好ましくは１００重量％の遊離形態のプロリン。
  8. 動物飼料用の原材料であって、前記原材料の総重量に対して、請求項１〜４のいずれか一項に記載の加水分解物、あるいは、請求項５または６に記載の製造方法による加水分解物、あるいは請求項７に記載の組成物を、８０〜１００重量％含む原材料。
  9. さらに、シスチンを含むことを特徴とする請求項８に記載の動物飼料用の原材料。
  10. 請求項１〜４のいずれか一項に記載の加水分解物のアミノ酸、または請求項７に記載の組成物のアミノ酸に加えて、アルギニン、グルタミン酸及びアスパラギン酸から選ばれる少なくとも１つの追加のアミノ酸を含むことを特徴とする請求項８または９に記載の動物飼料用の原材料。
  11. 組成物のアミノ酸の総重量に対して、重量で、以下のアミノ酸を含むことを特徴とする請求項８〜１０のいずれか一項に記載の動物飼料用の原材料：
    含有量が、６．００〜８．００重量％、好ましくは６．８９重量％のアスパラギン酸；
    含有量が、３．５０〜５．５０重量％、好ましくは４．５０重量％のトレオニン；
    含有量が、１７．００〜１９．００重量％、好ましくは１７．９１重量％のセリン；
    含有量が、９．００〜１１．００重量％、好ましくは９．８４重量％のグルタミン酸；
    含有量が、１７．００〜１９．００重量％、好ましくは１７．９０重量％のグリシン；
    含有量が、７．００〜９．００重量％、好ましくは７．９５重量％のアラニン；
    含有量が、３．００〜５．００重量％、好ましくは３．７１重量％のバリン；
    含有量が、１．００〜３．００重量％、好ましくは２．００重量％のシスチン；
    含有量が、０．１０〜１．００重量％、好ましくは０．２５重量％のメチオニン；
    含有量が、１．００〜３．００重量％、好ましくは１．８５重量％のイソロイシン；
    含有量が、３．５０〜５．５０重量％、好ましくは４．５３重量％のロイシン；
    含有量が、０．１０〜１．００重量％、好ましくは０．２５重量％のチロシン；
    含有量が、４．００〜６．００重量％、好ましくは５．０３重量％のフェニルアラニン；
    含有量が、０．３０〜１．００重量％、好ましくは０．５０重量％のリジン；
    含有量が、０．３０〜１．００重量％、好ましくは０．５０重量％のヒスチジン；
    含有量が、５．００〜７．００重量％、好ましくは５．７９重量％のアルギニン；
    含有量が、１０．００〜１２．００重量％、好ましくは１０．６０重量％のプロリン。
  12. 請求項１〜４のいずれか一項に記載の加水分解物、あるいは請求項５または６に記載の製造方法による加水分解物、あるいは請求項７に記載の組成物を、５〜４０重量％含む、動物飼料用の完全飼料。
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