JP2020046195A - Method for screening skin state improving agent - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、肌状態改善剤をスクリーニングする方法に関する。 The present invention relates to a method for screening a skin condition improving agent.
肌のハリ・弾力、シワ、色素沈着など、肌状態の良し悪しは、見た目の印象に大きな影響を与えるものであるため、その改善への関心は高い。そのため、抗老化用、抗シワ用、美白用等の肌状態の改善に有用な化粧料の需要は近年大きくなっており、盛んに開発されている。また、それらの化粧料に含有させる、抗老化剤、抗シワ剤、美白剤等の有効成分にもととなり得る成分の、新たなメカニズムによるスクリーニング方法も種々提案されている（特許文献１〜３等）。 Good and bad skin conditions, such as skin firmness / elasticity, wrinkles, and pigmentation, have a great effect on the visual impression, and there is a great interest in improving them. Therefore, the demand for cosmetics useful for improving skin conditions such as anti-aging, anti-wrinkle, and whitening is increasing in recent years and is being actively developed. In addition, various methods for screening components that can be used as active ingredients such as anti-aging agents, anti-wrinkle agents, and whitening agents in such cosmetics by a new mechanism have been proposed (Patent Documents 1 to 3). etc).
従来の肌状態改善剤では、ある程度の改善効果は認められるものの、十分に満足のいく効果が得られているとは言い難い。また、肌状態を向上させるメカニズムのさらなる解明も求められている。
本発明は、かかる状況に鑑み、新たなアプローチにより肌状態改善剤として有効な成分を探索することを目的とし、そのための新たなスクリーニング方法を確立することを課題とする。
The conventional skin condition improving agent has some improvement effect, but it is hard to say that a sufficiently satisfactory effect has been obtained. There is also a need for further elucidation of mechanisms that improve skin conditions.
In view of such circumstances, an object of the present invention is to search for a component effective as a skin condition improving agent by a new approach, and to provide a new screening method for that purpose.
本発明者は上記課題を解決するために鋭意研究を行った結果、筋肉と肌状態との関係に着目し、筋肉から分泌されるサイトカインであるマイオカイン（Ｍｙｏｋｉｎｅ）が、皮膚において種々機能し肌状態に関与する遺伝子の発現を変動させることを見出した。そして、骨格筋細胞におけるマイオカインの分泌活性を変動、すなわち増大又は減少させる物質が、肌状態改善剤の有効成分となり得ることに想到し、本発明を完成するに至った。 The present inventor has conducted intensive studies to solve the above problems, and as a result, focused on the relationship between muscle and skin condition. Myokine, a cytokine secreted from muscle, functions variously in the skin and Was found to fluctuate the expression of the genes involved in the expression. Then, they conceived that a substance that fluctuates, that is, increases or decreases the secretion activity of myokine in skeletal muscle cells can be an active ingredient of a skin condition improving agent, and has completed the present invention.
すなわち、本発明は以下の通りである。
［１］骨格筋細胞におけるマイオカインの分泌活性を指標として、肌状態改善剤をスクリーニングする方法。
［２］被験物質を添加した骨格筋細胞における前記マイオカインの分泌活性が、被験物質を添加しなかった骨格筋細胞における分泌活性と比較して大きい又は小さい場合に、前記被験物質は肌状態改善作用を有すると判定する、［１］に記載の方法。
［３］前記肌状態が、ハリ・弾力、色素沈着、炎症、バリア機能、及び薄毛から選択される、［１］又は［２］に記載の方法。
［４］前記マイオカインが、真皮線維芽細胞及び／又は表皮細胞において、肌状態に関連する遺伝子の発現量を変動させるものである、［１］〜［３］のいずれかに記載の方法。［５］前記マイオカインが、マイオネクチン、アディポネクチン、カテプシンＢ、ＭＣＰ−１、ＦＳＴＬ１、ＩＬ−４、及びＣＣＬ２０から選択される、［４］に記載の方法。
［６］前記遺伝子が肌状態を向上させる機能を有し、かつ前記発現量の変動が亢進である、［４］又は［５］に記載の方法。
［７］前記遺伝子が、ＣＯＬ１８Ａ１、ＥＬＮ、ＦＧＦ７、ＨＡＳ１、ＬＡＭＡ１、ＦＬＧ、ＫＲＴ２及びＫＲＴ４から選択される、［６］に記載の方法。
［８］前記遺伝子が肌状態を低下させる機能を有し、かつ前記発現量の変動が抑制である、［４］又は［５］に記載の方法。
［９］前記遺伝子が、ＩＬ−６、ＭＭＰ２、ＭＭＰ１１、ＭＭＰ１２、ＭＭＰ１５、ＭＭＰ１６、ＭＭＰ２５、ＰＴＧＩＳ、及びＥＤＮ１から選択される、［８］に記載の方法。［１０］［１］〜［９］のいずれかに記載のスクリーニング方法を行う工程、及び前記工程により選択された物質を含有させる工程を含む、肌状態改善用組成物の設計方法。
［１１］前記組成物が皮膚外用剤又は飲食品である、［１０］に記載の設計方法。
That is, the present invention is as follows.
[1] A method for screening for a skin condition improving agent using myokine secretion activity in skeletal muscle cells as an index.
[2] When the secretory activity of the myokine in the skeletal muscle cells to which the test substance is added is larger or smaller than the secretory activity in skeletal muscle cells to which the test substance is not added, the test substance improves skin condition. The method according to [1], wherein the method is determined to have:
[3] The method according to [1] or [2], wherein the skin condition is selected from firmness / elasticity, pigmentation, inflammation, barrier function, and thinning hair.
[4] The method according to any one of [1] to [3], wherein the myokine changes the expression level of a gene associated with a skin condition in dermal fibroblasts and / or epidermal cells. [5] The method according to [4], wherein the myokine is selected from myonectin, adiponectin, cathepsin B, MCP-1, FSTL1, IL-4, and CCL20.
[6] The method according to [4] or [5], wherein the gene has a function of improving a skin condition, and the fluctuation of the expression level is enhanced.
[7] The method according to [6], wherein the gene is selected from COL18A1, ELN, FGF7, HAS1, LAMA1, FLG, KRT2 and KRT4.
[8] The method according to [4] or [5], wherein the gene has a function of lowering a skin condition, and the fluctuation of the expression level is suppressed.
[9] The method according to [8], wherein the gene is selected from IL-6, MMP2, MMP11, MMP12, MMP15, MMP16, MMP25, PTGIS, and EDN1. [10] A method for designing a composition for improving skin condition, comprising a step of performing the screening method according to any one of [1] to [9], and a step of containing a substance selected in the step.
[11] The design method according to [10], wherein the composition is a skin external preparation or a food or drink.
本発明により、皮膚外用剤や飲食品に含有させるのに好適な、肌状態改善剤として有効な成分を探索できるスクリーニング方法が提供される。 According to the present invention, there is provided a screening method capable of searching for a component effective as a skin condition improving agent, which is suitable for being contained in a skin external preparation or a food or drink.
本発明の肌状態改善剤のスクリーニング方法は、骨格筋細胞におけるマイオカインの分泌活性を指標とすることを特徴とする。
本発明者らは、筋肉から分泌されるマイオカインが、皮膚において種々機能し肌状態に関与する遺伝子の発現を変動させることを見出した。かかる遺伝子としては、例えば、ハリ・弾力、色素沈着、炎症、バリア機能、及び薄毛等の肌状態の変化に関与する酵素やサイトカイン等の遺伝子が挙げられ、これらの発現が変動すると肌状態が向上又は低下する。
The screening method for a skin condition improving agent of the present invention is characterized in that the secretion activity of myokines in skeletal muscle cells is used as an index.
The present inventors have found that myokines secreted from muscles variously function in skin and alter the expression of genes involved in skin conditions. Such genes include, for example, genes such as enzymes and cytokines that are involved in changes in skin condition such as firmness / elasticity, pigmentation, inflammation, barrier function, and thinning hair. Or decrease.
より具体的には、コラーゲンやエラスチン等の線維状タンパク質の合成や分解等に関与する酵素、ヒアルロン酸等の合成や分解等に関与する酵素、細胞間基質の合成や分解等に関与する酵素などの遺伝子の発現が変動しその活性が変動すると、ハリ・弾力が向上又は低下する。メラニンの生成、輸送、分解等に関与する酵素やサイトカインなどの遺伝子の発現が変動しその活性が変動すると、色素沈着が向上又は低下する。炎症性サイトカインなどの遺伝子の発現が変動しその活性が変動すると、炎症が進行又は抑制される。なお、皮膚における炎症は、シワやニキビ等の発生にも至る。保水機能や紫外線吸収能を有する天然保湿因子や、角層の補修やターンオーバー、細胞接着等に関与する酵素などの遺伝子の発現が変動しその活性が変動すると、バリア機能が向上又は低下する。毛母細胞の分化や増殖等に関与する酵素などの遺伝子の発現が変動しその活性が変動すると、及び薄毛が進行又は抑制される。
かかるフローにおいて、骨格筋細胞におけるマイオカインの分泌活性を増強又は減弱させることによって、前記肌状態に関連する遺伝子が肌状態を向上させる又は悪化させない方向に発現が変動させれば、肌状態を改善することができる。言い換えると、皮膚において所定の遺伝子の活性を亢進又は抑制させるマイオネクチンの骨格筋細胞における分泌活性を増強又は減弱させるような物質は、肌状態改善剤となり得る。
More specifically, enzymes involved in the synthesis and degradation of fibrous proteins such as collagen and elastin, enzymes involved in the synthesis and degradation of hyaluronic acid and the like, enzymes involved in the synthesis and degradation of intercellular substrates, etc. When the expression of the gene fluctuates and its activity fluctuates, the elasticity and elasticity increase or decrease. When the expression of genes such as enzymes and cytokines involved in the production, transport and degradation of melanin fluctuates and their activities fluctuate, pigmentation improves or decreases. When expression of a gene such as an inflammatory cytokine fluctuates and its activity fluctuates, inflammation progresses or is suppressed. In addition, inflammation in the skin also leads to the occurrence of wrinkles, acne, and the like. When the expression of a gene such as a natural moisturizing factor having a water retention function or an ultraviolet absorbing ability, or an enzyme involved in repair, turnover, cell adhesion or the like of the stratum corneum fluctuates and its activity fluctuates, the barrier function is improved or lowered. When the expression of a gene such as an enzyme involved in hair cell differentiation and proliferation fluctuates and its activity fluctuates, thinning hair progresses or is suppressed.
In such a flow, by enhancing or attenuating the secretion activity of myokines in skeletal muscle cells, if the expression of the gene related to the skin condition is changed in a direction that does not improve or worsen the skin condition, the skin condition is improved. be able to. In other words, a substance that enhances or attenuates the secretion activity of myonectin in skeletal muscle cells that enhances or suppresses the activity of a given gene in the skin can be a skin condition improving agent.
本発明のスクリーニング方法において指標となるマイオカインの分泌活性とは、通常は骨格筋細胞からのマイオカインの分泌量である。 The secretion activity of myokine, which is an index in the screening method of the present invention, is usually the amount of myokine secreted from skeletal muscle cells.
本発明のスクリーニング方法の好ましい態様においては、被験物質を添加した骨格筋細胞における前記マイオカインの分泌活性が、被験物質を添加しなかった骨格筋細胞における分泌活性（コントロール）と比較して大きい又は小さい場合に、前記被験物質は肌状態改善作用を有すると判定される。 In a preferred embodiment of the screening method of the present invention, the secretion activity of the myokine in the skeletal muscle cells to which the test substance is added is larger or smaller than the secretory activity in the skeletal muscle cells to which the test substance is not added (control). In this case, the test substance is determined to have a skin condition improving action.
本発明のスクリーニング方法において指標とするマイオカインは、真皮線維芽細胞及び／又は表皮細胞において、肌状態に関連する遺伝子の発現量を変動させるものである。
ここで、マイオカインが、真皮線維芽細胞及び／又は表皮細胞において、前記発現量を変動させるか否かは、例えばマイオカインを添加した真皮線維芽細胞及び／又は表皮細胞における発現量を測定することにより確認することができ、前記発現量が、マイオカインを添加しなかった細胞における発現量（コントロール）と比較して大きい又は小さい場合に、前記マイオカインは該遺伝子の発現量を変動させるものであると判断する。ここで、発現量とは、肌状態に関連する遺伝子のｍＲＮＡの転写量と、該タンパク質の翻訳量との何れかを指すものとする。また、変動が大きい方の程度としてはコントロールに対して１２０％以上が好ましく、変動が小さい方の程度としてはコントロールに対して８０％以下が好ましい。
The myokine used as an index in the screening method of the present invention changes the expression level of a gene related to a skin condition in dermal fibroblasts and / or epidermal cells.
Here, whether or not myokine changes the expression level in dermal fibroblasts and / or epidermal cells can be determined, for example, by measuring the expression level in dermal fibroblasts and / or epidermal cells to which myokine is added. When the expression level is larger or smaller than the expression level (control) in cells to which myokine was not added, it was determined that the myokine fluctuated the expression level of the gene. I do. Here, the expression level refers to either the transcription level of mRNA of a gene related to the skin condition or the translation level of the protein. Further, the degree of the fluctuation is preferably 120% or more with respect to the control, and the degree of the fluctuation is preferably 80% or less with respect to the control.
本発明のスクリーニング方法の好ましい態様では、指標とするマイオカインが発現量を変動させる肌状態に関連する遺伝子は、肌状態を向上させる機能を有するものである。そのような遺伝子としては、特に限定されないが、ＣＯＬ１８Ａ１、ＥＬＮ、ＦＧＦ７、ＨＡＳ１、ＬＡＭＡ１、ＦＬＧ、ＫＲＴ２、ＫＲＴ４等が挙げられる。これらの遺伝子の機能と関連する肌状態を表１及び２に示す。 In a preferred embodiment of the screening method of the present invention, a gene associated with a skin condition whose expression level is varied by myokine as an index has a function of improving the skin condition. Such genes include, but are not limited to, COL18A1, ELN, FGF7, HAS1, LAMA1, FLG, KRT2, KRT4, and the like. Tables 1 and 2 show skin conditions associated with the functions of these genes.
本発明のスクリーニング方法の好ましい態様では、指標とするマイオカインが発現量を変動させる肌状態に関連する遺伝子は、肌状態を低下させる機能を有するものである。そのような遺伝子としては、特に限定されないが、ＩＬ−６、ＭＭＰ２、ＭＭＰ１１、ＭＭＰ１２、ＭＭＰ１５、ＭＭＰ１６、ＭＭＰ２５、ＰＴＧＩＳ、ＥＤＮ１等が挙げられる。これらの遺伝子の機能と関連する肌状態を表３及び４に示す。 In a preferred embodiment of the screening method of the present invention, a gene associated with a skin condition whose expression level is varied by myokine as an index has a function of reducing the skin condition. Such genes include, but are not limited to, IL-6, MMP2, MMP11, MMP12, MMP15, MMP16, MMP25, PTGIS, EDN1, and the like. Tables 3 and 4 show the skin conditions associated with the function of these genes.
本発明のスクリーニング方法の好ましい態様では、指標とするマイオカインは、真皮線維芽細胞及び／又は表皮細胞において肌状態に関連する遺伝子の発現量を変動させるものであれば特に限定されず、例えばマイオネクチン、アディポネクチン、カテプシンＢ、ＭＣＰ−１、ＦＳＴＬ１、ＩＬ−４、ＣＣＬ２０等が挙げられる。
また、肌状態に関連する遺伝子が肌状態を向上させる機能を有するものである場合、本発明のスクリーニング方法において指標とするマイオカインは、前記遺伝子の発現量を亢進させるものである。また、肌状態に関連する遺伝子が肌状態を低下させる機能を有するものである場合、本発明のスクリーニング方法において指標とするマイオカインは、前記発現量の変動を抑制させるものである。
表５に、上記マイオカインと、それにより発現が変動する遺伝子の組み合わせを例示するが、これらに限定されない。
In a preferred embodiment of the screening method of the present invention, the myokine used as an index is not particularly limited as long as it changes the expression level of a gene associated with a skin condition in dermal fibroblasts and / or epidermal cells. Adiponectin, cathepsin B, MCP-1, FSTL1, IL-4, CCL20 and the like.
When a gene related to a skin condition has a function of improving the skin condition, myokine used as an index in the screening method of the present invention enhances the expression level of the gene. When a gene related to the skin condition has a function of reducing the skin condition, myokine used as an index in the screening method of the present invention suppresses the fluctuation of the expression level.
Table 5 illustrates, but is not limited to, the combinations of the above myokines and the genes whose expression fluctuates thereby.
本発明のスクリーニング方法に用いる細胞としては、骨格筋細胞（筋芽細胞を含む）を用い、通常は、ヒト由来の正常な細胞を用いる。
細胞の培養の条件としては、通常の培養条件の他、本発明のスクリーニング方法の実行を妨げない、具体的にマイオネクチンの分泌活性（分泌量等）の測定を妨げない培養条件であれば、特段の限定なく適用することができる。
As the cells used in the screening method of the present invention, skeletal muscle cells (including myoblasts) are used, and normally, human-derived normal cells are used.
The conditions for culturing the cells are not limited to ordinary culture conditions, and any other culture conditions that do not hinder the execution of the screening method of the present invention and specifically do not hinder the measurement of the secretion activity (secretion amount, etc.) of myonectin can be used. Can be applied without limitation.
本発明のスクリーニング方法が対象とする被験物質は、純物質、動植物由来の抽出物、またはそれらの混合物等のいずれであってもよい。
動植物由来の抽出物は、動物又は植物由来の抽出物自体のみならず、抽出物の画分、精製した画分、抽出物又は画分、精製物の溶媒除去物の総称を意味するものとし、植物由来の抽出物は、自生若しくは生育された植物、漢方生薬原料等として販売されるものを用い
た抽出物、市販されている抽出物等が挙げられる。
抽出操作は、植物部位の全草を用いるほか、植物体、地上部、根茎部、木幹部、葉部、茎部、花、花蕾、果実等の部位を使用することできるが、予めこれらを粉砕あるいは細切して抽出効率を向上させることが好ましい。抽出溶媒としては、水、エタノール、イソプロピルアルコール、ブタノールなどのアルコール類、１，３−ブタンジオール、ポリプロピレングリコールなどの多価アルコール類、アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン類、ジエチルエーテル、テトラヒドロフランなどのエーテル類等の極性溶媒から選択される一種又は二種以上が好適なものとして例示することができる。具体的な抽出方法としては、例えば、植物体等の抽出に用いる部位又はその乾燥物１質量部に対して、溶媒を１〜３０質量部加え、室温であれば数日間、沸点付近の温度であれば数時間浸漬し、室温まで冷却した後、所望により不溶物及び／又は溶媒除去し、カラムクロマトグラフィー等で分画精製する方法が挙げられる。
The test substance targeted by the screening method of the present invention may be any of a pure substance, an extract derived from animals and plants, or a mixture thereof.
An extract derived from animals and plants means not only an extract derived from an animal or a plant itself, but also a fraction of an extract, a purified fraction, an extract or a fraction, a general term for a solvent-extracted product of a purified product, Examples of plant-derived extracts include native or grown plants, extracts using those sold as raw materials of Chinese herbal medicines, and commercially available extracts.
For the extraction operation, in addition to using the whole plant part, plant parts, above-ground parts, rhizomes, tree trunks, leaves, stems, flowers, flower buds, fruits and the like can be used, but these are crushed in advance. Alternatively, it is preferable to improve the extraction efficiency by shredding. Examples of the extraction solvent include water, alcohols such as ethanol, isopropyl alcohol and butanol, polyhydric alcohols such as 1,3-butanediol and polypropylene glycol, ketones such as acetone and methyl ethyl ketone, and ethers such as diethyl ether and tetrahydrofuran. One or two or more selected from polar solvents such as the above can be exemplified as suitable ones. As a specific extraction method, for example, 1 to 30 parts by mass of a solvent is added to 1 part by mass of a site used for extraction of a plant or the like or a dried product thereof, and at room temperature for several days, at a temperature near the boiling point. If so, a method of immersing for several hours, cooling to room temperature, removing insolubles and / or solvent if desired, and fractionating and purifying by column chromatography or the like can be mentioned.
本発明のスクリーニング方法における手順の一例を以下に挙げるが、本発明の趣旨を逸脱しない限り以下の内容に限定されるものではなく、適宜変更して実施することができる。
まず、プレ培養した骨格筋細胞に被験物質を添加し、２４〜４８時間インキュベーションする。その後、培養上清中のマイオカイン濃度を、ＥＬＩＳＡ等で定量的に測定する。コントロールとして被験物質を添加しなかった骨格筋細胞においても培養上清中のマイオカイン濃度を測定する。被験物質を添加した細胞におけるマイオカイン濃度が、被験物質を添加しなかった細胞におけるマイオカイン濃度（コントロール）に対して大きい又は小さい場合、前記被験物質は肌状態改善作用を有すると判定する。具体的には、指標とするマイオカインが、肌状態を向上させる機能を有する遺伝子の発現量を亢進させるものである場合、又は肌状態を低下させる機能を有する遺伝子の発現量を抑制させるものである場合、被験物質を添加した細胞におけるマイオカイン濃度がコントロールに対して大きいときに、前記被験物質は肌状態改善作用を有すると判定する。また、指標とするマイオカインが、肌状態を向上させる機能を有する遺伝子の発現量を抑制させるものである場合、又は肌状態を低下させる機能を有する遺伝子の発現量を亢進させるものである場合、被験物質を添加した細胞におけるマイオカイン濃度がコントロールに対して小さいときに、前記被験物質は肌状態改善作用を有すると判定する。該判定された物質は、肌状態改善用の組成物に好適に含有し得る肌状態改善剤となり得る。また、指標としたマイオカインが発現量を変動させる遺伝子が関与する肌状態の種類により、前記判定された物質が改善しうる具体的な肌状態を推定することができる。
なお、マイオカイン濃度等の分泌活性の変動の程度としては、変動が増強の場合はコントロールに対して１１０％以上が好ましく、１２０％以上がより好ましく、１５０％以上がさらに好ましい。また、変動が減弱の場合はコントロールに対して９０％以下が好ましく、８０％以下がより好ましく、５０以下がさらに好ましい。
An example of the procedure in the screening method of the present invention will be described below, but the present invention is not limited to the following contents without departing from the gist of the present invention, and can be appropriately modified and carried out.
First, a test substance is added to the pre-cultured skeletal muscle cells and incubated for 24 to 48 hours. Thereafter, the concentration of myokine in the culture supernatant is quantitatively measured by ELISA or the like. As a control, the myokine concentration in the culture supernatant is also measured in skeletal muscle cells to which no test substance has been added. When the myokine concentration in the cells to which the test substance is added is higher or lower than the myokine concentration (control) in the cells to which the test substance is not added, it is determined that the test substance has a skin condition improving effect. Specifically, when the myokine used as an index is one that enhances the expression level of a gene having a function of improving skin condition, or one that suppresses the expression amount of a gene having a function of decreasing skin condition. In this case, when the myokine concentration in the cells to which the test substance is added is higher than that of the control, it is determined that the test substance has a skin condition improving effect. In addition, when the myokine used as an index is one that suppresses the expression level of a gene having a function of improving skin condition, or one that enhances the expression level of a gene having a function of reducing skin condition, When the myokine concentration in the cells to which the substance is added is lower than the control, the test substance is determined to have a skin condition improving effect. The determined substance can be a skin condition improving agent that can be suitably contained in the composition for improving skin condition. In addition, a specific skin condition that can be improved by the determined substance can be estimated based on the type of skin condition in which a gene whose expression level is changed by myokine as an index is involved.
The degree of fluctuation in secretory activity such as myokine concentration is preferably 110% or more, more preferably 120% or more, and still more preferably 150% or more with respect to the control when the fluctuation is enhanced. When the fluctuation is attenuated, it is preferably 90% or less, more preferably 80% or less, and still more preferably 50 or less with respect to the control.
スクリーニングにより選択された被験物質が肌状態改善作用を有することは、例えば、該物質を含有する組成物を適用した被験者の自覚による評価、熟練の評価者による官能評価、画像解析によるメラニン量、シミ、シワ、タルミ等の評価、皮膚の粘弾物性の評価、皮膚のコラーゲン産生量の評価、皮膚の水分保持量やＴＥＷＬの評価、毛量の評価など、周知の方法によって確認することができる。 The fact that the test substance selected by the screening has a skin condition improving effect is, for example, the subjective evaluation of the subject to whom the composition containing the substance is applied, the sensory evaluation by a skilled evaluator, the amount of melanin by image analysis, It can be confirmed by well-known methods such as evaluation of wrinkles, wrinkles and the like, evaluation of skin viscoelasticity, evaluation of skin collagen production, evaluation of skin water retention and TEWL, and evaluation of hair volume.
本発明のスクリーニング方法により肌状態を改善する作用を有すると判定された物質（肌状態改善剤）は、任意の調製方法により組成物に含有させることができる。すなわち、本発明のスクリーニング方法は、肌状態改善用組成物の設計に好適に用いることができる。かかる組成物としては、例えば皮膚外用組成物や飲食品組成等を好適に挙げられる。また、肌状態改善用途としては、具体的にはハリ・弾力改善用、色素沈着改善用・美白用、抗炎症・抗シワ用、バリア機能改善用、薄毛改善用等が挙げられる。 The substance (skin condition improving agent) determined to have the action of improving the skin condition by the screening method of the present invention can be contained in the composition by an arbitrary preparation method. That is, the screening method of the present invention can be suitably used for designing a composition for improving skin condition. As such a composition, for example, a composition for external use on the skin, a food and drink composition, and the like are suitably mentioned. Specific examples of the use for improving skin condition include improvement of firmness and elasticity, improvement of pigmentation and whitening, anti-inflammatory and anti-wrinkle, improvement of barrier function, and improvement of thinning hair.
本発明のスクリーニングにより肌状態を改善する作用を有すると判定された物質（肌状態改善剤）を組成物に含有させる場合、その含有量（配合量）は、通常、０．００００１質量％以上、好ましくは０．０００１質量％以上、より好ましくは０．００１質量％以上であり、通常１５質量％以下、好ましくは１０質量％以下、より好ましくは５質量％以下である。肌状態改善剤の含有量（配合量）が少なすぎると所望の効果が得られにくい場合があり、多すぎると効果が頭打ちになるばかりか組成物の処方の自由度を損なう場合があるからである。また、組成物に含有させる肌状態改善剤の種類は、１種類のみでなく２種類以上であってもよい。なお、動植物抽出物等についてはその配合量は固形物換算量とする。
また、該組成物には、本発明のスクリーニングにより肌状態を改善する作用を有すると判定された物質以外の肌状態改善用成分、例えば他のハリ・弾力改善剤、色素沈着改善剤、美白剤、抗炎症剤、抗シワ剤、バリア機能改善剤、薄毛改善剤等もともに配合してもよい。
When the composition contains a substance (skin condition improving agent) determined to have an effect of improving the skin condition by the screening of the present invention, the content (blending amount) is usually 0.00001% by mass or more, It is preferably at least 0.0001% by mass, more preferably at least 0.001% by mass, usually at most 15% by mass, preferably at most 10% by mass, more preferably at most 5% by mass. If the content (blending amount) of the skin condition improver is too small, the desired effect may not be easily obtained. If the content is too large, the effect may not only reach a plateau but also impair the flexibility of formulation of the composition. is there. The type of the skin condition improving agent to be contained in the composition is not limited to one type, and may be two or more types. In addition, about the extract of animals and plants, the compounding quantity shall be a solid equivalent.
In addition, the composition may further contain a skin condition improving component other than a substance determined to have a skin condition improving effect by the screening of the present invention, for example, other firmness / elasticity improving agents, pigmentation improving agents, and whitening agents. , An anti-inflammatory agent, an anti-wrinkle agent, a barrier function improving agent, a thinning hair improving agent, and the like.
本発明に係る肌状態改善剤を皮膚外用組成物に含有させる場合、その製造に際しては、化粧料、医薬部外品、医薬品などの製剤化で通常使用される成分を任意に配合することができる。
かかる任意成分としては例えば、スクワラン、ワセリン、マイクロクリスタリンワックスなどの炭化水素類、ホホバ油、カルナウバワックス、オレイン酸オクチルドデシルなどのエステル類、オリーブ油、牛脂、椰子油などのトリグリセライド類、ステアリン酸、オレイン酸、レチノイン酸などの脂肪酸、オレイルアルコール、ステアリルアルコール、オクチルドデカノール等の高級アルコール、スルホコハク酸エステルやポリオキシエチレンアルキル硫酸ナトリウム等のアニオン界面活性剤類、アルキルベタイン塩等の両性界面活性剤類、ジアルキルアンモニウム塩等のカチオン界面活性剤類、ソルビタン脂肪酸エステル、脂肪酸モノグリセライド、これらのポリオキシエチレン付加物、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル等の非イオン界面活性剤類、ポリエチレングリコール、グリセリン、１，３−ブタンジオール等の多価アルコール類、増粘・ゲル化剤、酸化防止剤、紫外線吸収剤、色剤、防腐剤、粉体等を任意に配合することができる。
該皮膚外用組成物は、常法に従って前述の成分を処理・配合することにより製造することができる。また、その形態は、例えば、ローション剤型、乳化剤型、オイル剤型など任意の剤型とすることができる。
When the skin condition improving agent according to the present invention is contained in a composition for external use on the skin, at the time of its production, components commonly used in the preparation of cosmetics, quasi-drugs, pharmaceuticals, etc. can be arbitrarily blended. .
Such optional components include, for example, hydrocarbons such as squalane, petrolatum, microcrystalline wax, jojoba oil, carnauba wax, esters such as octyldodecyl oleate, olive oil, tallow, triglycerides such as coconut oil, stearic acid, Fatty acids such as oleic acid and retinoic acid; higher alcohols such as oleyl alcohol, stearyl alcohol and octyldodecanol; anionic surfactants such as sulfosuccinates and sodium polyoxyethylene alkyl sulfate; and amphoteric surfactants such as alkyl betaine salts , Surfactants such as dialkylammonium salts, sorbitan fatty acid esters, fatty acid monoglycerides, their polyoxyethylene adducts, polyoxyethylene alkyl ethers, polyoxy Nonionic surfactants such as tylene fatty acid esters, polyhydric alcohols such as polyethylene glycol, glycerin and 1,3-butanediol, thickening / gelling agents, antioxidants, ultraviolet absorbers, coloring agents, preservatives , Powder and the like can be arbitrarily compounded.
The composition for external use on the skin can be produced by treating and blending the above-mentioned components according to a conventional method. In addition, the form can be an arbitrary form such as a lotion form, an emulsifier form, and an oil form.
本発明に係る肌状態改善剤を飲食品に含有させる場合、その製造に際しては、食品製造において通常使用される成分を任意に配合することができる。
かかる任意成分としては例えば、タンパク質、炭水化物、脂肪、栄養素、調味料及び香味料等を用いることができる。炭水化物としては、単糖類、例えば、ブドウ糖、果糖など；二糖類、例えば、マルトース、スクロース、オリゴ糖など；及び多糖類、例えば、デキストリン、シクロデキストリンなどのような通常の糖及び、キシリトール、ソルビトール、エリトリトールなどの糖アルコールが挙げられる。香味料としては、天然香味料（タウマチン、ステビア抽出物等）及び合成香味料（サッカリン、アスパルテーム等）を使用することができる。その他に、前述の医薬組成物で用いられる添加物であって通常食品にも添加されるものを同様に用いてもよい。
In the case where the skin condition improving agent according to the present invention is contained in food or drink, at the time of its production, components commonly used in food production can be arbitrarily blended.
As such optional components, for example, proteins, carbohydrates, fats, nutrients, seasonings, flavors and the like can be used. Examples of carbohydrates include monosaccharides such as glucose and fructose; disaccharides such as maltose, sucrose and oligosaccharides; and polysaccharides such as ordinary sugars such as dextrin, cyclodextrin and the like, and xylitol, sorbitol, and the like. Sugar alcohols such as erythritol; As the flavor, a natural flavor (eg, thaumatin, stevia extract) and a synthetic flavor (eg, saccharin, aspartame) can be used. In addition, additives that are used in the above-mentioned pharmaceutical compositions and that are usually added to foods may also be used.
飲食品の形態としては、液状、ペースト状、固体、粉末、顆粒等の形態を問わない。また、錠菓、流動食、飼料等も飲食品の態様に含まれる。 The form of the food or drink may be any form such as a liquid, a paste, a solid, a powder, and a granule. Tablet confectionery, liquid food, feed, etc. are also included in the form of food and drink.
また、他に一般の飲食品に含有させる態様であってもよく、例えば、パン、マカロニ、スパゲッティ、めん類、ケーキミックス、から揚げ粉、パン粉の小麦粉製品；、即席めん
、カップめん、レトルト・調理食品、調理缶詰め、電子レンジ食品、即席スープ・シチュー、即席みそ汁・吸い物、スープ缶詰め、フリーズ・ドライ食品等の即席食品；農産缶詰め、果実缶詰め、ジャム・マーマレード類、漬物、煮豆類、農産乾物類、シリアル（穀物加工品）等の農産加工品；水産缶詰め、魚肉ハム・ソーセージ、水産練り製品、水産珍味類、つくだ煮類等の水産加工品；畜産缶詰め・ペースト類、畜肉ハム・ソーセージ等の畜産加工品；加工乳、乳飲料、ヨーグルト類、乳酸菌飲料類、チーズ、アイスクリーム類、調製粉乳類、クリーム、その他の乳製品等の乳・乳製品；バター、マーガリン類、植物油等の油脂類；しょうゆ、みそ、ソース類、トマト加工調味料、みりん類、食酢類等の基礎調味料；調理ミックス、カレーの素類、たれ類、ドレッシング類、めんつゆ類、スパイス類、その他の複合調味料等の複合調味料・食品類；素材冷凍食品、半調理冷凍食品、調理済冷凍食品等の冷凍食品；キャラメル、キャンディー、チューインガム、チョコレート、クッキー、ビスケット、ケーキ、パイ、スナック、クラッカー、和菓子、米菓子、豆菓子、デザート菓子等の菓子類；炭酸飲料、天然果汁、果汁飲料、果汁入り清涼飲料、果肉飲料、果粒入り果実飲料、野菜系飲料、豆乳、豆乳飲料、コーヒー飲料、お茶飲料、粉末飲料、濃縮飲料、スポーツ飲料、栄養飲料、アルコール飲料等の飲料類；これら以外の食品等に、本発明に係る肌状態改善剤を添加してもよい。
In addition, other forms may be included in general foods and drinks, for example, bread, macaroni, spaghetti, noodles, cake mix, fried meal, bread flour products; instant noodles, cup noodles, retort / cooked foods , Cooking cans, microwave foods, instant soups and stews, instant miso soups and soups, canned soups, frozen and dried foods, and other instant foods; canned agricultural products, canned fruits, jams and marmalades, pickles, boiled beans, dried agricultural products, Agricultural products such as cereals (processed cereals); Canned fish products, fish ham / sausage, fish paste products, fishery delicacies, fishery processed products such as boiled tsukudani; livestock canned products / pastes, processed livestock products such as meat ham / sausage ; Processed milk, milk drinks, yogurt, lactic acid drinks, cheese, ice cream, powdered milk, cream, etc. Milk and dairy products such as dairy products; fats and oils such as butter, margarines and vegetable oils; basic seasonings such as soy sauce, miso, sauces, tomato seasonings, mirin and vinegar; cooking mixes and curry bases , Seasonings and foods such as sauces, dressings, noodle soups, spices, and other compound seasonings; frozen foods such as frozen foods, semi-cooked frozen foods, and cooked frozen foods; caramels, candies, and chewing gum , Chocolate, cookies, biscuits, cakes, pies, snacks, crackers, sweets such as Japanese confectionery, rice confectionery, bean confectionery, dessert confectionery; Fruit drinks, vegetable drinks, soy milk, soy milk drinks, coffee drinks, tea drinks, powdered drinks, concentrated drinks, sports drinks, nutritional drinks, alcoholic drinks, etc. Beverages; to foods other than the above, a skin conditioner according to the present invention may be added.
本発明に係る肌状態改善剤を含有する食品組成物の態様としては、通常の食品、飲料、機能性表示食品、特定保健用食品等の保健機能食品、サプリメント等が挙げられ、特に機能性表示食品が好ましい。
本発明に係る食品組成物を肌状態改善用途、ハリ・弾力改善用途、色素沈着改善・美白用途、抗炎症・抗シワ用途、バリア機能改善用途、薄毛改善用途等とする場合、製品化の際にその有する有用性や機能性に関する表示を付してもよい。
かかる「表示」行為には、需要者に対して前記用途を知らしめるための全ての行為が含まれ、「肌状態の改善用」「美白用」「肌のハリ・弾力改善用」、「抗炎症・抗シワ用」、「バリア機能改善用」、「薄毛改善用」といった用途を想起・類推させうるような表現であれば、表示の目的、表示の内容、表示する対象物・媒体等の如何に拘わらず、全て本発明の「表示」行為に該当する。
また、「表示」は、需要者が上記用途を直接的に認識できるような表現により行われることが好ましい。具体的には、飲食品に係る商品又は商品の包装、容器等に前記用途を記載したものを譲渡し、引き渡し、譲渡若しくは引き渡しのために展示し、輸入する行為、商品に関する広告、価格表、カタログ、パンフレット、ＰＯＰ等の販売現場における宣伝材等、若しくは取引書類に上記用途を記載して展示し、若しくは頒布し、又はこれらを内容とする情報に上記用途を記載して電磁気的（インターネット等）方法により提供する行為等が挙げられる。なお、本発明の食品組成物が保健機能食品等の行政が定める各種制度に基づいて認可を受けその認可のもとで実施される場合は、該認可に基づく態様で表示することが好ましい。
Examples of the food composition containing the skin condition-improving agent according to the present invention include normal foods, beverages, functionally labeled foods, health functional foods such as foods for specified health use, supplements, and the like. Food is preferred.
When the food composition according to the present invention is used as a skin condition improving application, firmness / elasticity improving application, pigmentation improving / whitening application, anti-inflammatory / anti-wrinkle application, barrier function improving application, thinning hair improving application, etc. May be provided with an indication regarding the usefulness or functionality of the device.
Such “display” actions include all actions for notifying the user of the use, including “for improving skin condition”, “for whitening”, “for improving skin firmness and elasticity”, and “ If it is an expression that can remind or analogize uses such as "for inflammation / anti-wrinkle", "for improving barrier function", and "for improving thinning hair", the purpose of the display, the content of the display, the object / medium to be displayed, etc. Regardless of the case, all fall under the “display” act of the present invention.
In addition, “display” is preferably performed in an expression that allows the consumer to directly recognize the use. To be specific, the goods related to food and drink or the packaging, containers, etc. of the goods described above are transferred, delivered, displayed for transfer or delivery, and imported, acts related to goods, advertising, price list, Catalogs, pamphlets, POPs and other advertising materials at the point of sale, or business documents, exhibiting or distributing the above-mentioned applications, or describing the above-mentioned applications in information containing these, and electromagnetically (such as the Internet) ) Act provided by the method. In addition, when the food composition of the present invention is approved based on various systems determined by the administration of health functional foods and the like, and is implemented under the approval, it is preferable to display in a form based on the approval.
本発明に係る肌状態改善剤を含有する食品組成物の好ましい摂取量は、成人が摂取する場合、該肌状態改善剤の固形物換算で１日当たり０．００１〜１０００ｍｇ／ｋｇとすることが、十分に効果が発揮される観点から好ましく、更に０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ、特に０．１〜１０ｍｇ／ｋｇとすることが好ましい。この１日分の量を一度に又は数回に分けて摂取することができる。また、単回摂取する他に、連続的に又は断続的に数週間〜数か月の間摂取することが好ましい。 The preferred intake of the food composition containing the skin condition improving agent according to the present invention, when taken by an adult, may be 0.001 to 1000 mg / kg per day in terms of solids of the skin condition improving agent. It is preferable from the viewpoint of sufficiently exerting the effect, and more preferably 0.01 to 100 mg / kg, particularly preferably 0.1 to 10 mg / kg. This daily dose can be taken at once or in several portions. In addition to a single ingestion, it is preferable to ingest it continuously or intermittently for several weeks to several months.
以下、本発明を実施例により更に詳細に説明するが、本発明は、その要旨を超えない限り、以下の実施例に限定されるものではない。 Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to examples, but the present invention is not limited to the following examples unless it exceeds the gist thereof.
＜参考例＞皮膚に対するマイオカインの影響の確認
ＨｕＭｅｄｉａ−ＫＧ２培地（クラボウ製）及びＤＭＥＭ培地（Ｔｈｅｒｍｏ ＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ製）を用いて、正常ヒト表皮細胞（クラボウ製、成人女性Ｈｉｓｐａｎｉｃ由来、Ｌｏｔ：００７０３）及び正常ヒト真皮線維芽細胞（クラボウ製、成人女性Ｈｉｓｐａｎｉｃ由来、Ｌｏｔ：００７０２）をそれぞれ２４ウェルプレートに２×１０４ｃｅｌｌｓ／ウェル播種し培養した。播種２４時間後にマイオカイン（アディポネクチン、マイオネクチン、カテプシンＢ、ＭＣＰ−１、ＦＳＴＬ１、ＩＬ−４、ＣＣＬ２０）を各ウェルに一種類ずつ終濃度１００ｎｇ／ｍＬとなるように添加し、さらに培養した。２４時間後に細胞を回収し、ＱＩＡｃｕｂｅ（ＱＩＡＧＥＮ）にてＲＮＡを抽出・精製した。精製したＲＮＡサンプルをＣｌａｒｉｏｍ Ｓ Ａｓｓａｙ, ｈｕｍａｎ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて解析した。そのデータをＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｃｏｎｓｏｌｅ（ＴＡＣ）ソフトウェア（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて解析し、各細胞種のコントロールと比較して、各マイオカイン添加による遺伝子発現のシグナル比が＞１．２又は＜−１．２で、かつｐ値が＜０.０５の遺伝子であり、肌状態に関連することが知られている遺伝子を抽出した。
結果を表６に示す。マイオカインの添加により、線維芽細胞又は表皮細胞において肌状態に関連する遺伝子の発現量が変動することが分かる。
<Reference example> Confirmation of the effect of myokine on skin Using HuMedia-KG2 medium (manufactured by Kurabo Industries) and DMEM medium (manufactured by Thermo Fisher Scientific), normal human epidermal cells (manufactured by Kurabo Industries, derived from adult female Hispanic, Lot: 7033) and normal Human dermal fibroblasts (manufactured by Kurabo Industries, derived from adult female Hispanic, Lot: 007002) were seeded at 2 × 10 4 cells / well in a 24-well plate and cultured. Twenty-four hours after seeding, myokines (adiponectin, myonectin, cathepsin B, MCP-1, FSTL1, IL-4, and CCL20) were added to each well to a final concentration of 100 ng / mL, and further cultured. Twenty-four hours later, the cells were collected, and RNA was extracted and purified using QIAcube (QIAGEN). The purified RNA sample was analyzed using Clariom S Assay, human (Thermo Fisher Scientific). The data was analyzed using Transcriptome Analysis Console (TAC) software (Thermo Fisher Scientific), and the signal ratio of gene expression by addition of each myokine was> 1.2 or <-1. Genes having a p value of <2 and having a p value of <0.05 and known to be associated with skin conditions were extracted.
Table 6 shows the results. It can be seen that the addition of myokine fluctuates the expression level of genes related to skin conditions in fibroblasts or epidermal cells.
＜実施例＞肌状態改善剤のスクリーニング
以下の手順で、マイオネクチンの分泌量を指標に、肌状態改善剤のスクリーニングを行った。
ＳｋＧＭ２培地（Ｌｏｎｚａ製）を用いて、ヒト太腿由来筋芽細胞（クラボウ製、新生児男性Ｃａｕｃａｓｉａｎ由来、Ｌｏｔ:０４２１１）を２４ウェルプレートに１×１０４ｃｅｌｌｓ／ウェルで播種し、培養した。播種２４時間後に表７に記載の被験試料を各ウェルに１種類ずつ添加した。２日後、マイオネクチンのＥＬＩＳＡキット（Ｃｌｏｕｄ−Ｃｌｏｎｅ Ｃｏｒｐ製、製品番号：ＳＥＵ５４０Ｈｕ）を用いて培養上清のマイオネクチン濃度を解析した。コントロール細胞の培養上清のマイオネクチン濃度を１００％としたときの、被験試料を添加した細胞の培養上清の相対マイオネクチン濃度を算出した。
<Example> Screening of skin condition improving agent Screening of a skin condition improving agent was performed by the following procedure using the secretion amount of myonectin as an index.
Using a SkGM2 medium (manufactured by Lonza), human thigh-derived myoblasts (manufactured by Kurabo Industries, neonatal male Caucasian, Lot: 04211) were seeded at 1 × 10 4 cells / well in a 24-well plate and cultured. Twenty-four hours after seeding, one of the test samples described in Table 7 was added to each well. Two days later, the concentration of myonectin in the culture supernatant was analyzed using a myonectin ELISA kit (manufactured by Cloud-Clone Corp., product number: SEU540Hu). The relative myonectin concentration of the culture supernatant of the cells to which the test sample was added, assuming that the concentration of myonectin in the culture supernatant of the control cells was 100%, was calculated.
結果を表７に示す。その結果、クロバナツルアズキエキス及びノニエキスを添加した筋芽細胞において、マイオネクチンの分泌が促進されたことが確認された。なお、これらのエキスはハリ・弾力等の肌状態改善作用を有することが既に知られており、マイオカインの分泌活性を指標とする本発明の方法により、肌状態改善剤をスクリーニングできることが示された。
一方、ハスエキス及びフキタンポポエキスは筋芽細胞におけるマイオネクチンの分泌を抑制し、温泉水及びマタタビエキスは筋芽細胞におけるマイオネクチンの分泌に影響を与えなかった。
Table 7 shows the results. As a result, it was confirmed that the secretion of myonectin was promoted in the myoblasts to which the black bean adzuki bean extract and the noni extract were added. These extracts are already known to have skin condition improving effects such as firmness and elasticity, and it was shown that a skin condition improving agent can be screened by the method of the present invention using myokine secretion activity as an index. .
On the other hand, the lotus extract and the coltsfoot extract inhibited myonectin secretion in myoblasts, and the hot spring water and the snapper extract did not affect myonectin secretion in myoblasts.
本発明のスクリーニング方法により、肌状態改善剤として有効な成分を探索することができる。かかる肌状態改善剤は、肌状態改善用途の皮膚外用剤や飲食品に好適に含有させることができるため、産業上非常に有用である。 By the screening method of the present invention, a component effective as a skin condition improving agent can be searched for. Such a skin condition improving agent can be suitably contained in a skin external preparation or a food or drink for improving the skin condition, and is therefore extremely useful in industry.
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Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2014171441A (en) * | 2013-03-11 | 2014-09-22 | Pola Chem Ind Inc | Screening method of wrinkle formation inhibitor and/or anti-inflammatory agent |
| JP2015505242A (en) * | 2011-12-20 | 2015-02-19 | ザ プロクター アンド ギャンブルカンパニー | Human skin sampling method and model for evaluating the color-specific effects of drugs |
| JP2017178920A (en) * | 2015-12-25 | 2017-10-05 | 共栄化学工業株式会社 | Skin external composition and oral composition |
| JP2018072098A (en) * | 2016-10-27 | 2018-05-10 | 株式会社ナリス化粧品 | Corium stain prevention/improvement agent and/or screening method of macrophage attractant |
| JP2019147777A (en) * | 2018-02-28 | 2019-09-05 | 株式会社ファンケル | Myokine production promoting composition |
-
2018
- 2018-09-14 JP JP2018172370A patent/JP7206725B2/en active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2015505242A (en) * | 2011-12-20 | 2015-02-19 | ザ プロクター アンド ギャンブルカンパニー | Human skin sampling method and model for evaluating the color-specific effects of drugs |
| JP2014171441A (en) * | 2013-03-11 | 2014-09-22 | Pola Chem Ind Inc | Screening method of wrinkle formation inhibitor and/or anti-inflammatory agent |
| JP2017178920A (en) * | 2015-12-25 | 2017-10-05 | 共栄化学工業株式会社 | Skin external composition and oral composition |
| JP2018072098A (en) * | 2016-10-27 | 2018-05-10 | 株式会社ナリス化粧品 | Corium stain prevention/improvement agent and/or screening method of macrophage attractant |
| JP2019147777A (en) * | 2018-02-28 | 2019-09-05 | 株式会社ファンケル | Myokine production promoting composition |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 佐藤暢彦ほか: "C2C12細胞筋管由来マイオカインが皮膚線維芽細胞に与える影響解析", 日本薬学会第138年会講演予稿集, JPN6022031329, March 2018 (2018-03-01), JP, pages 26 - 279, ISSN: 0004844963 * |
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