JP2019530453A5

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Publication number: JP2019530453A5
Application number: JP2019517273A
Authority: JP
Filing date: 2017-09-29
Publication date: 2020-11-12
Anticipated expiration: 2037-09-29

Description

本発明の背景を説明し、その実践に関して追加的詳細を提供するための本明細書において言及される出版物、ウェブサイト及びその他の参考資料は、参照により本明細書に組み込まれる。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
そのゲノム中に内因性Ｃ９ｏｒｆ７２座位内に挿入された異種ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列を含む非ヒト動物または非ヒト動物細胞であって、前記配列は、前記異種ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列は、配列番号１として明記される前記ヘキサヌクレオチド配列のリピートを少なくとも一個含有する、非ヒト動物または非ヒト動物細胞。
(項目２)
前記異種ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列は、配列番号１として明記される前記ヘキサヌクレオチド配列のリピートを少なくとも３０個含有する、項目１に記載の非ヒト動物または非ヒト動物細胞。
(項目３)
前記ヘキサヌクレオチドリピート伸長は、配列番号１として明記される前記ヘキサヌクレオチド配列のリピートを少なくとも９０個含有する、項目１または項目２に記載の非ヒト動物または非ヒト動物細胞。
(項目４)
前記非ヒト動物または非ヒト動物細胞が、（ｉ）野生型Ｃ９ｏｒｆ７２座位を含有する対照動物と比較してＣ９ｏｒｆ７２転写物発現の増加、（ｉｉ）野生型Ｃ９ｏｒｆ７２座位を含有する対照動物と比較してＲＮＡ凝集体数の増加、（ｉｉｉ）野生型Ｃ９ｏｒｆ７２座位を含有する対照動物と比較してジペプチドリピートタンパク質レベルの増加、または（ｉｖ）（ｉ）〜（ｉｉｉ）の任意の組み合わせ、を示す、項目１〜３のいずれか一項に記載の非ヒト動物または非ヒト動物細胞。
(項目５)
前記異種ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列が、内因性Ｃ９ｏｒｆ７２座位の最初の非コード内因性エクソンとエクソン２の間に位置付けられる、項目１〜４のいずれか一項に記載の非ヒト動物または非ヒト動物細胞。
(項目６)
前記内因性Ｃ９ｏｒｆ７２座位が、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７として明記されるヌクレオチド配列、またはそのバリアントを含有する、項目５に記載の非ヒト動物または非ヒト動物細胞。
(項目７)
前記非ヒト動物が、齧歯類であるか、または前記非ヒト動物細胞が、齧歯類細胞である、項目１〜６のいずれか一項に記載の非ヒト動物または非ヒト動物細胞。
(項目８)
前記齧歯類がラットもしくはマウスであるか、または前記非ヒト動物細胞がラット細胞もしくはマウス細胞である、項目７に記載の非ヒト動物または非ヒト動物細胞。
(項目９)
前記非ヒト動物がマウスであるか、または前記非ヒト動物細胞がマウス細胞であり、前記異種ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列が配列番号１として明記される前記ヘキサヌクレオチド配列のリピートを９２個含有し、ならびに前記マウスまたはマウス細胞が、以下の三つの特徴、（ｉ）野生型Ｃ９ｏｒｆ７２座位を含有する対照動物と比較してＣ９ｏｒｆ７２転写物発現の増加、（ｉｉ）野生型Ｃ９ｏｒｆ７２座位を含有する対照動物と比較してＲＮＡ凝集体数の増加、および（ｉｉｉ）野生型Ｃ９ｏｒｆ７２座位を含有する対照動物と比較してジペプチドリピートタンパク質レベルの増加、のすべてを示す、項目８に記載の非ヒト動物または非ヒト動物細胞。
(項目１０)
前記非ヒト動物が、前記異種ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列に対してホモ接合性である、項目１〜９のいずれかに記載の非ヒト動物または非ヒト動物細胞。
(項目１１)
前記非ヒト動物が、前記異種ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列に対してヘテロ接合性である、項目１〜９のいずれか一項に記載の非ヒト動物または非ヒト動物細胞。
(項目１２)
前記異種ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列が、第一の異種ヘキサヌクレオチド伸長配列であり、前記非ヒト動物または非ヒト動物細胞が、第二の異種ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列に対してもヘテロ接合性であり、前記第一の伸長配列が、前記第二の異種ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列とは異なるリピート数を有する、項目１１に記載の非ヒト動物または非ヒト動物細胞。
(項目１３)
前記第一の異種リピート伸長配列が、配列番号１として明記される前記ヘキサヌクレオチド配列のリピートを１〜３個含有し、前記第二の異種リピート伸長配列が、配列番号１として明記されるヘキサヌクレオチド配列のリピートを４〜１００個含有する、項目１２に記載の非ヒト動物または非ヒト動物細胞。
(項目１４)
前記非ヒト動物細胞が、胚性幹細胞、胚性幹細胞から誘導された運動ニューロン、脳細胞、皮質細胞、神経細胞、筋細胞、心細胞、または生殖細胞である、項目１〜１３のいずれか１項に記載の非ヒト動物または非ヒト動物細胞。
(項目１５)
項目１４に記載の胚性幹細胞から誘導された不死化細胞株または運動ニューロン。
(項目１６)
そのゲノムが内因性Ｃ９ｏｒｆ７２座位中に異種ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列を含む非ヒト動物胚性幹細胞であって、前記異種ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列は、配列番号１として明記されるヘキサヌクレオチド配列のリピートを少なくとも一個含有する、非ヒト動物胚性幹細胞。
(項目１７)
項目１６に記載の胚性幹細胞から作製される非ヒト動物胚。
(項目１８)
そのゲノムがヘキサヌクレオチド配列を含む非ヒト動物の作製方法であって、前記方法が、
そのゲノムが内因性Ｃ９ｏｒｆ７２座位中に異種ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列を含むように、前記非ヒト動物のゲノムを改変することであって、前記異種ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列は、配列番号１として明記される前記ヘキサヌクレオチド配列のリピートを少なくとも一個含有する、改変することを含む、方法。
(項目１９)
前記改変することが、
（ａ）挿入核酸を含む核酸構築物を非ヒト胚性幹細胞内に導入することであって、前記挿入核酸は、５’から３’方向に、（ｉ）前記Ｃ９ｏｒｆ７２座位の５’標的配列に対して相同な５’相同アーム、（ｉｉ）異種ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列、および（ｉｉｉ）前記Ｃ９ｏｒｆ７２座位の５’標的配列に対して相同な３’相同アーム、を含有する、導入すること、
（ｂ）（ａ）から遺伝子改変された齧歯類胚性幹細胞を取得すること、および、
（ｃ）（ｂ）の前記遺伝子改変された齧歯類胚性幹細胞を使用して齧歯類を作製すること、を含むプロセスにより達成される、項目１８に記載の方法。
(項目２０)
前記挿入核酸が、５’相同アームと３’相同アームの間に、一つ以上の選択マーカーをコードする一つ以上の遺伝子をさらに含む、項目１９に記載の方法。
(項目２１)
前記挿入核酸が、５’相同アームと３’相同アームの間に、一つ以上の部位特異的組み換え部位をさらに含む、項目１９または２０に記載の方法。
(項目２２)
前記挿入核酸が、５’相同アームと３’相同アームの間に、リコンビナーゼ認識部位に隣接したリコンビナーゼ遺伝子と選択マーカーをさらに含み、前記リコンビナーゼ認識部位は、除去を誘導するよう方向づけられる、項目２１に記載の方法。
(項目２３)
前記５’相同アームが、前記内因性Ｃ９ｏｒｆ７２座位のエクソン１またはその一部に対して同一であるか、または実質的に同一である、項目１９〜２２のいずれか一項に記載の方法。
(項目２４)
前記５’相同アームが、配列番号２０または配列番号２３として明記される前記ヌクレオチド配列を含む、項目２３に記載の方法。
(項目２５)
前記３’相同アームが、前記内因性Ｃ９ｏｒｆ７２座位のイントロン１の少なくとも一部に対して同一であるか、または実質的に同一である、項目１９〜２４のいずれか一項に記載の方法。
(項目２６)
前記３’相同アームが、配列番号２２または配列番号２５として明記される前記ヌクレオチド配列を含む、項目２５に記載の方法。
(項目２７)
前記挿入核酸が、配列番号２または配列番号４として明記される核酸配列を含む、項目１８〜２６のいずれか一項に記載の方法。
(項目２８)
前記挿入核酸が、配列番号３または配列番号６として明記される核酸配列を含む、項目１８〜２６のいずれか一項に記載の方法。
(項目２９)
前記挿入に対しホモ接合性の齧歯類が作製されるように、（ｃ）で作製された前記齧歯類を交配させる工程をさらに含む、項目１８〜２８のいずれか一項に記載の方法。
(項目３０)
前記非ヒト動物が齧歯類である、項目１８〜２９のいずれか一項に記載の方法。
(項目３１)
前記齧歯類がマウスまたはラットである、項目３０に記載の方法。
(項目３２)
項目１８〜３１のいずれか一項に記載の方法により取得可能な非ヒト動物。
(項目３３)
ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列の存在と関連した疾患または状態の治療のための治療剤候補物質を特定する方法であって、
（ａ）候補物質を、配列番号１として明記された前記ヘキサヌクレオチド配列のリピートを少なくとも一個含むヘキサヌクレオチドリピート伸長配列を含むよう遺伝子改変されたＣ９ＯＲＦ７２座位を含む非ヒト動物または非ヒト動物細胞に投与すること、
（ｂ）前記候補物質が前記疾患または状態に関連した兆候、症状および／または状態の一つ以上に対する効果を有するかどうかを決定するためのアッセイを１種以上実施しすること、および
（ｃ）前記疾患または状態と関連した兆候、症状および／または状態に対する効果を有する前記候補物質を前記治療剤候補物質として特定すること、を含む、方法。
(項目３４)
前記候補物質が、非ヒト動物にｉｎｖｉｖｏで投与され、および任意で、前記アッセイが、前記候補物質の投与後に前記非ヒト動物から単離された組織に対してｉｎｖｉｔｒｏで行われる、項目３３に記載の方法。
(項目３５)
前記候補物質が、非ヒト胚性幹細胞から誘導された運動ニューロンに対してｉｎｖｉｔｒｏで投与される、項目３３に記載の方法。
(項目３６)
前記アッセイが、Ｃ９ｏｒｆ７２遺伝子産物を検出する定量的ポリメラーゼ連鎖反応（ｑＰＣＲ）である、項目３３〜３５のいずれか一項に記載の方法。
(項目３７)
ｑＰＣＲは、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５、配列番号７６、配列番号７７、配列番号７８、配列番号７９、配列番号８０、またはそれらの任意の組み合わせに明記されるヌクレオチド配列を有するプライマーおよび／またはプローブを用いて実施される、項目３６に記載の方法。
(項目３８)
前記アッセイは、Ｃ９ｏｒｆ７２のセンスＲＮＡ転写物またはアンチセンスＲＮＡ転写物を含むＲＮＡ凝集体を測定する、項目３３〜３５のいずれか一項に記載の方法。
(項目３９)
前記アッセイは、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、および／または配列番号８４のいずれか一つに明記されるヌクレオチド配列を有するプローブを一つ以上使用した蛍光ｉｎｓｉｔｕハイブリダイゼーションである、項目３８に記載の方法。
(項目４０)
前記アッセイは、ポリＧＡジペプチドリピートタンパク質を測定する、項目３３〜３５のいずれか一項に記載の方法。
(項目４１)
異種ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列を含む宿主細胞。
(項目４２)
前記宿主細胞は、細菌細胞である、項目４１に記載の宿主細胞。
(項目４３)
Ｃａｓタンパク質および／または一つ以上のｇＲＮＡを含むＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓシステムであって、前記一つ以上のｇＲＮＡは、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５、配列番号４６、配列番号４７、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される配列を含むＤＮＡによりコードされる、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓシステム。
(項目４４)
前記一つ以上のｇＲＮＡが、第一、第二、および第三のｇＲＮＡを含み、前記第一のｇＲＮＡは、配列番号３９として明記される配列を含むＤＮＡによりコードされ、前記第二のｇＲＮＡは、配列番号４４として明記される配列を含むＤＮＡによりコードされ、および前記第三のｇＲＮＡは、配列番号５０として明記される配列を含むＤＮＡによりコードされる、項目４３に記載のＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓシステム。
(項目４５)
配列番号４７として明記される配列を含むＤＮＡによりコードされる第四のｇＲＮＡをさらに含む、項目４４に記載のＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓシステム。
(項目４６)
第五、第六、および第七のｇＲＮＡをさらに含み、前記第五のｇＲＮＡは、配列番号４６として明記される配列を含むＤＮＡによりコードされ、前記第六のｇＲＮＡは、配列番号４８として明記される配列を含むＤＮＡによりコードされ、および前記第七のｇＲＮＡは、配列番号４９として明記される配列を含むＤＮＡによりコードされる、項目４５に記載のＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓシステム。
(項目４７)
前記ｇＲＮＡが、配列番号６３、６４、または６５として明記される配列を含むＤＮＡによりコードされるｔｒａｃｒＲＮＡを含む、項目４２〜４６のいずれか一項に記載のＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓシステム。
(項目４８)
前記ｔｒａｃｒＲＮＡが、配列番号６３として明記される配列を含むＤＮＡによりコードされる、項目４７に記載のＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓシステム。
(項目４９)
前記ｔｒａｃｒＲＮＡが、配列番号６４として明記される配列を含むＤＮＡによりコードされる、項目４７に記載のＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓシステム。
(項目５０)
前記ｔｒａｃｒＲＮＡが、配列番号６５として明記される配列を含むＤＮＡによりコードされる、項目４７に記載のＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓシステム。
(項目５１)
発現構築物をさらに含み、前記発現構築物が、前記Ｃａｓタンパク質をコードする核酸および／または少なくとも一つのｇＲＮＡをコードするＤＮＡを含み、任意で前記発現構築物が薬剤抵抗性遺伝子をさらに含む、項目４３〜５０のいずれか一項に記載のＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓシステム。

Claims

内因性Ｃ９ｏｒｆ７２座位にヘキサヌクレオチドリピート伸長配列を含む齧歯類であって、前記ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列は、
（ｉ）配列番号１として明記される前記ヘキサヌクレオチド配列のリピートを少なくとも一個含有し、
（ｉｉ）内因性Ｃ９ｏｒｆ７２制御配列に動作可能に連結されており、
（ｉｉｉ）内因性Ｃ９ｏｒｆ７２プロモーターから発現される、
齧歯類。
前記ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列が、配列番号１として明記される前記ヘキサヌクレオチド配列のリピートを少なくとも３０個含有する、請求項１に記載の齧歯類。
前記ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列が、配列番号１として明記される前記ヘキサヌクレオチド配列のリピートを少なくとも９０個含有する、請求項１に記載の齧歯類。
前記齧歯類が、（ｉ）野生型Ｃ９ｏｒｆ７２座位を含有する対照齧歯類と比較してＣ９ｏｒｆ７２転写物発現の増加、（ｉｉ）野生型Ｃ９ｏｒｆ７２座位を含有する対照齧歯類と比較してＲＮＡ凝集体数の増加、（ｉｉｉ）野生型Ｃ９ｏｒｆ７２座位を含有する対照齧歯類と比較してジペプチドリピートタンパク質レベルの増加、または（ｉｖ）（ｉ）〜（ｉｉｉ）の任意の組み合わせ、を示す、請求項１に記載の齧歯類。
前記ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列が５’から３’方向に、第一のヘキサヌクレオチド隣接配列、配列番号１として明記される前記ヘキサヌクレオチドの連続リピートおよび第二のヘキサヌクレオチド隣接配列を含み、
前記内因性Ｃ９ｏｒｆ７２のエクソン１およびＡＴＧ開始コドンを含む非コード配列の少なくとも一部が、前記ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列で置換されている、
請求項１に記載の齧歯類。
前記第一のヘキサヌクレオチド隣接配列が、配列番号３６として明記される配列を含み、前記第二のヘキサヌクレオチド隣接配列が、配列番号３７として明記される配列を含む、請求項５に記載の齧歯類。
前記齧歯類がラットまたはマウスである、請求項１に記載の齧歯類。
前記齧歯類がマウスであり、前記内因性Ｃ９ｏｒｆ７２座位が５’から３’方向に、
（ｉ）配列番号２０または配列番号２３として明記される配列を含むマウスＣ９ｏｒｆ７２配列、
（ｉｉ）配列番号２、配列番号３として明記される異種ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列またはそのバリアントを含む、
（ｉｉｉ）配列番号２２または配列番号２５として明記される配列を含むマウスＣ９ｏｒｆ７２配列、および
（ｉｖ）マウスＣ９ｏｒｆ７２コードエクソン
を含み、前記マウスは、以下の三つの特徴、
（ｉ）野生型Ｃ９ｏｒｆ７２座位を含有する対照動物と比較してＣ９ｏｒｆ７２転写物発現の増加、（ｉｉ）野生型Ｃ９ｏｒｆ７２座位を含有する対照動物と比較してＲＮＡ凝集体数の増加、および（ｉｉｉ）野生型Ｃ９ｏｒｆ７２座位を含有する対照動物と比較してジペプチドリピートタンパク質レベルの増加、のすべてを示す、請求項７に記載の齧歯類。
前記齧歯類が、前記ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列に対してホモ接合性である、請求項１に記載の齧歯類。
前記非ヒト動物が、前記ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列に対してヘテロ接合性である、請求項１に記載の齧歯類。
前記ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列が、第一のヘキサヌクレオチド伸長配列であり、前記齧歯類が、第二のヘキサヌクレオチドリピート伸長配列に対してもヘテロ接合性であり、前記第一の伸長配列が、前記第二のヘキサヌクレオチドリピート伸長配列とは異なるリピート数を有する、請求項１０に記載の齧歯類。
前記第一のリピート伸長配列が、配列番号１として明記される前記ヘキサヌクレオチド配列のリピートを１〜３個含有し、前記第二のリピート伸長配列が、配列番号１として明記されるヘキサヌクレオチド配列のリピートを４〜１００個含有する、請求項１１に記載の齧歯類。
内因性Ｃ９ｏｒｆ７２座位にヘキサヌクレオチドリピート伸長配列を含む齧歯類細胞であって、前記ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列は、
（ｉ）配列番号１として明記される前記ヘキサヌクレオチド配列のリピートを少なくとも一個含有し、
（ｉｉ）内因性Ｃ９ｏｒｆ７２制御配列に動作可能に連結されており、
（ｉｉｉ）内因性Ｃ９ｏｒｆ７２プロモーターから発現される、
齧歯類細胞。
請求項４０に記載の胚性幹細胞から誘導された不死化細胞株または運動ニューロン。
そのゲノムが内因性Ｃ９ｏｒｆ７２座位にヘキサヌクレオチドリピート伸長配列を含む齧歯類胚性幹細胞であって、前記ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列は、
（ｉ）配列番号１として明記される前記ヘキサヌクレオチド配列のリピートを少なくとも一個含有し、
（ｉｉ）内因性Ｃ９ｏｒｆ７２制御配列に動作可能に連結されており、
（ｉｉｉ）内因性Ｃ９ｏｒｆ７２プロモーターから発現される、
胚性幹細胞。
請求項１５に記載の胚性幹細胞から作製される齧歯類胚。
そのゲノムがヘキサヌクレオチド配列を含む齧歯類の作製方法であって、前記方法が、
そのゲノムが内因性Ｃ９ｏｒｆ７２座位中にヘキサヌクレオチドリピート伸長配列を含み、内因性制御配列に動作可能に連結されるように、前記齧歯類の前記ゲノムを改変することであって、前記ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列は、配列番号１として明記されるヘキサヌクレオチド配列のリピートを少なくとも一個含有する、改変することを含み、
前記ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列が内因性Ｃ９ｏｒｆ７２プロモーターから発現される、方法。
前記改変することが、
（ａ）挿入核酸を含む核酸構築物を齧歯類胚性幹細胞内に導入することであって、前記挿入核酸は、５’から３’方向に、（ｉ）前記Ｃ９ｏｒｆ７２座位の５’標的配列に対して相同な５’相同アーム、（ｉｉ）ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列、および（ｉｉｉ）前記Ｃ９ｏｒｆ７２座位の５’標的配列に対して相同な３’相同アーム、を含有する、導入すること、
（ｂ）（ａ）から遺伝子改変された齧歯類胚性幹細胞を取得すること、および、
（ｃ）（ｂ）の前記遺伝子改変された齧歯類胚性幹細胞を使用して齧歯類を作製すること、
を含むプロセスにより達成される、請求項１７に記載の方法。
前記挿入核酸が、５’相同アームと３’相同アームの間に、一つ以上の選択マーカーをコードする一つ以上の遺伝子をさらに含む、請求項１８に記載の方法。
前記挿入核酸が、５’相同アームと３’相同アームの間に、一つ以上の部位特異的組み換え部位をさらに含む、請求項１８に記載の方法。
前記挿入核酸が、５’相同アームと３’相同アームの間に、リコンビナーゼ認識部位に隣接したリコンビナーゼ遺伝子と選択マーカーをさらに含み、前記リコンビナーゼ認識部位は、除去を誘導するよう方向づけられる、請求項２０に記載の方法。
前記５’相同アームが、前記内因性Ｃ９ｏｒｆ７２座位のエクソン１またはその一部に対して同一であるか、または実質的に同一である、請求項１８に記載の方法。
前記５’相同アームが、配列番号２０または配列番号２３として明記されるヌクレオチド配列を含む、請求項２２に記載の方法。
前記３’相同アームが、前記内因性Ｃ９ｏｒｆ７２座位のイントロン１の少なくとも一部に対して同一であるか、または実質的に同一である、請求項１８に記載の方法。
前記３’相同アームが、配列番号２２または配列番号２５として明記されるヌクレオチド配列を含む、請求項２４に記載の方法。
前記挿入核酸が、配列番号２または配列番号４として明記される核酸配列を含む、請求項１８に記載の方法。
前記挿入核酸が、配列番号３または配列番号６として明記される核酸配列を含む、請求項１８に記載の方法。
前記挿入に対しホモ接合性の齧歯類が作製されるように、（ｃ）で作製された前記齧歯類を交配させる工程をさらに含む、請求項１８に記載の方法。
前記齧歯類がマウスまたはラットである、請求項１７に記載の方法。
請求項１７に記載の方法により取得可能な齧歯類。
ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列の存在と関連した疾患または状態の治療のための治療剤候補物質を特定する方法であって、
（ａ）候補物質を、Ｃ９ｏｒｆ７２座位にヘキサヌクレオチドリピート伸長配列を含む齧歯類または齧歯類細胞に投与することであって、前記にヘキサヌクレオチドリピート伸長配列は、
（ｉ）配列番号１として明記される前記ヘキサヌクレオチド配列のリピートを少なくとも一個含有し、
（ｉｉ）内因性Ｃ９ｏｒｆ７２制御配列に動作可能に連結されており、
（ｉｉｉ）内因性Ｃ９ｏｒｆ７２プロモーターから発現され、
前記齧歯類または齧歯類細胞は、（ｉ）野生型Ｃ９ｏｒｆ７２座位を含有する対照齧歯類もしくは齧歯類細胞と比較してＣ９ｏｒｆ７２転写物発現の増加、（ｉｉ）野生型Ｃ９ｏｒｆ７２座位を含有する対照齧歯類もしくは齧歯類細胞と比較してＲＮＡ凝集体数の増加、および（ｉｉｉ）野生型Ｃ９ｏｒｆ７２座位を含有する対照齧歯類もしくは齧歯類細胞と比較してジペプチドリピートタンパク質レベルの増加、または（ｉｖ）（ｉ）〜（ｉｉｉ）の任意の組み合わせを示す、こと、
（ｂ）前記齧歯類またはそれに由来する齧歯類細胞により発現されるＣ９ｏｒｆ７２遺伝子産物のレベルを測定するためのアッセイを１種以上実施しすることであって、前記Ｃ９ｏｒｆ７２遺伝子産物は、センスＣ９ｏｒｆ７２ＲＮＡ、アンチセンスＣ９ｏｒｆ７２ＲＮＡ、ＲＮＡ凝集体であって、Ｃ９ｏｒｆ７２センスまたはアンチセンスＲＮＡを含むＲＮＡ凝集体およびジペプチドリピートタンパク質からなる群から選択される、こと、ならびに
（ｃ）前記齧歯類または齧歯類細胞により発現されるセンスＣ９ｏｒｆ７２ＲＮＡ、アンチセンスＣ９ｏｒｆ７２ＲＮＡ、ＲＮＡ凝集体であって、Ｃ９ｏｒｆ７２センスまたはアンチセンスＲＮＡを含むＲＮＡ凝集体およびジペプチドリピートタンパク質からなる群から選択されるＣ９ｏｒｆ７２遺伝子産物のレベルに効果を有する前記候補物質を、前記治療剤候補物質として特定すること、を含む、方法。
前記候補物質が、齧歯類または齧歯類細胞にｉｎｖｉｖｏで投与され、および任意で、前記アッセイが、前記候補物質の投与後に前記齧歯類または齧歯類細胞から単離された組織に対してｉｎｖｉｔｒｏで行われる、請求項３１に記載の方法。
前記候補物質が、齧歯類胚性幹細胞から誘導された運動ニューロンに対してｉｎｖｉｔｒｏで投与される、請求項３１に記載の方法。
前記アッセイが、Ｃ９ｏｒｆ７２遺伝子産物を検出する定量的ポリメラーゼ連鎖反応（ｑＰＣＲ）である、請求項３１に記載の方法。
ｑＰＣＲは、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５、配列番号７６、配列番号７７、配列番号７８、配列番号７９、配列番号８０、またはそれらの任意の組み合わせに明記されるヌクレオチド配列を有するプライマーおよび／またはプローブを用いて実施される、請求項３４に記載の方法。
前記アッセイは、Ｃ９ｏｒｆ７２のセンスＲＮＡ転写物またはアンチセンスＲＮＡ転写物を含むＲＮＡ凝集体を測定する、請求項３１に記載の方法。
前記アッセイは、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、および／または配列番号８４のいずれか一つに明記されるヌクレオチド配列を有するプローブを一つ以上使用した蛍光ｉｎｓｉｔｕハイブリダイゼーションである、請求項３６に記載の方法。
前記アッセイは、ポリＧＡジペプチドリピートタンパク質を測定する、請求項３１に記載の方法。
前記ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列が、配列番号２、配列番号３に明記される配列またはそのバリアントを含む、請求項５に記載の齧歯類。
前記非ヒト動物細胞が、胚性幹細胞、胚性幹細胞から誘導された運動ニューロン、脳細胞、皮質細胞、神経細胞、筋細胞、心細胞、または生殖細胞である、請求項１３に記載の齧歯類細胞。
前記ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列が、配列番号１として明記される前記ヘキサヌクレオチド配列のリピートを少なくとも３０個含有する、請求項１３に記載の齧歯類細胞。
前記ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列が、配列番号１として明記される前記ヘキサヌクレオチド配列のリピートを少なくとも９０個含有する、請求項１３に記載の齧歯類細胞。
前記齧歯類細胞が、（ｉ）野生型Ｃ９ｏｒｆ７２座位を含有する対照齧歯類細胞と比較してＣ９ｏｒｆ７２転写物発現の増加、（ｉｉ）野生型Ｃ９ｏｒｆ７２座位を含有する対照齧歯類細胞と比較してＲＮＡ凝集体数の増加、（ｉｉｉ）野生型Ｃ９ｏｒｆ７２座位を含有する対照齧歯類細胞と比較してジペプチドリピートタンパク質レベルの増加、または（ｉｖ）（ｉ）〜（ｉｉｉ）の任意の組み合わせ、を示す、請求項１３に記載の齧歯類細胞。
前記ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列が５’から３’方向に、第一のヘキサヌクレオチド隣接配列、配列番号１として明記される前記ヘキサヌクレオチドの連続リピートおよび第二のヘキサヌクレオチド隣接配列を含み、
前記内因性Ｃ９ｏｒｆ７２のエクソン１およびＡＴＧ開始コドンを含む非コード配列の少なくとも一部が、前記ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列で置換されている、
請求項１３に記載の齧歯類細胞。
前記第一のヘキサヌクレオチド隣接配列が、配列番号３６として明記される配列を含み、前記第二のヘキサヌクレオチド隣接配列が、配列番号３７として明記される配列を含む、請求項４４に記載の齧歯類細胞。
前記齧歯類細胞がラット細胞またはマウス細胞である、請求項１３に記載の齧歯類細胞。
前記齧歯類細胞がマウス細胞であり、前記内因性Ｃ９ｏｒｆ７２座位が５’から３’方向に、
（ｉ）配列番号２０または配列番号２３として明記される配列を含むマウスＣ９ｏｒｆ７２配列、
（ｉｉ）配列番号２、配列番号３またはそのバリアントを含む異種ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列、
（ｉｉｉ）配列番号２２または配列番号２５として明記される配列を含むマウスＣ９ｏｒｆ７２配列、および
（ｉｖ）マウスＣ９ｏｒｆ７２コードエクソン
を含み、前記マウス細胞は、以下の三つの特徴、
（ｉ）野生型Ｃ９ｏｒｆ７２座位を含有する対照動物と比較してＣ９ｏｒｆ７２転写物発現の増加、（ｉｉ）野生型Ｃ９ｏｒｆ７２座位を含有する対照動物と比較してＲＮＡ凝集体数の増加、および（ｉｉｉ）野生型Ｃ９ｏｒｆ７２座位を含有する対照動物と比較してジペプチドリピートタンパク質レベルの増加、のすべてを示す、請求項４６に記載の齧歯類細胞。
前記ヘキサヌクレオチドリピート伸長配列は、配列番号２、配列番号３として明記される配列またはそのバリアントを含む、請求項４４に記載の齧歯類細胞。