JP2019519557A - 抗植物病原菌剤としてのリグニン画分の使用およびそれを含む抗植物病原菌組成物 - Google Patents

Abstract

抗植物病原菌剤としてのリグニン画分の使用、それを含む抗植物病原菌組成物、ならびに植物病原菌に対し植物を防御する方法が開示される。

Description

本発明は、抗植物病原菌剤としてのリグニン画分の使用、それを含む抗植物病原菌組成物、ならびに植物病原菌に対し植物を防御する方法に関する。

植物病は診断が難しいことがある。しばしば、それらは全く健康である植物と同様の徴候を見せる。植物が病気にかかる場合、その原因は細菌、真菌、またはウイルスである。

細菌
全ての細菌が植物または土壌にとって悪いわけではない。しかしながら、植物に病気を引き起こす約２００タイプの細菌がある。それらは温暖多湿な環境において最も活発である。細菌感染にはいくつかの症状がある。一つは斑点病である。この場合、植物を攻撃する細菌は、毒性の化学物質を産生し、それが周囲の植物細胞を殺す。そこで植物は、周囲の植物細胞を全滅させることにより防御的に反応し、それにより感染した細胞を隔離する。場合により、これらの死んだ細胞領域は脱落して、「穿孔病」のように見えるものが葉に生じる。

細菌は、水および養分を植物の残りの部分へ送達する植物の能力を妨げうる。最終的に植物は、立枯れまたは萎れし始める。このプロセスは迅速に、かつ１日以内に起こりうる。

別の症状は、キャンカーおよび軟腐病におけるような、植物組織の衰退を引き起こすが、これは死んだ植物組織によって生じる窪んだ領域である。別の場合には、虫えいと称される異常な増殖が症状である。植物は、多数の新しい細胞を迅速に産生することにより、これらの細菌の侵入に対し対応する。

細菌は、昆虫、水の跳ね返り、別の罹病植物、または道具を含むいくつかの方法で広がり得る。それらは損傷または切断のいずれかによる小さな開口部から、しかしまた植物自体にある天然の開口部からも植物に侵入する。

ひとたび植物が罹患すれば、それらはコントロールするのが難しいことがある。

真菌
細菌と同様、はるかに多数の真菌が実際には良性ではあるが、しかし細菌と異なり、植物に対して有害な何千もの真菌がある。真菌は土壌中および地上に存在しているため、真菌の攻撃による症状は地上および地下に現れ得る。これらは、根腐れまたは根枯れ、或いは地下の根の大きな瘤を包含する。土壌レベルでは、新しい実生茎が腐って覆いかぶさることがある。土壌線より上では、植物は斑点病、うどんこ病（葉の上の白色または灰色の粉状の斑点）、さび病、および立枯れ病を呈することがある。

真菌胞子は、非常に小さくて軽く、空気中を通って長い距離を移動して、他の植物または樹木に感染することがある。それらはまた、水、動物および昆虫、ならびに人々によっても広げられる。

ウイルス
ウイルスは、場合により有益であることもあるが、しかし殆どの場合そうではない。それらは、問題として現れる以前に、何年にもわたり生き残ることができ、そして出現する場合には、しばしばいくつかの主要な手段の一つで姿を現す。第一には、植物の葉が黄色に見えることがあり、或いはそれらは黄色、薄緑色、または白色のモザイク状斑点として出現することがある。次に植物は、成長阻害されたように見えることがある。加えて、植物はしばしば奇形または形成異常である可能性がある。具体的には、葉は巻き上がるか、または隆起するかもしくは皴になることがあり、或いはそれらは異常に細長くなることがある。

細菌および真菌とは異なり、ウイルスは水または風によって広がることはない。かわりに、それらは物理的に植物に侵入する。ウイルスの最も一般的な媒介者は、昆虫である。昆虫は、感染した植物を食べ、そして彼らが再び食べる際に健康な植物にウイルスを伝達する。他の方法には、植物の繁殖、ヒトによる接触、および感染種子が含まれる。

残念なことに、ひとたび感染すれば、ウイルスを除去するための化学的方法はない。ひとたび検出されれば、全ての疑わしい植物を除去しなければならない。このことは抜本的な処置のようにも見えるが、連続して広がることを減らすことが最も有効な方法である。

それ故、これらの微生物に効果的に対抗すること、同時に、植物および環境を保護すること、ならびに使用が容易で使用者に安全であることが必要だと考えられる。

上記の目的は、特許請求の範囲第１項に記載されたように、リグニン画分を抗植物病原菌剤として使用することにより達成された。

この点について、本発明はまた、植物病原菌に対し植物を防御する方法であって、前記方法が：
ｉ）本発明のリグニン画分を提供すること、および
ｉｉ）リグニン画分を植物または植物土壌に適用すること
の工程を含む、該方法にも関する。

別の態様においては、本発明は前記リグニン画分と、適当な農薬添加物とを含む、抗植物病原菌組成物に関する。

さらなる態様においては、本発明はまた、植物病原菌に対し植物を防御する方法であって、前記方法が：
ｉ）本発明の抗植物病原菌組成物を提供すること、および
ｉｉ）抗植物病原菌組成物を植物または植物土壌に適用すること
の工程を含む、該方法にも関する。

本発明の特徴および利点は、以下の詳細な記載から、および例示を目的として示された実施例から明らかとなるであろう。

本発明の主題はそれ故、抗植物病原菌剤としてのリグニン画分の使用であって、これにおいて前記リグニン画分が、サイズ排除クロマトグラフィーにより測定されるように、６，０００ダルトンまでの重量平均分子量を有するフラグメントを含む、該使用である。

リグニンは、いくつかの藻類、維管束植物、その樹皮を含む、および草本植物の支持組織、例えば材（すなわち、軟材および硬材）、全ての穀草類のわら、サトウキビバガス、草、亜麻、ジュート、麻、または綿などにおいて、重要な構造材料を形成する、複雑な有機ポリマーのクラスである。リグニンにはまた、泥炭、レオナルダイト、および石炭などの鉱物源もあり得る。

化学的には、リグニンは、多くの異なる結合により結合したフェニルプロパン単位の、非常に不規則なランダムに架橋したポリマーであり、２０，０００ダルトン以上の重量平均分子量をもつ。前記ポリマーは、３つのフェニルプロパノイドモノマー前駆体、すなわち、コニフェニル、シナピル、およびクマリルアルコールの、酵素媒介性の脱水素重合の結果である。

コニフェリルアルコールは、全ての種において生じ、針葉樹（軟材）では主要なモノマーである。落葉樹（硬材）種は、４０％までのシリンギルアルコール単位を含有するが、草および農作物はまた、クマリルアルコール単位も含有し得る。

最も重要な結合パターンを含有する、代表的かつ例示的なリグニンフラグメント（Ｉ）は、以下に示される：

リグニンは、その原料のバイオマス供給源により、軟材および硬材リグニンに分類できる。

該当するリグニン画分を得るための適当な出発原料となり得る未処理のバイオマス供給源は、本質的に純粋なリグニン、ならびにクラフトリグニン、バイオマス由来のリグニン、アルカリ性蒸解法由来のリグニン、ソーダ法由来のリグニン、オルガノソルブ法由来のリグニン、およびそれらの任意の組合せを包含する、任意のリグニンである。

「本質的に純粋なリグニン」という表現により、少なくとも９０％純粋なリグニン、好ましくは少なくとも９５％純粋なリグニンとして理解されるべきであり、残りは抽出物およびヘミセルロースなどの炭水化物、ならびに無機物質である。

「クラフトリグニン」という表現により、リグニンがクラフト黒液に由来することが理解されるべきである。黒液は、リグニン残渣、ヘミセルロース、およびクラフトパルピング法において使用される無機化学物質からなる、アルカリ性水溶液である。パルピング法に由来する黒液は、種々の軟材および硬材種に由来する成分を、様々な割合で含む。リグニンは、黒液から、例えば沈殿および濾過を含む種々の技術によって分離され得る。リグニンは、通常１１〜１２より低いｐＨにおいて沈殿される。様々な特性をもつグニン画分を沈殿するため、種々のｐＨ値が使用可能である。これらのリグニン画分は、その分子量分布、例えばＭ_ｗおよびＭ_ｎ、多分散性、ヘミセルロースおよび抽出成分、無機材料の含量により互いに異なり得る。沈殿したリグニンは、酸性洗浄工程を用いて、無機不純物、ヘミセルロース、および木材抽出物から精製され得る。さらなる精製は、濾過により達成され得る。

別法として、リグニンは純粋なバイオマスから分離される。分離プロセスは、バイオマスを強アルカリで液化することにより開始してもよく、それに中和プロセスが続けられる。アルカリ処理の後、リグニンは上記に示したものと同様の方法で沈殿され得る。

別法として、バイオマスからのリグニンの分離は、酵素処理の工程を含む。酵素処理は、バイオマスから抽出されるべきリグニンを修飾する。

純粋なバイオマスから分離されたリグニンは、本質的に無硫黄であり（硫黄含量３％未満）、したがってさらなる加工において価値がある。

好ましくは、そのように分離されたリグニンはまた、フラグメントの重量平均分子量をさらに低減する目的で、脱重合プロセスにも供される。

好ましくは、そのように分離されたリグニンはまた、フラグメントの重量および数平均分子量をさらに低減する目的で、脱重合プロセスにも供される。

適当な脱重合プロセスは、塩基触媒脱重合、酸触媒脱重合、金属触媒脱重合、イオン液体を介した脱重合、および超臨界流体を介したリグニン脱重合を包含する。

好ましい実施形態においては、前記リグニン画分は、塩基触媒脱重合により取得される。

好ましくは、前記リグニン画分は、分離されたリグニンを３００℃未満の温度および３０ＭＰａ未満の圧力において、塩基触媒脱重合に供することにより取得される。

ｐＨは、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、Ｃａ（ＯＨ）_２、ＬｉＯＨ、Ｋ_２ＣＯ_３、またはそれらの混合物などの塩基を添加することにより、１１と１４の間に設定される。

本発明の目的上、リグニン画分中のフラグメントの重量平均分子量（Ｍ_ｗ）は、サイズ排除クロマトグラフィー（または「ＳＥＣ」）により測定される。ＳＥＣは、ビーズの孔中に存在する停滞液体を固定相として、また流動する液体を移動相として用いる。それ故移動相は、ビーズ間を、またビーズの孔の内外をも流動できる。分離メカニズムは、溶液中のポリマー分子のサイズに基づく。より大きい分子は、速く溶出することになる。ビーズ中の多数の孔に入り得る小さい分子は、カラムを通過するのに長い時間がかかり、それ故ゆっくりとカラムを出る。ポリマーサンプルの成分の分子量を測定するためには、既知の分子量の標準ポリマーを用いたキャリブレーションを実施しなければならない。次に未知のサンプルからの値が、キャリブレーショングラフと比較される。保持時間は、用いたカラム材料、溶離液、および、用いた標準がサンプルに比較してどれくらい類似しているかに依存する。本発明では、溶離液は好ましくは０．１Ｍ ＮａＯＨである。

本発明のリグニン画分は、予想外にかつ驚くべきことに、実施例において示されるように、便利に低い濃度においてでも、植物および作物に影響を及ぼす植物病原菌に対し非常に有効であることが示された。

本発明の目的上、用語「植物病原菌」により、かくて土壌伝染病または感染症を引き起こす、植物宿主上の寄生生物が意味され、前記生物は、細菌、真菌、卵菌、またはウイルスである。

用語「植物」は、利益または生活のために生育および収穫され得る植物または複数の植物を意味し、それ故作物、穀物、野菜、果実、および花卉を包含し、同様に、ガーデニングまたは個人的な利用のために生育および収穫され得るものを意味する。

用語「植物土壌」は、そこで植物が生育されるか、植物が播種されるか、または植物が播種されることになる土壌を意味し、したがって大地、土地、およびハイドロカルチャーおよび水耕法などの無土壌培地を包含する。

具体的には、このリグニン画分は、細菌、真菌、卵菌、またはウイルスに対する抗植物病原菌剤として使用可能である。

この点に関し、このリグニン画分は、抗植物病原菌剤として、細菌、例えばエルウィニア・アミロボーラ（Ｅｒｗｉｎｉａ ａｍｙｌｏｖｏｒａ）、シュードモナス・シリンガエ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｙｒｉｎｇａｅ）、キサントモナス・アルボリコラ（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ａｒｂｏｒｉｃｏｌａ）、キサントモナス・カンペストリス（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ）に対し、病原性真菌、例えばボトリチス・シネレア（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）、セルコスポラ・ベティコラ（Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ ｂｅｔｉｃｏｌａ）、チモセプトリア・トリチチ（Ｚｙｍｏｓｅｐｔｏｒｉａ ｔｒｉｔｉｃｉ）、フザリウム・ソラニ（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｏｌａｎｉ）、アルテルナリア・ソラニ（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｓｏｌａｎｉ）、リゾクトニア・ソラニ（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｓｏｌａｎｉ）、モニリア・ラクサ（Ｍｏｎｉｌｉａ ｌａｘａ）、芝草の炭疽病（Ａｎｔｈｒａｃｎｏｓｅ ｏｆ ｔｕｒｆｇｒａｓｓ）、リンゴうどんこ病（Ａｐｐｌｅ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ）、リンゴ黒星病（Ａｐｐｌｅ ｓｃａｂ）、黒瘤病（Ｂｌａｃｋ ｋｎｏｔ）、斑葉病（Ｂｌａｃｋ ｓｉｇａｔｏｋａ）、菜種の黒足病（Ｂｌａｃｋｌｅｇ ｏｆ ｏｉｌｓｅｅｄ ｒａｐｅ）、核果の灰星病（Ｂｒｏｗｎ ｒｏｔ ｏｆ ｓｔｏｎｅ ｆｒｕｉｔｓ）、芝草のダラースポット病（Ｄｏｌｌａｒ ｓｐｏｔ ｏｆ ｔｕｒｆｇｒａｓｓ）、ニレ立枯れ病（Ｄｕｔｃｈ ｅｌｍ ｄｉｓｅａｓｅ）、ジャガイモおよびトマトの夏疫病（Ｅａｒｌｙ ｂｌｉｇｈｔ ｏｆ Ｐｏｔａｔｏ ａｎｄ Ｔｏｍａｔｏ）、ライムギの麦角病（Ｅｒｇｏｔ ｏｆ ｒｙｅ）、赤カビ病（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｈｅａｄ ｂｌｉｇｈｔ）、スイカおよび他のウリ科植物のつる割病（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｗｉｌｔ ｏｆ ｗａｔｅｒｍｅｌｏｎ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｃｕｃｕｒｂｉｔｓ）、核果のレウコストマ胴枯病（Ｌｅｕｃｏｓｔｏｍａ ｃａｎｋｅｒ ｏｆ ｓｔｏｎｅ ｆｒｕｉｔｓ）、黒点根腐れ病（Ｍｏｎｏｓｐｏｒａｓｃｕｓ ｒｏｏｔ ｒｏｔ）、マミーベリー病（Ｍｕｍｍｙ Ｂｅｒｒｙ）、イネいもち病（Ｒｉｃｅ ｂｌａｓｔ）、コムギの葉枯病（Ｓｅｐｔｏｒｉａ ｔｒｉｔｉｃｉ ｂｌｏｔｃｈ（ＳＴＢ）ｏｆ ｗｈｅａｔ）、ダイズの急性枯死症（Ｓｕｄｄｅｎ ｄｅａｔｈ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ｏｆ ｓｏｙｂｅａｎ）、テイクオールルートロット（Ｔａｋｅ−ａｌｌ ｒｏｏｔ ｒｏｔ）、穀物の黄斑病（Ｔａｎ ｓｐｏｔ ｏｆ ｃｅｒｅａｌｓ）、バーティシリウム萎凋病（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｗｉｌｔ）、白カビ（Ｗｈｉｔｅ ｍｏｌｄ）（スクレロティニア（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ））、ナラタケ病（Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ ｒｏｏｔ ｄｉｓｅａｓｅ）、マツタケ属による根腐（ｓｈｏｅｓｔｒｉｎｇ ｒｏｏｔ ｒｏｔ）、褐色根腐れ（Ｂｒｏｗｎ ｒｏｏｔ ｒｏｔ）、コーヒーさび病（Ｃｏｆｆｅｅ ｒｕｓｔ）、トウモロコシの黒穂病（Ｃｏｍｍｏｎ ｓｍｕｔ ｏｆ ｃｏｒｎ）、カンゾウさび病（Ｄａｙｌｉｌｙ ｒｕｓｔ）、芝草のリゾクトニア病（Ｒｈｙｚｏｃｔｏｎｉａ ｄｉｓｅａｓｅｓ ｏｆ ｔｕｒｆｇｒａｓｓ）、サザンブライト（白絹病）（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｉｇｈｔ）、サザンステムブライト（ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｓｔｅｍ ｂｌｉｇｈｔ）、白カビ病（ｗｈｉｔｅ ｍｏｌｄ）、ダイズさび病（Ｓｏｙｂｅａｎ ｒｕｓｔ）、コムギの黒さび病（Ｓｔｅｍ ｒｕｓｔ ｏｆ ｗｈｅａｔ）、コムギなまぐさ黒穂病（Ｓｔｉｎｋｉｎｇ ｓｍｕｔ ｏｆ ｗｅａｔ）、コムギ黒さび病（Ｗｈｅａｔ Ｓｔｅｍ Ｒｕｓｔ）、五葉松類発疹さび病（Ｗｈｉｔｅ ｐｉｎｅ ｂｌｉｓｔｅｒ ｒｕｓｔ）に対し、卵菌、例えばフィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）、プラスモパラ・ビチコラ（Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ ｖｉｔｉｃｏｌａ）、マメ科植物のアファノミセス根腐れ病または根腐れ病（Ａｐｈａｎｏｍｙｃｅｓ ｒｏｏｔ ｒｏｔ ｏｒ ｃｏｍｍｏｎ ｒｏｏｔ ｒｏｔ ｏｆ ｌｅｇｕｍｅｓ）、タバコの疫病（Ｂｌａｃｋ ｓｈａｎｋ ｏｆ ｔｏｂａｃｃｏ）、ウリ科のベト病（Ｄｏｗｎｙ ｍｉｌｄｅｗ ｏｆ ｃｕｃｕｒｂｉｔｓ）、ブドウのベト病（Ｄｏｗｎｙ ｍｉｌｄｅｗ ｏｆ ｇｒａｐｅ）、ジャガイモおよびトマトの葉枯病（Ｌａｔｅ ｂｌｉｇｈｔ ｏｆ ｐｏｔａｔｏ ａｎｄ ｔｏｍａｔｏ）、ウリ科の疫病（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｂｌｉｇｈｔ ｏｆ ｃｕｒｃｕｒｂｉｔｓ）、ダイズの茎疫病（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｒｏｏｔ ａｎｄ ｓｔｅｍ ｒｏｔ ｏｆ ｓｏｙｂｅａｎ）、芝草のピシウム病（Ｐｙｔｈｉｕｍ ｂｌｉｔｈｔ ｏｆ ｔｕｒｆｇｒａｓｓ）、オーク突然死病（Ｓｕｄｄｅｎ ｏａｋ ｄｅａｔｈ）およびラモルムブライト（ｒａｍｏｒｕｍ ｂｌｉｇｈｔ）、タロイモ葉枯病（Ｔａｒｏ ｌｅａｆ ｂｌｉｇｈｔ）、芝草のラッピッドブライト（Ｒａｐｉｄ Ｂｌｉｇｈｔ ｏｆ Ｔｕｒｆｇｒａｓｓ）に対し、およびウイロイドとウイルス様生物とを包含するウイルスに対して使用可能である。殆どの植物ウイルスは、小さい一本鎖ＲＮＡゲノムを有する。しかしながら、いくつかの植物ウイルスはまた、二本鎖ＲＮＡまたは一本もしくは二本鎖ＤＮＡゲノムを有する。これらのゲノムは、わずか３つまたは４つのタンパク質：レプリカーゼ、コートタンパク質、プラスモデスマータを通した細胞間移行を可能にするための移行タンパク質、および時にベクターによる伝達を可能にするタンパク質をコードし得る。植物ウイルスは、さらにいくつかのタンパク質を有し、かつ多くの異なる分子トランスレーション法を使用できる。

植物ウイルスは、一般に、媒介者によって植物から植物へ伝達されるが、また機械的および種子伝達も起こる。ベクター伝達はしばしば昆虫（例えば、アブラムシ）によるが、いくつかの真菌、線形動物、および原生動物がウイルス媒介者であることが示されている。
多くの場合、昆虫およびウイルスは、いくつかの作物において病気を引き起こすカーリートップウイルスを伝達するテンサイヨコバイのように、ウイルス伝達にとり特異的である。

好ましくは、前記リグニン画分は、５，５００ダルトンまでの重量平均分子量を有するフラグメントを含む。

好ましい実施形態においては、前記リグニン画分は、５，０００ダルトンまでの重量平均分子量を有するフラグメントを含む。

いくつかの実施形態においては、前記リグニン画分は、下は９０ダルトンまでの重量平均分子量を有するフラグメントを含む。

好ましい実施形態においては、前記リグニン画分は、９０ダルトンから６，０００ダルトンの重量平均分子量を有し、好ましくは９０ダルトンから５，５００ダルトンの重量平均分子量を有し、さらに好ましくは９０ダルトンから５，０００ダルトンの重量平均分子量を有するフラグメントを含む。

好ましくはこれらの実施形態において、前記フラグメントは重量平均で３３個までのフェニルプロパン単位を、より好ましくは重量平均で２８個までのフェニルプロパン単位を含む。

３つのフェニルプロパノイドモノマー前駆体の分子量は、クマリルアルコールの１５０Ｄａと、コニフェリルアルコールの１８０Ｄａと、およびシリンジルアルコールの２１０ｇ／ｍｏｌとの間で異なる。平均重量はそれ故１８０Ｄａであり、この値が「フェニルプロパン単位」として使用された。Ｍ_ｗ値は１８０Ｄａで割られ、かくて平均重量に対するフェニルプロパン単位数が得られた。

特に好ましい実施形態は、前記リグニン画分が、９０ダルトンから５，０００ダルトンの重量平均分子量および重量平均で１から２８個のフェニルプロパン単位を有するフラグメントを含む。

別の実施形態では、リグニン画分は２，０００ダルトンまでの数平均分子量（Ｍ_ｎ）を有するフラグメントを含む。

本発明の目的上、リグニン画分中のフラグメントの数平均分子量（Ｍ_ｎ）は、サイズ排除クロマトグラフィーにより測定される。

好ましくは、リグニン画分は、１，５００ダルトンまでの数平均分子量（Ｍ_ｎ）を有するフラグメントを含む。

いかなる理論にも拘束されることを望むものではないが、より低い数平均分子量はより活性の高い分子を意味すると考えられる。このことは、より低い分子量がより小さいフラグメントを意味し、かつより小さいフラグメントがより架橋の少ない／より短いフラグメントを意味し、かつより架橋の少ない／より短いフラグメントがその上の遊離の官能基の数が多いこと、したがってより活性のあるフラグメントを意味することを考慮することで提唱される。

さらに、より小さい分子が植物病原菌の細胞膜をより容易に通過してその中に拡散し、したがってリグニン画分の全体的な有効性を有意に増大することが考えられる。

好ましくはこれらの実施形態において、前記フラグメントは数平均で１５個までのフェニルプロパン単位、より好ましくは数平均で９個までのフェニルプロパン単位を含む。

３つのフェニルプロパノイドモノマー前駆体の分子量は、クマリルアルコールの１５０Ｄａと、コニフェリルアルコールの１８０Ｄａと、およびシリンジルアルコールの２１０ｇ／ｍｏｌとの間で異なる。平均重量はそれ故１８０Ｄａであり、この値が「フェニルプロパン単位」として使用された。Ｍ_ｎ値は１８０Ｄａで割られ、かくて数平均に対するフェニルプロパン単位数が得られた。

好ましい実施形態においては、前記リグニン画分は、９０ダルトンから５，０００ダルトンの重量平均分子量（Ｍ_ｗ）を有するフラグメント、および１，５００ダルトンまでの数平均分子量（Ｍ_ｎ）を有するフラグメントを含む。

より好ましくは、前記リグニン画分は、９０ダルトンから５，０００ダルトンの重量平均分子量および重量平均で１から２８個のフェニルプロパン単位を有するフラグメントと、１，５００ダルトンまでの数平均分子量（Ｍ_ｎ）および数平均で１１個までのフェニルプロパン単位を有するフラグメントとを含む。

さらなる実施形態においては、リグニン画分は、２から６の多分散指数（ＰＤＩ）を有する。

多分散指数（ＰＤＩ）もしくは異質性指数、または単純に分散度は、所与のポリマーサンプル中の分子質量の分布の尺度である。ＰＤＩは、重量平均分子量（Ｍ_ｗ）を数平均分子量（Ｍ_ｎ）で割ったものである。それは、ポリマーのバッチ中の個々の分子質量の分布を示す。

特に好ましい実施形態は、前記リグニン画分が、９０ダルトンから５，０００ダルトンの重量平均分子量（Ｍ_ｗ）および重量平均で１から２８個のフェニルプロパン単位を有するフラグメントを含み、かつこれにおいて、前記リグニン画分が２から６の多分散指数を有するものである。

特に好ましい実施形態はまた、前記リグニン画分が、２，０００ダルトンまでの数平均分子量（Ｍ_ｎ）および数平均で１１個までのフェニルプロパン単位を有するフラグメントを含み、かつこれにおいて、前記リグニン画分が２から６の多分散指数を有するものである。

最も好ましい実施形態は、前記リグニン画分が、９０ダルトンから５，０００ダルトンの重量平均分子量（Ｍ_ｗ）および重量平均で１から２８個のフェニルプロパン単位、２，０００ダルトンまでの数平均分子量（Ｍ_ｎ）および数平均で１１個までのフェニルプロパン単位を有するフラグメントを含み、かつこれにおいて、前記リグニン画分が２から６の多分散指数を有するものである。

リグニン画分は、非常に少量でも、すなわち２０，０００グラム／ｈａ未満、好ましくは５，０００グラム／ｈａ未満の量、より好ましくは２，０００〜４，０００グラム／ｈａの量で有効である。

リグニン画分は、固体または液体の形態であってよい。

リグニン画分が固体形態である場合、前記固体形態はタブレット、ミニタブレット、マイクロタブレット、顆粒、マイクロ顆粒、ペレット、マルチ粒子、微粒子化粒子、または粉末であってよい。

リグニン画分が液体形態である場合、前記液体形態は溶媒溶液である。

適当な溶媒は、水、グリコール、アルコール、多価アルコール、アルデヒド、ケトン、有機酸、ＤＭＳＯ、およびそれらの組合せである。

好ましい溶媒は、水、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソ−プロパノール、ｎ−ブタノール、イソブタノール、アリルアルコール、１，２−プロピレングリコール、１，３−プロピレングリコール、１，２−エチレングリコール、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ベンジルアルコール、グリセロール、アセトン、乳酸、ポリ乳酸、ＤＭＳＯ、およびそれらの混合物である。

より好ましい溶媒は、水、１，２−プロピレングリコール、１，３−プロピレングリコール、１，２−エチレングリコール、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、およびそれらの混合物である。

最も好ましい実施形態においては、溶媒は水である。

好ましくは、抗植物病原菌剤としてのリグニン画分は、溶媒１００ｌ当たり１，０００ｇ未満、より好ましくは溶媒１００ｌ当たり５００ｇ未満の濃度において使用される。

本発明はまた、植物病原菌に対し植物を防御する方法であって、前記方法が：
ｉ）上記記載のリグニン画分を提供すること、
ｉｉ）リグニン画分を植物または植物土壌に適用すること
の工程を含む、該方法にも関する。

工程ｉ）においては、リグニン画分は上記記載のように、固体または液体の形態で提供される。

工程ｉｉ）においては、リグニン画分はそのままで、すなわち、工程ｉ）で提供された形態で適用されてもよく、または予め水中に希釈されていてもよい。

いくつかの実施形態では、工程ｉｉ）において、リグニン画分は固体形態、例えば粉末形態であり、かつ植物または植物土壌上にそのまま散布される。

別の実施形態においては、工程ｉｉ）におけるリグニン画分の適用は、工程ｉ）で提供されたリグニン画分を水中に希釈すること、および得られた溶液を植物上に、病原体増殖のパラメータに従って植物の生育中の様々な時間に、或いは植物土壌上に、例えば播種の前または播種時に、噴霧することにより実施される。より好ましくは、リグニン画分は水中に、水１００ｌ当たり１，０００ｇ未満、好ましくは水１００ｌ当たり５００ｇ未満の濃度に希釈される。

好ましくは、リグニン画分は、１年に少なくとも１回適用される。

より好ましくは、リグニン画分は、１年に１〜１０回植物に適用される。

この方法の好ましい実施形態においては、工程ｉｉ）におけるリグニン画分は、２０，０００グラム／ｈａ未満、好ましくは５，０００グラム／ｈａ未満の量で、より好ましくは２，０００〜４，０００グラム／ｈａの量で、植物に適用される。特に好ましい実施形態では、工程ｉｉ）のリグニン画分は、３，０００グラム／ｈａの量で植物に適用される。

より好ましくは、リグニン画分は１年に１〜３回、植物土壌に適用される。

この方法の好ましい実施形態においては、工程ｉｉ）におけるリグニン画分は、１００，０００グラム／ｈａ未満、好ましくは５０，０００グラム／ｈａ未満の量で、より好ましくは２０，０００〜４０，０００グラム／ｈａの量で、植物土壌に適用される。特に好ましい実施形態では、工程ｉｉ）のリグニン画分は、３０，０００グラム／ｈａの量で植物土壌に適用される。

リグニン画分は、上記記載のように、そのままで、したがって植物または植物土壌上に直接使用されてもよく、或いは組成物中に配合されてもよい。

この点については、さらなる態様において、本発明はまた、上記記載のような使用のためのリグニン画分と適当な農薬添加物とを含む、抗植物病原菌組成物にも関する。

前記抗植物病原菌組成物は、固体または液体の形態であってよい。

抗植物病原菌組成物が固体形態である場合、前記固体形態はタブレット、ミニタブレット、マイクロタブレット、顆粒、マイクロ顆粒、ペレット、マルチ粒子、微粒子化粒子、または粉末であってよい。

抗植物病原菌組成物が固体形態である場合、前記固体形態は、９９ｗｔ％までのリグニン画分、好ましくは５〜９０ｗｔ％のリグニン画分を含む。

抗植物病原菌組成物が液体形態である場合、前記液体形態は、溶液、エマルジョン、分散物、懸濁液、ゲル、滴剤、またはスプレイであってよい。

抗植物病原菌組成物が液体形態である場合、前記液体形態は、５０ｗｔ％までのリグニン画分、好ましくは１〜２５ｗｔ％のリグニン画分を含む。このことは、組成物が植物または植物土壌への使用に先立ち、水中に適宜希釈され得る濃度であることを意味する。

適当な農薬添加物は、ｐＨ調整剤、酸性度調整剤、水硬度調整剤、鉱物油、植物油、化学肥料、葉の有機肥料、乳化剤、粘着付与剤、湿潤剤、およびそれらの組合せである。

抗植物病原菌組成物は、さらに溶媒を含み得る。

適当な溶媒は、水、グリコール、アルコール、多価アルコール、アルデヒド、ケトン、有機酸、ＤＭＳＯ、およびそれらの組合せである。

好ましい溶媒は、水、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソ−プロパノール、ｎ−ブタノール、イソブタノール、アリルアルコール、１，２−プロピレングリコール、１，３−プロピレングリコール、１，２−エチレングリコール、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ベンジルアルコール、グリセロール、アセトン、乳酸、ポリ乳酸、ＤＭＳＯ、およびそれらの混合物である。

より好ましい溶媒は、水、１，２−プロピレングリコール、１，３−プロピレングリコール、１，２−エチレングリコール、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、およびそれらの混合物である。

上記記載の抗植物病原菌組成物は、植物病原菌に対し植物を防御する方法において使用可能であり、前記方法は：
ａ）本発明の抗植物病原菌組成物を提供すること、および
ｂ）抗植物病原菌組成物を植物または植物土壌に適用すること
の工程を含む。

工程ａ）においては、抗植物病原菌組成物は、上記記載のように、固体または液体の形態で提供される。

工程ｂ）においては、抗植物病原菌組成物は、そのままで、すなわち工程ａ）で提供された形態で適用されてよく、または予め水中に希釈されてもよい。

いくつかの実施形態では、工程ｂ）において、抗植物病原菌組成物は固体形態で、例えば粉末形態であり、かつそのまま植物または植物土壌上に散布される。

別の実施形態では、工程ｂ）における抗植物病原菌組成物の適用は、まず組成物を水中に希釈すること、そして次に、得られた溶液を植物上に、病原体増殖のパラメータに従って植物の生育中の様々な時間に、或いは植物土壌上に、例えば播種の前または播種時に、噴霧することにより実施される。より好ましくは、工程ｂ）において、組成物の水中での希釈は、結果として、水１００ｌ当たり１，０００ｇ未満、好ましくは水１００ｌ当たり５００ｇ未満のリグニン画分濃度を生じる。

好ましくは、抗植物病原菌組成物は、１年に少なくとも１回適用される。

より好ましくは、抗植物病原菌組成物は、１年に１〜１０回、植物に適用される。

方法の好ましい実施形態においては、工程ｂ）の抗植物病原菌組成物は、植物に対し２０，０００グラム／ｈａ未満、好ましくは５，０００グラム／ｈａ未満のリグニン画分量、より好ましくは２，０００〜４，０００グラム／ｈａの量を達成するように適用される。特に好ましい実施形態では、工程ｂ）の抗植物病原菌組成物は、３，０００グラム／ｈａのリグニン画分量を達成するように、植物に適用される。

より好ましくは、抗植物病原菌組成物は１年に１〜３回、植物土壌に適用される。

この方法の好ましい実施形態においては、工程ｂ）の抗植物病原菌組成物は、１００，０００グラム／ｈａ未満、好ましくは５０，０００グラム／ｈａ未満のリグニン画分量、より好ましくは２０，０００〜４０，０００グラム／ｈａの量を達成するように、植物土壌に適用される。特に好ましい実施形態では、工程ｂ）の抗植物病原菌組成物は、３０，０００グラム／ｈａのリグニン画分量を達成するように、植物土壌に適用される。

リグニン画分の使用にとり好ましくかつ有利であると同定された全ての態様が、また植物を防御する方法、抗植物病原菌組成物、およびその使用にとっても、同様に好ましくかつ有利であると考えられることが理解されるべきである。

また、本発明のリグニン画分の使用の、ならびに上記に報告されたような、植物を防御する方法、抗植物病原菌組成物、およびその使用の、好ましい態様の全ての組合せが、本明細書に開示されたと見なされることも理解されるべきである。

以下は、例示を目的として提供された、本発明の実施例である。

これらの実施例におけるＭ_ｗおよびＭ_ｎは、サイズ排除クロマトグラフィーにより、以下の手順に従って測定された。

試薬および材料
−溶離液：０．１Ｍ ＮａＣｌ、流量０．５ｍｌ／ｍｉｎ
−ＲＩ検出器用のキャリブレーション：プルラン（Ｐｕｌｌｕｌａｎ）標準、Ｍ_ｐ：１００，０００−１，０８０（６つの標準）、これにおいてＭ_ｐは、最大ピーク分子量である
−ＵＶ検出器用のキャリブレーション（２８０ｎｍ）：ＰＳＳ標準、ポリスチレンスルホン酸ナトリウム塩、Ｍ_ｐ６５，４００−８９１（６つの標準）。標準は超純水中に溶解し、濃度を約５ｍｇ／ｍｌとする。注入体積は２０μｌ。
−品質管理サンプル：既知のＭ_ｗ分布をもつリグニンを使用する。

装置および機器
−Ｄｉｏｎｅｘ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ３０００オートサンプラー、カラムコンパートメント、およびポンプ
−Ｄｉｏｎｅｘ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ３０００ダイオードアレイ検出器
−示差屈折率検出器：Ｓｈｏｄｅｘ ＲＩ−１０１
−カラム：ＰＳＳ ＭＣＸカラム：プレカラムおよび２つの分析カラム：１０００Åおよび１００ ０００Å、カラム材料は、スルホン化ジビニルベンゼン共重合体マトリックスである。
−シリンジフィルター０，４５μｍ及び標準（ＳＴＤ）サンプル用のガラスサンプルボトル。サンプル濾過：Ｍｉｎｉ−Ｕｎｉｐｒｅｐシリンジレスフィルター装置ＰＴＦＥまたはナイロン、０，４５μｍ。プレ濾過用には、必要に応じて５μｍシリンジフィルター。
−測定ボトル

手順
−溶離液の調製
理想的には、溶離液を調製するために使用される水は、できるだけ少ない溶存二酸化炭素を含有する、低効率の低い（１８ＭΩ・ｃｍ以下）高品質脱イオン水でなければならない。水は、生物学的汚染物（例えば、細菌およびカビ）および微小粒子状物質があってはならない。
−１０％ＭｅＯＨ−水によるニードル洗浄
−液体サンプル
強アルカリ性の液体サンプルを１：１００希釈し、ＰＴＦＥシリンジフィルター（０，４５μｍ）を用いてバイアルへ濾過する。固体リグニンサンプルは、０．１Ｍ ＮａＯＨ中に溶解および希釈し、ＰＴＦＥ、０，４５μｍシリンジフィルターで濾過する。準備のできたサンプルを、オートサンプラーに負荷する。注入体積は２０μｌである。サンプルの後、１ＭＮａＯＨをサンプルと同様に注入して、カラムを清浄化する。
機器パラメータ：
−流速 ０．５ｍｌ／ｍｉｎ
−溶離液 ０．１Ｍ ＮａＯＨ
−カラムオーブン温度 ３０℃
−イソクラティックラン
−ランタイム ４８分間
−固体試料
固体サンプル（リグニン）を、必要に応じて、６０℃のオーブン中で一晩乾燥させる。約１０ｍｇを１０ｍｌの計量ボトル中に秤量する。サンプルを０．１Ｍ ＮａＯＨ溶液中に溶解および希釈し、マーク内に満たす。サンプルをＰＴＦＥ、０，４５μｍフィルターで濾過する。サンプルが適切に溶解しない場合、それを超音波水槽中に入れてもよく、または５μｍシリンジフィルターを通して濾過してもよい。
−キャリブレーション用の標準サンプル
約５０ｍｇの各標準を１０ｍｌの計量ボトル中に秤量し、超純水を添加してマーク内に満たす。標準は、ＰＴＦＥ ０，４５μｍシリンジフィルターを用いて濾過する。キャリブレーションサンプルのランの後、キャリブレーション結果を集積し、処理方法で処理して蓄える。キャリブレーションは、線形一次キャリブレーションである。
−品質管理サンプル
リグニンサンプル用には、既知のＭ_ｗ分布をもつリグニンを、品質管理コントロールサンプルとして使用する。リグニンは０．１Ｍ ＮａＯＨ中に溶解され、濃度は約１ｍｇ／ｍｌである。

実施例１
以下のリグニン画分が、クラフト黒液から抽出されており、前記リグニン画分は以下の特徴を有する：
全固体の＞９５％
単一種：サザンパイン
Ｍ_ｗ ４４００〜５０００Ｄａ（２４〜２８個のフェニルプロパン単位）
Ｍ_ｎ １２００〜１３００Ｄａ（６〜７個のフェニルプロパン単位）
ＯＨ基の構造：
脂肪族性 ２．１ｍｍｏｌ／ｇ
カルボン酸性 ０．５ｍｍｏｌ／ｇ
縮合およびシリンギル型 １．７ｍｍｏｌ／ｇ
グアイアシル型 ２．０ｍｍｏｌ／ｇ
カテコール性およびｐ−ＯＨ−フェニル ４．０ｍｍｏｌ／ｇ

実施例１ａ
１００ｇの上記のリグニン画分（１０％ｗ／ｗ）を、８４０ｇの１，３−プロピレングリコール、および６０ｇのＮＨ_４ＯＨ（３０％の溶液）と加熱混合した。
混合物を室温に冷却し、次いで濾過し、かくて黒色溶液（簡単に「ＯＸ１１」と称する）を得た。

実施例１ｂ
１００ｇの上記のリグニン画分（１０％ｗ／ｗ）を、８４０ｇの１，３−プロピレングリコール、および６０ｇのＮａＯＨ（３０％の溶液）と加熱混合した。
混合物を室温に冷却し、次いで濾過し、かくて黒色溶液（簡単に「ＯＸ１０」と称する）を得た。

実施例２
ブナ材（Ｆａｇｕｓ ｓｙｌｖａｔｉｃａ（ヨーロッパブナ））から得られたオルガノソルブリグニンを、塩基触媒脱重合（「ＢＣＤ」）に供した。ＢＣＤプロセスは、２８０℃および２５０バールにおいて８分間、ｐＨ１２〜１４で実施される。得られたリグニン生成物は、液体画分と固体画分とから成る。

これらの画分を次に分離した。

液体リグニン画分は、油であり、かつ以下の特徴を有していた：
単一種：Ｆａｇｕｓ ｓｙｌｖａｔｉｃａ
Ｍ_ｗ １００〜３００Ｄａ（１〜２個のフェニルプロパン単位）
フェノール ０％
グアイアコール １５〜２０％
シリンゴール ５０〜６０％
カテコールおよびメトキシカテコール ５〜１０％
オリゴマー／未知 １５〜３０％

固体リグニン画分は、以下の特徴を有していた：
単一種：Ｆａｇｕｓ ｓｙｌｖａｔｉｃａ
Ｍ_ｗ ８００〜１，５００Ｄａ（４〜８個のフェニルプロパン単位）
Ｍ_ｎ ３００〜７００Ｄａ（２〜４個のフェニルプロパン単位）
ＯＨ−基の構造：
脂肪族性 ０．２〜０．４ｍｍｏｌ／ｇ
カルボン酸性 ０．３〜０．５ｍｍｏｌ／ｇ
縮合およびシリンギル型 １．０〜２．０ｍｍｏｌ／ｇ
グアイアシル型 ０．４ｍｍｏｌ／ｇ
カテコール性およびｐ−ＯＨ−フェニル １．０〜１．８ｍｍｏｌ／ｇ

実施例２ａ
５０ｇの上記の油性のリグニン画分（５％ｗ／ｗ）を、９５０ｇの１，３−プロピレングリコールと混合し、４０〜５０℃に加熱した。混合物を室温に冷却し、かくて粘性の溶液（簡単に「ＬＭＷ１２」と称する）を得た。

実施例２ｂ
１００ｇの上記の固体リグニン画分（１０％ｗ／ｗ）を、８００ｇの１，３−プロピレングリコール、および１００ｇのＮＨ_４ＯＨ（３０％の溶液）と加熱混合した。
混合物を室温に冷却し、次いで濾過し、かくて黒色溶液（簡単に「ＬＭＷ１１」と称する）を得た。

実施例２ｃ
１００ｇの上記の固体リグニン画分（１０％ｗ／ｗ）を、８３５ｇの１，３−プロピレングリコール、および６５ｇのＫＯＨ（２０％の溶液）と加熱混合した。
混合物を室温に冷却し、次いで濾過し、かくて黒色溶液（簡単に「ＬＭＷ１０」と称する）を得た。

実施例３
実施例１〜２の生成物の抗植物病原菌活性を、ブロス微量液体希釈法（ＣＬＳＩプロトコール−Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（臨床検査標準委員会））を用いた抗菌物質感受性のインビトロ試験により評価した。７つの生成物（ブランク、ＬＭＷ１２、ＬＭＷ１１、ＬＭＷ１０、ＯＸ１２、ＯＸ１１、およびＯＸ１０）の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）を、マルチウェルプレートを用いて測定し、これにおいて、ブランクは１，３−プロピレングリコールのみであった。

生成物の抗植物病原菌活性を、以下に列記された微生物（細菌および真菌）に対し試験した：
特異的スクリーニングバイオコントロール
細菌
−エルウィニア・アミロボーラ（Ｅｒｗｉｎｉａ ａｍｙｌｏｖｏｒａ）
−キサントモナス・アルボリコラ（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ａｒｂｏｒｉｃｏｌａ）
−キサントモナス・カンペストリス（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ）
真菌
−フザリウム・ソラニ（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｏｌａｎｉ）
−アルテルナリア・ソラニ（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｓｏｌａｎｉ）
−ボトリチス・シネレア（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）
−モニリア・ラクサ（Ｍｏｎｉｌｉａ ｌａｘａ）

結果
試験生成物のｐＨを測定し、以下のように記録した：

このパラメータの変動性が高いこと、および検討した微生物の成長能力に対し大いに影響する可能性があることから、いくつかの試験を設定し、何ら修正なしに、またｐＨを７または８に調整して化合物を試験した。

全ての試験は、三重に実施され、非常に類似した阻害結果が得られた。

結果は以下の表に要約される。

結論として、以下の表に活性のランクが示される：

上記の星印は、各生成物についての、細菌／真菌が阻害されるリグニン画分の最小濃度（μｇ／ｍｌ）の範囲を表す：
^＊＝２５０，０００から６，２５０まで；
^＊＊＝４，６９０から７８０まで；
^＊＊＊＝５９０から９０まで；
^＊＊＊＊＝７３から１２まで。

Claims (20)

1. 抗植物病原菌剤としてのリグニン画分の使用であって、これにおいて前記リグニン画分が、サイズ排除クロマトグラフィーにより測定される、６，０００ダルトンまでの重量平均分子量を有するフラグメントを含む、該使用。
2. 前記リグニン画分が、細菌、真菌、卵菌、またはウイルスに対する抗植物病原菌剤である、請求項１に記載の使用。
3. 前記リグニン画分が、５，５００ダルトンまでの、好ましくは５，０００ダルトンまでの重量平均分子量を有するフラグメントを含む、請求項１または２に記載の使用。
4. 前記リグニン画分が、２から６の多分散指数を有する、請求項１から３のいずれか１項に記載の使用。
5. 前記リグニン画分が、水１００ｌ当たり１，０００ｇ未満、好ましくは水１００ｌ当たり５００ｇ未満の濃度において使用される、請求項１から４のいずれか１項に記載の使用。
6. 植物病原菌に対し植物を防御する方法であって、前記方法が：
   ｉ）サイズ排除クロマトグラフィーにより測定される、６，０００ダルトンまでの重量平均分子量を有するフラグメントを含むリグニン画分を提供すること、および
   ｉｉ）前記リグニン画分を植物または植物土壌に適用すること
   の工程を含む、該方法
7. 前記リグニン画分が、５，５００ダルトンまでの、好ましくは５，０００ダルトンまでの重量平均分子量を有するフラグメントを含む、請求項６に記載の方法。
8. 前記リグニン画分が、２から６の多分散指数を有する、請求項６または７に記載の方法。
9. 工程ｉ）の前記リグニン画分が、水１００ｌ当たり１，０００ｇ未満、好ましくは水１００ｌ当たり５００ｇ未満の濃度である、請求項６から８のいずれか１項に記載の方法。
10. 工程ｉｉ）における前記リグニン画分が、２０，０００グラム／ｈａ未満、好ましくは５，０００グラム／ｈａ未満の量で植物に適用されるか、または工程ｉｉ）における前記リグニン画分が、１００，０００グラム／ｈａ未満、好ましくは５０，０００グラム／ｈａ未満の量で植物土壌に適用される、請求項６から９のいずれか１項に記載の方法。
11. サイズ排除クロマトグラフィーにより測定される、６，０００ダルトンまでの重量平均分子量を有するフラグメントを含むリグニン画分と、および農薬添加物とを含む、抗植物病原菌組成物。
12. 前記リグニン画分が、５，５００ダルトンまでの、好ましくは５，０００ダルトンまでの重量平均分子量を有するフラグメントを含む、請求項１１に記載の抗植物病原菌組成物。
13. 前記リグニン画分が、２から６の多分散指数を有する、請求項１１または１２に記載の抗植物病原菌組成物。
14. 前記リグニン画分を、１ｋｇの前記組成物自体当り５００グラムまで、好ましくは１ｋｇ当たり１０〜２５０グラムの量で含む、請求項１１から１３のいずれか１項に記載の抗植物病原菌組成物。
15. 水、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソ−プロパノール、ｎ−ブタノール、イソブタノール、アリルアルコール、１，２−プロピレングリコール、１，３−プロピレングリコール、１，２−エチレングリコール、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ベンジルアルコール、グリセロール、ＤＭＳＯ、およびそれらの混合物から選択される溶媒をさらに含む、請求項１１から１４のいずれか１項に記載の抗植物病原菌組成物。
16. 植物病原菌に対し植物を防御する方法であって、前記方法が：
    ａ）サイズ排除クロマトグラフィーにより測定される、６，０００ダルトンまでの重量平均分子量を有するフラグメントを含むリグニン画分と、および農薬添加物とを含む抗植物病原菌組成物を提供すること、および
    ｂ）前記抗植物病原菌組成物を植物または植物土壌に適用すること
    の工程を含む、該方法。
17. 前記リグニン画分が、５，５００ダルトンまでの、好ましくは５，０００ダルトンまでの重量平均分子量を有するフラグメントを含む、請求項１６に記載の方法。
18. 前記リグニン画分が、２から６の多分散指数を有する、請求項１６または１７に記載の方法。
19. 前記リグニン画分を、１ｋｇの前記組成物自体当り５００グラムまで、好ましくは１ｋｇ当たり１０〜２５０グラムの量で含む、請求項１６から１８のいずれか１項に記載の方法。
20. 前記抗植物病原菌組成物が、水、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソ−プロパノール、ｎ−ブタノール、イソブタノール、アリルアルコール、１，２−プロピレングリコール、１，３−プロピレングリコール、１，２−エチレングリコール、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ベンジルアルコール、グリセロール、ＤＭＳＯ、およびそれらの混合物から選択される溶媒をさらに含む、請求項１６から１９のいずれか１項に記載の方法。