JP2019500860A5 - - Google Patents
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- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
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- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims 1
Claims (22)
- ウイルスの複製方法であって、
(1)遺伝子改変を欠くアイソジェニック細胞と比較した場合、細胞における抗ウイルス遺伝子の発現を減少させる遺伝子改変を有する細胞集合を取得し、並びに/又は、
(2)インビトロでウイルスを細胞に接種し、そして
(3)細胞を所定の期間培養してウイルスを複製させ、ここで当該細胞が、アイソジェニック細胞の集合よりも多くのウイルスを産生することができる、前記方法。 - 前記遺伝子改変が、細胞のゲノム内であるか及び/又はプログラム可能なヌクレアーゼによって導入された、請求項1に記載の方法。
- 前記ヌクレアーゼが、RNA誘導操作ヌクレアーゼ(RGEN)、転写活性化因子様ヌクレアーゼ(TALEN)、及びジンクフィンガーヌクレアーゼ(ZFN)から選択される、請求項2に記載の方法。
- 前記ヌクレアーゼが、RNA誘導操作ヌクレアーゼ(RGEN)である、請求項3に記載の方法。
- 前記ヌクレアーゼが、抗ウイルス遺伝子又はその制御領域に、欠失、置換、又は挿入を導入する、請求項3又は4に記載の方法。
- 前記遺伝子改変が、前記細胞における抗ウイルス遺伝子の前記発現を減少させるポリヌクレオチドをコードする導入遺伝子である、請求項1から5のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ポリヌクレオチドが、アンチセンスポリヌクレオチド、センスポリヌクレオチド、マイクロRNA、前記抗ウイルス遺伝子によりコードされるタンパク質に結合するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、二本鎖RNA分子、又はそれに由来するプロセッシングされたRNA分子である、請求項6に記載の方法。
- ウイルス複製方法であって、当該方法が、以下の:
(1)細胞集合を得ること、
(2)化合物を欠くアイソジェニック細胞と比較した場合、抗ウイルス遺伝子の発現を減少させるか、及び/又は細胞における抗ウイルスタンパク質活性のレベルを減少させる外因性化合物を細胞に投与すること、
(3)細胞にインビトロでウイルスを播種すること、並びに、
(4)所定の時間、細胞をインキュベートして、ウイルスを複製すること、
を含み、ここで当該細胞は、アイソジェニック細胞の集合よりも多くのウイルスを産生することができる、前記方法。 - 前記外因性化合物が、炭素系小分子、タンパク質結合剤、プログラム可能なヌクレアーゼ、ポリヌクレオチド、又はこれらのうち2つ以上の組合せである、請求項8に記載の方法。
- 前記タンパク質結合剤又は前記ポリヌクレオチドが、前記細胞へ投与される導入遺伝子から発現される、請求項9に記載の方法。
- 前記導入遺伝子が、前記細胞において培養されるウイルス中に存在する、請求項10に記載の方法。
- 前記抗ウイルス遺伝子が、I型、II型、又はIII型インターフェロン経路である、請求項1〜11のいずれか一項に記載の方法。
- 前記抗ウイルス遺伝子及び/又はタンパク質が、以下の:
IFNAR1、IL−1RA、DDI2、HSBP1、GNAZ、NPR2、CNOT4、MDA5、IFNα、IL−6、IFNβ、IFNγ、IFNλ、UBE1DC1、CDX2、LOC100859339、IL28RA、ZFPM2、TRIM50、DNASEIL2、PHF21A、GAPDH、BACE2、PCGF5、CAPN13、UBA5、NPR2、IFIH1、LAMP1、EFR3A、ARRDC3、ABI1、SCAF4、GADL1、ZKSCAN7、PLVAP、RPUSD1、CYYR1、UPF3A、ASAP1、NXF1、TOP1MT、RALGAPB、SUCLA2、GORASP2、NSUN6、CELF1、ANGPTL7、SLC26A6、WBSCR27、SIL1、HTT、MYOC、TM9SF2,CEP250、FAM188A、BCAR3、GOLPH3L、HN1、ADCY7、AKAP10、ALX1、CBLN4、CRK、CXORF56、DDX10、EIF2S3、ESF1、GBF1、GCOM1、GTPBP4、HOXB9、IFT43、IMP4、ISY1、KIAA0586、KPNA3、LRRIQ1、LUC7L、MECR、MRPL12、POLR3E、PWP2、RPL7A、SERPINH1、SLC47A2、SMYD2、STAB1、TTK、WNT3、XPO1、AHHR、ZNF334、SSR4、KLRC1、SIX5、TCL1B、ZNF211、MAGEL2、SBN01、OR1D5、SLC17A9、ZNF607、GCET2、TMEM223、ZNF146、NLRP13、RLN2、NCR2、OR4B1、GLUD2、IFNAR2、IFNGR1、INFGR2、IL−10R2、IFNκ、IFNΩ、IL−1RB及びHTRA4からなる群のうちの1、2、3、4、又はそれ以上から選ばれる、請求項1〜12のいずれか一項に記載の方法。 - 前記細胞は、
1)ニワトリ胚性線維芽細胞(CEF)由来の初代細胞由来であり;
2)ニワトリ組織由来の初代細胞由来であり;
3)ニワトリ由来の不死化細胞由来であり;
4)胚性由来幹細胞株EB14由来であり;
5)胚性由来幹細胞株EB66由来であり;
6)不死化ひよこ胚細胞株PBS−1由来であり;
7)ニワトリ線維化細胞株DF−1由来であり;
8)マジン―ダービー(Madin−Darby)イヌ腎臓細胞;
9)アフリカミドリザル腎臓由来Vero細胞;
10)ヒト網膜由来PER.C6細胞;又は
11)MRC−5二倍体細胞株由来である、請求項1〜13のいずれか一項に記載の方法。 - 前記ウイルスが、オルトミクソウイルス科、ヘルペスウイルス科、パラミクソウイルス科、フラビウイルス科、又はコロナウイルス科であるか、又は感染性ファブリーキウス嚢病ウイルスである、請求項1〜14のいずれか一項に記載の方法。
- 前記オルトミクソウイルス科ウイルスが、以下の:
i) 動物ウイルス
ii)インフルエンザAウイルス、インフルエンザBウイルス、及びインフルエンザCウイルスから選ばれる、
iii)インフルエンザAウイルスである、及び
iv)H1N1、H1N2、H1N3、H1N4、H1N5、H1N6、H1N7、H1N9、H2N1、H2N2、H2N3、H2N4、H2N5、H2N7、H2N8、H2N9、H3N1、H3N2、H3N3、H3N4、H3N5、H3N6、H3N8、H4N1、H4N2、H4N3、H4N4、H4N5、H4N6、H4N8、H4N9、H5N1、H5N2、H5N3、H5N6、H5N7、H5N8、H5N9、H6N1、H6N2、H6N3、H6N4、H6N5、H6N6、H6N7、H6N8、H6N9、H7N1、H7N2、H7N3、H7N4、H7N5、H7N7、H7N8、H7N9、H9N1、H9N2、H9N3、H9N5、H9N6、H9N7、H9N8、H10N1、H10N3、H10N4、H10N6、H10N7、H10N8、H10N9、H11N2、H11N3、H11N6、H11N9、H12N1、H12N4、H12N5、H12N9、H13N2、H13N6、H13N8、H13N9、H14N5、H15N2、H15N8、H15N9 及びH16N3から選ばれる、
のうちの1以上である、請求項15に記載の方法。 - 請求項1〜16のいずれか一項に記載の方法を用いて産生されるウイルス。
- ワクチン組成物を提供する方法であって、
(1)請求項1〜16のいずれか一項に記載の方法を用いてウイルスを複製すること、
(2)細胞から複製されたウイルス、又はその粒子を回収すること、及び、
(3)回収されたウイルスからワクチン組成物を調製すること、
を含む、前記方法。 - 遺伝子改変を欠くアイソジェニック細胞と比較した場合、細胞において抗ウイルス遺伝子の発現を減少させる、プログラム可能なヌクレアーゼにより導入された遺伝子改変を含むインビトロでの細胞集合であって、当該細胞が、アイソジェニック細胞の集合より多くのウイルスを産生することができる、前記細胞集合。
- 請求項19に記載の細胞集合の製造方法であって、以下の:
(1)遺伝子改変を1又は複数の細胞に導入すること、
(2)工程1)から産生された細胞を、遺伝子改変を欠くアイソジェニック細胞よりも多くのウイルスを産生する能力についてスクリーニングし、
(3)遺伝子改変を欠くアイソジェニック細胞よりも多くのウイルスを産生する遺伝子改変を有する1又は複数の細胞を選択し、そして
(4)場合により選択された細胞をクローン増幅すること
を含む、前記方法。 - 請求項20に記載の方法により産生される細胞集合。
- 化合物を欠くアイソジェニック細胞と比較した場合に、細胞において抗ウイルス遺伝子の発現を低下させ、及び/又は抗ウイルスタンパク質活性のレベルを低下させる外因性化合物を含む、インビトロにおける細胞集合であって、ここで当該細胞が、アイソジェニック細胞の集合よりも多くのウイルスを産生することができ、そしてここで当該ウイルスがオルソミクソウイルス科である、前記細胞集合。
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