JP2019069231A - ナノヒドロキシアパタイトを含む多孔質多糖足場、及び骨形成のための使用 - Google Patents
ナノヒドロキシアパタイトを含む多孔質多糖足場、及び骨形成のための使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2019069231A JP2019069231A JP2018246676A JP2018246676A JP2019069231A JP 2019069231 A JP2019069231 A JP 2019069231A JP 2018246676 A JP2018246676 A JP 2018246676A JP 2018246676 A JP2018246676 A JP 2018246676A JP 2019069231 A JP2019069231 A JP 2019069231A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- polysaccharide
- bone
- scaffold
- matrix
- porous
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/02—Inorganic materials
- A61L27/12—Phosphorus-containing materials, e.g. apatite
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/14—Macromolecular materials
- A61L27/20—Polysaccharides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/40—Composite materials, i.e. containing one material dispersed in a matrix of the same or different material
- A61L27/44—Composite materials, i.e. containing one material dispersed in a matrix of the same or different material having a macromolecular matrix
- A61L27/46—Composite materials, i.e. containing one material dispersed in a matrix of the same or different material having a macromolecular matrix with phosphorus-containing inorganic fillers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
- A61L27/56—Porous materials, e.g. foams or sponges
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
- C08B37/0009—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid alpha-D-Glucans, e.g. polydextrose, alternan, glycogen; (alpha-1,4)(alpha-1,6)-D-Glucans; (alpha-1,3)(alpha-1,4)-D-Glucans, e.g. isolichenan or nigeran; (alpha-1,4)-D-Glucans; (alpha-1,3)-D-Glucans, e.g. pseudonigeran; Derivatives thereof
- C08B37/0018—Pullulan, i.e. (alpha-1,4)(alpha-1,6)-D-glucan; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
- C08B37/0009—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid alpha-D-Glucans, e.g. polydextrose, alternan, glycogen; (alpha-1,4)(alpha-1,6)-D-Glucans; (alpha-1,3)(alpha-1,4)-D-Glucans, e.g. isolichenan or nigeran; (alpha-1,4)-D-Glucans; (alpha-1,3)-D-Glucans, e.g. pseudonigeran; Derivatives thereof
- C08B37/0021—Dextran, i.e. (alpha-1,4)-D-glucan; Derivatives thereof, e.g. Sephadex, i.e. crosslinked dextran
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J9/00—Working-up of macromolecular substances to porous or cellular articles or materials; After-treatment thereof
- C08J9/0061—Working-up of macromolecular substances to porous or cellular articles or materials; After-treatment thereof characterized by the use of several polymeric components
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J9/00—Working-up of macromolecular substances to porous or cellular articles or materials; After-treatment thereof
- C08J9/26—Working-up of macromolecular substances to porous or cellular articles or materials; After-treatment thereof by elimination of a solid phase from a macromolecular composition or article, e.g. leaching out
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J9/00—Working-up of macromolecular substances to porous or cellular articles or materials; After-treatment thereof
- C08J9/28—Working-up of macromolecular substances to porous or cellular articles or materials; After-treatment thereof by elimination of a liquid phase from a macromolecular composition or article, e.g. drying of coagulum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/10—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing inorganic materials
- A61L2300/112—Phosphorus-containing compounds, e.g. phosphates, phosphonates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2400/00—Materials characterised by their function or physical properties
- A61L2400/08—Methods for forming porous structures using a negative form which is filled and then removed by pyrolysis or dissolution
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2400/00—Materials characterised by their function or physical properties
- A61L2400/12—Nanosized materials, e.g. nanofibres, nanoparticles, nanowires, nanotubes; Nanostructured surfaces
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
- A61L2430/02—Materials or treatment for tissue regeneration for reconstruction of bones; weight-bearing implants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J2201/00—Foams characterised by the foaming process
- C08J2201/02—Foams characterised by the foaming process characterised by mechanical pre- or post-treatments
- C08J2201/026—Crosslinking before of after foaming
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J2201/00—Foams characterised by the foaming process
- C08J2201/04—Foams characterised by the foaming process characterised by the elimination of a liquid or solid component, e.g. precipitation, leaching out, evaporation
- C08J2201/044—Elimination of an inorganic solid phase
- C08J2201/0444—Salts
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J2201/00—Foams characterised by the foaming process
- C08J2201/04—Foams characterised by the foaming process characterised by the elimination of a liquid or solid component, e.g. precipitation, leaching out, evaporation
- C08J2201/048—Elimination of a frozen liquid phase
- C08J2201/0484—Elimination of a frozen liquid phase the liquid phase being aqueous
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J2205/00—Foams characterised by their properties
- C08J2205/02—Foams characterised by their properties the finished foam itself being a gel or a gel being temporarily formed when processing the foamable composition
- C08J2205/022—Hydrogel, i.e. a gel containing an aqueous composition
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J2207/00—Foams characterised by their intended use
- C08J2207/10—Medical applications, e.g. biocompatible scaffolds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J2305/00—Characterised by the use of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08J2301/00 or C08J2303/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J2405/00—Characterised by the use of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08J2401/00 or C08J2403/00
- C08J2405/02—Dextran; Derivatives thereof
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Composite Materials (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Prostheses (AREA)
Abstract
Description
骨関連障害の話題は、過去数年にわたってかなりの注目を集めている。自己骨及び同種骨を使用することは、骨欠損などの骨関連障害を克服するために、病院で広く行われている。しかしながら、自己骨を使用することは、二次的なトラウマをもたらすことが公知であり、同種骨は、免疫反発を引き起こす。加えて、自己骨及び同種骨の使用は、欠損部のサイズ及び局在に依存するので、自己骨及び同種骨には深刻な限界がある。例えば、大きな欠損部における移植片は、骨形成の完了前に体に再吸収されたので、この治療の成功について疑問が残ることが報告された(Hoexter DL. Bone regeneration graft materials J Oral Implantol. 2002;28(6); Delloye C, Cornu O, Druez V, Barbier O. Bone allografts: What they can offer and what they cannot. J Bone Joint Surg Br. 2007 May;89(5):574-9)。
i)少なくとも1つの多糖の量、架橋剤の量、及びポロゲン剤の量を含むアルカリ性水溶液を調製すること、
ii)前記溶液を、約4℃〜約80℃の温度で、前記多糖の量を架橋させるのに十分な時間置くことによって、当該溶液をヒドロゲルにトランスフォーメーションすること、
iii)前記ヒドロゲルを溶媒、好ましくは水溶液に浸すこと、及び
iv)工程iii)で得られた多孔質多糖足場を洗浄すること
を含み、
工程i)のアルカリ性水溶液が、ヒドロキシアパタイト、好ましくはナノヒドロキシアパタイトをさらに含む、方法に関する。
a)少なくとも1つの多糖、及び1つの架橋剤の量を含むアルカリ性水溶液を調製すること、
b)工程a)の水溶液を凍結すること、
c)工程b)の凍結溶液を昇華させること
を含み、
工程a)のアルカリ性水溶液が、ヒドロキシアパタイト、好ましくはナノヒドロキシアパタイトをさらに含み、
工程a)の溶液中で多糖の架橋が起こる前に工程b)が実施される、方法に関する。
定義
本明細書において使用される「多糖」という用語は、2つ以上の単糖単位を含む分子を指す。
第1の目的では、本発明は、多孔質多糖足場を調製するための方法であって、以下の工程:
i)少なくとも1つの多糖の量、架橋剤の量、及びポロゲン剤の量を含むアルカリ性水溶液を調製すること、
ii)前記溶液を、約4℃〜約80℃の温度で、前記多糖の量を架橋させるのに十分な時間置くことによって、当該溶液をヒドロゲルにトランスフォーメーションすること、
iii)前記ヒドロゲルを溶媒、好ましくは水溶液に浸すこと、及び
iv)工程iii)で得られた多孔質多糖足場を洗浄すること
を含み、
工程i)のアルカリ性水溶液が、ヒドロキシアパタイト、好ましくはナノヒドロキシアパタイトをさらに含む、方法に関する。
a)少なくとも1つの多糖、及び1つの架橋剤の量を含むアルカリ性水溶液を調製すること、
b)工程a)の水溶液を凍結すること、
c)工程b)の凍結溶液を昇華させること
を含み、
工程a)のアルカリ性水溶液が、ヒドロキシアパタイト、好ましくはナノヒドロキシアパタイトをさらに含み、
工程a)の溶液中で多糖の架橋が起こる前に工程b)が実施される、方法に関する。
本発明者らは、本発明の多孔質多糖足場の移植が、高密度コラーゲンネットワーク及び血管形成、並びに骨芽細胞様細胞のリクルートの刺激につながることを示した。皮下部位における本発明の足場の前記移植は、高密度石化組織の形成、そしてそれ故骨形成につながる。
実施例1:無胸腺マウスの頭蓋冠部位における本発明の足場の移植。
材料と方法
ナノヒドロキシアパタイトの調製
0.6Mリン酸溶液(H3PO4Rectapur, Prolabo(登録商標), France)及び1M水酸化カルシウム溶液(CaOH2 Alfa Aesar, Germany)を使用する湿式化学沈殿によって、ナノヒドロキシアパタイト(n−HA)を調製した。100mlのH3PO4溶液を100mlのCaOH2溶液に、室温で激しく撹拌しながら30分間かけて一滴ずつ加えた。反応終了時に、0.4.10−3molの0.6M水酸化ナトリウム溶液を使用して、pHを9に調整し、次いで、12時間撹拌し続けた。
9gのプルラン及び3gのデキストランを、14gのNaClを含む27mLの蒸留水及び13mLのナノヒドロキシアパタイト懸濁液(n−HA、6.36%w/v)に溶解させることによって調製したプルラン/デキストラン75:25の混合物(プルラン, MW 200,000, Hayashibara Inc, デキストランMW 500,000, Pharmacia)を使用して、マクロ多孔質複合足場(MATRI+)を調製した。アルカリ性条件下、トリメタリン酸三ナトリウムSTMP(Sigma)を使用して、化学的架橋を行った。つまり、1mLの10M酸化ナトリウムを10gの多糖混合物に加え、続いて、300mgのSTMPを含む1mLの水を加えた。50℃で15分間インキュベーションした後、得られた足場を直径6mmの円板に切断し、PBS10X(pH7.4)中で中和し、次いで、0.025%NaCl溶液で広範囲に洗浄した。凍結乾燥工程後、多孔質複合多糖足場を、使用するまで室温で保管した。架橋前に、1%のフルオレセインイソチオシアネート(FITC)デキストラン(Sigma, St. Louis MO, USA)をこの混合物に加えることによって、蛍光足場を調製した。
Gimble et al, 2007によって以前に記載されているように、0.1%(w/v)コラゲナーゼI型で分解した後のヒト脂肪組織から、脂肪由来間質細胞(ADSC)を単離し、培養した。基礎培地(10%(v/v)ウシ胎仔血清(FBS)を補充したDMEM F12培地(Invitrogen))、又はADSCの骨芽細胞分化を誘導するための骨形成培地(10%(v/v)FBS(Lonza)、10−8Mデキサメタゾン(Sigma)、50mg/mlアスコルビン酸(Sigma)及び10mMβ−グリセロリン酸塩(Sigma)を補充したIMDM培地(Invitrogen))中で、残りの間質血管画分(SVF)を培養した。
無胸腺マウスの頭蓋冠部位において、同所性新骨形成を評価した。12週齢ヌードマウスをイソフルレン/N2O混合物で麻酔し、外科手術に供して、冠状の歯科用バーを使用して、左側及び右側頭頂骨に直径4mmの全層を作製した。n−HAを含まない円板状のマトリックス(グループ1)及びn−HAを含む複合多糖足場MATRI+(グループ2)を、頭頂骨の骨膜先端に移植した。グループ3は、移植前1週間に分化したADSCに結合した複合多糖足場を移植したマウスに対応する。
in vivo Explore Locus SP X-Rayマイクロコンピューター化断層撮影(マイクロCT)装置(General Electric)において、等方性分解能45μmで、マウスをスキャンした。回転中心の修正及びミネラル密度の校正をした後に、頭頂及び皮下領域の再構築を実施した。「Advanced Bone Analysis」(商標)ソフトウェア(GE)を使用して、骨の分析を実施した。バックグラウンドから石化要素を分離するために、ヒストグラムツールを使用して、濃淡値の閾値化を実施した。関心対象の領域(ROI)において、石化組織の密度(TMD)を決定した。
実験期間の終了時に、マウスを安楽死させ、サンプルをばらばらにし、PBS 0.1M pH7.4に溶解させた3.7%(v/v)パラホルムアルデヒド中で固定した。サンプルの一部分を脱石灰化し、パラフィンに包埋した。7ミクロンの永久切片を、ヘマトキシリン及びエオシン及びマッソントリクローム色素で染色した。Schenk et al, 1984によって記載されているように、サンプルの他の部分をメチルメタクリレートに包埋した。Leicaミクロトーム及びタングステンカーバイドブレードを使用して、縦切片(15μmの厚さ)を調製した。切片をGoldnerトリクロム, Von Kossaで染色し、Nikon Eclipse 80i顕微鏡を使用して観察した。DXM 1200 C (Nikon)CCDカメラを使用して、写真を作製した。
出発製剤にn−HAを含め、PCT patent applications WO2009/047346及びWO2009/047347に開示されている方法に従って、3D多孔質マトリックス(図1)を得た。懸濁液中のn−HA(6.36%(w/v))により、得られた3DマトリックスにおけるHAナノ粒子の均一分散が可能になった。n−HAマトリックスは、乾燥状態で、2.8+/−0.1%(w/w)のHAを含んでいた。n−HA懸濁液の代わりに乾燥形態のn−HAを使用することにより、マトリックス内部に大きな凝集を誘導した。n−HAの存在下における3Dマトリックスは、特許取得済みのプロセスによってコントロールされる孔のサイズを有する多孔質(図2)である。
材料と方法
実施例1に記載されるように、本発明のナノヒドロキシアパタイト及び足場を調製した。本発明者らは、前記足場の移植を動物において評価した。手順及び動物処置は両方とも、National Society for Medical Researchによって策定されたPrinciples of Laboratory Animal Careに従った。認可(No: 3300048 of the Ministere de l’Agriculture, France)の下、University of Bordeaux Segalenの公認動物施設において研究を行い、Animal Research Committee of Bordeaux Universityによって承認された。
2つの異なる足場製剤:n−HAを含まない円板状マトリックス(グループ1)及びn−HAを含む複合足場(MATRI+)(グループ2)(直径4mm及び深さ6mmの円柱状)を、体重25〜30gの12週齢Balb/cマウス(Charles River Laboratories, France)の背部に作製した皮下ポケットに挿入した。移植の15、30及び60日後にサンプルを取り出し、マイクロCT及び組織学的分析のために処理した。各グループにおいて、8個のサンプルを組織学的観察及びマイクロCTに使用した。
冠状の歯科用バーを使用して、体重150〜200gのWistarラット(Charles River Laboratories, France)の左側及び右側大腿顆の両方に内部穴(直径5mm及び深さ6mm)を作製した。骨欠損部から骨片を除去し、足場を欠損部内に導入する前に、この穴を生理溶液(NaCl0.9%(w/v))で洗浄した。2つの異なる足場製剤(n−HAを含まないマトリックス、及びn−HAを含む複合足場)を、各骨欠損部に移植した。足場を用いないコントロール実験も行った。手術後15、30、60及び90日にインプラントを取り出し、マイクロCT及び組織学的分析のために処理した。各グループにおいて、6個のサンプルをマイクロCT及び組織学的観察に使用した。
各移植期間の終了時に、過剰量のペントバルビタールナトリウム(Nembutal(登録商標))を注射することによって、動物を安楽死させた。その後すぐに、インプラント及び周囲組織を取り出し、0.1Mリン酸緩衝液に溶解させた4%(w/v)パラホルムアルデヒドで固定し、組織学の前にマイクロCTでスキャンした。次いで、組織学的分析のために、サンプルを調製した。一部分を脱石灰化し、脱水し、パラフィンに包埋した。薄片(厚さ7μm)を調製し、ヘマトキシリン及びエオシン、並びに類骨染色用のGoldnerトリクロムで染色した。他の部分を段階的な一連のエタノール中で脱水し、次いで、メチルメタクリレートで包埋し、続いて、これを重合させた。各インプラントから得られた4つの切片を用いて、改変したダイヤモンドブレードミクロトーム(Leica Microsystems SP1600, Rijswijk, The Netherlands)を使用して、10〜15μmの横切片を作製した。切片をGoldnerトリクロム、Von Kossaで染色し、Nikon Eclipse 80i顕微鏡を使用して観察した。DXM 1200 C (Nikon)CCDカメラを使用して、写真を作製した。
マイクロCTを使用して、インプラント及び周囲組織の三次元画像を現像した;これらのモデルを使用して、各移植部位における骨形成を定量化した。電源電圧80kV、電流60μA、及び分解能15μmのex vivo General Electric (GE)マイクロCT(Explore LP Locus, General Electric)を使用して、X線写真を得た。電源電圧150mV、電流450μA、及び分解能45μmで、in vivoマイクロCT(General Electric)を実施した。スキャン後、断面の切片を再構築し、Microviewソフトウェアを使用して3D分析を実施した。同じ閾値を使用して、各スキャン結果を再構築し、骨と空気とを区別した。各グループの骨ミネラル量(BMC)及び骨ミネラル密度(BMD)容量を測定し、スチューデントt検定を使用して統計的に分析した。
プロテアーゼ阻害剤(10μg/mlアプロチニン(Sigma)、10μg/mlロイペプチン(Sigma)及び1mM(4−(2−アミノエチル)ベンゼンスルホニルフルオリド塩酸塩(AEBSF)(Fluka)のカクテルを含むPBS中、電動破砕機を用いて、移植の2、15、30及び60日後に取り出した皮下インプラントを氷上で破砕した。次いで、溶解物を16000rpm、4℃で20分間遠心分離した。上清を回収し、次いで、ELISA分析のために−80℃で凍結した。Smith PK et al. (1985)によって記載されているビシンコニン酸(BCA)タンパク質アッセイキット (Thermoscientific)を使用して、タンパク質の定量化を実施した。550nmで吸光度を読み込んだ。毎回の移植に関してそれぞれ、n−HAを含まないマトリックス(グループ1)及びn−HAサンプルを含む複合足場MATRI+(グループ2)が8個あった。マウスVEGF免疫アッセイキット(MMV00, Quantikine(登録商標), R&D sytems)、及びBMP−2免疫アッセイキット(DBP200, Quantikine(登録商標), R&D sytems)をそれぞれ用いて、2つの異なるインプラント製剤内に保持されたVEGF165及びBMP2の量を定量化した。
移植の15、30及び60日後に、n−HAを含まないマトリックス及びn−HAを含む複合足場MATRI+の皮下インプラントを取り出した。いかなる有機組織も含まない微粉を得るために、それらを漂白剤により室温で2時間処理し、次いで、遠心分離してペレットのみの状態を維持した。二次モノクロメーターを備えるPANalytical X’pert MPD回折計(Bragg Brentano t-t geometry)及び銅放射線(平均λ=1,5418A°)を使用して、X線回折(XRD)によって、構造特性を調査したところ、作用張力及び強度は、それぞれ40kV及び40mAであった。
すべてのデータを平均±標準偏差(SD)として表し、スチューデントt検定の標準分析を使用して分析した。p<0.05(a)又はp<0.01(b)の場合、差が有意であると考えた。
2つの異なる足場(n−HAを含まないマトリックス(グループ1)及びn−HAを含む複合足場MATRI+(グループ2))を、Balb/cマウスに15、30及び60日間移植した。両グループに関して、マイクロCT、石化の定量化(BMC及びBMD分析)、及び組織学的研究を実施した。マイクロCT(図5A)並びにBMC及びBMDの定量化(図5B)によって示されるように、n−HAを含まないマトリックスの移植により、15日目〜60日目に、いかなる石化組織も形成されなかった。対照的に、各時点(図1B)で測定したBMC(骨ミネラル量)及びBMD(骨ミネラル密度)によって定量化すると、n−HAを含むマトリックス(いかなる細胞及び成長因子も含まない)の皮下部位における移植は、高密度石化組織の形成をもたらす(図5A)。石化プロセスは、15日目に足場周辺から始まり(図1A)、移植の60日後に高密度石化組織をもたらす。
Claims (15)
- 多孔質多糖足場を調製するための方法であって、以下の工程:
i)少なくとも1つの多糖の量、架橋剤の量、及びポロゲン剤の量を含むアルカリ性水溶液を調製すること、
ii)前記溶液を、約4℃〜約80℃の温度で、前記多糖の量を架橋させるのに十分な時間置くことによって、当該溶液をヒドロゲルにトランスフォーメーションすること、
iii)前記ヒドロゲルを溶媒、好ましくは水溶液に浸すこと、及び
iv)工程iii)で得られた多孔質多糖足場を洗浄すること
を含み、
工程i)のアルカリ性水溶液が、ヒドロキシアパタイト、好ましくはナノヒドロキシアパタイトをさらに含む、方法。 - ポロゲン剤が、塩化ナトリウム、塩化カルシウム、炭酸アンモニウム、重炭酸アンモニウム、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、及び重炭酸ナトリウム、及びそれらの混合物からなる群において選択される、請求項1記載の方法。
- 多糖とポロゲン剤の重量比が、1:50〜50:1、好ましくは1:30〜30:1、好ましくは1:12〜12:1、の範囲であり、好ましくは12:14である、請求項1又は2記載の方法。
- 多孔質多糖足場を調製するための方法であって、以下の工程:
a)少なくとも1つの多糖、及び1つの架橋剤の量を含むアルカリ性水溶液を調製すること、
b)工程a)の水溶液を凍結すること、
c)工程b)の凍結溶液を昇華させること
を含み、
工程a)のアルカリ性水溶液が、ヒドロキシアパタイト、好ましくはナノヒドロキシアパタイトをさらに含み、
工程a)の溶液中で多糖の架橋が起こる前に工程b)が実施される、方法。 - 前記多糖が、デキストラン、プルラン、寒天、アルギン酸、デンプン、ヒアルロン酸、イヌリン、ヘパリン、フコイダン、キトサン、及びそれらの混合物からなる群より選択される、請求項1〜4のいずれか一項に記載の方法。
- 前記多糖が、95:5〜5:95の範囲の比、好ましくは75:25(w/w)の比のプルラン/デキストラン混合物である、請求項1〜5のいずれか一項に記載の方法。
- 前記多糖が、約70:20:10〜約50:20:30、好ましくは約70:20:10〜約50:30:20の範囲の比、最も好ましくは約73:22:5(w/w)の比のプルラン/デキストラン/フコイダン混合物である、請求項1〜5のいずれか一項に記載の方法。
- 前記架橋剤が、トリメタリン酸三ナトリウム(STMP)、オキシ塩化リン(POCl3)、エピクロロヒドリン、ホルムアルデヒド、カルボジイミド、グルタルアルデヒド、及びそれらの混合物からなる群より選択される、請求項1〜7のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ナノヒドロキシアパタイトが、0.3〜1Mに含まれる濃度、好ましくは0.6Mのリン酸溶液と、0.5〜1.5Mに含まれる濃度、好ましくは1Mの水酸化カルシウム溶液から、選択的に室温で化学沈殿することによって得られる、請求項1〜8のいずれか一項に記載の方法。
- アルカリ性多糖溶液中のナノヒドロキシアパタイトの濃度(w/v)が、0.01〜10%(w/v)、好ましくは0.1〜0.5%(w/v)、より好ましくは0.1〜0.3%(w/v)に含まれる、請求項9記載の方法。
- 請求項1〜10のいずれか一項に記載の方法によって得られる、多孔質多糖足場。
- 孔のサイズが、約1μm〜約500μm、好ましくは約10μm〜約200μmに含まれ、孔隙率が、約4%〜約75%、好ましくは約4%〜約50%である、請求項11記載の多孔質多糖足場。
- 骨の生成、好ましくは骨の修復及び/又は骨の発達に使用するための、請求項1〜10記載の方法によって得られる、多孔質多糖足場。
- 異所性石化組織形成を刺激するのに使用するための、請求項1〜10記載の方法によって得られる、多孔質多糖足場。
- 骨関連障害の処置において使用するための、請求項1〜10記載の方法によって得られる、多孔質多糖足場。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2021083699A JP2021137597A (ja) | 2010-08-31 | 2021-05-18 | ナノヒドロキシアパタイトを含む多孔質多糖足場、及び骨形成のための使用 |
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP10305932 | 2010-08-31 | ||
EP10305932.5 | 2010-08-31 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017162059A Division JP2017221738A (ja) | 2010-08-31 | 2017-08-25 | ナノヒドロキシアパタイトを含む多孔質多糖足場、及び骨形成のための使用 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2021083699A Division JP2021137597A (ja) | 2010-08-31 | 2021-05-18 | ナノヒドロキシアパタイトを含む多孔質多糖足場、及び骨形成のための使用 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2019069231A true JP2019069231A (ja) | 2019-05-09 |
Family
ID=43016619
Family Applications (5)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2013526446A Active JP6049619B2 (ja) | 2010-08-31 | 2011-08-30 | ナノヒドロキシアパタイトを含む多孔質多糖足場、及び骨形成のための使用 |
JP2016128903A Pending JP2016187585A (ja) | 2010-08-31 | 2016-06-29 | ナノヒドロキシアパタイトを含む多孔質多糖足場、及び骨形成のための使用 |
JP2017162059A Pending JP2017221738A (ja) | 2010-08-31 | 2017-08-25 | ナノヒドロキシアパタイトを含む多孔質多糖足場、及び骨形成のための使用 |
JP2018246676A Pending JP2019069231A (ja) | 2010-08-31 | 2018-12-28 | ナノヒドロキシアパタイトを含む多孔質多糖足場、及び骨形成のための使用 |
JP2021083699A Pending JP2021137597A (ja) | 2010-08-31 | 2021-05-18 | ナノヒドロキシアパタイトを含む多孔質多糖足場、及び骨形成のための使用 |
Family Applications Before (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2013526446A Active JP6049619B2 (ja) | 2010-08-31 | 2011-08-30 | ナノヒドロキシアパタイトを含む多孔質多糖足場、及び骨形成のための使用 |
JP2016128903A Pending JP2016187585A (ja) | 2010-08-31 | 2016-06-29 | ナノヒドロキシアパタイトを含む多孔質多糖足場、及び骨形成のための使用 |
JP2017162059A Pending JP2017221738A (ja) | 2010-08-31 | 2017-08-25 | ナノヒドロキシアパタイトを含む多孔質多糖足場、及び骨形成のための使用 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2021083699A Pending JP2021137597A (ja) | 2010-08-31 | 2021-05-18 | ナノヒドロキシアパタイトを含む多孔質多糖足場、及び骨形成のための使用 |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US20130224277A1 (ja) |
EP (1) | EP2611470B1 (ja) |
JP (5) | JP6049619B2 (ja) |
WO (1) | WO2012028620A1 (ja) |
Families Citing this family (26)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2203194B1 (en) * | 2007-10-11 | 2013-04-10 | Inserm (Institut National de la Santé et de la Recherche Scientifique) | Method for preparing porous scaffold for tissue engineering, cell culture and cell delivery |
KR101474855B1 (ko) * | 2007-10-11 | 2014-12-23 | 인썸 | 조직공학용 다공성 스캐폴드의 제조방법 |
BR112014007357B1 (pt) | 2011-09-30 | 2022-12-06 | Immedica Pharma Ab | Método para determinar o ajuste da dosagem de um fármaco de varredura de nitrogênio |
EP3222275B1 (en) | 2012-04-20 | 2020-06-24 | Immedica Pharma AB | Methods of therapeutic monitoring of phenylacetic acid prodrugs |
LT2922576T (lt) | 2012-11-21 | 2018-02-12 | Horizon Therapeutics, Llc | Azotą surišančių vaistų, skirtų kepenų encefalopatijos gydymui, skyrimo ir įvertinimo būdai |
WO2014099652A1 (en) * | 2012-12-18 | 2014-06-26 | University Of Massachusetts Medical School | Compositions and methods for templating three-dimensional mineralization |
CN103480038B (zh) * | 2013-09-09 | 2015-03-25 | 浙江大学 | 壳聚糖/羟基磷灰石复合水凝胶的制备方法 |
US20150086602A1 (en) * | 2013-09-25 | 2015-03-26 | Colorado State University Research Foundation | Methods for coating bone allografts with periosteum-mimetic tissue engineering scaffolds |
WO2015086640A1 (en) | 2013-12-10 | 2015-06-18 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods for adhering tissue surfaces and materials and biomedical uses thereof |
US20160082156A1 (en) * | 2014-08-28 | 2016-03-24 | Christopher G. WILSON | Osteoinductive substrates and methods of making the same |
KR101521058B1 (ko) * | 2014-12-08 | 2015-05-15 | 이노팜 주식회사 | 생체적합성 조성물 및 이의 제조방법 |
CA2977625A1 (en) | 2014-12-29 | 2016-07-07 | Bioventus, Llc | Systems and methods for improved delivery of osteoinductive molecules in bone repair |
US11577005B2 (en) * | 2015-09-14 | 2023-02-14 | École Polytechnique Fédérale De Lausanne (Epfl) | Composition for bone regeneration |
CN108601864A (zh) | 2015-10-30 | 2018-09-28 | 佰欧维恩图斯有限责任公司 | 用于增强骨修复中骨诱导分子的递送的基质 |
US9914692B2 (en) | 2016-05-25 | 2018-03-13 | Horizon Therapeutics, Llc | Procedure for the preparation of 4-phenyl butyrate and uses thereof |
EP3468626A1 (en) | 2016-06-10 | 2019-04-17 | Bioventus LLC | Protein delivery with porous metallic structure |
BR112019004332B1 (pt) | 2016-09-07 | 2022-09-06 | Luminera Derm Ltd | Géis injetáveis que compreendem ácido hialurônico reticulado e hidroxiapatita, composição e processo de fabricação dos mesmos |
TWI607032B (zh) * | 2017-01-18 | 2017-12-01 | 美樺興業股份有限公司 | 聚對二甲苯的三維多孔性結構 |
US10668040B2 (en) | 2017-09-11 | 2020-06-02 | Horizon Therapeutics, Llc | Treatment of urea cycle disorders in neonates and infants |
CN108079383A (zh) * | 2017-12-29 | 2018-05-29 | 广州军区广州总医院 | 一种光热抗肿瘤壳聚糖-纳米羟基磷灰石-碳量子点支架、其制备方法及应用 |
CN109912820B (zh) * | 2019-03-27 | 2021-10-08 | 浙江理工大学 | 一种具有梯度多孔结构的水凝胶的制备方法 |
CN110642876A (zh) * | 2019-10-10 | 2020-01-03 | 南京市口腔医院 | 半胱氨酸修饰金纳米颗粒和制备方法、应用及促进骨组织再生产品 |
WO2021249974A1 (en) * | 2020-06-09 | 2021-12-16 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Fucoidan-functionalized polysaccharide particles with t-pa for targeted thrombolytic therapy |
CN113981009B (zh) * | 2021-11-26 | 2023-06-30 | 西安理工大学 | 一种利用酵母菌诱导矿化生产羟基磷灰石骨粉的制备方法 |
CN115105464B (zh) * | 2022-08-31 | 2022-12-02 | 山东大学齐鲁医院 | 一种纳米复合水凝胶及其制备方法和应用 |
PL442451A1 (pl) * | 2022-10-05 | 2024-04-08 | Uniwersytet Medyczny W Lublinie | Nanokompozytowy granulat hydroksyapatytowo-polimerowy na bazie matrycy kurdlanowo-chitozanowej oraz sposób jego wytwarzania |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2009047346A1 (en) * | 2007-10-11 | 2009-04-16 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Method for preparing porous scaffold for tissue engineering, cell culture and cell delivery |
WO2009047347A1 (en) * | 2007-10-11 | 2009-04-16 | Inserm (Institut National De Sante Et De La Recherche Medicale) | Method for preparing porous scaffold for tissue engineering |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5413760A (en) | 1989-03-08 | 1995-05-09 | Abtox, Inc. | Plasma sterilizer and method |
US5603895B1 (en) | 1995-06-06 | 1998-11-03 | Abtox Inc | Plasma water vapor sterilizer and method |
AU2003219715A1 (en) * | 2002-02-05 | 2003-09-02 | Cambridge Scientific, Inc. | Bioresorbable osteoconductive compositions for bone regeneration |
US7700355B2 (en) * | 2005-01-07 | 2010-04-20 | Industrial Technology Research Institute | Methods of producing a porous matrix for culturing and recovering cells |
-
2011
- 2011-08-30 US US13/819,546 patent/US20130224277A1/en not_active Abandoned
- 2011-08-30 WO PCT/EP2011/064924 patent/WO2012028620A1/en active Application Filing
- 2011-08-30 JP JP2013526446A patent/JP6049619B2/ja active Active
- 2011-08-30 EP EP11752184.9A patent/EP2611470B1/en active Active
-
2015
- 2015-06-02 US US14/728,412 patent/US9757494B2/en active Active
-
2016
- 2016-06-29 JP JP2016128903A patent/JP2016187585A/ja active Pending
-
2017
- 2017-07-24 US US15/657,868 patent/US10143774B2/en active Active
- 2017-08-25 JP JP2017162059A patent/JP2017221738A/ja active Pending
-
2018
- 2018-12-28 JP JP2018246676A patent/JP2019069231A/ja active Pending
-
2021
- 2021-05-18 JP JP2021083699A patent/JP2021137597A/ja active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2009047346A1 (en) * | 2007-10-11 | 2009-04-16 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Method for preparing porous scaffold for tissue engineering, cell culture and cell delivery |
WO2009047347A1 (en) * | 2007-10-11 | 2009-04-16 | Inserm (Institut National De Sante Et De La Recherche Medicale) | Method for preparing porous scaffold for tissue engineering |
Non-Patent Citations (7)
Title |
---|
ACTA BIOMATERIALIA, vol. 5, no. 4, JPN6015021990, 2009, pages 1182 - 1197, ISSN: 0004426573 * |
BIO−MEDICAL MATERIALS AND ENGINEERING, vol. 18, no. 1, JPN6017042267, 2008, pages 25 - 33, ISSN: 0004426581 * |
BIOMATERIALS, vol. 22, no. 13, JPN6017042269, 2001, pages 1705 - 1711, ISSN: 0004426582 * |
BIOMATERIALS, vol. 25, no. 17, JPN6015021989, 2004, pages 3829 - 3835, ISSN: 0004426572 * |
INTERNATIONAL JOURNAL OF NANOMEDICINE, vol. 5, JPN6017042270, 2010, pages 331 - 335, ISSN: 0004426583 * |
JOURNAL OF BIOMEDICAL MATERIALS RESEARCH. PART A., vol. 75, no. 2, JPN6015021988, 2005, pages 275 - 282, ISSN: 0004426571 * |
JOURNAL OF BIOMEDICAL SCIENCE, vol. 16, JPN6016006954, 2009, pages 65 - 1, ISSN: 0004426570 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP2611470A1 (en) | 2013-07-10 |
US20150328365A1 (en) | 2015-11-19 |
JP2021137597A (ja) | 2021-09-16 |
JP2016187585A (ja) | 2016-11-04 |
EP2611470B1 (en) | 2017-08-23 |
JP2017221738A (ja) | 2017-12-21 |
WO2012028620A1 (en) | 2012-03-08 |
JP6049619B2 (ja) | 2016-12-21 |
US20170319741A1 (en) | 2017-11-09 |
JP2013540465A (ja) | 2013-11-07 |
US10143774B2 (en) | 2018-12-04 |
US20130224277A1 (en) | 2013-08-29 |
US9757494B2 (en) | 2017-09-12 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2019069231A (ja) | ナノヒドロキシアパタイトを含む多孔質多糖足場、及び骨形成のための使用 | |
EP1799277B1 (en) | Porous biomaterial-filler composite and a method for making the same | |
US8709452B2 (en) | Synthetic bone grafts | |
Begam et al. | Effect of bone morphogenetic protein on Zn-HAp and Zn-HAp/collagen composite: A systematic in vivo study | |
JP6158286B2 (ja) | 架橋多糖ビーズおよびその生物医学的使用 | |
Li et al. | A bone regeneration strategy via dual delivery of demineralized bone matrix powder and hypoxia-pretreated bone marrow stromal cells using an injectable self-healing hydrogel | |
Ruan et al. | Composite scaffolds loaded with bone mesenchymal stem cells promote the repair of radial bone defects in rabbit model | |
Zhang et al. | Efficacy of novel nano-hydroxyapatite/polyurethane composite scaffolds with silver phosphate particles in chronic osteomyelitis | |
WO2019048697A1 (en) | MACROPOROUS AND MICROPOROUS COMPOSITE CRYOGEL BIOMATERIAL FOR USE IN BONE REGENERATION | |
JP2018528005A (ja) | 骨再生のための組成物 | |
Chen et al. | Strontium combined with bioceramics for osteoporotic bone repair: Oral intake or as a dopant? | |
Huang et al. | In vivo bone regeneration with injectable chitosan/hydroxyapatite/collagen composites and mesenchymal stem cells | |
Dou et al. | Highly elastic and self-healing nanostructured gelatin/clay colloidal gels with osteogenic capacity for minimally invasive and customized bone regeneration | |
Zhang et al. | Incorporation of synthetic water-soluble curcumin polymeric drug within calcium phosphate cements for bone defect repairing | |
KR102422432B1 (ko) | 실리케이트-쉘화된 하이드로겔 섬유상 스케폴드 및 이의 제조 방법 | |
Wang et al. | Enhanced healing of rat calvarial critical size defect with selenium-doped lamellar biocomposites | |
Cao et al. | Biomimetic injectable and bilayered hydrogel scaffold based on collagen and chondroitin sulfate for the repair of osteochondral defects | |
WO2013077739A1 (en) | Injectable calcium phosphate cement comprising gluconodelta- lactone | |
Kim et al. | Osteogenic effect of a biodegradable BMP-2 hydrogel injected into a cannulated mg screw | |
EP3116555A1 (en) | Active agent-particle combination supporting bone regeneration | |
KR102157742B1 (ko) | 장기 유착 방지용 수화겔의 제조방법, 이를 이용한 수화겔, 필름 및 다공성 재료 | |
ES2688324T3 (es) | Composiciones de cemento bioactivo autoendurecible con quitina parcialmente desacetilada como sustituyentes de los injertos óseos | |
KR101473447B1 (ko) | 말뼈를 이용한 나노 세라믹 골시멘트 및 이의 제조 방법 | |
Menarbazari et al. | 3D-printed polycaprolactone/tricalcium silicate scaffolds modified with decellularized bone ECM-oxidized alginate for bone tissue engineering | |
Machado et al. | Evaluation of strontium-containing hydroxyapatite as bone substitute in sheep tibiae. |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190125 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20190125 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20191008 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20191223 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200305 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20200721 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20201012 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20201021 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20210119 |