JP2018510219A5 - - Google Patents
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Claims (46)
- ヒト免疫不全ウイルス(HIV)をインビトロで不活性化する方法であって、
HIV長末端反復(LTR)プロモーターの少なくともコア領域およびトランス活性型応答要素(TAR)を含む短縮型HIV LTRプロモーターと操作可能に結合している、規則的な間隔をもってクラスター化された短鎖反復回文配列(CRISPR)関連エンドヌクレアーゼをコードしている単離核酸配列を含む組成物を、
被検体に投与する工程、または哺乳動物細胞に接触させる工程を含む、方法。 - 上記単離核酸配列はさらに、HIV中の標的核酸配列に相補的な少なくとも1つのガイドRNAをコードしている、請求項1に記載の方法。
- 上記HIV中の標的核酸配列は、HIVのコード領域内または非コード領域内の配列を含む、請求項2に記載の方法。
- 上記非コード領域はHIVの長末端反復配列を含む、請求項3に記載の方法。
- 上記標的核酸配列はHIVの長末端反復内の配列を含み、
上記HIVの長末端反復内の上記配列は、上記短縮型HIV LTRプロモーターの配列を全く含まない配列であって、U3領域内、R領域内またはU5領域内の配列である配列を含む、請求項3に記載の方法。 - 上記哺乳動物細胞は潜伏感染細胞であり、
上記潜伏感染細胞は、CD4 + T細胞、マクロファージ、単球、腸関連リンパ系細胞、小膠細胞、および星状膠細胞からなる群から選択されるか、または、上記哺乳動物細胞は、(i)HIVに感染した被検体に由来する培養細胞、(ii)組織外植片、もしくは(iii)細胞株を含む、請求項1に記載の方法。 - 上記CRISPR関連エンドヌクレアーゼはCas9であり、
上記CRISPR関連エンドヌクレアーゼは、ヒト細胞における発現のために最適化されている、請求項1に記載の方法。 - 上記組成物は、トランス活性型小型RNA(tracrRNA)をコードしている配列をさらに含み、
上記tracrRNAは、ガイドRNAをコードしている配列と融合している、請求項1に記載の方法。 - 上記組成物は、核局在化シグナルをコードしている配列をさらに含む、請求項1に記載の方法。
- 上記組成物は、発現ベクターと操作可能に結合しており、
上記発現ベクターは、レンチウイルスベクター、アデノウイルスベクター、およびアデノ随伴ウイルスベクターからなる群から選択される、請求項1に記載の方法。 - 上記組成物は、上記HIV−1 LTRプロモーターのエンハンサー領域をさらに含む、請求項1に記載の方法。
- ヒト免疫不全ウイルス(HIV)長末端反復(LTR)プロモーターの少なくともコア領域およびトランス活性型応答要素(TAR)を含む短縮型HIV LTRプロモーターと操作可能に結合している、規則的な間隔をもってクラスター化された短鎖反復回文配列(CRISPR)関連エンドヌクレアーゼをコードしている配列を有する、単離核酸配列。
- 上記配列はさらに、HIVのコード領域内または非コード領域内の標的核酸配列に相補的な少なくとも1つのガイドRNAをコードしている、請求項12に記載の単離核酸配列。
- 上記非コード領域は、HIVの長末端反復、または当該HIVの上記長末端反復内の配列を含み、
上記HIVの長末端反復内の上記配列は、上記短縮型HIV LTRプロモーターの配列を全く含まない配列であって、U3領域内、R領域内またはU5領域内の配列である配列を含む、請求項13に記載の単離核酸配列。 - 上記CRISPR関連エンドヌクレアーゼはCas9であり、
上記CRISPR関連エンドヌクレアーゼは、ヒト細胞における発現のために最適化されている、請求項12に記載の単離核酸配列。 - トランス活性型小型RNA(tracrRNA)をコードしている配列をさらに含み、
上記tracrRNAは、ガイドRNAをコードしている配列と融合している、請求項12に記載の単離核酸配列。 - 核局在化シグナルをコードしている配列さらに含む、請求項12に記載の単離核酸配列。
- 上記単離核酸配列は、発現ベクターと操作可能に結合しており、
上記発現ベクターは、レンチウイルスベクター、アデノウイルスベクター、およびアデノ随伴ウイルスベクターからなる群から選択される、請求項12に記載の単離核酸配列。 - 上記HIV LTRプロモーターのエンハンサー領域をさらに含む、請求項12に記載の単離核酸配列。
- 薬学的に許容される担体、ならびに、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)長末端反復(LTR)プロモーターの少なくともコア領域およびトランス活性型応答要素(TAR)を含む短縮型HIV LTRプロモーターと操作可能に結合している、規則的な間隔をもってクラスター化された短鎖反復回文配列(CRISPR)関連エンドヌクレアーゼをコードしている核酸配列を含む、薬学的組成物。
- 上記薬学的に許容される担体は、脂質系コロイドまたは重合体系コロイドを含み、
上記コロイドは、リポソーム、ヒドロゲル、微粒子、ナノ粒子、またはブロック共重合体ミセルである、請求項20に記載の薬学的組成物。 - 上記薬学的組成物は、局所適用用に製剤されている、請求項20に記載の薬学的組成物。
- 上記薬学的組成物は、コンドーム内に収容されている、請求項20に記載の薬学的組成物。
- 上記配列はさらに、HIV中の標的核酸配列に相補的な少なくとも1つのガイドRNAをコードしている、請求項20に記載の薬学的組成物。
- 上記HIV中の標的核酸配列は、HIVのコード領域内または非コード領域内の配列を含み、
上記非コード領域は、HIVの長末端反復配列を含む、請求項24に記載の薬学的組成物。 - 上記標的核酸配列は、HIVの上記長末端反復内の配列を含み、
上記HIVの長末端反復内の上記配列は、上記短縮型HIV LTRプロモーターの配列を全く含まない配列であって、U3領域内、R領域内またはU5領域内の配列である配列を含む、請求項25に記載の薬学的組成物。 - 上記CRISPR関連エンドヌクレアーゼはCas9であり、
上記CRISPR関連エンドヌクレアーゼは、ヒト細胞における発現のために最適化されている、請求項20に記載の薬学的組成物。 - ガイドRNAをコードしている配列と融合しているトランス活性型小型RNA(tracrRNA)をコードしている核酸配列をさらに含む、請求項20に記載の薬学的組成物。
- 核局在化シグナルをコードしている配列をさらに含む、請求項20に記載の薬学的組成物。
- 上記薬学的組成物は、発現ベクターと操作可能に結合しており、
上記発現ベクターは、レンチウイルスベクター、アデノウイルスベクター、およびアデノ随伴ウイルスベクターからなる群から選択される、請求項20に記載の薬学的組成物。 - 上記配列はさらに、上記HIV−1 LTRプロモーターのエンハンサー領域をコードしている、請求項20に記載の薬学的組成物。
- ヒト免疫不全ウイルス(HIV)感染症を患う被検体を治療するため、または、HIVに感染した妊婦もしくは授乳婦からその子供への、HIV感染症の伝染リスクを低減するための薬学的組成物の製造のための使用であって、
上記薬学的組成物は、HIV長末端反復(LTR)プロモーターの少なくともコア領域およびトランス活性型応答要素(TAR)を含む短縮型HIV LTRプロモーターと操作可能に結合している、規則的な間隔をもってクラスター化された短鎖反復回文配列(CRISPR)関連エンドヌクレアーゼをコードしている核酸配列を含む。 - 上記配列はさらに、HIV中の標的核酸配列に相補的な少なくとも1つのガイドRNAをコードしている、請求項32に記載の薬学的組成物の製造のための使用。
- HIV感染症は潜伏感染症である、請求項32に記載の薬学的組成物の製造のための使用。
- 上記薬学的組成物は、局所的または非経口的に投与される、請求項32に記載の薬学的組成物の製造のための使用。
- 上記CRISPR関連エンドヌクレアーゼはCas9である、請求項32に記載の薬学的組成物の製造のための使用。
- 上記薬学的組成物は、発現ベクターと操作可能に結合しており、
上記発現ベクターは、レンチウイルスベクター、アデノウイルスベクター、およびアデノ随伴ウイルスベクターからなる群から選択される、請求項33に記載の薬学的組成物の製造のための使用。 - 上記配列はさらに、上記HIV LTRプロモーターのエンハンサー領域をコードしている、請求項33に記載の薬学的組成物の製造のための使用。
- HIV長末端反復(LTR)プロモーターの少なくともコア領域およびトランス活性型応答要素(TAR)領域を含む短縮型HIV LTRプロモーターと操作可能に結合している、規則的な間隔をもってクラスター化された短鎖反復回文配列(CRISPR)関連Cas9エンドヌクレアーゼ(CRISPR/Cas9)をコードしている核酸配列を含み、
上記CRISPR/Cas9は、ヒト細胞における発現のために最適化される、組成物。 - 上記CRISPR/Casは、最初期転写活性化因子(Tat)によって活性化され、それによって、HIV複製の初期段階に、制限的にCRISPR/Casを活性化する、最小HIV LTRプロモーターの制御下にある、請求項39に記載の組成物。
- HIV中の標的核酸配列に相補的な少なくとも1つのガイドRNAをさらに含む、請求項39に記載の組成物。
- 上記組成物は、トランス活性型小型RNA(tracrRNA)をコードしている配列をさらに含み、
上記tracrRNAは、ガイドRNAをコードしている配列と融合している、請求項39に記載の組成物。 - 上記CRISPR/Casは、ウイルスゲノムのセグメントを切除し、
上記セグメントは、ウイルスプロモーター配列および/またはウイルスコーディング配列に及んでいる、請求項39に記載の組成物。 - 配列番号1〜21の何れか1つに対して、少なくとも75%の配列類似性を有する、単離核酸配列。
- 配列番号1〜21の何れか1つ、またはその組み合わせを有する、単離核酸配列。
- (i)HIV長末端反復(LTR)プロモーターの少なくともコア領域およびトランス活性型応答要素(TAR)領域を含む短縮型HIV LTRプロモーターと操作可能に結合している、規則的な間隔をもってクラスター化された短鎖反復回文配列(CRISPR)関連エンドヌクレアーゼをコードしている配列を含む単離核酸配列、または
(ii)上記単離核酸をコードしているベクター
を含む、一定量の組成物と、
包装材料、使用方法説明を含む添付文書、無菌液、注射器、および無菌容器からなる群から選択される少なくとも1つと、を備えている、キット。
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