JP2018070450A - Plasmin inhibitor - Google Patents
Plasmin inhibitor Download PDFInfo
- Publication number
- JP2018070450A JP2018070450A JP2016207751A JP2016207751A JP2018070450A JP 2018070450 A JP2018070450 A JP 2018070450A JP 2016207751 A JP2016207751 A JP 2016207751A JP 2016207751 A JP2016207751 A JP 2016207751A JP 2018070450 A JP2018070450 A JP 2018070450A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- plasmin
- extract
- mica
- extraction
- ethanol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Abstract
Description
本発明は、プラスミン抑制剤に関する。より詳細には、本発明は、プラスミンの産生を抑えるか、または、プラスミンの活性を阻害することにより、シワ、たるみ、炎症等を抑制するための、プラスミン抑制剤に関する。 The present invention relates to a plasmin inhibitor. More specifically, the present invention relates to a plasmin inhibitor for suppressing wrinkles, sagging, inflammation and the like by suppressing plasmin production or inhibiting plasmin activity.
加齢や光老化で生じる肌のシワやたるみをもたらす主な原因は、真皮中のコラーゲン分解であると考えられている。コラーゲン分解は、Matrix Metalloproteinases（ＭＭＰｓ）という酵素群の活性が主たる要因として起こる。一方、ＭＭＰｓの活性化には、プラスミン等のセリンプロテアーゼ類が必要である。このように、コラーゲン分解を制御する因子は、ＭＭＰｓやプラスミン等、多岐にわたっている。また、プラスミンは表皮や多様な組織でも発現しており、その活性は皮膚に限らず炎症反応においても深く関わることが知られている。 It is believed that the main cause of skin wrinkles and sagging caused by aging and photoaging is collagen degradation in the dermis. Collagen degradation occurs mainly due to the activity of an enzyme group called Matrix Metalloproteinases (MMPs). On the other hand, activation of MMPs requires serine proteases such as plasmin. Thus, there are a wide variety of factors that control collagen degradation, such as MMPs and plasmin. Plasmin is also expressed in the epidermis and various tissues, and its activity is known to be deeply involved in inflammatory reactions as well as skin.
このようなプラスミンの産生を抑制するためのプラスミン抑制剤として、特許文献１に記載の皮膚外用剤が知られている。 As a plasmin inhibitor for suppressing the production of such plasmin, a skin external preparation described in Patent Document 1 is known.
特許文献１に記載の皮膚外用剤は、オトギリソウ、ノバラ、カリン、ボタン、イチヤクソウ、キイチゴ、シモツケソウ、ジュウヤクの抽出物より調製され得る。しかしながら、これら以外に、プラスミンの産生を特異的に抑制し得る原料素材は、知られていない。 The external preparation for skin described in Patent Document 1 can be prepared from extracts of hypericum, wild rose, quince, button, yew, raspberry, citrus, and jujuk. However, other than these, no raw material that can specifically suppress the production of plasmin is known.
本発明は、このような従来の課題に鑑みてなされたものであり、シワ、たるみ、炎症等を抑制するための、プラスミン抑制作用を示す新規の原料素材を含むプラスミン抑制剤を提供することを目的とする。 The present invention has been made in view of such conventional problems, and provides a plasmin inhibitor containing a novel raw material that exhibits a plasmin inhibitory action for suppressing wrinkles, sagging, inflammation, and the like. Objective.
上記課題を解決する本発明のプラスミン抑制剤には、以下の構成が主に含まれる。 The plasmin inhibitor of the present invention that solves the above problems mainly includes the following constitution.
（１）マイマイカ、および、シモン芋からなる群から選択される少なくとも１種の原料素材の抽出物を含む、プラスミン抑制剤。 (1) A plasmin inhibitor comprising an extract of at least one raw material selected from the group consisting of mica and Simon mochi.
このような構成によれば、本発明のプラスミン抑制剤は、上記原料素材が含まれていることにより、プラスミンの産生を抑制し得る。また、本発明のプラスミン抑制剤は、上記原料素材が含まれていることにより、プラスミンの活性を阻害し得る。そのため、このようなプラスミン抑制剤が用いられることにより、シワ、たるみ、炎症等の抑制効果が期待される。なお、本発明において、プラスミン抑制作用は、プラスミンの産生が抑制されることによって達成されてもよく、プラスミンの活性が阻害されることによって達成されてもよく、その両方によって達成されてもよい。 According to such a structure, the plasmin inhibitor of this invention can suppress the production of plasmin by including the said raw material. Moreover, the plasmin inhibitor of this invention can inhibit the activity of plasmin by including the said raw material. Therefore, the use of such a plasmin inhibitor is expected to suppress wrinkles, sagging, inflammation and the like. In the present invention, the plasmin inhibitory action may be achieved by suppressing the production of plasmin, may be achieved by inhibiting the activity of plasmin, or may be achieved by both.
本発明によれば、シワ、たるみ、炎症等を抑制するための、プラスミン抑制作用を示す新規の原料素材を含むプラスミン抑制剤を提供することができる。 ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, the plasmin inhibitor containing the novel raw material which shows a plasmin inhibitory action for suppressing a wrinkle, sagging, inflammation, etc. can be provided.
プラスミンは、前駆体であるプラスミノーゲンがプラスミノーゲンアクチベーターによって活性化されたプロテアーゼの一種である。プラスミンは、血液凝固系において血栓の形成を抑制する重要な働きを示す。しかしながら、プラスミンは、過剰に産生されると、組織や細胞のタンパクを非特異的に分解し、毛細血管の拡張や血管浸透性の亢進といった炎症を引き起こし、生体に悪影響を及ぼすことが知られている。一方、プラスミンは、皮膚において炎症に関与し、皮膚のバリア機能の低下、メラニン産生亢進による皮膚の黒化、ＭＭＰｓ活性化から真皮層の分解によるシワ、たるみの形成といった老化に関与することが知られている。本発明は、このようなプラスミンの産生を抑制するためのプラスミン抑制剤である。本発明の一実施形態のプラスミン抑制剤は、マイマイカ、および、シモン芋からなる群から選択される少なくとも１種の原料素材の抽出物を含む。 Plasmin is a kind of protease in which the precursor plasminogen is activated by a plasminogen activator. Plasmin plays an important role in inhibiting thrombus formation in the blood clotting system. However, when plasmin is produced in excess, it is known to cause non-specific degradation of tissue and cell proteins, causing inflammation such as dilation of capillaries and increased vascular permeability, and adversely affects the body. Yes. On the other hand, plasmin is involved in inflammation in the skin, and is known to be involved in aging such as skin barrier function reduction, skin blackening due to increased melanin production, wrinkles due to decomposition of the dermis layer from formation of MMPs, and sagging formation. It has been. The present invention is a plasmin inhibitor for suppressing the production of such plasmin. The plasmin inhibitor of one embodiment of the present invention includes an extract of at least one raw material selected from the group consisting of mica and simmon lees.
抽出物を得る際の抽出溶媒の種類は特に限定されない。抽出物は、極性溶媒として、水、低級アルコール、多価アルコール、高級アルコール等の有機溶媒を用いた抽出物であってもよい。また、抽出物は、非極性溶媒として、石油エーテル、或は炭素数４〜８の脂肪族炭化水素、炭素数１〜２の脂肪族炭化水素のハロゲン化物、炭素数６〜７の芳香族炭化水素等を用いた抽出物であってもよい。これらのうち、抽出物は、極性溶媒で抽出した抽出物であることが好ましく、水、または水とメタノール、エタノール、１，３−ブチレングリコール、イソプロパノール等の低級アルコールとの混合物を用いた抽出物であることがより好ましい。中でも、抽出物は、エタノール抽出物であることが好ましい。エタノールの濃度は特に限定されない。一例を挙げると、エタノールの濃度は、５０（ｖ／ｖ）％以上であることが好ましく、１００（ｖ／ｖ）％（無水エタノール）であってもよい。エタノール濃度が５０（ｖ／ｖ）％以上であるエタノール溶液を用いることにより、抽出時に腐敗を生じにくく、安定して抽出することができる。 The kind of extraction solvent at the time of obtaining an extract is not specifically limited. The extract may be an extract using an organic solvent such as water, a lower alcohol, a polyhydric alcohol, or a higher alcohol as a polar solvent. In addition, the extract is a non-polar solvent such as petroleum ether, aliphatic hydrocarbons having 4 to 8 carbon atoms, halides of aliphatic hydrocarbons having 1 to 2 carbon atoms, aromatic carbonized carbon atoms having 6 to 7 carbon atoms. An extract using hydrogen or the like may be used. Among these, the extract is preferably an extract extracted with a polar solvent, and is an extract using water or a mixture of water and a lower alcohol such as methanol, ethanol, 1,3-butylene glycol, or isopropanol. It is more preferable that Especially, it is preferable that an extract is an ethanol extract. The concentration of ethanol is not particularly limited. For example, the concentration of ethanol is preferably 50 (v / v)% or more, and may be 100 (v / v)% (anhydrous ethanol). By using an ethanol solution having an ethanol concentration of 50 (v / v)% or more, it is difficult to cause spoilage during extraction and can be stably extracted.
また、上記抽出時における抽出溶媒の量は特に限定されない。一例を挙げると、抽出溶媒の量は、原料素材１００質量部に対して、１００質量部以上であることが好ましく、５００質量部以上であることがより好ましい。また、抽出溶媒の量は、１０００００質量部以下であることが好ましく、１００００質量部以下であることがより好ましい。抽出溶媒の量が１００質量部未満である場合、抽出効率が悪くなる傾向がある。一方、抽出溶媒の量が１０００００質量部を超える場合、抽出効率の向上が望めない傾向があり、かつ、濃縮および精製に時間がかかり、製造効率が低下する傾向がある。 Moreover, the amount of the extraction solvent at the time of the extraction is not particularly limited. For example, the amount of the extraction solvent is preferably 100 parts by mass or more and more preferably 500 parts by mass or more with respect to 100 parts by mass of the raw material. The amount of the extraction solvent is preferably 100,000 parts by mass or less, and more preferably 10,000 parts by mass or less. When the amount of the extraction solvent is less than 100 parts by mass, the extraction efficiency tends to deteriorate. On the other hand, when the amount of the extraction solvent exceeds 100000 parts by mass, there is a tendency that improvement in extraction efficiency cannot be expected, and it takes time for concentration and purification, and there is a tendency that production efficiency is lowered.
なお、抽出時間および抽出温度は特に限定されない。抽出は、低温抽出であってもよく、室温〜加温抽出であってもよい。抽出時間は、数分から２週間程度であってもよい。また、抽出操作は、２回以上であってもよい。 In addition, extraction time and extraction temperature are not specifically limited. The extraction may be low temperature extraction or room temperature to warm extraction. The extraction time may be from a few minutes to about two weeks. The extraction operation may be performed twice or more.
得られた抽出物は、適宜、不純物の除去や脱臭、脱色、濃縮などの精製操作が行われてもよい。精製操作は、ろ過、ゲルろ過、遠心分離、クロマトグラフィ、蒸留、分配法等が例示される。 The obtained extract may be appropriately subjected to purification operations such as removal of impurities, deodorization, decolorization, and concentration. Examples of the purification operation include filtration, gel filtration, centrifugation, chromatography, distillation, distribution method and the like.
また、得られた抽出物はそのまま用いられてもよく、希釈液としたり、濃縮エキスとして用いられてもよい。また、抽出物は、凍結乾燥等により乾燥粉末とされてもよく、ペースト状に調製されてもよい。これら乾燥粉末等は、上記原料素材の抽出を介して得られたものであることから、本実施形態では、これら乾燥粉末等も、本実施形態でいう抽出物に含む。乾燥粉末は、水または上記低級アルコール、多価アルコールにあらかじめ溶解して用いられるか、水を含む組成物中で可溶化して用いられてもよい。なお、本実施形態のプラスミン抑制剤は、取扱いが容易である点から、乾燥粉末とされることが好ましい。 Moreover, the obtained extract may be used as it is, may be used as a diluted solution, or may be used as a concentrated extract. The extract may be made into a dry powder by freeze drying or the like, or may be prepared in a paste form. Since these dry powders and the like are obtained through extraction of the raw material, in the present embodiment, these dry powders and the like are also included in the extract referred to in the present embodiment. The dry powder may be used by dissolving in water or the above lower alcohol or polyhydric alcohol in advance, or may be used after being solubilized in a composition containing water. In addition, it is preferable that the plasmin inhibitor of this embodiment is made into a dry powder from the point that handling is easy.
得られた乾燥粉末は、プラスミン産生を抑制するか、または、プラスミンの活性を阻害するための活性成分を含んでいる。これら乾燥粉末がプラスミン産生を抑制するための活性成分を含んでいるかどうかは、たとえばコラーゲンゲル包埋培養法により、ヒト皮膚線維芽細胞（ＮＨＤＦ）をコラーゲンゲル中に分散、播種し、次いで、上記乾燥粉末を含む適宜の溶媒（たとえば無血清ダルベッコ変性イーグル培地（ＤＭＥＭ））を添加してプラスミンを産生させる場合において、プラスミン活性キット（ＡＮＡ ＳＰＥＣ ＡＳ−７２１２４）を用いて培地中に分泌されたプラスミンを定量することによって確認することができる。 The obtained dry powder contains an active ingredient for suppressing plasmin production or inhibiting the activity of plasmin. Whether these dry powders contain an active ingredient for suppressing plasmin production is determined by, for example, dispersing and seeding human skin fibroblasts (NHDF) in a collagen gel by a collagen gel embedding culture method, Plasmin secreted into the medium using the plasmin activity kit (ANA SPEC AS-72124) in the case where plasmin is produced by adding an appropriate solvent (eg, serum-free Dulbecco's modified Eagle medium (DMEM)) containing the dry powder Can be confirmed by quantitative determination.
・マイマイカ
マイマイカ（ハマナス）は、バラ科バラ属の落葉低木である。本実施形態で使用されるマイマイカの部位は特に限定されない。マイマイカは、葉、茎、幹、材、幼芽、花、種子、根等の一部位または複数部位が用いられ得る。茶葉など食用として利用され、食経験というある一定の安全性が担保されているという観点から、マイマイカの花が好適に使用される。この場合、マイマイカの花は、たとえば、抽出溶媒として５０（ｖ／ｖ）％エタノールを用いて抽出され、適宜精製された後に凍結乾燥されることにより、所定濃度の活性成分を含むマイマイカ乾燥粉末（マイマイカ抽出物）が得られる。
・ My mica My mica (Hananas) is a deciduous shrub belonging to the genus Rosaceae. The part of mica used in the present embodiment is not particularly limited. Mica can be used in one or more parts such as leaves, stems, stems, timber, buds, flowers, seeds, roots and the like. Mica flowers are preferably used from the viewpoint of being used for food such as tea leaves and ensuring a certain safety of eating experience. In this case, the mica flowers are extracted using, for example, 50 (v / v)% ethanol as an extraction solvent, and after being appropriately purified, lyophilized to obtain a mica dry powder containing an active ingredient at a predetermined concentration ( Mica extract) is obtained.
マイマイカ抽出物の使用量は、所望される用途や、所望されるプラスミン抑制効果の強弱等により適宜調整される。また、マイマイカ抽出物の使用量は、抽出溶媒の種類によっても最適使用量が異なる。一例を挙げると、５０（ｖ／ｖ）％エタノールによって抽出されて得られたマイマイカ乾燥粉末は、適宜の溶媒（たとえば無血清ＤＭＥＭ培地）を添加される場合において、１５μｇ／ｍＬ以上となるよう用いられることが好ましく、３０μｇ／ｍＬ以上となるよう用いられることがより好ましい。また、マイマイカ乾燥粉末は、１５０μｇ／ｍＬ以下となるよう用いられることが好ましい。 The amount of use of the mica extract is appropriately adjusted depending on the desired use, the strength of the desired plasmin inhibitory effect, and the like. Further, the amount of mica extract used varies depending on the type of extraction solvent. As an example, dry mica powder obtained by extraction with 50 (v / v)% ethanol is used so as to be 15 μg / mL or more when an appropriate solvent (for example, serum-free DMEM medium) is added. It is preferable to be used so as to be 30 μg / mL or more. Moreover, it is preferable that mica dry powder is used so that it may become 150 microgram / mL or less.
・シモン芋
シモン芋は、サツマ芋に近似するブラジル原産のヒルガオ科の植物であり、白甘藷、白サツマ芋、カイアポ芋等とも呼ばれる。シモン芋は、葉、茎、幹、材、幼芽、花、種子、根等の一部位または複数部位が用いられ得る。茶葉など食用として利用され、食経験というある一定の安全性が担保されているという観点から、シモン芋の葉が好適に使用される。この場合、シモン芋の葉は、たとえば、抽出溶媒として５０（ｖ／ｖ）％エタノールを用いて抽出され、適宜精製された後に凍結乾燥されることにより、所定濃度の活性成分を含むシモン芋乾燥粉末（シモン芋抽出物）が得られる。
・ Simon 芋 Simmon 芋 is a convolvulaceae plant native to Brazil that resembles Satsuma 芋, and is also called white sweet potato, white Satsuma 芋, or Kaiapo 芋. One part or a plurality of parts such as leaves, stems, stems, timbers, buds, flowers, seeds, and roots can be used for the simmon cocoons. From the viewpoint of being used as an edible material such as tea leaves and ensuring a certain level of safety of eating experience, Simon cocoon leaves are preferably used. In this case, for example, the leaves of Simon persimmon are extracted using, for example, 50 (v / v)% ethanol as an extraction solvent, appropriately purified, and then freeze-dried, thereby drying Simon persimmon containing an active ingredient at a predetermined concentration. A powder (simmon cocoon extract) is obtained.
シモン芋抽出物の使用量は、所望される用途や、所望されるプラスミン抑制効果の強弱等により適宜調整される。また、シモン芋抽出物の使用量は、抽出溶媒の種類によっても最適使用量が異なる。一例を挙げると、５０（ｖ／ｖ）％エタノールによって抽出されて得られたシモン芋乾燥粉末は、適宜の溶媒（たとえば無血清ＤＭＥＭ培地）を添加される場合において、１００μｇ／ｍＬ以上となるよう用いられることが好ましく、２００μｇ／ｍＬ以上となるよう用いられることがより好ましい。また、シモン芋乾燥粉末は、１８００μｇ／ｍＬ以下となるよう用いられることが好ましい。 The usage-amount of a simmon koji extract is suitably adjusted with the desired use, the strength of the desired plasmin suppression effect, etc. In addition, the amount of the shimon koji extract used varies depending on the type of extraction solvent. For example, when dried with an appropriate solvent (for example, serum-free DMEM medium), the dried Simmon cake obtained by extraction with 50 (v / v)% ethanol is 100 μg / mL or more. It is preferably used, and more preferably 200 μg / mL or more. Moreover, it is preferable to use soybean koji dry powder so that it may become 1800 microgram / mL or less.
以上、本実施形態のプラスミン抑制剤は、上記原料素材が含まれていることにより、プラスミンの産生を抑制し得る。また、本実施形態のプラスミン抑制剤は、上記原料素材が含まれていることにより、プラスミンの活性を阻害し得る。そのため、このようなプラスミン抑制剤が用いられることにより、シワ、たるみ、炎症等の抑制効果が期待される。 As mentioned above, the plasmin inhibitor of this embodiment can suppress the production of plasmin by containing the said raw material. Moreover, the plasmin inhibitor of this embodiment can inhibit the activity of plasmin by including the said raw material. Therefore, the use of such a plasmin inhibitor is expected to suppress wrinkles, sagging, inflammation and the like.
また、本実施形態のプラスミン抑制剤は、適宜、公知の添加剤等が配合されてもよい。一例を挙げると、プラスミン抑制剤は、外用剤基剤に通常用いられる油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、低級アルコール類、高級アルコール類、多価アルコール類、エステル類、水溶性高分子、界面活性剤、保湿剤、抗炎症剤、紫外線吸収剤、防腐剤、防カビ剤、香料、顔料、賦形剤、酸化防止剤、美容成分、化粧料安定化剤等が配合されてもよい。より具体的には、本実施形態のプラスミン抑制剤は、たとえば、水、油脂類や界面活性剤といった添加剤を配合することにより、化粧料や皮膚外用剤の用途として利用し得る。 Moreover, a well-known additive etc. may be mix | blended with the plasmin inhibitor of this embodiment suitably. As an example, plasmin inhibitors are oils, waxes, hydrocarbons, fatty acids, lower alcohols, higher alcohols, polyhydric alcohols, esters, esters, Even if molecules, surfactants, moisturizers, anti-inflammatory agents, ultraviolet absorbers, antiseptics, antifungal agents, fragrances, pigments, excipients, antioxidants, cosmetic ingredients, cosmetic stabilizers, etc. Good. More specifically, the plasmin inhibitor of the present embodiment can be used as an application for cosmetics and skin external preparations by blending additives such as water, fats and oils, and surfactants.
以下、実施例により本発明をより具体的に説明する。本発明は、これら実施例に何ら限定されない。 Hereinafter, the present invention will be described more specifically with reference to examples. The present invention is not limited to these examples.
＜マイマイカ５０（ｖ／ｖ）％エタノール抽出物（マイマイカ乾燥粉末）の調製＞
収穫したマイマイカの花１ｋｇを、２０Ｌの５０（ｖ／ｖ）％エタノールに浸漬し、４℃で１週間保持し、ろ過し、マイマイカ５０（ｖ／ｖ）％エタノール抽出原液を得た。次いで、溶媒留去し、凍結乾燥した。乾燥粉末として、４００ｇのマイマイカ乾燥粉末を得た。
<Preparation of Mica 50 (v / v)% ethanol extract (Mica dry powder)>
1 kg of harvested mica flowers were immersed in 20 L of 50 (v / v)% ethanol, kept at 4 ° C. for 1 week, and filtered to obtain a mica 50 (v / v)% ethanol extraction stock solution. The solvent was then distilled off and lyophilized. As a dry powder, 400 g of mica dry powder was obtained.
＜シモン芋５０（ｖ／ｖ）％エタノール抽出物の調製（シモン芋乾燥粉末）＞
収穫したシモン芋の葉１ｋｇを、２０Ｌの５０（ｖ／ｖ）％エタノールに浸漬し、４℃で１週間保持し、ろ過し、シモン芋５０（ｖ／ｖ）％エタノール抽出原液を得た。次いで、溶媒留去し、凍結乾燥した。乾燥粉末として、４８ｇのシモン芋乾燥粉末を得た。
<Preparation of Simon Koji 50 (v / v)% ethanol extract (Simon Koji dry powder)>
1 kg of harvested leaves of Simon persimmon were soaked in 20 L of 50 (v / v)% ethanol, kept at 4 ° C. for 1 week, and filtered to obtain a Simon persimmon 50 (v / v)% ethanol extraction stock solution. The solvent was then distilled off and lyophilized. As a dry powder, 48 g of Simmon koji dry powder was obtained.
（実施例１）
実施例１は、プラスミンを発現することが既知であるコラーゲンゲル包埋培養法に沿って実施した。まず、９６ウェルプレートにヒト皮膚線維芽細胞（ＮＨＤＦ）を２．５×１０3ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌとなるように、コラーゲンゲル中に分散、播種した。２４時間後に、ゲルをウェルから切り離し、マイマイカ乾燥粉末が１５μｇ／ｍＬとなるよう溶解させた無血清ダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）を添加した（プラスミン抑制剤もしくは活性抑制剤に相当）。さらに２４時間後に培養上清を回収し、培養上清中のプラスミン活性を測定した。プラスミン活性測定はプラスミン活性キット（ＡＮＡ ＳＰＥＣ社製 ＡＳ−７２１２４）を用い、基質溶液と培養上清を１：１の割合で混合した。混合後、初期値（Ｅｘ／Ｅｍ＝３８０／５００）を測定し、３７℃で６０分間反応させた後、再度Ｅｘ／Ｅｍ＝３８０／５００の蛍光強度を測定した。６０分後の蛍光強度と初期値の差をウェルごとに算出し、得られた値を元に、プラスミン抑制率（プラスミン阻害率）を算出した。なお、細胞増殖率（％）は別途単層培養細胞を用いて各ウェルの細胞からＢＣＡ法にてタンパク量をし、コントロールに対する相対タンパク量より算出した。なお、細胞増殖率は、約１００％以上であれば、細胞毒性がないと判断し得る。結果を表１に示す。
Example 1
Example 1 was performed according to a collagen gel embedded culture method that is known to express plasmin. First, human skin fibroblasts (NHDF) were dispersed and seeded in a collagen gel so as to be 2.5 × 10 3 cells / well in a 96-well plate. After 24 hours, the gel was separated from the wells, and serum-free Dulbecco's modified Eagle medium (DMEM) dissolved so that the mica dry powder was 15 μg / mL was added (corresponding to a plasmin inhibitor or activity inhibitor). The culture supernatant was further collected after 24 hours, and the plasmin activity in the culture supernatant was measured. The plasmin activity was measured using a plasmin activity kit (AS-72124 manufactured by ANA SPEC), and the substrate solution and the culture supernatant were mixed at a ratio of 1: 1. After mixing, the initial value (Ex / Em = 380/500) was measured, and after reacting at 37 ° C. for 60 minutes, the fluorescence intensity of Ex / Em = 380/500 was measured again. The difference between the fluorescence intensity after 60 minutes and the initial value was calculated for each well, and the plasmin inhibition rate (plasmin inhibition rate) was calculated based on the obtained value. The cell growth rate (%) was calculated from the amount of protein relative to the control by separately measuring the amount of protein from the cells in each well using the monolayer cultured cells by the BCA method. If the cell growth rate is about 100% or more, it can be determined that there is no cytotoxicity. The results are shown in Table 1.
（実施例２〜４）
使用した乾燥粉末の種類または使用量を表１に記載のものに変更した以外は、実施例１と同様の方法により、プラスミン活性を測定し、細胞増殖率およびプラスミン阻害率を算出した。結果を表１に示す。
(Examples 2 to 4)
The plasmin activity was measured and the cell growth rate and plasmin inhibition rate were calculated by the same method as in Example 1 except that the type or amount of dry powder used was changed to that shown in Table 1. The results are shown in Table 1.
表１に示されるように、実施例１〜４で調製されたいずれのプラスミン抑制剤も、細胞毒性はなく、かつ、優れたプラスミン阻害率を示した。中でも、シモン芋の５０（ｖ／ｖ）％エタノール抽出物を用いた実施例３〜４では、優れたプラスミン阻害率を示した。なお、実施例２のマイマイカの５０（ｖ／ｖ）％エタノール抽出物（３０μｇ／ｍＬ）のプラスミン阻害率（１５．３％）と同程度のプラスミン阻害率を達成するために必要なトラネキサム酸の量は、２．５ｍＭ（３９３μｇ／ｍＬ）である。すなわち、実施例２は、トラネキサム酸と比較して、約１３分の１の量で同程度のプラスミン抑制作用を示すことが分かった。 As shown in Table 1, none of the plasmin inhibitors prepared in Examples 1 to 4 showed cytotoxicity and an excellent plasmin inhibition rate. Among them, Examples 3 to 4 using 50% (v / v)% ethanol extract of Simon moth showed an excellent plasmin inhibition rate. It should be noted that the tranexamic acid necessary to achieve a plasmin inhibition rate comparable to the plasmin inhibition rate (15.3%) of the 50 (v / v)% ethanol extract (30 μg / mL) of the mica of Example 2. The amount is 2.5 mM (393 μg / mL). In other words, it was found that Example 2 showed the same level of plasmin inhibitory effect in an amount of about 1/13 compared with tranexamic acid.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2016207751A JP2018070450A (en) | 2016-10-24 | 2016-10-24 | Plasmin inhibitor |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2016207751A JP2018070450A (en) | 2016-10-24 | 2016-10-24 | Plasmin inhibitor |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2018070450A true JP2018070450A (en) | 2018-05-10 |
Family
ID=62113672
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2016207751A Pending JP2018070450A (en) | 2016-10-24 | 2016-10-24 | Plasmin inhibitor |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2018070450A (en) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0665042A (en) * | 1992-08-17 | 1994-03-08 | Kose Corp | Skin external preparation |
| JP2002128651A (en) * | 2000-10-25 | 2002-05-09 | Kose Corp | Photoaging inhibitor and skin care preparation characterized by comprising the same |
| JP2004189663A (en) * | 2002-12-11 | 2004-07-08 | Ichimaru Pharcos Co Ltd | Maillard reaction inhibitor |
| JP2008303147A (en) * | 2007-06-05 | 2008-12-18 | Noevir Co Ltd | External preparation for skin |
| JP2013213015A (en) * | 2012-04-04 | 2013-10-17 | Morishita Jintan Co Ltd | Tie2 activating agent |
| KR20160085149A (en) * | 2015-01-07 | 2016-07-15 | 대구한의대학교산학협력단 | Composition comprising the extract of Rosa rugosa Thunb for preventing or treating liver disease |
-
2016
- 2016-10-24 JP JP2016207751A patent/JP2018070450A/en active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0665042A (en) * | 1992-08-17 | 1994-03-08 | Kose Corp | Skin external preparation |
| JP2002128651A (en) * | 2000-10-25 | 2002-05-09 | Kose Corp | Photoaging inhibitor and skin care preparation characterized by comprising the same |
| JP2004189663A (en) * | 2002-12-11 | 2004-07-08 | Ichimaru Pharcos Co Ltd | Maillard reaction inhibitor |
| JP2008303147A (en) * | 2007-06-05 | 2008-12-18 | Noevir Co Ltd | External preparation for skin |
| JP2013213015A (en) * | 2012-04-04 | 2013-10-17 | Morishita Jintan Co Ltd | Tie2 activating agent |
| KR20160085149A (en) * | 2015-01-07 | 2016-07-15 | 대구한의대학교산학협력단 | Composition comprising the extract of Rosa rugosa Thunb for preventing or treating liver disease |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 世界有用植物事典, vol. 初版第１刷, JPN6009049062, 1989, pages 925, ISSN: 0003778686 * |
| 民間薬用植物誌, vol. 第３版, JPN6009049065, 1923, pages 494, ISSN: 0003778687 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5322948B2 (en) | Cosmetic composition for preventing photoaging and improving skin wrinkles containing Oyama lotus extract | |
| KR101393007B1 (en) | Cosmetic Composition for Skin-aging Protection and Wrinkle Improvement Comprising the Extract of Nephelium lappaceum and Litchi chinensis sonn as Active Ingredient | |
| KR101885195B1 (en) | Cosmetic Composition with Fermentative Extract of Osmanthus fragrans | |
| KR101619571B1 (en) | Anti-aging Composition for Skin External Application Comprising Magnolia Placenta Culture Extracts | |
| KR101872357B1 (en) | Cosmetic composition for enhancing skin elasticity containing extract of rhamnus yoshinoi | |
| KR20170055172A (en) | Cosmetic Composition Comprising Extracts of Centipeda minima | |
| KR101805872B1 (en) | Cosmetic composition for improving skin wrinkle containing plant extract removed chlorophyll | |
| KR102261149B1 (en) | Compositions containing Gastrodia extracts | |
| KR101883310B1 (en) | Cosmetic composition for improving skin wrinkle containing extract of rhamnus yoshinoi | |
| KR101883307B1 (en) | Cosmetic composition for improving skin wrinkle comprising extracts of hibiscus hamabo leaf as active ingredient | |
| JP2018070450A (en) | Plasmin inhibitor | |
| JP6290353B1 (en) | Prostaglandin E2 production inhibitor | |
| KR101776692B1 (en) | Composiitn for skin whitening comprising extract of Osmanthus heterophylla | |
| KR101619710B1 (en) | Anti-aging Composition for Skin External Application Comprising Liriodendron tulipifera Placenta Culture Extracts | |
| KR101871577B1 (en) | Anti-aging cosmetic composition containing alpine area plant-derived rosemary oil | |
| JP2022050090A (en) | Collagen type i production promoter | |
| KR20140125234A (en) | Composition for Improving Skin Condition Comprising Extract from Plum As Active Ingredient | |
| KR101827531B1 (en) | COSMETIC COMPOSITION FOR SKIN WHITENING CONTAINING Artemisia japonica Thunb. EXTRACTS AND PREPARING METHOD OF THE SAME | |
| KR20200004230A (en) | Cosmetic Composition Containing Vitamin C Stabilized by Moringa Seed Bark | |
| KR102371164B1 (en) | Skin external composition for anti-aging containing germinated Glycine gracilis extract | |
| JP6981675B2 (en) | External scalp agent and method to control active oxygen scavenging action and carbonyl protein production inhibitory action | |
| KR102461962B1 (en) | Cosmetic composition for wrinkles prevention or improvement with seaberry extraction | |
| KR101479244B1 (en) | Cosmetic composition comprising the extract of Lagerstroemia indica as active ingredient | |
| KR101978335B1 (en) | Fragrance composition comprising fermented product by yeast from flowers and manufacturing method thereof | |
| KR101479245B1 (en) | Cosmetic composition comprising the extract of Lagerstroemia indica as active ingredient |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20180417 |