KR102371164B1 - Skin external composition for anti-aging containing germinated Glycine gracilis extract - Google Patents

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Abstract

본 발명은 발아 납작콩 추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화용 피부 외용제 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 계피산(cinnamic acid)이 첨가된 배양액에서 발아된 납작콩 추출물을 함유함으로써 우수한 항노화 효과를 갖는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 피부 외용제 조성물을 사용하는 경우, 콜라겐을 합성하는 진피섬유아세포의 진피섬유아세포성장인자 발현이 증가하고, 콜라겐 분해효소(collagenase)의 발현 및 활성이 억제됨으로써 피부 탄력이 강화되고 주름이 개선되는 등의 우수한 항노화 효과가 있다.
The present invention relates to an anti-aging composition for external application for skin containing a germinated flat bean extract as an active ingredient, and more specifically, it contains a flat bean extract germinated in a culture solution to which cinnamic acid is added, thereby having an excellent anti-aging effect. It relates to a composition for external application to the skin.
When the composition for external application for skin according to the present invention is used, the expression of dermal fibroblast growth factor in dermal fibroblasts synthesizing collagen is increased, and the expression and activity of collagenase is suppressed, thereby strengthening skin elasticity and reducing wrinkles It has excellent anti-aging effects such as improvement.

Description

발아 납작콩 추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화용 피부 외용제 조성물{Skin external composition for anti-aging containing germinated Glycine gracilis extract}Skin external composition for anti-aging containing germinated flat bean extract as an active ingredient {Skin external composition for anti-aging containing germinated Glycine gracilis extract}

본 발명은 발아 납작콩 추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화용 피부 외용제 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 계피산(cinnamic acid)이 첨가된 배양액에서 발아된 납작콩 추출물을 함유함으로써 우수한 항노화 효과를 갖는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to an anti-aging composition for external application for skin containing a germinated flat bean extract as an active ingredient, and more specifically, it contains a flat bean extract germinated in a culture solution to which cinnamic acid is added, thereby having an excellent anti-aging effect. It relates to a composition for external application to the skin.

피부는 인체의 일차 방어막으로 체내의 제 기관을 온도 및 습도 변화와 자외선, 공해물질 등 외부 환경의 자극으로부터 보호해 주며 체온조절 등의 생체 항상성 유지에도 중요한 역할을 하고 있다. 그러나 외부로부터 받는 과도한 물리적·화학적 자극 및 스트레스, 영양결핍 등은 피부의 정상적인 기능을 저하시키고, 탄력 손실, 각질화, 주름생성 등의 피부 노화 현상을 촉진시키게 된다.The skin is the human body's primary defense barrier, and it protects various organs from external environmental stimuli such as temperature and humidity changes, ultraviolet rays and pollutants, and plays an important role in maintaining body homeostasis such as body temperature regulation. However, excessive physical and chemical stimuli, stress, and nutritional deficiencies from the outside reduce the normal function of the skin and accelerate skin aging such as loss of elasticity, keratinization, and wrinkle formation.

이러한 현상을 방지하고 보다 건강하고 탄력 있는 피부를 유지하기 위해, 각종 식물, 미생물 등으로부터 얻은 생리활성 물질들이 함유된 화장품을 제조하여, 피부의 고유기능을 유지시키고 피부 세포를 활성화시켜 피부 노화를 효과적으로 억제하기 위한 노력이 있어 왔다. 그러나 기존의 화장품 원료들은 대부분 효능이 미진하거나 피부 부작용을 유발하는 등의 여러 가지 문제점을 가지고 있었다.In order to prevent this phenomenon and maintain healthy and elastic skin, cosmetics containing physiologically active substances obtained from various plants and microorganisms are manufactured to maintain the unique function of the skin and activate skin cells to effectively prevent skin aging. Efforts have been made to contain it. However, most of the existing cosmetic raw materials have various problems such as insufficient efficacy or causing skin side effects.

본 발명에서 사용되는 납작콩(Glycine gracilis)은 모양이 납작하다는 어원에서 나온 것으로, 납떼기콩, 납쪼레기콩(청송), 납드레콩(영일), 납작콩(경기도) 등으로 다양하게 불린다. 가장 흔히 볼 수 있는 콩인 대두와 달리, 타원형이며 납작하고 갸름한 모양을 가진다. 납떼기콩을 초복 전에 심으면 덩굴이 많이 뻗지만 초복이 지나고 나서 심으면 키가 작고 포기 밑에 한꺼번에 발이 들어갈 틈도 없이 콩이 많이 달린다. 납떼기콩의 잎은 다소 좁고 작은 편이고, 파란색 꽃을 피운다. 납떼기콩을 콩나물로 기를 경우, 성장이 빠르고 머리 부분이 갸름하면서 작고 연하여 맛이 좋다는 특징이 있다. The flat bean ( Glycine gracilis ) used in the present invention comes from the etymology that the shape is flat, and it is variously called as naeptegi bean, naphteggi bean (cheongsong), napdreekong (Yeongil), flat bean (Gyeonggi-do), and the like. Unlike soybeans, which are the most common soybeans, they are oval and have a flat and slender shape. If you plant lead-tegi beans before Chobok, the vines will stretch out a lot. The leaves of leopard bean are rather narrow and small, and have blue flowers. When the lead bean sprouts are grown as bean sprouts, they are characterized by fast growth, a slender head, small and soft, and good taste.

콩에는 뛰어난 항산화 성분 및 항노화 성분들이 풍부하게 함유되어 있는 특징에 착안하여, 본 발명자들은 한국공개특허 제2013-0107123호에서, 발아되지 않은 납떼기콩(납작콩)의 추출물을 함유하는 조성물이 항산화, 항노화, 미백, 또는 보습효과가 우수하다는 점을 밝혀낸 바 있었다.Paying attention to the feature that soybeans are rich in antioxidants and anti-aging ingredients, the present inventors disclosed in Korean Patent Application Publication No. 2013-0107123, a composition containing an extract of ungerminated soybean (flat bean) It has been found to have excellent antioxidant, anti-aging, whitening, or moisturizing effects.

이러한 납작콩 추출물의 노화방지 효과 관련 연구의 연장선 상에서, 본 발명자들은 납작콩 추출물의 피부 주름 개선 효과 및 피부 탄력 증진효과를 더욱 강화시키기 위해 예의 노력한 결과, 발아된 납작콩 추출물, 특히 계피산이 첨가된 배양액에서 발아된 납작콩의 추출물의 경우, 발아되지 않은 납작콩이나 계피산 없이 발아된 납작콩 추출물의 경우보다 진피섬유아세포성장인자의 발현을 더 증진시키고 콜라겐 분해효소의 발현은 더 억제시킴으로써 뛰어난 피부 노화 억제 효과를 나타냄을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.
As an extension of the research related to the anti-aging effect of the flat bean extract, the present inventors made intensive efforts to further enhance the skin wrinkle improvement effect and the skin elasticity enhancing effect of the flat bean extract. In the case of the flat bean extract germinated in the culture medium, the expression of the dermal fibroblast growth factor is further enhanced and the expression of the collagen degrading enzyme is further suppressed, so that the expression of the collagen degrading enzyme is more excellent than the case of the ungerminated flat bean or the flat bean extract germinated without cinnamic acid. It was confirmed that the inhibitory effect was exhibited, and the present invention was completed.

한국공개특허 제2013-0107123호 (2013.10.01)Korea Patent Publication No. 2013-0107123 (2013.10.01)

본 발명의 목적은 계피산이 첨가된 배양액에서 발아된 납작콩의 추출물을 유효성분으로 함유함으로써 우수한 항노화 효과를 나타내는 피부 외용제 조성물을 제공하는 데 있다.
It is an object of the present invention to provide a composition for external application for skin that exhibits excellent anti-aging effect by containing as an active ingredient an extract of flat beans germinated in a culture medium to which cinnamic acid is added.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 발아 납작콩 추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화용 피부 외용제 조성물로서, 상기 발아 납작콩 추출물은 계피산이 첨가된 배양액에서 발아된 납작콩으로부터 얻어지는 것을 특징으로 하는, 피부 외용제 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention is an anti-aging composition for external application for skin containing a germinated flat bean extract as an active ingredient, wherein the germinated flat bean extract is obtained from germinated flat bean extract in a culture medium to which cinnamic acid is added, A composition for external application to the skin is provided.

또한, 본 발명은 발아 납작콩 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 피부 외용제 조성물로서, 상기 발아 납작콩 추출물은 계피산이 첨가된 배양액에서 발아된 납작콩으로부터 얻어지는 것을 특징으로 하는, 피부 외용제 조성물을 제공한다.In addition, the present invention is a composition for external application for skin wrinkle improvement containing a germinated flat bean extract as an active ingredient, wherein the germinated flat bean extract is obtained from flat beans germinated in a culture solution to which cinnamic acid is added. provides

또한, 본 발명은 발아 납작콩 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 탄력 개선용 피부 외용제 조성물로서, 상기 발아 납작콩 추출물은 계피산이 첨가된 배양액에서 발아된 납작콩으로부터 얻어지는 것을 특징으로 하는, 피부 외용제 조성물을 제공한다.
In addition, the present invention is a composition for skin external application for improving skin elasticity containing a germinated flat bean extract as an active ingredient, wherein the germinated flat bean extract is obtained from flat beans germinated in a culture solution to which cinnamic acid is added. provides

본 발명에 따른 피부 외용제 조성물을 사용하는 경우, 콜라겐을 합성하는 진피섬유아세포의 진피섬유아세포성장인자 발현이 증가하고, 콜라겐 분해효소(collagenase)의 발현 및 활성이 억제됨으로써 피부 탄력이 강화되고 주름이 개선되는 등의 우수한 항노화 효과가 있다.When the composition for external application for skin according to the present invention is used, the expression of dermal fibroblast growth factor in dermal fibroblasts synthesizing collagen is increased, and the expression and activity of collagenase is suppressed, thereby strengthening skin elasticity and reducing wrinkles It has excellent anti-aging effects such as improvement.

도 1은 발아되지 않은 납작콩 추출물(비교예 1), 발아 납작콩 추출물(비교예 2), 계피산 발아 납작콩 추출물(실시예 1) 각각에 대하여 HPLC(high performance liquid chromatography) 성분 분석한 결과를 비교한 것이다.1 shows the results of high performance liquid chromatography (HPLC) component analysis for each of the non-germinated flat bean extract (Comparative Example 1), the germinated flat bean extract (Comparative Example 2), and the cinnamic acid germinated flat bean extract (Example 1). will be compared

다른 식으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 숙련된 전문가에 의해서 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다. 일반적으로, 본 명세서에서 사용된 명명법은 본 기술 분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다.Unless defined otherwise, all technical and scientific terms used herein have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which this invention belongs. In general, the nomenclature used herein is those well known and commonly used in the art.

본 발명에서 사용되는 "계피산 발아 납작콩 추출물"은 계피산이 첨가된 배양액에서 발아된 납작콩으로부터 추출된 물질을 의미하고, "계피산"이라는 접두어가 없는 "발아 납작콩 추출물"은, 계피산이 첨가되지 않은 통상의 배양액에서 발아된 납작콩으로부터 추출된 물질을 의미한다. As used in the present invention, "sprouted flat bean extract with cinnamic acid" means a material extracted from flat beans germinated in a culture medium to which cinnamic acid is added, and "germinated flat bean extract" without the prefix "cinnamic acid" means that cinnamic acid is not added. It refers to a material extracted from flat beans germinated in a conventional culture medium.

또한, 본 발명에서 "콜라겐 분해효소"와 "콜라게나제(collagenase)"는 동일한 의미로 사용된다.
Also, in the present invention, "collagen degrading enzyme" and "collagenase" are used as the same meaning.

본 발명의 실시예에서, 계피산 수용액에서 발아된 납작콩으로부터 얻어진 추출물과, 계피산 수용액 없이 발아된 납작콩으로부터 얻어진 추출물 및 발아되지 않은 납작콩으로부터 얻어진 추출물의 진피섬유아세포성장인자 및 콜라겐 분해효소의 발현을 각각 측정하여 비교한 결과, 계피산 수용액에서 발아된 납작콩 추출물의 경우 진피섬유아세포성장인자의 발현을 더 촉진시키고, 콜라겐 분해 효소의 발현과 활성은 더 억제시킴으로써, 우수한 피부 주름 개선효과 및 피부 탄력 증진효과를 나타냄을 알 수 있었다.In an embodiment of the present invention, the expression of dermal fibroblast growth factor and collagenase in an extract obtained from germinated flat beans in an aqueous cinnamic acid solution, an extract obtained from germinated flat beans without an aqueous cinnamic acid solution, and an extract obtained from ungerminated flat beans As a result of measuring and comparing each of these, the flat bean extract germinated in an aqueous cinnamic acid solution further promotes the expression of dermal fibroblast growth factor and further inhibits the expression and activity of collagen degrading enzyme, thereby providing excellent skin wrinkle improvement effect and skin elasticity It was found that the enhancement effect was shown.

따라서, 본 발명은 일 관점에서, 발아 납작콩 추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화용 피부 외용제 조성물로서, 상기 발아 납작콩 추출물은 계피산이 첨가된 배양액에서 발아된 납작콩으로부터 얻어지는 것을 특징으로 하는, 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.Accordingly, in one aspect, the present invention is an anti-aging composition for external application for skin containing a germinated flat bean extract as an active ingredient, wherein the germinated flat bean extract is obtained from flat beans germinated in a culture medium to which cinnamic acid is added, characterized in that It relates to a composition for external use.

또한, 본 발명은 다른 관점에서, 발아 납작콩 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 또는 피부 탄력 개선용 피부 외용제 조성물로서, 상기 발아 납작콩 추출물은 계피산이 첨가된 배양액에서 발아된 납작콩으로부터 얻어지는 것을 특징으로 하는, 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.In addition, in another aspect, the present invention is a composition for external application for skin wrinkle improvement or skin elasticity improvement containing a germinated flat bean extract as an active ingredient, wherein the germinated flat bean extract is obtained from germinated flat beans in a culture medium to which cinnamic acid is added. It relates to a composition for external application for skin, characterized in that obtained.

본 발명에 있어서, 상기 조성물은 피부 조직의 주요 구성성분인 콜라겐을 합성하는 진피섬유아세포성장인자의 발현을 촉진시키거나, 콜라겐 분해 효소의 발현을 억제함으로써 항노화 효과, 특히 피부 탄력 개선효과 및 피부 주름 개선효과를 나타내는 것을 특징으로 할 수 있다.In the present invention, the composition promotes the expression of dermal fibroblast growth factor that synthesizes collagen, which is a major component of skin tissue, or inhibits the expression of collagen-degrading enzyme, thereby providing anti-aging effects, particularly improving skin elasticity and improving skin elasticity. It may be characterized in that it exhibits a wrinkle-improving effect.

본 발명에서 사용되는 납작콩의 학명은 Glycine gracilis이고, 우리말로는 납떼기콩, 납데기콩, 납쪼레기콩, 납드레콩, 납작콩 등으로 다양하게 불린다. "발아"란 식물의 종자, 포자, 화분 및 가지나 뿌리 등에 생긴 싹이 발생 또는 생장을 개시하는 현상으로, "발아 납작콩"이란 싹이 발생하기 시작한 납작콩을 의미한다. 본 발명에서는, 싹이 약 20~60mm 정도로 자랐을 때의 납작콩을 "발아 납작콩"이라고 정의하였다.The scientific name of the flat bean used in the present invention is Glycine gracilis , and in Korean, it is variously called as lead bean, napdekong, naphtaegi, naphdreong, flat bean, and the like. "Germination" refers to a phenomenon in which buds formed in seeds, spores, pollen, branches or roots of plants, etc. occur or start to grow. In the present invention, flat beans when sprouts grow to about 20-60 mm are defined as "germinating flat beans".

또한, 본 발명에서 납작콩을 발아시킬 때 사용되는 계피산(cinnamic acid)은 신남산, 육계산, β-페닐아크릴산 등으로도 불리며, 대표적인 방향족 불포화 카복실산 중의 하나이다. 육계유(계피유), 페루발삼(Peru balsam), 소합향유 등의 식물 추출물에 많이 함유되어 있으며, 인공적으로 합성할 수도 있다. 본 발명에서 배양액에 첨가되는 계피산은 식물성 호르몬과 유사한 기능을 함으로써, 식물체 내에서 신호 체계(signaling)의 작동을 유도하여 항노화 관련 물질을 더 많이 생성하게 하는 것으로 추측된다. 계피산을 배양액에 첨가하는 것이 가장 바람직하나, 자스몬산(jasmonic acid) 또는 p-쿠마르산(p-coumaric acid)으로 대체하여 사용할 수도 있다.In addition, cinnamic acid used for germinating flat beans in the present invention is also called cinnamic acid, broileric acid, β-phenylacrylic acid, and the like, and is one of representative aromatic unsaturated carboxylic acids. It is contained in a lot of plant extracts such as broiler oil (cinnamon oil), Peru balsam, and bovine frankincense oil, and can be artificially synthesized. In the present invention, cinnamic acid added to the culture medium has a function similar to that of a plant hormone, and it is assumed that it induces the operation of a signaling system in the plant to produce more anti-aging-related substances. It is most preferable to add cinnamic acid to the culture medium, but it may be used instead of jasmonic acid or p - coumaric acid.

본 발명에서 납작콩의 발아에 사용되는 계피산이 첨가된 배양액은 계피산 수용액을 의미할 수 있고, 계피산 수용액에 통상적으로 배양액에 첨가될 수 있는 보조성분을 더 첨가한 것일 수 있다. 계피산이 첨가된 배양액 중 계피산의 농도는 바람직하게는 0.50~1.00mM 일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 0.75mM 일 수 있다.In the present invention, the culture solution to which cinnamon acid is added used for germination of flat beans may refer to an aqueous cinnamic acid solution, and may be one in which an auxiliary component that can be normally added to the culture solution is further added to the cinnamic acid aqueous solution. The concentration of cinnamic acid in the culture medium to which cinnamic acid is added may be preferably 0.50 to 1.00 mM, and more preferably 0.75 mM.

본 발명에 있어서, 상기 발아 납작콩 추출물은 다음의 단계를 포함하는 공정으로 제조되는 것을 특징으로 할 수 있다.In the present invention, the germinated flat bean extract may be characterized in that it is prepared by a process comprising the following steps.

a) 계피산이 첨가된 배양액을 이용하여 납작콩을 발아시키는 단계; a) germinating flat beans using a culture solution to which cinnamic acid is added;

b) 상기 a) 단계에서 발아된 납작콩을 건조시킨 다음 분말화하는 단계; b) drying and then pulverizing the flat beans germinated in step a);

c) 상기 b) 단계에서 분말화된 납작콩 분말을 극성용매와 혼합한 후 끓임으로써 일차 추출하는 단계; c) mixing the flat bean powder powdered in step b) with a polar solvent and then boiling the powder for primary extraction;

d) 상기 c) 단계에서 얻어진 일차 추출물을 여과하는 단계; d) filtering the primary extract obtained in step c);

e) 상기 d) 단계에서 여과된 추출물을 저극성 또는 비극성 유기용매로 이차 추출하는 단계; 및 e) secondary extraction of the extract filtered in step d) with a low-polarity or non-polar organic solvent; and

f) 상기 e) 단계에서 얻어진 최종 추출물을 감압 농축하는 단계.f) concentrating the final extract obtained in step e) under reduced pressure.

본 발명의 조성물에 함유되는 계피산 발아 납작콩 추출물은 특히 극성 변화에 의해 순차적으로 추출하여 제조한 것으로서, 계피산 발아 납작콩 추출물을 무수 또는 함수의 저급 알코올(탄소수 1 내지 3), 아세톤 등의 극성 용매, 바람직하게는 에탄올로 일차 추출한 후, 에칠아세테이트, 디에칠에테르, 벤젠, 클로로포름, 헥산 등의 저극성 또는 비극성 용매, 바람직하게는 에칠아세테이트로 재추출(이차 추출)하여 활성성분의 함량을 극대화시키고 불순물을 제거하여 안정도가 향상됨과 동시에 효능이 극대화된 추출물을 제조할 수 있다. 그 다음 이를 피부외용제, 예컨대 가용화 기술을 이용한 유연화장수에서부터 유화기술을 응용한 영양화장수, 크림, 에센스등에 첨가하여 사용할 수 있다.The cinnamic acid germinated flat bean extract contained in the composition of the present invention is particularly prepared by sequential extraction by changing the polarity, and the cinnamic acid germinated flat bean extract is used in anhydrous or hydrated lower alcohol (1 to 3 carbon atoms), polar solvent such as acetone. , preferably after primary extraction with ethanol, re-extraction (secondary extraction) with a low polar or non-polar solvent such as ethyl acetate, diethyl ether, benzene, chloroform, and hexane, preferably ethyl acetate to maximize the content of the active ingredient, By removing impurities, it is possible to prepare an extract with improved stability and maximized efficacy. Then, it can be used by adding it to external preparations for skin, for example, from softening lotion using solubilization technology to nutrient lotion applying emulsification technology, cream, essence, etc.

또한, 극성 용매를 사용한 일차 추출과 이차 추출 사이에 여과하는 과정을 두 번 거침으로써, 추출물을 효율적으로 정제할 수 있다. 1차 여과는 200~300 메쉬의 여과포로 여과하고, 1차 여과된 여과액을 4-15℃에서 수일간 숙성시킨 뒤, 여과지로 2차 여과시키는 것이 바람직하다.In addition, by performing the filtration process twice between the primary extraction and the secondary extraction using a polar solvent, the extract can be efficiently purified. The primary filtration is preferably filtered through a 200-300 mesh filter cloth, and the primary filtered filtrate is aged at 4-15° C. for several days, followed by secondary filtration with filter paper.

또한, 본 발명에 있어서, 상기 계피산 발아 납작콩 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.01~10중량%로 함유되는 것을 특징으로 할 수 있다. 추출물의 함량이 0.01중량% 미만이면 그 효과를 기대하기 어렵고, 10중량%를 초과하면 효과의 증가가 더이상 뚜렷하게 나타나지 않는다.In addition, in the present invention, the cinnamic acid germinated flat bean extract may be characterized in that it is contained in an amount of 0.01 to 10% by weight based on the total weight of the composition. If the content of the extract is less than 0.01% by weight, it is difficult to expect the effect, and if it exceeds 10% by weight, the increase in the effect does not appear clearly anymore.

본 발명에 따른 피부 외용제 조성물을 화장료의 형태로 제형화 할 경우, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 아이 크림, 영양 크림, 마사지 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 파우더, 에센스 또는 팩 등의 형태로 제형화 될 수 있으며, 그 제형이 특별히 한정되는 것은 아니다. 또한, 본 발명에 의한 조성물은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다. 또한, 본 발명의 조성물은 피부 개선 효과를 증가시키기 위하여 피부 흡수 촉진 물질을 함유할 수 있다.When the composition for external application for skin according to the present invention is formulated in the form of a cosmetic, softening lotion, astringent lotion, nutrient lotion, eye cream, nourishing cream, massage cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, powder, essence or pack, etc. It may be formulated in the form of, and the formulation is not particularly limited. In addition, the composition according to the present invention is a fatty substance, an organic solvent, a solubilizer, a thickening agent, a gelling agent, an emollient, an antioxidant, a suspending agent, a stabilizer, a foaming agent, a fragrance, a surfactant, water, an ionic or non Ionic emulsifiers, fillers, sequestering agents, chelating agents, preservatives, vitamins, blocking agents, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, lipid vesicles or any other ingredients commonly used in cosmetics; It may contain adjuvants commonly used in the field of cosmetics or dermatology. The adjuvant is introduced in an amount generally used in the field of cosmetology or dermatology. In addition, the composition of the present invention may contain a skin absorption promoting material to increase the skin improvement effect.

본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 상기한 물질 이외에 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서, 바람직하게는 주효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분들을 포함할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 보습제, 에몰리언트제, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, pH 조정제, 유기 및 무기 안료, 향료, 냉감제 또는 제한제를 더 포함할 수 있다. 상기 성분의 배합량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 당업자가 용이하게 선정 가능하며, 그 배합량은 조성물 전체 중량을 기준으로 0.01 내지 5 중량%, 구체적으로 0.01 내지 3 중량%일 수 있다.
The composition for external application for skin according to the present invention may include other ingredients other than the above substances within a range that does not impair the main effect, preferably other ingredients capable of giving a synergistic effect to the main effect. In addition, the composition for external application for skin according to the present invention may further include a moisturizer, an emollient, a UV absorber, a preservative, a disinfectant, an antioxidant, a pH adjuster, an organic and inorganic pigment, a fragrance, a cooling agent or a limiting agent. The blending amount of the component can be easily selected by those skilled in the art within the range that does not impair the purpose and effect of the present invention, and the blending amount may be 0.01 to 5 wt%, specifically 0.01 to 3 wt%, based on the total weight of the composition there is.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples. These examples are only for illustrating the present invention, and it will be apparent to those of ordinary skill in the art that the scope of the present invention is not to be construed as being limited by these examples. Accordingly, the substantial scope of the present invention will be defined by the appended claims and their equivalents.

[실시예 1] 계피산 발아 납작콩 추출물의 제조[Example 1] Preparation of cinnamic acid germinated flat bean extract

계피산을 0.75mM 농도로 첨가한 물을 이용하여, 납작콩 100g을 25℃의 온도를 유지하는 발아기에서 48시간 동안 발아시켰다. 48시간동안 발아시킨 납작콩 싹의 길이는 평균 25mm였다. Using water to which cinnamic acid was added at a concentration of 0.75 mM, 100 g of flat beans were germinated for 48 hours in a germination machine maintained at a temperature of 25°C. The average length of flat bean sprouts germinated for 48 hours was 25 mm.

그 다음, 발아된 납작콩을 정제수로 세척하고 건조시키고, 분말화하여 계피산 발아 납작콩 가루 100g을 얻었다. 계피산 발아 납작콩 가루 100g을 70% 에탄올 수용액 1리터에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 12시간 동안 끓여서 추출한 후, 300 메쉬 여과포로 여과하였다. 이로써 얻어진 여과액을 4-15℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후, 와트만 2번 여과지로 다시 한 번 여과하였다. 이렇게 얻어진 추출액을 3리터들이 분액깔때기에 넣은 후 에칠아세테이트 1리터를 가하고 흔들어서 잘 섞어준 다음 두 층으로 완전히 분리되면 상층(에틸아세테이트 층)을 취하였다. 하층(물층)은 분액깔때기를 이용하여 상기와 같은 과정을 두 번 더 반복하여 추출하였다. 각각의 추출과정에서 분리된 상층을 모두 합한 뒤, 냉각 콘덴서가 달린 증류 장치를 이용하여 50℃로 감압 농축하고 건조하여 계피산 발아 납작콩 추출물(건조중량 13.54 g)을 얻었다.
Then, the germinated flat beans were washed with purified water, dried, and pulverized to obtain 100 g of cinnamic acid germinated flat bean powder. 100 g of cinnamic acid germinated flat bean powder was added to 1 liter of 70% ethanol aqueous solution, boiled for 12 hours in an extractor equipped with a cooling condenser, and extracted, followed by filtration with a 300 mesh filter cloth. The resulting filtrate was aged at 4-15° C. for 7 days, and then filtered again with Whatman No. 2 filter paper. The extract thus obtained was put into a 3-liter separatory funnel, 1 liter of ethyl acetate was added, and the mixture was shaken to mix well, and when it was completely separated into two layers, the upper layer (ethyl acetate layer) was taken. The lower layer (water layer) was extracted by repeating the above process twice more using a separatory funnel. The upper layers separated in each extraction process were combined, concentrated under reduced pressure at 50° C. using a distillation apparatus equipped with a cooling condenser, and dried to obtain an extract of germinated flat bean cinnamon (dry weight 13.54 g).

[비교예 1] 발아되지 않은 납작콩 추출물의 제조[Comparative Example 1] Preparation of ungerminated flat bean extract

발아되지 않은 납작콩을 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 분말화하여, 납작콩 가루 100g을 얻었다. 납작콩 가루 100g을 70% 에탄올 수용액 1리터에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 12시간 동안 끓여서 추출한 후, 300 메쉬 여과포로 여과하였다. 이로써 얻어진 여과액을 4-15℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후, 와트만 2번 여과지로 다시 한 번 여과하였다. 이렇게 얻어진 추출액을 3리터들이 분액깔때기에 넣은 후 에칠아세테이트 1리터를 가하고 흔들어서 잘 섞어준 다음 두 층으로 완전히 분리되면 상층(에틸아세테이트 층)을 취하였다. 하층(물층)은 분액깔때기를 이용하여 상기와 같은 과정을 두 번 더 반복하여 추출하였다. 각각의 추출과정에서 분리된 상층을 모두 합한 뒤, 냉각 콘덴서가 달린 증류 장치를 이용하여 50℃로 감압 농축하고 건조하여 발아되지 않은 납작콩 추출물 (건조중량 15.18 g)을 얻었다.
The ungerminated flat beans were washed with purified water, dried and then pulverized to obtain 100 g of flat soybean flour. 100 g of flat bean powder was added to 1 liter of 70% ethanol aqueous solution, boiled for 12 hours in an extractor equipped with a cooling condenser, and extracted, and then filtered through a 300 mesh filter cloth. The resulting filtrate was aged at 4-15° C. for 7 days, and then filtered again with Whatman No. 2 filter paper. The extract thus obtained was put into a 3-liter separatory funnel, 1 liter of ethyl acetate was added, and the mixture was shaken to mix well, and when it was completely separated into two layers, the upper layer (ethyl acetate layer) was taken. The lower layer (water layer) was extracted by repeating the above process twice more using a separatory funnel. The upper layers separated in each extraction process were combined, concentrated under reduced pressure at 50° C. using a distillation apparatus equipped with a cooling condenser, and dried to obtain an ungerminated flat bean extract (dry weight 15.18 g).

[비교예 2] 발아 납작콩 추출물 제조[Comparative Example 2] Preparation of germinated flat bean extract

먼저, 1차 증류수를 이용하여, 납작콩 100g을 25℃의 온도를 유지하는 발아기에서 48시간 동안 발아시켰다. 48시간동안 발아시킨 납작콩 싹의 길이는 평균 55mm였다. 싹의 평균 길이가 계피산 수용액을 이용하여 발아시킨 실시예 1에 비하여 긴 이유는, 콩의 경우 계피산이 줄기 길이 신장을 억제하기 때문인 것으로 생각된다(http://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0069105 참조).First, using distilled water, 100 g of flat beans were germinated for 48 hours in a germination machine maintained at a temperature of 25°C. The average length of flat bean sprouts germinated for 48 hours was 55 mm. The reason that the average length of the shoots is longer than that of Example 1, which was germinated using an aqueous solution of cinnamic acid, is thought to be because in the case of soybeans, cinnamic acid inhibits the elongation of the stem length (http://journals.plos.org/plosone/article). ?id=10.1371/journal.pone.0069105 Reference).

그 다음, 발아된 납작콩을 정제수로 세척하고 건조시키고, 분말화하여 발아 납작콩 가루 100g을 얻었다. 발아 납작콩 가루 100g을 70% 에탄올 수용액 1리터에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 12시간 동안 끓여서 추출한 후, 300 메쉬 여과포로 여과하였다. 이로써 얻어진 여과액을 4-15℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후, 와트만 2번 여과지로 다시 한 번 여과하였다. 이렇게 얻어진 추출액을 3리터들이 분액깔때기에 넣은 후 에칠아세테이트 1리터를 가하고 흔들어서 잘 섞어준 다음 두 층으로 완전히 분리되면 상층(에틸아세테이트 층)을 취하였다. 하층(물층)은 분액깔때기를 이용하여 상기와 같은 과정을 두 번 더 반복하여 추출하였다. 각각의 추출과정에서 분리된 상층을 모두 합한 뒤, 냉각 콘덴서가 달린 증류 장치를 이용하여 50℃로 감압 농축하고 건조하여 발아 납작콩 추출물(건조중량 14.16 g)을 얻었다.
Then, the germinated flat beans were washed with purified water, dried, and pulverized to obtain 100 g of germinated flat beans. 100 g of germinated flat bean powder was added to 1 liter of 70% ethanol aqueous solution, boiled for 12 hours in an extractor equipped with a cooling condenser, and extracted, followed by filtration with a 300 mesh filter cloth. The resulting filtrate was aged at 4-15° C. for 7 days, and then filtered again with Whatman No. 2 filter paper. The extract thus obtained was put into a 3-liter separatory funnel, 1 liter of ethyl acetate was added, and the mixture was shaken to mix well, and when it was completely separated into two layers, the upper layer (ethyl acetate layer) was taken. The lower layer (water layer) was extracted by repeating the above process twice more using a separatory funnel. The upper layers separated in each extraction process were combined, concentrated under reduced pressure at 50° C. using a distillation apparatus equipped with a cooling condenser, and dried to obtain a germinated flat bean extract (dry weight 14.16 g).

[시험예 1] 추출물 성분 비교 분석[Test Example 1] Comparative analysis of extract components

상기 실시예 1의 계피산 발아 납작콩 추출물, 비교예 1의 발아되지 않은 납작콩 추출물, 및 비교예 2의 발아 납작콩 추출물 각각의 성분을 분석하였다. 상기 추출물 각각을 70% 에탄올에 녹여 10,000ppm 용액으로 만든 후, HPLC(Waters사, 2695 model)를 이용하여 성분 분석(Waters사, 2996 PDA 검출기)을 진행하였다. 고정상은 Kanto Chemical의 Mightysil RP-18 GP 250-4.6(5μm) 칼럼을 이용하였고, 이동상은 하기 표 1과 같은 조성비를 사용하였다.Each component of the cinnamic acid germinated flat bean extract of Example 1, the ungerminated flat bean extract of Comparative Example 1, and the germinated flat bean extract of Comparative Example 2 was analyzed. Each of the extracts was dissolved in 70% ethanol to make a 10,000 ppm solution, and component analysis (Waters, 2996 PDA detector) was performed using HPLC (Waters, 2695 model). As a stationary phase, a Mightysil RP-18 GP 250-4.6 (5 μm) column of Kanto Chemical was used, and the composition ratio as shown in Table 1 below was used for the mobile phase.

시간 (분)time (minutes) A: 물A: water B: 아세토나이트릴B: acetonitrile 00 9595 55 3535 6565 3535 4545 55 9595 5050 9595 55 5555 9595 55

그 결과, 도 1에 나타난 바와 같이, 계피산 발아 납작콩 추출물에서, 발아되지 않은 납작콩 추출물과 발아 납작콩 추출물에서는 관찰되지 않았던 새로운 피크(peak)가 관찰되어, 신규한 성분이 존재하는 것을 확인할 수 있었다. 따라서, 이 성분으로 인해 계피산 발아 납작콩 추출물은 발아되지 않은 납작콩 추출물과 발아 납작콩 추출물에 비해 우수한 항노화 효능이 있을 것이라고 예측할 수 있었다.
As a result, as shown in Figure 1, in the cinnamic acid germinated flat bean extract, a new peak that was not observed in the non-germinated flat bean extract and the germinated flat bean extract was observed, confirming the presence of a novel component. there was. Therefore, due to this component, it could be predicted that the cinnamic acid germinated flat bean extract would have superior anti-aging effects compared to the ungerminated flat bean extract and the germinated flat bean extract.

[시험예 2] 진피섬유아세포성장인자 발현 측정 실험[Test Example 2] Test for measuring dermal fibroblast growth factor expression

상기 실시예 1의 계피산 발아 납작콩 추출물, 비교예 1의 발아되지 않은 납작콩 추출물, 및 비교예 3의 발아 납작콩 추출물 각각의 진피섬유아세포성장인자 발현량을, 2.5중량%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Media) 배지와 비교하여 측정하였다.The dermal fibroblast growth factor expression level of each of the cinnamic acid germinated flat bean extract of Example 1, the ungerminated flat bean extract of Comparative Example 1, and the germinated flat bean extract of Comparative Example 3, 2.5% by weight of fetal bovine serum It was measured compared to the contained DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Media) medium.

2.5중량%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM 배지가 들어 있는 96공 평판배양기(96-well microtiter plate)에 인간의 섬유아세포(Cascade Biologics사)(Portland, OR, U.S.A.)를 5,000 세포/웰(well)이 되도록 넣고, 90% 정도 자랄 때까지 배양하였다. 그 후 무혈청 DMEM 배지에서 24시간 배양한 다음, 무혈청 DMEM 배지에 녹여진 상기 실시예 1의 계피산 발아 납작콩 추출물, 비교예 1의 발아되지 않은 납작콩 추출물, 및 비교예 2의 발아 납작콩 추출물을 각각 50ppm씩 취하여 24시간 처리하였다. 양성대조군은 무혈청 DMEM배지를 2.5중량%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM배지로 교체 후 24시간 동안 배양 후, 세포배양액을 채취하였다. 5,000 cells/well of human fibroblasts (Cascade Biologics, Portland, OR, USA) in a 96-well microtiter plate containing DMEM medium containing 2.5% by weight of fetal bovine serum. ), and incubated until about 90% growth. After culturing in serum-free DMEM medium for 24 hours, the cinnamic acid germinated flat bean extract of Example 1, the ungerminated flat bean extract of Comparative Example 1, and the germinated flat bean of Comparative Example 2 dissolved in serum-free DMEM medium. Each extract was taken by 50ppm and treated for 24 hours. For the positive control group, the serum-free DMEM medium was replaced with a DMEM medium containing 2.5% by weight of fetal bovine serum and cultured for 24 hours, and then the cell culture medium was collected.

그 다음, 진피섬유아세포성장인자 측정기구 (미국 알엔디시스템 사)를 이용하여 채취한 세포배양액의 진피섬유아세포성장인자 발현 정도를 측정하였다. 먼저 1차 진피섬유아세포성장인자 항체가 균일하게 도포된 96-공 평판(96-well plate)에 채취된 세포 배양액을 넣고 3시간 동안 항원-항체 반응을 항온조(36℃)에서 실시하였다.Then, the expression level of the dermal fibroblast growth factor in the cell culture medium collected using a dermal fibroblast growth factor measuring instrument (R&D System, USA) was measured. First, the collected cell culture solution was placed in a 96-well plate coated with the primary dermal fibroblast growth factor antibody uniformly, and the antigen-antibody reaction was performed in a constant temperature bath (36° C.) for 3 hours.

4시간 후 발색단이 결합된 2차 진피섬유아세포성장인자 항체를 96-웰 플레이트 (96-well plate)에 넣고 다시 15분간 반응시켰다. 15분 후, 발색 유발물질을 넣어 실온에서 15분간 발색시키고, 다시 1M 황산을 넣어 반응 (발색)을 중지시키면 반응액의 색깔은 노란색을 띠게 되는데, 반응의 진행 정도에 따라 파란색의 정도가 다르게 나타남을 확인하였다.After 4 hours, the chromophore-conjugated secondary dermal fibroblast growth factor antibody was placed in a 96-well plate and reacted again for 15 minutes. After 15 minutes, add a color-generating substance to develop color at room temperature for 15 minutes, and then add 1M sulfuric acid to stop the reaction (color development), the color of the reaction solution is yellow. was confirmed.

파란색을 띠는 96-웰 플레이트 (96-well plate)의 흡광도를 흡광계를 이용하여 450nm에서 측정하였고, 하기 수학식 1에 의해 진피섬유아세포성장인자 발현 정도를 계산하였다. 이때 조성물을 처리하지 않은 군의 채취된 세포배양액의 반응 흡광도를 대조군으로 하였다. 즉, 비처리군에서의 진피섬유아세포성장인자의 발현 정도를 100으로 하고, 이에 대비하여 시험물질을 처리한 군에서의 진피섬유야세포성장인자의 발현 정도를 구하였으며, 그 결과는 하기 표 2에 나타내었다. The absorbance of the 96-well plate with blue color was measured at 450 nm using a light absorber, and the expression level of dermal fibroblast growth factor was calculated by Equation 1 below. At this time, the reaction absorbance of the cell culture solution collected from the group not treated with the composition was used as a control. That is, the expression level of dermal fibroblast growth factor in the untreated group was set to 100, and in contrast, the expression level of dermal fibroblast growth factor in the group treated with the test substance was obtained, and the results are shown in Table 2 below. shown in

Figure 112021130736029-pat00004
Figure 112021130736029-pat00004

시험물질test substance 진피섬유아세포성장인자 발현 정도(%)Dermal fibroblast growth factor expression level (%) 비처리군untreated group 100100 2.5중량%의 우태아 혈청이
함유된 DMEM 배지
2.5% by weight of fetal bovine serum
DMEM medium containing
196196
계피산 발아 납작콩 추출물(실시예 1)Cinnamon-acid germinated flat bean extract (Example 1) 189189 발아되지 않은 납작콩 추출물(비교예 1)Ungerminated flat bean extract (Comparative Example 1) 124124 발아 납작콩 추출물(비교예 2)Germinated flat bean extract (Comparative Example 2) 129129

상기 표 2에 나타난 바와 같이, 실시예 1의 계피산 발아 납작콩 추출물이 비교예 1의 발아되지 않은 납작콩 추출물 또는 비교예 2의 발아 납작콩 추출물보다 시험관내(in vitro)에서 진피섬유아세포성장인자의 발현을 더욱 효과적으로 증가시킴을 알 수 있었다. 따라서, 본 발명에 따른 추출물 또는 이를 함유하는 조성물은 우수한 항노화 효과, 즉 우수한 피부 주름 개선 효과 및 피부 탄력 개선 효과를 나타냄을 확인할 수 있다.
As shown in Table 2 above, the cinnamic acid germinated flat bean extract of Example 1 was better than the ungerminated flat bean extract of Comparative Example 1 or the germinated flat bean extract of Comparative Example 2 in vitro . was found to more effectively increase the expression of Therefore, it can be confirmed that the extract according to the present invention or a composition containing the same exhibits an excellent anti-aging effect, that is, an excellent skin wrinkle improvement effect and skin elasticity improvement effect.

[시험예 3] 항노화능 시험[Test Example 3] Anti-aging ability test

상기 실시예 1의 계피산 발아 납작콩 추출물, 비교예 1의 발아되지 않은 납작콩 추출물, 및 비교예 2의 발아 납작콩 추출물 각각의 콜라게나제(collagenase) 생성 억제능을 토코페롤 및 EGCG와 비교하여 측정하였다. 토코페롤 및 EGCG는 피부의 표피 세포를 재생시켜 피부의 노화를 방지하는 기능이 있는 것으로 알려진 물질이다. The cinnamic acid germinated flat bean extract of Example 1, the ungerminated flat bean extract of Comparative Example 1, and the germinated flat bean extract of Comparative Example 2 were each measured for their ability to inhibit collagenase production by comparing them with tocopherol and EGCG. . Tocopherol and EGCG are substances known to have a function of preventing skin aging by regenerating epidermal cells of the skin.

2.5중량%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Media) 배지가 들어 있는 96공 평판배양기(96-well microtiter plate)에 인간의 섬유아세포를 (Cascade Biologics사)(Portland, OR, U.S.A.) 5,000 세포/웰(well)이 되도록 넣고, 90% 정도 자랄 때까지 배양하였다. 그 후 무혈청 DMEM 배지에서 24시간 배양한 다음, 무혈청 DMEM 배지에 녹여진 상기 실시예 1의 계피산 발아 납작콩 추출물, 비교예 1의 발아되지 않은 납작콩 추출물, 및 비교예 2의 발아 납작콩 추출물은 각각 50ppm의 농도가 되도록 처리하고, 토코페롤 및 EGCG (Sigma Aldrich사)은 각각 50μM의 농도로 24시간 동안 처리한 후, 세포배양액을 채취하였다. Human fibroblasts (Cascade Biologics) (Portland, OR, USA) were placed in a 96-well microtiter plate containing DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Media) medium containing 2.5% by weight of fetal bovine serum. It was added so that it became 5,000 cells/well, and cultured until about 90% growth. After culturing in serum-free DMEM medium for 24 hours, the cinnamic acid germinated flat bean extract of Example 1, the ungerminated flat bean extract of Comparative Example 1, and the germinated flat bean of Comparative Example 2 dissolved in serum-free DMEM medium. The extracts were each treated to a concentration of 50 ppm, and tocopherol and EGCG (Sigma Aldrich) were each treated at a concentration of 50 μM for 24 hours, and then the cell culture solution was collected.

그 다음, 콜라게나제 측정기구 (미국 아머샴파마샤 사)를 이용하여 채취한 세포배양액의 콜라게나제 생성 정도를 측정하였다. 먼저 1차 콜라게나제 항체가 균일하게 도포된 96-공 평판(96-well plate)에 채취된 세포 배양액을 넣고 3시간 동안 항원-항체 반응을 항온조(36℃)에서 실시하였다. Then, using a collagenase measuring instrument (Amersham Pharma Corporation, USA), the collagenase production level of the collected cell culture was measured. First, the collected cell culture solution was placed in a 96-well plate uniformly coated with the primary collagenase antibody, and the antigen-antibody reaction was performed in a thermostat (36° C.) for 3 hours.

3시간 후 발색단이 결합된 2차 콜라겐 항체를 96-웰 플레이트 (96-well plate)에 넣고 다시 15분간 반응시켰다. 15분 후, 발색 유발물질을 넣어 실온에서 15분간 발색시키고, 다시 1M 황산을 넣어 반응 (발색)을 중지시키면 반응액의 색깔은 노란색을 띠게 되는데, 반응의 진행 정도에 따라 노란색의 정도가 다르게 나타남을 확인하였다.After 3 hours, the chromophore-conjugated secondary collagen antibody was placed in a 96-well plate and reacted for 15 minutes again. After 15 minutes, add a color-generating substance to develop color at room temperature for 15 minutes, and then add 1M sulfuric acid to stop the reaction (color development), the color of the reaction solution is yellow. was confirmed.

노란색을 띠는 96-웰 플레이트 (96-well plate)의 흡광도를 흡광계를 이용하여 405nm에서 측정하였고, 하기 수학식 2에 의해 콜라게나제의 합성 정도를 계산하였다. 이때 조성물을 처리하지 않은 군의 채취된 세포배양액의 반응 흡광도를 대조군으로 하였다. 즉, 비처리군에서의 콜라게나제의 발현 정도를 100으로 하고, 이에 대비하여 시험물질을 처리한 군에서의 콜라게나제의 발현 정도를 구하였으며, 그 결과는 하기 표 3에 나타내었다. Absorbance of a 96-well plate having a yellow color was measured at 405 nm using an absorber, and the degree of collagenase synthesis was calculated by Equation 2 below. At this time, the reaction absorbance of the cell culture solution collected from the group not treated with the composition was used as a control. That is, the expression level of collagenase in the untreated group was set to 100, and in contrast to this, the expression level of collagenase in the group treated with the test substance was obtained, and the results are shown in Table 3 below.

Figure 112015084248219-pat00002
Figure 112015084248219-pat00002

시험물질test substance 콜라게나제 발현 정도(%)Collagenase expression level (%) 비처리군untreated group 100100 토코페롤tocopherol 7575 EGCGEGCG 6161 계피산 발아 납작콩 추출물(실시예 1)Cinnamon-acid germinated flat bean extract (Example 1) 5858 발아되지 않은 납작콩 추출물(비교예 1)Ungerminated flat bean extract (Comparative Example 1) 7979 발아 납작콩 추출물(비교예 2)Germinated flat bean extract (Comparative Example 2) 7676

상기 표 3에 나타난 바와 같이, 실시예 1의 계피산 발아 납작콩 추출물이 비교예 1의 발아되지 않은 납작콩 추출물 또는 비교예 2의 발아 납작콩 추출물보다 시험관내(in vitro)에서 콜라게나제의 발현을 더욱 효과적으로 억제하며, 항노화 물질로 알려져 있는 토코페롤과 EGCG보다도 콜라게나제의 발현 억제능이 우수함을 알 수 있었다. 따라서, 본 발명에 따른 추출물 또는 이를 함유하는 조성물은 우수한 항노화 효과, 특히 우수한 피부 주름 개선 효과 및 피부 탄력 개선 효과를 나타냄을 확인할 수 있다.
As shown in Table 3 above, the expression of collagenase in the cinnamic acid germinated flat bean extract of Example 1 in vitro than the ungerminated flat bean extract of Comparative Example 1 or the germinated flat bean extract of Comparative Example 2 It was found that the ability to inhibit the expression of collagenase was superior to that of tocopherol and EGCG, which are known as anti-aging substances. Therefore, it can be confirmed that the extract according to the present invention or a composition containing the same exhibits an excellent anti-aging effect, particularly an excellent skin wrinkle improvement effect and skin elasticity improvement effect.

이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시태양일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
As described above in detail a specific part of the content of the present invention, for those of ordinary skill in the art, this specific description is only a preferred embodiment, and it is clear that the scope of the present invention is not limited thereby. something to do. Accordingly, it is intended that the substantial scope of the present invention be defined by the appended claims and their equivalents.

또한, 이하 본 발명의 조성물을 포함하는 피부 외용제 조성물의 제형예를 보다 상세하게 설명하나, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다.
In addition, the formulation examples of the composition for external application for skin including the composition of the present invention will be described in more detail below, but it will be clear that the scope of the present invention is not limited thereby.

[제형예 1] 영양화장수[Formulation Example 1] Nutrient lotion

하기 표 4에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양화장수를 제조하였다(단위: 중량%).Nutrient lotion was prepared by a conventional method according to the composition shown in Table 4 below (unit: wt%).

성분ingredient 함량content 정제수Purified water 잔량remaining amount 글리세린glycerin 8.08.0 부틸렌글리콜butylene glycol 4.04.0 히알루론산 추출물Hyaluronic Acid Extract 5.05.0 베타글루칸beta glucan 7.07.0 카보머Carbomer 0.10.1 계피산 발아 납작콩 추출물 (실시예 1)Cinnamon-acid germinated flat bean extract (Example 1) 0.050.05 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드Caprylic/Capric Triglycerides 8.08.0 스쿠알란squalane 5.05.0 세테아릴 글루코사이드cetearyl glucoside 1.51.5 소르비탄 스테아레이트Sorbitan Stearate 0.40.4 세테아릴 알코올cetearyl alcohol 1.01.0 트리에탄올아민triethanolamine 0.10.1

[제형예 2] 영양크림[Formulation Example 2] Nourishing cream

하기 표 5에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양크림을 제조하였다(단위: 중량%).Nutrient creams were prepared in a conventional manner according to the composition shown in Table 5 below (unit: wt%).

성분ingredient 함량content 정제수Purified water 잔량remaining amount 글리세린glycerin 3.03.0 부틸렌글리콜butylene glycol 3.03.0 유동파라핀liquid paraffin 7.07.0 베타글루칸beta glucan 7.07.0 카보머Carbomer 0.10.1 계피산 발아 납작콩 추출물 (실시예 1)Cinnamon-acid germinated flat bean extract (Example 1) 3.03.0 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드Caprylic/Capric Triglycerides 3.03.0 스쿠알란squalane 5.05.0 세테아릴 글루코사이드cetearyl glucoside 1.51.5 소르비탄 스테아레이트Sorbitan Stearate 0.40.4 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.21.2 트리에탄올아민triethanolamine 0.10.1

[제형예 3] 마사지 크림[Formulation Example 3] Massage Cream

하기 표 6에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 마사지 크림을 제조하였다(단위: 중량%).A massage cream was prepared in a conventional manner according to the composition shown in Table 6 below (unit: wt%).

성분ingredient 함량content 정제수Purified water 잔량remaining amount 글리세린glycerin 8.08.0 부틸렌글리콜butylene glycol 4.04.0 유동파라핀liquid paraffin 45.045.0 베타글루칸beta glucan 7.07.0 카보머Carbomer 0.10.1 계피산 발아 납작콩 추출물 (실시예 1)Cinnamon-acid germinated flat bean extract (Example 1) 1.01.0 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드Caprylic/Capric Triglycerides 3.03.0 밀납beeswax 4.04.0 세테아릴 글루코사이드cetearyl glucoside 1.51.5 세스퀴올레인산 소르비탄Sorbitan Sesquioleate 0.90.9 바세린Vaseline 3.03.0 파라핀paraffin 1.51.5

[제형예 4] 팩[Formulation Example 4] Pack

하기 표 7에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 팩을 제조하였다(단위: 중량%).A pack was prepared in a conventional manner according to the composition shown in Table 7 (unit: wt%).

성분ingredient 함량content 정제수Purified water 잔량remaining amount 글리세린glycerin 4.04.0 폴리비닐알콜polyvinyl alcohol 15.015.0 히알루론산 추출물Hyaluronic Acid Extract 5.05.0 베타글루칸beta glucan 7.07.0 알란토인allantoin 0.10.1 계피산 발아 납작콩 추출물 (실시예 1)Cinnamon-acid germinated flat bean extract (Example 1) 0.50.5 노닐페닐에테르nonylphenyl ether 0.40.4 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.21.2 에탄올ethanol 6.06.0

[제형예 5] 피부외용제 중 연고[Formulation Example 5] Ointment for external skin preparations

하기 표 8에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 연고를 제조하였다(단위: 중량%).An ointment was prepared in a conventional manner according to the composition shown in Table 8 (unit: wt%).

성분ingredient 함량content 정제수Purified water 잔량remaining amount 글리세린glycerin 8.08.0 부틸렌글리콜butylene glycol 4.04.0 유동파라핀liquid paraffin 15.015.0 베타글루칸beta glucan 7.07.0 카보머Carbomer 0.10.1 계피산 발아 납작콩 추출물 (실시예 1)Cinnamon Germination Flat Bean Extract (Example 1) 1.01.0 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드Caprylic/Capric Triglycerides 3.03.0 스쿠알란squalane 1.01.0 세테아릴 글루코사이드cetearyl glucoside 1.51.5 소르비탄 스테아레이트Sorbitan Stearate 0.40.4 세테아릴 알코올cetearyl alcohol 1.01.0 밀납beeswax 4.04.0

Claims (10)

발아 납작콩 추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화용 피부 외용제 조성물로서,
상기 발아 납작콩 추출물은 계피산(cinnamic acid)이 첨가된 배양액에서 발아된 납작콩으로부터 얻어지고,
상기 계피산이 첨가된 배양액의 계피산 농도는 0.50~1.00mM인 것을 특징으로 하는, 피부 외용제 조성물.
As an anti-aging skin external composition containing germinated flat bean extract as an active ingredient,
The germinated flat bean extract is obtained from germinated flat beans in a culture medium to which cinnamic acid is added,
The cinnamic acid concentration of the culture solution to which the cinnamic acid is added is 0.50 to 1.00 mM, characterized in that the composition for external application for skin.
발아 납작콩 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 피부 외용제 조성물로서,
상기 발아 납작콩 추출물은 계피산이 첨가된 배양액에서 발아된 납작콩으로부터 얻어지고,
상기 계피산이 첨가된 배양액의 계피산 농도는 0.50~1.00mM인 것을 특징으로 하는, 피부 외용제 조성물.
A composition for external application for skin wrinkle improvement containing germinated flat bean extract as an active ingredient, the composition comprising:
The germinated flat bean extract is obtained from germinated flat beans in a culture medium to which cinnamic acid is added,
The cinnamic acid concentration of the culture solution to which the cinnamic acid is added is 0.50 to 1.00 mM, characterized in that the composition for external application for skin.
발아 납작콩 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 탄력 개선용 피부 외용제 조성물로서,
상기 발아 납작콩 추출물은 계피산이 첨가된 배양액에서 발아된 납작콩으로부터 얻어지고,
상기 계피산이 첨가된 배양액의 계피산 농도는 0.50~1.00mM인 것을 특징으로 하는, 피부 외용제 조성물.
A composition for external application for skin for improving skin elasticity containing germinated flat bean extract as an active ingredient, the composition comprising:
The germinated flat bean extract is obtained from germinated flat beans in a culture medium to which cinnamic acid is added,
The cinnamic acid concentration of the culture solution to which the cinnamic acid is added is 0.50 to 1.00 mM, characterized in that the composition for external application for skin.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 발아 납작콩 추출물은
a) 계피산이 첨가된 배양액을 이용하여 납작콩을 발아시키는 단계;
b) 상기 a) 단계에서 발아된 납작콩을 건조시킨 다음 분말화하는 단계;
c) 상기 b) 단계에서 분말화된 납작콩 분말을 극성용매와 혼합한 후 끓임으로써 일차 추출하는 단계;
d) 상기 c) 단계에서 얻어진 일차 추출물을 여과하는 단계;
e) 상기 d) 단계에서 여과된 추출물을 저극성 또는 비극성 유기용매로 이차 추출하는 단계; 및
f) 상기 e) 단계에서 얻어진 최종 추출물을 감압 농축하는 단계;
를 포함하는 공정으로 제조되는 것을 특징으로 하는, 피부 외용제 조성물.
The method according to any one of claims 1 to 3, wherein the germinated flat bean extract is
a) germinating flat beans using a culture solution to which cinnamic acid is added;
b) drying the flat beans germinated in step a) and then pulverizing them;
c) mixing the flat bean powder powdered in step b) with a polar solvent and then boiling the powder for primary extraction;
d) filtering the primary extract obtained in step c);
e) secondary extraction of the extract filtered in step d) with a low- or non-polar organic solvent; and
f) concentrating the final extract obtained in step e) under reduced pressure;
A composition for external application for skin, characterized in that it is prepared by a process comprising a.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 계피산 농도는 0.75mM인 것을 특징으로 하는, 피부 외용제 조성물.4. The method according to any one of claims 1 to 3, wherein the The composition for external application for skin, characterized in that the concentration of cinnamic acid is 0.75mM. 제4항에 있어서, 상기 c)단계의 극성용매는 탄소수 1 내지 3의 알코올이고, 상기 e) 단계의 저극성 또는 비극성 유기용매는 에틸아세테이트인 것을 특징으로 하는, 피부 외용제 조성물.The composition for external application for skin according to claim 4, wherein the polar solvent in step c) is an alcohol having 1 to 3 carbon atoms, and the low polar or non-polar organic solvent in step e) is ethyl acetate. 제4항에 있어서, 상기 d) 단계의 여과는 여과포로 1차 여과하고, 1차 여과된 여과액을 4-15℃에서 숙성시킨 뒤, 여과지로 2차 여과하는 것을 특징으로 하는, 피부 외용제 조성물.[Claim 5] The composition for external application for skin according to claim 4, wherein the filtration in step d) is first filtered with a filter cloth, the first filtered filtrate is aged at 4-15° C., and second filtered with a filter paper. . 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 발아 납작콩 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.01~10중량%로 함유되는 것을 특징으로 하는, 피부 외용제 조성물.The composition for external application for skin according to any one of claims 1 to 3, wherein the germinated flat bean extract is contained in an amount of 0.01 to 10% by weight based on the total weight of the composition. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 진피섬유아세포성장인자의 발현을 촉진시키는 것을 특징으로 하는, 피부 외용제 조성물.The composition for external application for skin according to any one of claims 1 to 3, wherein the composition promotes the expression of dermal fibroblast growth factor. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 콜라겐 분해 효소의 발현을 억제하는 것을 특징으로 하는, 피부 외용제 조성물.The composition for external application for skin according to any one of claims 1 to 3, wherein the composition inhibits the expression of a collagen-degrading enzyme.
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