JP2017525686A

JP2017525686A - 薬物のバイオアベイラビリティーの増加および／または眼作用の持続方法

Info

Publication number: JP2017525686A
Application number: JP2017504698A
Authority: JP
Inventors: アジャイ、ジャイシン、コペイド; アリンダム、ハルダー
Original assignee: Sun Pharma Advanced Research Co Ltd
Current assignee: Sun Pharma Advanced Research Co Ltd
Priority date: 2014-07-28
Filing date: 2015-07-24
Publication date: 2017-09-07
Anticipated expiration: 2035-07-24
Also published as: US20210308130A1; US20170239243A1; WO2016016908A1; EP3179982B1; US10172852B2; EP3954362A1; US20190070176A1; US11058684B2; ES2951202T3; JP6567648B2; EP3179982A4; US11951106B2; PL3179982T3; US20230098352A1; US11931359B2; EP3179982A1

Abstract

本発明は、水性懸濁液剤を眼に点眼することを含む、薬物のバイオアベイラビリティーの増加および／または眼作用の持続方法であって、該水性懸濁液剤は、薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターであって、前記クラスターが少なくとも２マイクロメートルのＤ５０値を有し、前記薬物搭載ナノ樹脂粒子が、Ｄ９０値が７０ナノメートル〜９００ナノメートルであることを特徴とする粒径分布を有する前記薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターを含んでなる前記方法に関する。本発明は、薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターであって、前記クラスターは少なくとも２マイクロメートルのＤ５０値を有し、前記薬物搭載ナノ樹脂粒子は、Ｄ９０値が７０ナノメートル〜９００ナノメートルであることを特徴とする粒径分布を有する前記薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターを含んでなる水性懸濁液剤にさらに関する。

Description

本発明は、水性懸濁液剤を眼に点眼することを含む、薬物のバイオアベイラビリティーの増加および／または眼作用の持続方法であって、該水性懸濁液剤は、（ａ）薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターであって、前記クラスターは少なくとも２マイクロメートルのＤ_５０値を有し、前記薬物搭載ナノ樹脂粒子は、Ｄ_９０値が７０ナノメートル〜９００ナノメートルであることを特徴とする粒径分布を有する前記薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスター、および（ｂ）懸濁剤を含んでなる前記方法に関する。

本発明は、（ａ）薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターであって、前記クラスターは少なくとも２マイクロメートルのＤ_５０値を有し、前記薬物搭載ナノ樹脂粒子は、Ｄ_９０値が７０ナノメートル〜９００ナノメートルであることを特徴とする粒径分布を有する前記薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスター、および（ｂ）懸濁剤を含んでなる水性懸濁液剤にも関する。

点眼薬送達は、薬学者が直面する最も挑戦的な試みのひとつである。眼は、独立した生理機能を有するいくつかの広範囲な構造を含む解剖学的にも生理学的にも唯一の器官である。眼の複雑さにより薬物送達ストラテジーに独特のチャレンジが提供される。典型的には、点眼として局所的に適用された薬物の眼のバイオアベイラビリティーは非常に不良である。眼における薬物吸収は眼の適切な機能を保証するいくつかの保護機構、および他の付随因子、例えば：点眼液剤の鼻涙ドレナージ；流涙および涙液交換；短い角膜接触時間；代謝；涙の蒸発；非生産的吸収／吸着；限定された角膜面積および不良角膜透過性；ならびに涙液タンパク質による結合により大幅に限定される。これらの因子は、眼科薬吸収および薬物処分に対して大きな影響を有し、低い眼科薬バイオアベイラビリティーをもたらす。従って、最適な薬物のバイオアベイラビリティーを得る眼科薬送達系の開発は挑戦すべきものである。良好な角膜浸透、角膜上皮との接触時間の持続および眼に刺激性のない好適なレオロジー特性を有する処方物の使用を促進する効果的角膜適用を含むいくつかの因子を考慮することが重要である。この挑戦は、治療が非常に難しい病性網膜症、緑内障性視神経症、加齢黄斑変性等のような眼の後部組織関連疾患の場合にますますより困難となる。眼の前面または前部への眼科薬送達に使用される方法は、かなり異なり、皮下または眼後部治療よりかなりリスクが低い。後部点眼送達に利用可能な方法は複雑であり、例えば、所望の後部組織への注射、持続性インプラント、イオン注入薬物送達等であり、これらは感染、眼内出血および網膜障害の大きなリスクを伴い得る。従来の点眼液剤、懸濁液剤および軟膏剤形は、もはや眼後部に影響を及ぼす疾患だけでなく前部のいくつかの現存ずる悪性疾患と戦うのに十分でない。さらに、従来の処方物は、所望の治療効果を得るために時々１日４〜５回の頻繁な投与を必要とし、これにより患者がコンプライアンスをなくす。

眼への継続的送達の提供または角膜透過性促進のいずれかにより薬物のバイオアベイラビリティーを増強する目的を有する先発の点眼送達系で近年市販化されたもの、開発中であるものは少ない。局所眼科薬送達における近年の進展は、イオン注入薬送達、インサイツゲル化系、デンドリマー、浸透促進剤、脂肪乳剤、眼球インサート、および部位特異性薬物送達系から広がってきている。にもかかわらず、成功裏に市場に現れた薬物送達系はほとんどなく：現在、製品の約９５％は従来の点眼びんにより送達される。前述の問題を克服する効率的な点眼薬送達系／処方物の開発が絶えず必要とされている。点眼投与時に、薬物の眼作用を持続し、眼の適用に関連する刺激または他の不快を最小化して、眼前部ならびに眼後部の両方において薬物の眼のバイオアベイラビリティーを増加させる効率的な点眼薬送達系が必要とされている。

本発明はこの必要性を満足し、ナノ樹脂粒子を含んでなる新規な懸濁液剤の形態の新規な点眼薬送達系を提供する。本発明は、眼への本発明の新規水性懸濁液剤の点眼により薬物のバイオアベイラビリティーの増加方法および／または眼作用の持続方法を提供する。本発明による後眼部内に薬物を送達する能力は、治療が困難である該後部疾患の治療に好適となる。

本発明は、水性懸濁液剤を眼に点眼することを含む、薬物のバイオアベイラビリティーの増加および／または眼作用の持続方法であって、該水性懸濁液剤は、（ａ）薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターであって、前記クラスターは少なくとも２マイクロメートルのＤ_５０値を有し、前記薬物搭載ナノ樹脂粒子は、Ｄ_９０値が７０ナノメートル〜９００ナノメートルであることを特徴とする粒径分布を有する前記薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスター、および（ｂ）懸濁剤を含んでなる前記方法を提供する。

本発明は、（ａ）薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターであって、前記クラスターは少なくとも２マイクロメートルのＤ_５０値を有し、前記薬物搭載ナノ樹脂粒子は、Ｄ_９０値が７０ナノメートル〜９００ナノメートルであることを特徴とする粒径分布を有する前記薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスター、および（ｂ）懸濁剤を含んでなる水性懸濁液剤をさらに提供する。

本発明は、水性懸濁液剤を提供することを含む、薬物のバイオアベイラビリティーの増加および／または眼作用の持続方法であって、該水性懸濁液剤は、（ａ）薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターであって、前記クラスターは少なくとも２マイクロメートルのＤ_５０値を有し、前記薬物搭載ナノ樹脂粒子は、Ｄ_９０値が７０ナノメートル〜９００ナノメートルであることを特徴とする粒径分布を有する前記薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスター、および（ｂ）懸濁剤を含んでなる前記方法も提供する。

比較例１の懸濁剤製造で使用した平均粒径５ミクロンの樹脂粒子の例証となるヒストグラムである。超音波処理によりせん断を印加して、それぞれ、１分、２分、３分、４分および５分後の粒径分布を測定したときの比較例１に従って製造した懸濁液剤中の薬物搭載樹脂粒子の粒径分布の例証となるヒストグラムである。このヒストグラムはせん断の印加に対して粒径変化がないことを示している。超音波処理によりせん断を印加して、それぞれ、１分、２分、３分、４分および５分後の粒径分布を測定したときの比較例１に従って製造した懸濁液剤中の薬物搭載樹脂粒子の粒径分布の例証となるヒストグラムである。このヒストグラムはせん断の印加に対して粒径変化がないことを示している。超音波処理によりせん断を印加して、それぞれ、１分、２分、３分、４分および５分後の粒径分布を測定したときの比較例１に従って製造した懸濁液剤中の薬物搭載樹脂粒子の粒径分布の例証となるヒストグラムである。このヒストグラムはせん断の印加に対して粒径変化がないことを示している。超音波処理によりせん断を印加して、それぞれ、１分、２分、３分、４分および５分後の粒径分布を測定したときの比較例１に従って製造した懸濁液剤中の薬物搭載樹脂粒子の粒径分布の例証となるヒストグラムである。このヒストグラムはせん断の印加に対して粒径変化がないことを示している。超音波処理によりせん断を印加して、それぞれ、１分、２分、３分、４分および５分後の粒径分布を測定したときの比較例１に従って製造した懸濁液剤中の薬物搭載樹脂粒子の粒径分布の例証となるヒストグラムである。このヒストグラムはせん断の印加に対して粒径変化がないことを示している。超音波処理によりせん断を印加して、それぞれ、１分、２分、３分、４分および５分後の粒径分布を測定したときの比較例１に従って製造した懸濁液剤中の薬物搭載樹脂粒子の粒径分布の例証となるヒストグラムである。このヒストグラムはせん断の印加に対して粒径変化がないことを示している。本発明の水性懸濁液剤の製造で使用したナノ樹脂粒子の例証となるヒストグラムである。実施例２（せん断印加なし）に従って製造した薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスター／アグロメレートの粒径分布を示すヒストグラムである。９００ｎｍ未満のＤ_９０のナノサイズ樹脂粒子をわずかに含むミクロンサイズクラスターがある。明細書の実施例７に従ってせん断を印加した場合の個々の薬物搭載ナノ樹脂粒子中にクラスター分離している薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターを示すヒストグラムを示す。明細書の実施例７に従ってせん断を印加した場合の個々の薬物搭載ナノ樹脂粒子中にクラスター分離している薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターを示すヒストグラムを示す明細書の実施例７に従ってせん断を印加した場合の個々の薬物搭載ナノ樹脂粒子中にクラスター分離している薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターを示すヒストグラムを示す明細書の実施例７に従ってせん断を印加した場合の個々の薬物搭載ナノ樹脂粒子中にクラスター分離している薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターを示すヒストグラムを示す明細書の実施例７に従ってせん断を印加した場合の個々の薬物搭載ナノ樹脂粒子中にクラスター分離している薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターを示すヒストグラムを示す本発明の実施例１１に記載の試験に従った、本発明（実施例２（Ｂ））の水性懸濁液剤および参照処方物（ブランド名：アルファガン（Ａｌｐｈａｇａｎ）（登録商標）Ｐで入手可能）の点眼後に得られる異なる眼組織のＣ_ｍａｘおよびＡＵＣ_０〜ｔの値を示す棒グラフを提供する。本発明の実施例１１に記載の試験に従った、本発明（実施例２（Ｂ））の水性懸濁液剤および参照処方物（ブランド名：アルファガン（Ａｌｐｈａｇａｎ）（登録商標）Ｐで入手可能）の点眼後に得られる異なる眼組織のＣ_ｍａｘおよびＡＵＣ_０〜ｔの値を示す棒グラフを提供する。本発明の実施例１１に記載の試験に従った、本発明（実施例２（Ｂ））の水性懸濁液剤および参照処方物（ブランド名：アルファガン（Ａｌｐｈａｇａｎ）（登録商標）Ｐで入手可能）の点眼後に得られる異なる眼組織のＣ_ｍａｘおよびＡＵＣ_０〜ｔの値を示す棒グラフを提供する。本発明、すなわち、実施例２（Ａ）の水性懸濁液剤；および実施例８に記載の試験に従った異なる時点におけるアルファガン（登録商標）Ｐの点眼時の眼圧（ｍｍＨｇ）下降を示す棒グラフを提供する。実施例９に記載の試験に従った異なる時点における、２つの試験処方物、すなわち、実施例２（Ａ）の水性懸濁液剤；実施例２（Ｂ）の水性懸濁液剤；およびアルファガン（登録商標）Ｐの点眼時の眼圧（ｍｍＨｇ）下降を示す棒グラフを提供する。

本発明に記載の薬物搭載ナノ樹脂粒子の「可逆的クラスター」とは、個々の薬物搭載ナノ樹脂粒子が、せん断印加すると個々の薬物搭載ナノ樹脂粒子にアグロメレート分離またはクラスター分離する約２ミクロメートル以上の平均径を有するアグリゲートまたはアグロメレートを形成することを意味する。

発明者らは、そのような可逆的クラスターが、眼の瞬きで得られるようなせん断印加時にクラスター分離することを見出した。

定性的に、ガラススライド上にせん断した（塗り付けることにより）試料およびせん断していない試料を観察することにより、クラスター分離を顕微鏡（マルバーン製モフォロギＧ３Ｓ−ＩＤ装置）により観察できる。

さらに本明細書の通り、クラスターのＤ_５０をせん断印加前に得られる粒径分布から得る。粒径分布をマルバーン製マスターサイザーなどの適切な粒径分析器で決定してもよい。粒径分析器の超音波処理手段を使用しないが、試料に対して機械的撹拌機による撹拌のみ行う。

クラスター懸濁液剤を超音波処理浴中に入れて、５秒間、約３３±３ｋＨｚの超音波処理周波数を用いてせん断を行い、取り出した試料の粒径分布を測定する。１分間隔後に、各工程を５回繰り返す（実施例７、図９〜１４参照）。

本発明に記載のナノ樹脂粒子または薬物搭載ナノ樹脂粒子は、個々のイオン交換樹脂粒子を意味し、Ｄ_９０値が約７０ナノメートル〜９００ナノメートルの範囲であることを特徴とする粒径分布を有する個々の粒子のクラスターやアグロメレートを意味しない。ナノ樹脂粒子の粒径分布を、上記の通り１分間隔毎に３３±３ｋＨｚの周波数５パルスを懸濁液剤にさらした後に得られた粒径分布と見なしてよい。

個々の薬物搭載ナノ樹脂粒子は、Ｄ_９０値が７０ナノメートル〜９００ナノメートル（ｎｍまたはｎｍｓ）、好ましくは２００ｎｍ〜７００ｎｍになるように粒径分布を有する。さらに、このような薬物搭載ナノ樹脂粒子は、５００ｎｍ未満の平均粒径（Ｄ_５０）を有する。好ましくは、Ｄ_５０値は、５０ナノメートル〜３５０ナノメートルである。ナノ樹脂の粒径分布は、Ｄ_１０が３００ｎｍ未満、好ましくは１０ｎｍ〜２５０ｎｍであることをさらに特徴とし得る。

本発明に従えば、可逆的クラスターは平均径が少なくとも２ミクロメートル（μｍまたはミクロン）になるように粒径分布を有する。好ましい実施形態では、Ｄ_９０が８０ミクロメートル未満、好ましくは５０ミクロメートル未満、最も好ましくは３０ミクロメートル未満になるような粒径分布となる。粒径分布は、Ｄ_５０が４０ミクロメートル未満、好ましくは２０ミクロメートル未満、より好ましくは１０ミクロメートル未満であることをさらに特徴とし得る。可逆的クラスターは、せん断印加するとアグロメレート分離またはアグリゲート分離して薬物搭載ナノ樹脂粒子を形成する。

本発明は、（ａ）薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターであって、前記クラスターは少なくとも２マイクロメートルのＤ_５０値を有し、前記薬物搭載ナノ樹脂粒子は、Ｄ_９０値が７０ナノメートル〜９００ナノメートルであることを特徴とする粒径分布を有する前記薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスター、（ｂ）懸濁剤を含んでなる水性懸濁液剤を提供する。

本発明において、薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターの水性懸濁液剤であって、前記クラスターは少なくとも２マイクロメートルのＤ_５０値を有し、前記薬物搭載ナノ樹脂粒子は、Ｄ_９０値が７０ナノメートル〜９００ナノメートルであることを特徴とする粒径分布を有し、該水性懸濁液剤が懸濁剤を含む該水性懸濁液剤を眼に点眼する場合に、薬物のバイオアベイラビリティーが増加および／または眼作用が持続することを見出した。

本発明は、水性懸濁液剤を眼に点眼することを含む、薬物のバイオアベイラビリティーの増加および／または眼作用の持続方法であって、前記水性懸濁液剤は、（ａ）薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターであって、前記クラスターは少なくとも２マイクロメートルのＤ_５０値を有し、前記薬物搭載ナノ樹脂粒子は、Ｄ_９０値が７０ナノメートル〜９００ナノメートルであることを特徴とする粒径分布を有する前記薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスター、および（ｂ）懸濁剤を含んでなる前記方法も提供する。

本発明の方法に従った適切な「薬物」としては、酸またはアルカリと塩形成可能な治療有効成分が挙げられ、イオン化できる治療有効成分が挙げられる。１つの態様に従えば、薬物としてはカチオン性薬物として公知である、酸と塩形成できるイオン性薬物が挙げられる。別の態様に従えば、薬物としてはアニオン性薬物として公知である、塩基またはアルカリと塩形成できるイオン性薬物が挙げられる。本発明に従った薬物の非限定的例としては、これに限定されないが、抗緑内障薬などの眼に使用される薬物；抗生物質または抗感染症薬；抗アレルギー薬；抗炎症薬／抗アレルギーステロイド薬；非ステロイド系抗炎症薬；うっ血除去薬；局所麻酔薬；散瞳薬が挙げられる。抗緑内障薬としては、β遮断薬などの薬物群、炭酸脱水酵素阻害薬、αアドレナリン刺激薬、プロスタグランジン、副交感神経刺激薬およびコリンエステラーゼ阻害薬が挙げられる。使用され得るプロスタグランジンの非限定的例としては、ラタノプロスト、トラボプロスト、ビマトプロスト、タフルプロスト、イソプロピルウノプロストン、８−イソプロスタグランジンーＥ２等およびその薬剤的に許容可能な塩が挙げられ；使用され得るβ−遮断薬の非限定的例としては、チモロール、レボブノロール、ベフンドール（befundol）、メチプラノロール、カルテオロール、ベタキソロール、レボベタキソロール、ベフノロール、ラベタロール、プロプラノロール、メトプロロール（metaprolol）、ブナロール、エスモロール（esmalol）、ピンドロール、ヘプノロール（hepunolol）、メチプラノロール、セリプロロール、アロチノロール（azotinolol）、ジアセトロール、アセブトロール、アテノロール、イソキサプロロールまたはその薬剤的に許容可能な塩が挙げられ；使用され得る炭酸脱水酵素阻害薬の非限定的例としては、ブリンゾラミド、ドルゾラミド、アセタゾラミド、メタゾラミド、ジクロロフェナミド等およびその薬剤的に許容可能な塩が挙げられ；使用され得るαアドレナリン刺激薬の非限定的例としては、ブリモニジン、ジピベフリン、クロニジン、およびクロニジン誘導体−ｐ−アミノクロニジン、ｐ−アセトアミドクロニジン、アプラクロニジン等ならびにその薬剤的に許容可能な塩が挙げられ；使用され得るコリンエステラーゼ阻害薬の非限定的例としては、フィゾスチグミン、エコチオパート等およびその薬剤的に許容可能な塩が挙げられ；使用され得る副交感神経刺激薬の非限定的例としては、ピロカルピン、デメカリウム等およびその薬剤的に許容可能な塩が挙げられる。抗生物質または抗感染症薬の非限定的例としては、モキシフロキサシン、ベシフロキサシン、ゲンタマイシン、ネオマイシン；エリスロマイシン、シプロフロキサシン、ポリミキシンＢ、βラクタム系抗生物質、テトラサイクリン、クロルテトラサイクリン等およびその薬剤的に許容可能な塩が挙げられ；抗アレルギー薬としては、オロパタジンエメダスチン、アゼラスチン、エピナスチン、レボカバスチン、ベポタスチン、フェニラミン、クロルフェニラミン、エピネフリン、プロエピネフリン（proepinephrine）、ノルエピネフリン、ピリラミン等およびその薬剤的に許容可能な塩が挙げられ；抗炎症薬／抗アレルギーステロイド薬としては、デキストロメトルファン、デキサメタゾン、プレドニソロン等およびその薬剤的に許容可能な塩が挙げられる。非ステロイド系抗炎症薬としては、ケトチフェン等およびその薬剤的に許容可能な塩が挙げられ；うっ血除去薬としては、オキシメタゾリン、フェニレフリン、ナファゾリン、アンタゾリン等およびその薬剤的に許容可能な塩が挙げられ；局所麻酔薬としては、プロパラカイン、リドカイン等およびその薬剤的に許容可能な塩が挙げられ；散瞳薬としては、シクロペントラート等およびその薬剤的に許容可能な塩が挙げられる。２つ以上の薬物を組み合わせて使用してもよい。アニオン性薬物である他の薬物としては、ジクロフェナク、ブロムフェナク、スルファセタミド、フルルビプロフェン、ケトロラク、ロドキサミド、スルファセタミド、クロモリン、ペミロラストもしくはその薬剤的に許容可能な塩またはその混合物が挙げられる。好ましい態様に従えば、薬物は、ブリモニジン、ドキシサイクリン、ブロムフェナク、オロパタジン、エメダスチン、ドルゾラミド、シプロフロキサシン、モキシフロキサシン、ベシフロキサシン、ゲンタマイシン、ネオマイシン、ポリミキシン、ケトチフェン、フェニレフリン、ピリラミン、ジピベフリン、オキシメタゾリン、レボカバスチン、アゼラスチン、エピナスチン、ベポタスチン、ジピベフリン、ナファゾリン、アプラクロニジン、レボブノロール、ベタキソロール、レボベタキソロール、チモロール、カルテロール、デキストロメトルファン、シクロペントラート、プロパラカイン、ピロカルピン、ジクロフェナク、スルファセタミド、フルルビプロフェン、ケトロラクあるいはその薬剤的に許容可能な塩またはその混合物から選択される。

１つの好ましい実施形態に従えば、薬物はブリモニジンまたはその薬剤的に許容可能な塩である。さらに好ましい実施形態に従えば、薬物はブリモニジン酒石酸塩である。ブリモニジン酒石酸塩は、５−ブロモ−６−（２−イミダゾリジニリデンアミノ）キノキサリンＬ−酒石酸塩として化学で公知である。ブリモニジンは緑内障に関連する眼の上昇した眼圧（ＩＯＰ）を下げるαアドレナリン刺激薬である。ブリモニジンまたはその薬剤的許容可能な塩は、治療有効量で本発明の水性懸濁液剤中に存在する。好ましい実施形態では、ブリモニジンまたはその薬剤的に許容可能な塩は０．０５重量／体積％〜０．５重量／体積％の濃度で存在する。１つの特定の実施形態では、ブリモニジン酒石酸塩は０．３５重量／体積％の濃度で存在する。別の実施形態では、本発明の水性懸濁液剤は０．１５重量／体積％の濃度でブリモニジン酒石酸塩を含有する。

本発明の１つの態様に従えば、樹脂はイオン交換樹脂である。該イオン交換樹脂は、樹脂鎖上の反復位置で共有結合している。これらの帯電基は反対の電荷の他のイオンと会合する。可動対イオンがカチオンかアニオンのどちらかに依らず、カチオンとアニオン交換樹脂を区別可能である。カチオン交換体中のマトリックスはスルホン基、カルボン酸基およびリン酸基などのイオン基を担持する。アニオン交換体中のマトリックスは第一級、第二級、第三級または第四級アンモニウム基を担持する。樹脂マトリックスはその物理的特性、生体物質に対する挙動、およびある程度までその能力を決定付ける。ブリモニジンなどのカチオン性薬物は正電荷を有するので、カチオン交換樹脂と結合できる。スルホン酸交換体は本発明の薬物樹脂酸塩水性懸濁液剤に最も頻繁に使用するカチオン交換樹脂である。概して、該スルホン酸交換体は、スルホン酸またはクロロスルホン酸との処理により、重合後に導入されたスルホン酸基を有する架橋ポリスチレンである。本発明で使用され得る適切なカチオン交換樹脂としては、ローム・アンド・ハース社（ＲｏｈｍａｎｄＨａａｓ）市販の商品名アンバーライト（Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ）（商標）ＩＲＰ６９などのポリスチレンジビニルベンゼンスルホン酸ナトリウム；ローム・アンド・ハース社市販の商品名アンバーライト（商標）ＩＲＰ６４などのメタクリル酸とジビニルベンゼンとの多孔性共重合体から誘導されるポラクリレックスレジン；ローム・アンド・ハース社市販の商品名アンバーライト（商標）ＩＲＰ８８などのメタクリル酸とジビニルベンゼンから誘導された架橋重合体のカリウム塩であるポラクリリンカリウムが挙げられるが、これに限定されない。ＩｏｎＥｘｃｈａｎｇｅＩｎｄｉａＬｔｄ．社市販のインディオン（ＩＮＤＩＯＮ）（商標）２３４；インディオン（商標）２６４；インディオン（商標）２０４；インディオン（商標）２１４などの商品名の樹脂も使用してよい。１つの実施形態では、本発明に使用される好ましい樹脂はスチレンとジビニルベンゼンとのスルホン酸共重合体から誘導されたアンバーライトＩＲＰ６９である。アンバーライトＩＲＰ−６９は医薬グレード強カチオン交換樹脂であり、構造的には、ジビニルベンゼンと架橋したポリスチレンスルホン酸樹脂、すなわち、ポリスチレンジビニルベンゼンスルホン酸塩である。アンバーライトＩＲＰ−６９樹脂はローム・アンド・ハース社から市販されている。この樹脂中の可動または交換可能なカチオンはナトリウムであり、カチオン性（塩基性）化学種と交換または置換できる。本発明のイオン交換送達系の実施形態では、正電荷を帯びたカチオン性薬物はアンバーライト樹脂の負電荷を帯びたスルホン酸基と結合する。

適切に、本発明のいくつかの実施形態では、イオン交換樹脂はアニオン交換樹脂であり、薬物は事実上アニオン性である。アニオン性のイオン性薬物の非限定的例としては、ジクロフェナク、ブロムフェナク、スルファセタミド、フルルビプロフェン、ロドキサミド、スルファセタミド、クロモリン、ペミロラスト、ケトロラクもしくはその薬剤的に許容可能な塩またはその混合物が挙げられる。アニオン交換樹脂中のマトリックスは、概して、第一級、第二級、第三級または第四級アンモニウム基を担持する。本発明に使用され得る適切なアニオン交換樹脂としては、ローム・アンド・ハース社市販の商品名デュオライト（Ｄｕｏｌｉｔｅ）（商標）ＡＰ１４３／１０９３などのコレスチラミン樹脂；高分子スチレンジビニルベンゼンマトリックスと結合した第三級アミン官能基を有するマクロ多孔性弱塩基性アニオン樹脂であるインディオン（商標）８６０；ベンジルジメチルエタノールアミン官能基を有する架橋ポリスチレンマトリックス系強塩基ＩＩ型アニオン交換樹脂であるインディオン（商標）ＧＳ４００が挙げられるが、これに限定されない。

本発明の水性懸濁液剤中に存在するイオン交換樹脂の量は、懸濁液剤の約０．０５重量／体積％〜５．０重量／体積％の範囲であり得る。薬物に対する樹脂の重量比は、０．１：１〜１：０．１の範囲、より好ましくは０．３：１〜１：０．３の範囲であり得る。１つの好ましい実施形態では、ナノ樹脂粒子と薬物との重量比は約１：１である。本発明に従って使用するナノ樹脂粒子は、Ｄ_９０値が７０ｎｍ〜９００ｎｍ、好ましくは２００ｎｍ〜７００ｎｍであると特徴付けられる粒径分布を有する。

水性懸濁液剤は１つ以上の懸濁剤を含んでもよい。該懸濁剤を使用して懸濁液剤の粘度を上昇させたり、ナノ樹脂粒子をミクロン径クラスター中にクラスター化させたり、懸濁液剤のケーキングを防止する。適切な懸濁剤がアニオン性ポリマー、非イオン性ポリマーまたはその混合物から選択される。アニオン性ポリマーをカーボポールとしても公知のカルボキシビニルポリマーまたはカルボマーの様なアクリル酸ポリマーから成る群から選択してもよい。カーボポール９３４Ｐ、９７４、１３４２等を含むカルボマーの様々なグレードを本発明に使用してもよい。アクリル酸ポリマーは、本発明の水性懸濁液剤中、該懸濁液剤の約０．０１重量／体積％〜０．５重量／体積％の範囲の量で存在し得る。使用できる他のアニオン性ポリマーとしては、ヒアルロン酸ナトリウム；カルボキシメチルセルロースナトリウム；グアーガム；コンドロイチン硫酸；アルギン酸ナトリウムが挙げられるが、これに限定されない。特に、使用され得る好ましいアニオン性ポリマーとしては、カーボポール９７４Ｐが挙げられる。このアニオン性ポリマーを懸濁液剤の０．１％（ｗ／ｖ）の量で使用するのが最も好ましい。本発明に従って使用できる非イオン性ポリマーを、ポリビニルピロリドン、ソルプラス（ｓｏｌｕｐｌｕｓ）−ポリビニルカプロラクタム−ポリビニル酢酸−ＰＥＧグラフト共重合体、ポロキサマー、ポリビニルアルコール、ポリプロピレングリコール、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース等のようなセルロース誘導体から成る群から選択してもよい。非イオン性ポリマーは、本発明の水性懸濁液剤中、該懸濁液剤の約０．１重量／体積％〜約５．０重量／体積％の範囲の量で存在してもよい。使用され得る好ましい非イオン性ポリマーとしては、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよびポリビニルピロリドンが挙げられる。ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ヒプロメロースまたはＨＰＭＣまたはメトセルとしても公知）およびポリビニルピロリドン（ポビドンまたはＰＶＰまたはプラスドン）の様々な医薬グレードを使用してもよい。本発明の懸濁液剤で使用できるポリビニルピロリドンの好ましいグレードとしては、ＰＶＰＫ−３０、ＰＶＰＫ−２５、ＰＶＰＫ−５０；ＰＶＰＫ−６０およびＰＶＰＫ−９０が挙げられる。水性懸濁液剤中、該懸濁液剤の約０．５重量／体積％〜約３．０重量／体積％の範囲の量で存在してもよい。本発明の水性懸濁液剤で使用される最も好ましいグレードは、ＰＶＰＫ−９０であり、その１０％（ｗ／ｖ）水溶液は２０℃において約３００．０ｃｐｓ〜約７００．０ｃｐｓの範囲の動粘度を有し、約１，０００，０００〜１，５００，０００のおおよその分子量を有する。好ましい実施形態では、ポリビニルピロリドンＰＶＰＫ−９０を該懸濁液剤の１．２％（ｗ／ｖ）の量で使用する。本発明の水性懸濁液剤で使用するため選択され得るヒドロキシプロピルメチルセルロースの好ましいグレードとしては、メトセルＥ（ＵＳＰグレード２９１０／ヒプロメロース２９１０）；メトセルＦ（ＵＳＰグレード２９０６／ヒプロメロース２９０６）；メトセルＡ１５（プレミアムＬＶ）；メトセルＡ４Ｃ（プレミアム）；メトセルＡ１５Ｃ（プレミアム）；メトセルＡ４Ｍ（プレミアム）、ＨＰＭＣＵＳＰグレード１８２８等が挙げられるが、これに限定されない。本発明の水性懸濁液剤中、該懸濁液剤の約０．５重量／体積％〜約３．０重量／体積％の範囲の量で存在してもよい。最も好ましい実施形態では、水性懸濁液剤は、０．３％（ｗ／ｖ）の量でヒプロメロース２９１０を含んでなる。懸濁剤の補助として、ナノ樹脂粒子のフロキュレーションも電解質により補助し得る。

本発明に従った水性懸濁液剤は約２ｃｐｓ〜２０００ｃｐｓ、好ましくは、約５ｃｐｓ〜４００ｃｐｓの範囲の粘度を有し得る。該水性懸濁液剤の粘度を、標準条件でＢ型粘度計によるなどの公知の技術および装置により測定し得る。なお、本発明の１つの実施形態に従った水性懸濁液剤は、眼への点眼時にその粘度を維持する、すなわち、該粘度はナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、亜鉛、塩素イオン、および重炭酸塩などの様々なイオンを含む眼液と接触時に実質的に変化しない。

本発明に従った水性懸濁液剤は、キレート剤、防腐剤および防腐剤用アジュバントなどの他の薬剤的に許容可能な賦形剤をさらに含んでもよい。該水性懸濁液剤は、１つ以上の浸透物質／張度調整剤、１つ以上の薬剤的に許容可能な緩衝剤および／またはｐＨ調整剤をさらに含んでもよい。これらの賦形剤を、注射用水などの薬剤的に許容可能な媒体中に溶解または分散してもよい。

点眼薬に適切な最適ｐＨに達成し、次いで維持するために、本発明の水性懸濁液剤は適切な量でｐＨ調整剤および／または緩衝剤を本質的に含む。該水性懸濁液剤のためのｐＨの好ましい範囲は約５．０〜約８．０、好ましくは７．０〜８．０である。最も好ましいｐＨは約７．４である。本発明の水性懸濁液剤は、トロメタミン、酢酸またはその塩、ホウ酸またはその塩、リン酸またはその塩、クエン酸またはその塩、酒石酸またはその塩、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、トロメタモール等およびその混合物を含む。特に、本発明の水性懸濁液剤で使用され得る好ましいｐＨ調整剤としては、トロメタミン、酢酸、塩酸、炭酸ナトリウムおよび水酸化ナトリウムが挙げられ、最も好ましくはトロメタミンである。

本発明の水性懸濁液剤は、ヒトの眼に存在する眼液に対して等張性であることが必要であり、２５０〜３７５ｍＯｓｍ（ミリオスモル）／ｋｇの重量モル浸透圧濃度により特徴付けられる。浸透圧を浸透性／等張性調整剤の添加により調整する。ヒトの眼に存在する眼液に対して等張性にするために本発明の水性懸濁液剤で使用され得る浸透物質は、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、臭化ナトリウム、マンニトール、グリセロール、ソルビトール、プロピレングリコール、ブドウ糖、ショ糖等およびその混合物を含む群から選択される。これらを所望の浸透性を維持するように適切な量で使用する。本発明の好ましい実施形態では、マンニトールなどの非イオン性浸透物質を浸透物質として使用する。マンニトールは、本発明の水性懸濁液剤中、約２．０％〜約６．０％（ｗ／ｖ）、好ましくは約３．０％〜約５．０％（ｗ／ｖ）の範囲の量で、最も好ましくは約４．５％（ｗ／ｖ）の量で存在し得る。

さらに、本発明の水性懸濁液剤は抗菌に有効な量で防腐剤を含んでもよい。本発明の水性懸濁液剤で使用され得る防腐剤は、塩化ベンザルコニウム（ＢＫＣ）、臭化ベンゾドデシニウム、塩化セトリモニウム、塩化ポリキセトニウムおよび塩化ベンゼトニウムなどの第四級アンモニウム化合物；酢酸フェニル水銀、硝酸フェニル水銀およびチメロサールなどの有機水銀剤；メチルおよびプロピルパラベンなどのパラベン類；パラオキシ安息香酸エチルまたはパラオキシ安息香酸ブチル；ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、アスコルビン酸、ホウ酸、ホウ砂、サリチル酸などの酸およびその薬剤的に許容可能な塩；クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェニルエタノールなどの置換アルコール類およびフェノール類；アセトアミドなどのアミド類；ポリクアド（Ｐｏｌｙｑｕａｄ）（登録商標）、ポリヘキサメチレンビグアニド、過ホウ酸ナトリウム、アミノメチルプロパノール、酢酸クロルヘキシジン、亜鉛とホウ酸塩の組合せのようなイオン性防腐剤を含有する自己保存系のような他の防腐剤等、ならびにその組合せから選択してもよいが、これに限定されない。好ましくは、本発明の眼科用懸濁液剤は防腐剤として「第四級アンモニウム化合物」を含み、特に、塩化ベンザルコニウムを含む。塩化ベンザルコニウムは、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウムの混合物と特徴付けられる。塩化ベンザルコニウムは、本発明の水性懸濁液剤中、約０．００５〜約０．０５％（ｗ／ｖ）、好ましくは０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度で使用する。該水性懸濁液剤は、Ｎ−ラウロイルザルコシンナトリウムなどのアジュバントを適切な量で防腐剤にさらに含んでもよい。使用され得る適切なキレート剤は、エデト酸二ナトリウムである。

本発明の水性懸濁液剤は、製品の有効期間、物理的および化学的に安定性を保つ。例えば、薬物ブリモニジン含有水性懸濁液剤の場合、該懸濁液剤の長期貯蔵後のブリモニジンのアッセイで有意な変化は起こらない。該薬物のアッセイは設定した限度の範囲内を保ち、分解生成物や不純物は貯蔵時に観察されなかった。また、関連物質の有意な増加はなかった。

本発明の方法が後眼部に薬物を送達可能であることが、組織分布試験から分かった。本発明による後眼部内に薬物を送達する能力は、治療が困難である該後部疾患の治療に好適となる。例えば、ブリモニジンの場合、後部への送達は、ニューロン変性防止および神経保護作用の付与の助けとなる。該方法により、眼への点眼時の眼作用の持続に加えて、薬物のバイオアベイラビリティーを増加させるだけでなく、該後部への送達を達成し得るので、これは実に驚くべき発見であった。いかなる理論によっても束縛されることを望まないが、眼への点眼時に薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターがまばたきによるせん断下クラスター分離すると考えられる。クラスター分離した個々の薬物搭載ナノ樹脂粒子が角膜表面に広がり、次いで、眼組織内に存在するイオンの影響下でイオン交換現象により該薬物を放出する。該薬物の鼻涙ドレナージが減少する。この現象全体は眼作用の持続に加えて薬物のバイオアベイラビリティーを増加させる。

好ましい実施形態では、本発明は、薬物のバイオアベイラビリティーの増加方法および／または眼作用の持続方法であって、該方法は、薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターであって、前記クラスターは少なくとも２マイクロメートルのＤ_５０値を有し、前記薬物搭載ナノ樹脂粒子は、Ｄ_９０値が７０ナノメートル〜９００ナノメートルであることを特徴とする粒径分布を有する前記薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターを含んでなる水性懸濁液剤を眼に点眼することを含む前記方法を提供し、該ナノ樹脂はカチオン交換樹脂またはアニオン交換樹脂から選択され、該水性懸濁液剤は非イオン性ポリマー、アニオン性ポリマーまたはその混合物から選択される懸濁剤をさらに含む。

好ましい実施形態では、本発明は、薬物のバイオアベイラビリティーの増加方法および／または眼作用の持続方法であって、該方法は、薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターであって、前記クラスターは少なくとも２マイクロメートルのＤ_５０値を有し、前記薬物搭載ナノ樹脂粒子は、Ｄ_９０値が７０ナノメートル〜９００ナノメートルであることを特徴とする粒径分布を有する前記薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターを含んでなる水性懸濁液剤を眼に点眼することを含む前記方法を提供し、該ナノ樹脂はカチオン交換樹脂またはアニオン交換樹脂から選択され、該水性懸濁液剤は非イオン性ポリマー、アニオン性ポリマーまたはその混合物から選択される懸濁剤をさらに含み、該薬物はブリモニジン酒石酸塩である。ブリモニジン酒石酸塩は該水性懸濁液剤の約０．０５％（ｗ／ｖ）〜０．５％（ｗ／ｖ）の範囲の濃度で存在する。ナノ樹脂粒子とブリモニジンとの重量比は約０．１：１０〜１０：０．１、好ましくは０．１：１〜１：０．１、より好ましくは０．３：１〜１：０．３の範囲であり得る。１つの好ましい実施形態では、ナノ樹脂粒子とブリモニジンとの重量比は約１：１である。１つの特定の実施形態では、イオン交換樹脂はポリスチレンジビニルベンゼンスルホン酸塩であり、該水性懸濁液剤の約０．０５％（ｗ／ｖ）〜０．５％（ｗ／ｖ）の範囲の濃度で存在する。

より特に好ましい実施形態では、本発明は、（ａ）少なくとも２マイクロメートルのＤ_５０値を有する薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターであって、前記薬物搭載ナノ樹脂粒子は、Ｄ_９０値が７０ナノメートル〜９００ナノメートルであることを特徴とする粒径分布を有する前記薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスター、および（ｂ）懸濁剤を含んでなる水性懸濁液剤を提供し；該薬物はブリモニジン酒石酸塩であり、０．３５％（ｗ／ｖ）の量で存在し；樹脂はポリスチレンジビニルベンゼンスルホン酸塩であり；懸濁剤はカーボポール、ポリビニルピロリドンおよびヒドロキシプロピルメチルセルロースの混合物である。ナノ樹脂粒子とブリモニジンとの重量比は約１：１であり、ｐＨは約７〜８である。さらに、驚くべきことに、本発明の水性懸濁液剤は、薬物をより高濃度（約０．３５％（ｗ／ｖ））含有するにもかかわらず、副作用や有害性なく非常に安全である眼科用懸濁液剤を提供する。ニュージーランド白ウサギにおいて連続１４日間の水性懸濁液剤の点眼にもかかわらず副作用が観察されなかったので、この結果は実に驚くべきことであった。この結果から、所望の容量の６倍高い点眼においてさえ、適用部位の局所毒性または全身毒性などの眼内の副作用がなかったという予期せぬ発見もあった。さらに、刺激作用、腫脹もしくは発赤、またはアレルギー反応の徴候はなかった。

この態様に従えば、本発明の水性懸濁液剤は、１日１回眼に点眼する場合、０．３５重量／体積％の濃度において、ブリモニジン酒石酸塩の眼作用を持続するだけでなくバイオアベイラビリティーを増加させることが見出された。これは、眼に該水性懸濁液剤を１日１回点眼することによる緑内障治療の有効な使用を提供する。この実施形態に従えば、バイオアベイラビリティーの増加方法および／または眼作用の持続方法は、アルファガンＰ（登録商標）と均等な有効性を提供するが、アルファガンＰ（登録商標）に処方される１日３回の点眼と比較して、少ない投与頻度、すなわち、１日１回の点眼でよいことが分かった。（明細書の実施例８に例証）本発明の方法は、低用量において最適な有効性も有利に提供する。例えば、この実施形態では、アルファガンＰ（登録商標）の０．１５％（ｗ／ｖ）処方物の１日３回投与と比較して、０．３５％（ｗ／ｖ）本発明の懸濁液剤の１日１回投与の場合において、毎日の低（より低い）用量を投与するにもかかわらず、均等な有効性を得る。

別の実施形態では、本発明は、（ａ）Ｄ_９０値が７０ナノメートル〜９００ナノメートルであることを特徴とする粒径分布を有する薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターであって、前記クラスターが少なくとも２マイクロメートルの平均径（Ｄ_５０値）を有する前記薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスター、および（ｂ）懸濁剤を含んでなる水性懸濁液剤を提供し、該薬物はブリモニジン酒石酸塩であり、０．１５％（ｗ／ｖ）の量で存在し；樹脂はポリスチレンジビニルベンゼンスルホン酸塩であり；懸濁剤はカーボポール、ポリビニルピロリドンおよびヒドロキシプロピルメチルセルロースの混合物である。ナノ樹脂粒子とブリモニジンとの重量比は約１：１であり、ｐＨは約７〜８である。１日１回点眼される水性懸濁液剤は、１日３回点眼されるアルファガンＰ（登録商標）と均等な有効性を提供することが分かった。これは、本特許明細書の実施例９で確立され提供されている。この態様に従えば、このように本発明は、上記水性懸濁液剤を提供することを含む、薬物のバイオアベイラビリティーの増加方法および／または眼作用の持続方法を提供する。本発明の方法は、毎日の低用量において最適な有効性を有利に提供する。例えば、この実施形態では、アルファガンＰ（登録商標）の０．１５％（ｗ／ｖ）処方物の１日３回投与と比較して、０．１５％（ｗ／ｖ）本発明の懸濁液剤の１日２回投与の場合において、毎日の低（より低い）用量を投与するにもかかわらず、均等な有効性を得る。

１つの特定の実施形態に従えば、本発明の水性懸濁液剤は、例えば、ブリモニジンなどのイオン性抗緑内障薬およびβ遮断薬、炭酸脱水酵素阻害薬、αアドレナリン刺激薬、プロスタグランジン、副交感神経刺激薬およびコリンエステラーゼ阻害薬から成る群から選択される付加的抗緑内障薬を含んでなる。使用され得るプロスタグランジンの非限定的例としては、ラタノプロスト、トラボプロスト、ビマトプロスト、タフルプロスト、イソプロピルウノプロストン、８−イソプロスタグランジンーＥ２、またはその塩が挙げられる。使用され得るβ遮断薬の非限定的例としては、チモロール、レボブノロール、ベフンドール（befundol）、メチプラノロールまたはその塩が挙げられる。使用され得る炭酸脱水酵素阻害薬の非限定的例としては、ブリンゾラミド、ドルゾラミド、アセタゾラミド、メタゾラミド、ジクロロフェナミドまたはその塩が挙げられる。使用され得るαアドレナリン刺激薬の非限定的例としては、ブリモニジン、アプラクロニジン、ジピベフリンが挙げられる。使用され得るコリンエステラーゼ阻害薬の非限定的例としては、フィゾスチグミン、エコチオパートが挙げられる。実際には、抗緑内障薬は組成物の０．１重量％〜１．０重量％で形成する。

１つの好ましい実施形態では、本発明の水性懸濁液剤はイオン性抗緑内障薬ブリモニジンおよびチモロールまたはその塩の組合せを含んでなる。この実施形態では、該水性懸濁液剤は高眼圧を下げて、緑内障を治療するのに適切な治療有効量で、ブリモニジン酒石酸塩およびチモロールマレイン酸塩を含んでなる。１つの特定の実施形態では、本発明の水性懸濁液剤は、０．２％（ｗ／ｖ）〜０．３５％（ｗ／ｖ）の範囲の量でブリモニジン酒石酸塩および０．１〜０．５％（ｗ／ｖ）の量でチモロールマレイン酸塩を含んでなり、該水性懸濁液剤は１日１回の眼への局所点眼により所望の治療有効性を得るのに適切である。別の特定の実施形態では、本発明の水性懸濁液剤は、約０．１％（ｗ／ｖ）の量でブリモニジン酒石酸塩および約０．５％（ｗ／ｖ）の量でチモロールマレイン酸塩を含んでなり、該水性懸濁液剤は１日２回の眼への局所点眼により所望の治療有効性を得るのに適切である。

別の好ましい実施形態では、本発明は、薬物のバイオアベイラビリティーの増加方法および／または眼作用の持続方法であって、該方法は、薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターであって、前記クラスターが少なくとも２マイクロメートルの平均径を有し、前記薬物搭載ナノ樹脂粒子が、Ｄ_９０値が７０ナノメートル〜９００ナノメートルであることを特徴とする粒径分布を有する前記薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターを含んでなる水性懸濁液剤を眼に点眼することを含む方法を提供し、該薬物がブロムフェナクナトリウムであり；該ナノ樹脂がアニオン交換樹脂、好ましくはインディオン（Ｉｎｄｉｏｎ）（商標）８６０である。この態様に従えば、本発明は上記水性懸濁液剤を眼に投与することを含む、ブロムフェナクナトリウムの眼作用の持続方法も提供する。

別の好ましい実施形態では、本発明は、薬物のバイオアベイラビリティーの増加および／または眼作用の持続方法であって、該方法は、薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターであって、前記クラスターが少なくとも２マイクロメートルの平均径を有し、前記ナノ樹脂粒子が、Ｄ_９０値が７０ナノメートル〜９００ナノメートルであることを特徴とする粒径分布を有する前記薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターを含んでなる水性懸濁液剤を眼に点眼することを含む方法を提供し、該薬物がドキシサイクリンヒクラートであり；該ナノ樹脂がカチオン交換樹脂、好ましくはポリスチレンジビニルベンゼンスルホン酸ナトリウムである。

概して上記に本発明を開示しているが、さらなる態様をさらに考察し、以下の実施例を参照して例証する。しかしながら、該実施例は単に本発明を例証するためであり、それに限定されると解釈するべきでない。

比較例１
樹脂「アンバーライト（登録商標）ＩＲＰ６９」を複数回、無水アルコールで洗浄した。ｐＨがほぼ中性（ｐＨ７．０）になるまでミリポア水で樹脂をさらに洗浄した。樹脂の粒径分布をマルバーンマスターサイザー２０００バージョン５．６０（ＭａｌｖｅｒｎＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓＬｔｄ．、英国マルバーン）を用いて測定した。樹脂のヒストグラムを図１に示す。樹脂はＤ_１０が２．３４１ミクロン、Ｄ_５０が５．１７５ミクロン、Ｄ_９０が１０．４１ミクロンである粒径分布を有する。樹脂を表１の組成物の製造に使用した。

ステンレススチール（ＳＳ３１６）ビーカー内に、全バッチサイズの１５％注射用水を取り、８５℃まで加熱した。ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ヒプロメロース２９１０）を高速撹拌して分散し、均一な分散液を得た。温度が２５℃に達するまで撹拌を続けた。別のステンレススチール（ＳＳ３１６）ビーカー内に、全バッチサイズの注射用水の一部を２５℃で入れた。ポリビニルピロリドン（ポビドンＫ−９０）を注射用水中撹拌して分散し、均一な分散液を得た。

ステンレススチール（ＳＳ３１６）ビーカー内に、全バッチサイズの１０％注射用水を取り、６５℃まで加熱した。カーボポール９７４Ｐを加熱した注射用水中撹拌して分散した。温度が２５℃に達するまで撹拌を続けた。カーボポール９７４Ｐスラリーをトロメタミンで中和（ｐＨ７．４）した。上記で得られたヒプロメロースおよびポビドンポリマー分散液をカーボポール９７４Ｐ相に連続的に添加した。ポリマー混合物を１２１℃で２０分間オートクレーブした。Ｎ−ラウロイルザルコシンナトリウムを全バッチサイズの注射用水の一部中で混合し、０．２ミクロンナイロンフィルターによりろ過後、ポリマー相に添加した。マンニトールを５０〜６０℃において注射用水の一部中に溶解し、塩化ベンザルコニウムおよびエデト酸二ナトリウムを添加して透明溶液を生成した。この溶液を上記ポリマー相に添加した。全バッチサイズの１５％注射用水を容器に取り、アンバーライトＩＲＰ６９を撹拌して分散した。別の容器内に、全バッチサイズの１５％注射用水を容器に取り、ブリモニジン酒石酸塩を撹拌しながら添加して溶解した。この溶液を０．２ミクロンおよび０．４５ミクロンのナイロンフィルターによりろ過した。ろ過したブリモニジン酒石酸塩溶液を上記オートクレーブしたアンバーライトＩＲＰ６９分散液に添加して３０分間撹拌した。アンバーライトＩＲＰ６９とブリモニジン酒石酸塩分散液を上記で得られたポリマー混合物に撹拌しながら添加し、１時間撹拌を続けた。ｐＨをトロメタミン溶液で約７．４まで調整した。分散液の体積を最終的に１００％バッチサイズに調整した。この分散液を６０分間撹拌し、次いで１５０００ｒｐｍで１０分間ホモジナイズした。

懸濁液剤に対して３３±３ＫＨｚの周波数で５秒間超音波処理を行い、試料を取り出して、マルバーンマスターサイザー２０００バージョン５．６０（ＭａｌｖｅｒｎＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓＬｔｄ．、英国マルバーン）により粒径分布を測定した。５秒間のせん断／超音波処理の第一パルス印加時の粒径分布のヒストグラムを図２に示す。１分毎の間隔で、超音波処理工程とその後の粒径測定を５分まで繰り返した。図３〜７は、それぞれ、５分までの各１分の終わりにおける粒径分布のヒストグラムである。粒径分布について、表Ｎｏ．２参照。

観察：３３±３ＫＨｚの周波数で５秒間の超音波処理によるせん断印加後、薬物搭載樹脂粒子の粒径分布は５分の終わりにおいてＤ_５０が５ミクロンであったミクロン径を保持することが観察された。さらに、Ｄ_９０もせん断力による影響を受けず、１０ミクロンの範囲のままであった。

実施例１
精製ナノ樹脂の製造：樹脂「アンバーライト（登録商標）ＩＲＰ６９」をメタノールまたは無水アルコールなどの適切なアルコールを用いて複数回洗浄した。ｐＨがほぼ中性（ｐＨ７．０）になるまで加熱したミリポア水で樹脂をさらに洗浄した。洗浄した樹脂に対して湿式磨砕を行い、Ｄ_９０が９００ｎｍ未満となるナノメートル範囲まで粒径を低減した。洗浄した樹脂および安定化したジルコニアビーズを、テフロン被覆磁気ビーズを備えた容器内の注射用水に添加した。該容器をマグネチックスターラで約２４〜４８時間ウェットグラインディングして、粉砕したナノ径樹脂粒子を得た。そのように形成したスラリーを２５ミクロンのふるいにかけてビーズを取り除き、４０ミクロンのＰＰフィルターにさらに通した。上記で得た粉砕した樹脂懸濁液剤に対して、５００ｋＤ中空繊維カートリッジでダイアフィルトレーションを行い、水抽出可能な不純物を樹脂の１．０重量％未満まで低減した。粉砕した樹脂懸濁液剤を注射用水でさらに洗浄した。このスラリーを凍結乾燥して、粉砕精製樹脂の乾燥粉末体を得た。

粉砕樹脂の粒径分布をマルバーンマスターサイザー２０００バージョン５．６０（ＭａｌｖｅｒｎＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓＬｔｄ．、英国マルバーン）を用いて測定した。該樹脂のヒストグラムを図１に示す。該粒径分布は、Ｄ_１０＝０．１４８ミクロン、Ｄ_５０＝０．２４ミクロン、Ｄ_９０＝０．６０６ミクロンであった。該ナノ樹脂を実施例２〜実施例５の水性懸濁液剤の製造に使用した。

実施例２（Ａ）および２（Ｂ）

実施例２（Ａ）および２（Ｂ）の水性懸濁液剤を以下の通り製造した：

ステンレススチール（ＳＳ３１６）ビーカー内に、全バッチサイズの約１５％注射用水を取り、８５℃まで加熱した。ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ヒプロメロース２９１０）などの特定のポリマー媒体を高速撹拌して分散し、均一な分散液を得た。温度が２５℃に達するまで撹拌を続けた。別のステンレススチール（ＳＳ３１６）ビーカー内に、全バッチサイズの約１２％注射用水を２５℃において取った。ポリビニルピロリドン（ポビドンＫ−９０）を注射用水中撹拌して分散し、均一な分散液を得た。実施例２の場合、ステンレススチール（ＳＳ３１６）ビーカー内に、全バッチサイズの１０％注射用水を取り、６５℃まで加熱した。カーボポール９７４Ｐを加熱した注射用水中撹拌して分散した。温度が２５℃に達するまで撹拌を続けた。カーボポール９７４Ｐスラリーをトロメタミンで中和（ｐＨ７．４）した。上記で得られたヒプロメロースおよびポビドンポリマー分散液をカーボポール９７４Ｐ相に連続的に添加した。ポリマー混合物を１２１℃で２０分間オートクレーブした。Ｎ−ラウロイルザルコシンナトリウムを注射用水の一部中で混合し、０．２ミクロンナイロンフィルターによりろ過後、ポリマー相に添加した。マンニトールを５０〜６０℃において注射用水の一部中に溶解し、塩化ベンザルコニウムおよびエデト酸二ナトリウムを添加して透明溶液を生成した。この溶液を上記ポリマー相に添加した。全バッチサイズの注射用水の一部を容器に取り、実施例１のように得られたアンバーライトＩＲＰ６９を撹拌して分散した。この分散液を１２１℃で２０分間オートクレーブした。別の容器内に、注射用水の一部を取り、ブリモニジン酒石酸塩を撹拌しながら添加して溶解した。この溶液を０．２ミクロンおよび０．４５ミクロンのナイロンフィルターによりろ過した。ろ過したブリモニジン酒石酸塩溶液を上記オートクレーブしたアンバーライトＩＲＰ６９分散液に添加して３０分間撹拌した。

アンバーライトＩＲＰ６９とブリモニジン酒石酸塩分散液を上記で得られたポリマー混合物に撹拌しながら添加し、約３０分〜１時間撹拌を続けた。分散液の体積を最終的に１００％バッチサイズに調整した。この分散液を約６０分間撹拌し、次いで１５０００ｒｐｍで１０分間ホモジナイズした。ｐＨをトロメタミン溶液で約７．４まで調整した。実施例２（Ａ）の水性懸濁液剤の粘度をＢ型粘度計を用いて測定し、１９．７ｃｐｓであると分かった。

実施例３〜５
実施例３〜５の水性懸濁液剤を、ＨＰＭＣおよびＰＶＰの添加工程を除き、上記と同様にして製造した。

実施例３〜５の水性懸濁液剤の粘度を、Ｂ型粘度計を用いて測定した。粘度は、それぞれ、８．２ｃｐｓ、１２．０ｃｐｓおよび９７．９ｃｐｓであると分かった。

実施例６
化学的安定性評価を行い、そのために、実施例２（Ａ）の水性懸濁液剤を５ｍｌ乳白色ＬＤＰＥ容器内に満たした。実施例２（Ａ）の水性懸濁液剤で満たされたびんを加速安定性条件に付し、製品の有効期間中の貯蔵安定性を決定した。該びんを異なる条件に保管した。該びんを「中心から離れた」位置だけでなく真っ直ぐに保った。ブリモニジンのアッセイ観察を以下に示す。

表５および表６の結果は、長期貯蔵後のブリモニジンのアッセイの有意な変化はなかったことを示している。該薬物のアッセイは設定した限度の範囲内を保ち、分解生成物や不純物は貯蔵時に観察されなかった。また、関連物質の有意な増加はなかった。本発明の懸濁液剤は、製品の有効期間、化学的に安定性を保った。該懸濁液剤は室温安定性がある。

実施例７
実施例は、まばたきからもたらされるせん断などのせん断を行った場合の個々の薬物搭載ナノ樹脂粒子へのクラスター分離する、実施例２（Ａ）で懸濁した薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターに対するせん断の効果について説明している。開始時およびせん断印加時に、この効果を粒径分布に対して測定した。

手順：被験試料を、超音波洗浄器（モデルタイプ：ＭＣ−１０９およびＳＩｎｏ−１９０９：ＯｓｃａｒＵｌｔｒａｓｏｎｉｃＰｖｔ．Ｌｔｄ．製）で懸濁液剤を含むバイアルに入れることによりせん断に付し、３３±３ｋＨｚの周波数で５秒間超音波処理によってせん断を印加し、試料を取り出して粒径分布を測定した。１分間隔後に、各工程を５回繰り返す。

粒径測定をマルバーンマスターサイザー２０００バージョン５．６０（ＭａｌｖｅｒｎＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓＬｔｄ．、英国マルバーン）を用いて行ったが、分析計の超音波処理手段を使用しなかった。該試料に対して機械的撹拌機による中程度の撹拌のみ行った。観察結果を下表７に纏めている。

超音波処理前に実施例２（Ａ）の懸濁液剤の粒径分布のヒストグラムを図９に示す。それから、懸濁液剤に対して３３±３ＫＨｚの周波数で５秒間超音波処理を行い、試料を取り出して粒径分布を測定した。５秒間のせん断／超音波処理の第一パルス印加時の粒径分布のヒストグラムを図１０に示す。１分毎の間隔で、超音波処理工程とその後のマルバーンによる粒径測定を５分まで繰り返した。

図１１〜１４は、それぞれ、５分までの各１分の終わりにおける粒径分布のヒストグラムである。粒径分布について、上記表Ｎｏ．７参照。

観察：実施例２（Ａ）の薬物搭載ナノ樹脂粒子のクラスターがせん断を該水性懸濁液剤に印加したときに完全に崩壊したことが分かった。これは、表７および図９〜１４に示すようにせん断／超音波の印加時に観察された粒径の減少により証明された。薬物−樹脂ナノ粒子のＤ_５０は最初約１９．５ミクロンであり、一定な５分間隔のせん断印加時に崩壊し、０．２１３ミクロン（２１３ｎｍ）のＤ_５０を有する個々の薬物−樹脂ナノ粒子に転換した。

図９〜１４は、個々の薬物−樹脂粒子の粒子である９００ｎｍ未満の粒子はいつも残り、一方、同時に、せん断印加時に個々のナノ樹脂粒子にアグロメレート分離するＤ_５０＞２ミクロンを有する薬物搭載ナノ樹脂粒子のクラスターがあることを示している。４分および５分におけるせん断印加に対応する図１３〜１４は、大きく個々のナノ樹脂粒子を示し、明細書の全目的のため、該個々の薬物搭載ナノ樹脂粒子の粒径分布を示すと解釈される。

これと反対に、比較例１の場合、崩壊はなく、粒径は変化しなかった。このことは表２および図２〜７から明白である。懸濁された薬物−樹脂粒子のＤ_５０は、最初約５．２ミクロンであり、一定な５分間隔のせん断印加後でさえ、粒径は変化せず、ほとんど同じ、すなわち、５．１７６ミクロンのままであった。

実施例８
１日１回投与された実施例２（Ａ）の懸濁液剤の有効性（眼圧低下効果）をニュージーランド白（ＮＺＷ）ウサギで試験した。これを、１日３回投与されるアルファガン（登録商標）Ｐの０．１５％（ｗ／ｖ）および１日１回投与される偽薬と比較した。０．２ｍｌデキサメタゾン（Ｓｏｌｏｄｅｘ（登録商標）点眼０．１％（ｗ／ｖ））を１０日の間隔をおいて２回の硝子体内注射により雄ＮＺＷウサギに高眼圧症を片側性に（すなわち、左眼、コントロールとして右眼）導入した。反対側の眼と比較した眼圧の有意な上昇（＞６ｍｍＨｇ）を６０日まで持続するデキサメタゾンの第一注射の２０日目から確証し；眼圧に対するブリモニジン懸濁液剤を用いた治療効果をこの期間中評価した。眼圧上昇に基づいて動物を３つの異なる治療群−実施例２（Ａ）の懸濁液剤、｛試験｝（０．３５％（ｗ／ｖ））；アルファガン（登録商標）Ｐ、０．１５％（ｗ／ｖ）および偽薬にランダムに分け；各群は５つの動物を有した。用量投与の期間は２１日だった。

連続した２１日間、実施例２（Ａ）の水性懸濁液剤（０．３５％（ｗ／ｖ））３５μｌおよび偽薬３５μｌを１日１回（午前８時）点眼し、参照処方物アルファガン（登録商標）Ｐ（ブリモニジン酒石酸塩水溶液、０．１５％（ｗ／ｖ））３５μｌを１日３回（午前８時、午後２時および午後８時）点眼した。２１日の治療期間中、１日目、３日目、４日目、７日目、１０日目、１３日目、１６日目、１９日目および２１日目に、１日３回、午前７時｛すなわち、実施例２（Ａ）の投薬後２３時間目、およびアルファガン（登録商標）Ｐの投薬後１１時間目、「０時間」と図中に示されている｝；午前１０時（投薬後２時間）および午後１時（投薬後５時間）に、各動物の各眼における眼圧を測定した。治療の中止後、２２日目の午前７時および２３日目の午前７時と午前１０時に眼圧を測定した。異なる時点における眼圧変化についての観察を図１８に示す。

観察および推論：１日１回投与する場合、実施例２（Ａ）の水性懸濁液剤の眼への局所送達は、その第一投与の約４８時間目（３日目）に測定した場合に眼圧の統計的に有意な低下を起こした。眼圧の有意な低下を２２日目、すなわち、最終投与後２４時間目まで観察した。

アルファガン（登録商標）Ｐの局所点眼（０．１５％、１日３回）は、その第一投与の７日目（すなわち、６日目の最終投与後１２時間目）に測定した場合にＩＯＰの統計的に有意な低下を起こした。２１日目（すなわち、２１日目の第一投与後５時間目）までＩＯＰの有意な低下を観察した。１３日目、１６日目、１９日目および２１日目に、前日の最終投与後約１２時間にアルファガン（登録商標）Ｐ治療群において、ＩＯＰの低下は統計的に有意でなかった。本発明の水性懸濁液剤が１日１回の投与計画において眼圧低下効果の持続を提供したと結論され得る。この効果は、アルファガン（登録商標）Ｐ（ブリモニジン酒石酸塩水溶液、０．１５％（ｗ／ｖ））の１日３回投与と同程度である。

実施例９
この実施例は、眼に対する薬物「ブリモニジン酒石酸塩」の眼作用の持続方法であって、前記方法が本発明の水性懸濁液剤の投与を含む前記方法を例証する。１日１回投与された実施例２（Ａ）の懸濁液剤（ブリモニジン酒石酸塩０．３５％（ｗ／ｖ））、ならびに１日２回投与された実施例２（Ｂ）の本発明の別の懸濁液剤（ブリモニジン酒石酸塩０．１５％（ｗ／ｖ））の有効性（眼圧低下効果）をＮＺＷウサギで試験した。これを、１日３回投与されるアルファガン（登録商標）Ｐの０．１５％（ｗ／ｖ）と比較した。

雄ＮＺＷウサギ［５〜８ヶ月（受入時）；１．４〜３．２ｋｇ］を試験用に使用した。１日目、各群に５匹の動物から成る以下のように４群に動物を分けた。
・偽薬
・ブリモニジン酒石酸塩水性懸濁液剤、実施例２（Ａ）０．３５％（ｗ／ｖ）−被験物質１
・ブリモニジン酒石酸塩水性懸濁液剤、実施例２（Ｂ）０．１５％（ｗ／ｖ）−被験物質２
・アルファガン（登録商標）Ｐ、０．１５％（ｗ／ｖ）−参照処方物

各動物の左目を指定して１０日の治療期間（３日目〜１２日目）それぞれの薬物液剤（体積３５μｌ）を受けた。ニューマトノメーターモデル３０クラシック（商標）（ライヘルト社、米国）を用いて治療前２日間（１日目〜２日目）午前８時および午後６時および３日目午前８時に各動物の両眼について眼圧の治療前測定を行い、４８時間までの眼圧平均値を開始（ベースライン）眼圧の読みとして見なした。眼圧測定中、各動物を鎮静なしで抑制装置内に拘束した。ニューマトノメータープローブを角膜上に軽く置き、１０〜１５秒間静止させた。プローブを水平位置に角膜上全体に置いて、５つの連続した読みを記録し、各々はスクリーンに表示された標準偏差値＜１であった。各使用後に綿棒（食塩水に浸した）に優しく接触させることによりニューマトノメータープローブフィルターを洗浄し、ティッシュペーパーで拭き取った。３日目、５日目、７日目、９日目および１１日目に、眼圧を午前８時に測定し、眼圧測定直後に、偽薬；被験物質１；被験物質２；参照物質の各々３５μｌを各それぞれの指定動物の左眼の眼内に点眼した。午前１０時および午後２時、すなわち、偽薬／被験物質／参照物質点眼後それぞれ２時間目および６時間目に、眼圧の読みを上記のように測定した。午後２時に、参照物質３５μｌをその動物群に再度点眼した。午後８時にも、偽薬または被被験物質２または参照物質の３５μｌをその動物群に点眼した。

４日目、６日目、８日目および１０日目、午前８時に、偽薬または被験物質１または被験物質２または参照物質を各それぞれの指定動物の左眼の眼内に点眼した。午後２時に、参照物質３５μｌをその動物群に再度点眼した。午後８時にも、偽薬または被被験物質２または参照物質の３５μｌをその動物群に点眼した。１３日目および１４日目、眼圧を午前８時に測定した。試験懸濁液剤の眼圧低下％をそれぞれの群の開始（ベースライン）眼圧読みに関して算出した。異なる時点における眼圧変化についての観察を図１９に示す。

観察および推論：実施例２（Ａ）の水性懸濁液剤の１日１回の眼内点眼（０．３５％（ｗ／ｖ））および実施例２（Ｂ）の水性懸濁液剤の１日２回の点眼（０．１５％（ｗ／ｖ））；またはアルファガン（登録商標）Ｐの１日３回の点眼は、ベースライン平均眼圧値と比較して、治療日毎の第一点眼後２時間目（午前１０時）における眼圧ベースラインの有意な低下を示した。第一点眼後６時間目（午後２時）および１２時間目（午前８時）においても、ベースライン平均眼圧値と比較して、眼圧低下（しかしながら、有意ではなかった）を示した。被験物質１または被験物質２または参照物質間の眼圧低下の統計的に有意な差はなかった。

本発明実施例２（Ａ）（１日１回）の水性懸濁液剤の眼圧低下の可能性は、山（点眼後２時間）と谷（点眼後２４時間）の両方において、アルファガン（登録商標）Ｐ（０．１５％、１日３回）より比較的高い。また、０．１５％ブリモニジン水性懸濁液剤、実施例２（Ｂ）は、アルファガン（登録商標）Ｐ（０．１５％、１日３回）だが、アルファガンＰ（登録商標）（０．１５％）の１日３回投与の代わりに１日２回投与と比較して比較的有効性を示した。

実施例１０
ブリモニジン酒石酸塩（０．３５％（ｗ／ｖ））を含む水性懸濁液剤の安全性／毒性プロファイルを１４日間の毎日の点眼投与後のニュージーランド白ウサギで評価した。試験の目的は、ＮＯＡＥＬ、すなわち、ヒトの眼に使用するための副作用が観察されないレベル、暴露レベルおよび安全基準を確立することであった。

試験計画−
２０匹のニュージーランド白ウサギ；（１０匹の雄と１０匹の雌）を、体重を基準に以下の５つの試験群にランダムに分けた。各群は両方の性別の２匹の動物から成った。所望の用量を点眼により投与した。
Ｇ１（食塩水｛コントロール｝、３６０μＬ／動物／日）、１回当たり３０μＬ／眼 × ６回／日
Ｇ２（偽薬、３６０μＬ／動物／日）、１回当たり３０μＬ／眼 × ６回／日
Ｇ３（低用量｛試験｝、６０μＬ／動物／日）、１回当たり３０μＬ／眼 × １回／日
Ｇ４（中用量｛試験｝、１８０μＬ／動物／日）、１回当たり３０μＬ／眼 × ３回／日
Ｇ５（高用量｛試験｝、３６０μＬ／動物／日）、１回当たり３０μＬ／眼 × ６回／日
Ｇ３、Ｇ４＆Ｇ５試験＝０．３５％（ｗ／ｖ）本発明のブリモニジン酒石酸塩水性懸濁液剤（実施例２（Ａ））

評価した試験パラメーターは、毎日の臨床徴候および死亡率；詳細な臨床徴候観察；体重；眼底検査および検死とした。結果に加えてこれらの試験パラメーター詳細を以下に説明する。この他にも、評価した他のパラメーターとして（しかしながら、本明細書にデータを示していない）：臨床病理学、組織学、生化学、プロトロンビン時間および尿検査も含む。

毎日の臨床徴候および死亡率−全動物について１日２回ケージサイド観察を行い、投薬期間中、眼を含む臨床徴候と副作用、罹患率および死亡率に注目した。これらの観察を、２〜４時間の間で投薬前および最終投薬後に１回行った。死亡率を観察するための動物チェックを、全試験期間を通して１日２回行い、所見を記録した。

コントロール、偽薬、ならびに検査項目の投薬群で死亡率は観察されなかった。１４日の投薬期間中、両眼の周囲の領域を染めている黄色がかった滲出液（たぶん過剰な被験物質から出た）がＧ４およびＧ５で観察された。他の有害な臨床徴候は観察されなかった。

詳細な臨床徴候観察−投薬開始前および投薬後１日目、７日目および１４日目に詳細な観察を行った。臨床徴候、全般的挙動または他の徴候について動物を精密に検査した。ハンドヘルドスリットランプオフサルモスコープを用いて眼を検査し、下表１０に記載のドレイズ採点法に従って所見を記録した。

詳細な臨床徴候観察中、有害な臨床徴候に関連する被験物質は全試験期間を通していずれの群にも観察されなかった。眼の詳細な検査（ドレイズ採点を含む）は有害な所見／徴候を示さなかった。全群の動物全てについて採点は０であった。

眼底検査：投与開始時に全動物の眼底検査を実施し；その後、７日目および１４日目に実施した。各観察において、動物の両眼を、ハンドヘルド検眼鏡（オフサルモスコープＨｅｉｎｅ）を用いて検査した。以下の観察に注目した：眼球、流涙、結膜、眼瞼、強膜、光に対する瞳孔反応、角膜、虹彩、前眼房、水晶体、硝子体および散瞳薬を使用した眼底。角膜のフルオレセイン染色を１４日目の投薬終了時に行った。角膜検査を、オフサルモスコープを用いて実施した。

眼底検査の間、投薬前および投薬後７日目および１４日目の間のいずれの動物の眼においても異常は検出されなかった。フルオレセインストリップ染色した角膜について、角膜ダメージの徴候も他の異常も認められなかった。

検死−投薬完了時Ｇ１〜Ｇ５の全動物を１５日目で検死した。全体の病理に注目した。頭蓋腔、胸腔および内臓腔を開き、肉眼で検査した。眼球、視神経および付属組織（眼瞼、副腺、瞬膜、結膜および眼窩筋）を肉眼で見える変化について全体的に検査した。組織の顕微鏡評価をＧ１、Ｇ２およびＧ５で行い、注目すべき病理組織の被験物質関連副作用がＧ５になかったので、より低い群まで広げなかった。脳、肝臓、主幹気管支を含む肺をＧ１、Ｇ２およびＧ５から全動物でピアレビューした。

検死の終わりに、Ｇ２雄の心臓の絶対重量、Ｇ４雄の脾臓の相対重量およびＧ４雌の副腎の相対重量の統計的に有意な増加に注目した；しかしながら、これらの変化は投薬依存のものではなく、それ故、被験物質関連副作用と見なさなかった。Ｇ２またはＧ５の雌雄動物の器官／組織の顕微鏡評価は偽薬または被験物質の投薬に関連し得る所見を示さなかった。Ｇ２およびＧ５で観察された顕微鏡の所見は偶発的／自然発生的性質のものであり、Ｇ１と同程度である。眼およびその付属組織／器官の顕微鏡検査は被験物質または偽薬関連の所見を示さなかった。要約すれば、いずれの投薬群の雄と雌について死亡率は観察されなかった。投薬期間中、たぶん過剰な被験物質から出たのが原因である眼の周囲を染めている黄色がかった滲出液が、Ｇ４およびＧ５の両方で観察された。被験物質関連臨床徴候は、毎日または詳細な臨床徴候観察中に観察されなかった。被験物質関連の有害変化は、体重、体重変化％、眼底検査、血液科、生化学、尿、絶対器官重量および雌雄の相対器官重量において注目するものはなかった。雌雄において、被験物質関連の肉眼または顕微鏡での病変は、いずれの投薬群においても眼を含むいずれの器官においても観察されなかった。

水性懸濁液剤の０．３５重量／体積％の濃度でブリモニジン酒石酸塩を含む本発明の方法の水性懸濁液剤は、連続１４日間１日最大６回まで両眼に３０μＬ／眼を投与した場合、全身毒性がないだけでなく、適用部位における局所毒性もなく、眼に副作用を生じなかったと結論した。このように、本発明の方法は、眼圧低下に関して有効性を改善するだけでなく、連続１４日間以上など長期期間投与した場合に副作用なく安全であることも分かった。

実施例１１
この実施例では、０．１５％（ｗ／ｖ）のブリモニジン酒石酸塩を含む本発明の水性懸濁液剤（実施例２（Ｂ）の懸濁液剤；本明細書で試験処方物と呼ぶ）を眼への点眼時のイオン性薬物、ブリモニジン酒石酸塩の眼組織分布を試験し、０．１５％（ｗ／ｖ）のブリモニジン酒石酸塩を含む現在市販製品アルファガン（登録商標）Ｐ（本明細書で参照処方物と呼ぶ）と比較した。ニュージーランド白ウサギで試験を行った。試験および参照処方物の点眼後４時間（ｔ＝４時間）のＣ_ｍａｘ値およびＡＵＣ_０〜ｔ値を前部および後部の眼組織において決定した。異なる組織（房水、角膜、強膜、眼瞼、結膜、水晶体、網膜、硝子体液）における試験処方物（本発明）および参照処方物（アルファガン（登録商標）Ｐ）を比較したＣ_ｍａｘ値（ｎｇ（ナノグラム）・ｍｌ^−１）およびＡＵＣ_０〜ｔ値（ｎｇ・ｍｌ^−１・時^−１）を図１５〜１７に示す。バイオアベイラビリティー（ＡＵＣ_０〜ｔ）だけでなく最大濃度（Ｃ_ｍａｘ）が、参照処方物、すなわち、アルファガン（登録商標）Ｐに対して試験処方物、すなわち、本発明の水性懸濁液剤の場合に、組織全てにおいてより高いことが明白に分かる。値の差は有意である。例えば、図１５でにおいて、試験処方物の角膜におけるＣ_ｍａｘは、１４７９３ｎｇ・ｍｌ^−１であるが、参照処方物の場合では６４９１ｎｇ・ｍｌ^−１でしかない。、試験処方物の網膜におけるＣ_ｍａｘは、１２６７ｎｇ・ｍｌ^−１であるが、参照処方物の場合では６０３ｎｇ・ｍｌ^−１でしかない（図１６）。また、試験処方物の場合では、より高い薬物量が組織に達している；例えば、網膜などの後部組織のバイオアベイラビリティー、すなわち、ＡＵＣ_０〜ｔは、参照処方物で得られた５３７ｎｇ・ｍｌ^−１・時^−１のＡＵＣ_０〜ｔに対して試験処方物の場合に１７４１ｎｇ・ｍｌ^−１・時^−１であった。従って、参照処方物に対する試験処方物の均等強度（０．１５％（ｗ／ｖ））を比較したこの試験結果から、本発明の水性懸濁液剤が従来の市販処方物（アルファガン（登録商標）Ｐ）と比較して、全組織においてバイオアベイラビリティーの増加およびより高いＣ_ｍａｘを提供することは明白である。

従って、本発明は、水性懸濁液剤を眼に点眼することを含む、薬物のバイオアベイラビリティーの増加および／または眼作用の持続方法であって、該水性懸濁液剤は、Ｄ_９０値が７０ナノメートル〜９００ナノメートルであることを特徴とする粒径分布を有する薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターを含んでなり、前記クラスターが少なくとも２ミクロメートルの平均径を有する前記方法を提供する。

実施例１２

水性懸濁液剤を以下のように製造した。

ステンレススチール（ＳＳ３１６）ビーカー内に、全バッチサイズの約１５％注射用水を取り、８５℃まで加熱した。ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ヒプロメロース２９１０）などの特定のポリマー媒体を高速撹拌して分散し、均一な分散液を得た。温度が２５℃に達するまで撹拌を続けた。別のステンレススチール（ＳＳ３１６）ビーカー内に、全バッチサイズの約１２％注射用水を２５℃において取った。ポリビニルピロリドン（ポビドンＫ−９０）を注射用水中撹拌して分散し、均一な分散液を得た。ステンレススチール（ＳＳ３１６）ビーカー内に、全バッチサイズの１０％注射用水を取り、６５℃まで加熱した。カーボポール９７４Ｐを加熱した注射用水中撹拌して分散した。温度が２５℃に達するまで撹拌を続けた。カーボポール９７４Ｐスラリーをトロメタミンで中和（ｐＨ７．４）した。上記で得られたヒプロメロースおよびポビドンポリマー分散液をカーボポール９７４Ｐ相に連続的に添加した。ポリマー混合物を１２１℃で２０分間オートクレーブした。Ｎ−ラウロイルザルコシンナトリウムを注射用水の一部中で混合し、０．２ミクロンナイロンフィルターによりろ過後、ポリマー相に添加した。マンニトールを５０〜６０℃において注射用水の一部中に溶解し、塩化ベンザルコニウムおよびエデト酸二ナトリウムを添加して透明溶液を生成した。この溶液を上記ポリマー相に添加した。アンバーライトＩＲＰ６９を実施例１のように得た。該粒径分布は、Ｄ_１０＝０．０７４ミクロン、Ｄ_５０＝０．１５３ミクロン、Ｄ_９０＝０．４３６ミクロンであった。そのように得たアンバーライトＩＲＰ６９ナノ樹脂を注射用水の一部中、撹拌しながら分散した。この分散液を１２１℃で２０分間オートクレーブした。別の容器内に、全バッチサイズの約１０％注射用水を容器に取り、ブリモニジン酒石酸塩を撹拌しながら添加して溶解した。この溶液を０．２ミクロンおよび０．４５ミクロンのナイロンフィルターによりろ過した。ろ過したブリモニジン酒石酸塩溶液を上記オートクレーブしたアンバーライトＩＲＰ６９分散液に添加して３０分間撹拌した。

アンバーライトＩＲＰ６９とブリモニジン酒石酸塩分散液を上記で得られたポリマー混合物に撹拌しながら添加し、３０分間撹拌を続けた。全バッチサイズの１０％注射用水を容器に取り、チモロールマレイン酸塩を撹拌しながら添加して溶解した。この溶液を０．２ミクロンおよび０．４５ミクロンのナイロンフィルターによりろ過した。ろ過したチモロールマレイン酸塩溶液を上記相に添加し、３０分間撹拌した。ｐＨをトロメタミン溶液で約７．４まで調整した。分散液の体積を最終的に１００％バッチサイズに調整した。この分散液を６０分間撹拌し、次いで１５０００ｒｐｍで１０分間ホモジナイズした。

実施例１３
実施例は、本発明の１つの実施形態に従って、イオン性薬物ドキシサイクリンの水性懸濁液剤処方物を提供する。

手順：ステンレススチール（ＳＳ３１６）ビーカー内に、注射用水を取り、８５℃まで加熱した。ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ヒプロメロース２９１０）などの特定のポリマー媒体を高速撹拌して分散し、均一な分散液を得た。温度が２５℃に達するまで撹拌を続けた。別のステンレススチール（ＳＳ３１６）ビーカー内に、注射用水の一部を２５℃で入れた。ポリビニルピロリドン（ポビドンＫ−９０）を注射用水中撹拌して分散し、均一な分散液を得た。別のステンレススチール（ＳＳ３１６）ビーカー内に、注射用水の一部を取り、６５℃で加熱した。カーボポール９７４Ｐを加熱した注射用水中撹拌して分散した。温度が２５℃に達するまで撹拌を続けた。カーボポール９７４Ｐスラリーをトロメタミンで中和した。上記で得られたヒプロメロースおよびポビドンポリマー分散液をカーボポール９７４Ｐ相に連続的に添加した。ポリマー混合物を１２１℃で２０分間オートクレーブした。Ｎ−ラウロイルザルコシンナトリウムを注射用水の一部中で混合し、０．２ミクロンナイロンフィルターによりろ過後、ポリマー相に添加した。マンニトールを５０〜６０℃において注射用水の一部中に溶解し、塩化ベンザルコニウムおよびエデト酸二ナトリウムを添加して透明溶液を生成した。この溶液を上記ポリマー相に添加した。アンバーライトＩＲＰ６９を実施例１のように得た。該粒径分布は、Ｄ_１０＝０．０７４ミクロン、Ｄ_５０＝０．１５３ミクロン、Ｄ_９０＝０．４３６ミクロンであった。そのように得たアンバーライトＩＲＰ６９ナノ樹脂を注射用水の一部中、撹拌しながら分散した。別の容器内に、全バッチサイズの約１０％注射用水を容器に取り、ドキシサイクリンヒクラートを撹拌しながら添加して溶解した。ろ過したドキシサイクリンヒクラート溶液を上記アンバーライトＩＲＰ６９分散液に添加して３０分間撹拌した。アンバーライトＩＲＰ６９とドキシサイクリンヒクラート分散液を上記で得られたポリマー混合物に撹拌しながら添加し、１時間撹拌を続けた。ｐＨを、トロメタミン溶液を用いて５．０まで調整した。分散液の体積を最終的に１００％バッチサイズに調整した。該懸濁液剤を６０分間撹拌した。

実施例１４
実施例は、本発明の１つの実施形態に従って、ブロムフェナクナトリウムの水性懸濁液剤処方物を提供する。

方法：ステンレススチール（ＳＳ３１６）ビーカー内に、全バッチサイズの約１５％注射用水を取り、８５℃まで加熱した。ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ヒプロメロース２９１０）などの特定のポリマー媒体を高速撹拌して分散し、均一な分散液を得た。温度が２５℃に達するまで撹拌を続けた。別のステンレススチール（ＳＳ３１６）ビーカー内に、全バッチサイズの約１２％注射用水を２５℃において取った。ポリビニルピロリドン（ポビドンＫ−９０）を注射用水中撹拌して分散し、均一な分散液を得た。実施例１５（Ｂ）の場合、ステンレススチール（ＳＳ３１６）ビーカー内に、全バッチサイズの１０％注射用水を取り、６５℃まで加熱した。カーボポール９７４Ｐを加熱した注射用水中撹拌して分散した。温度が２５℃に達するまで撹拌を続けた。カーボポール９７４Ｐスラリーをトロメタミンで中和（ｐＨ７．４）した。上記で得られたヒプロメロースおよびポビドンポリマー分散液をカーボポール９７４Ｐ相に連続的に添加した。ポリマー混合物を１２１℃で２０分間オートクレーブした。Ｎ−ラウロイルザルコシンナトリウムを注射用水の一部中で混合し、０．２ミクロンナイロンフィルターによりろ過後、ポリマー相に添加した。マンニトールを５０〜６０℃において注射用水の一部中に溶解し、塩化ベンザルコニウムおよびエデト酸二ナトリウムを添加して透明溶液を生成した。この溶液を上記ポリマー相に添加した。全バッチサイズの注射用水の一部を容器に取り、実施例１と同様な方法に従って得られたインディオン（商標）８６０を撹拌して分散した。この分散液を１２１℃で２０分間オートクレーブした。別の容器内に、注射用水の一部を取り、ブロムフェナクナトリウムを撹拌しながら添加して溶解した。この溶液を０．２ミクロンおよび０．４５ミクロンのナイロンフィルターによりろ過した。ろ過したブロムフェナクナトリウム溶液を上記インディオン（商標）８６０分散液に添加して３０分間撹拌した。インディオン（商標）８６０とブロムフェナクナトリウム分散液を上記で得られたポリマー混合物に撹拌しながら添加し、約３０分〜１時間撹拌を続けた。分散液の体積を最終的に１００％バッチサイズに調整した。この分散液を約６０分間撹拌し、次いで１５０００ｒｐｍで１０分間ホモジナイズした。ｐＨをトロメタミン溶液で約７．８まで調整した。

Claims

水性懸濁液剤を眼に点眼することを含む、薬物のバイオアベイラビリティーの増加および／または眼作用の持続方法であって、
前記水性懸濁液剤は、
（ａ）薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターであって、前記クラスターは少なくとも２マイクロメートルのＤ_５０値を有し、前記薬物搭載ナノ樹脂粒子は、Ｄ_９０値が７０ナノメートル〜９００ナノメートルである粒径分布を有する前記薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスター、および
（ｂ）懸濁剤を含んでなる、前記方法。
前記Ｄ_９０値が、２００ナノメートル〜７００ナノメートルである、請求項１に記載の方法。
前記薬物が、ブリモニジン、ドキシサイクリン、ブロムフェナク、オロパタジン、エメダスチン、ドルゾラミド、シプロフロキサシン、モキシフロキサシン、ベシフロキサシン、ゲンタマイシン、ネオマイシン、ポリミキシン、ケトチフェン、フェニレフリン、ピリラミン、ジピベフリン、オキシメタゾリン、レボカバスチン、アゼラスチン、エピナスチン、ベポタスチン、ジピベフリン、ナファゾリン、アプラクロニジン、レボブノロール、ベタキソロール、レボベタキソロール、チモロール、カルテロール、デキストロメトルファン、シクロペントラート、プロパラカイン、ピロカルピン、ジクロフェナク、スルファセタミド、フルルビプロフェン、ケトロラクあるいはその薬剤的に許容可能な塩またはその混合物から選択される、請求項１に記載の方法。
ブリモニジンまたはその薬剤的に許容可能な塩が、０．０５重量／体積％〜０．５重量／体積％の濃度で存在する、請求項３に記載の方法。
ブリモニジンまたはその薬剤的に許容可能な塩が、ブリモニジン酒石酸塩であり、０．３５重量／体積％の濃度で存在する、請求項４に記載の方法。
前記薬物搭載ナノ樹脂粒子は、前記Ｄ_５０値が５０ナノメートル〜３５０ナノメートルである粒径分布を有する、請求項１に記載の方法。
前記ナノ樹脂がカチオン交換ナノ樹脂またはアニオン交換ナノ樹脂から選択される、請求項１に記載の方法。
前記カチオン交換ナノ樹脂がポリスチレンジビニルベンゼンスルホン酸塩である、請求項７に記載の方法。
前記懸濁剤がアニオン性ポリマー、非イオン性ポリマーまたはその混合物から選択される、請求項１に記載の方法。
前記水性懸濁液剤を緑内障治療のため１日１回眼に点眼する、請求項５に記載の方法。
（ａ）薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスターであって、前記クラスターは少なくとも２マイクロメートルのＤ_５０値を有し、前記薬物搭載ナノ樹脂粒子は、Ｄ_９０値が７０ナノメートル〜９００ナノメートルである粒径分布を有する前記薬物搭載ナノ樹脂粒子の可逆的クラスター、および（ｂ）懸濁剤を含んでなる水性懸濁液剤。
前記Ｄ_９０値が、２００ナノメートル〜７００ナノメートルである、請求項１１に記載の水性懸濁液剤。
前記薬物が、ブリモニジン、ドキシサイクリン、ブロムフェナク、オロパタジン、エメダスチン、ドルゾラミド、シプロフロキサシン、モキシフロキサシン、ベシフロキサシン、ゲンタマイシン、ネオマイシン、ポリミキシン、ケトチフェン、フェニレフリン、ピリラミン、ジピベフリン、オキシメタゾリン、レボカバスチン、アゼラスチン、エピナスチン、ベポタスチン、ジピベフリン、ナファゾリン、アプラクロニジン、レボブノロール、ベタキソロール、レボベタキソロール、チモロール、カルテロール、デキストロメトルファン、シクロペントラート、プロパラカイン、ピロカルピン、ジクロフェナク、スルファセタミド、フルルビプロフェン、ケトロラクあるいはその薬剤的に許容可能な塩またはその混合物から選択される、請求項１１に記載の水性懸濁液剤。
ブリモニジンまたはその薬剤的に許容可能な塩が、０．０５重量／体積％〜０．５重量／体積％の濃度で存在する、請求項１３に記載の水性懸濁液剤。
ブリモニジンまたはその薬剤的に許容可能な塩が、ブリモニジン酒石酸塩であり、０．３５重量／体積％の濃度で存在する、請求項１４に記載の水性懸濁液剤。
前記薬物搭載ナノ樹脂粒子は、前記Ｄ_５０値が５０ナノメートル〜３５０ナノメートルである粒径分布を有する、請求項１１に記載の水性懸濁液剤。
前記ナノ樹脂が、カチオン交換ナノ樹脂またはアニオン交換ナノ樹脂から選択される、請求項１１に記載の水性懸濁液剤。
前記カチオン交換ナノ樹脂が、ポリスチレンジビニルベンゼンスルホン酸塩である、請求項１７に記載の水性懸濁液剤。
前記懸濁剤が、アニオン性ポリマー、非イオン性ポリマーまたはその混合物から選択される、請求項１１に記載の水性懸濁液剤。
眼に前記水性懸濁液剤を１日１回点眼することによる緑内障治療に使用するための、請求項１５に記載の水性懸濁液剤。
薬物のバイオアベイラビリティーの増加および／または眼作用の持続に使用するための、請求項１１〜２０のいずれかに記載の水性懸濁液剤。