JP2017505290A - グリコペプチド組成物及びその使用 - Google Patents

Abstract

本発明は、配列パルミトイル−Ｘ１−Ｌｙｓ−Ｘ２−Ｘ３−Ｌｙｓ−Ｘ４−ＯＨを有するグリコシル化オリゴペプチドを提供し、式中、Ｘ１は存在しないか、グリコシル化側鎖を有するＳｅｒ、又はグリコシル化側鎖を有するＡｓｎであり；Ｘ２は、Ｔｈｒ、グリコシル化側鎖を有するＴｈｒ、グリコシル化側鎖を有するＡｓｎ、又はグリコシル化側鎖を有するＳｅｒであり；Ｘ３は、Ｔｈｒ又はグリコシル化側鎖を有するＴｈｒであり；Ｘ４は、Ｓｅｒ又はグリコシル化側鎖を有するＳｅｒである。Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３及びＸ４のうちの少なくとも１つは、グリコシル化側鎖を有するアミノ酸である。それぞれのグリコシル化側鎖は、独立して、グルコース、Ｎ−アセチルグルコサミン、ガラクトース、Ｎ−アセチルガラクトサミン、マンノース、マルトース、ラクトース、ラムノース、セロビオース、キシロース、及びフコースからなる群から選択される炭水化物でグリコシル化されている。炭水化物のそれぞれのヒドロキシル基は、独立して、ＯＨであるか、又はアセチル化されている。【選択図】図１１Ａ

Description

関連出願の相互参照
本願は、参照により本明細書に組み込まれる、２０１３年１２月１０日出願の米国仮特許出願第６１／９１４，３０９号の優先権の利益を主張するものである。

本発明は、化粧品及び皮膚医薬用の組成物並びに化粧品及び皮膚医薬の用途で使用するための、５〜６個のアミノ酸からなるオリゴペプチドのグリコシル化に関する。

皮膚の老化の懸念は、皮膚科及び美容医療の分野において重要性が増している。皮膚の老化は、コラーゲン、エラスチン及びフィブロネクチンを含む細胞外マトリックス（ＥＣＭ）成分の減少によって部分的に引き起こされる複雑なプロセスである（Ｃａｌｌａｇｈａｎ，ＴＭ ａｎｄ Ｗｉｌｈｅｌｍ，ＫＰ（２００８）Ｉｎｔ Ｊ．Ｃｏｓｍｅｔ．Ｓｃｉ．３０：３１３−３２２）。Ｉ型コラーゲンは、最も豊富な種類のコラーゲンであり、構造的完全性、細胞接着及び遊走、組織リモデリング並びに創傷治癒において機能する（Ｔｒｏｊａｎｏｗｓｋａ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，（１９９８）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．７６：２６６−２６７；Ｃｈｉｑｕｅｔ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，（１９９６）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．７４：７３７−７４４）。１９９３年に、Ｉ型プロコラーゲンのカルボキシル末端由来のペンタペプチド（ＫＴＴＫＳとしても知られているＬｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ、配列番号１）は、ＥＣＭ生成を促進することが示された（Ｋａｔａｙａｍａ，Ｋ．ｅｔ ａｌ．，（１９９３）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６８：９９４１−９９４４）。ヒト肺線維芽細胞を用いたインビトロモデルでは、このペンタペプチドは、Ｉ型及びＩＩＩ型コラーゲン並びにフィブロネクチンの合成増加を介してＥＣＭタンパク質を著しく増強することが見出された。

前述のインビトロデータは、このペンタペプチドのコラーゲン及びフィブロネクチンの合成を刺激する能力を実証したが、その正味電荷が経皮浸透の問題となった。ペプチドの活性、安定性を増強し、親油性を高めるために、Ｌｉｎｔｎｅｒら（Ｌｉｎｔｎｅｒ （２００３）米国特許第６，６２０，４１９号）は、このペンタペプチドを１６炭素脂肪酸のパルミチン酸とコンジュゲートし、パルミトイルＫＴＴＫＳ（Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ、配列番号２）を作製した。この脂肪酸修飾により、ＫＴＴＫＳ単独と比較して、皮膚を横切る送達がより効果的になった（Ｌｉｎｔｎｅｒ，Ｋ（２００２）Ａｎｎ Ｄｅｒｍａｔｏｌ Ｖｅｎｅｒｅｏｌ １２９：１Ｓ １０５；Ｍａｓ−Ｃｈａｍｂｅｒｌｉｎ，Ｃ．ｅｔ ａｌ．，（２００２）Ａｎｎ Ｄｅｒｍａｔｏｌ Ｖｅｎｅｒｅｏｌ １２９：１Ｓ ４５６；Ｔｓａｉ，ＴＣ及びＨａｎｔａｓｈ，ＢＭ（２００８）Ｃｌｉｎ Ｍｅｄ ２：１−２０）。パルミトイル−ＫＴＴＫＳは、化粧剤として開発された最初のオリゴペプチドの１つであり、現在は化粧剤Ｍａｔｒｉｘｙｌ（商標）（セデルマＳＡＳ）中の有効成分である。Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳは、皮膚の局所治療のためのスキンケア組成物を形成するために、スキンケアに有効で、皮膚科学的に許容される担体で製剤化された（Ｔｈｅ Ｐｒｏｃｔｏｒ ａｎｄ Ｇａｍｂｌｅ社）。得られた組成物は、特に、シワの形成に対する、及び他の皮膚の老化の影響に対する皮膚治療に有利であることが見出されている（Ｒｏｂｉｎｓｏｎ（２００２）米国特許第６，４９２，３２６号）。該Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳは、特定の条件下で線維芽細胞の生存率を減少させることが見出されている。

線維芽細胞からのＥＣＭタンパク質の産生及び分泌を促進することができる代替オリゴペプチドを提供することが望ましい。

一般に、本発明は、配列：パルミトイル−Ｘ１−Ｌｙｓ−Ｘ２−Ｘ３−Ｌｙｓ−Ｘ４−ＯＨを有する５又は６個のアミノ酸のグリコシル化オリゴペプチドを提供し、式中、Ｘ１は、存在しないか、グリコシル化側鎖を有するＳｅｒ、又は、グリコシル化側鎖を有するＡｓｎであり；Ｘ２は、Ｔｈｒ、グリコシル化側鎖を有するＴｈｒ、グリコシル化側鎖を有するＡｓｎ、又はグリコシル化側鎖を有するＳｅｒであり；Ｘ３は、Ｔｈｒ又はグリコシル化側鎖を有するＴｈｒであり；Ｘ４は、Ｓｅｒ又はグリコシル化側鎖を有するＳｅｒであり：Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３及びＸ４のうちの少なくとも１つは、グリコシル化側鎖を有するアミノ酸であり、それぞれのグリコシル化側鎖は、独立して、グルコース、Ｎ−アセチルグルコサミン、ガラクトース、Ｎ−アセチルガラクトサミン、マンノース、マルトース、ラクトース、ラムノース、セロビオース、キシロース、及びフコースからなる群から選択される炭水化物でグリコシル化されており、炭水化物のそれぞれのヒドロキシル基は、独立して、ＯＨであるか、又はアセチル化されている。このグリコシル化ペプチドの配列は配列番号３で定義されている。

炭水化物の水酸基は、全てアセチル化されていてよい。

炭水化物の水酸基は、全てアセチル化されていなくてよい。

Ｘ１のアミノ酸は存在しなくてよい。

好ましくは、アミノ酸の少なくとも１つは、マルトース、グルコース、ガラクトース、又はマンノースでグリコシル化されている。

Ｘ２のアミノ酸は、グリコシル化側鎖を有するＴｈｒであってよい。このグリコシル化側鎖は、グルコース又はマルトースでグリコシル化されてよい。Ｘ１、Ｘ３及びＸ４のアミノ酸は、全てグリコシル化されなくてよい。

Ｘ４のアミノ酸は、グリコシル化側鎖を有するＳｅｒであってよい。このグリコシル化側鎖は、グルコース又はガラクトースでグリコシル化されてよい。Ｘ１、Ｘ２及びＸ３アミノ酸のアミノ酸は、全てのグリコシル化されなくてよい。

具体例では、配列：パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ^＊−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−ＯＨを有するグリコシル化オリゴペプチドが提供され、式中、Ｔｈｒ^＊は、過アセチル化β−グルコースでグリコシル化されたトレオニンである（配列番号４）。

本発明に係る別の代表的なオリゴペプチドは、配列：パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ^＊−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−ＯＨを有し、式中、Ｔｈｒ^＊は、過アセチル化α−マンノースでグリコシル化されたトレオニンである（配列番号５）。

別の具体例では、配列：パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ^＊−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−ＯＨを有するグリコシル化オリゴペプチドが提供され、式中、Ｔｈｒ^＊は、過アセチル化β−マルトースでグリコシル化されたトレオニンである（配列番号６）。

さらに別の具体例では、配列：パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ^＊−ＯＨを有するグリコシル化オリゴペプチドが提供され、式中、Ｓｅｒ^＊は、過アセチル化β−ガラクトースでグリコシル化されたセリンである（配列番号７）。

さらに別の具体例では、配列：パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ^＊−ＯＨを有するグリコシル化オリゴペプチドが提供され、式中、Ｓｅｒ^＊は、過アセチル化β−グルコースでグリコシル化されたセリンである（配列番号８）。

さらに別の具体例では、配列：パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ^＊−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−ＯＨを有するグリコシル化オリゴペプチドが提供され、式中、Ｔｈｒ^＊は、過アセチル化β−マルトースでグリコシル化されたトレオニンである（配列番号９）。

さらに別の具体例では、配列：パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ^＊−ＯＨを有するグリコシル化オリゴペプチドが提供され、式中、Ｓｅｒ^＊は、過アセチル化β−マルトースでグリコシル化されたセリンである（配列番号１０）。

別の態様では、本発明は、上記の少なくとも１つのグリコシル化オリゴペプチドを含む化粧品用又は皮膚薬剤用の組成物を提供する。

別の態様において、本発明は、個体において細胞により細胞外マトリックスタンパク質の分泌を増加させる方法を提供する。本方法は、個人に上記の組成物を局所投与することを含む。細胞外マトリックスタンパク質は、エラスチン、フィブロネクチン、又はコラーゲンであってよい。

さらに別の態様において、本発明は、細胞による細胞外マトリックスタンパク質の分泌を増加させるための、上記のグリコシル化オリゴペプチドの使用を提供する。細胞外マトリックスタンパク質は、エラスチン、フィブロネクチン、又はコラーゲンであってよい。

さらに別の態様において、本発明は、以下のものを含むスキンケア組成物を提供する：（ａ）安全かつ有効な量の上記のグリコシル化オリゴペプチド、（ｂ）落屑活性物質、抗ニキビ活性物質、ビタミンＢ_３化合物、レチノイド、ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチド、ペンタペプチド及びヘキサペプチド並びにこれらの誘導体、ヒドロキシ酸、ラジカル捕捉剤、キレーター、抗炎症剤、局所麻酔剤、日焼け活性物質、皮膚美白剤、抗セルライト剤、フラボノイド、抗菌活性物質、皮膚治癒剤、抗真菌活性物質、ファルネソール、フィタントリオール、アラントイン、グルコサミン、及びこれらの混合物からなる群から選択される、安全かつ有効な量の少なくとも１種類の追加のスキンケア活性物質、並びに（ｃ）皮膚科学的に許容される担体。

本明細書に開示するペプチドは、単独で又は互いに組み合わせて、溶液、分散液、エマルジョンの形態で使用されるか；マクロカプセル、マイクロカプセルもしくはナノカプセル、リポソーム又はカイロミクロンなどのベクターに封入されるか；マクロ粒子、マイクロ粒子もしくはナノ粒子中に含まれるか；マイクロスポンジ中に含まれるか；又は粉末有機ポリマー、タルク、ベントナイトもしくは別の無機物支持体上に吸着され得る。

本明細書に開示するペプチドは、単独で又は互いに組み合わせて、生薬製剤；水中油型エマルジョン；油中水型エマルジョン；ミルク；ローション；ゲル化、増粘化、界面活性化もしくは乳化したポリマー、ポマード、ローション、キャピラリー、シャンプー、石鹸、パウダー、スティック、ペンシル、スプレー又はボディオイルで使用することができる。

本明細書に開示するペプチドは、単独で又は互いに組み合わせて、抽出脂質、合成脂質、ゲル化、増粘化、界面活性化もしくは乳化したポリマー、水溶性もしくは脂溶性の有効成分、野菜エキス、組織抽出物、海洋エキス、太陽光フィルター、又は抗酸化剤などの従来使用されている任意の他の成分と共に使用することができる。

本明細書に開示するペプチドは、単独で又は互いに組み合わせて、治癒、水和を促進するため、あるいは特にシワの形成もしくは悪化に対する、又は自然な皮膚老化もしくは加速された皮膚老化（皮膚病（ｈｅｌｉｏｄｅｒｍｉａ）、もしくは汚染など）に対するスキンケアのために化粧品用途で使用することができる。

本明細書に開示するペプチドは、単独で又は互いに組み合わせて、化粧品用薬剤又は皮膚医薬用薬剤を調製するために使用されてよい。該ペプチド又はその薬剤は、治癒、水和を促進するため、あるいは特にシワの形成もしくは悪化に対する、又は自然な皮膚老化もしくは加速された皮膚老化（皮膚病（ｈｅｌｉｏｄｅｒｍｉａ）、もしくは汚染など）に対するスキンケアのために使用することができる。

本明細書に開示するペプチドは、単独で又は互いに組み合わせて、いくつかの追加のスキンケア活性物質と共に使用することができる。代表的なスキンケア活動としては、創傷治癒、ストレッチマーク、乾癬、皮膚癌、皮膚炎、湿疹の出現の減少が挙げられる。

本発明の他の態様及び特徴は、添付の図面と併せて、以下の特定の実施形態の説明を検討することにより当業者に明らかになるであろう。

本発明の実施形態を、これから添付の図面を参照しながら、単なる例として説明する。

ヒト皮膚線維芽細胞の治療後４８時間の時点でのエラスチン分泌に対する代表的なグリコペプチドの有効性を対照の％として比較したグラフである。 ヒト皮膚線維芽細胞の治療後７２時間の時点でのエラスチン分泌に対する代表的なグリコペプチドの有効性を対照の％として比較したグラフである。 ヒト皮膚線維芽細胞の治療後４８時間の時点でのフィブロネクチン分泌に対する代表的なグリコペプチドの有効性を対照の％として比較したグラフである。 ヒト皮膚線維芽細胞の治療後７２時間の時点でのフィブロネクチン分泌に対する代表的なグリコペプチドの有効性を対照の％として比較したグラフである。 代表的な化合物ＧＰ００１−１（配列番号４）のＨＰＬＣプロファイルを示すグラフである。 代表的な化合物ＧＰ００１−１（配列番号４）の質量分析を示すグラフである。 代表的な化合物ＧＰ００２−３（配列番号８）のＨＰＬＣプロファイルを示すグラフである。 代表的な化合物ＧＰ００２−３（配列番号８）の質量分析を示すグラフである。 ＧＰ００２−７（配列番号７）のＨＰＬＣプロファイルを示すグラフである。 ＧＰ００２−７（配列番号７）の質量分析を示すグラフである。 代表的な化合物ＧＰ００３−９（配列番号６）のＨＰＬＣプロファイルを示すグラフである。 代表的な化合物ＧＰ００３−９（配列番号６）の質量分析を示すグラフである。 代表的な化合物ＧＰ００４−３（配列番号９）のＨＰＬＣプロファイルを示すグラフである。 代表的な化合物ＧＰ００４−３（配列番号９）の質量分析を示すグラフである。 代表的な化合物ＧＰ００４−４（配列番号１０）のＨＰＬＣプロファイルを示すグラフである。 代表的な化合物ＧＰ００４−４（配列番号１０）の質量分析を示すグラフである。 ６種の代表的なグリコペプチド（ＧＰ００１−１、ＧＰ００２−３、ＧＰ００２−７、ＧＰ００３−９、ＧＰ００４−３及びＧＰ００４−４）、並びに非グリコシル化Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ参照ペプチドの細胞形態に対する効果を示す位相コントラスト画像を示す。 ４８時間後の細胞生存率に対する６種の代表的なグリコペプチド（ＧＰ００１−１、ＧＰ００２−３、ＧＰ００２−７、ＧＰ００３−９、ＧＰ００４−３及びＧＰ００４−４）、並びに非グリコシル化Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ参照ペプチドの効果を比較した（ＭＴＴアッセイによって測定した場合の）グラフである。 ７２時間後の細胞生存率に対する６種の代表的なグリコペプチド（ＧＰ００１−１、ＧＰ００２−３、ＧＰ００２−７、ＧＰ００３−９、ＧＰ００４−３及びＧＰ００４−４）、並びに非グリコシル化Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ参照ペプチドの効果を比較した（ＭＴＴアッセイによって測定した場合の）グラフである。 ヒト皮膚線維芽細胞の処理後７２時間の時点でのエラスチン分泌に対する６種の代表的なグリコペプチド（ＧＰ００１−１、ＧＰ００２−３、ＧＰ００２−７、ＧＰ００３−９、ＧＰ００４−３及びＧＰ００４−４）、並びに非グリコシル化Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ参照ペプチドの有効性を対照の％として比較したグラフである。 ヒト皮膚線維芽細胞の処理後７２時間の時点でのフィブロネクチン分泌に対する６種の代表的なグリコペプチド（ＧＰ００１−１、ＧＰ００２−３、ＧＰ００２−７、ＧＰ００３−９、ＧＰ００４−３及びＧＰ００４−４）、並びに非グリコシル化Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ参照ペプチドの有効性を対照の％として比較したグラフである。 ヒト皮膚線維芽細胞の処理後７２時間の時点での総コラーゲン分泌に対する３種の代表的なグリコペプチド（ＧＰ００３−９、ＧＰ００４−３及びＧＰ００４−４）、並びに非グリコシル化Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ参照ペプチドの有効性を対照の％として比較したグラフである。 ヒト皮膚（ヒト表皮ケラチノサイト及びヒト皮膚線維芽細胞で構成される）のインビトロ３Ｄモデルにおける処理後７２時間の時点での対照の％として比較したエラスチン分泌に対する代表的なグリコペプチドＧＰ００３−９、及び非グリコシル化Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ参照ペプチドの有効性を示すグラフである。 代表的なグリコペプチドＧＰ００３−９、及び非グリコシル化Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ参照ペプチドの形態に対する効果を示す、ヒト皮膚（ヒト表皮ケラチノサイト及びヒト皮膚線維芽細胞で構成される）のインビトロ３Ｄモデルのヘマトキシリン＆エオシン染色切片の顕微鏡写真を示す。

グリコシル化と呼ばれる、特定の側鎖への炭水化物の共有結合によるタンパク質及びペプチドの翻訳後修飾は、タンパク質及びペプチドの機能を調節するのに重要なプロセスとして浮上している。

このプロセスは、細胞型、グリコシル化の部位及び炭水化物鎖（グリカン）のサイズに応じて変化するように、細胞内で高度に調節されている。ヒトでは、タンパク質のグリコシル化の最も一般的な部位は、次の糖類：グルコース（Ｇｌｃ）、フコース（Ｆｕｃ）、ガラクトース（Ｇａｌ）、マンノース（Ｍａｎ）、Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、Ｎ−アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）及びシアル酸（Ｓｉａ）によりアスパラギン残基（Ｎ−グリコシル化）並びにセリン残基及びトレオニン残基（Ｏ−グリコシル化）で生じる。グリコシル化には、次の糖類：ラクトース（Ｌａｃ）、ラムノース（Ｒｈａ）、セロビオース（Ｃｅｌ）、及びキシロース（Ｘｙｌ）によるグリコシル化も含まれ得る。

タンパク質のグリコシル化は、タンパク質の結合及び有効性を増加させ得る。例えば、コラーゲンのグリコシル化は、コラーゲンがウロキナーゼプラスミノーゲン活性化因子受容体関連タンパク質（ｕＰＡＲＡＰ／Ｅｎｄｏ１８０）などの膜受容体のレシチンドメインに結合するのを可能にする。ペプチドのグリコシル化は、結果として生じるペプチドの安定性も増加させ得る。

炭水化物は、皮膚の主要構成成分の１つであり、皮膚の恒常性において役割を果たしている。炭水化物は、主に受容体のリガンド及び外部メッセージのコンダクターとして作用し、かつ隣接細胞との相互作用のために皮膚細胞上で見られる。炭水化物は、細胞の増殖及び分化、タンパク質合成に関わり、かつ組織の作り及び構造にも関与し得る。

老化のプロセスでは、還元糖の存在が増加している。糖化は、タンパク質又は脂質分子に共有結合している内因性又は外因性の過剰な還元糖の結果として生じる天然の細胞プロセスである。糖化は、コラーゲン、フィブロネクチン及びエラスチンなどの細胞外タンパク質の架橋の増加をもたらし、糖を生物学的に機能不全にさせる。糖化は、皮膚ＥＣＭに糖化最終産物（ＡＧＥ）と呼ばれる架橋の形成を可能にし、これらの生体分子の正常な機能を破壊する。糖化は、酵素の作用を制御することなく偶発的に発生し、シワの形成に関与することが示されている。還元糖は、老化プロセスを促進していると当技術分野で考えられている。グリコシル化は、糖化の有害なプロセスと混同されるべきではない。

本発明に係るグリコシル化ペプチドは、グリコシル化ペプチドの安定性を高めること、老化プロセスの遅延においてその有効性を高めること、又はその両方が可能である。本発明に係るグリコシル化ペプチドは、例えば、ＥＣＭのタンパク質分解を減少させるか、又はＥＣＭタンパク質生合成を誘導することができる。代表的なＥＣＭタンパク質には、エラスチン、フィブロネクチン及びコラーゲンが含まれる。

一般に、本発明は、配列パルミトイル−Ｘ１−Ｌｙｓ−Ｘ２−Ｘ３−Ｌｙｓ−Ｘ４−ＯＨを有するグリコシル化オリゴペプチドを提供し、式中、Ｘ１は存在しないか、又はグリコシル化側鎖を有するＳｅｒであるか、又はグリコシル化側鎖を有するＡｓｎであり；Ｘ２は、Ｔｈｒ、グリコシル化側鎖を有するＴｈｒ、グリコシル化側鎖を有するＡｓｎ、又はグリコシル化側鎖を有するＳｅｒであり；Ｘ３は、Ｔｈｒ、又はグリコシル化側鎖を有するＴｈｒであり；Ｘ４は、Ｓｅｒ又はグリコシル化側鎖を有するＳｅｒである。Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３及びＸ４のうちの少なくとも１つは、グリコシル化側鎖を有するアミノ酸である。それぞれのグリコシル化側鎖は、独立して、グルコース、Ｎ−アセチルグルコサミン、ガラクトース、Ｎ−アセチルガラクトサミン、マンノース、マルトース、ラクトース、ラムノース、セロビオース、キシロース、及びフコースからなる群から選択される炭水化物でグリコシル化されている。炭水化物の各ヒドロキシル基は、独立して、ＯＨであるか、又はアセチル化されている。グリコシル化ペプチドの配列は配列番号３で定義されている。

いくつかの例において、炭水化物の全ての水酸基がアセチル化されている。アセチル化ヒドロキシル基を有するオリゴ糖は、細胞膜透過性を向上させることができる。このような改善された透過性は、皮膚を横切る送達を改善することができる。

本発明に係る好ましいオリゴペプチドは、Ｎ末端パルミトイル基を有する。Ｎ末端パルミトイル基を有するオリゴペプチドは、細胞膜透過性を向上させることができる。このような改善された透過性は、皮膚を横切る送達を改善することができる。好ましくは、本発明に係るオリゴペプチドは、Ｘ１が存在しない５個のアミノ酸を有する。

いくつかの好ましいオリゴペプチドにおいて、Ｘ２は、グリコシル化側鎖を有するＴｈｒである。このグリコシル化側鎖は、グルコース、マンノース又はマルトースでグリコシル化されている。残りのアミノ酸は、好ましくは、グリコシル化されていない。

別の好ましいオリゴペプチドにおいて、Ｘ３はグリコシル化側鎖を有するＴｈｒである。このグリコシル化側鎖は、マルトースでグリコシル化されている。残りのアミノ酸は、好ましくは、グリコシル化されていない。

さらに他の好ましいオリゴペプチドにおいて、Ｘ４は、グリコシル化側鎖を有するＳｅｒである。このグリコシル化側鎖は、グルコース、ガラクトース又はマルトースでグリコシル化されている。残りのアミノ酸は、好ましくは、グリコシル化されていない。

本発明に係る１つの代表的なオリゴペプチドは、配列：パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ^＊−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−ＯＨを有し、Ｔｈｒ^＊は、過アセチル化β−グルコースでグリコシル化されたトレオニンである（配列番号４）。

本発明に係る別の代表的なオリゴペプチドは、配列：パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ^＊−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−ＯＨを有し、Ｔｈｒ^＊は、過アセチル化α−マンノースでグリコシル化されたトレオニンである（配列番号５）。

本発明に係るさらに別の代表的なオリゴペプチドは、配列：パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ^＊−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−ＯＨを有し、Ｔｈｒ^＊は、過アセチル化β−マルトースでグリコシル化されたトレオニンである（配列番号６）。

本発明に係るさらに別の代表的なオリゴペプチドは、配列：パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ^＊−ＯＨを有し、Ｓｅｒ^＊は、過アセチル化βガラクトースでグリコシル化されたセリンである（配列番号７）。

本発明に係るさらなる代表的なオリゴペプチドは、配列：パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ^＊−ＯＨを有し、Ｓｅｒ^＊は、過アセチル化β−グルコースでグリコシル化されたセリンである（配列番号８）。

さらなる具体例では、配列：パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ^＊−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−ＯＨを有するグリコシル化オリゴペプチドが提供され、Ｔｈｒ^＊は、過アセチル化β−マルトースでグリコシル化されたトレオニンである（配列番号９）。

さらに別の具体例では、配列：パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ^＊−ＯＨを有するグリコシル化オリゴペプチドが提供され、Ｓｅｒ^＊は、過アセチル化β−マルトースでグリコシル化されたセリンである（配列番号１０）。

上にまとめた代表的なグリコシル化オリゴペプチドなどの、本発明に係るグリコシル化オリゴペプチドは、非グリコシル化Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳと比較して有効性の増強、毒性の減少、又はその両方を示すことができる。

有効性の増強とは、本発明の文脈では、次のキット：フィブロネクチン（Ｔａｋａｒａ、ＭＫ１１５）、エラスチン（Ｕｓｃｎ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ社、Ｅ９１３３７Ｈｕ）及び総コラーゲン（Ｃｈｏｎｄｒｅｘ社、９０６２）を用いて測定した場合、非グリコシル化Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳと比較して、インビトロでのヒト皮膚線維芽細胞培養物中のエラスチン、フィブロネクチン又は総コラーゲンの分泌のより大きい誘導を指す。

スキンケア製品として使用され、有効な製剤のために、グリコシル化ペプチドは、好ましくは、製剤中で安定であり、実質的に皮膚内への吸収性があり、かつ目的物に対して生物学的に活性がなければならない。

本明細書で使用する用語「安全かつ有効な量」は、正の利点、好ましくは良好なケラチン組織の外観を著しく誘導するか、又は本明細書に開示する利点を独立して又は組み合わせて含む利点を感じるのに十分な化合物もしくは組成物の量であるが、重篤な副作用を回避する、すなわち、当業者の健全な判断の範囲内で合理的な損益比を提供するには十分に低い量を意味する。

本明細書で使用する用語「たるみ」は、皮膚エラスチンの減少、皮膚エラスチンへの損傷、皮膚エラスチンへの変化、及び／又は皮膚エラスチン中の異常の結果として生じる皮膚の弛緩、緩み、又はそのような状態を意味する。

本明細書で使用する用語「平滑化」及び「軟化」は、その感触が改善されるようにケラチン組織の表面を変化させることを意味する。

「皮膚の老化の兆候」には、全ての外見的、触覚的症状だけでなく、皮膚の老化による他のマクロ又はミクロの効果が含まれるが、これらに限定されない。そのような兆候は、内因性の要因もしくは外因性の要因、例えば、加齢による老化及び／もしくは環境破壊によって誘導されるか、又は引き起こされ得る。これらの兆候は、シワ及び粗い深いシワ、皮膚の線、割れ目、隆起、大きな孔（例えば、汗腺管、皮脂腺、もしくは毛包などの付属器構造に関連する）、又は凹凸や粗さ、皮膚の弾力性の損失（機能的皮膚エラスチンの損失及び／もしくは不活性化）、たるみ（眼の領域及び顎の腫れを含む）、皮膚の堅さの喪失、皮膚のツッパリ感の喪失、変形からの皮膚の反動の喪失、変色（目の下の円を含む）、シミ、血色の悪さ、年齢によるシミもしくはそばかすなどの色素過剰の皮膚領域、角化症、異常な分化、過剰角化、弾力繊維症、コラーゲン分解、並びに角質層、真皮、表皮、皮膚血管系（例えば、毛細血管拡張症もしくはクモ状血管）、及び下層組織、特に、皮膚に近接した組織内の他の組織学的変化を含むが、これらに限定されないプロセスから生じ得る。

本発明に係るグリコシル化ペプチドは、皮膚の質感及び色の不連続性を含む、哺乳類の皮膚の視覚的及び／又は触覚的な不連続性を治療で調節するのに有用であり得る。例えば、孔の見かけの直径は減少し、開口部に最も近い組織の見かけの高さは付属器内（ｉｎｔｅｒａｄｎｅｘａｌ）の皮膚の見かけの高さに近づき、皮膚の色調／色はより均一になり、線及び／もしくはシワの長さ、深さ、並びに／又は他の寸法は減少する。

本発明によるグリコシル化ペプチドは、皮膚の状態を調節するのに、特にケラチン組織の状態を調節するのにも有用であり得る。皮膚の状態、すなわち、哺乳類、特にヒトの皮膚の状態の調節は、体の内部及び／又は外部の要因によって誘発されるか、又は引き起こされ得る状態が原因で必要とされる場合が多い。例としては、環境破壊、（紫外線を含む）放射線被曝、加齢による老化、閉経状態（例えば、閉経後の皮膚の変化）、ストレス、病気などが挙げられる。例えば、「皮膚の状態の調整」は、皮膚の状態の予防的調節及び／又は治療的調節を含み、以下の利点のうちの１以上を含み得る：皮膚萎縮を減少させるための皮膚の肥厚（すなわち、皮膚の表皮及び／又は真皮及び／又は皮下（例えば、皮下脂肪もしくは筋肉）の層の構築、爪及び毛軸のケラチン層にも適用できる）、真皮−表皮の境界線の畳み込み（乳頭間隆起としても知られている）の増加、弾力繊維症、たるみ、変形からの皮膚の反動の喪失などの皮膚の弾力性の喪失（機能的皮膚エラスチンの欠乏、損害及び／又は不活性化）の防止；目の下の円などの非メラニン皮膚変色の防止、シミ（例えば、酒さに起因する、例えば、不均一な赤色着色）（以下では、「赤斑」と呼ぶ）、血色の悪さ（淡い色）、毛細血管拡張症又はクモ状血管によって引き起こされる変色の防止。

本明細書で使用する場合、皮膚の状態の予防的調整には、皮膚の視覚的及び／もしくは触覚的不連続性（例えば、視覚的又は感触によって検出され得る皮膚の質感の凹凸）の遅延、最小化並びに／又は防止が含まれる。

本明細書で使用する場合、皮膚の状態の予防的調整には、皮膚の不連続性の改善、例えば、減少、最小化及び／又は除去が含まれる。

本発明に係るグリコシル化ペプチドは、皮膚の外観及び／又は感触を改善するのにも有用であり得る。例えば、本発明に係る組成物は、皮膚への組成物の適用後に皮膚外観における視覚的即時改善を提供することによって、皮膚状態の外観を制御するのに有用であり得る。一般的に、粒子状物質をさらに含む本発明の組成物は、視覚的即時改善を提供するのに最も有用であろう。

本発明の組成物は、安定性、著しい（消費者が許容できない）皮膚刺激がないこと、及び良い美学を含む追加の利点を提供することができる。

本発明の組成物は安定している。本発明に係るグリコシル化ペプチドを含む、本明細書で使用する成分は、組成物中で安定であり、互いに適合性があり、かつナイアシンアミド、フィタントリオール、ファルネソール、ビサボロール、及びサリチル酸などの他のスキンケア活性物質と適合性がある。したがって、ナイアシンアミドなどの追加のスキンケア活性物質とのオリゴペプチドの組み合わせを含有する組成物は、添加剤及び／又は相乗的な皮膚の利点を提供することができる。さらに、結果として得られるスキンケア組成物は、良好な製品安定性及び適度に長い貯蔵寿命を有する。

少なくとも１種類の追加のスキンケア活性物質と組み合わせて得られる、本発明に係るグリコシル化ペプチドを含有する組成物は、良い美学を有する。良い美学の例としては、（ｉ）明るく、ベタベタしない、（ｉｉ）皮膚に滑らかな、絹のような感触を与え、（ｉｉｉ）簡単に広がり、かつ／又は（ｉｖ）迅速に吸収される贅沢なクリーム及びローションなどの組成物が挙げられる。良い美学の他の例としては、消費者に許容される外観を有し（すなわち、不快な臭い又は変色が存在しない）、かつ良好な皮膚感触を提供する組成物が挙げられる。

好ましい例では、スキンケア製品は、グリコシル化ペプチドを該組成物の重量で約０．０１％〜約５０％含む。より好ましい例では、該スキンケア製品は、グリコシル化ペプチドを該組成物の重量で約０．０５％〜約２０％含む。さらにより好ましい例では、該スキンケア製品は、グリコシル化ペプチドを該組成物の重量で約０．１％〜約１０％含む。

本発明のグリコシル化オリゴペプチドは、少なくとも１種類の追加の成分を用いて製剤化することができる。該組成物がヒトのケラチン組織と接触する場合、追加成分は、ケラチン組織への適用に適していなければならず、すなわち、該組成物に組み込まれた場合、過度の毒性、不適合性、不安定性、アレルギー反応などがなく、かつ健全な医学的判断の範囲内にあって、ヒトのケラチン組織と接触させて使用するのに適する。ＣＴＦＡ化粧品成分ハンドブック、第２版（１９９２）には、本発明の組成物に使用するのに適する、スキンケア産業で一般的に使用されている非限定的で多種多様な化粧品及び医薬品成分が記載されている。これらの構成要素のクラスの例としては、研磨剤、吸収剤、芳香剤、顔料、着色料／着色剤などの美的成分、精油、皮膚感覚剤、収斂剤など（例えば、丁子油、メントール、カンファー、ユーカリ油、オイゲノール、乳酸メンチル、マンサク留出物）、抗ニキビ剤、固化防止剤、消泡剤、抗菌剤（例えば、ヨードプロピルブチルカルバメート）、酸化防止剤、結合剤、生物学的添加物、緩衝剤、増量剤、キレート剤、化学添加剤、着色剤、化粧品収斂剤、化粧品用殺生物剤、変性剤、薬物収斂剤、外用鎮痛剤、フィルム形成剤もしくは物質、例えば、該組成物のフィルム形成特性及び持続性を補助するためのポリマー（例えば、エイコセンとビニルピロリドンのコポリマー）、不透明化剤、ｐＨ調整剤、噴射剤、還元剤、皮膚漂白及び美白剤（例えば、ヒドロキノン、コウジ酸、アスコルビン酸、マグネシウムアスコルビルホスフェート、アスコルビルグルコサミン）、皮膚コンディショニング剤（例えば、湿潤剤及び閉塞性の湿潤剤を含む湿潤剤）、皮膚の鎮静剤及び／又は治癒剤（例えば、パンテノール及び誘導体（例えば、エチルパンテノール）、アロエベラ、パントテン酸及びその誘導体、アラントイン、ビサボロール、及びグリチルリチン酸二カリウム）、皮膚処理剤、増粘剤、並びにビタミン類及びこれらの誘導体が挙げられる。

ファルネソール
本発明の局所用組成物は、安全かつ有効な量のファルネソールを含有してよい。ファルネソールは、スクアレン及びステロール類、とりわけコレステロールの生合成における前駆体及び／又は中間体として作用すると考えられている天然物質である。ファルネソールは、タンパク質の修飾及び調節（例えば、タンパク質のファルネシル化）にも関与しており、ファルネソールに応答する細胞核内受容体が存在する。

化学的には、ファルネソールは、［２Ｅ，６Ｅ］−３，７，１１−トリメチル−２，６，１０−ドデカトリエン−１−オールであり、本明細書で使用する「ファルネソール」は、そのような異性体及び互変異性体を含む。ファルネソールは、例えば、ファルネソール（Ｄｒａｇｏｃｏ社、１０ゴードン・ドライブ、ニュージャージー州トトワの異性体混合物）及びトランス−トランス−ファルネソール（Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社、私書箱１４５０８、ミズーリ州セントルイス）の名で市販されている。

本発明の組成物中に存在する場合、該組成物は、好ましくは、ファルネソールを該組成物の重量で約０．００１％〜約５０％、より好ましくは約０．０１％〜約２０％、さらにより好ましくは約０．１％〜約１５％、さらにより好ましくは約０．１％〜約１０％、さらにより好ましくは約０．５％〜約５％、かつさらにより好ましくは約１％〜約５％含有する。

フィタントリオール
本発明の局所用組成物は、安全かつ有効な量のフィタントリオールを含有してよい。フィタントリオールは、３，７，１１，１５−テトラメチルヘキサデカン−１，２，３−トリオールとして知られる化学物質の一般名である。フィタントリオールは、ＢＡＳＦ（１６０９ビドルアベニュー、ミシガン州ワイアンドット）から市販されている。例えば、フィタントリオールは、クモ状脈管／赤斑治療剤、暗い円／腫れぼったい目の補修剤、黄ばみ補修剤、たるみ治療剤、かゆみ止め薬、皮膚の肥厚剤、細孔減少剤、油／光沢低減剤、炎症後色素沈着の補修剤、創傷治癒薬、抗セルライト剤として有用であり、シワ及び細い線を含む皮膚の質感を調整する。

本発明の組成物において、フィタントリオールは、該組成物の重量で好ましくは約０．００１％〜約５０％、より好ましくは約０．０１％〜約２０％、さらにより好ましくは約０．１％〜約１５％、さらにより好ましくは約０．２％〜約１０％、さらにより好ましくは約０．５％〜約１０％、かつさらにより好ましくは約１％〜約５％の量で含まれる。

落屑活性物質
該組成物の重量で、より好ましくは約０．１％〜約１０％、さらにより好ましくは約０．２％〜約５％、好ましくは約０．５％〜約４％の安全かつ有効な量の落屑活性物質を、本発明の組成物に添加してよい。落屑活性物質は、本発明の皮膚外観の利点を向上させる。例えば、落屑活性物質は、皮膚の質感（例えば、滑らかさ）を改善する傾向がある。本明細書で使用するのに適する１種類の落屑系は、スルフヒドリル化合物及び双性イオン性界面活性剤を含有しており、参照により本明細書に組み込まれるＢｉｓｓｅｔｔの米国特許第５，６８１，８５２号に記載されている。本明細書で使用するのに適する別の落屑系は、サリチル酸及び双性イオン性界面活性剤を含有しており、参照により本明細書に組み込まれるＢｉｓｓｅｔｔの米国特許第５，６５２，２２８号に記載されている。これらの出願に記載されているような双性イオン性界面活性剤も、本明細書では落屑剤として有用であり、セチルベタインが特に好ましい。

抗ニキビ活性物質
本発明の組成物は、安全かつ有効な量の１種以上の抗ニキビ活性物質を含有してよい。有用な抗ニキビ活性物質の例としては、レゾルシノール、硫黄、サリチル酸、過酸化ベンゾイル、エリスロマイシン、亜鉛などが挙げられる。適切な抗ニキビ活性物質のさらなる例は、１９９７年３月４日に発行されたＭｃＡｔｅｅらの米国特許第５，６０７，９８０号にさらに詳細に記載されている。

抗シワ活性物質／抗萎縮活性物質
本発明の組成物は、安全かつ有効な量の１種以上の抗シワ活性物質又は抗萎縮活性物質をさらに含有してよい。本発明の組成物に使用するのに適する代表的な抗シワ／抗萎縮活性物質としては、硫黄含有Ｄ及びＬアミノ酸並びにこれらの誘導体及び塩、特に、Ｎ−アセチル誘導体が挙げられ、その好ましい例はとしては、特にケラチン組織状態、例えば、皮膚状態を調節する際に本発明のケラチン組織の外観の利点を増強するＮ−アセチル−Ｌ−システイン；チオール類、例えば、エタンチオール；ヒドロキシ酸（例えば、乳酸及びグリコール酸などのアルファ−ヒドロキシ酸もしくはサリチル酸などのベータ−ヒドロキシ酸及びオクタノイル誘導体などのサルチル酸誘導体）、フィチン酸、リポ酸；リゾホスファチジン酸、皮膚落屑剤（例えば、フェノールなど）、ビタミンＢ_３化合物及びレチノイド類が挙げられる。

ａ）ビタミンＢ_３化合物
本発明の組成物は、安全かつ有効な量のビタミンＢ_３化合物を含有してよい。ビタミンＢ_３化合物は、同時係属中の１９９７年４月１１日出願の米国出願第０８／８３４，０１０（１９９７年１０月３０日公開の国際公開ＷＯ９７／３９７３３Ａ１に相当する）に記載されているような皮膚の状態を調節するのに特に有用である。ビタミンＢ_３化合物が本発明の組成物中に存在する場合、該組成物は、ビタミンＢ_３化合物を、該組成物の重量で、約０．０１％〜約５０％、より好ましくは約０．１％〜約１０％、さらにより好ましくは約０．５％〜約１０％、さらにより好ましくは約１％〜約５％、かつさらにより好ましくは約２％〜約５％含む。

本明細書で使用する「ビタミンＢ_３化合物」は、式：

（式中、Ｒは、−ＣＯＮＨ_２（すなわち、ナイアシンアミド）、−ＣＯＯＨ（すなわち、ニコチン酸）又は−ＣＨ_２ＯＨ（すなわち、ニコチニルアルコール）；それらの誘導体；及び前述のいずれかの塩である）
を有する化合物を意味する。

前述のビタミンＢ_３化合物の代表的な誘導体としては、ニコチン酸非血管拡張性エステル（例えば、トコフェリルニコチネート）、ニコチニルアミノ酸類、カルボン酸のニコチニルアルコールエステル類、ニコチン酸Ｎ−オキシド及びナイアシンアミドＮ−オキシドを含むニコチン酸エステル類が挙げられる。

適切なビタミンＢ_３化合物の例は、当技術分野で周知であり、いくつかの供給元、例えば、Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社（ミズーリ州セントルイス）、ＩＣＮ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｓ社（カリフォルニア州アービン）及びＡｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社（ウィスコンシン州ミルウォーキー）から市販されている。

ビタミン化合物類は、実質的に純粋な物質として、又は天然（例えば、植物）供給源からの適切な物理的及び／又は化学的単離により得られる抽出物として含まれてよい。

ｂ）レチノイド類
本発明の組成物は、レチノイドを含有してよい。本明細書で使用する「レチノイド」は、ビタミンＡの全ての天然及び／又は合成類似体又は皮膚においてビタミンＡの生物学的活性を有するレチノール様化合物、並びにこれらの化合物の幾何異性体及び立体異性体を含む。レチノイドは、好ましくはレチノール、レチノールエステル（例えば、レチニルパルミテート、レチニルアセテート、レチニルプロピオネートを含むレチノールのＣ_２〜Ｃ_２２アルキルエステル類）、レチナール、及び／又はレチノイン酸（全トランスレチノイン酸及び／又は１３−シス−レチノイン酸を含む）、より好ましくはレチノイン酸以外のレチノイド類である。これらの化合物は、当技術分野で周知であり、いくつかの供給元、例えば、Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社（ミズーリ州セントルイス）、及びＢｏｅｒｈｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ社（インディアナ州インディアナポリス）から市販されている。本明細書で有用である他のレチノイド類は、１９８７年６月３０日発行のＰａｒｉｓｈらの米国特許第４，６７７，１２０号、１９８９年１２月５日発行のＰａｒｉｓｈらの米国特許第４，８８５，３１１号、１９９１年９月１７日発行のＰｕｒｃｅｌｌらの米国特許第５，０４９，５８４号、１９９２年６月２３日発行のＰｕｒｃｅｌｌらの米国特許５，１２４，３５６号、及び１９９２年９月２２日発行されたＰｕｒｃｅｌｌらの再発行米国特許第３４，０７５号に記載されている。他の適切なレチノイド類としては、トコフェリルレチノエート［レチノイン酸（トランス又はシス）トコフェロールエステル、アダパレン｛６−［３−（１−アダマンチル）−４−メトキシフェニル］−２−ナフトエ酸｝、及びタザロテン（エチル−６−［２−（４，４−ジメチルチオクロマン−６−イル）−エチニル］ニコチネート）が挙げられる。好ましいレチノイド類としては、レチノール、レチニルパルミテート、レチニルアセテート、レチニルプロピオネート、レチナール及びこれらの組み合わせが挙げられる。

レチノイドは、実質的に純粋な物質として、又は天然（例えば、植物）供給源からの適切な物理的及び／又は化学的単離により得られる抽出物として含まれ得る。レチノイドは、好ましくは実質的に純粋、より好ましくは本質的に純粋である。

本発明に係る組成物は、安全かつ有効な量のレチノイドを含むことができ、その結果、得られる組成物は、ケラチン組織の状態を調節するのに、好ましくは、皮膚の視覚的及び／又は触覚的不連続性を調整するのに、さらに好ましくは、皮膚の老化の兆候を調節するのに、さらにより好ましくは、皮膚の老化に関連する皮膚の質感における視覚的及び／又は触覚的不連続性を調節するのに安全かつ有効である。該組成物は、好ましくは、レチノイドを約０．００５％〜約２％、より好ましくは０．０１％〜約２％含有する。レチノールは、好ましくは約０．０１％〜約０．１５％の量で使用され、レチノールエステル類は、好ましくは約０．０１％〜約２％（例えば、約１％）の量で使用され、レチノイン酸は、好ましくは約０．０１％〜約０．２５％の量で使用され、トコフェリルレチノエート、アダパレン、及びタザロテンは、好ましくは約０．０１％〜約２％の量で使用される。

本発明の組成物は、レチノイド及びビタミンＢ_３化合物の両方を含有する場合、レチノイドは、好ましくは上記の量で使用され、ビタミンＢ_３化合物は、好ましくは約０．１％〜約１０％、より好ましくは約２％〜約５％の量で使用される。

（ｃ）ヒドロキシ酸
本発明の組成物は、安全かつ有効な量のヒドロキシ酸を含有してよい。本発明の組成物に使用するのに好ましいヒドロキシ酸は、サリチル酸及びサリチル酸誘導体を含む。本発明の組成物中に存在する場合、サリチル酸は、好ましくは約０．０１％〜約５０％、より好ましくは約０．１％〜約２０％、さらにより好ましくは約０．１％〜約１０％、さらにより好ましくは約０．５％〜約５％、かつさらにより好ましくは約０．５％〜約２％の量で使用される。

ペプチド類
ジペプチド、トリペプチド、及びテトラペプチド並びにこれらの誘導体を含むが、これらに限定されない追加のペプチド類が、安全かつ有効な量で本発明の組成物に含まれてよい。本明細書で使用する「ペプチド」は、天然に存在するペプチド及び合成ペプチドの両方を指す。ペプチドを含有する天然及び市販の組成物も本明細書で有用である。

本明細書で使用するのに適するジペプチドとしては、カルノシン（β−ａｌａ−ｈｉｓ）が挙げられる。本明細書で使用するのに適するトリペプチドとしては、ｇｌｙ−ｈｉｓ−ｌｙｓ、ａｒｇ−Ｌｙｓ−ａｒｇ、ｈｉｓ−ｇｌｙ−ｇｌｙが挙げられる。好ましいトリペプチド及びその誘導体としては、ＢｉｏｐｅｐｔｉｄｅＣＬ（登録商標）（フランスのＳｅｄｅｒｍａ社から市販されている１００ｐｐｍのパルミトイル−ｇｌｙ−ｈｉｓ−ｌｙｓ）として購入することができるパルミトイル−ｇｌｙ−ｈｉｓ−ｌｙｓ；ペプチドＣＫ（ａｒｇ−ｌｙｓ−ａｒｇ）；ペプチドＣＫ＋（ａｃ−ａｒｇ−ｌｙｓ−ａｒｇ−ＮＨ_２）；及びＳｉｇｍａ社（ミズーリ州セントルイス）からラミンとして市販されているｈｉｓ−ｇｌｙ−ｇｌｙの銅誘導体が挙げられる。本明細書で使用するのに適するテトラペプチドとしては、ペプチドＥ、ａｒｇ−ｓｅｒ−ａｒｇ−ｌｙｓ（配列番号１１）が挙げられる。

好ましくは、追加のペプチドは、パルミトイル−ｇｌｙ−ｈｉｓ−ｌｙｓ、ベータ−ａｌａ−ｈｉｓ、これらの誘導体、及びこれらの組み合わせから選択される。より好ましくは、追加のペプチドは、パルミトイル−ｇｌｙ−ｈｉｓ−ｌｙｓ、これらの誘導体、及びこれらの組み合わせから選択される。

本発明の組成物に含まれる場合、追加のペプチドは、該組成物の重量で、好ましくは約１×１０^−６％〜約１０％、より好ましくは約１×１０^−６％〜約０．１％、さらにより好ましくは約１×１０^−５％〜約０．０１％の量で含まれる。ペプチドのＣａｒｎｏｓｉｎｅ（登録商標）を含む特定の実施形態において、該組成物は、かかるペプチドを該組成物の重量で、好ましくは約０．１％〜約５％含有する。ペプチド含有組成物Ｂｉｏｐｅｐｔｉｄｅ ＣＬ（登録商標）が含まれる他の実施形態において、得られる組成物は、好ましくは、Ｂｉｏｐｅｐｔｉｄｅ ＣＬ（登録商標）を該組成物の重量で約０．１％〜約１０％含有する。

抗酸化剤／ラジカルスカベンジャー
本発明の組成物は、安全かつ有効な量の抗酸化剤／ラジカルスカベンジャーを含んでよい。抗酸化剤／ラジカルスカベンジャーは、角質層内で増加したスケーリング又は質感の変化を引き起こし得るＵＶ照射に対する保護、並びに皮膚の損傷を引き起こし得る他の環境因子に対する保護を提供するのに特に有用である。

安全かつ有効な量の酸化防止剤／ラジカルスカベンジャーを、本発明の組成物に、好ましくは該組成物の約０．１％〜約１０％、より好ましくは約１％〜約５％添加してよい。

アスコルビン酸（ビタミンＣ）及びその塩、脂肪酸のアスコルビルエステル類、アスコルビン酸誘導体類（例えば、マグネシウムアスコルビルホスフェート、ナトリウムアスコルビルホスフェート、アスコルビルソルベート）、トコフェロール（ビタミンＥ）、ソルビン酸トコフェロール、酢酸トコフェロール、トコフェロールの他のエステル類、ブチル化ヒドロキシ安息香酸（ｂｕｔｙｌａｔｅｄ ｈｙｄｒｏｘｙ ｂｅｎｚｏｉｃ ａｃｉｄｓ）及びこれらの塩、６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−２−カルボン酸（商品名Ｔｒｏｌｏｘ（登録商標）で市販されている）、没食子酸及びそのアルキルエステル類、特に没食子酸プロピル、尿酸及びその塩及びアルキルエステル類、ソルビン酸及びその塩、リポ酸、アミン類（例えば、Ｎ，Ｎ−ジエチルヒドロキシルアミン、アミノ−グアニジン）、スルフヒドリル化合物類（例えば、グルタチオン）、ジヒドロキシフマル酸及びその塩、リシンピドレート、アルギニンピロレート、ノルジヒドログアイアレチン酸、バイオフラボノイド類、クルクミン、リジン、メチオニン、プロリン、スーパーオキシドジスムターゼ、シリマリン、茶抽出物、ブドウの皮／種子抽出物、メラニン、及びローズマリー抽出物などの抗酸化剤／ラジカルスカベンジャーを使用してよい。好ましい抗酸化剤／ラジカルスカベンジャーは、トコフェロールソルベート及びトコフェロールの他のエステル類、より好ましくはソルビン酸トコフェロールから選択される。例えば、局所用組成物中の、本発明に適用できるトコフェロールソルベートの使用については、１９８９年７月１１日発行のＤｏｎａｌｄ Ｌ．Ｂｉｓｓｅｔｔ，Ｒｏｄｎｅｙ Ｄ．Ｂｕｓｈ及びＲａｎｊｉｔ Ｃｈａｔｔｅｒｊｅｅの米国特許第４，８４７，０７１号に記載されている。

キレーター類
本発明の組成物は、安全かつ有効な量のキレーター又はキレート剤も含んでよい。本明細書で使用する「キレーター」又は「キレート剤」は、金属イオンが容易に化学反応に関与できない、又は化学反応を触媒できないように錯体を形成することによって系から金属イオンを除去できる活性薬剤を意味する。キレート剤の含有は、過剰なスケーリング又は皮膚の質感の変化に関与し得るＵＶ照射に対する保護及び皮膚損傷を引き起こし得る他の環境要因に対する保護を提供するのに特に有用である。

安全かつ有効な量のキレート剤を、本発明の組成物に、好ましくは該組成物の約０．１％〜約１０％、より好ましくは約１％〜約５％添加してよい。本明細書に有用である代表的なキレーターは、１９９６年１月３０日発行のＢｉｓｓｅｔｔらの米国特許第５，４８７，８８４号；１９９５年１０月３１日公開のＢｕｓｈらの国際公開番号９１／１６０３５；及び１９９５年１０月３１日公開Ｂｕｓｈらの国際公開番号９１／１６０３４に開示されている。本発明の組成物に有用な好ましいキレーター類は、フリルジオキシム、フリルモノオキシム、及びこれらの誘導体である。

フラボノイド類
本発明の組成物は、必要に応じてフラボノイド化合物を含有してよい。フラボノイドは、米国特許第５，６８６，０８２号及び同第５，６８６，３６７号に広く開示されており、両方とも参照により本明細書に組み込まれる。本発明での使用に適するフラボノイド類としては、非置換フラバノン類、一置換フラバノン類、及びこれらの混合物から選択されるフラバノン類；非置換カルコン類、一置換カルコン類、二置換カルコン類、三置換カルコン類、及びこれらの混合物から選択されるカルコン類；非置換フラボン類、一置換フラボン類、二置換フラボン類、及びこれらの混合物から選択されるフラボン類；１種以上のイソフラボン類；非置換クマリン類、一置換クマリン類、二置換クマリン類、及びこれらの混合物から選択されるクマリン類；非置換クロモン類、一置換クロモン類、二置換クロモン類、及びこれらの混合物から選択されるクロモン類；１種以上のジクマロール類；１種以上のクロマノン類；１種以上のクロマノール類；これらの異性体（例えば、シス／トランス異性体）；並びにこれらの混合物が挙げられる。本明細書で使用する用語「置換」は、フラボノイドの１個以上の水素原子が、独立して、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシル、及びＯ−グリコシドなど又はこれらの置換基の混合物で置換されているフラボノイド類を意味する。

適切なフラボノイドの例としては、非置換フラバノン、モノ−ヒドロキシフラバノン類（例えば、２’−ヒドロキシフラバノン、６−ヒドロキシフラバノン、７−ヒドロキシフラバノンなど）、モノ−アルコキシフラバノン類（例えば、５−メトキシフラバノン、６−メトキシフラバノン、７−メトキシフラバノン、４’−メトキシフラバノンなど）、非置換カルコン（特に非置換トランス−カルコン）、モノ−ヒドロキシカルコン類（例えば、２’−ヒドロキシカルコン、４’−ヒドロキシカルコンなど）、ジ−ヒドロキシカルコン類（例えば、２’，４−ジヒドロキシカルコン、２’，４’−ジヒドロキシカルコン、２，２’−ジヒドロキシカルコン、２’，３−ジヒドロキシカルコン、２’，５’−ジヒドロキシカルコンなど）、及びトリ−ヒドロキシカルコン類（例えば、２’，３’，４’−トリヒドロキシカルコン、４，２’，４’−トリヒドロキシカルコン、２，２’，４’−トリヒドロキシカルコンなど）、非置換フラボン、７，２’−ジヒドロキシフラボン、３’，４’−ジヒドロキシナフトフラボン、４’−ヒドロキシフラボン、５，６−ベンゾフラボン、及び７，８−ベンゾフラボン、非置換イソフラボン、ダイゼイン（７，４’−ジヒドロキシイソフラボン）、５，７−ジヒドロキシ−４’−メトキシイソフラボン、大豆イソフラボン類（大豆から抽出された混合物）、非置換クマリン、４−ヒドロキシクマリン、７−ヒドロキシクマリン、６−ヒドロキシ−４−メチルクマリン、非置換クロモン、３−ホルミルクロモン、３−ホルミル−６−イソプロピルクロモン、非置換ジクマロール、非置換クロマノン、非置換クロマノール、及びこれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。

非置換フラバノン、メトキシフラバノン類、非置換カルコン、２’，４−ジヒドロキシカルコン、及びこれらの混合物が本明細書での使用に好ましい。非置換フラバノン、非置換カルコン（特にトランス異性体）、及びこれらの混合物がより好ましい。

これらは、合成物質であり得るか、又は天然源（例えば、植物）からの抽出物として得ることができる。天然源物質は、さらに誘導体化することもできる（例えば、天然源からの抽出後に調製されるエステル又はエーテル誘導体）。本明細書で有用なフラボノイド化合物は、いくつかの供給元、例えば、Ｉｎｄｏｆｉｎｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社（ニュージャージー州サマービル）、Ｓｔｅｒａｌｏｉｄｓ社（ニューハンプシャー州ウィルトン）、及びＡｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社（ウィスコンシン州ミルウォーキー）から市販されている。

上記フラボノイド化合物の混合物も使用してよい。

本明細書に記載のフラボノイド化合物は、本発明に係る組成物中に、好ましくは約０．０１％〜約２０％、より好ましくは約０．１％〜約１０％、かつさらにより好ましくは約０．５％〜約５％の濃度で存在する。

抗炎症剤
安全かつ有効な量の抗炎症剤を、本発明の組成物に、好ましくは該組成物の約０．１％〜約１０％、より好ましくは約０．５％〜約５％添加してよい。抗炎症剤は、本発明の皮膚外観の利点を向上させ、例えば、かかる薬剤は、より均一で許容される皮膚の色調又は色に寄与する。かかる薬剤は効力が大きく異なるので、該組成物中に使用される抗炎症剤の正確な量は、利用される特定の抗炎症剤に依存する。

ヒドロコルチゾン、ヒドロキシトリアムシノロン、アルファ−メチルデキサメタゾン、リン酸デキサメタゾン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、吉草酸クロベタゾール、デソニド、デソキシメタゾン、酢酸デソキシコルチコステロン、デキサメタゾン、ジクロリゾン、ジフロラゾンジアセテート、吉草酸ジフルコルトロン、フルアドレノロン、フルクロロロンアセトニド、フルドロコルチゾン、ピバル酸フルメタゾン、フルオシノロンアセトニド、フルオシノニド、フルコルチンブチルエステル（ｆｌｕｃｏｒｔｉｎｅ ｂｕｔｙｌｅｓｔｅｒ）類、フルオコルトロン、酢酸フルプレドニデン（ｆｌｕｐｒｅｄｎｙｌｉｄｅｎｅ）、フルランドレノロン、ハルシノニド、酢酸ヒドロコルチゾン、酪酸ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、トリアムシノロンアセトニド、コルチゾン、コルトドキソン、フルセトニド（ｆｌｕｃｅｔｏｎｉｄｅ）、フルドロコルチゾン、ジフルオロゾンジアセテート、フルラドレノロン、フルドロコルチゾン、ジフルロゾンジアセテート、フルラドレノロンアセトニド、メドリゾン、アムシナフェル、アムシナフィド、ベタメタゾン及びそのエステル類のバランス、クロロプレドニゾン、酢酸クロロプレドニゾン、クロコルテロン、クレスシノロン、ジクロリゾン、ジフルプレドナート（ｄｉｆｌｕｒｐｒｅｄｎａｔｅ）、フルクロロニド、フルニソリド、フルオロメタローン、フルペロロン、フルプレドニソロン、吉草酸ヒドロコルチゾン、プロピオン酸ヒドロコルチゾンシクロペンチル、ヒドロコルタメート、メプレドニゾン、パラメタゾン、プレドニゾロン、プレドニゾン、二プロピオン酸ベクロメタゾン、トリアムシノロン、及びこれらの混合物などのコルチコステロイド類を含むがこれらに限定されないステロイド性抗炎症剤を使用してよい。使用するのに好ましいステロイド系抗炎症剤はヒドロコルチゾンである。

該組成物で有用である抗炎症剤の第二のクラスには、非ステロイド性抗炎症剤が含まれる。このグループに包含される様々な化合物は、当業者に周知である。非ステロイド性抗炎症剤等の化学構造、合成、副作用などの詳細な開示については、抗炎症薬及び抗リウマチ薬（Ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ａｎｄ Ａｎｔｉ−Ｒｈｅｕｍａｔｉｃ Ｄｒｕｇｓ）、Ｋ．Ｄ．Ｒａｉｎｓｆｏｒｄ、Ｉ−ＩＩＩ巻、ＣＲＣプレス、Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ、（１９８５）、及び抗炎症薬、化学と薬理学（Ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ａｇｅｎｔｓ， Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ）、１、Ｒ．Ａ．Ｓｃｈｅｒｒｅｒら、アカデミックプレス、ニューヨーク（１９７４）を含む標準的なテキストを参照することができる。

本発明に係る組成物に有用な特定の非ステロイド性抗炎症剤としては、以下のものが挙げられるが、これらに限定されない：

１）ピロキシカム、イソキシカム、テノキシカム、スドキシカム、及びＣＰ−１４，３０４などのオキシカム類；

２）アスピリン、ジサルシド、ベノリレート、トリリサート、サファプリン、ソルプリン、ジフルニサル、及びフェンドサルなどのサリチル酸塩；

３）ジクロフェナク、フェンクロフェナク、インドメタシン、スリンダク、トルメチン、イソキセパック、フロフェナク、チオピナク、ジドメタシン、アセマタシン、フェンチアザク、ゾメピラック、クリンダナク、オキセピナク、フェルビナク、及びケトロラクなどの酢酸誘導体類；

４）メフェナム酸、メクロフェナム酸、フルフェナム酸、ニフルム酸、及びトルフェナム酸などのフェナム酸塩；

５）イブプロフェン、ナプロキセン、ベノキサプロフェン、フルルビプロフェン、ケトプロフェン、フェノプロフェン、フェンブフェン、インドプロフェン、ピルプロフェン、カルプロフェン、オキサプロジン、プラノプロフェン、ミクロプロフェン、チオキサプロフェン、スプロフェン、アルミノプロフェン、及びチアプロフェンなどのプロピオン酸誘導体類；並びに

６）フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、フェプラゾン、アザプロパゾン、及びトリメタゾンなどのピラゾール類。

これらの非ステロイド性抗炎症剤の混合物、並びにこれらの薬剤の皮膚科学的に許容される塩類及びエステル類も使用してよい。例えば、エトフェナメート、フルフェナム酸誘導体は、局所適用に特に有用である。非ステロイド性抗炎症剤のうち、イブプロフェン、ナプロキセン、フルフェナム酸、エトフェナメート、アスピリン、メフェナム酸、メクロフェナム酸、ピロキシカム及びフェルビナクが好ましい。イブプロフェン、ナプロキセン、ケトプロフェン、エトフェナメート、アスピリン及びフルフェナム酸がより好ましい。

最後に、いわゆる「天然の」抗炎症剤は、本発明の方法において有用である。かかる薬剤は、天然供給源（例えば、植物、菌類、微生物の副産物）からの適切な物理的及び／又は化学的単離によって抽出物として適切に取得され得るか、又は合成的に調製することができる。例えば、キャンデリラワックス、ビサボロール（例えば、アルファ−ビサボロール）、アロエベラ、植物ステロール類（例えば、フィトステロール）、マンジスタ（ｍａｎｊｉｓｔｈａ）（アカネ属、特にルビアコルディフォリアの植物から抽出される）、及びグガル（ｇｕｇｇａｌ）（コンミフォラ属の植物、特にコミフォラムクルから抽出される）、コーラ抽出物、カモミール、ムラサキツメクサ抽出物、及びムチヤギ抽出物を使用してよい。

本明細書で有用なさらなる抗炎症剤としては、グリチルレチン酸、グリチルリチン酸、及びこれらの誘導体（例えば、塩類及びエステル類）を含むカンゾウ（植物の属／種Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ ｇｌａｂｒａ）ファミリーの化合物が挙げられる。前述の化合物の適切な塩としては、金属塩及びアンモニウム塩が挙げられる。適切なエステル類としては、酸のＣ_２〜Ｃ_２４、好ましくはＣ_１０〜Ｃ_２４、より好ましくはＣ_１６〜Ｃ_２４飽和又は不飽和エステル類が挙げられる。前述の具体例としては、油溶性カンゾウ抽出物、グリチルリチン及びグリチルレチン酸そのもの、グリチルリチン酸モノアンモニウム、グリチルリチン酸モノカリウム、グリチルリチン酸二カリウム、１−β−グリチルレチン酸、グリチルレチン酸ステアリル、及び３−ステアリルオキシ−グリチルレチン酸、及び３−スクシニルオキシ−β−グリチルレチン酸二ナトリウムが挙げられる。グリチルレチン酸ステアリルが好ましい。

抗セルライト剤
本発明の組成物は、安全かつ有効な量の抗セルライト剤を含んでもよい。適切な薬剤としては、キサンチン化合物類（例えば、カフェイン、テオフィリン、テオブロミン、及びアミノフィリン）が挙げられ得るが、これらに限定されない。

局所麻酔剤
本発明の組成物は、安全かつ有効な量の局所麻酔剤を含んでもよい。局所麻酔薬の例としては、ベンゾカイン、リドカイン、ブピバカイン、クロルプロカイン、ジブカイン、エチドカイン、メピバカイン、テトラカイン、ジクロニン、ヘキシルカイン、プロカイン、コカイン、ケタミン、プラモキシン、フェノール、及びその薬学的に許容される塩が挙げられる。

日焼け活性物質
本発明の組成物は、日焼け活性物質を含んでよい。存在する場合、該組成物は、人工日焼け活性物質としてのジヒドロキシアセトンを該組成物の重量で約０．１％〜約２０％、より好ましくは約２％〜約７％、かつさらにより好ましくは約３％〜約６％含有することが好ましい。

ＤＨＡ又は１，３−ジヒドロキシ−２−プロパノンとしても知られているジヒドロキシアセトンは、ホワイト〜オフホワイトの結晶性粉末である。この物質は、化学式Ｃ_３Ｈ_６Ｏ_３及び以下の化学構造

で表すことができる。

該化合物は、単量体及び二量体の混合物として存在することができ、二量体が固体結晶状態で優勢である。加熱又は溶融時には、二量体を分解して、単量体を得る。二量体形態の単量体形態へのこの変換も水溶液中で生じる。ジヒドロキシアセトンは、酸性ｐＨ値でより安定であることも知られている。メルクインデックス、第１０版、エントリー３１６７、４６３ページ（１９８３）及び「化粧品のためのジヒドロキシアセトン（Ｄｉｈｙｄｒｏｘｙａｃｅｔｏｎｅ ｆｏｒ Ｃｏｓｍｅｔｉｃｓ）」、メルクテクニカルブリテン、０３−３０４ １１０、３１９ ８９７、１８０ ５８８を参照されたい。

皮膚美白剤
本発明の組成物は、皮膚美白剤を含有してよい。使用される場合、該組成物は、好ましくは、皮膚美白剤を、該組成物の重量で好ましくは約０．１％〜約１０％、より好ましくは約０．２％〜約５％、さらに好ましくは約０．５％〜約２％含有する。適切な皮膚美白剤としては、コウジ酸、アルブチン、アスコルビン酸及びこれらの誘導体（例えば、マグネシウムアスコルビルホスフェート又はナトリウムアスコルビルホスフェート）、並びに抽出物（例えば、桑抽出物、胎盤抽出物）を含む、当技術分野で知られているものが挙げられる。本明細書での使用に適する皮膚美白剤は、１９９５年６月１２日出願のＰＣＴ出願番号米国特許出願第９５／０７４３２号に相当するＨｉｌｌｅｂｒａｎｄの名前でのＰＣＴ公開番号９５／３４２８０；及び１９９５年８月９日公開のＰＣＴ公開番号９５／２３７８０に相当するＫｖａｌｎｅｓ、Ｍｉｔｃｈｅｌｌ Ａ．ＤｅＬｏｎｇ、Ｂａｒｔｏｎ Ｊ．Ｂｒａｄｂｕｒｙ、Ｃｕｒｔｉｓ Ｂ．Ｍｏｔｌｅｙ、及びＪｏｈｎ Ｄ．Ｃａｒｔｅｒの名前で出願した同時係属米国出願第０８／３９０，１５２号に記載のものも挙げられる。

皮膚沈静及び皮膚治癒用活性物質
本発明の組成物は、皮膚沈静又は皮膚治癒用活性物質を含んでよい。本明細書での使用に適する皮膚鎮静又は皮膚治癒用活性物質としては、パントテン酸誘導体（パンテノール、デクスパンテノール、エチルパンテノールを含む）、アロエベラ、アラントイン、ビサボロール、及びグリチルリチン酸二カリウムが挙げられる。安全かつ有効な量の皮膚鎮静又は皮膚治癒用活性物質を、本発明の組成物に、好ましくは形成される組成物の重量で約０．１％〜約３０％、より好ましくは約０．５％〜約２０％、さらにより好ましくは約０．５％〜約１０％添加してよい。

ａ）ビサボロール
本発明の局所用組成物は、安全かつ有効な量のビサボロールも含んでよい。ビサボロールは、以下の構造

を有する天然の不飽和単環式テルペンアルコールである。

ビサボロールは、カモミールエキス／油の主要な活性成分である。ビサボロールは、合成（ｄ，１−α−異性体又は（＋／−）−α−異性体）もしくは天然（（−）−α−異性体）起源であり得、本質的に純粋な化合物又は化合物の混合物（例えば、カモミールなどの天然源からの抽出物）として使用することができる。ビサボロールのアルファ形（ａ−ビサボロール）は、スキンコンディショニング剤又は沈静剤として様々な化粧品で使用されている。本明細書で使用する「ビサボロール」には、カモミール抽出物又は油並びにこれらの異性体及び互変異性体が含まれる。適切なビサボロール化合物は、Ｄｒａｇｏｃｏ社（ニュージャージー州トトワ）からアルファ−ビサボロール天然（ａｌｐｈａ−ｂｉｓａｂｏｌｏｌ ｎａｔｕｒａｌ）の商品名で天然物質として、かつＦｌｕｋａ社（ウィスコンシン州ミルウォーキー）からアルファ−ビサボロールの商品名で合成物質として市販されている。

本発明の組成物において、該組成物は、ビサボロールを、該組成物の重量で好ましくは約０．００１％〜約５０％、より好ましくは約０．０１％〜約２０％、さらにより好ましくは約０．０１％〜約１５％、さらにより好ましくは約０．１％〜約１０％、さらにより好ましくは約０．１％〜約５％含有する。

抗菌及び抗真菌活性物質
本発明の組成物は、抗菌又は抗真菌活性物質を含有してよい。かかる活性物質は、微生物を破壊し、微生物の発生を予防するか、又は微生物の病原作用を防止することが可能である。安全かつ有効な量の抗菌又は抗真菌活性物質を、本発明の組成物に好ましくは約０．００１％〜約１０％、より好ましくは約０．０１％〜約５％、かつさらにより好ましくは約０．０５％〜約２％添加してよい。

抗菌及び抗真菌活性物質の例としては、βラクタム薬、キノロン薬、シプロフロキサシン、ノルフロキサシン、テトラサイクリン、エリスロマイシン、アミカシン、２，４−４’−トリクロロ−２’−ヒドロキシジフェニルエーテル、３，４，４’−トリクロロバニリド（ｔｒｉｃｈｌｏｒｏｂａｎｉｌｉｄｅ）、フェノキシエタノール、フェノキシプロパノール、フェノキシイソプロパノール、ドキシサイクリン、カプレオマイシン、クロルヘキシジン、クロルテトラサイクリン、オキシテトラサイクリン、クリンダマイシン、エタンブトール、イセチオン酸ヘキサミジン、メトロニダゾール、ペンタミジン、ゲンタマイシン、カナマイシン、リネオマイシン、メタサイクリン、メテナミン、ミノサイクリン、ネオマイシン、ネチルマイシン、パロモマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシン、ミコナゾール、塩酸テトラサイクリン、エリスロマイシン、亜鉛エリスロマイシン、エリスロマイシンエストレート、エリスロマイシンステアレート、硫酸アミカシン、塩酸ドキシサイクリン、硫酸カプレオマイシン、グルコン酸クロルヘキシジン、塩酸クロルヘキシジン、塩酸クロルテトラサイクリン、塩酸オキシテトラサイクリン、塩酸クリンダマイシン、塩酸エタンブトール、塩酸メトロニダゾール、塩酸ペンタミジン、硫酸ゲンタマイシン、硫酸カナマイシン、リネオマイシン塩酸塩、メタサイクリン塩酸塩、馬尿酸メテナミン、マンデル酸メテナミン、塩酸ミノサイクリン、硫酸ネオマイシン、硫酸ネチルマイシン、硫酸パロモマイシン、硫酸ストレプトマイシン、硫酸トブラマイシン、塩酸ミコナゾール、ケトコナゾール、塩酸アマンファジン（ａｍａｎｆａｄｉｎｅ）、硫酸アマンファジン、オクトピロックス、パラクロロメタキシレノール、ナイスタチン、トルナフタート、亜鉛ピリチオン及びクロトリマゾールが挙げられる。

本明細書で有用な活性物質の好ましい例としては、サリチル酸、過酸化ベンゾイル、３−ヒドロキシ安息香酸、グリコール酸、乳酸、４−ヒドロキシ安息香酸、アセチルサリチル酸、２−ヒドロキシブタン酸、２−ヒドロキシペンタン酸、２−ヒドロキシヘキサン酸、シス−レチノイン酸、トランス−レチノイン酸、レチノール、フィチン酸、Ｎ−アセチル−Ｌ−システイン、リポ酸、アゼライン酸、アラキドン酸、過酸化ベンゾイル、テトラサイクリン、イブプロフェン、ナプロキセン、ヒドロコルチゾン、アセトミノフェン、レゾルシノール、フェノキシエタノール、フェノキシプロパノール、フェノキシイソプロパノール、２，４，４’−トリクロロ−２’−ヒドロキシジフェニルエーテル、３，４，４’−トリクロロカルバニリド、オクトピロックス、塩酸リドカイン、クロトリマゾール、ミコナゾール、ケトコナゾール、硫酸ネオマイシン、及びこれらの混合物から選択されるものが挙げられる。

日焼け止め活性物質
紫外線への曝露は、角質層の過度のスケーリング及び質感変化をもたらし得る。したがって、本発明の組成物は、必要に応じて日焼け止め活性物質を含有してよい。本明細書で使用する「日焼け止め活性物質」には、日焼け止め剤及び物理的日焼け止めの両方が含まれる。適切な日焼け止め活性物質は、有機又は無機であってよい。

本明細書で有用な無機日焼け止め剤としては、以下の金属酸化物が挙げられる；平均一次粒径が約１５ｎｍ〜約１００ｎｍの二酸化チタン、平均一次粒径が約１５ｎｍ〜約１５０ｎｍの酸化亜鉛、平均一次粒径が約１５ｎｍ〜約１５０ｎｍの酸化ジルコニウム、平均一次粒径が約１５ｎｍ〜約５００ｎｍの酸化鉄、及びこれらの混合物。本明細書で使用する場合、無機日焼け止め剤は、該組成物の重量で約０．１％〜約２０％、好ましくは約０．５％〜約１０％、より好ましくは約１％〜約５％の量で存在する。

多種多様な従来の有機日焼け止め活性物質が本明細書での使用に適する。Ｓａｇａｒｉｎらの化粧品科学と技術（Ｃｏｓｍｅｔｉｃｓ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）（１９７２）の第ＶＩＩＩ章、１８９ページ以降に多数の適切な活性物質が開示されている。特定の適切な日焼け止め活性物質としては、例えば、ｐ−アミノ安息香酸、その塩類及びその誘導体類（エチル、イソブチル、グリセリルエステル類；ｐ−ジメチルアミノ安息香酸）；アントラニレート（すなわち、Ｏ−アミノ安息香酸塩；メチル、メンチル、フェニル、ベンジル、フェニルエチル、リナリル、テルピニル、及びシクロヘキセニルエステル類）；サリチレート（アミル、フェニル、オクチル、ベンジル、メンチル、グリセリル、及びジプロピレングリコールエステル類）；桂皮酸誘導体類（メンチル及びベンジルエステル類、ａ−フェニルシンナモニトリル；ブチルシンナモイルピルベート）；ジヒドロキシ桂皮酸誘導体類（ウンベリフェロン、メチルウンベリフェロン、メチルアセトウンベリフェロン）；トリヒドロキシ桂皮酸誘導体類（エスクレチン、メチルエスクレチン、ダフネチン、及びグルコシド、エスクリン及びダフニン）；炭化水素類（ジフェニルブタジエン、スチルベン）；ジベンザルアセトン及びベンザルアセトフェノン；ナフトールスルホン酸塩（２−ナフトール−３，６−ジスルホン酸ナトリウム塩及び２−ナフトール−６，８−ジスルホン酸ナトリウム塩）；ジ−ヒドロキシナフトエ酸及びその塩類；ｏ−及びｐ−ヒドロキシビフェニルジスルホン酸塩；クマリン誘導体類（７−ヒドロキシ、７−メチル、３−フェニル）；ジアゾール（２−アセチル−３−ブロモインダゾール、フェニルベンゾオキサゾール、メチルナフトオキサゾール、様々なアリールベンゾチアゾール類）；キニーネ塩（重硫酸塩、硫酸塩、塩化物、オレイン酸塩、及びタンニン酸塩）キノリン誘導体類（８−ヒドロキシキノリン塩、２−フェニルキノリン）；ヒドロキシ−又はメトキシ−置換ベンゾフェノン類；尿酸及びビオルル酸；タンニン酸及びその誘導体類（例えば、ヘキサエチルエーテル）；（ブチルカルボトール）（６−プロピルピペロニル）エーテル；ヒドロキノン；ベンゾフェノン類（オキシベンゼン、スリソベンゾン、ジオキシベンゾン、ベンゾレゾルシノール、２，２’，４，４’−テトラヒドロキシベンゾフェノン、２，２’−ジヒドロキシ−４，４’−ジメトキシベンゾフェノン、オクタベンゾン；４−イソプロピルジベンゾイルメタン；ブチルメトキシジベンゾイルメタン；エトクリレン；オクトクリレン；［３−（４’−メチルベンジリデンボマン−２−オン）、テレフタリリデンジカンファースルホン酸及び４−イソプロピル−ジ−ベンゾイルメタンが挙げられる。

これらのうち、２−エチルヘキシル−ｐ−メトキシシンナメート（ＰＡＲＳＯＬ ＭＣＸとして市販されている）、４，４’−ｔ−ブチルメトキシジベンゾイルメタン（ＰＡＲＳＯＬ １７８９として市販されている）、２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン、オクチルジメチル−ｐ−アミノ安息香酸、ジガロイルトリオレエート、２，２−ジヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン、エチル−４−（ビス（ヒドロキシプロピル））アミノベンゾエート、２−エチルヘキシル−２−シアノ−３，３−ジフェニルアクリレート、２−エチルヘキシルサリチレート、グリセリル−ｐ−アミノベンゾエート、３，３，５−トリメチルシクロヘキシルサリチレート、メチルアントラニレート、ｐ−ジメチルアミノ安息香酸又はアミノベンゾエート、２−エチルヘキシル−ｐ−ジメチルアミノベンゾエート、２−フェニルベンズイミダゾール−５−スルホン酸、２−（ｐ−ジメチルアミノフェニル）−５−スルホニックベンゾキサゾ酸（ｓｕｌｆｏｎｉｃｂｅｎｚｏｘａｚｏｉｃ ａｃｉｄ）、オクトクリレン、及びこれらの化合物の混合物が好ましい。

該組成物に有用なより好ましい有機日焼け止め活性物質としては、２−エチルヘキシル−ｐ−メトキシシンナメート、ブチルメトキシジベンゾイルメタン、２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン、２−フェニルベンズイミダゾール−５−スルホン酸、オクチルジメチル−ｐ−アミノ安息香酸、オクトクリレン及びこれらの混合物が挙げられる。

１９９０年６月２６日発行のＳａｂａｔｅｌｌｉの米国特許第４，９３７，３７０号、及び１９９１年３月１２日発行のＳａｂａｔｅｌｌｉ ＆ Ｓｐｉｒｎａｋの米国特許第４，９９９，１８６に開示されているものなどの日焼け止め活性物質も該組成物中で特に有用である。本明細書に開示される日焼け止め剤は、単一分子中に、異なる紫外線放射吸収スペクトルを示す２つの異なる発色団部分を有する。発色団部分の１方はＵＶＢ照射範囲において主に吸収し、他方はＵＶＡ放射線範囲において強く吸収する。

このクラスの日焼け止め剤の好ましいメンバーは、２，４−ジヒドロキシベンゾフェノンの４−Ｎ，Ｎ−（２−エチルヘキシル）メチルアミノ安息香酸エステル；４−ヒドロキシジベンゾイルメタンとのＮ，Ｎ−ジ−（２−エチルヘキシル）−４−アミノ安息香酸エステル；４−ヒドロキシジベンゾイルメタンとの４−Ｎ，Ｎ−（２−エチルヘキシル）メチルアミノ安息香酸エステル；２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシエトキシ）ベンゾフェノンの４−Ｎ，Ｎ−（２−エチルヘキシル）メチルアミノ安息香酸エステル；４−（２−ヒドロキシエトキシ）ジベンゾイルメタンの４−Ｎ，Ｎ−（２−エチルヘキシル）メチルアミノ安息香酸エステル；２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシエトキシ）ベンゾフェノンのＮ，Ｎ−ジ−（２−エチルヘキシル）−４−アミノ安息香酸エステル；及び４−（２−ヒドロキシエトキシ）ジベンゾイルメタンのＮ，Ｎ−ジ−（２−エチルヘキシル）−４−アミノ安息香酸エステル並びにこれらの混合物である。

特に好ましい日焼け止め活性物質としては、４，４’−ｔ−ブチルメトキシジベンゾイルメタン、２−エチルヘキシル−ｐ−メトキシシンナメート、フェニルベンズイミダゾールスルホン酸、及びオクトクリレンが挙げられる。

典型的には、該組成物の重量で約１％〜約２０％、より典型的には約２％〜約１０％の安全かつ有効な量の有機日焼け止め活性物質が使用される。正確な量は、選択された日焼け止め剤又は複数の日焼け止め剤及び所望の太陽光線保護指数（ＳＰＦ）に依存して変化する。

粒子状物質
本発明の組成物は、粒子状物質、好ましくは、金属酸化物を含有してよい。これらの粒子は、コーティングされるか又はコーティングされない、荷電しているか、又は無電荷であり得る。荷電した粒子状物質は、参照により本明細書に組み込まれるＨａらの米国特許第５，９９７，８８７号に開示されている。本明細書で有用な粒子状物質としては、オキシ塩化ビスマス、酸化鉄、雲母、硫酸バリウム及びＴｉＯ_２で処理した雲母、シリカ、ナイロン、ポリエチレン、タルク、スチレン、ポリプロピレン、エチレン／アクリル酸コポリマー、セリサイト、酸化アルミニウム、シリコーン樹脂、硫酸バリウム、炭酸カルシウム、セルロースアセテート、二酸化チタン、ポリメチルメタクリレート、及びこれらの混合物が挙げられる。

無機粒子状物質、例えば、ＴｉＯ_２、ＺｎＯ、又はＺｒＯ_２は、いくつかの供給元から市販されている。適切な粒子状物質の一例としては、Ｕ．Ｓ．Ｃｏｓｍｅｔｉｃｓ社から入手可能な物質（ＴＲＯＮＯＸ ＴｉＯ_２シリーズ、ＳＡＴ−Ｔ ＣＲ８３７、ルチルＴｉＯ_２）が挙げられる。好ましくは、粒子状物質は、該組成物の重量で約０．０１％〜約２、より好ましくは約０．０５％〜約１．５％、さらにより好ましくは約０．１％〜約１％のレベルで該組成物中に存在している。

コンディショニング剤
本発明の組成物は、湿潤剤、保湿剤、又は皮膚コンディショナーから選択されるコンディショニング剤を含有してよい。これらの様々な物質を用いることができ、それぞれは、該組成物の重量で約０．０１％〜約２０％、より好ましくは約０．１％〜約１０％、さらにより好ましくは約０．５％〜約７％のレベルで存在することができる。これらの物質には、グアニジン；尿素；グリコール酸及びグリコール酸塩（例えば、アンモニウム及び第四級アルキルアンモニウム）；サリチル酸；乳酸及び乳酸塩（例えば、アンモニウム及び第四級アルキルアンモニウム）、様々な形態のいずれかのアロエベラ（例えば、アロエベラゲル）；ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、グリセロール、ヘキサントリオール、ブタントリオール、プロピレングリコール、ブチレングリコール、及びヘキシレングリコールなどの多価アルコール類；ポリエチレングリコール類；糖類（例えば、メリビオース）及びデンプン；糖及びデンプン誘導体類（例えば、アルコキシル化グルコース、フルクトース、グルコサミン）；ヒアルロン酸；ラクトアミドモノエタノールアミン；アセトアミドモノエタノールアミン；パンテノール；アラントイン；及びこれらの混合物が含まれるが、これらに限定されない。１９９０年１２月１１日発行のＯｒｒらの米国特許第４，９７６，９５３号に記載のプロポキシル化グリセロール類も本明細書で有用である。

糖及び関連物質の様々なＣ_１〜Ｃ_３０モノエステル類並びにポリエステル類も有用である。これらのエステル類は、糖又はポリオール部分及び１以上のカルボン酸部分から誘導される。かかるエステル物質については、１９７７年１月２５日発行のＪａｎｄａｃｅｋの米国特許第２，８３１，８５４号、同第４，００５，１９６号；１９７７年１月２５日発行のＪａｎｄａｃｅｋの米国特許第４，００５，１９５号、１９９４年４月２６日発行のＬｅｔｔｏｎらの米国特許第５，３０６，５１６号、１９９４年４月２６日発行のＬｅｔｔｏｎらの米国特許第５，３０６，５１５号、１９９４年４月２６日発行のＬｅｔｔｏｎらの米国特許第５，３０５，５１４号、１９８９年１月１０日発行のＪａｎｄａｃｅｋらの米国特許第４，７９７，３００号、１９７６年６月１５日発行のＲｉｚｚｉらの米国特許第３，９６３，６９９号、１９８５年５月２１日発行のＶｏｌｐｅｎｈｅｉｎの米国特許第４，５１８，７７２号、１９８５年５月２１日発行のＶｏｌｐｅｎｈｅｉｎの米国特許第４，５１７，３６０号に記載されている。

好ましくは、コンディショニング剤は、尿素、グアニジン、スクロースポリエステル、パンテノール、デクスパンテノール、アラントイン、及びこれらの組み合わせから選択される。

構造剤
本明細書の組成物、特にそのエマルジョンは、構造剤を含有してよい。構造剤は、本発明の水中油型エマルジョンにおいて特に好ましい。理論によって限定されないが、構造剤は、該組成物の安定性に寄与するレオロジー特性を該組成物に提供するのに役立つと考えられている。例えば、構造剤は、液晶ゲルネットワーク構造の形成を補助する傾向がある。構造剤は、乳化剤又は界面活性剤としても機能することができる。好ましい組成物は、１種以上の構造剤を約０．１％〜約２０％、より好ましくは約０．１％〜約１０％、さらにより好ましくは約０．５％〜約９％含有する。

好ましい構造剤は、ＨＬＢが約１〜約８であり、融点が少なくとも約４５℃である薬剤である。適切な構造剤としては、飽和Ｃ_１４〜Ｃ_３０脂肪族アルコール、約１〜約５モルのエチレンオキシドを含有する飽和Ｃ_１６〜Ｃ_３０脂肪族アルコール、飽和Ｃ_１６〜Ｃ_３０ジオール類、飽和Ｃ_１６〜Ｃ_３０モノグリセロールエーテル、飽和Ｃ_１６〜Ｃ_３０ヒドロキシ脂肪酸、Ｃ_１４〜Ｃ_３０ヒドロキシル化飽和脂肪酸及びＣ_１４〜Ｃ_３０非ヒドロキシル化飽和脂肪酸、Ｃ_１４〜Ｃ_３０飽和エトキシル化脂肪酸、約１〜約５モルのエチレンオキシドジオールを含有するアミン類及びアルコール類、モノグリセリド含量が少なくとも４０％であるＣ_１４〜Ｃ_３０飽和グリセリルモノエステル、約１〜約３個のアルキル基及び約２〜約３個の飽和グリセロール単位を有するＣ_１４〜Ｃ_３０飽和ポリグリセロールエステル、Ｃ_１４〜Ｃ_３０グリセリルモノエーテル、約１〜約５モルのエチレンオキシドとのＣ_１４〜Ｃ_３０飽和エトキシル化ソルビタンモノ／ジエステル、Ｃ_１４〜Ｃ_３０飽和メチルグルコシドエステル、Ｃ_１４〜Ｃ_３０飽和スクロースモノ／ジエステル、約１〜約５モルのエチレンオキシドとのＣ_１４〜Ｃ_３０飽和エトキシル化メチルグルコシドエステル、平均１〜２個のグルコース単位を有するＣ_１４〜Ｃ_３０飽和ポリグルコシド、並びに融点が少なくとも約４５℃であるこれらの混合物が挙げられる。

本発明の好ましい構造剤は、ステアリン酸、パルミチン酸、ステアリルアルコール、セチルアルコール、ベヘニルアルコール、ステアリン酸、パルミチン酸、平均約１〜約５個のエチレンオキシド単位を有するステアリルアルコールのポリエチレングリコールエーテル、平均約１〜約５個のエチレンオキシド単位を有するセチルアルコールのポリエチレングリコールエーテル、及びこれらの混合物から選択される。本発明のより好ましい構造剤は、ステアリルアルコール、セチルアルコール、ベヘニルアルコール、平均約２個のエチレンオキシド単位を有するステアリルアルコールのポリエチレングリコールエーテル（ステアレス−２）、平均約２個のエチレンオキシド単位を有するセチルアルコールのポリエチレングリコールエーテル、及びこれらの混合物から選択される。さらにより好ましい構造剤は、ステアリン酸、パルミチン酸、ステアリルアルコール、セチルアルコール、ベヘニルアルコール、ステアレス−２、及びこれらの混合物から選択される。

増粘剤（増粘剤及びゲル化剤を含む）
本発明の組成物は、１種以上の増粘剤を、該組成物の重量で好ましくは約０．１％〜約５％、より好ましくは約０．１％〜約４％、さらにより好ましくは約０．２５％〜約３％含有することができる。

非限定的な増粘剤のクラスには、以下から選択されるものが含まれる：

ａ）カルボン酸ポリマー類
これらのポリマーは、アクリル酸、置換アクリル酸、これらのアクリル酸及び置換アクリル酸の塩類並びにこれらのアクリル酸及び置換アクリル酸のエステル類から誘導される１以上のモノマーを含有する架橋化合物であり、架橋剤は、２個以上の炭素−炭素二重結合を含有し、かつ多価アルコールから誘導される。本発明で有用なポリマー類は、１９９２年２月１１日発行のＨａｆｆｅｙらの米国特許第５，０８７，４４５号；１９８５年４月５日発行のＨｕａｎｇらの米国特許第４，５０９，９４９号；１９５７年７月２日発行のＢｒｏｗｎの米国特許第２，７９８，０５３号；及びＣＴＦＡ国際化粧品成分辞典、第４版、１９９１年、１２及び８０ページにより完全に記載されている。

本明細書で有用な市販のカルボン酸ポリマーの例としては、スクロース又はペンタエリトリトールのアリルエーテル類で架橋されたアクリル酸のホモポリマーであるカルボマーが挙げられる。カルボマー類は、Ｂ．Ｆ．Ｇｏｏｄｒｉｃｈ社からＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）９００シリーズ（例えば、Ｃａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）９５４）として入手可能である。さらに、他の適切なカルボン酸ポリマー剤としては、アクリル酸、メタクリル酸、又はこれらの短鎖（すなわち、Ｃ_１−４アルコール）エステル類の１種のうちの１種以上のモノマー類とのＣ_{１０ 〜３０}アルキルアクリレートのコポリマーが挙げられ、この架橋剤は、スクロース又はペンタエリスリトールのアリルエーテルである。これらのコポリマーは、アクリレート／Ｃ_{１０〜３０}アルキルアクリレートクロスポリマーとして知られており、Ｂ．Ｆ．Ｇｏｏｄｒｉｃｈ社からＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）１３４２、Ｃａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）１３８２、ペミュレンＴＲ−１、及びペミュレンＴＲ−２として市販されている。換言すれば、本明細書で有用なカルボン酸ポリマー増粘剤の例としては、カルボマー類、アクリレート類／Ｃ_{１０〜３０}アルキルアクリレートクロスポリマー類、及びこれらの混合物から選択される。

ｂ）架橋ポリアクリレートポリマー類
本発明の組成物は、必要に応じて増粘剤又はカチオン性及び非イオン性ポリマーの両方を含むゲル化剤として有用な架橋ポリアクリレートポリマー類を含有することができ、カチオン性物質が一般的に好ましい。有用な架橋非イオン性ポリアクリレートポリマー類及び架橋カチオン性ポリアクリレートポリマー類の例としては、１９９２年３月３１日発行のＨａｗｅらの米国特許第５，１００，６６０号；１９８９年７月１８日発行のＨｅａｒｄの米国特許第４，８４９，４８４号；１９８９年５月３０日発行のＦａｒｒａｒらの米国特許第４，８３５，２０６号；１９８６年１２月９日発行のＧｌｏｖｅｒらの米国特許第４，６２８，０７８号；１９８６年７月８日発行のＦｌｅｓｈｅｒらの米国特許第４，５９９，３７９号；及び１９８７年７月１５日公開のＦａｒｒａｒらのＥＰ２２８，８６８に記載のものが挙げられる。

ｃ）ポリアクリルアミドポリマー類
本発明の組成物は、必要に応じて、ポリアクリルアミドポリマー類、特に、置換されている分枝又は非分枝ポリマーを含む非イオン性ポリアクリルアミドポリマー類を含むことができる。これらのポリアクリルアミドポリマーの中でより好ましいのは、Ｓｅｐｐｉｃ社（ニュージャージー州フェアフィールド）からセピゲル（Ｓｅｐｉｇｅｌ）３０５という商品名で入手可能な、ＣＴＦＡ指定の、ポリアクリルアミドとイソパラフィンとラウレス−７の非イオン性ポリマーである。

本明細書で有用な他のポリアクリルアミドポリマーとしては、アクリルアミドのマルチブロックコポリマーとアクリル酸と置換されたアクリルアミド及び置換アクリル酸が挙げられる。市販されているこれらのマルチブロックコポリマーの例としては、Ｌｉｐｏ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ社（ニュージャージー州パターソン）のＨｙｐａｎ ＳＲ１５０Ｈ、ＳＳ５００Ｖ、ＳＳ５００Ｗ、ＳＳＳＡ１００Ｈが挙げられる。

ｄ）多糖類
多種多様な多糖類が本明細書で有用である。「多糖類」は、糖（すなわち、炭水化物）の繰り返し単位の主鎖を含有するゲル化剤を指す。多糖類のゲル化剤の非限定的な例としては、セルロース、カルボキシメチルヒドロキシエチルセルロース、セルロースアセテートプロピオネートカルボキシレート、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシエチルエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルヒドロキシエチルセルロース、微結晶性セルロース、セルロース硫酸ナトリウム、及びこれらの混合物から選択されるものが挙げられる。アルキル置換セルロースも本明細書で有用である。これらのポリマーの中で、セルロースポリマーのヒドロキシ基はヒドロキシアルキル化（好ましくは、ヒドロキシエチル化又はヒドロキシプロピル化）されて、ヒドロキシアルキル化セルロースを形成し、次いで、エーテル結合を介してＣ_１０〜Ｃ_３０の直鎖又は分枝鎖アルキル基で修飾される。典型的には、これらのポリマーは、ヒドロキシアルキルセルロースとＣ_１０〜Ｃ_３０の直鎖又は分枝鎖アルコールのエーテルである。本明細書で有用なアルキル基の例としては、ステアリル、イソステアリル、ラウリル、ミリスチル、セチル、イソセチル、ココイル（すなわち、ココナッツツ油のアルコールに由来するアルキル基）、パルミチル、オレイル、リノレイル、リノレニル、リシノレイル、ベヘニル、及びこれらの混合物から選択されるものが挙げられる。アルキルヒドロキシアルキルセルロースエーテル類の中で好ましいのは、セチルアルコールとヒドロキシエチルセルロースのエーテルである、ＣＴＦＡ指定の物質のセチルヒドロキシエチルセルロースである。この物質は、Ａｑｕａｌｏｎ社（デラウェア州ウィルミントン）からＮａｔｒｏｓｏｌ（登録商標）ＣＳプラスという商品名で販売されている。

他の有用な多糖類としては、３単位毎に（１−６）結合グルコースと（１−３）結合グルコース単位の直鎖であるスクレログルカン類が挙げられ、この市販例としては、Ｍｉｃｈｅｌ Ｍｅｒｃｉｅｒ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ社（ニュージャージー州マウンテンサイド）のＣｌｅａｒｏｇｅｌ（商標）ＣＳ１１である。

ｅ）ガム類
本明細書で有用な他の増粘剤及びゲル化剤は、主に天然源から誘導される物質が含まれる。これらのゲル化剤ゴムの非限定的な例としては、アカシア、寒天、アルギン、アルギン酸、アルギン酸アンモニウム、アミロペクチン、アルギン酸カルシウム、カルシウムカラギーナン、カルニチン、カラギーナン、デキストリン、ゼラチン、ジェランガム、グアーガム、グアーヒドロキシプロピルトリモニウムクロリド、ヘクトライト、ヒアルロン酸、水和シリカ、ヒドロキシプロピルキトサン、ヒドロキシプロピルグアー、カラヤゴム、ケルプ、ローカストビーンガム、ナットゴム、アルギン酸カリウム、カリウムカラギーナン、アルギン酸プロピレングリコール、スクレロチウムガム、カルボキシメチルデキストランナトリウム、ナトリウムカラギナン、トラガカントゴム、キサンタンゴム、及びこれらの混合物が挙げられる。

本発明の好ましい組成物には、カルボン酸ポリマー類、架橋ポリアクリレートポリマー類、ポリアクリルアミドポリマー類、及びこれらの混合物から選択され、より好ましくは、カルボン酸ポリマー類、ポリアクリルアミドポリマー類、及びこれらの混合物から選択される増粘剤が含まれる。

皮膚科学的に許容される担体
本発明の局所用組成物は、皮膚科学的に許容される担体も含有する。本明細書で使用する語句「皮膚科学的に許容される担体」は、担体が、ケラチン組織への局所適用に適し、良好な美的特性を有し、本発明の活性物質及び任意の他の成分と適合性があり、いかなる不都合な安全性又は毒性の懸念も生じないことを意味する。担体の安全かつ有効な量は、該組成物の約５０％〜約９９．９９％、好ましくは約８０％〜約９９．９％、より好ましくは約９０％〜約９８％、かつさらにより好ましくは約９０％〜約９５％である。

担体は、多種多様な形態であり得る。例えば、水中油型、油中水型、水中油中水型、及び水中シリコーン中油型のエマルジョンを含むが、これらに限定されないエマルジョン担体が本明細書で有用である。

好ましい担体は、水中油型エマルジョン、油中水型エマルジョン、及びシリコーン中水型エマルジョンなどのエマルジョンを含む。当業者によって理解されるように、所与の成分は、該組成物中の成分の水への溶解度／分散性に依存して、水又は油／シリコーン相のいずれかに主に分布する。水中油型エマルジョンが特に好ましい。

本発明に係るエマルジョンは、一般的に、上記の溶液及び脂質又は油を含有する。脂質類及び油類は、動物、植物、又は石油から誘導されてもよく、天然又は合成（すなわち、人造）であってもよい。好ましいエマルジョンはグリセリンなどの保湿剤も含有する。エマルジョンは、さらに、好ましくは、担体の重量に基づいて、乳化剤を約０．０１％〜約１０％、より好ましくは約０．１％〜約５％含有する。乳化剤は、非イオン性、アニオン性又はカチオン性であってよい。適切な乳化剤は、例えば、１９７３年８月２８日発行のＤｉｃｋｅｒｔらの米国特許第３，７５５，５６０号；１９８３年１２月２０日発行のＤｉｘｏｎらの米国特許第４，４２１，７６９号；及びＭｃＣｕｔｃｈｅｏｎの洗剤及び乳化剤、北米版、３１７〜３２４ページ（１９８６）に開示されている。

エマルジョンは、ケラチン組織への適用時に泡立ちを最小限に抑えるための消泡剤も含有してよい。消泡剤には、かかる使用について当技術分野で周知の高分子量シリコーン類及び他の物質が含まれる。

適切なエマルジョンは、所望の製品形態に応じて広範囲の粘度を有してよい。好ましい代表的な低粘度のエマルジョンは、約５０センチストークス以下、より好ましくは約１０センチストークス以下、さらにより好ましくは約５センチストークス以下の粘度を有する。

好ましいシリコーン中水型及び水中油型エマルジョンを以下でより詳細に記載する。

Ａ）シリコーン中水型エマルジョン
シリコーン中水型エマルジョンは、連続シリコーン相及び分散水相を含有する。

（１）連続シリコーン相
本発明の好ましいシリコーン中水型エマルジョンは、連続シリコーン相の重量で約１％〜約６０％、好ましくは約５％〜約４０％、より好ましくは約１０％〜約２０％含有する。連続シリコーン相は、後述する不連続水相を含有するか、又は囲む外部相として存在する。

連続シリコーン相は、ポリオルガノシロキサンオイルを含有する。好ましいシリコーン中水型エマルジョン系は、酸化的に安定なビヒクルをレチノイドに提供するように製剤化される。これらの好ましいエマルジョンの連続シリコーン相は、オルガノポリシロキサン油を約５０重量％〜約９９．９重量％及び非シリコーン油を約５０重量％未満含有する。特に好ましい実施形態において、連続シリコーン相は、連続シリコーン相の重量でポリオルガノシロキサンオイルを少なくとも約５０％、好ましくは約６０％〜約９９．９％、より好ましくは約７０％〜約９９．９％、さらにより好ましくは約８０％〜約９９．９％含有し、かつ連続シリコーン相の重量で非シリコーン油を最大約５０％、好ましくは約４０％未満、より好ましくは約３０％未満、さらにより好ましくは約１０％未満、かつさらにより好ましくは約２％未満含有する。これらの好ましいエマルジョン系は、低濃度のポリオルガノシロキサン油を含有する同等の油中水型エマルジョンよりも酸化安定性を長期間にわたってレチノイドに提供する。該組成物中の選択されたレチノイドの酸化安定性をさらに高めるように、連続シリコーン相中の非シリコーン油の濃縮は最小化されるか、又は完全に回避される。このタイプのシリコーン中水型エマルジョンは、１９９７年６月１９日公開のＰＣＴ出願ＷＯ９７／２１４２３に記載されている。

該組成物に使用するためのオルガノポリシロキサンオイルは、揮発性シリコーン類、不揮発性シリコーン類、又は揮発性シリコーン類と不揮発性シリコーン類の混合物であってよい。この文脈で使用する用語「不揮発性」は、周囲条件下で液体であり、約１００℃又はそれを超える引火点（圧力の１気圧下）を有するシリコーン類を指す。この文脈で使用する用語「揮発性」は、他の全てのシリコーン油類を指す。適切なオルガノポリシロキサン類は、広範囲の揮発性及び粘度に及ぶ様々なシリコーン類から選択することができる。適切なオルガノポリシロキサン油類の例としては、ポリアルキルシロキサン類、環式ポリアルキルシロキサン類、及びポリアルキルアリールシロキサン類が挙げられる。

本明細書の組成物に有用なポリアルキルシロキサン類には、粘度が２５℃で約０．５〜約１，０００，０００センチストークスであるポリアルキルシロキサン類が含まれる。かかるポリアルキルシロキサン類は、一般化学式Ｒ_３ＳｉＯ［Ｒ_２ＳｉＯ］_ｘＳｉＲ_３で表すことができ、式中、Ｒは、１〜約３０個の炭素原子を有するアルキル基であり（好ましくは、Ｒはメチル又はエチル、より好ましくはメチルである；また、混合アルキル基が同じ分子内で使用することができる）、ｘは、約１０，０００，０００以上に及び得る所望の分子量を達成するように選択される０〜約１０，０００の整数である。市販のポリアルキルシロキサン類には、ジメチコン類としても知られているポリジメチルシロキサン類が含まれ、例として、Ｇｅｎｅｒａｌ Ｅｌｅｃｔｒｉｃ社から販売されているＶｉｃａｓｉｌ（登録商標）シリーズ及びＤｏｗ Ｃｏｒｎｉｎｇ社から販売されているＤｏｗ Ｃｏｒｎｉｎｇ（登録商標）２００シリーズが挙げられる。適切なポリジメチルシロキサン類の具体例としては、粘度が０．６５センチストークスで沸点が１００℃のＤｏｗ Ｃｏｒｎｉｎｇ（登録商標）２００流体、粘度が１０センチストークスで沸点が２００℃を超えるＤｏｗ Ｃｏｒｎｉｎｇ（登録商標）２２５流体、並びにそれぞれ、粘度が５０、３５０、及び１２，５００センチストークスで沸点が２００℃を超えるＤｏｗ Ｃｏｒｎｉｎｇ（登録商標）２００流体が挙げられる。適切なジメチコン類には、化学式（ＣＨ_３）_３ＳｉＯ［（ＣＨ_３）_２ＳｉＯ］_ｘ［ＣＨ_３ＲＳｉＯ］_ｙＳｉ（ＣＨ_３）_３で表されるものが含まれ、式中、Ｒは、約２〜約３０個の炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖アルキルであり、ｘ及びｙはそれぞれ、約１０，０００，０００以上に及び得る所望の分子量を達成するように選択される１以上の整数である。これらのアルキル置換ジメチコン類の例としては、セチルジメチコン及びラウリルジメチコンが挙げられる。

該組成物に使用するのに適する環状ポリアルキルシロキサン類としては、化学式［ＳｉＲ_２−Ｏ］_ｎで表されるものが挙げられ、式中、Ｒはアルキル基であり（好ましくは、Ｒはメチル又はエチルであり、より好ましくはメチルである）、ｎは約３〜約８の整数であり、より好ましくは、ｎは約３〜約７の整数であり、さらに好ましくは、ｎは約４〜約６の整数である。Ｒがメチルである場合、これらの物質は、典型的にはシクロメチコン類と呼ばれる。市販のシクロメチコン類には、主としてシクロメチコンテトラマー（すなわち、ｎ＝４）を含有する、粘度が２．５センチストークスで沸点が１７２℃のＤｏｗ Ｃｏｒｎｉｎｇ（登録商標）２４４流体、主としてシクロメチコンペンタマー（すなわち、ｎ＝５）を含有する、粘度が２．５センチストークスで沸点が１７８℃のＤｏｗ Ｃｏｒｎｉｎｇ（登録商標）３４４流体、主としてシクロメチコンテトラマーとシクロメチコンペンタマー（すなわち、ｎ＝４と５）の混合物を含有する粘度が４．２センチストークスで沸点が２０５℃のＤｏｗ Ｃｏｒｎｉｎｇ（登録商標）２４５流体、並びに主としてシクロメチコンテトラマーとシクロメチコンペンタマーとシクロメチコンヘキサマー（すなわち、ｎ＝４、５と６）の混合物を含有する粘度が４．５センチストークスで沸点が２１７℃のＤｏｗ Ｃｏｒｎｉｎｇ（登録商標）３４５流体が含まれる。

一般化学式［（ＣＨ_２）_３ＳｉＯ_１／２］_ｘ［ＳｉＯ_２］_ｙに相当するポリマー物質であるトリメチルシロキシシリケートなどの物質も有用であり、式中、ｘは約１〜約５００の整数であり、ｙは約１〜約５００の整数である。市販のトリメチルシロキシシリケートは、ジメチコンとの混合物として、Ｄｏｗ Ｃｏｒｎｉｎｇ（登録商標）５９３流体として販売されている。

ジメチコノール類も該組成物に使用するのに適する。これらの化合物は、化学式Ｒ_３ＳｉＯ［Ｒ_２ＳｉＯ］_ｘＳｉＲ_２ＯＨ及びＨＯＲ_２ＳｉＯ［Ｒ_２ＳｉＯ］_ｘＳｉＲ_２ＯＨで表すことができ、式中、Ｒはアルキル基であり（好ましくは、Ｒはメチル又はエチルであり、より好ましくはメチルである）、ｘは所望の分子量を達成するように選択される、０〜約５００の整数である。市販のジメチコノール類は、典型的には、ジメチコン又はシクロメチコンとの混合物（例えば、Ｄｏｗ Ｃｏｒｎｉｎｇ（登録商標）１４０１、１４０２、及び１４０３流体）として販売されている。

ポリアルキルアリールシロキサン類も該組成物での使用に適する。２５℃で、粘度が約１５〜約６５センチストークスであるポリメチルフェニルシロキサン類が特に有用である。

ポリアルキルシロキサン類、アルキル置換ジメチコン類、シクロメチコン類、トリメチルシロキシシリケート類、ジメチコノール類、ポリアルキルアリールシロキサン類、及びこれらの混合物から選択されるオルガノポリシロキサン類が本明細書で使用するのに好ましい。ポリアルキルシロキサン類及びシクロメチコン類が本明細書での使用により好ましい。ポリアルキルシロキサン類の中で、ジメチコン類が好ましい。

上述したように、連続シリコーン相は、１以上の非シリコーン油類を含有してよい。該組成物中の選択されたレチノイドの酸化安定性をさらに高めるように、連続シリコーン相における非シリコーン油の濃度は、好ましくは、最小化されるか、又は完全に回避される。適切な非シリコーン油類は、圧力が約１気圧下で約２５℃以下の融点を有する。連続シリコーン相での使用に適する非シリコーン油類の例としては、油中水型エマルジョン、例えば、鉱油、植物油、合成油、半合成油などの形態で、局所パーソナルケア製品の化学分野で周知のものが挙げられる。

（２）分散水相
本発明の局所用組成物は、分散水相を約３０％〜約９０％、より好ましくは約５０％〜約８５％、かつさらにより好ましくは約７０％〜約８０％含有する。エマルジョン技術において、用語「分散相」は、当業者に周知の用語であり、相が、連続相中に懸濁され、連続相によって囲まれている小さい粒子又は液滴として存在することを意味する。分散相は、内相又は不連続相としても知られている。分散水相は、上記の連続シリコーン相に懸濁され、連続シリコーン相によって囲まれた小さな水性粒子又は液滴の分散系である。

水相は、水、又は水と１種以上の水溶性成分もしくは水分散性成分の組み合わせであり得る。かかる成分の非限定的な例としては、増粘剤、酸、塩基、塩、キレート剤、ガム、水溶性又は水分散性アルコール及びポリオール、緩衝剤、防腐剤、日焼け止め剤、及び着色剤などが挙げられる。

本発明の局所用組成物は、典型的には、分散水相中の水を該組成物の重量で約２５％〜約９０％、好ましくは約４０％〜約８０％、より好ましくは約６０％〜約８０％含有する。

（３）水相を分散させるための乳化剤
本発明のシリコーン中水型エマルジョンは、好ましくは乳化剤を含有する。好ましい実施形態において、該組成物は、乳化剤を該組成物の重量で約０．１％〜約１０％、より好ましくは約０．５％〜約７．５％、さらにより好ましくは約１％〜約５％含有する。乳化剤は、連続シリコーン相内に水相を分散させ、懸濁するのを助ける。

多種多様な乳化剤を本明細書で用いて、好ましいシリコーン中水型エマルジョンを形成することができる。既知の又は従来の乳化剤を該組成物で使用することができるが、選択された乳化剤は本発明の組成物の成分と化学的及び物理的に適合性があり、所望の分散特性を提供することを条件とする。適切な乳化剤としては、局所用パーソナルケア製品に使用するための、当業者に周知のシリコーン乳化剤、非シリコン含有乳化剤、及びこれらの混合物が挙げられる。好ましくは、これらの乳化剤は、約１４以下、より好ましくは約２〜約１４、かつさらにより好ましくは約４〜約１４のＨＬＢ値を有する。これらの範囲外のＨＬＢ値を有する乳化剤は、これらの範囲内にある、該組成物に有効な加重平均ＨＬＢを達成するために他の乳化剤と組み合わせて使用することができる。

シリコーン乳化剤が好ましい。多種多様なシリコーン乳化剤が本明細書で有用である。これらのシリコーン乳化剤は、典型的には、シリコーン系界面活性剤として当業者に周知でもある、有機修飾されているオルガノポリシロキサン類である。有用なシリコーン乳化剤としては、ジメチコンコポリオール類が挙げられる。これらの物質は、ポリエチレンオキシド鎖、ポリプロピレンオキシド鎖、これらの鎖の混合物、及びエチレンオキシド及びプロピレンオキシドの両方に由来する部分を含有するポリエーテル鎖などのポリエーテル側鎖を含むように修飾されたポリジメチルシロキサン類である。他の例としては、アルキル修飾ジメチコンコポリオール、すなわち、Ｃ２〜Ｃ３０ペンダント側鎖を含有する化合物が挙げられる。さらに他の有用なジメチコンコポリオール類は、様々なカチオン性、アニオン性、両性、及び双性イオン性のペンダント部分を有する物質を含む。

本明細書で有用なジメチコンコポリマー乳化剤は、以下の一般構造によって説明することができる：

式中、Ｃ_１〜Ｃ_３０直鎖、分枝鎖、又は環状のアルキル基であり、Ｒ^２は、−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｏ−（ＣＨ_２ＣＨＲ^３Ｏ）_ｍ−Ｈ及び−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｏ−（ＣＨ_２ＣＨＲ^３Ｏ）_ｍ−（ＣＨ_２ＣＨＲ^４Ｏ）_Ｏ−Ｈからなる群から選択され、式中、ｎは、３から約１０の整数であり；Ｒ^３及びＲ^４は、Ｒ^３及びＲ^４が同時に同一ではないようにＨ及びＣ_１〜Ｃ_６直鎖又は分枝鎖アルキルからなる群から選択され；ｍ、ｏ、ｘ及びｙは、当該分子が約２００〜約１０，０００，０００の全体分子量を有するように選択され、ｍ、ｏ、ｘ及びｙは、ｍ及びｏが両方同時にゼロではないように独立して０以上の整数から選択され、かつｚは、独立して１以上の整数から選択される。これらのコポリオール類の位置異性体を得ることができることが認識される。Ｒ^３基及びＲ^４基を含有するＲ^２部分について上に示した化学表示は、限定するものではないが、便宜上、このようなものとして示されている。

厳密にはジメチコンコポリオール類としては分類されないが、前の段落の構造で示したようなシリコーン界面活性剤も本明細書で有用であり、式中、Ｒ^２は、−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｏ−Ｒ^５であり、式中、Ｒ^５は、カチオン性、アニオン性、両性、又は双性イオン性部分である。

本明細書で乳化剤として有用なジメチコンコポリオール類及び他のシリコーン界面活性剤の非限定的な例として、ペンダントポリエチレンオキシド側鎖を有するポリジメチルシロキサンポリエーテルコポリマー、ペンダントポリプロピレンオキシド側鎖を有するポリジメチルシロキサンポリエーテルコポリマー、ペンダント混合ポリエチレンオキシド側鎖とポリプロピレンオキシド側鎖を有するポリジメチルシロキサンポリエーテルコポリマー、ペンダント混合ポリ（エチレン）（プロピレン）オキシド側鎖を有するポリジメチルシロキサンポリエーテルコポリマー、ペンダントオルガノベタイン側鎖を有するポリジメチルシロキサンポリエーテルコポリマー、ペンダントカルボン酸側鎖を有するポリジメチルシロキサンポリエーテルコポリマー、ペンダント第四級アンモニウム側鎖を有するポリジメチルシロキサンポリエーテルコポリマー、並びにペンダントＣ_２〜Ｃ_３０直鎖、分枝鎖、又は環状のアルキル部分を含有する前述のコポリマーのさらなる修飾物が挙げられる。本明細書で有用な、Ｄｏｗ Ｃｏｒｎｉｎｇ社から販売されている市販のジメチコンコポリオール類の例としては、Ｄｏｗ ＣｏＲｎｉｎｇ（登録商標）１９０、１９３、Ｑ２−５２２０、２５０１Ｗａｘ、２−５３２４流体、及び３２２５Ｃが挙げられる（この後者の物質はシクロメチコンとの混合物として販売されている）。セチルジメチコンコポリオールは、ポリグリセリル−４−イソステアレート（及び）ヘキシルラウレートとの混合物として市販されており、ＡＢＩＬ（登録商標）ＷＥ−０９という商品名で販売されている（Ｇｏｌｄｓｃｈｍｉｄｔから入手可能である）。セチルジメチコンコポリオールは、ヘキシルラウレート（及び）ポリグリセリル−３−オレエート（及び）セチルジメチコンとの混合物としても市販されており、ＡＢＩＬ（登録商標）ＷＳ−０８という商品名で販売されている（Ｇｏｌｄｓｃｈｍｉｄｔから入手可能である）。ジメチコンコポリオール類の他の非限定的な例としては、ラウリルジメチコンコポリオール、ジメチコンコポリオールアセテート、ジメチコンコポリオールアジパート、ジメチコンコポリオールアミン、ジメチコンコポリオールベヘネート、ジメチコンコポリオールブチルエーテル、ジメチコンコポリオールヒドロキシステアレート、ジメチコンコポリオールイソステアレート、ジメチコンコポリオールラウレート、ジメチコンコポリオールメチルエーテル、ジメチコンコポリオールホスフェート、及びジメチコンコポリオールステアレートが挙げられる。国際化粧品成分辞典、第５版、１９９３を参照されたい。

本明細書で有用なジメチコンコポリオール乳化剤は、例えば、１９９０年１０月２日発行のＦｉｇｕｅｒｏａ，Ｊｒ．らの米国特許第４，９６０，７６４号；１９８９年８月３０日公開のＳａｎｏＧｕｅｉｒａの欧州特許ＥＰ ３３０，３６９；Ｇ．Ｈ．Ｄａｈｍｓらの「シリコーンコポリオール類によって提供される新製剤の可能性（Ｎｅｗ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ Ｐｏｓｓｉｂｉｌｉｔｉｅｓ Ｏｆｆｅｒｅｄ ｂｙ Ｓｉｌｉｃｏｎｅ Ｃｏｐｏｌｙｏｌｓ）」、Ｃｏｓｍｅｔｉｃｓ ＆ Ｔｏｉｌｅｔｒｉｅｓ、１１０巻、９１〜１００ページ、１９９５年３月；Ｍ．Ｅ．Ｃａｒｌｏｔｔｉらの「Ｗ／Ｏ−Ｓエマルジョンの最適化及びエステル構造と乳化特性との間の定量的関係の調査（Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｗ／Ｏ−Ｓ Ｅｍｕｌｓｉｏｎｓ Ａｎｄ Ｓｔｕｄｙ Ｏｆ Ｔｈｅ Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ Ｂｅｔｗｅｅｎ Ｅｓｔｅｒ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ Ａｎｄ Ｅｍｕｌｓｉｏｎ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ）、Ｊ．Ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１３（３），３１５−３３６（１９９２）；Ｐ．Ｈａｍｅｙｅｒ「化粧品の油中水型エマルジョン調製物中の有機及び有機シリコーン乳化剤の比較技術調査（Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｓ ｏｆ ＯｒｇａｎｉＣ ａｎｄ Ｏｒｇａｎｏｓｉｌｉｃｏｎｅ Ｅｍｕｌｓｉｆｉｅｒｓ ｉｎ Ｃｏｓｍｅｔｉｃ Ｗａｔｅｒ−ｉｎ−Ｏｉｌ Ｅｍｕｌｓｉｏｎ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ）」、ＨＡＰＰＩ ２８（４）、８８〜１２８ページ（１９９１）；Ｊ．Ｓｍｉｄ−Ｋｏｒｂａｒらの「エマルジョン中のシリコーン界面活性剤の効率性及び使いやすさ（Ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ａｎｄ ｕｓａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｓｉｌｉｃｏｎｅ ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ ｉｎ ｅｍｕｌｓｉｏｎｓ）、Ｐｒｏｖｉｓｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｏｓｍｅｔｉｃ Ｓｃｉｅｎｃｅ，１２，１３５−１３９（１９９０）；並びにＤ．Ｇ．Ｋｒｚｙｓｉｋらの「油中水型システムのための新しいシリコーン乳化剤（Ａ Ｎｅｗ Ｓｉｌｉｃｏｎｅ Ｅｍｕｌｓｉｆｉｅｒ Ｆｏｒ Ｗａｔｅｒ−ｉｎ−Ｏｉｌ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、Ｄｒｕｇ ａｎｄ Ｃｏｓｍｅｔｉｃ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ，１４６巻（４）２８〜８１ページ（１９９０年４月）に記載されている。

本明細書で有用な非シリコーン含有乳化剤には、糖エステル類及びポリエステル類、アルコキシル化糖エステル類及びポリエステル類、Ｃ_１〜Ｃ_３０脂肪族アルコールのＣ_１〜Ｃ_３０脂肪酸エステル類、Ｃ_１〜Ｃ_３０脂肪族アルコールのＣ_１〜Ｃ_３０脂肪酸エステルのアルコキシル化誘導体類、Ｃ_１〜Ｃ_３０脂肪族アルコールのアルコキシル化エーテル類、Ｃ_１〜Ｃ_３０脂肪酸のポリグリセリルエステル類、Ｃ_１〜Ｃ_３０ポリオールエステル類、Ｃ_１〜Ｃ_３０ポリオールエーテル類、アルキルホスフェート類、ポリオキシアルキレン脂肪族エーテルホスフェート類、脂肪酸アミド類、アシルラクチレート類、石鹸、及びこれらの混合物などの様々な非イオン性及びアニオン性乳化剤がある。他の適切な乳化剤は、例えば、Ａｌｌｕｒｅｄ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ社によって出版されたＭｃＣｕｔｃｈｅｏｎの洗剤及び乳化剤、北米版（１９８６）；１９９１年４月３０日発行のＣｉｏｔｔｉらの米国特許第５，０１１，６８１号；１９８３年１２月２０日発行のＤｉｘｏｎらの米国特許第４，４２１，７６９号；１９７３年８月２８日発行のＤｉｃｋｅｒｔらの米国特許第３，７５５，５６０号に記載されている。

これらの非シリコーン含有乳化剤の非限定的な例としては、ポリエチレングリコール２０ソルビタンモノラウレート（ポリソルベート２０）、ポリエチレングリコール５大豆ステロール、ステアレス−２０、セテアレス−２０、ＰＰＧ−２メチルグルコースエーテルジステアレート、セテス−１０、ポリソルベート８０、リン酸セチル、セチルリン酸カリウム、セチルリン酸ジエタノールアミン、ポリソルベート６０、ステアリン酸グリセリル、ＰＥＧ−１００ステアレート、ポリオキシエチレン２０ソルビタントリオレエート（ポリソルベート８５）、ソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレン４ラウリルエーテルナトリウムステアレート、ポリグリセリル−４−イソステアレート、ヘキシルラウレート、ステアレス−２０、セテアレス−２０、ＰＰＧ−２メチルグルコースエーテルジステアレート、セテス−１０、ジエタノールアミンセチルホスフェート、グリセリルステアレート、ＰＥＧ−１００ステアレート、及びこれらの混合物が挙げられる。

Ｂ）水中油型エマルジョン
他の好ましい局所用担体としては、連続水相及びその中に分散された疎水性の、水不溶性の相（「油相」）を有する水中油型エマルジョンが挙げられる。適切な水中油型エマルジョン担体の例は、１９９１年１２月１７日発行のＴｕｒｎｅｒ，Ｄ．Ｊ．らの米国特許第５，０７３，３７１号、及び１９９１年１２月１７日発行のＴｕｒｎｅｒ，Ｄ．Ｊ．らの米国特許第５，０７３，３７２号に記載されている。構造剤、親水性界面活性剤及び水を含有する特に好ましい水中油型エマルジョンについては以下に詳細に記載されている。

（１）構造剤
好ましい水中油型エマルジョンは、液晶ゲルネットワーク構造の形成を補助する構造剤を含有する。理論によって限定されないが、構造剤は、組成物の安定性に寄与するレオロジー特性を該組成物に提供するのに役立つと考えられている。構造剤は、乳化剤又は界面活性剤としても機能することができる。好ましい組成物は構造剤を、該組成物の重量で約０．５％〜約２０％、より好ましくは約１％〜約１０％、さらにより好ましくは約１％〜約５％含有する。

本発明の好ましい構造剤としては、ステアリン酸、パルミチン酸、ステアリルアルコール、セチルアルコール、ベヘニルアルコール、ステアリン酸、パルミチン酸、エチレンオキシド単位が平均約１〜約２１個であるステアリルアルコールのポリエチレングリコールエーテル、エチレンオキシド単位が平均約１〜約５個であるセチルアルコールのポリエチレングリコールエーテル、及びこれらの混合物が挙げられる。本発明のより好ましい構造剤は、ステアリルアルコール、セチルアルコール、ベヘニルアルコール、エチレンオキシド単位が平均約２個であるステアリルアルコールのポリエチレングリコールエーテル（ステアレス−２）、エチレンオキシド単位が平均約２１個であるステアリルアルコールのポリエチレングリコールエーテル（ステアレス−２１）、エチレンオキシド単位が平均約２個であるセチルアルコールのポリエチレングリコールエーテル、及びこれらの混合物から選択される。さらにより好ましい構造剤は、ステアリン酸、パルミチン酸、ステアリルアルコール、セチルアルコール、ベヘニルアルコール、ステアレス−２、ステアレス−２１、及びこれらの混合物から選択される。

（２）親水性界面活性剤
好ましい水中油型エマルジョンは、水相に疎水性物質を分散させることができる少なくとも１種類の親水性界面活性剤を（局所担体の重量パーセントで）約０．０５％〜約１０％、好ましくは約１％〜約６％、かつより好ましくは約１％〜約３％含有する。界面活性剤は、少なくとも、水に分散するのに十分な親水性でなければならない。

好ましい親水性界面活性剤は、非イオン性界面活性剤から選択される。本明細書で有用な非イオン性界面活性剤には、長鎖アルコール類、例えば、Ｃ_８〜３０アルコール類と糖又はデンプンポリマー、すなわち、グリコシドとの縮合生成物として広く定義することができるものがある。これらの化合物は、式（Ｓ）_ｎ−Ｏ−Ｒで表すことができ、式中、Ｓは、グルコース、フルクトース、マンノース、及びガラクトースなどの糖部分であり；ｎは約１〜約１０００の整数であり、ＲはＣ_８〜３０アルキル基である。アルキル基を誘導することができる長鎖アルコール類の例としては、デシルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、ラウリルアルコール、ミリスチルアルコール、及びオレイルアルコールなどが挙げられる。これらの界面活性剤の好ましい例としては、Ｓがグルコース部分であり、ＲはＣ_８〜２０アルキル基であり、ｎは約１〜約９の整数であるものが挙げられる。これらの界面活性剤の市販例としては、デシルポリグルコシド（Ｈｅｎｋｅｌ社からＡＰＧ ３２５ ＣＳとして入手可能）及びラウリルポリグルコシド（Ｈｅｎｋｅｌ社からＡＰＧ ６００ＣＳ及び６２５ ＣＳとして入手可能）が挙げられる。

他の有用な非イオン性界面活性剤としては、脂肪酸とアルキレンオキシドの縮合生成物（すなわち、脂肪酸のアルキレンオキシドエステル類）が挙げられる。これらの物質は、一般式ＲＣＯ（Ｘ）_ｎＯＨを有し、式中、ＲはＣ_{１０〜３０}アルキル基であり、Ｘは−ＯＣＨ_２ＣＨ_２−（すなわち、エチレングリコールもしくはオキシドから誘導される）又は−ＯＣＨ_２ＣＨＣＨ_３−（すなわち、プロピレングリコールもしくはオキシドから誘導される）であり、かつｎは約６〜約２００の整数である。他の非イオン性界面活性剤としては、２モルの脂肪酸とアルキレンオキシドの縮合生成物（すなわち、脂肪酸のアルキレンオキシドジエステル類）が挙げられる。これらの物質は、一般式ＲＣＯ（Ｘ）_ｎＯＯＣＲを有し、式中、ＲはＣ_{１０〜３０}アルキル基であり、Ｘは−ＯＣＨ_２ＣＨ_２−（すなわち、エチレングリコールもしくはオキシドから誘導される）、又は−ＯＣＨ_２ＣＨＣＨ_３−（すなわち、プロピレングリコールもしくはオキシドから誘導される）、かつｎは約６〜約１００の整数である。他の非イオン性界面活性剤は、脂肪族アルコールとアルキレンオキシドの縮合生成物（すなわち、脂肪族アルコールのアルキレンオキシドエーテル類）である。これらの物質は、一般式Ｒ（Ｘ）_ｎＯＲ’を有し、式中、ＲはＣ_{１０〜３０}アルキル基であり、Ｘは−ＯＣＨ_２ＣＨ_２−（すなわち、エチレングリコールもしくはオキシドから誘導される）又は−ＯＣＨ_２ＣＨＣＨ_３−（すなわち、プロピレングリコールもしくはオキシドから誘導される）であり、ｎは約６〜約１００の整数であり、かつＲ’はＨもしくはＣ_{１０〜３０}アルキル基である。さらに他の非イオン性界面活性剤としては、脂肪酸と脂肪族アルコールの両方とアルキレンオキシドの縮合生成物である［すなわち、ポリアルキレンオキシド部分が一端は脂肪酸でエステル化され、他端は脂肪族アルコールでエーテル化されている（すなわち、エーテル結合を介して連結されている）］。これらの物質は、一般式ＲＣＯ（Ｘ）_ｎＯＲ’を有し、式中、Ｒ及びＲ’はＣ_{１０〜３０}アルキル基であり、Ｘは−ＯＣＨ_２ＣＨ_２（すなわち、エチレングリコールもしくはオキシドから誘導される）又は−ＯＣＨ_２ＣＨＣＨ_３−（プロピレングリコールもしくはオキシドから誘導される）、かつｎは約６〜約１００の整数である。これらのアルキレンオキシドから誘導される非イオン性界面活性剤の非限定的な例としては、セテス−６、セテス−１０、セテス−１２、セテアレス−６、セテアレス−１０、セテアレス−１２、ステアレス−６、ステアレス−１０、ステアレス−１２、ステアレス−２１、ＰＥＧ−６ステアレート、ＰＥＧ−１０ステアレート、ＰＥＧ−１００ステアレート、ＰＥＧ−１２ステアレート、ＰＥＧ−２０グリセリルステアレート、ＰＥＧ−８０グリセリルタローエート（ｇｌｙｃｅｒｙｌ ｔａｌｌｏｗａｔｅ）、ＰＥＧ−１０グリセリルステアレート、ＰＥＧ−３０グリセリルココエート、ＰＥＧ−８０グリセリルココエート、ＰＥＧ−２００グリセリルタローエート、ＰＥＧ−８ジラウレート、ＰＥＧ−１０ジステアレート、及びこれらの混合物が挙げられる。

さらに他の有用な非イオン性界面活性剤としては、以下の構造式に対応するポリヒドロキシ脂肪酸アミド界面活性剤が挙げられる：

式中、Ｒ^１は、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、２−ヒドロキシエチル、２−ヒドロキシプロピル、好ましくはＣ_１〜Ｃ_４アルキル、より好ましくはメチル又はエチル、最も好ましくはメチルであり；Ｒ^２は、Ｃ_５〜Ｃ_３１アルキル又はアルケニル、好ましくはＣ_７〜Ｃ_１９アルキル又はアルケニル、より好ましくはＣ_９〜Ｃ_１７アルキル又はアルケニル、最も好ましくはＣ_１１〜Ｃ_１５アルキル又はアルケニルであり、Ｚは、少なくとも３個のヒドロキシル基が鎖に直接結合している直鎖状ヒドロカルビル鎖を有するポリヒドロキシヒドロカルビル部分、又はそのアルコキシル化（好ましくはエトキシル化又はプロポキシル化）誘導体である。Ｚは、好ましくは、グルコース、フルクトース、マルトース、ラクトース、ガラクトース、マンノース、キシロース、及びこれらの混合物からなる群から選択される糖部分である。上記の構造に対応する特に好ましい界面活性剤は、ココナッツツアルキルＮ−メチルグルコシドアミドである（すなわち、Ｒ^２ＣＯ−部分は、ココナッツツ油脂肪酸から誘導される）。ポリヒドロキシ脂肪酸アミド類を含有する組成物を製造するプロセスは、例えば、Ｔｈｏｍａｓ Ｈｅｄｌｅｙ ＆ Ｃｏ．社によって１９５９年２月１８日公開の英国特許明細書８０９，０６０；１９６０年１２月２０日発行のＥ．Ｒ．Ｗｉｌｓｏｎの米国特許第２，９６５，５７６号；１９５５年３月８日発行のＡ．Ｍ．Ｓｃｈｗａｒｔｚの米国特許第２，７０３，７９８号；及び１９３４年１２月２５日発行のＰｉｇｇｏｔｔの米国特許第１，９８５，４２４号に開示されており、これらはその全体が参照により本明細書に組み込まれる。

非イオン性界面活性剤の中で、ステアレス−２１、セテアレス−２０、セテアレス−１２、スクロースココエート、ステアレス−１００、ＰＥＧ−１００ステアレート、及びこれらの混合物からなる群から選択されるものが好ましい。

本明細書で使用するのに適する他の非イオン性界面活性剤としては、糖エステル類及びポリエステル類、アルコキシル化糖エステル類及びポリエステル類、Ｃ１〜Ｃ３０脂肪族アルコールのＣ１〜Ｃ３０脂肪酸エステル類、Ｃ１〜Ｃ３０脂肪族アルコールのＣ１〜Ｃ３０脂肪酸エステルのアルコキシル化誘導体類、Ｃ１〜Ｃ３０脂肪族アルコールのアルキル化エーテル類、Ｃ１〜Ｃ３０脂肪酸のポリグリセリルエステル類、ポリオールのＣ１〜Ｃ３０エステル類、ポリオールのＣ１〜Ｃ３０エーテル類、アルキルホスフェート、ポリオキシアルキレン脂肪族エーテルホスフェート類、脂肪酸アミド類、アシルラクチレート類、及びこれらの混合物が挙げられる。これらの乳化剤の非限定的な例としては、ポリエチレングリコール２０ソルビタンモノラウレート（ポリソルベート２０）、ポリエチレングリコール５大豆ステロール、ステアレス−２０、セテアレス−２０、ＰＰＧ−２メチルグルコースエーテルジステアレート、セテス−１０、ポリソルベート８０、セチルホスフェート、カリウムセチルホスフェート、ジエタノールアミンセチルホスフェート、ポリソルベート６０、ステアリン酸グリセリル、ポリオキシエチレン２０ソルビタントリオレエート（ポリソルベート８５）、ソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレン４ラウリルエーテルナトリウムステアレート、ポリグリセリル−４イソステアレート、ヘキシルラウレート、ＰＰＧ−２メチルグルコースエーテル５ジステアレート、ＰＥＧ−１００ステアレート、及びこれらの混合物が挙げられる。

本明細書で有用な非イオン性界面活性剤の別のグループは、ソルビタン又はソルビトール脂肪酸エステルとスクロース脂肪酸エステルの混合物に基づく脂肪酸エステル混合物であり、それぞれの場合において、脂肪酸は、好ましくはＣ_８〜Ｃ_２４、より好ましくはＣ_１０〜Ｃ_２０である。好ましい脂肪酸エステル乳化剤は、ソルビタン又はソルビトールＣ_１６〜Ｃ_２０脂肪酸エステルとスクロースＣ_１０〜Ｃ_１６脂肪酸エステル、特にソルビタンステアレートとスクロースココエートの混合物である。これは、Ａｒｌａｔｏｎｅ２１２１という商品名でＩＣＩ社から市販されている。

本明細書で有用な他の適切な界面活性剤としては、様々なカチオン性、アニオン性、双性イオン性、及び両性界面活性剤が挙げられ、これらは、当技術分野で周知であり、以下でより完全に説明する。例えば、ＭｃＣｕｔｃｈｅｏｎの洗剤及び乳化剤、北米１５版（１９８６）、Ａｌｌｕｒｅｄ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ社出版；１９９１年４月３０日発行のＣｉｏｔｔｉらの米国特許第５，０１１，６８１号；１９８３年１２月２０日発行のＤｉｘｏｎらの米国特許第４，４２１，７６９号；１９７３年８月２８日発行のＤｉｃｋｅｒｔらの米国特許第３，７５５，５６０号を参照されたく、これら４つの参考文献は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。本明細書で有用な親水性界面活性剤には、単一の界面活性剤、又は適切な界面活性剤の任意の組み合わせが含まれ得る。選択される正確な界面活性剤（又は複数の界面活性剤）は、存在する該組成物及び他の成分のｐＨに依存する。

カチオン性界面活性剤、特にジアルキル第四級アンモニウム化合物も本明細書で有用であり、これらの例は、米国特許第５，１５１，２０９号；同第５，１５１，２１０号；同第５，１２０，５３２号；同第４，３８７，０９０号；同第３，１５５，５９１号；同第３，９２９，６７８号；同第３，９５９，４６１号；ＭｃＣｕｔｃｈｅｏｎの洗剤及び乳化剤、（北米版１９７９）、Ｍ．Ｃ．Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．社；及びＳｃｈｗａｒｔｚらの界面活性剤、それらの化学と技術（Ｓｕｒｆａｃｅ Ａｃｔｉｖｅ Ａｇｅｎｔｓ，Ｔｈｅｉｒ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、ニューヨーク：Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ社、１９４９に記載されており、その説明は、参照により本明細書に組み込まれる。本明細書で有用なカチオン性界面活性剤としては、以下の式を有するものなどのカチオン性のアンモニウム塩が挙げられる：

式中、Ｒ_１は、約１２〜約３０個の炭素原子を有するアルキル基、又は約１２〜約３０個の炭素原子を有する芳香族基、アリール基又はアルカリール基であり；Ｒ_２、Ｒ_３、及びＲ_４は、独立して、水素、約１〜約２２個の炭素原子を有するアルキル基、又は約１２〜約２２個の炭素原子を有する芳香族基、アリール基又はアルカリール基から選択され；Ｘは、好ましくは、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、リン酸塩、硝酸塩、硫酸塩、メチル硫酸塩、エチル硫酸塩、トシラート、乳酸塩、クエン酸塩、グリコール酸塩、及びこれらの混合物から選択される任意の適合性アニオンである。さらに、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、及びＲ_４のアルキル基は、エステル結合及び／もしくはエーテル結合、又はヒドロキシ基もしくはアミノ基の置換基も含むことができる（例えば、アルキル基は、ポリエチレングリコール及びポリプロピレングリコール部分を含むことができる）。

さらに好ましくは、Ｒ_１は、約１２〜約２２個の炭素原子を有するアルキル基であり、Ｒ_２は、Ｈ又は約１〜約２２個の炭素原子を有するアルキル基から選択され、Ｒ_３及びＲ_４は、独立して、Ｈ又は約１〜約３個の炭素原子を有するアルキル基から選択され、かつＸは前述のとおりである。

さらにより好ましくは、Ｒ_１は、約１２〜約２２個の炭素原子を有するアルキル基であり、Ｒ_２、Ｒ_３及びＲ_４は、Ｈ又は約１〜約３個の炭素原子を有するアルキル基から選択され、かつＸは前述のとおりである。

あるいは、他の有用なカチオン性乳化剤としては、アミノアミド類が挙げられ、上記の構造において、Ｒ_１は、あるいは、Ｒ_５ＣＯＮＨ−（ＣＨ_２）_ｎであり、Ｒ_５は、約１２〜約２２個の炭素原子を有するアルキル基であり、かつｎは、約２〜約６、より好ましくは約２〜約４、かつさらにより好ましくは約２〜約３の整数である。これらのカチオン性乳化剤の非限定的な例としては、ステアラミドプロピルＰＧ−ジモニウムクロリドホスフェート、ベヘンアミドプロピルＰＧジモニウムクロリド、ステアラミドプロピルエチルジモニウムエトサルフェート、ステアラミドプロピルジメチル（ミリスチルアセテート）塩化アンモニウム、ステアラミドプロピルジメチルセテアリルアンモニウムトシレート、ステアラミドプロピルジメチルアンモニウムクロリド、ステアラミドプロピルジメチルアンモニウムラクテート、及びこれらの混合物が挙げられる。特に好ましいのは、ベヘンアミドプロピルＰＧジモニウムクロリドである。

第４級アンモニウム塩のカチオン界面活性剤の非限定的な例としては、セチルアンモニウムクロリド、セチルアンモニウムブロミド、ラウリルアンモニウムクロリド、ラウリルアンモニウムブロミド、ステアリルアンモニウムクロリド、ステアリルアンモニウムブロミド、セチルジメチルアンモニウムクロリド、セチルジメチルアンモニウムブロミド、ラウリルジメチルアンモニウムクロリド、ラウリルジメチルアンモニウムブロミド、ステアリルジメチルアンモニウムクロリド、ステアリルジメチルアンモニウムブロミド、セチルトリメチルアンモニウムクロリド、セチルトリメチルアンモニウムブロミド、ラウリルトリメチルアンモニウムクロリド、ラウリルトリメチルアンモニウムブロミド、ステアリルトリメチルアンモニウムクロリド、ステアリルトリメチルアンモニウムブロミド、ラウリルジメチルアンモニウムクロリド、ステアリルジメチルセチルジタロージメチルアンモニウムクロリド、ジセチルアンモニウムクロリド、ジセチルアンモニウムブロミド、ジラウリルアンモニウムクロリド、ジラウリルアンモニウムブロミド、ジステアリルアンモニウムクロリド、ジステアリルアンモニウムブロミド、ジセチルメチルアンモニウムクロリド、ジセチルメチルアンモニウムブロミド、ジラウリルメチルアンモニウムクロリド、ジラウリルメチルアンモニウムブロミド、ジステアリルメチルアンモニウムクロリド、ジステアリルメチルアンモニウムブロミド、及びこれらの混合物から選択されるものが挙げられる。さらなる第四級アンモニウム塩としては、Ｃ_１２〜Ｃ_３０アルキル炭素鎖がタロー脂肪酸又はココナッツ脂肪酸から誘導されるものが挙げられる。用語「タロー」は、一般にＣ_１６〜Ｃ_１８の範囲のアルキル鎖の混合物を有するタロー脂肪酸から誘導されるアルキル基（通常、水素化タロー脂肪酸）を指す。用語「ココナッツツ」は、一般にＣ_１２〜Ｃ_１４の範囲のアルキル鎖の混合物を有するココナッツツ脂肪酸から誘導されるアルキル基を指す。これらのタロー及びココナッツツ源から誘導される第四級アンモニウム塩の例としては、ジタロージメチルアンモニウムクロリド、ジタロージメチルアンモニウムメチルサルフェート、ジ（水素化タロー）ジメチルアンモニウムクロリド、ジ（水素化タロー）ジメチルアンモニウムアセテート、ジタロージプロピルアンモニウムホスフェート、ジタロージメチルアンモニウムニトレート、ジ（ココナッツアルキル）ジメチルアンモニウムクロリド、ジ（ココナッツアルキル）ジメチルアンモニウムブロミド、タローアンモニウムクロリド、ココナッツツアンモニウムクロリド、ステアラミドプロピルＰＧ−ジモニウムクロリドホスフェート、ステアラミドプロピルエチルジモニウムエトサルフェート、ステアラミドプロピルジメチル（ミリスチルアセテート）アンモニウムクロリド、ステアラミドプロピルジメチルセテアリルアンモニウムトシレート、ステアラミドプロピルジメチルアンモニウムクロリド、ステアラミドプロピルジメチルアンモニウムラクテート、及びこれらの混合物が挙げられる。エステル結合を有するアルキル基を有する第四級アンモニウム化合物の例としては、ジタローイルオキシエチルジメチルアンモニウムクロリドが挙げられる。

より好ましいカチオン性界面活性剤としては、ベヘンアミドプロピルＰＧジモニウムクロリド、ジラウリルジメチルアンモニウムクロリド、ジステアリルジメチルアンモニウムクロリド、ジミリスチルジメチルアンモニウムクロリド、ジパルミチルジメチルアンモニウムクロリド、ジステアリルジメチルアンモニウムクロリド、ステアラミドＰＧ−ジモニウムクロリドホスフェート、ステアラミドプロピルエチルジアンモニウムエトサルフェート、ステアラミドプロピルジメチル（ミリスチルアセテート）アンモニウムクロリド、ステアラミドプロピルジメチルセテアリルアンモニウムトシレート、ステアラミドプロピルジメチルアンモニウムクロリド、ステアラミドプロピルジメチルアンモニウムラクテート、及びこれらの混合物から選択されるものが挙げられる。

さらにより好ましいカチオン性界面活性剤としては、ベヘンアミドプロピルＰＧジモニウムクロリド、ジラウリルジメチルアンモニウムクロリド、ジステアリルジメチルアンモニウムクロリド、ジミリスチルジメチルアンモニウムクロリド、ジパルミチルジメチルアンモニウムクロリド、及びこれらの混合物から選択されるものが挙げられる。

カチオン性界面活性剤と構造剤の好ましい組み合わせは、ベヘンアミドプロピルＰＧジモニウムクロリド及び／又はベヘニルアルコールであり、特にこのような組み合わせがイオン性及び／又は高度に極性のある溶剤を含む場合は、この比は、好ましくは物理的及び化学的安定性を維持し、高めるように最適化される。この組み合わせは、酸化亜鉛及びメトキシケイヒ酸オクチルなどの日焼け止め剤の送達のために特に有用である。

様々なアニオン性界面活性剤も本明細書で有用である。例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、１９７５年１２月３０日発行のＬａｕｇｈｌｉｎらの米国特許第３，９２９，６７８号を参照されたい。アニオン性界面活性剤の非限定的な例としては、アルコイルイセチオネート、並びにアルキル及びアルキルエーテルサルフェートが挙げられる。アルコイルイセチオネート類は、典型的には、式ＲＣＯ−ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＳＯ_３Ｍを有し、式中、Ｒは、約１０〜約３０個の炭素原子のアルキル又はアルケニルであり、Ｍは、アンモニウム、ナトリウム、カリウム及びトリエタノールアミンなどの水溶性カチオンである。これらのイセチオネート類の非限定的な例としては、アンモニウムココイルイセチオネート、ナトリウムココイルイセチオネート、ナトリウムラウロイルイセチオネート、ナトリウムステアロイイセチオネート、及びこれらの混合物から選択されるアルコイルイセチオネート類が挙げられる。

アルキル及びアルキルエーテルサルフェートは、典型的には、それぞれ式ＲＯＳＯ_３Ｍ及びＲＯ（Ｃ_２Ｈ_４Ｏ）_ｘＳＯ_３Ｍを有し、式中、Ｒは、約１０〜約３０個の炭素原子のアルキル又はアルケニルであり、ｘは約１〜約１０であり、Ｍは、アンモニウム、ナトリウム、カリウム及びトリエタノールアミンなどの水溶性カチオンである。別の適切なクラスのアニオン性界面活性剤としては、一般式Ｒ−ＳＯ_３−Ｍの有機硫酸反応生成物の水溶性塩が挙げられ、式中、Ｒ_１は、約８〜約２４、好ましくは約１０〜約１６個の炭素原子を有する直鎖又は分枝鎖の飽和脂肪族炭化水素基を含む群から選択され、Ｍはカチオンである。さらに他のアニオン性合成界面活性剤としては、スクシナメート、約１２〜約２４個の炭素原子を有するオレフィンスルホネート、及びβ−アルキルオキシアルカンスルホネートとして指定されるクラスが挙げられる。これらの物質の例としては、ラウリル硫酸ナトリウム及びラウリル硫酸アンモニウムが挙げられる。

本明細書で有用な他のアニオン性物質としては、典型的には約８〜約２４個の炭素原子、好ましくは約１０〜約２０個の炭素原子を有する脂肪酸の石鹸（すなわち、アルカリ金属塩、例えば、ナトリウム又はカリウム塩）である。石鹸を製造する際に使用される脂肪酸は、例えば、植物又は動物由来のグリセリド（例えば、パーム油、ヤシ油、大豆油、ヒマシ油、タロー、ラードなど）などの天然の供給源から得ることができる。これらの脂肪酸は合成で調製することもできる。石鹸については、米国特許第４，５５７，８５３号により詳細に記載されている。

両性及び双性イオン性界面活性剤も本明細書で有用である。本発明の組成物に使用できる両性及び双性イオン性界面活性剤の例は、脂肪族第二級及び第三級アミンの誘導体として広く説明されているものであり、その中の脂肪族ラジカルが直鎖又は分枝鎖であり得、脂肪族置換基の１つが約８〜約２２個の炭素原子（好ましくは、Ｃ_８〜Ｃ_１８）を含有し、１つはアニオン性水可溶化基、例えば、カルボキシ、スルホネート、サルフェート、ホスフェート、又はホスホネートを含有する。例としては、式ＲＮ［ＣＨ_２］_ｍＣＯ_２Ｍ］_２及びＲＮＨ（ＣＨ_２）_ｍＣＯ_２Ｍのアルキルイミノアセテート類、イミノジアルカノエート類及びアミノアルカノエート類が挙げられ、式中、ｍは１〜４であり、ＲはＣ_８〜Ｃ_２２アルキル又はアルケニルであり、Ｍは、Ｈ、アルカリ金属、アルカリ土類金属アンモニウム、又はアルカノールアンモニウムである。イミダゾリニウム及びアンモニウム誘導体も含まれる。適切な両性界面活性剤の具体例としては、その全体が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第２，６５８，０７２号の教示に従ってイセチオン酸ナトリウムとドデシルアミンの反応により調製したものなどのナトリウム３−ドデシルアミノプロピオネート、ナトリウム３−ドデシルアミノプロパンスルホネート、Ｎ−アルキルタウリン類；その全体が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第２，４３８，０９１号の教示に従って生成されるものなどのＮ−高級アルキルアスパラギン酸；及び「ミラノール」という商標名で販売されており、その全体が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第２，５２８，３７８号に記載されている生成物が挙げられる。有用な両性界面活性剤の他の例としては、（Ｍｏｎａ社からＭｏｎａｑｕａｔ ＰＴＣとして市販されている）コアミドプロピル（ｃｏａｍｉｄｏｐｒｏｐｙｌ）ＰＧ−ジモニウムクロリドホスフェートなどのホスフェートが挙げられる。

本明細書で有用な他の両性又は双性イオン性界面活性剤としてはベタイン類が挙げられる。ベタイン類の例としては、ココジメチルカルボキシメチルベタイン、ラウリルジメチルカルボキシメチルベタイン、ラウリルジメチルアルファカルボキシエチルベタイン、セチルジメチルカルボキシメチルベタイン、セチルジメチルベタイン（Ｌｏｎｚａ社からＬｏｎｚａｉｎｅ １６ＳＰとして入手可能）、ラウリルビス−（２−ヒドロキシエチル）カルボキシメチルベタイン、ステアリルビス−（２−ヒドロキシプロピル）カルボキシメチルベタイン、オレイルジメチルガンマ−カルボキシプロピルベタイン、ラウリルビス−（２−ヒドロキシプロピル）アルファ−カルボキシエチルベタイン、ココジメチルスルホプロピルベタイン、ステアリルジメチルスルホプロピルベタイン、ラウリルジメチルスルホエチルベタイン、ラウリルビス−（２−ヒドロキシエチル）スルホプロピルベタイン、並びにアミドベタイン類及びアミドスルホベタイン類（式中、ＲＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_３ラジカルは、ベタインの窒素原子に結合している）、オレイルベタイン（Ｈｅｎｋｅｌ社から両性ベルベテックスＯＬＢ−５０として入手可能）、及びコカミドプロピルベタイン（Ｈｅｎｋｅｌ社からベルベテックスＢＫ−３５及びＢＡ−３５として入手可能）などの高級アルキルベタイン類が挙げられる。

他の有用な両性及び双性イオン界面活性剤としては、コカミドプロピルヒドロキシスルタイン（Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ社からＭｉｒａｔａｉｎｅ ＣＢＳとして入手可能）などのスルタイン類及びヒドロキシスルタイン類、並びに式ＲＣＯＮ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯ_２Ｍに対応するアルカノイルサルコシネートが挙げられ、式中、Ｒは、約１０〜約２０個の炭素原子のアルキル又はアルケニルであり、Ｍは、アンモニウム、ナトリウム、カリウム及びトリアルカノールアミン（例えば、トリエタノールアミン）などの水溶性カチオンであり、その好ましい例としてはナトリウムラウロイルサルコシネートが挙げられる。

（３）水
好ましい水中油型エマルジョンは、水を局所用担体の重量で約２５％〜約９８％、好ましくは約６５％〜約９５％、より好ましくは約７０％〜約９０％含有する。

疎水相は連続水相中に分散されている。疎水相は、水中シリコーン型エマルジョンを参照して本明細書に記載したシリコーンを含むがこれらに限定されない、当技術分野で周知の水不溶性又は部分的に水溶性の物質、並びにエマルジョンを参照して上述したような他の油及類び脂質類を含んでよい。

ローション及びクリームを含むが、これらに限定されない本発明に係る局所用組成物は、皮膚科学的に許容される皮膚軟化剤を含有してよい。かかる組成物は、皮膚軟化剤を好ましくは約１％〜約５０％含有する。本明細書で使用する「皮膚軟化剤」は、乾燥の予防又は軽減、並びに皮膚の保護に有用な物質を指す。様々な適切な皮膚軟化剤が知られており、本明細書で使用されてよい。参照により本明細書に組み込まれるＳａｇａｒｉｎの化粧品科学技術、第２版、１巻、３２〜４３ページ（１９７２）は、皮膚軟化剤として適する多数の物質の例を含む。好ましい皮膚軟化剤はグリセリンである。グリセリンは、好ましくは約０．００１〜約３０％、より好ましくは約０．０１〜約２０％、さらにより好ましくは約０．１〜約１０％、例えば、５％の量で使用される。

本発明に係るローション及びクリームは、一般に、溶液担体系及び１種以上の皮膚軟化剤を含有する。ローション及びクリームは、典型的には、皮膚軟化剤を約１％〜約５０％、好ましくは約１％〜約２０％；水を約５０％〜約９０％、好ましくは約６０％〜約８０％；並びに上記の量でペンタペプチド及び／もしくはペンタペプチド誘導体並びに追加のスキンケア活性物質（又は複数の活性物質）を含有する。クリームは、一般に皮膚軟化剤のレベルがより高いため又は増粘剤のレベルがより高いためにローションよりも濃い。

本発明の軟膏は、動物又は植物油の単一担体基剤もしくは半固体炭化水素（油性）；水を吸収してエマルジョンを形成する吸収軟膏基剤；又は水溶性担体、例えば、水溶性の溶液担体を含有してよい。軟膏は、参照により本明細書に組み込まれるＳａｇａｒｉｎの化粧品、科学と技術（Ｃｏｓｍｅｔｉｃｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、第２版、１巻、７２〜７３（１９７２）に記載のものなどの増粘剤、及び／又は皮膚軟化剤をさらに含有してよい。例えば、軟膏は、皮膚軟化剤を約２％〜約１０％；増粘剤を約０．１％〜約２％；上記の量でペンタペプチド及び／又はペンタペプチド誘導体並びに追加のスキンケア活性物質（又は複数の活性物質）を含有してよい。

洗浄に有用な本発明に係る組成物（「清浄剤」）は、例えば、上記の適切な担体を用いて製剤化され、好ましくは、上記の量のペンタペプチド及び／又はペンタペプチド誘導体並びに追加のスキンケア活性物質（又は複数の活性物質）に加えて、皮膚科学的に許容される界面活性剤を約１％〜約９０％、より好ましくは約５％〜約１０％含有する。界面活性剤は、適切には、アニオン性、非イオン性、双性イオン性、両性及び両性電解質の界面活性剤、並びにこれらの界面活性剤の混合物から選択される。かかる界面活性剤は、洗浄技術分野の当業者に周知である。可能な界面活性剤の非限定的な例としては、イソセテス−２０、メチルココイルタウリン酸ナトリウム、ナトリウムメチルオレオイルタウレート、及びラウリル硫酸ナトリウムが挙げられる。本明細書で有用な代表的な界面活性剤については、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる１９８９年１月２４日発行のＫｏｗｃｚらの米国特許第４，８００，１９７号を参照されたい。本明細書で有用な追加の様々な界面活性剤の例については、Ａｌｌｕｒｅｄ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ社出版のＭｃＣｕｔｃｈｅｏｎの洗剤及び乳化剤、北米版（１９８６）に記載されている。洗浄組成物は、必要に応じて、これらの当該技術分野で確立されたレベルで、従来の洗浄組成物に使用される他の物質を含有することができる。

洗浄組成物の物理的形状は重要ではない。該組成物は、例えば、トイレットバー、液体、シャンプー、バスジェル、ヘアコンディショナー、ヘアトニック、ペースト又はムースとして製剤化することができる。シャンプーなどのリンスオフ洗浄組成物は、皮膚及び頭皮上に十分なレベルの活性物質を堆積するのに適切な送達システムを必要とする。好ましい送達システムは、不溶性複合体の使用を含む。かかる送達システムのより完全な開示については、１９８９年５月３０日発行のＢａｒｆｏｒｄらの米国特許第４，８３５，１４８号を参照されたい。

本明細書で使用する用語「ファンデーション」は、ローション、クリーム、ゲル、ペースト、及びケーキなどを含むがこれらに限定されない液体、半液体、半固体、又は固体の皮膚化粧品を指す。典型的には、ファンデーションは、特定の外観を提供するために、顔の上などの皮膚の広い領域にわたって使用される。ファンデーションは、典型的には、口紅、頬紅、及びパウダーなどのカラー化粧品の接着ベースを提供するために使用され、皮膚の欠点を隠し、皮膚に滑らかで平な外観を付与する傾向がある。本発明のファンデーションは、皮膚科学的に許容される担体を含み、油、着色剤、顔料、皮膚軟化剤、香料、ワックス、及び安定剤などの従来の成分を含んでよい。本明細書で使用するのに適する代表的な担体及びかかる他の成分については、例えば、１９９６年１０月３１日公開のＣａｎｔｅｒらのＰＣＴ出願ＷＯ ９６／３３６８９及び１９９４年８月３日発行の英国特許ＧＢ ２２７４５８５に記載されている。

組成物の調製
本発明の方法に有用な組成物は、一般に、局所用組成物を製造する当該技術分野で知られているような従来の方法により調製される。かかる方法は、典型的には、加熱、冷却、及び真空の適用などの有無にかかわらず、比較的均一な状態への１以上の工程で成分を混合することを含む。

皮膚の状態を調節する方法
本発明の組成物は、哺乳類の皮膚状態を調節するのに有用である。ケラチン組織状態のかかる調節は、予防的及び治療的調節を含むことができる。例えば、かかる調整方法は、ケラチン組織の肥厚（すなわち、皮膚の表皮及び／又は真皮の層、該当する場合には爪及び毛軸のケラチン層の構築）、並びに哺乳類の皮膚の萎縮の予防及び／又は遅延、哺乳類の皮膚上のクモ状血管及び／又は赤斑の出現の予防及び／又は遅延、哺乳類の眼の下のくまの出現の予防及び／又は遅延、哺乳類の皮膚の血色の悪さの予防及び／又は遅延、哺乳類の皮膚のたるみの予防及び／又は遅延、哺乳類の唇、毛髪及び爪の軟化及び／又は平滑化、哺乳類の皮膚のかゆみの予防及び／又は軽減、皮膚の質感（例えば、シワ及び細い線）の調節、皮膚の色（例えば赤み、そばかす）の改善を対象とする。

ケラチン組織状態の調節は、安全かつ有効な量の本発明の組成物をケラチン組織に局所適用することを含む。適用される組成物の量、適用頻度及び使用期間は、例えば、存在するか又は発生することが予想されるケラチン組織の損傷レベルを考慮すると、所与の組成物中のペンタペプチド及び／又はペンタペプチド誘導体並びに追加のスキンケア活性物質（複数可）のレベル、並びに所望の調節レベルに依存して大きく変化する。

好ましい実施形態において、該組成物は、慢性的に皮膚に適用される。「慢性局所適用」とは、対象の生涯の間、好ましくは少なくとも約１週間、より好ましくは少なくとも約１ヶ月、さらにより好ましくは少なくとも約３ヶ月、さらにより好ましくは少なくとも６ヶ月、かつさらにより好ましくは少なくとも約１年間の期間、長期間にわたる該組成物の継続的な局所適用を意味する。利点は、様々な最大使用期間（例えば、５、１０又は２０年）後に得られるが、慢性適用は対象の生涯にわたって継続することが好ましい。典型的な適用は、かかる長期間にわたって１日当たり約１回程度であるが、適用率は、１週間に約１回から１日に約３回又はそれ以上と変化させることができる。

広い範囲の量の本発明の組成物を用いて、皮膚の外観を提供し、かつ／又は効果を感じることができる。典型的には、適用ごとに使用される本発明の組成物の量は、該組成物１ｍｇ／皮膚ｃｍ^２で、約０．１ｍ／ｃｍ^２〜約１０ｍｇ／ｃｍ^２である。特に有用な適用量は、約１ｍｇ／ｃｍ^２〜約２ｍｇ／ｃｍ^２である。

ケラチン組織の状態の調節は、好ましくは、スキンローション、クリーム、ゲル、フォーム、軟膏、ペースト、エマルジョン、スプレー、コンディショナー、トニック、化粧品、口紅、ファンデーション、マニキュア、又はアフターシェーブなどの形態で組成物を適用することによって実施され、好ましくは、いくらかの審美、予防、治療又はその他の利点のために、皮膚又は他のケラチン構造上に残ることが意図される（すなわち、「リーブオン」組成物）。該組成物を皮膚に適用した後、少なくとも約１５分間、より好ましくは少なくとも約３０分、さらにより好ましくは少なくとも約１時間、さらにより好ましくは少なくとも数時間、例えば、最大約１２時間皮膚上に残る。顔、毛髪、及び／又は爪の外側部分の全ての部分、例えば、顔、唇、下眼領域、まぶた、頭皮、首、胴体、腕、手、脚、足、爪、足の爪、、頭皮毛髪、睫毛、眉毛などを治療することができる。該組成物は、指で又は道具もしくは装置（例えば、パッド、綿ボール、アプリケーターペン、及びスプレーアプリケーターなど）で適用することができる。

少なくとも最小レベルのペンタペプチド及び／又はペンタペプチド誘導体並びに追加のスキンケア活性物質（又は複数の活性物質）に対する皮膚の連続暴露を確保するための別のアプローチは、例えば、顔に適用されるパッチの使用によって化合物を適用することである。かかるアプローチは、より集中的な治療を必要とする問題の皮膚領域（例えば、顔のカラスの足領域、しかめ面ライン、及び目尻の下など）に特に有用である。パッチは、閉塞性、半閉塞性又は非閉塞性であり得、接着性又は非接着性であり得る。ペンタペプチド及び／又はペンタペプチド誘導体並びに追加のスキンケア活性物質（又は複数の活性物質）の組成物は、パッチ内に含まれるか、又はパッチの適用前に皮膚に適用することができる。パッチは、Ｗｕらの米国特許第５，８２１，２５０号、同第５，９８１，５４７号、及び同第５，９７２，９５７号に記載のものなどの、発熱反応のための化学的開始剤などの追加の活性成分も含むことができる。パッチは、夜療法の形態として、好ましくは少なくとも約５分間、より好ましくは少なくとも約１５分、より好ましくは少なくとも約３０分、さらにより好ましくは少なくとも約１時間、さらに好ましくは夜間、皮膚上に放置される。

説明の目的のための以下の記載では、実施例の完全な理解を提供するために多くの詳細が記載されている。しかし、これらの特定の詳細は必要とされないことは当業者には明らかであろう。

実施例
物質及び方法
グリコシル化Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ誘導体のための一般的な合成手順
Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ配列に基づいて、過アセチル化と脱アセチル化の両方の形態の様々な糖類（Ｇｌｃ、Ｇａｌ、ＧｌｃＮＡｃ、ＧａｌＮＡｃ、Ｍａｎ、Ｍａｉ、Ｌａｃ、Ｒｈａ、Ｃｅｌ、Ｘｙｌ、Ｆｕｃ）で全ての可能な部位をグリコシル化することにより、同様に改変したペンタペプチドの４つのグループを作製した。その後、これらの合成化合物を、インビトロでヒト皮膚線維芽細胞培養物上でのエラスチン、フィブロネクチン及び総コラーゲンの分泌を調べ、（ヒト表皮ケラチノサイト及びヒト真皮線維芽細胞で構成される）ヒトの皮膚のインビトロ３Ｄモデルにおけるエラスチン分泌及び組織学を調べることにより毒性及び生物活性について試験した。同様に改変して作製したペプチドの４つのグループについて、ＨＰＬＣ及び質量分析によって化学的同定を行った。

グループ１の改変は、該Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ配列内の２つの中間トレオニンのいずれか一方又は両方における、過アセチル化又は脱アセチル化の形態のグルコース、Ｎ−アセチルグルコサミン、ガラクトース、Ｎ−アセチルガラクトサミン、又はそれらの組み合わせによるグリコシル化を伴った。

グループ２の改変は、該Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ配列内の末端セリンにおける、過アセチル化又は脱アセチル化の形態のグルコース、Ｎ−アセチルグルコサミン、ガラクトース、Ｎ−アセチルガラクトサミンによるグリコシル化を伴った。

グループ３の改変は、該Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ配列内の第１のトレオニンにおける、過アセチル化又は脱アセチル化形態のマンノース又はマルトースによるグリコシル化を伴った。グループ３の改変は、該Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ配列内の第１のトレオニンのセリン置換も含み、このセリンは、過アセチル化又は脱アセチル化形態のグルコースでグリコシル化されている。グループ３の改変は、該Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ配列内の第１のトレオニンのアスパラギン置換も含み、このアスパラギンは、過アセチル化又は脱アセチル化形態のグルコースによりグリコシル化されている。グループ３の改変は、該Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ配列のＮ末端におけるアスパラギンアミノ酸の付加も含み、このアスパラギンは、過アセチル化又は脱アセチル化形態のグルコースによりグリコシル化されている。

グループ４の改変は、該Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ配列内の第１もしくは第２のトレオニン、又は該Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ配列内の末端セリンにおける、過アセチル化形態のガラクトース、マルトース、ラクトース、ラムノース、セロビオース、キシロース又はフコースによるグリコシル化を伴った。

全ての化学試薬は、試薬又はＨＰＬＣ等級として商業的供給業者から入手し、さらに精製することなく使用した。ジクロロメタン（ＤＣＭ）は、水素化カルシウム（ＣａＨ_２）から蒸留により乾燥させた。特に断りのない限り、全ての反応を室温で行った。グリコペプチド合成に使用した全ての非グリコシル化Ｆｍｏｃ保護アミノ酸は、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社（ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社）から入手した。グリコペプチド合成に使用した全てのグリコシル化Ｆｍｏｃ保護アミノ酸（グリコアミノ酸又はグリコシル化アミノ酸）は、Ｓｕｓｓｅｘ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ社（オタワ、カナダ）から市販されている（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｓｕｓｓｅｘ−ｒｅｓｅａｒｃｈ．ｃｏｍ／ｐｒｏｄｕｃｔｓ／ｇｌｙｃｏａｍｉｎｏ−ａｃｉｄｓ／ａｌｌ−ｇｌｙｃｏａｍｉｎｏ−ａｃｉｄｓ／）。プレロードレジン（Ｈ−Ｌ−Ｓｅｒ（ｔ−Ｂｕ）−２−Ｃｌ−トリチル樹脂）は、Ｍａｔｒｉｘ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ社（ケベック、カナダ）から購入した。標準樹脂（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社、２−クロロトリチルクロリド樹脂）は、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社から入手した。パルミチン酸（純度＞９９％）を、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ社から購入した。

Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８カラム：粒径５μｍ、分析カラム２５０×４．６０ｍｍを用いて、８０５マノメータモジュール（最大圧力６０ＭＰａ）、８１１Ｃダイナミックミキサー、３０５ポンプ及びＵＶ／ＶＩＳ−１５５検出器を装備したギルソンクロマトグラフにて逆相高圧液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）を行った。勾配は、それぞれ移動相Ａ及びＢ（水／ＴＦＡ（１００／０．１）及びアセトニトリル／ＴＦＡ（１００／０．１）からなる。グリコペプチド類を、２１４ｎｍでのＵＶ検出を用いて、１ｍＬ／分の流速で４０分かけて、２〜７０％の移動相Ｂの直線勾配によりカラムから溶出した。Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８カラム：粒径１０μｍ、半分取カラム２５０×２１．２０ｍｍを用いて、ギルソンクロマトグラフ（８０５マノメータモジュール、最大圧力６０ＭＰａ、８１１Ｃダイナミックミキサー、３０５ポンプ、ＵＶ／ＶＩＳ−１５５検出器）にて分取ＨＰＬＣを行った。移動相Ａ及びＢは、それぞれ（水／ＴＦＡ（１００／０．１）及びアセトニトリル／ＴＦＡ（１００／０．１）からなっていた。２１４ｎｍでのＵＶ検出を用いて、１０ｍＬ／分の流速で、３５分間での２〜７０％の移動相Ｂの直線勾配によりグリコペプチドを不純物から分離した。

マイクロマスＺＱシングル四重極質量分析計を用いてエレクトロスプレーイオン化質量分析（ＥＳＩ−ＭＳ）にてペプチド試料分析を行った。

過アセチル化トレオニングリコシル化オリゴペプチドの合成の一般手順
標準的なＦｍｏｃ固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）法を使用してＣＳ Ｂｉｏ ＣＳ１３６ＸＴ自動合成機にてグリコペプチドを合成した。プレロードレジンのＨ−Ｌ−Ｓｅｒ（ｔ−Ｂｕ）−２−Ｃｌ−トリチル樹脂（０．１３３ｇ、０．１ミリモル）を反応容器に入れた。Ｆｍｏｃ保護アミノ酸（０．４ミリモル）、Ｆｍｏｃ保護グリコアミノ酸（０．４ミリモル）又はパルミチン酸（０．４ミリモル）をＤＭＦ５ｍＬに溶解し、ＤＭＦ中でのＨＢＴＵ（０．４ミリモル）及びＤＩＰＥＡ（０．６ミリモル）を用いた活性化によってカップリング反応を行った。Ｆｍｏｃ脱保護は、ＤＭＦ中の２０％ピペリジン溶液を用いて行った。ペプチドアセンブリ完了後、樹脂を、ＤＭＦ（３×５ｍＬ）、続いてＤＣＭ（３×５ｍＬ）で洗浄し、その後、３時間、高真空下で乾燥させた。その後、乾燥樹脂を、各０．１ミリモル樹脂について試薬Ｋ（ＴＦＡ：水：フェノール：チオアニソール＝８．５：０．５：０．５：０．５）１０ｍＬにより室温で３時間処理した。粗グリコペプチド生成物を冷エチルエーテルから沈殿させ、ＲＰ−ＨＰＬＣで精製し、凍結乾燥して、白色粉末としてグリコペプチドを８０〜１００ｍｇ得た。グリコペプチドの分子量をＭＳによって確認し、純度を分析用ＲＰ−ＨＰＬＣによって測定した。

脱アシル化グリコシル化オリゴペプチドの合成の一般手順
無水ＭｅＯＨ（５ｍＬ）中のＰａｌ−ＫＴＴ^＊ＫＳ−［ＯＨ］又はＰａｌ−ＫＴ^＊ＴＫＳ−［ＯＨ］（それぞれ０．０５ミリモル）の溶液に、無水メタノール中のナトリウムメトキシド（１Ｍ）を滴下し、ｐＨを約１０に調整した。この反応混合物を室温で１時間撹拌し、その後、酢酸（ｐＨ約４．０）で中和した。溶媒を真空中で除去した。粗脱保護グリコペプチドをＲＰ−ＨＰＬＣで精製し、凍結乾燥して、目的グリコペプチドを白色粉末として典型的には３０〜４０ｍｇ得た。

過アセチル化セリングリコシル化オリゴペプチドの合成の一般手順
プレロードされたＨ−Ｌ−Ｓｅｒ（糖）−２−Ｃｌ−トリチル樹脂の合成：無水ＤＣＭ（５ｍＬ＿）中のＦｍｏｃ−Ｓｅｒ（糖）−ＯＨ（０．３ミリモル）の溶液を、遠心分離管中の２−クロロトリチル樹脂（０．４ｇ、０．３ミリモル）に添加した。１５分後、ＤＩＰＥＡ（８７μｌ、０．５ミリモル）を添加した。混合物を３０分間シェーカー上で攪拌し、その後、ＤＩＰＥＡ（１２０μｌ、０．７５ミリモル）を添加した。この混合物をさらに３時間シェーカー上で放置した。エンドキャップに、メタノール（０．４ｍＬ）を添加し、この混合物をさらに３０分間撹拌した。樹脂を、多孔質ディスクを取り付けたガラス漏斗に移し、ＤＭＦ（２×５ｍＬ）、その後、ＤＣＭ（２×５ｍＬ）、最後にＭｅＯＨ（３×５ｍＬ）で洗浄した。この樹脂を真空下で一晩乾燥させ、グリコペプチドのＦｍｏｃ−ＳＰＰＳ合成でさらに使用するためのプレロードされたＨ−Ｌ−Ｓｅｒ（糖）−２−Ｃｌ−トリチル樹脂を得た。

セリングリコシル化グリコペプチドを、標準的なＦｍｏｃ固相ペプチド合成法により、ＣＳ Ｂｉｏ ＣＳ１３６ＸＴ自動合成装置にて合成した。プレロードレジン（Ｈ−Ｌ−Ｓｅｒ（糖）−２−Ｃｌ−トリチル樹脂（０．１ミリモル））を反応容器に入れた。Ｆｍｏｃ保護アミノ酸（ＤＭＦ５ｍＬに溶解した０．４ミリモル）を、ＨＢＴＵ（０．４ミリモル）及びＤＩＰＥＡ（０．６ミリモル）を用いた活性化を利用して結合させた。Ｎ−末端パルミチン酸（ＤＭＦ５ｍＬに溶解した０．４ミリモル）を同様に結合させた。Ｆｍｏｃ保護基を、ＤＭＦ中２０％ピペリジン溶液を用いて除去した。ペプチドアセンブリ後、樹脂をＤＭＦ（３×５ｍＬ）、続いて、ＤＣＭ（３×５ｍＬ）で洗浄し、その後、３時間、高真空下で乾燥させた。乾燥樹脂に試薬Ｋ（ＴＦＡ：水：フェノール：チオアニソール＝８．５：０．５：０．５：０．５）１０ｍＬを添加した。その後、混合物を室温で３時間振盪した。粗製グリコペプチドを冷エチルエーテルから沈殿させ、ＲＰ−ＨＰＬＣで精製し、凍結乾燥して、目的グリコペプチドを白色粉末として１２０〜１５０ｍｇ得た。生成物グリコペプチドの分子量をＭＳにより確認し、純度を分析用ＨＰＬＣによって評価した。

Ｐａｌ−ＫＴ（Ａｃ_４−β−Ｇｌｃ）ＴＫＳ−［ＯＨ］（ＧＰ００１−１）の代表的な合成
グリコペプチドＧＰ００１−１を、Ｈ−Ｌ−Ｓｅｒ（ｔ−Ｂｕ）−２−Ｃｌ−トリチル樹脂（１３３．３ｍｇ、０．１ミリモル）上で標準的なＦｍｏｃ−ＳＰＰＳ法及び以下の一般的な手順を用いて、ＣＳ−Ｂｉｏ ＣＳ１３６ＸＴ自動合成装置にて合成した。最初のアミノ酸のＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（１８７．４ｍｇ、０．４ミリモル）を、ＤＭＦ（５ｍＬ）中のＨＢＴＵ（１２８．４ｍｇ、０．４ミリモル）及びＤＩＰＥＡ（１０４．５μｌ、０．６ミリモル）を用いてプレロードレジンに結合させた。後続のＦｍｏｃアミノ酸及びパルミチン酸を同様に結合させた。Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ＡＣ_４−β−Ｇｌｃ）−ＯＨ（０．２７０ｍｇ、０．４ミリモル）を、第３のカップリング反応に使用した。固相合成後に、このグリコペプチドを試薬Ｋ（１０ｍＬ）で樹脂から切断した。得られた粗グリコペプチドを分取ＲＰ−ＨＰＬＣにより精製し、白色粉末としてＰａｌ−ＫＴ（Ａｃ_４−β−Ｇｌｃ）ＴＫＳ−ＯＨ、ＧＰ００１−１（７０ｍｇ、６２％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ：Ｃ_５３Ｈ_９３Ｎ_７Ｏ_１９の計測値；１１３２．３４；実測値：１１３３．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。分析用ＲＰ−ＨＰＬＣによって測定した場合、純度は９５．６％であった。

Ｐａｌ−ＫＴ（β−Ｇｌｃ）−ＴＫＳ−［ＯＨ］（ＧＰ００１−２）の代表的な合成
上記の一般的な手順で説明したように、グリコペプチドＧＰ００１−１（６５ｍｇ、０．０５ミリモル）を、無水メタノール５ｍＬに溶解し、メタノール中のナトリウムメトキシドを添加することにより脱保護し、白色粉末として目的の脱アセチル化グリコペプチドＧＰ００１−２を３２ｍｇ得た。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ：Ｃ_４５Ｈ_８５Ｎ_７Ｏ_１５の計測値；９６４．１９；実測値：９６５［Ｍ＋Ｈ］^＋。分析用ＨＰＬＣにより、純度は９９％であった。

Ｐａｌ−ＫＴ（Ａｃ_７−β−Ｍａｌ）ＴＫＳ−［ＯＨ］（ＧＰ００３−９）の代表的な合成
グリコペプチドＧＰ００３−９を、Ｈ−Ｌ−Ｓｅｒ（ｔ−Ｂｕ）−２−Ｃｌ−トリチル樹脂（１３３．３ｍｇ、０．１ミリモル）上で標準的なＦｍｏｃ−ＳＰＰＳ法及び以下の一般的な手順を用いて、ＣＳ−Ｂｉｏ ＣＳ１３６ＸＴ自動合成機にて合成した。最初のアミノ酸のＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（１８７．４ｍｇ、０．４ミリモル）を、ＤＭＦ（５ｍＬ）中のＨＢＴＵ（１２８．４ｍｇ、０．４ミリモル）及びＤＩＰＥＡ（１０４．５μＬ、０．６ミリモル）を用いてプレロードレジンに結合させた。後続のＦｍｏｃアミノ酸を同様の方法で結合させた。Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（Ａｃ_７−β−Ｍａｌ）−ＯＨ（０．３７２ｍｇ、０．４ミリモル）を第３のカップリング反応に使用した。固相合成後に、グリコペプチドを試薬Ｋ（１０ｍＬ）で樹脂から切断した。得られた粗グリコペプチドを分取ＲＰ−ＨＰＬＣにより精製し、白色粉末としてＰａｌ−ＫＴ（Ａｃ_７−β−Ｍａｌ）ＴＫＳ−ＯＨ、ＧＰ００３−９（９０ｍｇ、６３％収率）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ：Ｃ_６５Ｈ_１０９Ｎ_７Ｏ_２７の計測値；１４２０．５９；実測値：１４２０．７［Ｍ＋Ｈ］^＋。分析用ＲＰ−ＨＰＬＣにより測定した場合、純度は９９．１％であった。

Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ（Ａｃ_４−β−Ｇｌｃ）−［ＯＨ］（ＧＰ００２−３）の代表的な合成
ａ）Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（Ａｃ４−β−Ｇｌｃ）−ＯＨ（０．３ミリモル）を、上記の一般的な手順により、２−クロロトリチル樹脂（０．４ｇ、０．３ミリモル）にロードした。乾燥させたプレロードレジンを、その後のステップでさらに処理することなく使用した。

ｂ）グリコペプチドＧＰ００２−３を、上記で説明したように調製し、プレロードレジン上での標準的なＦｍｏｃ固相ペプチド合成法により、ＣＳ Ｂｉｏ ＣＳ１３６ＸＴ自動合成装置上で合成した。固相合成の後に、グリコペプチドを、試薬Ｋ（１０ｍＬ）を使用して樹脂から切断した。得られた粗グリコペプチドを分取ＨＰＬＣによって精製し、白色粉末としてＰａｌ−ＫＴＴＫＳ（Ａｃ４−β−Ｇｌｃ）−ＯＨ、ＧＰ００２−３（１３６ｍｇ、４０％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ：Ｃ_５３Ｈ_９３Ｎ_７Ｏ_１９についての計算値；１１３２．３４；実測値：１１３２．［Ｍ＋Ｈ］^＋。純度は、分析用ＲＰ−ＨＰＬＣにより９９．６％であった。

ＰａＫＴＴＫＳ（Ａｃ_４−β−Ｇａｌ）−［ＯＨ］（ＧＰ００２−７）の代表的な合成
ａ）Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（Ａｃ４−β−Ｇａｌ）−ＯＨ（０．３ミリモル）を、上記の一般的な手順により、２−クロロトリチル樹脂（０．４ｇ、０．３ミリモル）上にロードした。乾燥させたプレロードレジンを、その後の工程でさらに処理することなく使用した。

ｂ）グリコペプチドＧＰ００２−７を、上記で説明したように調製し、プレロードレジン上での標準的なＦｍｏｃ固相ペプチド合成法により、ＣＳ Ｂｉｏ ＣＳ１３６ＸＴ自動合成装置上で合成した。固相合成の後に、グリコペプチドを、試薬Ｋ（１０ｍＬ）を用いて樹脂から切断した。得られた粗グリコペプチドを分取ＲＰ−ＨＰＬＣにより精製し、白色粉末として目的ペプチドのＰａｌ−ＫＴＴＫＳ（Ａｃ４−β−Ｇａｌ）−ＯＨ、ＧＰ００２−７（１４０ｍｇ、４１％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ：Ｃ_５３Ｈ_９３Ｎ_７Ｏ_１９についての計算値１１３２．３４；実測値：１１３２．５［Ｍ＋Ｈ］^＋。純度は、分析用ＨＰＬＣで９９．６％であった。

Ｐａｌ−ＫＴＴ（Ａｃ_７−β−Ｍａｌ）ＫＳ−［ＯＨ］（ＧＰ００４−３）の代表的な合成
グリコペプチドＧＰ００４−３を、Ｈ−Ｌ−Ｓｅｒ（ｔ−Ｂｕ）−２−Ｃｌ−トリチル樹脂（１３３．３ｍｇ、０．１ミリモル）上での標準的なＦｍｏｃ−ＳＰＰＳ法及び以下の一般的な手順を用いて、ＣＳ−Ｂｉｏ ＣＳ１３６ＸＴ自動合成装置上で合成した。最初のアミノ酸のＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（１７９．６ｍｇ、０．４ミリモル）を、ＤＭＦ（５ｍＬ）中のＨＢＴＵ（１２６．３ｍｇ、０．４ミリモル）及びＤＩＰＥＡ（１０４．５μｌ、０．６ミリモル）を用いてプレロードレジンに結合させた。後続のＦｍｏｃ−アミノ酸を同様の方法で結合させた。Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（Ａｃ_７−β−Ｍａｌ）−ＯＨ（０．３８３ｍｇ、０．４ミリモル）を第２のカップリング反応に用いた。固相合成後に、グリコペプチドを試薬Ｋ（１０ｍＬ）で樹脂から切断した。得られた粗グリコペプチドを分取ＲＰ−ＨＰＬＣにより精製し、白色粉末としてＰａｌ−ＫＴ（Ａｃ_７−β−Ｍａｌ）ＴＫＳ−ＯＨ、ＧＰ００４−３（２６ｍｇ、収率１８％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ：Ｃ_６５Ｈ_１０９Ｎ_７Ｏ_２７についての計算値１４２０．５９；実測値：１４２０．７［Ｍ＋Ｈ］^＋。分析用ＲＰ−ＨＰＬＣにより測定した場合、純度は９８．５％であった。

Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ（Ａｃ_７−β−Ｍａｌ）−［ＯＨ］（ＧＰ００４−４）の代表的な合成
ａ）Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（Ａｃ７−β−Ｍａｌ）−ＯＨ（０．３ミリモル）を、上記の一般的な手順により、２−クロロトリチル樹脂（０．４ｇ、０．３ミリモル）にロードした。乾燥させたプレロードレジンを、その後のステップでさらに処理することなく使用した。

ｂ）グリコペプチドＧＰ００４−４を、上記のように調製したプレロードレジン上での標準的なＦｍｏｃ固相ペプチド合成法により、ＣＳ Ｂｉｏ ＣＳ１３６ＸＴ自動合成装置上で合成した。固相合成後に、グリコペプチドを、試薬Ｋ（１０ｍＬ）を用いて樹脂から切断した。得られた粗グリコペプチドを分取ＨＰＬＣにより精製し、白色粉末としてＰａｌ−ＫＴＴＫＳ（Ａｃ７−β−Ｍａｌ）−［ＯＨ］、ＧＰ００４−４（１０２ｍｇ、２４％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ：Ｃ_６５Ｈ_１０９Ｎ_７Ｏ_２７についての計算値；１４２０．５９；実測値：１４２０．７［Ｍ＋Ｈ］^＋。純度は、分析用ＲＰ−ＨＰＬＣにより９７．８％であった。

略語：
Ａｃ アセチル
Ａｃ４−β−Ｇｌｃ ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド
Ａｃ４−β−Ｇａｌ ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド
Ａｃ７−β−Ｍａｌ ２，２’，３，３’，４’，６，６’−ヘプタ−Ｏ−β−Ｄ−マルトピラノシド
Ｃｅｌ Ｄ−セロビオース
Ｃｌ 塩素
Ｇａｌ Ｄ−ガラクトース
ＧａｌＮＡｃ Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミン
Ｃｌｃ Ｄ−グルコース
ＧｌｃＮＡｃ Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＩＰＥＡ Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＦ ジメチルホルムアミド
Ｆｕｃ Ｌ−フコース
ＨＢＴＵ Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−Ｏ−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）ウロニウムヘキサフルオロホスフェート
Ｌａｃ Ｄ−ラクトース
Ｍａｌ Ｄ−マルトース
Ｍａｎ Ｄ−マンノース
ＭｅＯＨ メタノール
Ｐａｌ パルミトイル
Ｒｈａ Ｌ−ラムノース
ｔ−Ｂｕ ｔｅｒｔ−ブチル
ＴＦＡ トリフルオロ酢酸
Ｘｙｌ Ｄ−キシロース

質量分析
ＬＣ−ＭＳシステム（ＨＰＬＣ：Ｗａｔｅｒｓ Ａｌｌｉａｎｃｅ ２７９５）上に、水に溶解したペプチド試料（２〜５μｌ）を注入することによりペプチドの質量スペクトルを得た。移動相Ａ及びＢのそれぞれについての移動相は、水：ギ酸（１００：０．１）及びアセトニトリル：ギ酸（１００：０．１）からなっていた。流量は、５０：５０（移動相Ａ：移動相Ｂ）の組成物を用いて０．２ｍＬ／分に設定した。２．０分の実行時間にわたって正と負の両方のモードで１秒間に１００〜１８００ａｍｕをスキャンするように質量分析計（質量スペクトル：Ｗａｔｅｒｓ Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＺＱ）を設定した。質量スペクトルは、ＴＩＣクロマトグラムから抽出した。

ＥＣＭ ＥＬＩＳＡアッセイ
ＫＭＳＴ−６細胞（財団法人ヒューマンサイエンス振興財団、ＪＣＲＢ０４３３）を、１２ウェル組織培養処理プレート（Ｆａｌｃｏｎ社、３５３０４３）に完全培地中７，０００細胞／ｍｌで播種した。完全培地は以下のものからなる：ＭＥＭ／ＥＢＳＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ社、ＳＨ３００２４．０１）、１０％熱不活性化ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ社、１００８２−１４７）、１％ Ｌ−グルタミン（Ｈｙｃｌｏｎｅ社、ＳＨ３００３１．０１）、１％ ヌクレオシド（８００ｍｇ／Ｌ アデノシン、８５０ｍｇ／Ｌ グアニジン、７３０ｍｇ／Ｌ シチジン、７３０ｍｇ／Ｌ ウリジン及び２４０ｍｇ／Ｌ チミジン）、１％ ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｈｙｃｌｏｎｅ社、ＳＶ３００１０）、１％ ピルビン酸ナトリウム（Ｈｙｃｌｏｎｅ社、ＳＨ３０２３９．０１）、１％ 非必須アミノ酸（Ｈｙｃｌｏｎｅ社、ＳＨ３０２３８．０１）及び０．０４％ ゲンタマイシン（Ｇｉｂｃｏ社、１５７１０−０６４）。細胞を、処理前に２日間増殖させた。培地を吸引し、細胞を１×ＰＢＳ（Ｆｉｓｈｅｒ社、ＳＨ３０２５６．０１）で洗浄し、５０μｇ／ｍＬのアスコルビン酸ナトリウム（Ｓｉｇｍａ社、Ａ４０３４）及び８０μｇ／ｍＬのβ−アミノプロピオンフマル酸塩（Ｓｉｇｍａ社、Ａ３１３４）を補充した無血清培地中５μΜ（１ｍＬ／ウェル）グリコペプチド、参照物質（Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ、ＣＰＣ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、８２２１９７）、及び対照（ＤＭＳＯ、Ｆｉｓｈｅｒ社、ＢＰ２３１−１００）で処理した。処理した細胞を、４８時間及び７２時間、３７℃、５％ＣＯ_２でインキュベートした。各時点で、各処理からの培地を収集し、４℃で１５分間、１５００ＲＰＭで遠心分離した。上清を収集し、細胞外マトリックスタンパク質の定量化のために−８０℃で保存した。以下のキットを、ＥＣＭタンパク質：フィブロネクチン（Ｔａｋａｒａ、ＭＫ１１５）及びエラスチン（Ｕｓｃｎライフサイエンス社、Ｅ９１３３７Ｈｕ）の定量化のために使用した。細胞を回収し、２５０μＬの溶解バッファー（２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（Ｓｉｇｍａ社、Ｔ１５０３）、１３７ｍＭの ＮａＣｌ（Ｓｉｇｍａ社、Ｓ９８８８）、２ｍＭ ＥＤＴＡ（Ｆｉｓｈｅｒ社、ＢＰ１１８）、１％ ＩＧＥＰＡＬ（Ｓｉｇｍａ社、Ｉ８８９６）、１０％グリセロール（Ｓｉｇｍａ社、Ｇ５５１６）、１００μＭ ＰＭＳＦ（Ｆｉｓｈｅｒ社、３６９７８）及び１０μｇ／ｍＬ ロイペプチン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社、Ｌ２８８４））で溶解した。それらを冷容器に入れ、３０分間、プレートシェーカー（Ｌａｂ−Ｌｉｎｅ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、３５９５）上に置いた。溶解物を４℃で５分間、１０，０００ｇで遠心分離した。上清を収集し、タンパク質定量（ＢｉｏＲａｄ、５００−０１１２）のために使用した。

細胞の形態
ＫＭＳＴ−６細胞（財団法人ヒューマンサイエンス振興財団、ＪＣＲＢ０４３３）を、１２ウェル組織培養処理プレート（Ｆａｌｃｏｎ社、３５３０４３）に完全培地中７，０００細胞／ｍｌで播種した。完全培地は以下のものからなる：ＭＥＭ／ＥＢＳＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ社、ＳＨ３００２４．０１）、１０％ 熱不活性化ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ社、１００８２−１４７）、１％ Ｌ−グルタミン（Ｈｙｃｌｏｎｅ社、ＳＨ３００３１．０１）、１％ヌクレオシド（８００ｍｇ／Ｌ アデノシン、８５０ｍｇ／Ｌ グアニジン、７３０ｍｇ／Ｌ シチジン、７３０ｍｇ／Ｌ ウリジン及び２４０ｍｇ／Ｌ チミジン）、１％ ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｈｙｃｌｏｎｅ社、ＳＶ３００１０）、１％ ピルビン酸ナトリウム（Ｈｙｃｌｏｎｅ社、ＳＨ３０２３９．０１）、１％ 非必須アミノ酸（Ｈｙｃｌｏｎｅ社、ＳＨ３０２３８．０１）及び０．０４％ゲンタマイシン（Ｇｉｂｃｏ社、１５７１０−０６４）。細胞を、処理前に２日間増殖させた。培地を吸引し、細胞を１×ＰＢＳ（Ｆｉｓｈｅｒ社、ＳＨ３０２５６．０１）で洗浄し、５０μｇ／ｍＬのアスコルビン酸ナトリウム（Ｓｉｇｍａ社、Ａ４０３４）及び８０μｇ／ｍＬのβ−アミノプロピオンフマル酸塩（Ｓｉｇｍａ社、Ａ３１３４）を補充した無血清培地中５μΜ グリコペプチド（ＧＰ００１−１、ＧＰ００２−３、ＧＰ００２−７、ＧＰ００３−９、ＧＰ００４−３及びＧＰ００４−４）、参照物質（Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ、ＣＰＣ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、８２２１９７）、及び対照（ＤＭＳＯ、Ｆｉｓｈｅｒ社、ＢＰ２３１−１００）で処理した。処理した細胞を４８時間及び７２時間、３７℃、５％ＣＯ_２でインキュベートした。各時点で、画像をオリンパス社製Ｏｐｔｉ−Ｔｅｃｈ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ（１０倍の倍率でのＬｕｍｅｎｅｒａ、Ｉｎｆｉｎｉｔｙ ２カメラ）で撮影し、細胞のサイズ及び形態の変化を記録した。

細胞生存率ＭＴＴアッセイ
ＫＭＳＴ−６細胞（財団法人ヒューマンサイエンス振興財団、ＪＣＲＢ０４３３）を、完全培地中７，０００細胞／ｍＬで播種した。完全培地は以下のものからなる：ＭＥＭ／ＥＢＳＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ社、ＳＨ３００２４．０１）、１０％ 熱不活性化ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ社、１００８２−１４７）、１％ Ｌ−グルタミン（Ｈｙｃｌｏｎｅ社、ＳＨ３００３１．０１）、１％ヌクレオシド（８００ｍｇ／Ｌ アデノシン、８５０ｍｇ／Ｌ グアニジン、７３０ｍｇ／Ｌ シチジン、７３０ｍｇ／Ｌ ウリジン及び２４０ｍｇ／Ｌ チミジン）、１％ ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｈｙｃｌｏｎｅ社、ＳＶ３００１０）、１％ ピルビン酸ナトリウム（Ｈｙｃｌｏｎｅ社、ＳＨ３０２３９．０１）、１％ 非必須アミノ酸（Ｈｙｃｌｏｎｅ社、ＳＨ３０２３８．０１）及び０．０４％ゲンタマイシン（Ｇｉｂｃｏ社、１５７１０−０６４）。細胞を、処理前に２日間増殖させた。培地を吸引し、細胞を１×ＰＢＳ（Ｆｉｓｈｅｒ社、ＳＨ３０２５６．０１）で洗浄し、５０μｇ／ｍＬのアスコルビン酸ナトリウム（Ｓｉｇｍａ社、Ａ４０３４）及び８０μｇ／ｍＬのβ−アミノプロピオンフマル酸塩（Ｓｉｇｍａ社、Ａ３１３４）を補充した無血清培地中５μΜ グリコペプチド（ＧＰ００１−１、ＧＰ００２−３、ＧＰ００２−７、ＧＰ００３−９、ＧＰ００４−３及びＧＰ００４−４）、参照物質（Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ、ＣＰＣ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、８２２１９７）、及び対照（ＤＭＳＯ、Ｆｉｓｈｅｒ社、ＢＰ２３１−１００）で処理した。処理した細胞を４８時間及び７２時間、３７℃、５％ＣＯ_２でインキュベートした。各時点で、全てのウェルに色素溶液（Ｐｒｏｍｅｇａ社、Ｇ４１０２）を１５μＬ添加することによりＭＴＴアッセイを行った。細胞を２〜４時間インキュベートした。この間、生きている細胞は、色素溶液のＭＴＴテトラゾリウム成分をホルマザン生成物に変換する。その後、ホルマザン生成物を可溶化するために、可溶化／停止溶液（Ｐｒｏｍｅｇａ社、Ｇ４１０１）を培養ウェルに添加した。吸光度を５７０ｎｍでマイクロプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ社、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｍ２ｅ）を用いて測定した。発明者らは、対照と比較した場合に５０％未満である細胞生存率として毒性を定義した。

総コラーゲンアッセイ
ＫＭＳＴ−６細胞（財団法人ヒューマンサイエンス振興財団、ＪＣＲＢ０４３３）を、６０ｍｍ組織培養処理プレートに完全培地中７，０００細胞／ｍＬで播種した。完全培地は以下のものからなっていた：ＭＥＭ／ＥＢＳＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ社、ＳＨ３００２４．０１）、１０％ 熱不活性化ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ社、１００８２−１４７）、１％ Ｌ−グルタミン（Ｈｙｃｌｏｎｅ社、ＳＨ３００３１．０１）、１％ヌクレオシド（８００ｍｇ／Ｌ アデノシン、８５０ｍｇ／Ｌ グアニジン、７３０ｍｇ／Ｌ シチジン、７３０ｍｇ／Ｌ ウリジン及び２４０ｍｇ／Ｌ チミジン）、１％ ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｈｙｃｌｏｎｅ社、ＳＶ３００１０）、１％ ピルビン酸ナトリウム（Ｈｙｃｌｏｎｅ社、ＳＨ３０２３９．０１）、１％ 非必須アミノ酸（Ｈｙｃｌｏｎｅ社、ＳＨ３０２３８．０１）及び０．０４％ゲンタマイシン（Ｇｉｂｃｏ社、１５７１０−０６４）。細胞を、処理前に２日間増殖させた。細胞を１×ＰＢＳ（Ｆｉｓｈｅｒ社、ＳＨ３０２５６．０１）で洗浄し、５０μｇ／ｍＬのアスコルビン酸ナトリウム（Ｓｉｇｍａ社、Ａ４０３４）及び８０μｇ／ｍＬのβ−アミノプロピオンフマル酸塩（Ｓｉｇｍａ社、Ａ３１３４）を補充した無血清培地中５μΜ グリコペプチド（ＧＰ００３−９、ＧＰ００４−３、ＧＰ００４−４）、参照物質（Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ、ＣＰＣ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、８２２１９７）、及び対照（ＤＭＳＯ、Ｆｉｓｈｅｒ社、ＢＰ２３１−１００）で処理した。処理した細胞を４８時間及び７２時間、３７℃、５％ＣＯ_２でインキュベートした。各時点で、各処理からの培地を収集し、４℃で１５分間、１５００ＲＰＭで遠心分離した。上清を収集し、細胞外マトリックスタンパク質の定量化のために−８０℃で保存した。以下のキット：シリウスレッドコラーゲン検出キット（Ｃｈｏｎｄｒｅｘ社、９０６２）を、総コラーゲンの定量化のために使用した。細胞を回収し、溶解緩衝液（２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（Ｓｉｇｍａ社、Ｔ１５０３）、１３７ｍＭ ＮａＣｌ（Ｓｉｇｍａ社、Ｓ９８８８）、２ｍＭ ＥＤＴＡ（Ｆｉｓｈｅｒ社、ＢＰ１１８）、１％ ＩＧＥＰＡＬ（Ｓｉｇｍａ社、Ｉ８８９６）、１０％グリセロール（Ｓｉｇｍａ社、Ｇ５５１６）、１００μΜ ＰＭＳＦ（Ｆｉｓｈｅｒ社、３６９７８）及び１０μｇ／ｍＬ ロイペプチン（Ｓｉｇｍａ社、Ｌ２８８４））で溶解した。それらを冷容器に入れ、３０分間オービタルシェーカー（ＶＷＲ、８９０３２−０８８）上に置いた。細胞溶解物を４℃で５分間、１０，０００ｇで遠心分離した。上清を収集し、タンパク質定量（ＢｉｏＲａｄ、５００−０１１２）のために使用した。

ヒト３Ｄインビトロ皮膚モデル
ＭａｔＴｅｋ社製 ＥｐｉＤｅｒｍＦＴ（商標）ヒト３Ｄインビトロ皮膚モデルをＭａｔＴｅｋ社（米国マサチューセッツ州アッシュランド）によって生成した。３Ｄ皮膚モデルは、それぞれ新生児包皮組織及び成人の皮膚に由来する正常ヒト表皮ケラチノサイト（ＮＨＥＫ）及び正常ヒト皮膚線維芽細胞（ＮＨＤＦ）から構成されている。組織診断により、８〜１２細胞層に加えて、基底層、有棘層及び顆粒層を含む角質層が明らかになった。組織は、細孔径０．４μｍ、直径１．２ｃｍ及び表面積１．０ｃｍ^２のＣｏｓｔａｒ社製Ｓｎａｐｗｅｌｌ（商標）単一ウェル組織培養プレートインサート中の気液界面で成長させた。組織の維持のために、ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）、上皮成長因子、インスリン、ヒドロコルチゾン、５μｇ／ｍＬ ゲンタマイシン、０．２μｇ／ｍｌのアムホテリシンＢ及びフェノールレッドを含む無血清ＥＦＴ−４００−ＡＳＹ培地を用いた。

エラスチン評価
組織を１％ＰＢＳで２回すすぎ、５μΜ ＧＰ００３−９、参照物質（ＰａＬ−ＫＴＴＫＳ、ＣＰＣ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、８２２１９７）、及び対照（ＤＭＳＯ、Ｆｉｓｈｅｒ社、ＢＰ２３１−１００）で処理した。処理後７２時間の時点で、上清を分離し、エラスチンＥＬＩＳＡ分析（Ｃｅｄａｒｌａｎｅ社、ＳＥ９１３３Ｈｕ）のために−８０℃で維持した。１：５０試料希釈を用いて、製造業者のプロトコルに従ってＥＬＩＳＡを行った。

総タンパク質定量のために、組織を１％ＰＢＳですすぎ、冷組織タンパク質抽出試薬（Ｐｉｅｒｃｅ社、７８５１０）を添加した。組織を、手持ちペレット乳棒を用いて約１分間均質化した。全ての試料を４℃で１０分間、１６０００ｇで遠心分離した。遠心分離後、上清を収集し、ＢＣＡタンパク質アッセイキット（Ｐｉｅｒｃｅ社、２３２２７）を用いてタンパク質濃度を決定した。

組織学的処理
組織を１％ＰＢＳで２回すすぎ、５μΜ ＧＰ００３−９、参照物質（ＰａＬ−ＫＴＴＫＳ、ＣＰＣ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、８２２１９７）、及び対照（ＤＭＳＯ、Ｆｉｓｈｅｒ社、ＢＰ２３１−１００）で処理した。処理後７２時間の時点で、組織を一晩、１０％中性緩衝ホルマリンで固定し、翌日に１％ＰＢＳに移した。その後、組織は（断面を提供するために）二分し、段階的エタノールシリーズで脱水し、パラフィンに包埋した。５ミクロン切片を調製し、組織学的観察に使用するためのヘマトキシリン＆エオシンで染色した。

統計分析
一方向Ａｎｏｖａ統計手法を用いて、３つ以上の試料の平均を比較した。ボンフェローニ多重比較検定により、対照又は参照物質でのグリコペプチド処理間の差の比較が可能になった。ｐ＜０．０５にｐ値を設定することによって統計的有意性を導いた（データ分析は、基本的な統計的検定、データ編成及び科学グラフの性能を有効にするグラフパッドプリズム６、ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製ソフトウェアを用いて取得した）。

以下の実施例で、本明細書に記載の特定の組成物を作製し、かつ本明細書に記載の方法を実行するいくつかの代表的な方法について説明する。これらの実施例は、例示の目的のみのためであり、本明細書に記載の組成物及び方法の範囲を限定することを意味するものではないことを理解されたい。

実施例１
改変ペプチドの４つのバッチを作製し、前述のように、化学的同一性をＨＰＬＣ及び質量分析によって確認した。合計で４４種の異なるグリコペプチドを作製し、表１Ａ及び表１Ｂに示す。

細胞外マトリックスタンパク質の分泌に対する効果を決定するために、個々のグリコペプチド５μΜを、ヒト皮膚線維芽細胞（ＫＭＳＴ−６）と共にインキュベートした。対照試料の細胞をＤＭＳＯ（Ｆｉｓｈｅｒ社、ＢＰ２３１−１００）で処理した。前述のように、上清を（２つの時点、処理後４８時間及び７２時間）処理細胞から収集し、ＥＬＩＳＡキット（フィブロネクチン（Ｔａｋａｒａ社、ＭＫ１１５）、エラスチン（Ｕｓｃｎライフサイエンス社、Ｅ９１３３７Ｈｕ）を用いて、その後の細胞外マトリックスタンパク質の定量のために−８０℃で保存した。総細胞タンパク質の決定のために、処理細胞を収集し、溶解した。溶解物を遠心分離し、上清を収集した後、タンパク質定量（ＢｉｏＲａｄ社、５００−０１１２）のために使用した。ＥＬＩＳＡプレートを、４５０ｎｍの吸光度でプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ社）上で読み取り、ＳｏｆｔＭａｘ Ｐｒｏソフトウェアを用いて、生成した４パラメータフィット標準曲線から導き出される目的のタンパク質のμｇ／ｍｌ値を計算した。分泌タンパク質のそれぞれのμｇ／ｍｌを１ウェル当たりの総タンパク質に正規化した。このデータを、少なくとも３つの独立した実験からの正規化値を平均化し、１００％に設定した処理対照と比較した％として表すことによって分析した（表２〜５）。一方向ＡＮＯＶＡ（Ｐ＜０．０５）を用いて統計的有意性を調べ、「^＊」は、対照と比較した場合の統計的有意性を表し、「＃」は参照物質と比較した場合の統計的有意性を表す。

以下の表は、ヒト皮膚線維芽細胞の処理後のエラスチン分泌（表２及び表３、それぞれ４８時間及び７２時間の時点）、並びにフィブロネクチン分泌（表４及び表５、それぞれ４８時間及び７２時間の時点）に対する全４４種のグリコペプチドの有効性を示す。これらの結果のグラフを表１Ａ及び表１Ｂ（それぞれ４８時間及び７２時間の時点でのエラスチン分泌）並びに表２Ａ及び表２Ｂ（それぞれ４８時間及び７２時間の時点でのフィブロネクチン分泌）に示す。これらの結果から、グリコシル化ペプチド処理した線維芽細胞は、対照処理した線維芽細胞を上回るＥＣＭ分泌（エラスチン及びフィブロネクチン）の増加を示したことがわかる。

この最初のスクリーンから、６種のグリコペプチド：ＧＰ００１−１（Ｐａｌ−ＫＴ（Ａｃ_４−Ｇｌｃ）ＴＫＳ−ＯＨ）、ＧＰ００２−３（（Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ（Ａｃ_４−Ｇｌｃ）−ＯＨ）、ＧＰ００２−７（Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ（Ａｃ_４−Ｇａｌ）−ＯＨ）、ＧＰ００３−９（Ｐａｌ−ＫＴ（Ａｃ_７−β−Ｍａｌ）ＴＫＳ−ＯＨ）、ＧＰ００４−３（Ｐａｌ−ＫＴＴ（Ａｃ_７−β−Ｍａｌ）ＫＳ−ＯＨ）及びＧＰ００４−４（Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ（Ａｃ_７−β−Ｍａｌ）は、有効性（ＥＣＭ分泌）の増加を示し、さらなる開発のために特定した。

ＧＰ００１−１（Ｐａｌ−ＫＴ（Ａｃ_４−β−Ｇｌｃ）ＴＫＳ−ＯＨ）−物質：グリコペプチド（β−ＧｌｃペプチドＰｅｒＡｃ）；分子量：１１３２；外観：白色の凍結乾燥固体；純度（ＨＰＬＣ）＞９５％（図３Ａ）、質量分析法（ＥＳＩ ＰＯＳ）：確認［Ｍ＋Ｈ］^＋＝１１３２．５及び［Ｍ＋２Ｈ］^＋＝５６７（図３Ｂ）。

ＧＰ００２−３（（Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ（Ａｃ_４−β−Ｇｌｃ）−ＯＨ）−物質：グリコペプチド（β−ＧｌｃペプチドＰｅｒＡｃ）；分子量１１３２；外観：白色の凍結乾燥固体；純度（ＨＰＬＣ）＞９９．６％（図４Ａ）；質量分析（ＥＳＩ ＰＯＳ）：確認［Ｍ＋Ｈ］＝１１３２．５（図４Ｂ）。

ＧＰ００２−７（Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ（Ａｃ_４−β−ＧＡＬ）−ＯＨ）−物質：グリコペプチド（β−ＧｌｃペプチドＰｅｒＡｃ）；分子量：１１３２；外観：白色の凍結乾燥固体；純度（ＨＰＬＣ）＞１００％（図５Ａ）。質量分析（ＥＳＩ ＰＯＳ）：確認［Ｍ＋Ｈ］＝１１３２．４（図５Ｂ）。

ＧＰ００３−９（Ｐａｌ−ＫＴ（Ａｃ_７−β−Ｍａｌ）ＴＫＳ−ＯＨ）−物質：グリコペプチド（β−マルトースペプチドＰｅｒＡｃ）；分子量：１４２０；外観：白色の凍結乾燥固体；純度（ＨＰＬＣ）＞９７％（図６Ａ）。質量分析（ＥＳＩ ＰＯＳ）：確認［Ｍ＋Ｈ］＝１４２０．７（図６Ｂ）。

ＧＰ００４−３（Ｐａｌ−ＫＴＴ（Ａｃ_７−β−Ｍａｌ）ＫＳ−ＯＨ）−物質：グリコペプチド（β−マルトースペプチドＰｅｒＡｃ）；分子量：１４２０；外観：白色の凍結乾燥固体；純度（ＨＰＬＣ）＞９５％（図７Ａ）。質量分析（ＥＳＩ ＰＯＳ）：確認［Ｍ＋Ｈ］＝１４２０．８（図７Ｂ）。

ＧＰ００４−４（Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ（Ａｃ_７−β−Ｍａｌ）−ＯＨ）−物質：グリコペプチド（β−マルトースペプチドＰｅｒＡｃ）；分子量：１４２０；外観：白色の凍結乾燥固体；純度（ＨＰＬＣ）＞９５％（図８Ａ）；質量分析（ＥＳＩ ＰＯＳ）：確認［Ｍ＋Ｈ］＝１４２０．７（図８Ｂ）。

これらの６種のグリコシル化ペンタペプチドを、参照物質ペンタペプチドＰａｌ−ＫＫＴＫＳと比較して、インビトロ毒性試験（細胞の生存率及び形態）に供した。

細胞形態及びサイズに対する影響を決定するために、前述のように、５μΜの６種の代表的なグリコペプチドをヒト皮膚線維芽細胞（ＫＭＳＴ−６）に適用した。参照ペンタペプチドはＰａｌ−ＫＴＴＫＳ（ＣＰＣ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、８２２１９７）であり、対照試料細胞をＤＭＳＯ（Ｆｉｓｈｅｒ社、ＢＰ２３１−１００）で処理した。形態学的画像は、対照及びグリコペプチドで処理した細胞と比較して、参照物質が目に見えて細胞生存率を妨害し、細胞のコンフルエンスの減少があったことを示した。対照的に、位相コントラスト形態を通して観察されるように、試験した６種のグリコペプチドのどれも、いかなる毒性の形態も示さなかった（図９）。重要なことには、ＭＴＴアッセイによって測定されるとおり、５μΜ濃度で試験した全てのグリコペプチドの９０％がいかなる毒性の形態も示さなかった（データ示さず）。

毒性の尺度として細胞生存率に対する影響を決定するために、前述したように、５μΜの６種の代表的なグリコペプチドをヒト皮膚線維芽細胞（ＫＭＳＴ−６）に適用した。参照ペンタペプチドはＰａｌ−ＫＴＴＫＳ（ＣＰＣ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、８２２１９７）であり、対照試料の細胞をＤＭＳＯ（Ｆｉｓｈｅｒ社、ＢＰ２３１−１００）で処理した。前述したように、処理細胞を、４８時間（図１０Ａ）及び７２時間（図１０Ｂ）、３７℃、５％ＣＯ_２でインキュベートした。各時点で、全てのウェルに色素溶液（Ｐｒｏｍｅｇａ社、Ｇ４１０２）を１５μＬ添加することによってＭＴＴアッセイを行った。生細胞が色素溶液のＭＴＴテトラゾリウム成分をホルマザン生成物に変換する間、細胞を２〜４時間インキュベートした。その後、ホルマザン生成物を可溶化するために、可溶化／停止溶液（Ｐｒｏｍｅｇａ社、Ｇ４１０１）を培養ウェルに添加した。吸光度を５７０ｎｍでマイクロプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ社、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｍ２ｅ）を用いて測定した。３つ以上の独立した実験を行い、一方向ＡＮＯＶＡ（ｐ＜０．０５）を用いて統計的有意性を決定した。毒性は、対照と比較した場合、細胞生存率は５０％未満であると定義した。試験した６種のグリコペプチドのうちの１種のみが、いずれかの時点での細胞生存率に対する効果を示した（図１０Ａ及び１０Ｂ）。対照的に、非グリコシル化参照ペンタペプチドは、対照と比較して４８時間及び７２時間の時点で細胞生存率の有意な減少を示した（図１０Ｂ）。重要なことには、ＭＴＴアッセイによって測定されるとおり、５μΜ濃度で試験した全グリコペプチドの９０％がいかなる毒性の形態も示さなかった（データ示さず）。

グリコペプチドの毒性プロフィールをさらに特徴付け、調べるために、試験グリコペプチドＧＰ００３−９、ＧＰ００４−３及びＧＰ００４−４について追加実験を行った（データ示さず）。ヒト皮膚線維芽細胞（ＫＭＳＴ−６）を、４８時間及び７２時間の時点で５μΜのグリコペプチド、参照物質（Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ、ＣＰＣ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、８２２１９７）及び対照（ＤＭＳＯ、Ｆｉｓｈｅｒ社、ＢＰ２３１−１００）で処理した。以下の毒性アッセイを行った：１）細胞代謝活性の測定のための細胞生存率（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）水性一溶液（ＭＴＳ）比色アッセイ、Ｐｒｏｍｅｇａ社、Ｇ３５８０）；２）全細胞集団あたりの生細胞の測定のためのＬＩＶＥ／ＤＥＡＤ（登録商標）生存率／細胞毒性キット（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ社、、Ｌ−３２２４）；３）ａ）総生細胞数を得るための細胞数及びｂ）インタクトなＤＮＡを有する細胞を定量化するためのＤＮＡ含量（ＰｕｒｅＬｉｎｋ（登録商標）ゲノムＤＮＡミニキット、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社、Ｋ１８２００２）を測定することによる細胞増殖；最後に４）細胞死を受けている細胞の測定のためのアポトーシス／壊死（アネキシンＶ Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）４８８＆ヨウ化プロピジウム、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ社、Ｖ１３２４１を有する死細胞アポトーシスキット）。実行した全ての追加実験において、追加のインビトロ毒性試験に供した３種のグリコペプチドでは毒性は観察されなかった。

細胞外マトリックスタンパク質分泌に対する影響を確認するために、ヒト皮膚線維芽細胞（ＫＭＳＴ−６）を５μΜのグリコペプチド［ＧＰ００１−１（Ｐａｌ−ＫＴ（Ａｃ_４−Ｇｌｃ）ＴＫＳ−ＯＨ）、ＧＰ００２−３（（Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ（Ａｃ_４−Ｇｌｃ）−ＯＨ）、ＧＰ００２−７（Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ（Ａｃ_４−Ｇａｌ）−ＯＨ）、ＧＰ００３−９（Ｐａｌ−ＫＴ（Ａｃ_７−β−Ｍａｌ）ＴＫＳ−ＯＨ）、ＧＰ００４−３（Ｐａｌ−ＫＴＴ（Ａｃ_７−β−Ｍａｌ）ＫＳ−ＯＨ）及びＧＰ００４−４（Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ（Ａｃ_７−β−Ｍａｌ）−ＯＨ）］、参照物質（Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ、ＣＰＣ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、８２２１９７）、又はビヒクル対照（ＤＭＳＯ、Ｆｉｓｈｅｒ社、ＢＰ２３１−１００）で７２時間処理した。３回以上の独立した実験を行った。一方向ＡＮＯＶＡ（Ｐ＜０．０５）を用いて統計的有意性を調べ、「^＊」は、対照と比較した場合の統計的有意性を表し、「＃」は参照物質と比較した場合の統計的有意性を表す。

ＧＰ００１−１、ＧＰ００２−３、ＧＰ００２−７、ＧＰ００３−９、ＧＰ００４−３及びＧＰ００４−４の全ては、エラスチン分泌（表６及び図１１Ａ）及びフィブロネクチン分泌（表６及び図１１Ｂ）において対照と比較して高い生物活性を誘導した。しかし、グリコペプチドＧＰ００２−３（１８９％、ｐ＜０．０００１）、ＧＰ００３−９（１５１％、Ｐ＜０．０００１）及びＧＰ００４−３（２５２％、Ｐ＜０．０００１）は、参照ペプチドと比較してエラスチン分泌を有意に増加させたが、ＧＰ００２−３（２２２％、Ｐ＜０．０００１）、ＧＰ００２−７（１０７％、Ｐ＜０．０４）、ＧＰ００３−９（１８４％、Ｐ＜０．０００１）及びＧＰ００４−３（２８５％、Ｐ＜０．０００１）は、対照と比較してエラスチン分泌を有意に増加させた。さらに、ＧＰ００４−３（５０％、Ｐ＜０．０２）及びＧＰ００４−４（６５％、Ｐ＜０．０００７）は、参照物質と比較してフィブロネクチン分泌を有意に増加させたが、ＧＰ００２−３（３５％、Ｐ＜０．０１）、ＧＰ００３−９（４０％、Ｐ＜０．０００４）、ＧＰ００４−３（６８％、Ｐ＜０．０００３）及びＧＰ００４−４（８３％、Ｐ＜０．０００１）は、対照と比較してフィブロネクチン分泌を有意に増加させた。最後に、ＧＰ００３−９、ＧＰ００４−３及びＧＰ００４−４は、総コラーゲンについて試験した唯一のグリコペプチドであり、結果は、これら全てが対照と比較してそれぞれ２５％（Ｐ＜０．００４）、３１％（Ｐ＜０．０００８）及び２４％（Ｐ＜０．００５）総コラーゲン分泌を有意に増加させ、ＧＰ００４−３（２１％、Ｐ＜０．０１）が参照ペプチドと比較して総コラーゲン分泌を有意に増加させた（表６及び図１２）ことを示した。

（正常ヒト表皮ケラチノサイト及び正常ヒト皮膚線維芽細胞で構成される）３Ｄヒトインビトロ皮膚モデルであるＭａｔＴｅｋ社製ＥｐｉＤｅｒｍＦＴ（商標）を用いて、ヒトの皮膚上の代表的なグリコシル化ペプチド（ＧＰ００３−９）の影響をさらに調べた。組織を、前述したように、５μΜのＧＰ００３−９、参照物質（Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ、ＣＰＣ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、８２２１９７）、又はビヒクル対照（ＤＭＳＯ、Ｆｉｓｈｅｒ社、ＢＰ２３１−１００）で処理した。処理後７２時間の時点で、上清を収集し、エラスチン分泌について分析した。図１３は、ＧＰ００３−９が、３Ｄヒト皮膚モデルにおいて非グリコシル化参照ペプチド又は対照と比較してエラスチン分泌を約１．５倍増加させたことを示している。あるいは、５μΜのＧＰ００３−９、参照物質（Ｐａｌ−ＫＴＴＫＳ、ＣＰＣ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、８２２１９７）、又はビヒクル対照（ＤＭＳＯ、Ｆｉｓｈｅｒ社、ＢＰ２３１−１００）で処理した組織を、組織学的評価のためにパラフィン包埋して、切片を作製し、その後、ヘマトキシリン＆エオシンで染色した。図１４は、ＧＰ００３−９が３Ｄヒト皮膚モデルの組織学に対して有害な影響を与えなかったことを示している。

上記の実施例は、例示のみを意図している。添付の特許請求の範囲によってのみ定義される範囲から逸脱することなく、当業者なら特定の実施例に対して変更、改変及び変形を行うことができる。

Claims (26)

1. 配列：パルミトイル−Ｘ１−Ｌｙｓ−Ｘ２−Ｘ３−Ｌｙｓ−Ｘ４−ＯＨを有する５個又は６個のアミノ酸のグリコシル化オリゴペプチドであって、式中：
   Ｘ１は、存在しないか、グリコシル化側鎖を有するＳｅｒ、又は、グリコシル化側鎖を有するＡｓｎであり；
   Ｘ２は、Ｔｈｒ、グリコシル化側鎖を有するＴｈｒ、グリコシル化側鎖を有するＡｓｎ、又はグリコシル化側鎖を有するＳｅｒであり；
   Ｘ３は、Ｔｈｒ又はグリコシル化側鎖を有するＴｈｒであり；
   Ｘ４は、Ｓｅｒ又はグリコシル化側鎖を有するＳｅｒであり、
   Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３及びＸ４のうちの少なくとも１つは、グリコシル化側鎖を有するアミノ酸であり、
   それぞれのグリコシル化側鎖は、独立して、グルコース、Ｎ−アセチルグルコサミン、ガラクトース、Ｎ−アセチルガラクトサミン、マンノース、マルトース、ラクトース、ラムノース、セロビオース、キシロース、及びフコースからなる群から選択される炭水化物でグリコシル化されており、
   炭水化物のそれぞれのヒドロキシル基は、独立して、ＯＨであるか、又はアセチル化されているグリコシル化オリゴペプチド。
2. 前記炭水化物のヒドロキシル基が全てアセチル化されている、請求項１に記載のグリコシル化オリゴペプチド。
3. 前記炭水化物のヒドロキシル基が全てアセチル化されていない、請求項１に記載のグリコシル化オリゴペプチド。
4. Ｘ１が存在しない、請求項１〜３のいずれか一項に記載のグリコシル化オリゴペプチド。
5. 前記Ｘ２がグリコシル化側鎖を有するＴｈｒである、請求項１〜４のいずれか一項に記載のグリコシル化オリゴペプチド。
6. 前記グリコシル化側鎖がグルコース、マンノース又はマルトースでグリコシル化されている、請求項５に記載のグリコシル化オリゴペプチド。
7. Ｘ１、Ｘ３及びＸ４のアミノ酸がグリコシル化されていない、請求項５又は６に記載のグリコシル化オリゴペプチド。
8. Ｘ４がグリコシル化側鎖を有するＳｅｒである、請求項１〜４のいずれか一項に記載のグリコシル化オリゴペプチド。
9. 前記グリコシル化側鎖が、グルコース、ガラクトース又はマルトースでグリコシル化されている、請求項８に記載のグリコシル化オリゴペプチド。
10. 前記Ｘ１、Ｘ２及びＸ３のアミノ酸がグリコシル化されていない、請求項８又は９に記載のグリコシル化オリゴペプチド。
11. 前記Ｘ３がグリコシル化側鎖を有するＴｈｒである、請求項１〜４のいずれか一項に記載のグリコシル化オリゴペプチド。
12. 前記Ｘ１、Ｘ２及びＸ４アミノ酸がグリコシル化されていない、請求項１１に記載のグリコシル化オリゴペプチド。
13. 配列：パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ^＊−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−ＯＨを有するグリコシル化オリゴペプチドであって、式中、Ｔｈｒ^＊が過アセチル化β−グルコースでグリコシル化されたトレオニンであるグリコシル化オリゴペプチド（配列番号４）。
14. 配列：パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ^＊−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−ＯＨを有するグリコシル化オリゴペプチドであって、式中、Ｔｈｒ^＊が過アセチル化α−マンノースでグリコシル化されたトレオニンであるグリコシル化オリゴペプチド（配列番号５）。
15. 配列：パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ^＊−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−ＯＨを有するグリコシル化オリゴペプチドであって、式中、Ｔｈｒ^＊が過アセチル化β−マルトースでグリコシル化されたトレオニンであるグリコシル化オリゴペプチド（配列番号６）。
16. 配列：パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ^＊−ＯＨを有するグリコシル化オリゴペプチドであって、式中、Ｓｅｒ^＊が過アセチル化β−ガラクトースでグリコシル化されたセリンであるグリコシル化オリゴペプチド（配列番号７）。
17. 配列：パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ^＊−ＯＨを有するグリコシル化オリゴペプチドであって、式中、Ｓｅｒ^＊が過アセチル化β−グルコースでグリコシル化されたセリンであるグリコシル化オリゴペプチド（配列番号８）。
18. 配列：パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ^＊−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−ＯＨを有するグリコシル化オリゴペプチドであって、式中、Ｔｈｒ^＊が過アセチル化β−マルトースでグリコシル化されたトレオニンであるグリコシル化オリゴペプチド（配列番号９）。
19. 配列：パルミトイル−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ^＊−ＯＨを有するグリコシル化オリゴペプチドであって、式中、Ｓｅｒ^＊が過アセチル化β−マルトースでグリコシル化されたセリンであるグリコシル化オリゴペプチド（配列番号１０）。
20. 配列番号１２〜４８のいずれか１つに記載の配列を有するグリコシル化オリゴペプチド。
21. 請求項１〜２０のいずれか一項に記載の少なくとも１つのグリコシル化オリゴペプチドを含む化粧品又は皮膚薬剤組成物。
22. 個体において細胞による細胞外マトリックスタンパク質の分泌を増加させる方法であって、前記個体に請求項２１に記載の組成物を局所投与することを含む方法。
23. 前記細胞外マトリックスタンパク質が、エラスチン、フィブロネクチン、又はコラーゲンである、請求２２に記載の方法。
24. 細胞による細胞外マトリックスタンパク質の分泌を増加させるための、請求項１〜２０のいずれか一項に記載のグリコシル化オリゴペプチドの使用。
25. 前記細胞外マトリックスタンパク質が、エラスチン、フィブロネクチン、又はコラーゲンである請求項２４に記載の使用。
26. スキンケア組成物であって：
    ａ）請求項１〜２０のいずれか一項に記載の、安全かつ有効な量のグリコシル化オリゴペプチド；
    ｂ）落屑活性物質、抗ニキビ活性物質、にきび薬、ビタミンＡ化合物、ビタミンＢ_３化合物、ビタミンＣ化合物、ビタミンＥ化合物、カロチノイド、レチノイド、ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチド、ペンタペプチド及びヘキサペプチド並びにこれらの誘導体、ヒドロキシ酸、ラジカル捕捉剤、キレーター、抗炎症剤、局所麻酔剤、日焼け活性物質、皮膚美白剤、日焼け防止剤、抗セルライト剤、フラボノイド、抗菌活性物質、皮膚治癒剤、抗真菌活性物質、ファルネソール、フィタントリオール、アラントイン、グルコサミン、ヒアルロン酸並びにこれらの混合物からなる群から選択される安全かつ有効な量の、少なくとも１種類の追加のスキンケア活性物質；
    ｃ）皮膚科学的に許容される担体
    を含むスキンケア組成物。
    
    

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