JP2017501158A - 嗜好性食品に対する衝動を減らすためのチラコイドの使用 - Google Patents

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Abstract

本発明は、嗜好性食品に対する衝動を減らすため、喫煙することの必要性を減らすため、および/またはアルコール飲料に対する衝動を減らすための単離チラコイドまたはその部分の使用に関する。おそらく、その衝動と必要性は、各種刺激の報酬値に影響を与えることにより減少する。【選択図】図1B

Description

本発明は、各種食品(特に、嗜好性食品)に対する衝動およびそのような食品を摂取することに結びつく報酬値に影響を与える組成物の分野に関する。さらに、本発明は、ニコチンに対する必要性およびそれに結びつく報酬値に影響を与える組成物に関する。
今日、全世界で10億人を超える成人が太りすぎ、つまり、体格指数(BMI)が25〜30kg/mであり、そして、3億人より多くが肥満であって、BMIが>30kg/mである。さらにまた、太りすぎと肥満は、高脂血症、アテローム性動脈硬化症、および心血管疾患ならびに2型糖尿病と強く関連する。
近年、西洋社会では、嗜好性食品(例、甘い食べ物、グリセミック指数が高く、しばしば脂肪が豊富な食品)がますます入手し易くなっている。このことは、過去数十年に渡り体重の増加が全世界的に観察されることに寄与している可能性がある。全世界的な肥満の流行は、過剰摂食の背後にあるメカニズムの理解と肥満および摂食障害の効率的な治療法の開発を促してきた。代謝必要性を超える摂食は、体重獲得における重要なイベントである。嗜好性食品(つまり、甘いおよび/または脂肪のある食べ物)は、報酬値を増加させることと食べることの楽しみを増加させることにより、それら食品を摂取することを強化する。高リスクの摂食エピソードとは、嗜好性食品(脂肪と糖分が豊富な食品のようなもの)を含むものである。太りすぎと肥満に苦しむ個人を手助けするため、満腹感シグナルを増強し、空腹感シグナルを減弱するやり方を見つけることが、従って、重要である。
さらにまた、ヒトの食品消費の割合の増加は、カロリーへの実際の必要性だけではなく、楽しみにより駆り立てられているように見える(非特許文献1)。認識されてきたのは、空腹感および摂食が、エネルギーまたは栄養分の不足と関係するフィードバック制御の対象となるだけではなく、食べることの楽しみ(快楽的空腹感)への期待からのものであることである。各種食料品は、互いに異なる快楽的評価を有している。嗜好性食品(特に、糖分)は、高い快楽的評価を有している、つまり、特に強い報酬への期待を提供する。さらに、快楽的空腹感(エネルギーの不足がなくとも楽しみを得るために摂食するという食欲)は、過剰摂食および摂食上の制御喪失と関連している(非特許文献2)。快楽的空腹感は、糖分と脂肪に富んでエネルギーが詰まった嗜好性食品(例、スナック、ペーストリー、デザート、焼き菓子、およびスイーツ)−典型的には間食に供される食品および特に女性に好まれる食品を好む(非特許文献3)。
従って、満腹感シグナルの増加や生体恒常性の空腹感シグナルの減少以外の因子も、肥満治療または予防に妥当である場合がある。太りすぎの被験者は、しばしば、嗜好性食品(特に、糖分(非特許文献4)と脂肪(非特許文献5))に対する衝動が増加している。
従って、肥満の効果的治療および予防には、好ましくは、嗜好性食品(特に、甘い食べ物)に対する衝動を抑える対策が含まれる。さらに、興味深いのは、快楽的空腹感およびそのような食品への欲求を減弱し、それにより、過剰摂食を減らし、そして、より健全な摂食行動を得るのを補助するということである。さらに、食品−報酬行動を制御するための対策は興味深く、それは、Dicksonらにより認識されている(非特許文献6)。しかしながら、今日、そのような対策は利用可能ではない。
Loweら、Physiology&Behavior,Vol.91(4),2007年,p.432-439 Wittら、International Journal of Eating Disorders,Vol.47(3),p.273-280,2014年 Drewnowski,A.(1997年)、Taste preferences and food intake.,Annual review of nutrition,17,237-253 Ettinger L,Duizer L,Caldwell T:Body fat,sweetness sensitivity,and preference:determining the relationship,Can J Diet Pract Res,2012年,73(1):45−48 Blundell JE,MacDiarmid JI:Fat as a risk factor for overconsumption:satiation,satiety,and patterns of eating,J Am Diet Assoc,1997年,97(7 Suppl):S63−69 J Neurosci,2012年,32(14):4812−4820
本発明は、当該技術分野における上記に同定された欠点の内少なくとも一つの(例、一又は複数の)ものを軽減し、緩和し、回避し、または排除することを求めている。
従って、ヒトにおける嗜好性食品に対する衝動を減らすための単離チラコイドまたはその部分の使用を、本発明の第一観点に従って提供する。
さらに、
−喫煙することの必要性を減らすため;
−ニコチンに対する必要性を減らすため;
−人々がニコチン製品を使用するのを止めようとすること、例えば喫煙を止めることを容易にするため;
−禁煙において;および/または
−ニコチン製品の使用量を減らすための、単離チラコイドまたはその部分の使用を、本発明の一つの観点に従って、提供する。
さらにまた、
−アルコール飲料に対する衝動を減らすため;
−アルコール飲料の消費を低下させるため;および/または
−アルコールの乱用を減らすための、単離チラコイドまたはその部分の使用を、本発明の一つの観点に従って、提供する。
単離チラコイドまたはその部分のそのような使用には、その効果を提供するために単離チラコイドまたはその部分を摂取することが含まれる。典型的には、その摂取により、GLP−1(グルカゴン様ペプチド1)の放出が増加し、それにより、脳の報酬中枢に影響を与える嗜好性食品、ニコチン、および/またはアルコールの報酬作用が減少する。
本発明のさらに有利な特徴を、従属請求項に定義する。また、本発明の有利な特徴を、本明細書中に開示される実施形態において詳述する。
本発明が可能とするこれら及び他の観点、特徴、ならびに利点は、本発明の実施形態の以下の記載から明白であり、そして明らかにされる。以下の添付する図面に言及する。
ヒトにおいてチラコイドを事前に投与するか又は投与しなかった場合の(A)空腹感への衝動を示すグラフである。 ヒトにおいてチラコイドを事前に投与するか又は投与しなかった場合の(B)甘い食べ物(キャンディ)への衝動を示すグラフである。 ヒトにおいてチラコイドを事前に投与するか又は投与しなかった場合の(C)デンプンも含む、塩分と脂肪のある食べ物(ポテトチップス)への衝動を示すグラフである。 ヒトにおいてチラコイドを事前に投与するか又は投与しなかった場合の(D)甘くて脂肪のある食べ物(チョコレート)への衝動を示すグラフである。 図2は、チラコイド入り又は無しの甘いアイテムを含む朝食時間中のグルカゴン様ペプチド1(GLP−1)の放出を示すグラフである。 図3A〜Cは、チラコイドを用いるか又は用いない食事介入中に体験する空腹感を示すグラフである。 図4A〜Cは、チラコイドを用いるか又は用いない食事介入中のチョコレートに対する衝動を示すグラフである。 図5A〜Cは、チラコイドを用いるか又は用いない食事介入中の炭水化物スナックに対する衝動を示すグラフである。 図6A〜Dは、チラコイドまたはプラセボを摂取後の空腹感及び満腹感を示すグラフである。 処置(チラコイド)条件およびプラセボ(コントロール)条件を比べた場合の、塩気のあるスナックへの欲求のVAS格付けを示すグラフである。 処置(チラコイド)条件およびプラセボ(コントロール)条件を比べた場合の、塩気のあるスナックへの欲求のVAS格付けを示すグラフである。 処置(チラコイド)条件およびプラセボ(コントロール)条件を比べた場合の、甘いスナックへの欲求のVAS格付けを示すグラフである。 処置(チラコイド)条件およびプラセボ(コントロール)条件を比べた場合の、甘いスナックへの欲求のVAS格付けを示すグラフである。 処置(チラコイド)条件およびプラセボ(コントロール)条件を比べた場合の、甘くて脂肪のあるスナックへの欲求のVAS格付けを示すグラフである。 処置(チラコイド)条件およびプラセボ(コントロール)条件を比べた場合の、甘くて脂肪のあるスナックへの欲求のVAS格付けを示すグラフである。 処置(チラコイド)条件およびプラセボ(コントロール)条件を比べた場合の、全てのスナックへの欲求を合わせたもののVAS格付けを示すグラフである。 処置(チラコイド)条件およびプラセボ(コントロール)条件を比べた場合の、全てのスナックへの欲求を合わせたもののVAS格付けを示すグラフである。 図8は、午後のスナックビュッフェからのカロリー摂取を示す。 図9は、チラコイド処置を伴うか又は伴わない場合の、特定食製品を消費した後の好みを示す。 図10A〜Bは、嗜好性食品への欲求へのチラコイド処置効果と情動性摂食行動スコアとの相関を示す。
当業者が本発明を実施できるために、付随する図面を参照して、本発明のいくつかの実施形態を以下に詳細に記述する。本発明は、しかしながら、多様な形態で化体し、本明細書中で記載される実施形態に限定されるものとして解釈されるべきではない。むしろ、これらの実施形態を提供することによって、本開示が徹底的で完全なものとなり、そして、本発明の範囲を当業者へ十分に伝えるものである。本実施形態は本発明を限定することはないが、本発明は添付した特許請求の範囲のみにより限定される。さらにまた、添付した図面中に説明される特定の実施形態の詳細な説明中に使用される用語も、本発明を限定する意図はない。
本発明は、ヒトにおけるチラコイドまたはその部分の使用に基づいていて、その使用には単離チラコイドまたはその部分の摂取が含まれる。
チラコイドは、植物の葉緑体の内部およびシアノバクテリアの内部に存在する膜結合区画である。チラコイドは、光合成の光化学反応の部位である。光合成の暗反応(すなわち、カルビン−ベンソン回路)(光合成の光化学反応で形成されるNADPHを必要とする)では、二酸化炭素が炭素数3の糖類に変換され、その後、合体してショ糖とデンプンを形成する。この過程を、しばしば、炭素固定と呼ぶ。チラコイドは、チラコイド内腔を取り囲むチラコイド膜からなる。葉緑体中で、チラコイドは、ディスクの積層体として、グラナと称される共通の群となる。
チラコイドは緑葉の葉緑体から抽出される場合もあるし、シアノバクテリアから抽出される場合もある。その含有物には、タンパク質、脂質、および色素(例、クロロフィルおよびカロテノイド類)が含まれる。チラコイドを単離および濃縮する一般的原理は、別の場所に記載されている(参照、PCT/SE2006/000676、WO/SE2009/000327、およびEmek,SC,Szilagyi A,Akerlund HEら(2010年)、A large scale method for preparation of plant thylakoids for use in body weight regulation、Prepar biochem&biotech、40(1),13-27)。手短に言うと、緑葉の細胞を力学的に破砕する。チラコイドをその後、ろ過により細胞壁および他の大型細胞断片から分離する。チラコイドをその後、pH4.7で析出させることにより濾液から回収し、そして、遠心分離を繰り返すことにより水中で洗浄する。
単離チラコイドは、ヒトと動物被検体の両者において、満腹感を増加させ、生体恒常性空腹感シグナルを減少させ、そして、いくつかの研究では体重喪失を促進させることが以前から分かっていた(参照、WO2006/132586およびWO2010/008333等)。チラコイドまたはその部分が多種多様なやり方で食料品に含まれる場合があるのは、それら自身が食品であるからだ。チラコイドまたはその部分は、様々なタイプの医薬製剤中に含まれる場合もあり、そのことはWO2006/7132586に以前から記載されている。
当該技術分野の現状の考えは(参照、Stenblomら、Supplementation by thylakoids to a high carbohydrate meal decreases feelings of hunger,elevates CCK levels and prevents postprandial hypoglycaemia in overweight women、Appetite 68(2013年)、118-123)、単離チラコイドが脂質分解を遅らせ、そして、生体恒常性空腹感(つまり、絶食した際の摂食したい衝動)を減少させるということである。単離チラコイドの摂取が、コレシストキニン(CCK)のレベル(満腹感)を増加せることによることとグレリンのレベル(空腹感)を減少させることにより生体恒常性空腹感シグナルに影響を与えることが分かっている。
緑葉は自然にチラコイドを含んでいるが、新鮮な緑葉を摂取することは単離チラコイドまたはその部分の摂取と同じ効果を提供するわけではない。チラコイドを含む植物細胞は、非常に厚く強固な細胞壁に取り囲まれている。野菜を食べる際に我々はよく噛み砕くが、多くの細胞は破砕されるわけではない。細胞壁を溶解するために、特別な酵素(例、セルラーゼおよびペクチナーゼ等)が必要とされる。しかしながら、これらの酵素はヒトの胃または小腸に存在しない。緑葉から抽出されなければ、チラコイドは大腸(そこでは、細菌が細胞壁を破壊することができる)に到達する前に、小腸において効果を発揮できない。
単離チラコイドの脂質分解活性と共にインスリンへの感受性および各種分子の取り込みへの効果は、当該技術分野で報告されている(例えば、WO2006/7132586、WO2010/008333、およびWO2012/113918を参照されたい)。さらに、ラジカル捕捉剤としてのそのままのチラコイドの効果も、当該技術分野で報告されている(参照、WO2003/004042)。しかしながら、チラコイドのさらなる効果は、いまだ発見されていないままである。
上記に説明したように、肥満の重要な観点は、肥満の個人が過剰摂食するだけではなく、健康食品よりも嗜好性食品(例、高グリセミック指数(つまり、60以上)を有する、しばしば脂肪含有量の高い食品ならびに甘味料または糖分を含む甘味のある食品および甘くて脂肪のある食品)を優先して選択する傾向があることである。ファーストフード(例、ピザ、ハンバーガー、フレンチフライ、清涼飲料等)は、過剰摂食のリスクを増加させる嗜好性食品の典型例である。嗜好性食品を好むことは食品の報酬値と関連する。過剰摂食は、従って、快楽を得たいと思う気持ちにより突き動かされている場合がある。
今日の社会において入手できる食品の嗜好性は、正常な満腹感シグナルを害し、エネルギーの必要性とは独立してエネルギーの摂取を動機づけする(参照、Erlanson−Albertsson C:How palatable food disrupts appetite regulation.、Basic Clin Pharmacol Toxicol、2005年、97(2):61−73)。さらに、甘い食べ物と脂肪のある食べ物の両者は、報酬システム内でオピオイドとドパミンを動員し、そのような食べ物への衝動およびそのような食べ物への切望さえのための経路を樹立する(参照、Kelley AE,Bakshi VP,Haber SN,Steininger TL,Will MJ,Zhang M:Opioid modulation of taste hedonics within the ventral striatum.、Physiol Behav 2002年、76(3):365−377)。
従って、嗜好性食品に対する衝動を減らすことは、体重減量プログラムが成功するために極めて重要となる。さらに、肥満の被験者だけではなく正常な体重の被験者にとっても、嗜好性食品に対する衝動を減らす組成物を使用することが期待される。快楽的空腹感を減らすことは、より健康的な摂食行動を得ることを容易にする場合がある。同様に、嗜好性食品の報酬作用を減少させることも、より健康的な摂食行動を得ることを容易にする可能性がある。嗜好性食品への切望の増加を経験する人における快楽的衝動を減弱することは、過剰摂食と体重増加を回避するやり方である。
高グリセミック指数を有するか又は甘味のある食べ物および高脂肪含有量の食べ物の摂取は、肥満、心血管疾患(冠状動脈疾患を含むもの)、および糖尿病のリスクの増加と関連し、そのことは、いくつかの研究で実証されている(参照、Johnson RK,Appel LJ,Brands M,Howard BV,Lefevre M,Lustig RH,Sacks F,Steffen LM,Wylie−Rosett J:Dietary sugars intake and cardiovascular health:a scientific statement from the American Heart Association.、Circulation、2009年、120(11):1011−1020およびJohnson RJ,Segal MS,Sautin Y,Nakagawa T,Feig DI,Kang DH,Gersch MS,Benner S,Sanchez−Lozada LG:Potential role of sugar(fructose)in the epidemic of hypertension,obesity and the metabolic syndrome,diabetes,kidney disease,and cardiovascular disease.、Am J Clin Nutr、2007年、86(4):899−906)。特に、フルクトースを含む糖類により、そのような疾患にかかりやすくなる可能性がある。
嗜好性食品を好んで選択することに関する重要な因子は、嗜好性食品とリンクする報酬値である。嗜好性食品を摂食することにより、過剰摂食に重要な役割のある報酬因子の放出が生じる。これらの報酬因子の効果が減ると、嗜好性食品を好んで選択すること及び過剰摂食も減る場合がある。
さらに、食べ物だけでなく他の刺激物(例、アルコールおよびニコチン)も、同じ報酬因子により、その衝動が動かされる。禁煙しようとする人々の体重がしばしば増加するので、嗜好性食品の報酬値だけでなく、ニコチンの報酬値も減らすことに特に着目してもよい。嗜好性食品の摂取と同様に、喫煙も心血管疾患のリスクの増加と関連する。
本発明者らは、驚くべきことに、単離チラコイドの摂取が脂質分解活性に影響を与えて、そのことにより食欲(生体恒常性空腹感−図1A)に影響するだけではなく、重要なことには、嗜好性食品に対する衝動(快楽的空腹感−図1B〜D等)を減らすことを明らかにした。興味深いことには、この知見は食欲の抑制と関係がないことである。というのも、この効果は空腹感のある個人にも存在しているからである(参照、図1A対図1B〜D)。換言すると、嗜好性食品に対する衝動の減少は、摂食の直後だけでなく、後期食後フェーズの少なくとも6時間(空腹感が存在する時間)においても観察される。しかしながら、単離チラコイドを含む組成物を投与されていた空腹感のある個人は、嗜好性食品(例、キャンディ、チョコレート、およびポテトチップス)に対する衝動への傾向がずっと弱いことが分かった。この効果は、チラコイドが全くない第二の食事(昼食)後でさえも維持されている(参照、図1B〜D)が、生体恒常性空腹感は異ならない(参照、図1A)。
食事介入を受ける被験者(生体恒常性空腹感が弱い(参照、図3A〜C)被験者)でも、快楽的空腹感の減少が単離チラコイドの投与で得られる(参照、図4および5)。さらに、単離チラコイドの投与は、甘味を好むことが減少する結果とさえなる場合がある(参照、図9)。
いかなる理論にも拘束されることはないが、嗜好性食品に対する衝動を減らす効果は、グルカゴン様ペプチド1(GLP−1)(特定L細胞により腸の遠位で生産されるホルモン)の放出を増加させるというこれまで知られていなかった効果に関連すると考えられている(Holst JJ:The physiology of glucagon−like peptide 1.、Physiol Rev、2007年、87(4):1409−1439)。以下の明細書中に示すように、単離チラコイドの経口摂取はGLP−1の放出を増加させる。
興味深いことには、このホルモンは血糖制御に関与するだけではなく、食品の報酬値を下げることも示されている(Dickson SL,Shirazi RH,Hansson C,Bergquist F,Nissbrandt H,Skibicka KP:The glucagon−like peptide 1(GLP−1)analogue,exendin−4,decreases the rewarding value of food:a new role for mesolimbic GLP−1 receptors.、J Neurosci、2012年、32(14):4812−4820)。従って、嗜好性食品に対する衝動を減らす効果は、GLP−1の放出の増加にリンクしている可能性がある。しかしながら、まだ解明されていない他の因子も、本明細書中に開示される新たな知見にとって重要である可能性がある。
この知見がさらに興味深いのは、GLP−1の放出が食品の報酬値に影響を与えるだけでなく、(アルコールを含む)他の刺激物の報酬値にも影響を与えるからである(Egecioglu E,Steensland P,Fredriksson I,Feltmann K,Engel JA,Jerlhag E:The glucagon−like peptide 1 analogue Exendin−4 attenuates alcohol mediated behaviors in rodents.、Psychoneuroendocrinology、2013年、38(8):1259−1270;およびShirazi RH,Dickson SL,Skibicka KP:Gut peptide GLP−1 and its analogue,Exendin−4,decrease alcohol intake and reward.、PLoS One、2013年、8(4):e61965)。そのメカニズムは、脳の報酬中枢でのドパミンの抑制に関係づけられると考えられている。
さらに、たばこ及び他のタバコ製品に対する必要性も、脳の報酬中枢でドパミンを放出させるニコチンに関係づけられる。ニコチンの刺激作用は、GLP−1の放出により減弱されていて、そのことはEgeciogluらにより実証された(参照、「The Glucagon−Like Peptide 1 Analogue Exendin−4 Attenuates the Nicotine−Induced Locomotor Stimulation,Accumbal Dopamine Release,Conditioned Place Preference as well as the Expression of Locomotor Sensitization in Mice」、PloS One、2013年、18:8e 77 284.)
予想外に分かったのは、単離チラコイドを摂取する喫煙者が喫煙の必要性が実際減ったと体感すること(ニコチンに対する必要性の減少として解釈される)、それによりその喫煙者は一日当たりのたばこの本数が減るということである。このことは、チラコイドによるGLP−1放出増加作用である可能性がある。禁煙しようとする喫煙者がしばしが体重増加するので、単離チラコイドが禁煙しようとする個人により摂取される場合、単離チラコイドの摂取により提供される食欲抑制効果(以前から知られているもの)は、さらなる利点を提供する。
腸におけるチラコイドにより奏される末梢効果に依存するチラコイドの従前の使用とは対照的に、本発明の使用は脳の報酬中枢に影響を与えるチラコイドにより奏される中枢効果に関連すると考えられている。さらに、その効果は、これまでに報告されてきたCCKレベルの増加//グレリンレベルの減少とは異なっている。
本発明の一実施形態は、従って、ヒトにおける嗜好性食品に対する衝動を抑制し、低下させ、減少させ、減らし、減弱させ、及び/又は緩和するための単離チラコイドまたはその部分の使用に関する。そのような使用は、非医薬的である場合もある。更に、そのような使用は、医薬的である場合もある。その使用には、単離チラコイドまたはその部分の摂取が含まれる。単離チラコイドを服用する人がより健康的な代替物よりも嗜好性食品を選択する傾向が低い一方で、その人は突然嗜好性食品を嫌いになるわけではない。嗜好性食品に対する衝動が減るのは肥満治療および予防の手助けとなる。というのも、単離チラコイドを服用する人は過剰摂食する傾向が低下するからだ。さらに、嗜好性食品に対する衝動が減るのは、体重減量計画に参加して成功した後に体重を維持するのを手助けする場合がある。
嗜好性食品の例には、スイーツ、ペーストリー(例、ドーナツ、クロワッサン、ショートブレッド・クッキー、およびウエハース)、キャンディー、ポテトチップス、フレンチフライ、清涼飲料(例、コカ・コーラ、ファンタ、スプライト、ペプシコーラ、およびエネルギー飲料(例、レッドブル))、チョコレート(例、ミルクチョコレートおよびチョコレートバー)、ファーストフード(例、ピザおよびハンバーガー)、およびアイスクリームが含まれる。更に、嗜好性食品は、典型的には、以下の性質のうち、一つ又はいくつかを有する場合がある:
−少なくとも60(例、少なくとも70)のグリセミック指数;
−飲料に関して少なくとも5重量%および他の食料品に関して少なくとも20重量%(例、少なくとも50重量%)の高糖含量;
−甘味料(例、ステビア、アスパルテーム、スクラロース、ネオテーム、アセスルファームカリウム、シクラミン酸塩、アリターム、モグロシド類、ズルチン、グルチン(glucin)、ネオヘスペリジルジヒドロカルコン、サッカリン、ブラゼイン、クルクリン、グリチルリチン、マビンリン、モネリン、ペンタジン、およびタウマチンからなる群より選択される甘味料;特に、ステビア、アスパルテーム、スクラロース、ネオテーム、アセスルファームカリウム、およびサッカリンからなる群より選択される甘味料)を含むこと;
−少なくとも20重量%の高脂肪含量および少なくとも20重量%の糖の高含量;
−少なくとも20重量%の高脂肪含量および少なくとも50のグリセミック指数;ならびに
−少なくとも20重量%の高脂肪含量および少なくとも1.0重量%の塩(NaCl)含量。
典型的には、嗜好性食品は、グリセミック指数が高く、および/または、甘味がある。また、GIの高くない甘い食べ物(例、フルクトースまたは甘味料を含む食品)も、報酬作用を惹起する場合があり、従って、過剰摂食に関与する可能性がある。当業者には知られているように、ダイエット清涼飲料の摂取もまた、報酬作用を提供し、間接的に過剰摂食に寄与する。ダイエット飲料はドパミン放出を引き起こし、それら飲料が、過剰摂食を導く場合がある報酬作用を有することも実証されている。さらに、少なくとも50という中程度のGIと高脂肪含量を有する食品(例、フレンチフライ)も、報酬作用を惹起し、従って、過剰摂食に関与する場合がある。高脂肪含量を有する塩気のあるスナック(例、塩ナッツ)でさえも報酬作用を惹起する。
一実施形態によれば、本明細書中の上記で特定された量の、嗜好性食品中に存在する糖類は、単糖類(グルコース(デキストロースとしても知られるもの)、フルクトース、およびガラクトース)、二糖類(スクロース、マルトース、およびラクトース)、ならびにその混合物からなる群より選択される。
別の実施形態は、食品(例、嗜好性食品)の報酬作用を減少させるための、単離チラコイドまたはその部分の使用に関する。そのような使用は、非医薬的である場合もある。更に、そのような使用は、医薬的である場合もある。嗜好性食品の例を、本明細書の上記部分に提供した。
本発明が嗜好性食品に対する衝動を抑制し、低下させ、減少させ、減らし、減弱させ、及び/又は緩和するための単離チラコイドまたはその部分の使用に関するように記載される一方で、別の実施形態によれば、本発明は嗜好性食品に対する衝動を抑制し、低下させ、減少させ、減らし、減弱させ、及び/又は緩和する方法に関する。そのような方法は、被験者(例、ヒト)(嗜好性食品に対する衝動が影響を受けることになるもの)へ単離チラコイドまたはその部分を投与する工程を含む。
既に記載したように、チラコイドまたはその部分の摂取はまた、脳の報酬中枢におそらく影響を与えることにより、ヒトにおける喫煙への必要性または衝動を減らすことが示されている。本発明の別の実施形態は、従って、ヒトにおける喫煙することの衝動または必要性およびニコチンに対する衝動または必要性を抑制し、低下させ、減少させ、減らし、減弱させ、及び/又は緩和するための単離チラコイドまたはその部分の使用に関する。さらにまた、単離チラコイドまたはその部分を使用して、人々がニコチンを使用することを止めようとすること(例、喫煙を止めること)を容易にすることができる。単離チラコイドまたはその部分を、従って、禁煙に使用する場合もある。ニコチン製品は、喫煙用タバコに限定されるだけでなく、他の製品(例、かぎタバコおよびニコチン代替物)も含む。さらに、人々がニコチン代替物(例、ニコチンパッチ(経皮的にニコチンを投与するもの)およびニコチンガム(経口的にニコチンを投与するもの))を常習するようになる傾向も増加している。また、単離チラコイドまたはその部分を使用することにより、そのような製品を使用する衝動または必要性を抑制し、低下させ、減少させ、減らし、減弱させ、および/又は緩和することもできる。さらに、単離チラコイドまたはその部分を使用して、ニコチン製品の使用量を削減(例、喫煙またはかぎタバコする回数を減らす)こともできる。ニコチンおよびニコチン含有製品に関する使用は、非医薬的である場合もある。更に、そのような使用は、医薬的である場合もある。
単離チラコイドまたはその部分は、喫煙することの衝動または必要性と共にニコチンに対する衝動または必要性を、抑制し、低下させ、減少させ、減らし、減弱させ、および/又は緩和する方法に使用可能でもある。そのような方法では、単離チラコイドまたはその部分を、被験者に投与して、それにより、喫煙することの衝動または必要性と共にニコチンに対する衝動または必要性に影響を及ぼす。同様に、単離チラコイドまたはその部分は、人々がニコチンの使用を止めようとすること(例、喫煙を止めること)を容易にする方法中で使用可能である。そのような方法では、単離チラコイドまたはその部分を、被験者に投与する。さらに、単離チラコイドまたはその部分は、単離チラコイドまたはその部分の投与工程を含む禁煙方法中でも使用可能である。
別の実施形態は、ニコチン(例、タバコ製品(例、たばこ及びかぎタバコ))の報酬作用を減少させるための、単離チラコイドまたはその部分の使用に関する。そのような使用は、非医薬的である場合もある。更に、そのような使用は、医薬的である場合もある。
嗜好性食品およびニコチンだけが脳の報酬中枢に作用するのではなく、他の刺激物(例、アルコール、つまり、エタノール)もそうである。本発明の別の実施形態は、従って、ヒトにおけるアルコール飲料(例、ビール、ワイン、スパークリングワイン、サイダー、ウォッカ、ウイスキー、ジン、テキーラ、コニャック、ブランデー、ラム、アクアビット等)に対する衝動を抑制し、低下させ、減少させ、減らし、減弱させ、及び/又は緩和するための単離チラコイドまたはその部分の使用に関する。このことは、アルコール飲料(しばしば、アルコールと表示されるもの)の消費を低下させるのに有用である可能性がある。さらに、単離チラコイドまたはその部分を使用して、ヒトにおけるアルコール乱用を抑制し、制限し、低下させ、減少させ、減らし、および/または減弱させることもできる。単離チラコイドは、従って、被験者がアルコール中毒になるリスクを減らすのに有用である場合がある。別の実施形態は、アルコール飲料の報酬作用を減少させるための、単離チラコイドまたはその部分の使用に関する。
本発明の別の実施形態は、従って、アルコール飲料(例、ビール、ワイン、スパークリングワイン、サイダー、ウォッカ、ウイスキー、ジン、テキーラ、コニャック、ブランデー、ラム、アクアビット等)に対する衝動を抑制し、低下させ、減少させ、減らし、減弱させ、及び/又は緩和する方法に関する。そのような方法では、単離チラコイドまたはその部分を被験者に投与し、それによりアルコール飲料に対する衝動に影響を及ぼす。さらに、単離チラコイドまたはその部分は、アルコール乱用を抑制し、低下させ、減少させ、減らし、及び/又は減弱させる方法において使用される場合もある。単離チラコイドまたはその部分はまた、アルコール飲料の報酬作用を減少させる方法中で使用可能でもある。アルコール飲料とアルコールの乱用に関する使用は、非医薬的である場合もある。更に、そのような使用は、医薬的である場合もある。
本明細書中の上記に説明したように、各種刺激(嗜好性食品、ニコチン、およびアルコールを含むもの)に対する衝動への、単離チラコイドまたはその部分を摂取することの効果は、GLP−1(グルカゴン様ペプチド1)の放出の増加とリンクしていると考えられている。従って、さらなる実施形態は、ヒトにおいてGLP−1(グルカゴン様ペプチド1)を放出させるための単離チラコイドまたはその部分の使用に関し、そして、ヒトにおいてGLP−1(グルカゴン様ペプチド1)を放出させる方法であって、単離チラコイドまたはその部分の投与工程を含む方法にも関する。そのような使用は、非医薬的である場合もある。さらに、そのような使用は医薬的である場合もある。さらにまた、GLP−1は、脳の報酬中枢における各種刺激(嗜好性食品、ニコチン、およびアルコールを含むもの)の報酬作用を減少させることが知られている。単離チラコイドまたはその部分は、従って、脳の報酬中枢に影響を与える刺激の報酬作用を減少させるために使用可能でもある。同様に、単離チラコイドまたはその部分は、脳の報酬中枢に影響を与える刺激の報酬作用を減少させる方法中でも使用可能である。
チラコイドを植物から単離してもよいし、ラン藻類から単離してもよい。典型的には、チラコイドを緑葉または緑藻類から濃縮する。チラコイドは、任意の光合成植物(例、クローバー、セイヨウアブラナ、テンサイ、タンポポ、シロイヌナズナ、トウモロコシ、タバコ、ヒマワリ、アカザ、アトリプレックス、ホウレンソウ、マンゴールド、キノア、ケール、テンサイ、およびイネ科草本)の葉に由来する。好ましくは、チラコイドを、ホウレンソウから単離濃縮する。チラコイドの他の部分の中で、単離チラコイドはチラコイド膜またはその部分を含む。チラコイド単離法は、本明細書中の上記で議論した。
単離チラコイドのクロロフィル含量が、単離チラコイド1g当たり約8mg〜150mg(例、10〜100mg)のクロロフィルとなるような様式で、チラコイドを単離濃縮する場合がある。いくつかの実施形態では、単離チラコイドのクロロフィルa/b比は、約2.0〜4.0、好ましくは約2.6から3.4、そして、最も好ましくは約2.9〜3.4である。さらに、単離チラコイド中のタンパク質:クロロフィル比は、約3.0〜約10.0、好ましくは約2.0〜5.0、3.0〜5.0、または6.0〜8.0である。
典型的には、チラコイドを経口投与して、その作用を提供する。チラコイドを直接投与する場合がある一方で、チラコイドを、組成物(例、栄養補助食品組成物(例、食料品または食品サプリメント)または医薬組成物(例、医薬品))の必須部分として投与することも一般的である。
もし、医薬品として投与するならば、単離チラコイドを除くその医薬品は、また、少なくとも一つの医薬的に許容可能な賦形剤(例、担体、希釈剤、および/または安定化剤)を含む。この文脈での「医薬的に許容可能な」は、賦形剤が、その投与量と濃度を用いる場合、投与される被験者中でいかなる不必要な作用を引き起こすことのないの賦形剤に関する。そのような医薬的に許容可能な賦形剤は、当該技術分野で周知である。一実施形態によれば、本明細書中に開示される医薬品はまた、他の医薬的に許容可能な賦形剤(例、防腐剤、抗酸化剤、着色剤等)を含んでもよい。
別の実施形態によれば、単離チラコイドを、食料品に食品添加剤として加えて、本明細書中に記載しているように脳の報酬中枢に作用する能力を有する食料品を提供する。単離チラコイドまたはその部分と同様に、そのような食料品には、医薬的および非医薬的用途を見出すことができる。
さらに別の実施形態によれば、単離チラコイドを、食品サプリメントに成分として加えて、本明細書中に記載しているように脳の報酬中枢に作用する能力を有する食品サプリメントを提供する。単離チラコイドと同様に、そのような食品サプリメントには、医薬的および非医薬的用途を見出すことができる。食品サプリメントは、その中に単離チラコイドまたはその部分を加えた、例えば、フルーツジュースシュート(例、ブルーベリーショット)あるいは野菜スープまたはシュート(例、ポテトスープ、ブロッコリスープ、ポテトスープ、もしくはトマトスープ)である場合がある。食品サプリメント中の成分は、さらに健康に関して有用性を与える抗酸化剤、ビタミン、繊維を含んでなる。
単離チラコイドが組成物の必須部分として投与される実施形態では、組成物中のチラコイド含量は、組成物(乾燥重量)1g当たり1mg〜100mgのクロロフィルのクロロフィル含量に対応する場合がある。好ましくは、組成物は、(乾燥重量)1g当たり約8〜約80mgのクロロフィル、好ましくは、(乾燥重量)1g当たり約10〜約50mgのクロロフィル(例、約10mg〜30mg、20mg〜40mg、または30mg〜40mgのクロロフィル)を含む。さらに、組成物の炭水化物含量は、組成物(乾燥重量)100g当たり約5〜約50gの炭水化物含量、好ましくは100g当たり約10g〜40g(例、(乾燥重量)100g当たり15g〜30g、20g〜30g、または30g〜40g)である。また、組成物のタンパク質含量は、組成物(乾燥重量)100g当たり約10〜約60gのタンパク質、好ましくは100g当たり約10g〜40g、さらに好ましくは(乾燥重量)100g当たり15g〜30g、20g〜30g、または30g〜40gである。
一実施形態によれば、組成物は経口医薬組成物または栄養補助食品組成物であって、生理学的に許容可能な水中油型チラコイド含有エマルジョンを含むものである。そのようなエマルジョンでは、チラコイド量が20〜30重量%(例、約25重量%)である場合がある。さらに、油量が20〜30重量%(例、約25重量%)である場合がある。使用する油は、食品グレードのベジタブルオイル(例、食用ナタネ油(カノーラ油としても知られるもの)、オリーブオイル、ヒマワリ油等)である場合がある。
組成物は各種形態で投与される場合があるので、投与されるチラコイドの一日当たりの用量は変化する場合がある。指導原則としては、投与される組成物量は、投与量が哺乳動物の体重1kg当たり2.4mg〜240mgの一日当たりの用量に相関するような様式で選択可能である。
さらに、本発明者らは、驚くべきことに、チラコイドが腸内微生物相を制御して、従って、プレバイオティクス剤として機能する可能性があることを最近発見した(PCT/EP2013/068656を参照されたい)。一実施形態によると、本明細書中で開示される組成物は、従って、プロバイオティクス細菌をさらに含む。組成物に含有されることになるプロバイオティクス細菌は、ビフィドバクテリウム(Bifidobacterium)(例、ビフィドバクテリウム・インファンティス(Bifidobacterium infantis))またはラクトバチルス(Lactobacillus)(例、ラクトバチルス・プランタラム(Lactobacillus plantarum))である場合がある。さらに、プレバイオティクス剤(例、トランス−ガラクトオリゴ糖、イヌリン、フルクトオリゴ糖(FOS)、ラクツロース、およびマンナンオリゴ糖(MOS))を、組成物に含ませてもよい。
さらに苦心することなく、当業者は、これまでの記載を利用して本発明を最大限まで活用することができると考えられる。上記した好ましい具体的実施形態は、従って、単に説明的なものとして解釈され、そして、どんなに如何なる様式でも開示事項に対して限定的なものとしては解釈されない。
本発明は、具体的実施形態(複数可)を参照して上記に記載されているが、本明細書中に記載される特定の形態に限定されることを意図していない。むしろ、本発明は付属している特許請求の範囲によってのみ限定され、上記具体例とは別の実施形態も、これら添付した特許請求項の範囲内で同等に可能である(例、上記したものとは異なっている)。
特許請求の範囲では、用語「含む/含んでいる」は、他の要素または工程の存在を除外しない。さらに、個々の特徴が互いに異なる請求項に含まれる場合があるが、これら特徴は有利である場合に組み合わされる場合があり、そして、互いに異なる請求項に含まれることは特徴の組合せが実行可能および/または有利ではないことを意味しない。
また、単数扱いの参照物は、複数のものを除外しない。用語「a」、「an」、「第一」、「第二」等も、複数のものを排除しない。
実験
以下の実施例は単に例であり、本発明の範囲を制限するように解釈されることは決してないことが期待される。むしろ、本発明は、添付している特許請求の範囲によってのみ制限される。
実施例1−嗜好性食品に対する衝動の減少
本試験:
38人の女性を、ポスターと広告を通して、地域社会(Lund、スウェーデン)で募集して得た。その基準は、40〜65歳の女性で、BMIが25〜33、非喫煙者、且つ健康であることである。除外基準には、糖尿病、食品アレルギー、腸症候群、食物不耐性、および最近の抗生物質使用が挙げられる。被験者はベジタリアンではなく、最近3か月でダイエットしていなかった人である。38人の算入した女性のベースライン特性を表1に見ることができる。2つのテスト群を、無作為に選択して作った。Lund(スウェーデン)の倫理委員会は、この試験を承認した。
Figure 2017501158
被験者は、試験当日の朝7時にクリニックへ絶食して(すなわち、前日夜から飲食せずに)到着した。静脈カテーテルを、丸一日採血を繰り返すために装着した。被験者は、660kcalの同カロリーの朝食(表2)(炭水化物60%、脂肪28%、およびタンパク質12%)を与えられた。
Figure 2017501158
5gのチラコイドを添加するか又は無添加の50gのブルーベリーショットを、朝食の約5分前に服用した。被験者は、15分以内に全ての与えらえた食品を食べるように言われた。飲食は、食事と食事の間は許可されなかった。ピザ(Grandiosa Gudfadern、Procordia AB、Eslov、スウェーデン)、水、及びコーヒ−/ティーからなる第二の食事を、満足するまで飲食するように指示して、6時間後に被験者に与えた。第二の食事を、一人に一つずつ各被験者に、個人用個室にて給仕した。サーモン「pytt i panna」(Laxpytt、Findus AB、Bjuv、スウェーデン)からなる第三の食事(夕食)を、自宅で晩に自由に選択した量を消費するために、参加者に与えた。
血液サンプルを、朝食直前(時点:0分)およびその後、15、30、45、60、90、120、180、240、300、および360分で採取した。360分の時点で採血直後に、昼食を与えた。GLP−1を含む多くの組成成分に関して解析した。
空腹感、満足感、および様々な食品に対する衝動に関する質問表(視覚的アナログ尺度(VAS)としてデザインされたもの)に、一日を通して血液サンプルを採取した同時点で答えてもらった。
第二と第三の食事の間で、昼食後60、120、180、および240分の時点でもまた、質問表に答えてもらった。
本食事試験で使用したチラコイド粉末は、Future−ceuticals(Chicago、IL、米国)によって、Appethylとして製造された。その粉末5gを、50gのブルーベリージュース(Ekstroms Blabarssoppa Orginal、Procordia AB、Eslov、スウェーデン)および2gのナタネ油(Zeta rapsolja、DILUCA&DI LUCA AB、Stockholm、スウェーデン)と混ぜた。コントロールは50gのブルーベリージュースおよび2gのナタネ油からなっていた。
血漿中のGLP−1を、酵素結合免疫吸着測定法(ELISA)キット(カタログ#EGLP−35K;Millipore Corp.、Billerica、MA、米国)を用いて解析した。このキットは、ヒト血漿中の生物学的に活性型のGLP−1(GLP−1(7〜36アミド)およびGLP1(7〜37アミド))のみを解析する。励起波長355nmで発光波長460nmの蛍光プレートリーダー(FLUOstar OPTIMA413−101;BMG LABTECH GmbH、Ortenberg、ドイツ)を使用してサンプルを測定した。製造元のデータによると、アッセイ間の変動係数(CV)は、1〜13%で、そして、アッセイ内部のものは6〜9%である。
視覚的アナログ尺度(VAS)質問表を用いて、被験者の空腹感、満足感、ならびに糖、糖/脂肪、および塩/脂肪に対する切望感を推定した。被験者に紙に書いた質問を与え、横に伸びる直線スケール上に縦方向の直線を書くことにより感覚と考えを評価するように言い渡した。スケールの長さは100mmで、感覚描写のアンカーを付けた(表3)。
Figure 2017501158
ダイエット計画(すなわち、一日当たり5gのチラコイドの摂取)を3ヶ月間継続した。
結果
チラコイド摂取を共に行うと、嗜好性食品に対する衝動の有意な減少が観察された(図1B〜Dを参照)。衝動の減少が、スイーツ(菓子類)に関して、脂肪と甘さがあるもの(チョコレート)に関して、および脂肪と塩分があるもの(チップス)に関して起こった。従って、結論されたのは、チラコイドが甘さ、塩、および脂肪に対する衝動または欲求を抑える能力を有することである。この欲求抑制は、午前中にチラコイドショットを消費した後丸一日持続する。さらにまた、嗜好性食品への好みが、3ヶ月のチラコイド処置後にさらに減少した。
重要なことには、空腹感への効果は、かなり低かった(図1Aを参照されたい)。空腹であるにも関わらず、女性達は、嗜好性食品(例、キャンディ、チョコレート、チップス)に対する欲求が有意に少なかった。本発明を基礎とする効果は、従って、濃縮単離したチラコイドの摂取が、脂肪分解活性が減少することに起因して食欲を抑え(WO2006/132586を参照されたい)、そして、グルコース等の分子の取り込みを遅らせる(WO2012/113918を参照されたい)という従来の知見に明らかに関連しない。
如何なる理論に拘束されるわけではないが、そのメカニズムは、グルカゴン様ペプチド(glp−1)の放出におそらく関連づけられる(グルカゴン様ペプチドは、コントロールと比べてチラコイドにより有意に放出された(図2))。チラコイドは、従って、肥満を予防および治療するのに役立つ方向に、報酬関連摂食行動を制御するホルモンの内在性放出を引き起こす。特に、チラコイドを摂取した被験者は、嗜好性食品に対する衝動が有意に減少するので、健康的な食事を選択するようにより駆り立てられることになる。さらに、過剰摂食のリスクが減る。このことは、肥満とインスリン抵抗性に関連する2型糖尿病と心血管疾患のリスクの減少を導くことになる。
実施例2−ニコチンに対する必要性の減少
周知であることには、喫煙者は、体重減量計画に参加する場合、喫煙への衝動が増加するのを一般的に体験する。これは、主として、ニコチンが食欲を低下させ、そして食品の味覚を下げるからである。予想外なことには、チラコイドシュートを摂取した喫煙者の中には、ニコチンに対する必要性が、規則的かつ自発的により低下することが報告されている。典型的には、チラコイドシュートを、体重減量計画の一部として提供する。
誤って、一人の喫煙者が実施例1の試験に含まれていた。この女性は、過去40年間に一日約17本のたばこを喫煙していたのであるが、一旦この試験に参加すると喫煙への衝動が有意に低下することを報告した。試験が終了すると、彼女は、喫煙への衝動が再び増加したことを訴えた。
一日当たり約23本のたばこを典型的に喫煙する別の女性は、定期的にチラコイドシュートを摂取開始すると、たばこの消費が一日当たり約15本のたばこに減ったことを報告した。さらに、彼女は、喫煙することの衝動が低下したことを報告し、そのことは、どうして突然喫煙回数が減ったのかということの説明になると彼女は信じていた。
一日当たり15〜20本のたばこを典型的に喫煙する男性は、午前中にチラコイドシュートを定期的に摂取開始した10日後に、たばこの消費が一日当たり10本未満のたばこ(典型的には、一日当たり約9本のたばこ)へと減ったことを報告した。
実施例3−食事介入の間の嗜好性食品に対する衝動の減少
実施例1で観察された効果を、カロリー制限なしに実現した。しかしながら、ほとんどの体重減量計画はカロリー制限に基づいている。従って、体重減量計画で一般的に用いられるカロリー制限中の快楽的空腹感へのチラコイドの効果も試験する。
被験者
ダイエットを現在または最近行っていなかった48人の中年(40〜65歳)、非喫煙、太りすぎな女性を、地域新聞の広告を介して、スクリーニングのために募集して得た。除外基準は、糖尿病、炎症性腸疾患、甲状腺疾患、食品アレルギー、および33を超えるBMIであった。30人の個人が、この試験の参加者として登録された。30人の登録参加者の全員がこの試験を完了した。規則順守していることを、日記の記帳、インタビュー、および歩数計を日常的に使用することを通して判断した。4人の参加者(コントロール群から1名とチラコイド群から3名)は、食事および運動計画を順守しなかったので、データ解析から除外した。
26人の算入した被験者のベースライン特性を表1に一覧表にする。コントロール群の参加者の1人は、出席しなかったので、空腹感、満腹感、および特定の食品アイテムに対する衝動の主観的格付けの解析に含めなかった。
Figure 2017501158
試験の手順、目的、および要求条件を詳細に参加者に説明し、そして、同意書に、スクリーニング前と試験開始の前の両方で署名してもらった。試験はLund大学の倫理委員会で承認され、ヘルシンキ宣言に従って実施した。試験完了後、全ての参加者は2000SEK(課税対象)の報酬を受けとった。
実験試験デザイン
試験を実施し、2ヶ月間の単純盲検無作為の食事及び運動介入試験としてデザインした。体重、BMI、血糖、インスリン、トリグリセリド(TAG)、およびコレステロール(全体とLDL)に基づいて、参加者を無作為に2つの群に分け、群内および群間で正規分布となることを確かめた。群の一つは、毎日のブルーベリー飲料中にチラコイドを添加して与えられた。一方、その他の群はコントロールとして働き、チラコイド無しのブルーベリー飲料を毎日与えられた。
隔週の午前中の同じ時間に、参加者は、体重、体組成、胴と腰まわりの測定のため、および、採血のためにクリニックを訪問した。全ての測定条件を最適化するために、各検査日前の晩に標準化された夕食を取ること及び8.00pm後に食品または液体のさらなる摂取を避けるように参加者に命じた。
参加者は、試験期間中、合計5回、個人的にスケジュールして面接した。初日と最終日(1日目と56日目)に、人体計測測定と採血後、同カロリーの朝食(2114kJ/505kcal)(チラコイド入り又は無しのブルーベリー飲料、リンゴ付きヨーグルト、朝食用シリアル、ナッツ、およびコーヒーまたはティーからなるもの)を給仕した(表2)。240分後、同カロリーのお持ち帰り用ランチ(2593kJ/630kcal)(凍結タイカレー食、豆サラダ、およびバナナからなるもの)を与えた。空腹感、満腹感、および特定の食品に対する衝動の主観的パラメータを測定するVAS質問表に、1日目と56日目の両方の当日を通して所定の時点で記入してもらった。一方、血液サンプルは朝食後最初の240分間のみ採取した。
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チラコイド
本試験で使用したチラコイドは、ホウレンソウの幼葉からpH法(Emek SCら、A large scale method for preparation of plant thylakoids for use in body weight regulation、Prep Biochem Biotechnol、2010年、40(1):13−27に記載されるもの)を使用して調製した。チラコイドスラリーを乾燥させて、チラコイド粉末(Swepharm AB(Sodra Sandby、スウェーデン)により調製されたもの)を得た。100gのチラコイドは、41.1gのタンパク質、14.5gの脂肪、36.8gの炭水化物、3.5gの塩と共に色素、例えば、3640mgのクロロフィル、28mgのルテイン、730μgのゼアキサンチン、4760μgのβカロテン、21μgのビタミンA、1330μgのビタミンK、6.07mgのビタミンE、および166μgの葉酸からなる。
チラコイド群には、2.8gのナタネ油(Zeta、Di Luca&Di Luca AB、Stockholm、スウェーデン)と混ぜた5.6gのチラコイド粉末と50gのブルーベリースープ(Ekstroms original、Procordia Food AB、Eslov、スウェーデン)を与えた。コントロール群には、2.8gのナタネ油と50gのブルーベリースープとを混ぜたものを与えた。チラコイド入りまたは無しのブルーベリー飲料は、それぞれ、209kJ/50kcal対188kJ/45kcalを含んでいた。その飲料を毎日朝食前に服用した。
カロリー制限とダイエットの推奨
試験開始前に、参加者の平均一日エネルギー要件を、年齢、体重、身長、および推定一日エネルギー消費の観点で、Dietist XP(Kostdata、Bromma、スウェーデン)を使用してHarris Benedict等式に従って、8800kJ(〜2100kcal)と計算した。試験中、計算されたエネルギー摂取量を、15E%減らして、〜7500kJ/日(〜1800kcal/日)にした。参加者に、その中から選択される特選レシピ集(3種類の朝食、29種類の昼食/夕食、および4種類のデザート)を提供した。試験中の一日当たりの推奨エネルギー摂取量を、分割して3回の食事/日(朝食2100kJ(〜500kcal)、および昼食と夕食それぞれ2500kJ(〜600kcal))にした。さらに400kJ(〜100kcal)を、コーヒー/ティー中のミルクと個人的調整のために許可した。水、コーヒー、およびティーを食事と食事の間に許可したが、追加的な食品またはスナックは許可しなかった。食事には、いかなる甘くした飲料も与えなかった。
被験者には、また、低/中程度の運動(例、パワーウォーキング、水泳、ベーシックエアロビクス等)を毎日60分間行うように命じた。
毎日、参加者は、食事の選択、健康状態、および運動に関する質問に答えて日記帳に記載した。これらのデータを使用して、試験ガイドラインを順守しているか分析した。
身体解析
体重をデジタル体重計(TANITA WB−100A、classIII、Amsterdam、オランダ)で測定した。体脂肪組成(kg)と内臓脂肪(kg)を、生体電気インピーダンス解析器(TANITA−BC 418 MA)で測定した。胴回り(肋骨下端部と腸骨稜との中間)および腰回りを、非伸縮テープ型測定器を用いて0.5cm単位で測定した。
質問表
VAS(Flint Aら、Reproducibility,power and validity of visual analogue scales in assessment of appetite sensations in single test meal studies、Int J Obes Relat Metab Disord、2000年、24(1):38−48)として作成した質問表を使って、空腹感、満足感、特定食品アイテムに対する衝動の感覚を測定した。写真が、特定食品アイテムに対する衝動の評価を補助した。高炭水化物スナックに関しては、サンドイッチと甘いシナモンロールの写真を提示した。塩と脂肪に関しては、チップスと塩ピーナツの写真を提示した。甘いスナックに関しては、キャンディーと棒付きアイスキャンデーの写真を示した。そして、脂肪と甘さに関しては、ケーキとチョコレートの写真を提示した。試験の初日(1日目)と最終日(56日目)に、被験者は朝食前(0分)ならびに15、60、120、180、240分(昼食を給仕する前)、270分(昼食を給仕後)、330、390、450および630分の時点で質問に答えた。書面での指示を質問表の表題紙に与え、各被験者が間違って解釈することを避けるために、どのように質問表に記入するかを個人的に指示した。質問に引き続いて、線の各側に描写のアンカーを付けた100mmの直線があった(表3を参照されたい)。被験者に、その尺度に縦線を引くように指示し、従って、全ての時点で感覚がどれだけ強いかを格付けした。格付けは、「全くない」と個々の被験者のマークとの間のmmとして点数化した。
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統計
検出力の計算は、ヒトでのチラコイド添加を血糖の変化に関して検証する事前のパイロット試験に基づいていた。臨床差異を0.6に設定し、被験者内の標準偏差が0.56である場合、検出力の計算は各群のサンプルサイズが14で、感度が0.80で有意差レベル0.05であることを示した。全ての血液サンプルと身体測定の統計データ解析は、R Development Core Team、バージョン2.15.3、2011年(R Foundation for Statistical Computing、Vienna、オーストリア)を使用して行った。解析は、2工程で実施した。第一に、単純回帰モデルを、各被験者に適合させ、時間を説明変数(5つの時点)および測定変数を応答変数として採用して13個の測定変数のそれぞれに適合させた。得られた勾配値は、特定の個人と変数に関する変化の適合率に相当した。第二に、2試料のホテリングT2検定を使用して、13個の変数全てを一緒に処理して、上記のようにして得た変化の率に関して多変量解析を実施した。仮定正規分布からのずれを検討したが、重度なものではないことが分かった。さらに、解釈目的で、2つの群間の勾配変数の平均差異を、13個の測定変数のそれぞれについての単変量で2試料の課題に関するt検定を用いて解析した。個々の変数比較から得られたp値は、複数の検定の効果があるので、注意して処理すべきであり、従って、どの変数が群間の有意差に最も寄与するのかを議論および解釈するのに使用されるだけである。
VAS質問表の統計解析を、Prism、バージョン6(GraphPad Software社、SanDiego、CA、米国)を使用して行った。それぞれ初日と最終日に、その日の格付けの変動を、処置と時間を固定因子とする二元反復測定ANOVAで解析した。個々の時点を、多重比較検定、その後、フィッシャーLSD検定でさらに解析した。総曲線下面積(tAUC)の数値計算を、群内での試験初日と最終日間の差異を比較するために、Wilcoxon符号付順位和検定で解析した。群間の差異を比較するために、Mann−Whitneyのt検定も使用した。
客観的データは、ほとんどの変数に関して正規分布を示し、そして、ある変数(チラコイド群のHbA1c、ApoB、および体重)に関しては仮定正規分布からのある程度のずれを示したが、解析結果には重要ではなかった。後者は、再データ採取試験により評価した。図では、データは平均±SEMとして表現したが、表中では、データを平均±SDとして与えた。p値<0.05を統計学的に有意であると考え、p値<0.1を目的対象とした。
結果
二か月間の食事制限後、全ての参加者は、コントロールとチラコイド処置群間の有意差はないが、体重を失い、そして、総体脂肪が減った。
VAS質問表使用して、空腹感の主観的格付けの解析をしたところ、試験初日に比べて最終日に、チラコイド群内での空腹感の減少が明らかになった(p=0.016、図3A)。一方で、コントロール群では空腹感の変化は見られなかった(図3A)。チラコイド群とコントロール間での空腹感の差は試験初日も見いだせなかった(F(10,240)=1.6、ns(有意差無し))し、最終日にも見いだせなかった(F(10,210)=0.83、ns)(図3Bおよび3C)。
チラコイド群内のチョコレートに対する衝動の減少の強い傾向が、試験初日に比べて最終日に観察された(p=0.052)が、コントロール群では観察されなかった(p=0.62、図4A)。このことは、食事介入ではなくチラコイドがチョコレートに対する衝動を減らしたことを確認する。それぞれ、初日と最終日の処置とコントロール間でのチョコレートに対する衝動のANOVA分析は、時間と処置間の有意な相互作用を明らかにした(初日:(F(10,240)=1.9、p<0.05);最終日:(F(10,230)=1.9、p<0.05))。個々の時点の分析は、初日の昼食前と最終日の午後でのチョコレートに対する衝動の減少を示した(図4Bおよび4C)。
炭水化物スナックに対する衝動は、どの群においても試験過程にわたり有意な変化はなかった(図5A)。しかしながら、処置初日の炭水化物スナックに対する衝動において時間と処置の間の相互作用があった(F(10,240)=2.1、p<0.05)が、最終日にはなかった(F10,230)=1.3、ns、図5C)。炭水化物スナックに対する衝動は、しかしながら、初日の昼食前と午後において減少した(図5B)。この結果は、チラコイドと食事介入の両方が炭水化物スナックに対する衝動を減らすことを示す。さらに、図5Bの知見は実施例1の知見を確認する。
チラコイド添加の副作用は報告されなかった。
考察
食事制限と組み合わせて2ヶ月間チラコイドを毎日補給すると、チラコイド処置群とコントロール群で同様な大きさの体重喪失が起きた。総体重減少は、チラコイド群で0.65kg/週、コントロール群で0.59kg/週であった(差は有意ではなかった)。
空腹感とチョコレートに対する衝動は、試験過程に渡りチラコイド処置により減った。対照的に、それらはコントロール群で減らなかった。さらにまた、チョコレートと炭水化物スナックに対する衝動は、試験初日にコントロールと比較してチラコイド処置群で減少した。そして、チョコレートに対する衝動は最終日にも減少した。
興味深いことには、初日には(図3B参照)、空腹感(生体恒常性空腹感)の差は見られなかった。一方、チョコレート(図4B参照)および炭水化物スナック(図4C参照)に対する衝動の両者が減った。このことは、実施例1の知見に沿ったものである(図1参照)。明らかに、チラコイドは、快楽的空腹感(生体恒常性空腹感に関する長期効果とは異なるもの)に効果がある。このことは、本発明の効果を確認する。さらに、実施例1および3から明らかであるが、チラコイドは、カロリー制限にかかわらずに快楽的空腹感を抑制することができる。
体重減少が二つの群間で似ていたけれども、このレベルの体重喪失は、コントロール群に比べてチラコイド処置群でより少ない努力で到達できたように見える。それは、チラコイド群における空腹感の主観的格付けの減少と嗜好性食品に対する衝動の減少に基づいている。このことは、チラコイドが、カロリー制限中でさえも食欲制御効果を発揮し、この効果が体重喪失後にも持続することを示唆する。このことはチラコイド処置の重要な特性である。というのも、空腹感は、体重喪失時によくあることであり、しばしば過剰摂食と体重再増加につながるからである。
従って、チラコイドの摂取は、体重減量計画中のカロリー制限に連結したいくつかの負担を軽減する。さらに、チラコイドの摂取は、より健康的な摂食行動を採用すること及び嗜好性食品の相対的摂取量を削減することを補助する。このことは、健康的な摂食行動を維持するのと体重減量計画に引き続く体重増加を回避するのに重要である場合がある。
従って、単離チラコイドは、カロリー制限に関係なく、空腹感である快楽的空腹感を抑制できることが結論可能である。
実施例4−情動的摂食者における欲求と快楽的空腹感の抑制
材料および方法
被験者
地域広告を通して32人の女性を募集して得た。応募してきた人を、一般的な健康状態、摂食行動、および様々な食製品に対する主観的好みを評価する質問表を含むスクリーニング手順を通して適格性に関して査定した。スクリーニングプロセス中、6人の女性を除外し、26人の女性を試験に算入した。算入基準:40〜70歳、正常体重または太りすぎの女性。除外基準:糖尿病、食欲に影響を与える病気、本試験で給仕される食品への食品アレルギーもしくは不耐性、または過去3ヶ月間にダイエットしていたこと。22人の被験者が本試験を完了し、最終解析に算入された(表1)。
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試験設計
本試験は、無作為、プラセボ対照、二重盲検、単一施設食事介入試験であって、クロスオーバー設計を有するものを、Lund大学(スウェーデン)のBiomedical Centre(BMC)(バイオ医学センター)で実施した。各参加者は、少なくとも1週間の休薬期間で隔てられた二日にテストされ、緑色植物サプリメント(5g)を一日、プラセボをその他の日に服用した。処置またはプラセボへの割り当ては無作為化され、テスト日間でバランスを取った。
被験者は22:00から絶食して朝に到着した。テスト日のスケジュールは、表2に示されるように従った。テスト日前の数日またはテスト日中は、アルコールまたは激しい身体活動は許可されなかった。朝食前、参加者は、空腹感、満腹感、特定の食製品に対する欲求に関する質問を有する視覚的アナログ尺度(VAS)として作成された質問表に記入した。それに引き続き、緑色植物膜(チラコイド)を補充するか又は無しのブルーベリー飲料を給仕し、その後、標準的高炭水化物のスウェーデン流朝食が出された。VAS質問表に、毎時間と昼食(13:00に給仕)およびフリースナックビュッフェ(16:00に給仕)の前後に記入してもらった。朝食と昼食の間に、参加者は仕事または自由活動のために施設を離れたが、テキストメッセージを介して毎時間VAS質問表に記入するように注意を促した。昼食後、参加者は指定席に留まって、その間に段ボールの仕切りを使って並んで座り、全員が窓に向かっているようにした。参加者は、スナックビュッフェがテーブルの個々のトレイ上に給仕される16:00時まで本を読んだりラップトップで仕事したりするのを許可された。給仕される製品についての情報が含まれているチラシがビュッフェと共に配られ、また、その食品の新鮮さは保証されていた。チラシには、製造者の名前と包装の写真が含まれていた。同じ写真をVAS質問表のために使用した。参加者の前にあるスナックビュッフェから摂食開始前に、参加者はVAS質問表に今一度記入した。その後、参加者はトレイ上の複数の製品から自由に食べることを許可され、衝動に従って、もしそれら製品が尽きてしまった場合はおかわりを求めることを奨励された。参加者は、スナックビュッフェに45分間専念するようにし、この時間中は他のことは何もしなかった。その後、参加者はVAS質問表に再度記入し、今回は、参加者が試食した製品を彼女らがどれだけ好きかに関する質問が含まれていた。最後に、参加者は、彼女らがテスト日中にどう感じたかについて自由にコメントする機会があった。
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検出力とサンプルサイズ
このクロスオーバー試験で検出力が0.8を達成するのに必要な参加者数は、これ以前の試験のデータを使用して計算した。これらの計算に基づいて、15人の被験者が、空腹感のVAS格付けで10mmの差異を検出するのに必要とされた。この被験者数はまた、嗜好性食品を欲求することに関する格付けの差異を検出するためにも十分であった。文献によれば、17人の被験者が、500kJ/120kcalの食品摂取の差異を検出するために十分であったとされる。
倫理
本試験は、Lundのヒト試験に関する倫理委員会により承認された(2006/361)。試験をヘルシンキ宣言に従って実施した。全ての被験者から、試験開始前にインフォームドコンセトを書面で得た。参加者は、いかなる金銭的補償も受け取らなかった。
緑色植物膜
本試験で使用された緑色植物膜(Appethyl、Greenleaf Medical AB、Stockholm、スウェーデン)は、以前記載されているようにpH法を使用してホウレンソウの幼葉から調製され、その後、ドラムで乾燥された。100gの緑色植物膜は、26.1gのタンパク質、7.24gの脂肪、48.7gの炭水化物、27.9mgのルテイン、730μgのゼアキサンチン、3.45mgのβ−カロテン、21μgのビタミンA、1330μgのビタミンK、6.07mgのビタミンE、および166μgの葉酸を含んでいる。5gの緑色植物膜を、冷たいブルーベリー飲料中に給仕したが、それは2.5gのナタネ油(Zeta、Di Luca&Di Luca AB、Stockholm、スウェーデン)および92.5gのブルーベリースープ(Ekstroms original、Procordia Food AB、Eslov、スウェーデン)と混ぜ、そして処置テスト日の朝食直前に給仕した。コントロールテスト日に、参加者は、プラセボ飲料(2.5gのナタネ油を92.5gのブルーベリースープと混ぜたものからなるもの)を給仕された。ブルーベリー飲料は、緑色植物膜入りでは82kcalで、無いものは64kcalを含んでいた。
食事
テスト両日の朝食は、標準化されたスウェーデン流、高炭水化物の朝食(ヨーグルトとムーズリ、バター、チーズ、およびピーマン付き白パン一枚、コーヒーまたはティー)であった。エネルギー分布は、総エネルギーの31.2%(E%)の脂肪、15.4E%のタンパク質、および53.4E%の炭水化物であった。糖分の構成は22.6E%であった。テスト両日に給仕された昼食は、トマトソース、ハム、オニオン、マッシュルーム、およびチーズ付きピザ(発酵生地から作られたもの)に、ゆでたブロッコリと水道水を給仕したものであった。昼食後のコーヒーまたはティーは任意であるが、被験者にはテスト両日に同じものを飲むことを要求した。昼食のエネルギー分布は、45.9E%の炭水化物、32.5E%の脂肪、および21.6E%のタンパク質であった。また、参加者には、朝食と昼食の間に、砂糖も甘味料も無しのコーヒー/ティー1杯と昼食後にコーヒー/ティー1杯を許可した。エネルギー分布は、Dietist Net Pro(Kost och Naringsdata AB、Bromma、スウェーデン)を使用して計算した。
スナックビュッフェ
スナックビュッフェのために、ベストセラーのスナック、スイーツ、および菓子類の範囲を、製品質問表に対する反応に基づいて選んだ(表3)。これらの製品を、3つの異なるカテゴリー(塩気のあるスナック、甘いスナック、および甘くて脂肪のあるスナック)にグループ分けした。塩味のスナックには、ポテトチップスと塩ナッツ詰め合わせが含まれた。糖分を含む甘味のある製品には、2種類の異なる種のスイーツとオレンジジュースが含まれた。糖分と脂肪の両方を含む甘味のある製品は、ミルクチョコレート、ダークチョコレート、チョコレートで覆われたトフィー、チョコレートペーストリー、およびシナモンロールであった。各参加者は、別々の容器に給仕された製品を有するトレイを受け取ったが、容器は食物の消費前後に計量した。量は、一人分に充分以上となるように選び、自由に食物を消費できることを保証した。コーヒー、ティー、および水を、限られた量でスナックと共に給仕した。それら飲料は任意であるが、被験者はテスト両日に同じものを飲まなくてはならなかった。
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製品質問表
製品質問表を、良く適した製品を選択するツールとして、本試験用に作成し、スウェーデン人におけるスナック摂取と切望を評価した。質問表は、スウェーデンで最も人気のあるブランドのスナック(ポテトチップス、ナッツ、チョコレート、スイーツ、焼き菓子、バン、フルーツジュース、および清涼飲料)についての具体的質問を含んでいた。質問を問うたのは、質問に答える人が、嗜好性食品を消費する頻度、9点快楽尺度上で製品をどれだけ好きか、および各カテゴリー内のどの製品を好むかについてである。
3因子摂食質問表−改訂18アイテム バージョン2(TFEQ−R18V2)
TFEQ−R18V2は、オリジナルの3因子摂食質問表(TFEQ)(摂食行動の試験で広く使用される自己評価スケール)の改訂版である。オリジナルのTFEQは51アイテムを含んでいたが、TFEQ−R18V2は、3つのタイプの摂食行動(情動性摂食、非制御型摂食、認知的自制)を評価する18個の質問を含む。本試験で使用される質問表は、スウェーデン語翻訳文であった。
VAS質問表
視覚的アナログ尺度VASとして作成された質問表を、テスト日の間、繰り返して使用して(表2)、食欲の感覚および特定食品アイテム(表3)に対する切望を測定した。質問表を、第一ページに指示を書いてある小冊子として作成した。全ての質問の後には、100mmの横線が続き、その上に被験者は自己の応答をマークした。その線の各端にアンカーを付け、最小値を左側に「全くない」と記し、そして、最大値を右側に「非常にある」と記した。当日の最終時点では、その特定の日に試食した製品に対する好みについての質問を加え、アイテムの報酬特性の評価を可能にした。解析の際には、個々の食品アイテムの格付けを3種類の異なるカテゴリーへ合わせ、そして、塩気のあるスナック、甘いスナック、および甘くて脂肪のあるスナック(表3)として提示した。全てのスナックを併せたものに関する解析については、全ての値を合わせて、合計/全スナックとして提示した。
統計
全ての統計解析を、Prismバージョン6(統計ソフトウェア)(GraphPad Software社、San Diego、CA、米国)を使用して行った。対応のあるパラメータの正規分布および処置条件とコントロール条件との間の予測差異を、d´Agostino&Pearsonオムニバス正規性検定(ボックスプロットおよびヒストグラムならびに平均値と中央値との間の比較により検証されたもの)により算出した。集団サンプルが小さいので、正規変動を決定するのは難しかった。それが、非パラメトリックテストが優先された理由である。時間と処置と処置に対する時間の相互作用とを検定するために、VAS格付けの時間変動を二元反復測定(RM)ANOVAで解析した。個々の時点でのVAS格付けの解析と同様にVAS格付け、食品摂取、および好みの格付けの総曲線下面積(tAUC)の差異の解析を、Wilcoxon符号付順位和検定を使用して実施した。文面および図の説明における所定のp値を、もしそうでないと述べない限り、Wilcoxon符号付順位和検定で解析した。
それぞれ、空腹感、満腹感、ならびに特定食製品に対する衝動および好みへの、緑色植物膜の処置効果を、処置日のVAS格付けをコントロール日の値から引き算して計算した(満腹感は逆方向に計算するので除く)。食品摂取への処置効果を、コントロール日と処置日との間のカロリー摂取量差として計算した。処置効果のΔ値を計算することが、対応のある観察を説明するために要求された。これらのΔ値を、その後、摂食行動スコア(TFEQR18−V2質問表により測定されたもの)と相関させ、3つの領域(情動性摂食、非制御型摂食、認知的自制)に分けた。相関はまた、摂食行動スコア、BMI、および体脂肪パーセンテージの間で計算された。全ての相関は、Pearson相関係数により算出された。0.3以上の相関係数(r)および決定計数(R)はかなり強いと考えられ、本文書中に含めた。図と文面の両方において、それ以外であると述べない限り、データを平均±SEMとして表記する。p値<0.05を統計学的に有意であると考え、p値<0.10を目的対象とした。
結果
空腹感と満腹感に関するVAS格付け
緑色植物膜を用いた処置は、コントロールと比較した場合、空腹感の主観的格付けを下げ、それは一日を通してより低かった(F(1,21)=6.237、p<0.05、図6A)。空腹感のtAUCは、コントロール条件と処置条件の間で21%減少した(p<0.05、図6B)。コントロールと処置との間の空腹感の格付けの差は、昼食前とスナックビュッフェの前に最も顕著で、朝食開始後285分および480分の時点で最も有意度が高い点に到達した(図6A)。
緑色植物膜を用いた処置はまた、コントロールと比べて満腹感の格付けを増加させた(図6C〜D)。満腹感のスコアは、処置条件で丸一日中、全体的により高かった(F(1,21)=8.745、p<0.01、図6C)。満腹感のtAUCは、処置後に14%増加した(p<0.01、tAUC、図6D)。コントロール群と処置群との間の満腹感の有意差が、60および120分と共にスナックビュッフェ直前の480分の時点で観察された(図6C)。
嗜好性食品を欲求することに関するVAS格付け
緑色植物膜を用いた処置は、コントロールと比べて全ての種類の嗜好性食品を欲求する主観的感情を減少させた(図7)。VAS格付けは、全てのカテゴリーのスナック(塩気のあるもの、甘いもの、および甘くて脂肪があるもの)に関して処置テスト日中一貫してより低く、全てのスナックに対する総合的欲求も同様であった。
塩気のあるスナックを欲求することに関する格付けへの処置の効果を図7Aに提示する(F(1,21)=6.110、p<0.05)。処置は、塩気のあるスナックに対する欲求を、コントロール条件と処置条件の間で、30%減少させた(p<0.01、tAUC、図7B)。具体的には、塩気のあるスナックに対する衝動は、コントロールに比べて処置群で、60、120、および360分の時点でより低かった(図7A)。
甘いスナックを欲求することに関する格付けへの処置の効果を図7Cに提示する(F(1,21)=8.412、p<0.01)。甘さに対する欲求は、コントロール条件と処置条件の間で38%減少した(p<0.001、tAUC、図7D)。さらにまた、甘いスナックを欲求することにおける処置に対する時間の相互作用へのある傾向があった。つまり、VAS格付けへの時間の影響は、被験者が処置またはプラセボを与えられたかどうかに依存していた(F(11,231)=1.803、p=0.05)。甘いスナックに対する衝動は、朝食と昼食の間の全ての時点でコントロールに比べて処置群において低く、それは既に朝食後15分で開始していた。この衝動は午後の420分の時点でもより低かった(図7C)。
甘くて脂肪のあるスナックを欲求することに関する格付けへの処置の効果を図7Eに提示する(F(1,21)=5.198、p<0.05)。甘くて脂肪のあるものへの欲求は、コントロールに比べて処置群において36%減少した(p<0.05、tAUC、図7F)。甘くて脂肪のあるスナックへの衝動は、60、120、180分の時点と、また、昼食直前の285分でも、コントロールに比べて処置群においてより低かった(図7E)。
全てのスナックへの総合的欲求のANOVA解析は、処置の効果を明らかにした(F(1,21)=7.364、p<0.05、図7G)。個々の時点でのその後の解析は、処置が朝食後15、60、120、180、285、および420分での総合的欲求を減少させたことを示した(p<0.05)。全てのスナックへの欲求を合わせたものは、コントロールに比べて処置群において36%減少した(p<0.05、tAUC、図7H)。
フリースナックビュッフェからの食品摂取
22人の被験者の内、全員がテスト両日にスナックビュッフェから何かを食べた。コントロールに比べて緑色植物膜で処置後の、塩気のある食品アイテムのカロリー摂取が減少する強い傾向があり、中央値の差は65kcalであった(p=0.0547、図8)。処置条件とコントロール条件との間で、甘いスナックまたは甘くて脂肪のあるスナックの摂取あるいは総消費には有意差はなかった。
スナックビュッフェから食物を消費後に評価した、嗜好性食品に対する好み
アイテムを試食した被験者だけに、そのアイテムに対する好みを格付けすることを許可した。好みのスコア解析に含まれることになる各特定の食製品に関して、被験者は、コントロール日と処置日の両日にその製品を試食して、その製品に対する好みを格付けしなければならなかった。一人は、用紙に正しく記入しなかったので解析から除外した。緑色植物膜を用いる処置により、コントロール日に比べて、消費後の甘い製品への好みが低くなった(p<0.01、図9)。対照的に、塩気のある製品および甘くて脂肪のある製品に対する好みは、処置日とコントロール日との間で変わらなかった。コントロール日に比べて処置日で、全てのスナックに対する総合的好みに有意差はなかった(p=0.15、図9)。
3因子摂食質問表(TFEQ−R18V2)により測定される摂食行動
参加者は、摂食関連行動を特徴づける文章についての18個の質問の各々に対して、四点Likert尺度上で答えた。応答は、四点尺度(1〜4)でコード化され、より高い値はその行動がより多いことを示していた。3種類の行動カテゴリ−の各々の平均値は、情動性摂食領域2.27(+/−0.15)、認知的自制領域2.52(+/−0.15)、および非制御型摂食領域2.26(+/−0.10)であった。
欲求への処置効果と摂食行動のスコアとの間の相関
甘くて脂肪のあるスナックおよび全ての種類のスナックを欲求することへの処置効果は、情動性摂食スコアと正の相関を示した。従って、情動性摂食行動のスコアが高いことは、一般的に嗜好性食品、特に甘くて脂肪のある食品を欲求することに関する格付けへの緑色植物膜の処置効果が高くなることと相関していた(それぞれ、p<0.01、ピアソンr、図10AおよびB)。認知的自制領域および非制御型摂食領域は、処置効果と摂食行動スコアとの間に相関は全くなかった。
解析した別の相関
空腹感、満腹感、食品摂取、または好みに対する緑色植物膜の処置効果と様々な摂食行動スコアとの間に相関はなかった。BMIまたは体脂肪パーセンテージと摂食行動のスコアとの間に相関はなかったし、互いに異なる摂食行動スコア間にも何ら相関はなかった。
有害事象または副作用の報告もなかった。
考察
本実施例は、朝食前のチラコイドの摂取が、当日中の満腹感の主観的格付けを増加させ、そして、空腹感と共にスナックおよびスイーツに対する切望を減少させることを実証する。摂食行動スコアと相関させる場合、欲求への緑色植物膜の処置効果は、全てのスナック、具体的にターゲットとしている甘くて脂肪のある食品に対する情動性摂食と正に相関していた。チラコイドの摂取はまた、それを消費直後に点数付けされる、甘いものへの主観的好みを減少させた。
この実施例で見出されるチラコイドによる満腹感の促進は、まったく新しい知見である。これは朝食後60分で開始したが、初期満腹感シグナル伝達が向上したことを示唆する。また、処置群での満腹感の格付けは、プラセボと比べると、昼食後数時間でも高かった。この満腹感の向上は、ある初期の時点およびその後の時点の両時点での満腹感ホルモンCCKの分泌の増加により説明可能である。
処置は、当日ずっと空腹感の格付けへの減弱効果を有していた。満腹感の格付けに比較すると、空腹感の格付けの差は、満腹感が60分であることに比較して遅く、朝食後180分で有意に至った。空腹感に関する本知見は、緑色植物膜を用いる処置後の空腹感の格付けの減少に関する従前の知見を確認する。空腹感の抑制は、グレリンのレベルの減少と満腹感ホルモンCCKおよびGLP−1の血液循環中のレベルの増加の間接的効果と関係する可能性がある。空腹感の抑制が後に出現することは、満腹感ホルモンの促進へのチラコイドによる間接的効果を示唆する。
本試験では、満腹感の増加と空腹感の減少に加えて、緑色植物膜を用いる処置は、コントロールに比較して、全てのカテゴリーの嗜好性スナック(塩気のあるスナック、甘いスナック、および甘くて脂肪のあるスナックと共に全てのスナックを一緒にしたもの)に対する欲求も減少させた。本結果は、緑色植物膜を用いる処置が快楽的空腹感を直接抑制することを実証する。
如何なる理論にも拘束されるわけではないが、チラコイドによる快楽的空腹感の抑制は、報酬関連食欲ホルモンGLP−1のレベルが変化することの効果である可能性がある。
本試験では、相関解析は、情動性摂食行動のスコアが高かった個人が、嗜好性食品に対する欲求を減少させることへの緑色植物膜によるより大きな効果を有していたことを実証したが、このことは全く新しい知見である。情動性摂食は、男性よりも女性により一般的なものであり、特に、ストレス要因およびネガティブな感情に応答して、甘くて脂肪のある食品への切望と消費が増加することと関連していた。いくつかの試験は、摂食行動のタイプとBMIとの間の相関が情動性摂食行動に関して最も強く、そして、太りすぎの被験者においてより高いことを示していた。従って、情動的な摂食者における過剰摂食に対して具体的に影響を与えることが非常に重要である。
好みの減少に関する知見は重要である。というのは、甘さへの好みは甘味のある製品を欲求することに影響するからである。実際、太りすぎの女性は、甘いものに対する好みが増加していることを示していた。好みの減少は、甘いものに対する欲求の減少を経時的に引き起こす可能性がある。結果として、欲求の減少は、間食にスナックを食べることを減らし、従って、過剰摂食を減少させる場合がある。本試験では、処置は、他の種類のスナックと比較すると、甘いものに対する欲求をより多く減少させた。また、その開始もより早かった。甘いものに対する欲求は15分からそれ以降減少したが、それと比較すると、塩気のあるスナックおよび甘くて脂肪のあるスナックに対する欲求は、それぞれ、60分から減少した。このことは、緑色植物膜を用いる急性的な処置は、特に、甘さへの味覚を抑制することを暗示する。この感覚を標的とすることに関するメカニズムは知られていない。
本実施例は、緑色植物膜を用いる処置が空腹感(生体恒常性および快楽的なもの)と共に嗜好性食品に対する欲求および甘いものに対する好みを減弱することを示す。欲求を減らすことが重要であるのは、欲求が、過剰消費と肥満に寄与する快楽的摂食の主要な原因となるからである。また、肥満および/またはダイエット中の個人は快楽的空腹感にさらに感受性がより強い。従って、嗜好性食品に対する切望を減らすことが、食欲を制御し、体重増加を予防し、そして、永続的な体重喪失を容易にすることの全てに必要である。緑色植物膜を補給することは、間食を防ぐこと、従って、過剰摂食および長い目では太りすぎを防ぐことを助けることができる。

Claims (27)

  1. ヒトにおける嗜好性食品に対する衝動を減らすための単離チラコイドまたはその部分の使用であって、前記使用には単離チラコイドまたはその部分の摂取が含まれる、使用。
  2. 前記嗜好性食品が、以下の性質:
    − 少なくとも60、例えば、少なくとも70のグリセミック指数;
    − 飲料に関して少なくとも5重量%および他の食品に関して少なくとも20重量%、例えば、少なくとも50重量%の高糖含量;
    − 甘味料を含むこと;
    − 少なくとも20重量%の高脂肪含量および少なくとも20重量%の糖の高含量;
    − 少なくとも20重量%の高脂肪含量および少なくとも50のグリセミック指数;ならびに
    − 少なくとも20重量%の高脂肪含量および少なくとも1.0重量%の塩(NaCl)含量、の内一つまたはいくつかを有する、請求項1に記載の使用。
  3. 前記嗜好性食品が、以下の性質:
    − 飲料に関して少なくとも5重量%および他の食料品に関して少なくとも20重量%、例えば、少なくとも50重量%の高糖含量;ならびに
    − 少なくとも20%の高脂肪含量および少なくとも20重量%の糖の高含量、の少なくとも一つを有していて、
    前記嗜好性食品中に含まれる前記糖が、単糖類であるグルコース、フルクトース、およびガラクトース、二糖類であるスクロース、マルトース、およびラクトース、ならびにその混合物からなる群より選択される、請求項2に記載の使用。
  4. ヒトにおける単離チラコイドまたはその部分の使用であって、前記使用には、
    − 喫煙することの必要性を減らすため;
    − ニコチンに対する必要性を減らすため;
    − 人々がニコチン製品を使用するのを止めようとすること、例えば喫煙を止めることを容易にするため;
    − 禁煙における;および/または
    − ニコチン製品の使用量を減らすための、単離チラコイドまたはその部分の摂取が含まれる、使用。
  5. 請求項1〜3のいずれか一項に記載および請求項4に記載の使用。
  6. ヒトにおける単離チラコイドまたはその部分の使用であって、前記使用には、
    − アルコール飲料に対する衝動を減らすため;
    − アルコール飲料の消費を低下させるため;および/または
    − アルコールの乱用を減らすための、単離チラコイドまたはその部分の摂取が含まれる、使用。
  7. GLP−1(グルカゴン様ペプチド1)の放出が単離チラコイドまたはその部分の前記使用により増加する、請求項1〜6のいずれか一項に記載の使用。
  8. 脳の報酬中枢に作用する嗜好性食品、ニコチン、および/またはアルコールの報酬作用が単離チラコイドまたはその部分の前記使用により減少する、請求項1〜7のいずれか一項に記載の使用。
  9. 前記単離チラコイドまたはその部分が植物の緑葉または緑藻類から単離された;好ましくは、前記チラコイドまたはその部分が、クローバー、セイヨウアブラナ、テンサイ、タンポポ、シロイヌナズナ、トウモロコシ、タバコ、ヒマワリ、アカザ、アトリプレックス、ホウレンソウ、マンゴールド、キノア、ケール、テンサイ、およびイネ科草本の葉から単離された;より好ましくは、前記チラコイドがホウレンソウから単離された、請求項1〜8のいずれか一項に記載の使用。
  10. 使用される前記単離チラコイドまたはその部分が栄養補助食品組成物の必須部分である、請求項1〜9のいずれか一項に記載の使用。
  11. 前記栄養補助食品組成物中の前記単離チラコイドの含量が、前記組成物1g(乾燥重量)当たり約10〜約50mgのクロロフィルのクロロフィル含量に対応し;
    好ましくは前記栄養補助食品組成物の炭水化物含量が、前記栄養補助食品組成物100g(乾燥重量)当たり5〜50gの炭水化物であり;および/または前記栄養補助食品組成物のタンパク質含量が、前記栄養補助食品組成物100g(乾燥重量)当たり10〜60gのタンパク質である、請求項10に記載の使用。
  12. 前記栄養補助食品組成物が、単離チラコイドまたはその部分を含む生理学的に許容可能な水中油型エマルジョンを含む、請求項10または11に記載の使用。
  13. 前記栄養補助食品組成物が、プロバイオティクス細菌および、任意に、プレバイオティクス剤を含む、請求項10〜12のいずれか一項に記載の使用。
  14. 嗜好性食品、例えば、請求項2または3のいずれか一項に記載の嗜好性食品、ならびに、任意に、ニコチンおよび/またはアルコールの報酬作用を減少させるための、単離チラコイドまたはその部分の使用。
  15. 前記単離チラコイドまたはその部分が植物の緑葉または緑藻類から単離された;好ましくは、前記チラコイドまたはその部分が、クローバー、セイヨウアブラナ、テンサイ、タンポポ、シロイヌナズナ、トウモロコシ、タバコ、ヒマワリ、アカザ、アトリプレックス、ホウレンソウ、マンゴールド、キノア、ケール、テンサイ、およびイネ科草本の葉から単離された;より好ましくは、前記チラコイドがホウレンソウから単離された、請求項14に記載の使用。
  16. 使用される前記単離チラコイドまたはその部分が栄養補助食品組成物の必須部分である、請求項14または15のいずれか一項に記載の使用。
  17. 前記栄養補助食品組成物中の前記単離チラコイドの含量が、前記組成物1g(乾燥重量)当たり約10〜約50mgのクロロフィルのクロロフィル含量に対応し;
    好ましくは前記栄養補助食品組成物の炭水化物含量が、前記栄養補助食品組成物100g(乾燥重量)当たり5〜50gの炭水化物であり;および/または前記栄養補助食品組成物のタンパク質含量が、前記栄養補助食品組成物100g(乾燥重量)当たり10〜60gのタンパク質である、請求項16に記載の使用。
  18. 前記栄養補助食品組成物が、単離チラコイドまたはその部分を含む生理学的に許容可能な水中油型エマルジョンを含む、請求項16または17に記載の使用。
  19. 前記栄養補助食品組成物が、プロバイオティクス細菌および、任意に、プレバイオティクス剤を含む、請求項16〜18のいずれか一項に記載の使用。
  20. 前記報酬作用が、GLP−1(グルカゴン様ペプチド1)の放出を増加させることにより減少する、請求項14〜19のいずれか一項に記載の使用。
  21. 快楽的空腹感を減少させるための、単離チラコイドまたはその部分の使用。
  22. 前記単離チラコイドまたはその部分が植物の緑葉または緑藻類から単離された;好ましくは、前記チラコイドまたはその部分が、クローバー、セイヨウアブラナ、テンサイ、タンポポ、シロイヌナズナ、トウモロコシ、タバコ、ヒマワリ、アカザ、アトリプレックス、ホウレンソウ、マンゴールド、キノア、ケール、テンサイ、およびイネ科草本の葉から単離された;より好ましくは、前記チラコイドがホウレンソウから単離された、請求項21に記載の使用。
  23. 使用される前記単離チラコイドまたはその部分が栄養補助食品組成物の必須部分である、請求項21または22のいずれか一項に記載の使用。
  24. 前記栄養補助食品組成物中の前記単離チラコイドの含量が、前記組成物1g(乾燥重量)当たり約10〜約50mgのクロロフィルのクロロフィル含量に対応し;
    好ましくは前記栄養補助食品組成物の炭水化物含量が、前記栄養補助食品組成物100g(乾燥重量)当たり5〜50gの炭水化物であり;および/または前記栄養補助食品組成物のタンパク質含量が、前記栄養補助食品組成物100g(乾燥重量)当たり10〜60gのタンパク質である、請求項23に記載の使用。
  25. 前記栄養補助食品組成物が、単離チラコイドまたはその部分を含む生理学的に許容可能な水中油型エマルジョンを含む、請求項23または24に記載の使用。
  26. 前記栄養補助食品組成物が、プロバイオティクス細菌および、任意に、プレバイオティクス剤を含む、請求項23〜25のいずれか一項に記載の使用。
  27. 前記快楽的空腹感が、GLP−1(グルカゴン様ペプチド1)の放出を増加させることにより減少する、請求項21〜26のいずれか一項に記載の使用。

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