JP2017221121A - 非アルコール性脂肪性肝疾患の非ヒトモデル動物 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】非ヒト動物にタンパク質を実質的に含有しないことを特徴とするコリン不含・L−アミノ酸規定(CDAA)飼料を与えて飼育することにより、非アルコール性脂肪性肝疾患(NAFLD)の非ヒトモデル動物を作製する。
【選択図】なし
Description
[1]非ヒト動物にコリン不含・L−アミノ酸規定(CDAA)飼料を与えて飼育する工程を含む、非アルコール性脂肪性肝疾患(NAFLD)の非ヒトモデル動物を作製する方法であって、
前記CDAA飼料が、タンパク質を実質的に含有しないことを特徴とする、方法。
[2]前記非ヒト動物が、霊長類、げっ歯類、食肉類および偶蹄類からなる群より選択される哺乳類目の動物である、[1]に記載の方法。
[3]前記非ヒト動物がブタである、[1]または[2]に記載の方法。
[4][1]〜[3]のいずれかに記載の方法により作製される、非アルコール性脂肪性肝疾患(NAFLD)の非ヒトモデル動物。
[5]以下の所見(1)〜(6)の少なくとも1つを示す、非アルコール性脂肪性肝疾患(NAFLD)の非ヒト動物モデル:
(1)血中総コレステロール濃度の低下
(2)血中アルブミン濃度の低下
(3)ヘパプラスチンテスト(HPT)の値の低下
(4)血中IV型コラーゲン濃度の上昇
(5)血中アラニンアミノトランスフェラーゼ(ALT)濃度の上昇
(6)血中ヒアルロン酸濃度の上昇。
[6]非ヒト動物において非アルコール性脂肪性肝疾患(NAFLD)を惹起するために用いられる、タンパク質を実質的に含有しない、コリン不含・L−アミノ酸規定(CDAA)飼料。
(1)血中総コレステロール濃度の低下
(2)血中アルブミン濃度の低下
(3)ヘパプラスチンテスト(HPT)の値の低下
(4)血中IV型コラーゲン濃度の上昇
(5)血中アラニンアミノトランスフェラーゼ(ALT)濃度の上昇
(6)血中ヒアルロン酸濃度の上昇。
なお、本明細書においては、上記所見(1)〜(6)を総称して、「NAFLDの所見」と称する場合がある。
マイクロミニブタを用いて、以下の手順でNAFLDの非ヒトモデル動物を作製した。
上記のように飼育された各マイクロミニブタ群について、NAFLDの臨床病態の検討を行った。NAFLDの臨床病態としては、ヒトのNAFLDを診断する指標を参考にして、以下の項目(1)〜(6)を設定した(NAFLDの所見)。
(1)血中総コレステロール濃度の低下
(2)血中アルブミン濃度の低下
(3)ヘパプラスチンテスト(HPT)の値の低下
(4)血中IV型コラーゲン濃度の上昇
(5)血中アラニンアミノトランスフェラーゼ(ALT)濃度の上昇
(6)血中ヒアルロン酸濃度の上昇。
実施例1において記載された、通常飼料MP−Aによる一週間程度の馴化期間は、NAFLDの病態は認められなかった。従って、馴化期間終了後のマイクロミニブタ6個体について、採血を行い血清を得、得られた血清試料を用いて、以下の(1)〜(6)の各項目について測定を行い、その測定値を「標準値」とした。
(1)血中総コレステロール濃度
(2)血中アルブミン濃度
(3)ヘパプラスチンテスト(HPT)の値
(4)血中IV型コラーゲン濃度
(5)血中アラニンアミノトランスフェラーゼ(ALT)濃度
(6)血中ヒアルロン酸濃度
(1)血中総コレステロール濃度については、コレステロール脱水素酵素(UV)法を用いて測定した。
(2)血中アルブミン濃度については、ネフェロメトリー(BCP改良法)を用いて測定した。
(3)ヘパプラスチンテスト(HPT)値については、凝固時間測定を用いて測定した。
(4)血中IV型コラーゲン濃度については、Type IV collagen ELISA kit, ACB(フナコシ株式会社製)を用いて測定した。
(5)血中アラニンアミノトランスフェラーゼ(ALT)濃度については、JSCC標準化対応法を用いて測定した。
(6)血中ヒアルロン酸濃度については、ラテックス凝集免疫比濁法を用いて測定した。
各個体の標準値と、タンパク質を実質的に含有しないCDAA飼料で飼育開始後16週までの、上記(1)〜(6)の項目の経時的な変化を表3に示す。
上記(1)〜(6)各項目について、通常飼料でMP−Aで一週間程度飼育(馴化)した時点での測定値(標準値)と、タンパク質を実質的に含有しないCDAA飼料を給餌後16週間までの、2週間ごとの測定値とを比較した結果を表4に示す。
6個体のマイクロミニブタのうちの1個体(個体番号:3)について、肝臓組織を取り出して生検写真を得た。生検写真を図1に示す。
Claims (6)
- 非ヒト動物にコリン不含・L−アミノ酸規定(CDAA)飼料を与えて飼育する工程を含む、非アルコール性脂肪性肝疾患(NAFLD)の非ヒトモデル動物を作製する方法であって、
前記CDAA飼料が、タンパク質を実質的に含有しないことを特徴とする、方法。 - 前記非ヒト動物が、霊長類、げっ歯類、食肉類および偶蹄類からなる群より選択される哺乳類目の動物である、請求項1に記載の方法。
- 前記非ヒト動物がブタである、請求項1または2に記載の方法。
- 請求項1〜3のいずれか一項に記載の方法により作製される、非アルコール性脂肪性肝疾患(NAFLD)の非ヒトモデル動物。
- 以下の所見(1)〜(6)の少なくとも1つを示す、非アルコール性脂肪性肝疾患(NAFLD)の非ヒト動物モデル:
(1)血中総コレステロール濃度の低下
(2)血中アルブミン濃度の低下
(3)ヘパプラスチンテスト(HPT)の値の低下
(4)血中IV型コラーゲン濃度の上昇
(5)血中アラニンアミノトランスフェラーゼ(ALT)濃度の上昇
(6)血中ヒアルロン酸濃度の上昇。 - 非ヒト動物において非アルコール性脂肪性肝疾患(NAFLD)を惹起するために用いられる、タンパク質を実質的に含有しない、コリン不含・L−アミノ酸規定(CDAA)飼料。
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