JP2016190814A

JP2016190814A - Calcium permeation promoter

Info

Publication number: JP2016190814A
Application number: JP2015072032A
Authority: JP
Inventors: 佐藤　敬; Takashi Sato; 敬佐藤; 仁人鍔田; Masahito Tsubata; 高垣　欣也; Kinya Takagaki; 欣也高垣; 艶梅李; Yan Mei Lee; 啓介園田; Keisuke Sonoda
Original assignee: Toyo Shinyaku Co Ltd
Current assignee: Toyo Shinyaku Co Ltd
Priority date: 2015-03-31
Filing date: 2015-03-31
Publication date: 2016-11-10

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a new calcium permeation promoter having excellent calcium permeability.SOLUTION: The present invention provides a calcium permeation promoter comprising plants belonging to Polypodiaceae.SELECTED DRAWING: Figure 1

Description

本発明は、カルシウム透過能を向上させるカルシウム透過促進剤に関する。 The present invention relates to a calcium permeation enhancer that improves calcium permeability.

骨の主成分であるカルシウムは主要なミネラル成分であり、生体において重要な役割を果たす。骨は、絶えず壊れて吸収され、そして新しく生まれ変わる。この現象をリモデリングという。健常人では一般に、骨吸収と骨形成とのバランスがとれている。しかしながら、カルシウムの吸収能が低下し、当該バランスが崩れると、骨量の減少を生じ、結果として骨由来の疾患をもたらす。従って、カルシウムの吸収能や透過性を向上させることは、非常に重要である。 Calcium, the main component of bone, is a major mineral component and plays an important role in the living body. Bone is constantly broken and absorbed and reborn. This phenomenon is called remodeling. Healthy individuals generally have a balance between bone resorption and bone formation. However, when the ability to absorb calcium is reduced and the balance is lost, bone mass is reduced, resulting in bone-derived diseases. Therefore, it is very important to improve calcium absorption and permeability.

消化管でのカルシウム吸収機構として、主に二つが知られている（下記非特許文献１〜３を参照）。一つ目は小腸カルシウム・トランスポーターTRPV6によるカルシウム吸収である。TRPV6は活性型ビタミンＤによって発現が亢進することが報告されており、ビタミンＤ摂取におけるカルシウム吸収亢進の要因であることが知られている。二つ目は腸管上皮細胞間質を通じたカルシウム吸収であり、ピペリンや短鎖脂肪酸による腸管上皮細胞間質の拡大がカルシウムなどのミネラル吸収を亢進することが報告されている。 There are mainly two known calcium absorption mechanisms in the digestive tract (see Non-Patent Documents 1 to 3 below). The first is calcium absorption by the small intestine calcium transporter TRPV6. TRPV6 has been reported to be upregulated by active vitamin D, and is known to be a factor in enhancing calcium absorption upon vitamin D intake. The second is calcium absorption through the intestinal epithelial cell stroma, and it has been reported that expansion of the intestinal epithelial cell stroma by piperine or short-chain fatty acids enhances absorption of minerals such as calcium.

カルシウム吸収能を向上させる物質として、例えば、カゼインホスホペプチド（ＣＰＰ）が開発されている。ＣＰＰは、カゼインにトリプシンを作用させて、加水分解した分解物中に得られるホスホペプチドであり、カルシウムと結合して可溶性複合体を形成する。この為、水溶液中でカルシウムが沈殿するのを抑制することによってカルシウムを可溶化し、カルシウムの吸収率を高めると考えられている（下記特許文献１及び２を参照）。 For example, casein phosphopeptide (CPP) has been developed as a substance that improves calcium absorption capacity. CPP is a phosphopeptide obtained in the hydrolyzate by allowing trypsin to act on casein, and binds to calcium to form a soluble complex. For this reason, it is considered that calcium is solubilized by suppressing the precipitation of calcium in an aqueous solution and the absorption rate of calcium is increased (see Patent Documents 1 and 2 below).

特開昭５８−１７０４４０号公報JP 58-170440 A 特開平７−２４１１７２号公報JP-A-7-241172

Prakash UN et. al., “Enhanced intestinal uptake of iron, zinc and calcium in rats fed pungent spice principles-piperine, capsaicin and ginger (Zingiber officinale), J Trace Elem Med Biol., Vol. 27(3), pp. 184-190, July, 2013Prakash UN et.al., “Enhanced intestinal uptake of iron, zinc and calcium in rats fed pungent spice principles-piperine, capsaicin and ginger (Zingiber officinale), J Trace Elem Med Biol., Vol. 27 (3), pp. 184-190, July, 2013 Hiroko Isoda et. al., “Effects of capsaicin on human intestinal cell line Caco-2”, Cytotechnology, Vol. 36(1-3), pp. 155-161, July, 2001Hiroko Isoda et. Al., “Effects of capsaicin on human intestinal cell line Caco-2”, Cytotechnology, Vol. 36 (1-3), pp. 155-161, July, 2001 Akiko Fukushima et. al., “Short-Chain Fatty Acids Induce Intestinal Transient Receptor Potential Vanilloid Type 6 Expression in Rats and Caco-2 Cells”, The Journal of Nutrition, Vol. 139(1), pp. 20-25, January 2013Akiko Fukushima et. Al., “Short-Chain Fatty Acids Induce Intestinal Transient Receptor Potential Vanilloid Type 6 Expression in Rats and Caco-2 Cells”, The Journal of Nutrition, Vol. 139 (1), pp. 20-25, January 2013

本発明は、カルシウム透過能の優れた、新たなカルシウム透過促進剤を提供することを目的とする。 An object of the present invention is to provide a new calcium permeation accelerator having excellent calcium permeability.

本発明者らは、袴裏星が優れたカルシウム透過促進能を有することを発見した。 The present inventors have found that dwarf stars have excellent calcium permeation promoting ability.

脂肪細胞中のカルシウム濃度が上昇することにより新陳代謝が促進されることが知られている。本件の袴裏星による腸管からのカルシウム透過促進作用により、脂肪細胞中のカルシウム濃度が上昇し、脂肪細胞の活性が高まることで、新陳代謝促進がもたらされる。 It is known that metabolism is promoted by increasing the calcium concentration in fat cells. The promotion of calcium permeation from the intestinal tract by the cometary star of the present case increases the calcium concentration in the adipocytes and increases the activity of the adipocytes, thereby promoting metabolism.

また、血中のカルシウム濃度が上昇することで血圧が低下することが知られている。本件の袴裏星による腸管からのカルシウム透過促進作用により、血中のカルシウム濃度が上昇することで、血圧の低下がもたらされる。 It is also known that blood pressure decreases as the calcium concentration in the blood increases. The action of promoting the calcium permeation from the intestinal tract by the cometary star in this case leads to a decrease in blood pressure by increasing the calcium concentration in the blood.

袴裏星は、カルシウムの透過性を向上乃至は促進させる。従って、袴裏星を含有する剤は、例えばカルシウム不足、年齢又は性差による骨に起因する疾病を予防し乃至は改善し有用であり、また上記骨に起因する疾病に罹った又はその可能性のある者に対して有用である。また、袴裏星は、脂肪細胞中のカルシウム濃度の上昇により、脂肪細胞の活性を高める。従って、袴裏星を含有する剤は、新陳代謝を促進するのに有用であり、また新陳代謝の低下に罹った又はその可能性のある者に対して有用である。さらに、袴裏星は、血中のカルシウム濃度上昇により、血圧の低下をもたらす。従って、袴裏星を含有する剤は、血圧低下に有用であり、また高血圧に罹った又はその可能性のある者に対して有用である。 Dwarf stars improve or promote calcium permeability. Therefore, an agent containing dwarf stars is useful for preventing or improving diseases caused by bone due to, for example, calcium deficiency, age or sex, and suffering from or possibly having the disease caused by bone. Useful for some people. In addition, the dwarf stars enhance the activity of adipocytes by increasing the calcium concentration in the adipocytes. Thus, agents containing dwarf stars are useful for promoting metabolism and are useful for those suffering from or possibly having a decrease in metabolism. Furthermore, comet stars cause a drop in blood pressure due to an increase in blood calcium concentration. Accordingly, agents containing dwarf stars are useful for lowering blood pressure and are useful for those suffering from or possibly having high blood pressure.

カルシウムの透過量を示す図である。It is a figure which shows the permeation amount of calcium.

袴裏星は、ウラボシ科に属する植物である。本発明で用いる袴裏星の使用部位としては、例えば茎、葉、花、根が挙げられる。根の中でも、特に根茎が好ましく、根茎の鱗片を除去したものがより好ましい。 A dwarf star is a plant belonging to the family Laboraceae. Examples of the use site of the cocoon star used in the present invention include stems, leaves, flowers, and roots. Among the roots, rhizomes are particularly preferable, and those obtained by removing the rhizome scales are more preferable.

袴裏星としては、袴裏星の植物体に粉砕、抽出、乾燥から選ばれる１又は２以上の加工を施した加工物が好ましい。好ましい加工物としては、植物体を乾燥させて得られる乾燥物、植物体をそのまま又は加工後に粉砕して得られる植物体の粉砕物、或いは、植物体をそのまま又は加工後に水及び／又は有機溶媒で抽出して得られる抽出物を挙げることができる。ここでいう加工とは、加熱、乾燥、粉砕、圧搾から選ばれる少なくとも１つの処理が挙げられる。これらの加工物は単独、混合のいずれでも使用できる。 As the dwarf star, a processed product obtained by subjecting a dwarf star plant to one or more processes selected from pulverization, extraction, and drying is preferable. As a preferable processed product, a dried product obtained by drying a plant body, a pulverized plant body obtained by pulverizing the plant body as it is or after processing, or water and / or an organic solvent as it is or after processing the plant body The extract obtained by extracting with can be mentioned. The processing referred to here includes at least one treatment selected from heating, drying, pulverization, and pressing. These workpieces can be used either alone or in combination.

袴裏星の植物体の抽出物を得る場合の溶媒としては、水又は有機溶媒が選ばれる。水を用いる場合には温水又は熱水が用いられる。抽出に用いる有機溶媒としては、通常使用される有機溶媒であればよく、例えば、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、ブタン、アセトン、ヘキサン、シクロヘキサン、プロピレングリコール、含水エタノール、含水プロピレングリコール、エチルメチルケトン、グリセリン、酢酸メチル、酢酸エチル、ジエチルエーテル、ジクロロメタン、食用油脂、１，１，１，２−テトラフルオロエタン、１，１，２−トリクロロエテンが好ましく用いられる。これらの水及び有機溶媒は単独で用いてもよいし、２種以上を組み合わせて用いてもよい。特に、例えば熱水、含水エタノール又は含水プロピレングリコールが好ましく用いられうる。 Water or an organic solvent is selected as a solvent for obtaining an extract of a dwarf star plant. When water is used, warm water or hot water is used. The organic solvent used for the extraction may be a commonly used organic solvent, for example, methanol, ethanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, butane, acetone, hexane, cyclohexane, propylene. Glycol, water-containing ethanol, water-containing propylene glycol, ethyl methyl ketone, glycerin, methyl acetate, ethyl acetate, diethyl ether, dichloromethane, edible fats and oils, 1,1,1,2-tetrafluoroethane, 1,1,2-trichloroethene Preferably used. These water and organic solvent may be used independently and may be used in combination of 2 or more type. In particular, for example, hot water, water-containing ethanol or water-containing propylene glycol can be preferably used.

袴裏星の植物体の抽出物を得るための抽出方法は特に制限はないが、例えば、加温抽出法、又は超臨界流体抽出法が用いられうる。 The extraction method for obtaining the extract of the dwarf star plant is not particularly limited, and for example, a warm extraction method or a supercritical fluid extraction method may be used.

超臨界流体抽出法とは、物質の気液の臨界点（臨界温度、臨界圧力）を超えた状態の流体である超臨界流体を用いて抽出を行う方法である。超臨界流体としては、例えば二酸化炭素、エチレン、プロパン、又は亜酸化窒素（笑気ガス）が用いられるが、二酸化炭素が好ましく用いられうる。 The supercritical fluid extraction method is a method of performing extraction using a supercritical fluid that is a fluid that exceeds the critical point (critical temperature, critical pressure) of a gas-liquid substance. As the supercritical fluid, for example, carbon dioxide, ethylene, propane, or nitrous oxide (laughing gas) is used, but carbon dioxide can be preferably used.

超臨界流体抽出法では、目的成分を超臨界流体によって抽出する抽出工程と、目的成分と超臨界流体を分離する分離工程とを行う。分離工程では、圧力変化による抽出分離、温度変化による抽出分離、吸着剤や吸収剤を用いた抽出分離のいずれを行ってもよい。 In the supercritical fluid extraction method, an extraction process for extracting a target component with a supercritical fluid and a separation process for separating the target component and the supercritical fluid are performed. In the separation step, any one of extraction separation by pressure change, extraction separation by temperature change, and extraction separation using an adsorbent or an absorbent may be performed.

また、エントレーナー添加法による超臨界流体抽出を行ってもよい。この方法は、抽出流体に、例えば、エタノール、プロパノール、ｎ−ヘキサン、アセトン、トルエン、その他の脂肪族低級アルコール類、脂肪族炭化水素類、芳香族炭化水素類、ケトン類を２〜２０Ｗ／Ｖ％程度添加し、この流体を用いて超臨界流体抽出を行うことによって、目的とする抽出物の抽出溶媒に対する溶解度を飛躍的に上昇させる、あるいは分離の選択性を増強させる方法であり、効率的な抽出物を得る方法である。 Moreover, you may perform supercritical fluid extraction by the entrainer addition method. In this method, for example, ethanol, propanol, n-hexane, acetone, toluene, other aliphatic lower alcohols, aliphatic hydrocarbons, aromatic hydrocarbons, and ketones are added to the extraction fluid in an amount of 2 to 20 W / V. It is a method that drastically increases the solubility of the target extract in the extraction solvent or enhances the separation selectivity by performing supercritical fluid extraction using this fluid. It is a method to obtain a simple extract.

超臨界流体抽出法は、比較的低い温度で操作できるために、高温で変質や分解する物質にも適用できるという利点、抽出流体が残留しないという利点、溶媒の循環利用が可能である。それ故に、超臨界流体抽出法は例えば、脱溶媒工程が省略でき、工程がシンプルになるという利点をもたらす。 Since the supercritical fluid extraction method can be operated at a relatively low temperature, it can be applied to substances that are altered or decomposed at a high temperature, the advantage that the extraction fluid does not remain, and the recycling of the solvent is possible. Therefore, the supercritical fluid extraction method has an advantage that, for example, the desolvation step can be omitted, and the process becomes simple.

また、袴裏星の植物体の抽出物を得るための植物体からの抽出方法は、上述の抽出法以外に、例えば液体二酸化炭素回分法、液体二酸化炭素還流法、又は超臨界二酸化炭素還流法の方法によって行ってもよい。 Moreover, the extraction method from the plant body for obtaining the extract of the plant body of dwarf stars is, for example, a liquid carbon dioxide batch method, a liquid carbon dioxide reflux method, or a supercritical carbon dioxide reflux method other than the above-described extraction method. You may carry out by the method of.

袴裏星の植物体の抽出物を得るための抽出方法は、複数の抽出方法を組み合わせてもよい。複数の抽出方法を組み合わせることにより、種々の組成の抽出物を得ることが可能となる。 A plurality of extraction methods may be combined as an extraction method for obtaining an extract of a dwarf star plant body. By combining a plurality of extraction methods, it is possible to obtain extracts having various compositions.

袴裏星の植物体からの抽出物は、限外濾過、あるいは吸着性担体（例えばダイヤイオンＨＰ−２０、Ｓｅｐｈａｄｅｘ−ＬＨ２０、又はキチン）を用いたカラム法またはバッチ法などにより、精製を行うことが安全性の面から好ましい。また、必要に応じて、減圧濃縮、凍結乾燥などの方法により濃縮または乾燥して、液状、ペースト状、または粉末状（抽出物粉末）、細粒状、顆粒状としてもよい。袴裏星の抽出物の袴裏星の加工物は、粉末状、細粒状、顆粒状であることが好ましい。 Extracts from dwarf star plants should be purified by ultrafiltration or column method or batch method using adsorptive carrier (eg Diaion HP-20, Sephadex-LH20, or chitin). Is preferable from the viewpoint of safety. Further, if necessary, it may be concentrated or dried by a method such as vacuum concentration or freeze-drying to obtain a liquid, paste, powder (extract powder), fine granule, or granule. It is preferable that the processed product of the dwarf star extract is in the form of powder, fine particles, or granules.

袴裏星の原料は例えば、市販品として入手可能である。 The raw material of the dwarf star is available as a commercial product, for example.

本発明に従うカルシウム透過促進剤の形態としては特に限定されず、任意の形態とすることができる。例えば、経口用の形態としては、例えば、経口的な使用に適した形態、具体的には、顆粒状、粉末状、タブレット状、チュアブル状、カプセル状、液状又はシロップ状などの各形態が挙げられる。 It does not specifically limit as a form of the calcium-permeation promoter according to this invention, It can be set as arbitrary forms. For example, the oral form includes, for example, forms suitable for oral use, specifically, granular, powder, tablet, chewable, capsule, liquid or syrup forms. It is done.

本発明に従うカルシウム透過促進剤は必要に応じて、当技術分野で通常用いられる賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、若しくは矯臭剤又はそれらの組み合わせも含みうる。賦形剤は例えば、糖類（例えば、スクロース、乳糖、糖アルコール）、澱粉、若しくはデキストリン又はそれらの組み合わせでありうるが、これらに限定されるものでない。結合剤は例えば、蜂蜜、米澱粉、若しくはトラガント又はそれらの組み合わせでありうるが、これらに限定されるものでない。崩壊剤は例えば、でんぷん若しくはセルロース類又はそれらの組み合わせでありうるが、これらに限定されるものでない。滑沢剤は例えば、ワックス（例えば、ステアリン酸マグネシウム）、若しくはタルク又はそれらの組み合わせでありうるが、これらに限定されるものでない。着色剤は、天然又は合成由来の任意の着色料でありうる。矯味剤は例えば、糖類（例えば、スクロース、乳糖、糖アルコール）でありうるが、これらに限定されるものでない。矯臭剤は例えば、メントールでありうるが、これらに限定されるものでない。賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色、矯味、又は矯臭の含有量は、当技術分野の当業者に知られている。 The calcium permeation enhancer according to the present invention may optionally contain excipients, binders, disintegrants, lubricants, colorants, flavoring agents, or flavoring agents or combinations thereof commonly used in the art. . The excipient can be, but is not limited to, for example, a saccharide (eg, sucrose, lactose, sugar alcohol), starch, or dextrin, or a combination thereof. The binder can be, for example, honey, rice starch, or tragacanth, or a combination thereof, but is not limited thereto. The disintegrant can be, for example, starch or celluloses or combinations thereof, but is not limited thereto. The lubricant can be, for example, but not limited to, wax (eg, magnesium stearate), or talc or a combination thereof. The colorant can be any colorant of natural or synthetic origin. The corrigent can be, for example, a saccharide (eg, sucrose, lactose, sugar alcohol), but is not limited thereto. The flavoring agent can be, for example, menthol, but is not limited thereto. The content of excipients, binders, disintegrants, lubricants, coloring, flavoring, or flavoring is known to those skilled in the art.

本発明に従うカルシウム透過促進剤は、袴裏星以外のカルシウム透過を促進する効果を有する化合物や剤を含みうる。当該化合物や剤は例えば、魚の骨、貝殻、サンゴカルシウム、乳酸カルシウム、炭酸カルシウム、塩化カルシウムといったカルシウム剤、ダイフラクトースアンハイドライドIII（ＤＦＡIII）、フラクトオリゴ糖（ＦＯＳ）、カゼインホスホペプチド（ＣＰＰ）、クエン酸リンゴ酸（ＣＣＭ）、クエン酸リンゴ酸カルシウム、乳糖、ビタミンＤ、ビタミンＫ、大豆イソフラボン、若しくはコラーゲン又はそれらの組み合わせでありうるが、これらに限定されるものでない。 The calcium permeation enhancer according to the present invention may include a compound or agent having an effect of promoting calcium permeation other than dwarf stars. Such compounds and agents include, for example, fish agents such as fish bones, shells, coral calcium, calcium lactate, calcium carbonate, calcium chloride, difructose anhydride III (DFAIII), fructooligosaccharide (FOS), casein phosphopeptide (CPP), quencher It can be, but is not limited to, acid malic acid (CCM), calcium citrate malate, lactose, vitamin D, vitamin K, soy isoflavone, or collagen or combinations thereof.

本発明に従うカルシウム透過促進剤は、袴裏星を、例えばその最終製品当たり、通常０．０１〜３０重量％、好ましくは０．０５〜２０重量％、更に好ましくは０．１〜１０重量％の量で含みうる。 The calcium permeation enhancer according to the present invention comprises cocoon stars, for example, generally 0.01 to 30% by weight, preferably 0.05 to 20% by weight, more preferably 0.1 to 10% by weight, based on the final product. May be included in quantity.

本発明に従うカルシウム透過促進剤は例えば、一日当たり例えば１回乃至は３回、例えば食前、食後又は就寝前に摂取しうるが、これらに限定されるものでない。 The calcium permeation enhancer according to the present invention can be taken, for example, 1 to 3 times per day, for example, before meals, after meals or before going to bed, but is not limited thereto.

以下、実施例を挙げて本発明をより具体的に解説するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。 EXAMPLES Hereinafter, although an Example is given and this invention is demonstrated more concretely, this invention is not limited to these Examples.

袴裏星抽出物のカルシウム透過促進作用を、単層CACO-2に対するカルシウム透過性により評価した。当該評価の試験を、以下の方法に従って行った。 Calcium permeation promoting effect of dwarf star extract was evaluated by calcium permeability to monolayer CACO-2. The test for the evaluation was performed according to the following method.

（袴裏星抽出物の調製）
袴裏星抽出物は、以下の方法に従い調製した。袴裏星（ＢＧＧＪａｐａｎ株式会社社より入手）に超純水を加えて、100及び30mg/mLの各濃度に調製した。更に、上記各濃度に調製した袴裏星抽出物をHBSS-HEPES-Ca bufferに加えて、最終濃度100、及び30μg/mLの各袴裏星抽出物（被検物質溶液）を調製した。当該袴裏星抽出物は、調整後、即日使用した。対照として、袴裏星抽出物の代わりに超純水をHBSS-HEPES-Ca bufferに加えた培地を使用した。 (Preparation of dwarf star extract)
The dwarf star extract was prepared according to the following method. Ultra-pure water was added to Samurai Star (obtained from BGG Japan Co., Ltd.) to prepare concentrations of 100 and 30 mg / mL. Further, the comet extract extracted to each concentration was added to HBSS-HEPES-Ca buffer to prepare each comet extract (test substance solution) at a final concentration of 100 and 30 μg / mL. The dwarf star extract was used on the same day after adjustment. As a control, a medium in which ultrapure water was added to HBSS-HEPES-Ca buffer instead of the dwarf star extract was used.

（試験方法）
ＰＯＣＡ（登録商標：Point Of Cell Assay）小腸吸収CACO-2（以下、単層CACO-2という）（型番DSPOCA001-ZS：ＤＳファーマバイオメディカル株式会社）を入手後速やかに、5% ＣＯ_２インキュベーター（ASTEC）に静置した。単層CACO-2の培養してあるtranswell filter chanber（コーニンング社、ポアサイズ0.4 μm、ポリカーボネート製）のapical side（100μL）およびマルチウェル側のbasal side（600μL）をHBSS-HEPESバッファで置換し、20分間5% ＣＯ₂インキュベーター内で静置した。apical sideのHBSS-HEPESバッファを吸引除去し、100μL被検物質溶液および対照溶液を加えて、上記ウェルプレートを２４時間、上記ＣＯ_２インキュベーターに静置した。5% ＣＯ_２インキュベーターから上記ウェルプレートを取り出し、basal side培地を回収し、以下の方法に従いカルシウム濃度の測定を行った。 (Test method)
Immediately after obtaining POCA (registered trademark: Point Of Cell Assay) small intestine absorption CACO-2 (hereinafter referred to as single layer CACO-2) (model number DSPOCA001-ZS: DS Pharma Biomedical Co., Ltd.), 5% CO ₂ incubator ( ASTEC). Replace the apical side (100 μL) and multiwell basal side (600 μL) of transwell filter chanber (Corning, pore size 0.4 μm, made of polycarbonate) in which single layer CACO-2 is cultured with HBSS-HEPES buffer, and 20 It was left in a 5% CO ₂ incubator for 5 minutes. The apical side HBSS-HEPES buffer was removed by aspiration, 100 μL of the test substance solution and the control solution were added, and the well plate was allowed to stand in the CO ₂ incubator for 24 hours. The well plate was removed from the 5% CO ₂ incubator, the basal side medium was collected, and the calcium concentration was measured according to the following method.

上記回収したbasal side培地のカルシウム濃度を以下の方法に従い試験した。
上記回収したbasal side培地（600μL）を遠心濃縮器（トミー精工）で４０℃、１８時間、減圧乾燥した。乾燥後のサンプルに30μL HBSS-HEPESバッファを加えて、完全に溶解するまで混和した。上記HBSS-HEPESバッファに溶解したサンプル2μLを96ウェルプレートに滴下し、続けて240μLメタロアッセイCaを加えて、１０分間、室温で静置した。各ウェル中のサンプルの吸光度を、690nmの吸光度でVARIOSKAN（Thermoscientific）を用いて測定し、カルシウム透過量を測定した。その結果を図１に示す。 The calcium concentration of the recovered basal side medium was tested according to the following method.
The recovered basal side medium (600 μL) was dried under reduced pressure at 40 ° C. for 18 hours with a centrifugal concentrator (Tomy Seiko). 30 μL HBSS-HEPES buffer was added to the dried sample and mixed until completely dissolved. 2 μL of the sample dissolved in the HBSS-HEPES buffer was added dropwise to a 96-well plate, 240 μL metalloassay Ca was added, and the mixture was allowed to stand at room temperature for 10 minutes. The absorbance of the sample in each well was measured using VARIOSKAN (Thermoscientific) at an absorbance of 690 nm, and the calcium permeation amount was measured. The result is shown in FIG.

（結果）
図１に示すように、袴裏星抽出物は、いずれの濃度（100、及び30μg/mL）においても、その添加２４時間後に、対照に比べてカルシウム透過量を有意に増加させた。 (result)
As shown in FIG. 1, the comet star extract significantly increased calcium permeation compared to the control 24 hours after its addition at any concentration (100 and 30 μg / mL).

以下の配合例１〜１０において、袴裏星抽出物を含有する医薬用部外品、化粧品又は医薬品の配合例を示すが、本発明はこれらに限定されるものでない。 In the following formulation examples 1 to 10, formulation examples of quasi-drugs, cosmetics, or pharmaceuticals containing a dwarf star extract are shown, but the present invention is not limited thereto.

（配合例１：化粧水）
全体を１００質量部として、袴裏星抽出物０．００５質量部、グリセリン１０質量部、ジグリセリン３質量部、１，３−ブチレングリコール１２質量部、ペンチレングリコール３質量部、ヒアルロン酸ナトリウム０．１質量部、クエン酸０．０１質量部、クエン酸ナトリウム０．０２質量部、キサンタンガム０．１質量部、メチルパラベン０．１５質量部、カルボマー０．２質量部、水酸化ナトリウム０．０３質量部及び水残部を混合して、化粧水の態様で本発明の剤を調製した。 (Formulation example 1: lotion)
Based on 100 parts by mass of the whole, 0.005 parts by mass of dwarf star extract, 10 parts by mass of glycerin, 3 parts by mass of diglycerin, 12 parts by mass of 1,3-butylene glycol, 3 parts by mass of pentylene glycol, sodium hyaluronate 0 0.1 part by mass, citric acid 0.01 part by mass, sodium citrate 0.02 part by mass, xanthan gum 0.1 part by mass, methyl paraben 0.15 part by mass, carbomer 0.2 part by mass, sodium hydroxide 0.03 part by mass The agent of the present invention was prepared in the form of a lotion by mixing the part and the rest of the water.

（配合例２：シャンプー）
全体を１００質量部として、袴裏星抽出物０．００１質量部、ラウレス硫酸ナトリウム７．５質量部、コカミドプロピルベタイン４．２質量部、コカミドＤＥＡ３質量部、１，３−ブチレングリコール０．１質量部、ポリクオタニウム−１００．２２５質量部、クエン酸０．１５質量部、クエン酸ナトリウム０．０５質量部、フェノキシエタノール０．９質量部及び水残部を混合して、シャンプーの態様で本発明の剤を調製した。 (Formulation example 2: shampoo)
Based on 100 parts by mass as a whole, 0.001 part by mass of dwarf star extract, 7.5 parts by mass of sodium laureth sulfate, 4.2 parts by mass of cocamidopropyl betaine, 3 parts by mass of cocamide DEA, 1,3-butylene glycol 0 0.1 part by mass, 0.25 part by mass of polyquaternium-10, 0.15 part by mass of citric acid, 0.05 part by mass of sodium citrate, 0.9 part by mass of phenoxyethanol, and the remainder of water are mixed together to form a shampoo. Inventive agents were prepared.

（配合例３：石鹸）
全体を１００質量部として、袴裏星粉末１質量部、グリセリン２質量部、オリーブ油１質量部、ＥＤＴＡ−４ナトリウム０．１質量部、エチドロン酸４ナトリウム０．２質量部及び石ケン素地残部を混合し、そして固化することにより、石鹸の態様で本発明の剤を調製した。 (Formulation example 3: soap)
100 parts by weight as a whole, 1 part by weight of dwarf star powder, 2 parts by weight of glycerin, 1 part by weight of olive oil, 0.1 part by weight of EDTA-4 sodium, 0.2 part by weight of etidronate 4 sodium, and the rest of the soap base The agent of the present invention was prepared in the soap form by mixing and solidifying.

（配合例４：乳液）
全体を１００質量部として、袴裏星抽出物０．０５質量部、ショ糖脂肪酸エステル３質量部、グリセリン１２質量部、スクアラン６質量部、ジメチルシリコーンオイル２４質量部、ポリプロピレングリコール１質量部、増粘剤０．０６質量部、フェノキシエタノール０．２質量部、エタノール５質量部、水酸化ナトリウム０．０１質量部及び精製水残部を混合して、乳液の態様で本発明の剤を調製した。 (Formulation example 4: emulsion)
100 parts by weight as a whole, 0.05 parts by weight of dwarf star extract, 3 parts by weight of sucrose fatty acid ester, 12 parts by weight of glycerin, 6 parts by weight of squalane, 24 parts by weight of dimethyl silicone oil, 1 part by weight of polypropylene glycol The agent of the present invention was prepared in the form of an emulsion by mixing 0.06 parts by weight of a viscous agent, 0.2 parts by weight of phenoxyethanol, 5 parts by weight of ethanol, 0.01 parts by weight of sodium hydroxide, and the remainder of purified water.

（配合例５：化粧用クリーム）
全体を１００質量部として、袴裏星抽出物０．０３質量部、スクワラン１５．０質量部、ミリスチン酸オクチルドデシル４．０質量部、水素添加大豆リン脂質０．２質量部、ブチルアルコール２．４質量部、硬化油１．５質量部、ステアリン酸１．５質量部、親油型モノステアリン酸グリセリン１．５質量部、モノステアリン酸ポリグリセリル０．５質量部、ベヘニルアルコール０．８質量部、モノミリスチン酸ポリグリセリル０．７質量部、サラシミツロウ０．３質量部、ｄ−δ−トコフェロール０．１質量部、メチルパラベン０．３質量部、Ｃ１０〜３０アルキル変性カルボキシビニルポリマー０．２質量部、カルボキシビニルポリマー０．１質量部、１，３−ブタンジオール１８．０質量部、水酸化ナトリウム０．１質量部及び精製水残部を混合して、化粧用クリームの態様で本発明の剤を調製した。 (Formulation Example 5: Cosmetic cream)
1. 100 parts by mass of the whole, 0.03 parts by mass of dwarf star extract, 15.0 parts by mass of squalane, 4.0 parts by mass of octyldodecyl myristate, 0.2 parts by mass of hydrogenated soybean phospholipid, butyl alcohol 4 parts by mass, 1.5 parts by mass of hardened oil, 1.5 parts by mass of stearic acid, 1.5 parts by mass of lipophilic glyceryl monostearate, 0.5 parts by mass of polyglyceryl monostearate, 0.8 parts by mass of behenyl alcohol, Polyglyceryl monomyristate 0.7 parts by weight, beeswax 0.3 parts by weight, d-δ-tocopherol 0.1 parts by weight, methylparaben 0.3 parts by weight, C10-30 alkyl-modified carboxyvinyl polymer 0.2 parts by weight, Carboxyvinyl polymer 0.1 mass part, 1,3-butanediol 18.0 mass parts, sodium hydroxide 0.1 mass And a mixture of purified water balance, to prepare a preparation of the present invention in the form of cosmetic creams.

（配合例６：パック剤）
全体を１００質量部として、袴裏星抽出物０．１質量部、ポリビニルアルコール２０．０質量部、グリセリン５．０質量部、エタノール２０．０質量部、カオリン６．０質量部、防腐剤０．２質量部、香料０．１質量部及び精製水残部を混合して、パック剤の態様で本発明の剤を調製した。 (Formulation Example 6: Packing agent)
100 parts by mass as a whole, 0.1 parts by mass of dwarf star extract, 20.0 parts by mass of polyvinyl alcohol, 5.0 parts by mass of glycerin, 20.0 parts by mass of ethanol, 6.0 parts by mass of kaolin, preservative 0 .2 parts by mass, 0.1 part by mass of fragrance, and the remainder of purified water were mixed to prepare the agent of the present invention in the form of a pack agent.

（配合例７：錠剤）
全体を１００質量部として、袴裏星粉末５質量部、ビタミンＢ_１５質量部、ビタミンＢ_６１２質量部、ステアリン酸カルシウム４質量部、麦芽糖３０質量部及びヒドロキシプロピルセルロース残部を混合し、そして打錠することにより、錠剤の態様で本発明の剤を調製した。 (Formulation Example 7: Tablet)
Mixing 100 parts by weight of the whole, 5 parts by weight of dwarf star powder, 5 parts by weight of vitamin B ₁ , 12 parts by weight of vitamin B ₆ , 4 parts by weight of calcium stearate, 30 parts by weight of maltose and the rest of hydroxypropylcellulose, The agent of the present invention was prepared in the form of a tablet by tableting.

（配合例８：顆粒剤）
全体を１００質量部として、袴裏星抽出物５質量部、乳糖１０質量部、ステアリン酸カルシウム１質量部及び結晶セルロース残部を混合し、そして顆粒化することにより、顆粒剤の態様で本発明の剤を調製した。 (Formulation Example 8: Granules)
The agent of the present invention in the form of a granule by mixing and granulating 5 parts by mass of dwarf star extract, 10 parts by mass of lactose, 1 part by mass of calcium stearate and the rest of crystalline cellulose, with 100 parts by mass as a whole. Was prepared.

（配合例９：カプセル剤）
全体を１００質量部として、袴裏星抽出物１０質量部、レシチン８質量部及びオリーブ油残部を混合して調製したものを内容液として、これをカプセル殻に内包することにより、カプセル剤の態様で本発明の剤を調製した。 (Formulation example 9: capsule)
In the form of a capsule, the total amount is 100 parts by mass, and the mixture is prepared by mixing 10 parts by mass of dwarf star extract, 8 parts by mass of lecithin, and the remainder of olive oil. The agent of the present invention was prepared.

（配合例１０：液剤）
全体を１００質量部として、袴裏星抽出物１質量部、ビタミンＢ_１１質量部、果糖ブドウ糖液糖１０質量部、クエン酸１質量部、安息香酸ナトリウム０．０２質量部、香料製剤２質量部、スクラロース０．０５質量部、アセスルファムカリウム０．０３質量部、及び精製水残部を混合して、液剤の態様で本発明の剤を調製した。 (Formulation example 10: liquid agent)
100 parts by weight as a whole, 1 part by weight of dwarf star extract, 1 part by weight of vitamin B _1, 10 parts by weight of fructose glucose liquid sugar, 1 part by weight of citric acid, 0.02 part by weight of sodium benzoate, 2 parts by weight of a fragrance preparation Part, 0.05 part by mass of sucralose, 0.03 part by mass of acesulfame potassium, and the remainder of purified water were mixed to prepare the agent of the present invention in the form of a solution.

Claims

Calcium permeation enhancer containing dwarf stars.

Metabolic promoter containing dwarf stars.