JP2015506949A5 - - Google Patents
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Description
蔓延性を決定するための血清学的調査
C/ブタ/Oklahoma/1334/2011をヒトインフルエンザCと低い配列相同性を有する新規なウイルスと立証したので、血清学的調査を実施して、ヒト及びブタの両方で感染発生率を決定した。多数の州からニューポートラボラトリーズに付託された、約200の任意抽出ブタ血清サンプルを、血球凝集阻害アッセイを用いてC/ブタ/Oklahoma/1334/2011に対する抗体について分析した。約8%のサンプルがHIアッセイで陽性で、10−160の力価を示した。
同様に、セント・ジュード小児病院(St Jude’s Children’s Hospital;Memphis, TN)の共同研究者らは、カナダの高齢者(65−95歳)から収集したヒト血清バンクでHIアッセイを実施した。約28%のサンプルが10−80の陽性HI力価を示した。総合すれば、これらの結果は、ヒト及びブタはC/ブタ/Oklahoma/1334/2011に広く曝露されていることを示している。これらの結果はまた、このウイルスがヒト及びブタに感染できることを示唆している。
ブタのワクチン免疫及びチャレンジ実験
C/ブタ/Oklahoma/1334/2011を高力価(HA=2560)に増殖させ、バイナリーエチレンイミンで不活化し、続いて10%トリゲン(Trigen)(水中油アジュバント)を添加して死滅ウイルスワクチンを作製した。C/ブタ/Oklahoma/1334/2011に対する抗体について血清学的に陰性の22匹のブタに、0日目及び14日目に2mLの不活化ウイルスワクチンの筋肉内デリバリーによりワクチン接種した。血清サンプルを0、14及び28日目に収集してHI力価について分析した。28匹のブタもまた非ワクチン接種コントロールとして含まれた。ワクチン接種ブタは28日までに血清転換を示し、平均HI力価は433を有した。非ワクチン接種ブタはHIアッセイで陰性であった。表8及び図3はそれらの結果を示す。ワクチン接種ブタは強い血清転換を示した。インフルエンザAでの大ざっぱな指針は、40を超えるHI力価は防御能力を示す。チャレンジ前のワクチン接種ブタの血清で測定した抗体は、防御抗体が存在していたことを示唆している。このデータはチャレンジ結果と一致する。
C/ブタ/Oklahoma/1334/2011をヒトインフルエンザCと低い配列相同性を有する新規なウイルスと立証したので、血清学的調査を実施して、ヒト及びブタの両方で感染発生率を決定した。多数の州からニューポートラボラトリーズに付託された、約200の任意抽出ブタ血清サンプルを、血球凝集阻害アッセイを用いてC/ブタ/Oklahoma/1334/2011に対する抗体について分析した。約8%のサンプルがHIアッセイで陽性で、10−160の力価を示した。
同様に、セント・ジュード小児病院(St Jude’s Children’s Hospital;Memphis, TN)の共同研究者らは、カナダの高齢者(65−95歳)から収集したヒト血清バンクでHIアッセイを実施した。約28%のサンプルが10−80の陽性HI力価を示した。総合すれば、これらの結果は、ヒト及びブタはC/ブタ/Oklahoma/1334/2011に広く曝露されていることを示している。これらの結果はまた、このウイルスがヒト及びブタに感染できることを示唆している。
ブタのワクチン免疫及びチャレンジ実験
C/ブタ/Oklahoma/1334/2011を高力価(HA=2560)に増殖させ、バイナリーエチレンイミンで不活化し、続いて10%トリゲン(Trigen)(水中油アジュバント)を添加して死滅ウイルスワクチンを作製した。C/ブタ/Oklahoma/1334/2011に対する抗体について血清学的に陰性の22匹のブタに、0日目及び14日目に2mLの不活化ウイルスワクチンの筋肉内デリバリーによりワクチン接種した。血清サンプルを0、14及び28日目に収集してHI力価について分析した。28匹のブタもまた非ワクチン接種コントロールとして含まれた。ワクチン接種ブタは28日までに血清転換を示し、平均HI力価は433を有した。非ワクチン接種ブタはHIアッセイで陰性であった。表8及び図3はそれらの結果を示す。ワクチン接種ブタは強い血清転換を示した。インフルエンザAでの大ざっぱな指針は、40を超えるHI力価は防御能力を示す。チャレンジ前のワクチン接種ブタの血清で測定した抗体は、防御抗体が存在していたことを示唆している。このデータはチャレンジ結果と一致する。
Claims (13)
- ブタインフルエンザウイルスの株による感染から哺乳動物を防御するワクチンであって、免疫学的に有効な量の前記ブタインフルエンザウイルスの不活化ウイルスを含み、前記ブタインフルエンザゲノムがヒトインフルエンザCウイルスのゲノムと65%以下の相同性を有する、前記ワクチン。
- インフルエンザウイルスの株がブタから単離された株であり、ヒトインフルエンザCウイルスのゲノムと50%未満の相同性を有する、請求項1に記載のワクチン。
- インフルエンザウイルスの株がC/ブタ/Oklahoma/1334/2011であり、フェレットに感染できる、請求項2に記載のワクチン。
- ブタをC/ブタ/Oklahoma/1334/2011インフルエンザウイルスによる感染から防御する、請求項2に記載のワクチン。
- 水中油アジュバントを含む、請求項1に記載のワクチン。
- 水中油アジュバントが少なくとも10%の量で存在する、請求項5に記載のワクチン。
- インフルエンザウイルスがバイナリーエチレンイミンで不活化されている、請求項1に記載のワクチン。
- 動物が病原性ブタインフルエンザでチャレンジされた後のウイルス排出を顕著に低下させる、請求項1に記載のワクチン。
- 配列番号5、7、9、11、13、15、17および18の配列を有する8つのインフルエンザCポリペプチド(PB1、PB2、P3、HE、NP、M,NS1およびNS2)をコードする核酸分子を含むブタインフルエンザウイルスであって、前記核酸分子がヒトインフルエンザCウイルス株のゲノムと65%以下の相同性を有する、前記ブタインフルエンザウイルス。
- 核酸分子が、ヒトインフルエンザCウイルス株のゲノムと50%未満の相同性を有する、請求項9に記載のブタインフルエンザウイルス。
- 請求項9に記載のブタインフルエンザウイルスの存在を少なくとも1つのサンプルにおいて検出する方法であって、以下の工程(a)及び(b)を含む前記方法:
(a)フォワード及びリバースプライマーを含む少なくとも1つの精製オリゴヌクレオチドプライマー対を用いて該サンプル由来の少なくとも1つの核酸の1つ以上のセグメントを増幅させる工程であって、該フォワードプライマーが配列番号:1を含み、さらにリバースプライマーが配列番号:2を含み、少なくとも1つの増幅生成物を生成する、前記工程;及び
(b)該増幅生成物を検出し、それによって該サンプル中のブタインフルエンザウイルスの存在を検出する工程。 - (b)が該サンプル中のブタインフルエンザウイルスの量を決定する工程を含む、請求項11に記載の方法。
- (b)が逆転写リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応を含む、請求項11に記載の方法。
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