JP2015500808A - Ｂ細胞リンパ腫の治療 - Google Patents
Ｂ細胞リンパ腫の治療 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2015500808A JP2015500808A JP2014544928A JP2014544928A JP2015500808A JP 2015500808 A JP2015500808 A JP 2015500808A JP 2014544928 A JP2014544928 A JP 2014544928A JP 2014544928 A JP2014544928 A JP 2014544928A JP 2015500808 A JP2015500808 A JP 2015500808A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- sirna
- eif
- polynucleotide sequence
- expression
- seq
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 208000003950 B-cell lymphoma Diseases 0.000 title claims abstract description 17
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 claims abstract description 69
- 102100026761 Eukaryotic translation initiation factor 5A-1 Human genes 0.000 claims abstract description 49
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 40
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims abstract description 26
- GOTYRUGSSMKFNF-UHFFFAOYSA-N lenalidomide Chemical compound C1C=2C(N)=CC=CC=2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O GOTYRUGSSMKFNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 229960004942 lenalidomide Drugs 0.000 claims abstract description 16
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 claims abstract description 13
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 claims abstract description 13
- 108010085279 eukaryotic translation initiation factor 5A Proteins 0.000 claims abstract description 12
- GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N bortezomib Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)B(O)O)NC(=O)C=1N=CC=NC=1)C1=CC=CC=C1 GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 229960001467 bortezomib Drugs 0.000 claims abstract description 10
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims description 52
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims description 52
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims description 52
- 208000031671 Large B-Cell Diffuse Lymphoma Diseases 0.000 claims description 16
- 206010012818 diffuse large B-cell lymphoma Diseases 0.000 claims description 16
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 claims description 14
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 13
- 208000025205 Mantle-Cell Lymphoma Diseases 0.000 claims description 12
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 claims description 9
- 102220530537 Eukaryotic translation initiation factor 5A-1_K50R_mutation Human genes 0.000 claims description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 6
- 208000010839 B-cell chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 claims description 4
- 201000003444 follicular lymphoma Diseases 0.000 claims description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 3
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 3
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 claims 24
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims 8
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 claims 2
- 108010044843 Peptide Initiation Factors Proteins 0.000 claims 2
- 102000005877 Peptide Initiation Factors Human genes 0.000 claims 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 abstract description 8
- 101001054354 Homo sapiens Eukaryotic translation initiation factor 5A-1 Proteins 0.000 abstract description 6
- 101710126270 Eukaryotic translation initiation factor 5A-1 Proteins 0.000 description 54
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 25
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 21
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 16
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 9
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 8
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 7
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 6
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 5
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 5
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 5
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 5
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 5
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 5
- 102100021002 Eukaryotic translation initiation factor 5A-2 Human genes 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 108010045839 eIF-5A2 Proteins 0.000 description 4
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 3
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 3
- 238000011579 SCID mouse model Methods 0.000 description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102220530538 Eukaryotic translation initiation factor 5A-1_K50A_mutation Human genes 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 102200158804 rs35481866 Human genes 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 102220530555 Eukaryotic translation initiation factor 5A-1_K47R_mutation Human genes 0.000 description 1
- 102220477310 Exportin-7_K67A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 108091030071 RNAI Proteins 0.000 description 1
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000009368 gene silencing by RNA Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 238000001050 pharmacotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 229940120975 revlimid Drugs 0.000 description 1
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
- A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
- A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/69—Boron compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
- A61K47/595—Polyamides, e.g. nylon
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
- A61K48/005—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'active' part of the composition delivered, i.e. the nucleic acid delivered
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2840/00—Vectors comprising a special translation-regulating system
- C12N2840/10—Vectors comprising a special translation-regulating system regulates levels of translation
- C12N2840/102—Vectors comprising a special translation-regulating system regulates levels of translation inhibiting translation
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本出願は、ヒト対象において変異型ｅＩＦ−５Ａを発現する発現ベクターと併用して、ヒトｅＩＦ−５Ａを標的とするｓｉＲＮＡをヒト対象に投与することにより、そのような治療を必要とするヒト対象のＢ細胞リンパ腫を治療するための方法に関する。本出願はまた、ヒトｅＩＦ−５Ａを標的とするｓｉＲＮＡ、ヒト対象において変異型ｅＩＦ−５Ａを発現する発現ベクター、及びボルテゾミブ又はレナリドミドをヒト対象に投与することにより、そのような治療を必要とするヒト対象の多発性骨髄腫を治療する方法に関する。【選択図】なし
Description
［背景］
本発明は、ｅＩＦ−５Ａ１発現を操作することによってＢ細胞リンパ腫を治療する方法に関する。この遺伝子の内因性発現を抑制するためのｅＩＦ−５Ａ１遺伝子を標的としたｓｉＲＮＡを含む組成物の対象における使用、及び多発性骨髄腫を治療するための対象で発現し得る変異型ｅＩＦ−５Ａ１をコードするポリヌクレオチドは既に論じられている（米国特許出願公開第２０１０／００７６０６２号及び同第２０１０／０００４３１４号を参照）。
本発明は、ｅＩＦ−５Ａ１発現を操作することによってＢ細胞リンパ腫を治療する方法に関する。この遺伝子の内因性発現を抑制するためのｅＩＦ−５Ａ１遺伝子を標的としたｓｉＲＮＡを含む組成物の対象における使用、及び多発性骨髄腫を治療するための対象で発現し得る変異型ｅＩＦ−５Ａ１をコードするポリヌクレオチドは既に論じられている（米国特許出願公開第２０１０／００７６０６２号及び同第２０１０／０００４３１４号を参照）。
［発明の概要］
本発明は、対象においてヒプシン化されることが不可能なｅＩＦ−５Ａ１の発現を提供する発現プラスミドと併用して、内因性ｅＩＦ−５Ａ１の発現をブロックするｓｉＲＮＡを投与することによるＢ細胞リンパ腫の治療に関する。
本発明は、対象においてヒプシン化されることが不可能なｅＩＦ−５Ａ１の発現を提供する発現プラスミドと併用して、内因性ｅＩＦ−５Ａ１の発現をブロックするｓｉＲＮＡを投与することによるＢ細胞リンパ腫の治療に関する。
本発明は、ボルテゾミブ又はレナリドミドと併用して、ヒプシン化されることが不可能なｅＩＦ−５Ａ１の発現を提供する発現プラスミドと一緒に、内因性ｅＩＦ−５Ａ１の発現をブロックするｓｉＲＮＡを同時投与することによる多発性骨髄腫の治療をさらに提供する。
［詳細な説明］
本発明は、Ｂ細胞リンパ腫、例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、マントル細胞リンパ腫及び濾胞性リンパ腫を治療する方法を提供する。一部の実施形態では、本発明は、本明細書に記載の治療方法に適したＢ細胞リンパ腫に罹患している患者の選択を包含する。
本発明は、Ｂ細胞リンパ腫、例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、マントル細胞リンパ腫及び濾胞性リンパ腫を治療する方法を提供する。一部の実施形態では、本発明は、本明細書に記載の治療方法に適したＢ細胞リンパ腫に罹患している患者の選択を包含する。
本発明は、ｅＩＦ−５Ａ１の３’末端を標的とするｅＩＦ−５Ａ１ ｓｉＲＮＡと、変異型ｅＩＦ５Ａ１をコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターとの複合体を含む組成物であって、変異型ｅＩＦ５Ａ１がヒプシン化されることが不可能であり、且つｓｉＲＮＡ及び発現ベクターがポリエチレンイミンに複合化して複合体を形成している、組成物を投与するステップを含む、Ｂ細胞リンパ腫を治療する方法を提供する。
本発明が、Ｂ細胞リンパ腫を治療するために、対象における標的遺伝子の内因性発現を抑制するための標的遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡと、対象において発現させることができる標的タンパク質をコードするポリヌクレオチドとを含む組成物の使用を提供する場合、ある特定の実施形態では、ポリヌクレオチドは、（ｓｉＲＮＡによって抑制されることはない）ＲＮＡｉ耐性プラスミドにある。
ある特定の実施形態では、ｓｉＲＮＡは、配列番号１に示すｅＩＦ−５Ａ１配列を標的とし、変異型ｅＩＦ−５Ａ１をコードしているポリヌクレオチドはｅＩＦ−５Ａ１Ｋ５０Ｒである。本発現ベクターは、変異型ｅＩＦ５−Ａ１をコードしているポリヌクレオチドと、対象においてポリヌクレオチドが発現されるように操作可能に連結されているプロモーターを含む。プロモーターは、組織特異的であるか、遍在的であるのが好ましい。例えば、本組成物を用いてＢ細胞リンパ腫を治療する場合、プロモーターは、がんが存在する組織に対して組織特異的である。したがって、プロモーターは、Ｂ細胞が通常見出される組織、例えば、骨髄及びリンパ組織（すなわち、リンパ節及び脾臓）に特異的であり得るか、或いは、Ｂ細胞は通常存在しないが、Ｂ細胞腫瘍が形成された組織、例えば肺又は横隔膜に位置する他の組織部位に特異的であり得る。例えば、Ｂ細胞リンパ腫の治療においては、Ｂ細胞特異的プロモーター、例えばＢ２９を使用するのが好ましい。ある特定の実施形態では、発現ベクターはｐＣｐＧプラスミドを含む。
本発明はまた、切断形態のｅＩＦ−５Ａ１をコードしている単離ポリヌクレオチド、並びに切断型ｅＩＦ−５Ａ１ポリペプチドを使用する、Ｂ細胞リンパ腫を治療する方法も提供する。切断型ｅＩＦ−５Ａ１ポリヌクレオチドはアポトーシスを誘導し、がん細胞を死滅させるのに有用である。切断型ポリヌクレオチドは発現ベクター内で使用することができ、その後、そのベクターを哺乳動物に投与することができる。切断型ｅＩＦ−５Ａ形態は哺乳動物内で発現され、がん細胞を死滅させる。切断型ｅＩＦ−５Ａ１タンパク質は、完全長ｅＩｆ−５Ａ１タンパク質が約１７ｋＤａであるのに対し、約１６ｋＤＡである。
ある特定の実施形態では、切断型ｅＩＦ−５Ａ１ポリヌクレオチドは配列番号９に示した配列を含むか、又はその配列からなり、そのアミノ酸配列は配列番号１０を含むか、又はその配列からなる。ある特定の実施形態では、切断型ｅＩＦ−５Ａ１ポリヌクレオチドは、プラスミド又は発現ベクター内に含まれる。プラスミド及び発現ベクターは、本明細書の下記により詳しく記載されている。ある特定の実施形態では、発現ベクターはアデノウイルス発現ベクターであるか、ｐＨＭ６である。ある特定の実施形態では、組成物又は医薬を使用して多発性骨髄腫を治療する場合、発現ベクターは組織特異的プロモーター、例えば、Ｂ細胞特異的プロモーター（すなわちＢ２９）を含む。発現ベクターはｐＣｐＧプラスミドを含んでいてもよい。下記により詳しく述べているように、発現ベクターはポリエチレンイミンに複合化されていてもよい。
ある特定の実施形態では、ｅＩＦ−５Ａ１ ｓｉＲＮＡ、及び変異型ｅＩＦ−５Ａ１ポリヌクレオチドを含む発現ベクターは、ポリエチレンイミン、例えばｉｎ ｖｉｖｏ ＪＥＴ−ＰＥＩに独立して複合化される。他の実施形態では、ｅＩＦ−５Ａ１ ｓｉＲＮＡ、及び変異型ｅＩＦ５−Ａ１ポリヌクレオチドを含む発現ベクターは、ポリエチレンイミンに一緒に複合化される。
本発明は、ｅＩＦ−５Ａ１遺伝子の３’末端を標的とするｅＩＦ−５Ａ１ ｓｉＲＮＡと、変異型ｅＩＦ−５Ａ１をコードしているポリヌクレオチドを含んでなる発現ベクターとを含む組成物を投与するステップを含む、治療を必要とする対象のＢ細胞リンパ腫を治療する方法であって、変異型ｅＩＦ５Ａ１がヒプシン化されることが不可能である、方法をさらに提供する。Ｂ細胞リンパ腫は、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、マントル細胞リンパ腫及び濾胞性リンパ腫のいずれかであり得る。
本明細書に記載のｓｉＲＮＡとプラスミドとを含有する組成物は、任意の適切な手段、例えば、非経口投与、経皮投与、鼻腔内投与及び経口投与を含む手段によって投与することができる。送達に適する製剤は、限定するものではないが、静脈内投与又は筋内投与が含まれる。一部の実施形態では、製剤はリポソームを含有し、他では、ナノ粒子を含有する。一部の実施形態では、ナノ粒子はポリエチレンイミン（ＰＥＩ）ナノ粒子である。
変異型ｅＩＦ−５Ａ１をコードしているポリヌクレオチドは、ヒプシン化されることが不可能なように変異されているのが好ましいため、細胞を生存状態にさせることができない。例えば、一実施形態では、ｅＩＦ−５Ａをコードしているポリヌクレオチドは、通常ＤＨＳによってヒプシン化される、５０位のリジン（Ｋ）がアラニン（Ａ）又はアルギニン（これらはヒプシン化することができない）に変わるように変異されている。この変異型は、それぞれ、Ｋ５０Ａ又はＫ５０Ｒと表示される。
別の実施形態では、ｅＩＦ−５Ａ１の６７位のリジンがアルギニン（Ｒ）に変えられている。この変異型は、（Ｋ６７Ｒ）として表示される。別の実施形態では、６７位のリジン（Ｋ）がアラニン（Ａ）に変えられ、（Ｋ６７Ａ）として表示される。別の実施形態では、４７位のリジン（Ｋ）がアルギニンに変えられている変異型（Ｋ４７Ｒ）が考えられる。
他の実施形態では、ｅＩＦ−５Ａ１の二重変異型が用いられる。ある二重変異型は、５０位のリジン（Ｋ）がアルギニン（Ｒ）に変えられており、６７位のリジン（Ｋ）がアルギニン（Ｒ）に変えられている。この二重変異型は、Ｋ５０Ｒ／Ｋ６７Ｒと呼ばれる。この二重変異型は、同様に、ヒプシン化されることが不可能であるが、アミノ酸の変化は、ｅＩＦ−５Ａ１の３次元構造を単一変異（Ｋ５０Ａ）ほどは変化させない。したがって、二重変異型は、野性型と非常に類似した３Ｄ（３次元）形状及び折畳のタンパク質を提供するので、単一変異型よりも安定している。二重変異体は、安定性がより高いため、体内により長く存在し、より長く治療上の利益を提供する。こうして、身体は、正常な細胞機能に必要であるｅＩＦ−５Ａを有することになるが、ｅＩＦ−５Ａはヒプシン化されることが不可能であり、その結果、細胞は細胞生存状態に固定されることがなく、アポトーシスが回避されることがない。
身体は正常細胞の生存と健常細胞の増殖のためにｅＩＦ−５Ａａを必要とするので、例えば、ｓｉＲＮＡが全身的に送達される場合、ｓｉＲＮＡによって対象における発現を完全に遮断しないことが望ましい。ｅＩＦ−５Ａ発現の制御は、発現を完全に排除しない（すなわち、発現を低下させるが、発現を完全には遮断しない）ｓｉＲＮＡを使用すること、或いは、発現レベルのバランスを保つ投与及び／又は治療レジメンを利用して、健常細胞の正常な成長と機能を可能にし、且つがん細胞を強制的にアポトーシスへ誘導することのいずれかによって達成することができる。
或いは、ｓｉＲＮＡの局所送達を利用することができる。ｓｉＲＮＡががん細胞又は腫瘍へ局所的に送達される場合、発現がノックアウトされることが好ましい。発現をノックアウトすることによって、ヒプシン化されることが可能なｅＩＦ−５Ａ１はその周囲には存在しなくなり、したがって、細胞を生存状態に固定するヒプシン化ｅＩＦ−５Ａ１は存在しなくなる。ｓｉＲＮＡはがん又は腫瘍へ局所的に送達されるので、正常な細胞成長に利用可能なｅＩＦ−５Ａを有する必要はない。
ある特定の実施形態では、ｓｉＲＮＡは、配列番号５及び配列番号６に示すｓｉＲＮＡ構築物から本質的になる。例えば、ｓｉＲＮＡはｅＩＦ−５Ａ１を標的とする核酸を含有するだけでなく、突出、例えば、Ｕ核酸又はＴ核酸を含有するか、タグ、例えばｈｉｓタグ（ＨＡタグと呼ばれることが多く、しばしばｉｎ ｖｉｔｒｏでの試験で使用される）もさらに含有する。５’末端又は３’末端のいずれかで（或いは核酸の連続鎖内で）付着した分子又はさらなる核酸が包含されていてもよく、ｓｉＲＮＡ構築物が標的遺伝子の発現を低下させることができる限り、本発明の範囲内に含まれる。ｓｉＲＮＡは、外因性ポリヌクレオチドの発現に影響を及ぼさないようにｅＩＦ−５Ａ１遺伝子の領域を標的とするのが好ましい。例えば、ｅＩＦ−５Ａ１ ｓｉＲＮＡは、３’ＵＴＲ又は３’末端を標的とする。配列番号５及び配列番号６に示すｓｉＲＮＡは、代表的なｅＩＦ−５Ａ１ ｓｉＲＮＡである。
一部の実施形態では、ｅＩＦ−５Ａ１をコードしているポリヌクレオチドは、ｅＩＦ５Ａ１変異体をコードするように変異される。変異型ｅＩＦ−５Ａ１は、変異体ｅＩＦ−５Ａ１が翻訳後修飾され得ないように（すなわち、ヒプシン化されることが不可能であるように）設計されている。代表的な変異型は、本明細書の上記で論じている。
本発明の方法はまた、ｅＩＦ−５Ａ２アイソフォーム（ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＭ０２０３９０）をコードしているポリヌクレオチドの投与を包含する。ｅＩＦ−５Ａ２アイソフォームは、発現時に、がん細胞のアポトーシスを誘導する（米国特許出願公開第２００７／０１５４４５７号を参照）。したがって、本発明は、がん細胞でｅＩＦ−５Ａ２アイソフォームを発現させるポリヌクレオチドを投与し、それによってアポトーシスを誘導することにより、Ｂ細胞リンパ腫、例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、マントル細胞リンパ腫及び濾胞性リンパ腫を治療する方法を提供する。ｅＩＦ−５Ａ２ポリヌクレオチドは、プラスミド、ベクター、例えばアデノウイルスベクター、又は任意の適切な発現ベクターで送達することができる。
別の態様では、本発明は、多発性骨髄腫と診断された対象に、対象の内因性ｅＩＦ−５Ａ１遺伝子の発現をノックアウト又はノックダウンするための治療上有効な量の内因性ｅＩＦ−５Ａ１遺伝子を標的としたｓｉＲＮＡと、ボルテゾミブ（ベルケイド（ＶＥＬＣＡＤＥ））と併用した、本明細書に記載のｅＩＦ−５Ａ１タンパク質又はその一部をコードしているポリヌクレオチドの送達とを投与することによって、対象（例えばヒト）のＢ細胞リンパ腫又は多発性骨髄腫を治療する方法を提供する。ある特定の実施形態では、ボルテゾミブの治療上有効な量は０．５ｍｇ／ｍ２〜３ｍｇ／ｍ２の範囲である。ある特定の実施形態では、ボルテゾミブの治療上有効な量は約１．３ｍｇ／ｍ２である。ある特定の実施形態では、対象の内因性ｅＩＦ−５Ａ１遺伝子の発現をノックアウト又はノックダウンするための治療上有効な量の内因性ｅＩＦ−５Ａ１遺伝子を標的としたｓｉＲＮＡと、ｅＩＦ−５Ａ１タンパク質又はその一部をコードしているポリヌクレオチドの送達とは、本明細書に記載のとおりである。ある特定の実施形態では、対象の内因性ｅＩＦ−５Ａ１遺伝子の発現をノックアウト又はノックダウンする量の内因性ｅＩＦ−５Ａ１遺伝子を標的としたｓｉＲＮＡと、ｅＩＦ−５Ａ１のタンパク質又はその一部をコードしているポリヌクレオチドの送達とは、週に２回又は３回投与され、ボルテゾミブは週に２回投与される。一部の実施形態では、本発明は、多発性骨髄腫に罹患しており、且つ本明細書に記載の治療方法に関するボルテゾミブによる治療を既に受けているヒト対象の選択を包含する。
別の態様では、本発明は、多発性骨髄腫と診断された対象に対象の内因性ｅＩＦ−５Ａ１遺伝子の発現をノックアウト又はノックダウンするための治療上有効な量の内因性ｅＩＦ−５Ａ１遺伝子を標的としたｓｉＲＮＡと、レナリドミド（レブリミド（ＲＥＶＬＩＭＩＤ））を併用した、本明細書に記載のｅＩＦ−５Ａ１タンパク質又はその一部をコードしているポリヌクレオチドの送達とを投与することによって、対象（例えばヒト）の多発性骨髄腫を治療する方法を提供する。ある特定の実施形態では、レナリドミドの治療上有効な量は一日に５ｍｇ〜３０ｍｇの範囲である。ある特定の実施形態では、レナリドミドの治療上有効な量は一日に約２５ｍｇである。ある特定の実施形態では、対象の内因性ｅＩＦ−５Ａ１遺伝子の発現をノックアウト又はノックダウンするための治療上有効な量の内因性ｅＩＦ−５Ａ１遺伝子を標的としたｓｉＲＮＡと、ｅＩＦ−５Ａ１のタンパク質をコードしているポリヌクレオチドの送達とは、０．１ｍｇ／ｋｇ〜０．５ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、対象の内因性ｅＩＦ−５Ａ１遺伝子の発現をノックアウト又はノックダウンする量の内因性ｅＩＦ−５Ａ１遺伝子を標的としたｓｉＲＮＡと、ｅＩＦ−５Ａ１タンパク質又はその一部をコードしているポリヌクレオチドの送達とは、週に２回又は３回投与され、レナリドミドは週に５回以下で投与される。一部の実施形態では、本発明は、多発性骨髄腫に罹患しており、且つ本明細書に記載の治療方法に関するレナリドミドによる治療を既に受けているヒト対象の選択を包含する。
実施例１：ＳＮＳ０１−Ｔ組成
変異型ｅＩＦ−５Ａ１Ｋ５０Ｒ（ｐＥｘｐ５Ａ）の発現用プラスミドは図７（配列番号１３）に記載のとおりである。ＣｐＧジヌクレオチドを低減した発現プラスミドは、主としてＢ細胞株の細胞でヒトｅＩＦ５Ａ１Ｋ５０Ｒ（配列番号１４）を発現するように設計する。ベクターは、ｐＣｐＧ−ＬａｃＺに由来する、ＣｐＧジヌクレオチドが完全に欠失しているプラスミドである。大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）での複製及び選択に必要なすべてのエレメントはＣｐＧジヌクレオチドを含まない。ｅＩＦ５Ａ１Ｋ５０ＲのＢ細胞特異的発現を作動させるため、ＣｐＧ−ＬａｃＺベクター由来の本来のＣＭＶエンハンサー／プロモーター及びＬａｃＺ遺伝子は、それぞれ、ヒトミニマルＢ細胞特異的プロモーター（Ｂ２９／ＣＤ７９ｂ、Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）及びヒトｅＩＦ５Ａ１Ｋ５０Ｒに置換されている。Ｂ２９プロモーターの活性を高め、且つ非Ｂ細胞における発現を低減させるために、Ｂ２９ ＤＨＳ４．４ ３’エンハンサーがｅＩＦ５Ａ１発現カセットの下流でプラスミドに導入されている（Ｍａｌｏｎｅ （２００６） Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ３６２：１７３−１８３）。Ｂ２９ミニマルプロモーター、ｅＩＦ５Ａ１Ｋ５０Ｒ、及びＢ２９ ＤＨＳ４．４ ３’エンハンサーの組込みにより、３２ＣｐＧジヌクレオチドがベクターに導入されている。
変異型ｅＩＦ−５Ａ１Ｋ５０Ｒ（ｐＥｘｐ５Ａ）の発現用プラスミドは図７（配列番号１３）に記載のとおりである。ＣｐＧジヌクレオチドを低減した発現プラスミドは、主としてＢ細胞株の細胞でヒトｅＩＦ５Ａ１Ｋ５０Ｒ（配列番号１４）を発現するように設計する。ベクターは、ｐＣｐＧ−ＬａｃＺに由来する、ＣｐＧジヌクレオチドが完全に欠失しているプラスミドである。大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）での複製及び選択に必要なすべてのエレメントはＣｐＧジヌクレオチドを含まない。ｅＩＦ５Ａ１Ｋ５０ＲのＢ細胞特異的発現を作動させるため、ＣｐＧ−ＬａｃＺベクター由来の本来のＣＭＶエンハンサー／プロモーター及びＬａｃＺ遺伝子は、それぞれ、ヒトミニマルＢ細胞特異的プロモーター（Ｂ２９／ＣＤ７９ｂ、Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）及びヒトｅＩＦ５Ａ１Ｋ５０Ｒに置換されている。Ｂ２９プロモーターの活性を高め、且つ非Ｂ細胞における発現を低減させるために、Ｂ２９ ＤＨＳ４．４ ３’エンハンサーがｅＩＦ５Ａ１発現カセットの下流でプラスミドに導入されている（Ｍａｌｏｎｅ （２００６） Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ３６２：１７３−１８３）。Ｂ２９ミニマルプロモーター、ｅＩＦ５Ａ１Ｋ５０Ｒ、及びＢ２９ ＤＨＳ４．４ ３’エンハンサーの組込みにより、３２ＣｐＧジヌクレオチドがベクターに導入されている。
ヒトｅＩＦ−５Ａ１を標的としているｓｉＲＮＡ：ｅＩＦ５Ａ１ ｓｉＲＮＡターゲット＃１（このｓｉＲＮＡは、ヒトｅＩＦ５Ａ１のこの領域：５’−ＡＡＧＣＴＧＧＡＣＴＣＣＴＣＣＴＡＣＡＣＡ−３’（配列番号１）を標的とする）。このｓｉＲＮＡ配列は、本明細書ではｈ５Ａ１と呼ぶことが多く、配列番号５及び配列番号６に示される。ｅＩＦ５Ａ１ ｓｉＲＮＡターゲット＃２ ｅＩＦ５Ａ１（このｓｉＲＮＡは、ヒトｅＩＦ５Ａ１のこの領域：５’−ＡＡＡＧＧＡＡＴＧＡＣＴＴＣＣＡＧＣＴＧＡ−３’（配列番号２）を標的とする）。（このｓｉＲＮＡ配列は本明細書ではｈ５Ａ１−ＡＬＴと呼ぶことが多い）。対照のｓｉＲＮＡは、配列番号３及び配列番号４に示される。
マイクロチューブで１ｍＬのＳＮＳ０１−Ｔを調製するため、滅菌エッペンドルフチューブに２．３ｍｇ／ｍＬのｐＥｘｐ５Ａを２１．８μＬ加える。ｐＤＮＡが入っているエッペンドルフチューブにｓｉＲＮＡを２５μＬ加える。ピペットチップを使用して、上下にゆっくりと５回ピペッティングすることにより穏やかに混合する。ＤＮＡ／ｓｉＲＮＡ混合物に１１．３ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ７．４を２０３μＬ加える。ピペットチップを使用して、上下にゆっくりと５回ピペッティングすることにより穏やかに混合する。１０％グルコースを２５０μＬ加える。ピペットチップを使用して、上下にゆっくりと１０〜１２回ピペッティングすることにより穏やかに混合する。チューブを別にして置き、次のステップに進む。ｉｎｖｉｖｏ−ｊｅｔＰＥＩを９μＬ加え、滅菌エッペンドルフチューブを分ける。ｉｎｖｉｖｏ−ｊｅｔＰＥＩが入っているエッペンドルフチューブに１１．３ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ７．４を２４１μＬ加える。ピペットチップを使用して、上下にゆっくりと５回ピペッティングすることにより穏やかに混合する。ｉｎｖｉｖｏ−ｊｅｔＰＥＩ／ｔｒｉｓ混合物に１０％グルコースを２５０μＬ加える。ピペットチップを使用して、上下にゆっくりと１０〜１２回ピペッティングすることにより穏やかに混合する。１０００μL容量にセットしたＰ１０００を用い、ステップＡで得たＤＮＡ／ｓｉＲＮＡ／ｔｒｉｓ／グルコース混合物が入っているチューブから全容量を、ステップＢで得たＰＥＩ／トリス／グルコース混合物が入っているチューブに移す。ピペットチップを使用して、上下にゆっくりと１０〜１２回ピペッティングすることにより穏やかに混合する。チューブを別にして室温に置き、使用前に最低３０分間ナノ粒子を形成させる。
実施例２：ＤＬＢＣＬ試験の設計
３〜４週齢の雌ＣＢ１７−ＳＣＩＤマウスに、１．２×１０７個のびまん性大細胞性Ｂ細胞リンパ腫ＳＵ−ＤＨＬ６細胞を皮下接種した。腫瘍が５０ｍｍ３に達するまで下記の治療プロトコルは開始せず、治療薬を６週間まで週に２回又は３回投与した。
３〜４週齢の雌ＣＢ１７−ＳＣＩＤマウスに、１．２×１０７個のびまん性大細胞性Ｂ細胞リンパ腫ＳＵ−ＤＨＬ６細胞を皮下接種した。腫瘍が５０ｍｍ３に達するまで下記の治療プロトコルは開始せず、治療薬を６週間まで週に２回又は３回投与した。
実施例３：ＤＬＢＣＬにおけるＳＮＳ０１−Ｔの用量反応
ＳＮＳ０１−Ｔの用量反応では、週２回の投与と週３回の投与の間に差は認められなかった（図１〜２を参照）。腫瘍の成長は、治療の終了後（３８日）増加した。ｐＥｘｐ５Ａの代わりに切断型ｅＩＦ５Ａプラスミドを使用した場合には（図３を参照）反応は改善されなかったが、ＤＬＢＣＬ腫瘍に対する活性は維持されていた（注：この群のマウス一匹は治癒した）。マウスの体重に対する影響は認められなかった。ＳＮＳ０１−Ｔで治療したＤＬＢＣＬ腫瘍を有するマウスにおける生存率中央値を下に示す。
ＳＮＳ０１−Ｔの用量反応では、週２回の投与と週３回の投与の間に差は認められなかった（図１〜２を参照）。腫瘍の成長は、治療の終了後（３８日）増加した。ｐＥｘｐ５Ａの代わりに切断型ｅＩＦ５Ａプラスミドを使用した場合には（図３を参照）反応は改善されなかったが、ＤＬＢＣＬ腫瘍に対する活性は維持されていた（注：この群のマウス一匹は治癒した）。マウスの体重に対する影響は認められなかった。ＳＮＳ０１−Ｔで治療したＤＬＢＣＬ腫瘍を有するマウスにおける生存率中央値を下に示す。
実施例４：マントル細胞リンパ腫試験の設計
３〜４週齢の雌ＣＢ１７−ＳＣＩＤマウスに、２．５×１０６個のマントル細胞リンパ腫ＭＣＬ−ＪＭＶ−２細胞を皮下接種した。腫瘍が５０ｍｍ３に達するまで下記の治療プロトコルは開始せず、治療薬は３週間まで週に２回又は３回（レナリドミドについては５回）投与した。
３〜４週齢の雌ＣＢ１７−ＳＣＩＤマウスに、２．５×１０６個のマントル細胞リンパ腫ＭＣＬ−ＪＭＶ−２細胞を皮下接種した。腫瘍が５０ｍｍ３に達するまで下記の治療プロトコルは開始せず、治療薬は３週間まで週に２回又は３回（レナリドミドについては５回）投与した。
実施例５：マントル細胞リンパ腫におけるＳＮＳ０１−Ｔ
ＳＮＳ０１−Ｔの用量反応では、腫瘍サイズの依存性縮小を示した（図５を参照）。ＳＮＳ０１−Ｔ及びレナリドミドの併用薬物療法は、マントル細胞リンパ腫の異種移植片腫瘍の成長を制御する上で単剤療法よりも効果的である（図６）。ＳＣＩＤマウスには、右脇腹に０．２５×１０６個のＪＶＭ−２ ＭＣＬ細胞が移植された。腫瘍が５０ｍｍ３の平均サイズに達した時、治療を開始した。マウスに対し、０．３７５ｍｇ／ｋｇの対照ナノ粒子又はＳＮＳ０１−Ｔのいずれかで週に２回（注射間隔は３〜４日）治療した。レナリドミド（ＬＥＮ）治療を受けるマウスは、１５ｍｇ／ｋｇの腹腔内注射を週５回受けた。腫瘍の寸法を、週２〜３回測定した。治療は、５１日間継続された。示したデータは、平均腫瘍体積±標準誤差（対照群と比較して＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１）である。
ＳＮＳ０１−Ｔの用量反応では、腫瘍サイズの依存性縮小を示した（図５を参照）。ＳＮＳ０１−Ｔ及びレナリドミドの併用薬物療法は、マントル細胞リンパ腫の異種移植片腫瘍の成長を制御する上で単剤療法よりも効果的である（図６）。ＳＣＩＤマウスには、右脇腹に０．２５×１０６個のＪＶＭ−２ ＭＣＬ細胞が移植された。腫瘍が５０ｍｍ３の平均サイズに達した時、治療を開始した。マウスに対し、０．３７５ｍｇ／ｋｇの対照ナノ粒子又はＳＮＳ０１−Ｔのいずれかで週に２回（注射間隔は３〜４日）治療した。レナリドミド（ＬＥＮ）治療を受けるマウスは、１５ｍｇ／ｋｇの腹腔内注射を週５回受けた。腫瘍の寸法を、週２〜３回測定した。治療は、５１日間継続された。示したデータは、平均腫瘍体積±標準誤差（対照群と比較して＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１）である。
実施例６：レナリドミド又はボルテゾミブとＳＮＳ０１−Ｔとを用いる多発性骨髄腫の治療
認可されている他の多発性骨髄腫薬物（例えばレナリドミド又はボルテゾミブ）とＳＮＳ０１−Ｔを併用することによりさらなる利益がある。本発明者らは、ＳＮＳ０１−Ｔと併用した場合、これらの薬物が最高約４０倍まで、より効果的に作用することを明らかにした。
認可されている他の多発性骨髄腫薬物（例えばレナリドミド又はボルテゾミブ）とＳＮＳ０１−Ｔを併用することによりさらなる利益がある。本発明者らは、ＳＮＳ０１−Ｔと併用した場合、これらの薬物が最高約４０倍まで、より効果的に作用することを明らかにした。
Claims (24)
- （ａ）配列番号８の残基５０に変異を含有する変異型真核生物開始因子５Ａ１（ｅＩＦ−５Ａ１）をコードしているポリヌクレオチドを含む発現ベクターと、
（ｂ）ある量の低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）であって、前記ｓｉＲＮＡのポリヌクレオチド配列が内因性ｅＩＦ−５Ａの発現を干渉するが、変異型ｅＩＦ−５Ａ１の発現は干渉しない、低分子干渉ＲＮＡと、
を投与するステップを含む、治療を必要とするヒト対象のＢ細胞リンパ腫を治療する方法。 - 発現ベクター及びｓｉＲＮＡがポリエチレンイミン（ＰＥＩ）ナノ粒子に連結されている、請求項１に記載の方法。
- ＰＥＩナノ粒子が静脈内投与される、請求項１又は２に記載の方法。
- ｓｉＲＮＡの鎖の１本が５’−ＧＣＵＧＧＡＣＵＣＣＵＣＣＵＡＣＡＣＡｄＴｄＴ−３’のポリヌクレオチド配列を含み、ｓｉＲＮＡの逆鎖が３’−ｄＴｄＴＣＧＡＣＣＵＧＡＧＧＡＧＧＡＵＧＵＧＵ−５’のポリヌクレオチド配列を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
- ｓｉＲＮＡの鎖の１本が５’−ＧＣＵＧＧＡＣＵＣＣＵＣＣＵＡＣＡＣＡｄＴｄＴ−３’のポリヌクレオチド配列からなり、ｓｉＲＮＡの逆鎖が３’−ｄＴｄＴＣＧＡＣＣＵＧＡＧＧＡＧＧＡＵＧＵＧＵ−５’のポリヌクレオチド配列からなる、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
- Ｂ細胞リンパ腫が、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、マントル細胞リンパ腫及び濾胞性リンパ腫からなる群から選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
- ｓｉＲＮＡの鎖の１本が５’−ＡＡＧＣＵＧＧＡＣＵＣＣＵＣＣＵＡＣＡＣＡｄＴｄＴ−３’のポリヌクレオチド配列を含み、ｓｉＲＮＡの逆鎖が３’−ｄＴｄＴＵＵＣＧＡＣＣＵＧＡＧＧＡＧＧＡＵＧＵＧＵ−５’のポリヌクレオチド配列を含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
- ｓｉＲＮＡの鎖の１本が５’−ＡＡＧＣＵＧＧＡＣＵＣＣＵＣＣＵＡＣＡＣＡｄＴｄＴ−３’のポリヌクレオチド配列からなり、ｓｉＲＮＡの逆鎖が３’−ｄＴｄＴＵＵＣＧＡＣＣＵＧＡＧＧＡＧＧＡＵＧＵＧＵ−５’のポリヌクレオチド配列からなる、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
- 配列番号８のＫ５０の置換がＫ５０Ｒである、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
- 残基５０に置換を含有する変異型ｅＩＦ−５Ａ１をコードしているポリヌクレオチドが配列番号１３のヌクレオチド８２７〜１２８７を含む、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
- 残基５０に置換を含有する変異型ｅＩＦ−５Ａ１をコードしているポリヌクレオチドが配列番号１３のヌクレオチド８２７〜１２８７からなる、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
- 発現ベクターがＢ細胞で活性のあるプロモーターをさらに含み、前記プロモーターがＢ細胞における配列番号８の置換残基５０を含有する変異型ｅＩＦ−５Ａ１の発現を制御する、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
- ヒト対象にボルテゾミブ又はレナリドミドを投与するステップをさらに含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
- （ａ）配列番号８の残基５０に変異を含有する変異型真核生物開始因子５Ａ１（ｅＩＦ−５Ａ１）をコードしているポリヌクレオチドを含む発現ベクターと、
（ｂ）ある量の低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）であって、前記ｓｉＲＮＡのポリヌクレオチド配列が内因性ｅＩＦ−５Ａの発現を干渉するが、変異型ｅＩＦ−５Ａ１の発現は干渉しない、低分子干渉ＲＮＡと、
（ｃ）ボルテゾミブ又はレナリドミドから選択される薬剤と、
を投与するステップを含む、治療を必要とするヒト対象の多発性骨髄腫を治療する方法。 - 発現ベクター及びｓｉＲＮＡがポリエチレンイミン（ＰＥＩ）ナノ粒子に連結されている、請求項１４に記載の方法。
- ＰＥＩナノ粒子が静脈内投与される、請求項１４又は１５に記載の方法。
- ｓｉＲＮＡの鎖の１本が５’−ＧＣＵＧＧＡＣＵＣＣＵＣＣＵＡＣＡＣＡｄＴｄＴ−３’のポリヌクレオチド配列を含み、ｓｉＲＮＡの逆鎖が３’−ｄＴｄＴＣＧＡＣＣＵＧＡＧＧＡＧＧＡＵＧＵＧＵ−５’のポリヌクレオチド配列を含む、請求項１４〜１６のいずれか一項に記載の方法。
- ｓｉＲＮＡの鎖の１本が５’−ＧＣＵＧＧＡＣＵＣＣＵＣＣＵＡＣＡＣＡｄＴｄＴ−３’のポリヌクレオチド配列からなり、ｓｉＲＮＡの逆鎖が３’−ｄＴｄＴＣＧＡＣＣＵＧＡＧＧＡＧＧＡＵＧＵＧＵ−５’のポリヌクレオチド配列からなる、請求項１４〜１７のいずれか一項に記載の方法。
- ｓｉＲＮＡの鎖の１本が５’−ＡＡＧＣＵＧＧＡＣＵＣＣＵＣＣＵＡＣＡＣＡｄＴｄＴ−３’のポリヌクレオチド配列を含み、ｓｉＲＮＡの逆鎖が３’−ｄＴｄＴＵＵＣＧＡＣＣＵＧＡＧＧＡＧＧＡＵＧＵＧＵ−５’のポリヌクレオチド配列を含む、請求項１４〜１８のいずれか一項に記載の方法。
- ｓｉＲＮＡの鎖の１本が５’−ＡＡＧＣＵＧＧＡＣＵＣＣＵＣＣＵＡＣＡＣＡｄＴｄＴ−３’のポリヌクレオチド配列からなり、ｓｉＲＮＡの逆鎖が３’−ｄＴｄＴＵＵＣＧＡＣＣＵＧＡＧＧＡＧＧＡＵＧＵＧＵ−５’のポリヌクレオチド配列からなる、請求項１４〜１９のいずれか一項に記載の方法。
- 配列番号８のＫ５０の置換がＫ５０Ｒである、請求項１４〜２０のいずれか一項に記載の方法。
- 残基５０に置換を含有する変異型ｅＩＦ−５Ａ１をコードしているポリヌクレオチドが配列番号１３のヌクレオチド８２７〜１２８７を含む、請求項１４〜２１のいずれか一項に記載の方法。
- 残基５０に置換を含有する変異型ｅＩＦ−５Ａ１をコードしているポリヌクレオチドが配列番号１３のヌクレオチド８２７〜１２８７からなる、請求項１４〜２２のいずれか一項に記載の方法。
- 発現ベクターがＢ細胞で活性のあるプロモーターをさらに含み、前記プロモーターがＢ細胞における配列番号８の置換残基５０を含有する変異型ｅＩＦ−５Ａ１の発現を制御する、請求項１４〜２３のいずれか一項に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201161565418P | 2011-11-30 | 2011-11-30 | |
| US61/565,418 | 2011-11-30 | ||
| PCT/US2012/067330 WO2013082449A2 (en) | 2011-11-30 | 2012-11-30 | Treatment of b cell lymphomas |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2015500808A true JP2015500808A (ja) | 2015-01-08 |
Family
ID=48536237
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2014544928A Pending JP2015500808A (ja) | 2011-11-30 | 2012-11-30 | Ｂ細胞リンパ腫の治療 |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20140314704A1 (ja) |
| EP (1) | EP2785380A4 (ja) |
| JP (1) | JP2015500808A (ja) |
| KR (1) | KR20140113647A (ja) |
| CN (1) | CN104736183A (ja) |
| AU (1) | AU2012345707A1 (ja) |
| CA (1) | CA2857747A1 (ja) |
| WO (1) | WO2013082449A2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013165973A1 (en) * | 2012-04-30 | 2013-11-07 | Senesco Technologies, Inc. | Combination treatment of multiple myeloma |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101115834A (zh) * | 2004-12-03 | 2008-01-30 | 森尼斯科技术公司 | 细胞凋亡－特异性的eIF－5A及其编码多核苷酸 |
| CN101568347A (zh) * | 2005-12-13 | 2009-10-28 | 森尼斯科技术公司 | eIF-5A在杀死多发性骨髓瘤细胞上的用途 |
| CN102282259A (zh) * | 2008-03-07 | 2011-12-14 | 森尼斯科技术公司 | 与有义构建体实现期望多核苷酸的表达的用途相组合的、sirna实现内源基因的减量调节的用途 |
| CA2735823A1 (en) * | 2008-09-03 | 2010-03-11 | Senesco Technologies, Inc. | Use of a truncated eif-5a1 polynucleotide to induce apoptosis in cancer cells |
-
2012
- 2012-11-30 US US14/362,005 patent/US20140314704A1/en not_active Abandoned
- 2012-11-30 JP JP2014544928A patent/JP2015500808A/ja active Pending
- 2012-11-30 EP EP12853168.8A patent/EP2785380A4/en not_active Withdrawn
- 2012-11-30 KR KR1020147016281A patent/KR20140113647A/ko not_active Application Discontinuation
- 2012-11-30 AU AU2012345707A patent/AU2012345707A1/en not_active Abandoned
- 2012-11-30 CA CA2857747A patent/CA2857747A1/en not_active Abandoned
- 2012-11-30 WO PCT/US2012/067330 patent/WO2013082449A2/en active Application Filing
- 2012-11-30 CN CN201280068504.6A patent/CN104736183A/zh active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU2012345707A1 (en) | 2014-06-26 |
| WO2013082449A2 (en) | 2013-06-06 |
| KR20140113647A (ko) | 2014-09-24 |
| US20140314704A1 (en) | 2014-10-23 |
| CA2857747A1 (en) | 2013-06-06 |
| CN104736183A (zh) | 2015-06-24 |
| EP2785380A4 (en) | 2015-12-09 |
| EP2785380A2 (en) | 2014-10-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20230026381A1 (en) | Combinations of mrnas encoding immune modulating polypeptides and uses thereof | |
| US10973917B2 (en) | MRNA combination therapy for the treatment of cancer | |
| JP2021536244A (ja) | 遺伝子操作されたａｄａｒのリクルートを介したｒｎａ及びｄｎａ塩基の編集 | |
| ES2919552T3 (es) | Procedimientos de utilización de polinucleotidos codificadores de ligando ox40 | |
| KR20150014493A (ko) | 고 형질도입 효율 raav 벡터, 조성물 및 사용 방법 | |
| JP2024105237A (ja) | 治療用タンパク質の標的細胞に特異的な産生のための、および、標的細胞に関連する疾患、疾病、または障害の処置のための、融合性脂質ナノ粒子、および、融合性脂質ナノ粒子の製造方法と使用方法 | |
| JP2022525302A (ja) | フェニルアラニンヒドロキシラーゼ（ｐａｈ）治療薬を発現するための非ウイルス性ｄｎａベクターおよびその使用 | |
| EP4013879A1 (en) | Methods and compositions for reducing gene or nucleic acid therapy-related immune responses | |
| JP2015500808A (ja) | Ｂ細胞リンパ腫の治療 | |
| WO2011071027A1 (ja) | Socs3遺伝子がコードするsocs3タンパク質の発現を抑制し得るrna干渉分子、及びその利用 | |
| KR101595152B1 (ko) | Ｔｃｔｐ-ｐｔｄ를 포함하는 유전자 전달체 | |
| US20240269255A1 (en) | Hpv infectious disease vaccine | |
| WO2024036273A1 (en) | Chimeric cd8-alpha co-receptor compositions and methods of use | |
| WO2023183820A2 (en) | Respiratory tract infection therapeutics against covid-19 | |
| WO2024113009A1 (en) | Agents, compositions and methods for modulating immunity | |
| JP2024522851A (ja) | 遺伝子の発現をモジュレートするための組成物および方法 | |
| JP2020193160A (ja) | 肺送達用薬物担体およびこれを含む肺疾患治療薬 |