JP2014532657A - Ｃ型肝炎ウイルスを処置するための方法および組成物 - Google Patents

Abstract

本明細書では、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンをＣ型肝炎ウイルスに感染している被験体に一定期間投与する工程を含む、該被験体を処置する方法を開示する。一態様では、該方法は、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンを含む、インターフェロンを用いない処置レジメンを該被験体に投与する工程を含む。特定の一態様では、該方法は、該期間が終了した後少なくとも１２週間、該被験体のＨＣＶ ＲＮＡの量を検出不可能にするのに十分な方法である。また本明細書では、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンを含む、Ｃ型肝炎ウイルス感染症の処置に有用な組成物を開示する。

Description

発明の分野
本明細書では、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンをＣ型肝炎ウイルスに感染している被験体に一定期間（ｆｏｒ ａ ｔｉｍｅ ｐｅｒｉｏｄ）投与する工程を含む、該被験体を処置する方法を開示する。一態様では、該方法は、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンを含む、インターフェロンを用いない処置レジメンを被験体に投与する工程を含む。特定の一態様では、該方法は、その期間が終了した後少なくとも１２週間、被験体のＨＣＶ ＲＮＡの量を検出不可能にするのに十分な方法である。また本明細書では、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンを含む、Ｃ型肝炎ウイルス感染症の処置に有用な組成物を開示する。

背景
Ｃ型肝炎ウイルス（「ＨＣＶ」）感染症は、相当数の感染個体において肝硬変および肝細胞癌などの慢性肝疾患をもたらす主要な健康問題であり、世界保健機関によれば、感染個体は世界人口の約３％に上ると推定されている（世界保健機関、Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ（２００２年））。米国疾病管理予防センターによれば、ＨＣＶは、米国で最も一般的な血液媒介性の感染症であり、米国だけで推定３２０万（１．８％）の人が慢性感染している（米国疾病管理予防センター、Ｖｉｒａｌ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｓｕｒｖｅｉｌｌａｎｃｅ−Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ、２０１０年；米国疾病管理予防センター、Ｍｏｒｂｉｄｉｔｙ ａｎｄ Ｍｏｒｔａｌｉｔｙ Ｗｅｅｋｌｙ Ｒｅｐｏｒｔ ７０巻（１７号）：５３７〜５３９頁（２０１１年５月６日））。世界的には推定１億５千万人〜１億８千万人の個体がＨＣＶに慢性感染しており、毎年３００〜４００万人が感染している（世界保健機関、Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ、Ｆａｃｔ Ｓｈｅｅｔ、１６４号（２０１２年７月）；Ｇｈａｎｙら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ（２００９年）４９巻（４号）：１３３５〜１３７４頁）。一度感染すると、約２０％の人はウイルスを除去するが、残りの人は余生ずっとＨＣＶを保有し得る。慢性感染した個体の１０〜２０パーセントは、最終的に、肝臓を破壊する肝硬変またはがんを発症する（Ｎａｇｇｉｅら、Ｊ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．（２０１０年）６５巻：２０６３〜２０６９頁）。ウイルス性疾患は、汚染血液および血液製剤によって、汚染針によって、または性感染によって、および感染した母親もしくはキャリアの母親からその母親の子への垂直感染によって、非経口により伝播する。

ＨＣＶビリオンは、エンベロープを有するプラス鎖ＲＮＡウイルスであり、約３，０１０アミノ酸のポリタンパク質をコードする約９６００塩基の単一オリゴリボヌクレオチドゲノム配列からなる。ＨＣＶ遺伝子のタンパク質産物は、構造タンパク質Ｃ、Ｅ１およびＥ２、ならびに非構造タンパク質ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４ＡおよびＮＳ４Ｂ、ならびにＮＳ５ＡおよびＮＳ５Ｂを有する。非構造（「ＮＳ」）タンパク質は、ウイルス複製のための触媒機構を提供すると考えられる。ＮＳ３プロテアーゼは、ポリタンパク質鎖からＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼであるＮＳ５Ｂを放出する。ＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼは、ＨＣＶの複製サイクルにおける鋳型として働く一本鎖ウイルスＲＮＡから二本鎖ＲＮＡを合成するために必要である。したがって、ＮＳ５Ｂポリメラーゼは、ＨＣＶ複製複合体における必須成分とみなされる（Ｋ． Ｉｓｈｉら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ（１９９９年）２９巻：１２２７〜１２３５頁；Ｖ．Ｌｏｈｍａｎｎら、Ｖｉｒｏｌｏｇｙ（１９９８年）２４９巻：１０８〜１１８頁）。ＨＣＶ ＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害は、二本鎖ＨＣＶ ＲＮＡの形成を防止し、したがってＨＣＶに特異的な抗ウイルス療法の開発に魅力的な手法となる。

現在、抗ＨＣＶ療法剤として直接作用する抗ウイルス剤の薬物開発に対する潜在的ないくつかの分子標的が、限定されるものではないが、ＮＳ２−ＮＳ３自己プロテアーゼ、Ｎ３プロテアーゼ、Ｎ３ヘリカーゼおよびＮＳ５Ｂポリメラーゼを含め、同定されている。ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼは、一本鎖プラスセンスＲＮＡゲノムの複製に必須であり、この酵素は、医薬品化学者の間で大きな関心の的になっている。ＨＣＶの別の補助タンパク質は、ＮＳ５Ａと呼ばれる。ＮＳ５Ａ非構造タンパク質は、明らかな酵素活性をもたないリンタンパク質であるが、宿主細胞増殖、免疫および先天性免疫、ならびにウイルス複製を含む細胞経路の多機能制御因子として作用する（Ａｐｐｅｌら、Ｊ． Ｖｉｒｏｌ．（２００５年）７９巻：３１８７〜３１９４頁；Ｅｖａｎｓら、Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ（２００４年）１０１巻：１３０３８〜１３０４３頁；Ｇａｌｅら、Ｎａｔｕｒｅ（２００５年）４３６巻：９３９〜９４５頁；Ｇａｌｅら、Ｖｉｒｏｌｏｇｙ（１９９７年）２３０巻：２１７〜２２７頁；Ｇｈｏｓｈら、Ｊ． Ｇｅｎ． Ｖｉｒｏｌ．（１９９９年）８０巻（Ｐｔ５）：１１７９〜１１８３頁；Ｎｅｄｄｅｒｍａｎｎら、Ｊ． Ｖｉｒｏｌ．（１９９９年）７３巻：９９８４〜９９９１頁；Ｐｏｌｙａｋら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ（１９９９年）２９巻：１２６２〜１２７１頁；Ｓｈｉｍａｋａｍｉら、Ｊ． Ｖｉｒｏｌ．（２００４年）７８巻：２７３８〜２７４８頁；Ｓｈｉｒｏｔａら、Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．（２００２年）２７７巻：１１１４９〜１１１５５頁；およびＴａｎら、Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． Ｕ．Ｓ．Ａ．（１９９９年）９６巻：５５３３〜５５３８頁）。ＮＳ５Ａは、そのＮ末端の両親媒性ヘリックスによって宿主細胞膜と会合しており、それは複製複合体の一部である（Ｅｌａｚａｒら、Ｊ． Ｖｉｒｏｌ．（２００４年）７８巻：１１３９３〜１１４００頁およびＰｅｎｉｎら、Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．（２００４年）２７９巻：４０８３５〜４０８４３頁）。近年の研究では、ＮＳ５Ａが３つのドメインで構成されていることが示唆されている。Ｎ末端ドメインの最初の２１３アミノ酸はドメインＩを構成しかつ亜鉛結合モチーフを含有し、このことは、このタンパク質が亜鉛金属タンパク質であることを示唆しておりそして、ドメインＩＩおよびＩＩＩが、このタンパク質のＣ末端領域にある（Ｔｅｌｌｉｎｇｈｕｉｓｅｎら、Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．（２００４年）２７９巻：４８５７６〜４８５８７頁およびＴｅｌｌｉｎｇｈｕｉｓｅｎら、Ｎａｔｕｒｅ（２００５年）４３５巻：３７４〜３７９頁）。ＮＳ５Ａは、５６ｋＤの基本形態と５８ｋＤの高リン酸化形態の２種類のリン酸化形態で存在する。このタンパク質は、主にドメインＩＩおよびＩＩＩ内のセリン残基上の特定の部位で、宿主細胞キナーゼによってリン酸化されている（Ｉｄｅら、Ｇｅｎｅ（１９９７年）２０１巻：１５１〜１５８頁；Ｋａｎｅｋｏら、Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ｒｅｓ． Ｃｏｍｍｕｎ．（１９９４年）２０５巻：３２０〜３２６頁；Ｋａｔｚｅら、Ｖｉｒｏｌｏｇｙ（２０００年）２７８巻：５０１〜５１３頁；Ｒｅｅｄら、Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．（１９９９年）２７４巻：２８０１１〜２８０１８頁；Ｒｅｅｄら、Ｊ． Ｖｉｒｏｌ．（１９９７年）７１巻：７１８７〜７１９７頁；およびＴａｎｊｉら、Ｊ． Ｖｉｒｏｌ．（１９９５年）６９巻：３９８０〜３９８６頁）。

慢性ＨＣＶ感染症の処置に最初に承認された標準ケア（「ＳＯＣ」）は、ペグ化インターフェロンアルファ−２ａまたはペグ化インターフェロンアルファ−２ｂ（まとめて「ペグインターフェロン」または「ＰＥＧ」）の単独使用、またはリバビリン（「ＲＢＶ」）と組み合わせた併用療法である。慢性Ｃ型肝炎の処置の主要目的は、持続性ウイルス学的応答（「ＳＶＲ」）であり、これは、処置後に一定期間、血清ＨＣＶ ＲＮＡレベルが検出不可能になることを指す。年齢、体重、人種および進行性線維症を含む宿主因子は、処置転帰に影響を及ぼすが（Ｄｉｅｎｓｔａｇ ａｎｄ ＭｃＨｕｔｃｈｉｓｏｎ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ（２００６年）１３０巻：２３１〜２６４頁、およびＭｉｓｓｉｈａら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ（２００８年）１３４巻：１６９９〜１７１４頁）、応答の予測因子としては弱い。それとは対照的に、遺伝子型および処置中のウイルス応答パターンなどのウイルス因子は、処置が成功する尤度を決定し、処置期間を個々に導き出すのに使用することができ、臨床実践において非常に有用であることが証明されている（Ｇｅら、Ｎａｔｕｒｅ（２００９年）４６１巻：３９９〜４０１頁）。

ある患者ではＳＯＣ処置に対する応答を促進するにもかかわらず、Ｃ型肝炎ウイルスに感染した患者の間での、ペグインターフェロン／リバビリン併用療法に対する全体的な応答は、わずか約５０％である。遺伝子型１のＨＣＶに感染した患者では、長期（４８〜７２週間）のペグインターフェロン／リバビリン療法で処置しても、ＳＶＲ率は＜５０％である（Ｎａｇｇｉｅら、Ｊ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．（２０１０年）６５巻：２０６３〜２０６９頁）。したがって、ペグインターフェロン単独によるまたはペグインターフェロンとリバビリンとの組合せでの処置転帰と比較してＳＶＲを改善する療法を提供する必要がある。また、処置開始後に、患者が完全なウイルス抑制（陰性ＨＣＶ状態）の証拠を示すまでの期間を短縮する療法を提供する必要がある。

商標ＰＥＧＡＳＹＳ（登録商標）で市販されているペグインターフェロンアルファ−２ａ（「ＰＥＧ−ＩＦＮ−α−２ａ」または「ペグインターフェロンα−２ａ」）は、単独でまたはリバビリンと組み合わせて皮下注射によって投与される、とりわけ慢性Ｃ型肝炎（「ＣＨＣ」）の処置に適応される抗ウイルス剤である。ＰＥＧＡＳＹＳ（登録商標）は、まだインターフェロンアルファによる処置を受けていない代償性肝疾患の患者、肝硬変および代償性肝疾患の組織学的証拠がある患者、ならびにＣＨＣ／ＨＩＶに共感染した成人のＣＨＣ処置に適応される。ＰＥＧ−ＩＦＮ−α−２ａとリバビリンを使用する併用療法は、患者が禁忌を有しているか、またはリバビリンに対して著しく不耐性でない限り、推奨される。

商標ＰＥＧＩＮＴＲＯＮ（登録商標）で市販されているペグインターフェロンアルファ−２ｂ（「ＰＥＧ−ＩＦＮ−α−２ｂ」または「ペグインターフェロンα−２ｂ」）は、やはり皮下注射によって投与され、代償性肝疾患の患者のＣＨＣを処置するのに、単独使用またはリバビリンとの併用に適応される。ＰＥＧ−ＩＦＮ−α−２ｂは、ＰＥＧ−ＩＦＮ−α−２ａと同様に望ましくない副作用がある。

商標ＣＯＰＥＧＵＳ（登録商標）で市販されているリバビリン（「ＲＢＶ」）は、まだペグインターフェロンによる処置を受けていない５歳以上の代償性肝疾患の患者、およびＨＩＶに共感染しているＣＨＣの成人患者において、ペグインターフェロンを組み合わせたＣＨＣウイルス感染症処置に適応されるヌクレオシド類似体である。リバビリンは、単独ではＣＨＣ処置には承認されていない（ＣＯＰＥＧＵＳ（登録商標）ＦＤＡ承認ラベル、２０１１年８月改訂）。臨床試験では、リバビリン単独によって、一部のＣＨＣ感染症患者の処置過程中に、アラニンアミノトランスフェラーゼ（「ＡＬＴ」）レベルが一過性に正常化され得ることが示されている。しかし、これらの研究によれば、リバビリン単独では、療法中または療法後のＨＣＶ ＲＮＡレベルは低下せず、持続性ウイルス学的応答も得られなかったことが報告されている（Ｄｉ Ｂｉｓｃｅｇｌｉｅら、Ａｎｎ． Ｉｎｔｅｒｎ． Ｍｅｄ．（１９９５年）１２３巻（１２号）：８９７〜９０３頁；Ｄｕｓｈｅｉｋｏら、Ｊ． Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ（１９９６年）２５巻：５９１〜５９８頁；Ｂｏｄｅｎｈｅｉｍｅｒ， Ｊｒ．ら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ（１９９７年）２６巻（２号）：４７３〜４７７頁）。ある臨床研究では、リバビリン単剤療法（毎日１．０〜１．２ｇ、２４週間）による処置でＨＣＶ ＲＮＡ低下の観察が報告されたが、観察されたＨＣＶ ＲＮＡの低下は、一時的なものであり、リバビリン単剤療法を受けた患者は、ＨＣＶ ＲＮＡが一掃されなかった（Ｐａｗｌｏｔｓｋｙら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ（２００４年）１２６巻：７０３〜７１４頁）。

ペグインターフェロン単独またはペグインターフェロンとリバビリンの組合せを使用するＣＨＣ処置には、いくつかの不利益がある。何よりもまず、この療法は、多くの患者にとって有効ではない。例えば、ペグインターフェロンとリバビリンを併用する特定の第ＩＩＩ相臨床試験では、５４〜６３％のＳＶＲ率が報告されているが、追加研究では、特定の集団においてＳＶＲ率がはるかに低い場合があることが示されている（Ｆｅｕｒｓｔａｄｔら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ（２０１０年）５１巻（４号）：１１３７〜１１４３頁）。第２に、ペグインターフェロンとリバビリンの使用は、特定の有害事象に関連する。例えば、ＰＥＧＡＳＹＳ（登録商標）ラベルの警告欄には、ペグインターフェロンを使用すると、致命的なまたは生命を危うくする精神神経性、自己免疫性、虚血性および感染性の障害が引き起こされるまたは憎悪する場合があると記載されている（ＰＥＧＡＳＹＳ（登録商標）（ペグインターフェロンアルファ−２ａ）ＦＤＡ承認ラベル、２０１１年９月改訂）。さらに、ＣＯＰＥＧＵＳ（登録商標）ラベルの警告欄には、リバビリンの有害作用に、溶血性貧血が含まれ得ること、および著しい「催奇性および胚傷害性作用が、リバビリンに曝露されたあらゆる動物種で実証されている」ことが記載されている（ＣＯＰＥＧＵＳ（登録商標）（リバビリン）ＦＤＡ承認ラベル、２０１１年８月改訂）。最後に、ペグインターフェロン／リバビリン処置プロトコルは、非常に高価である。これらの不利益を前提として、新しい抗ＨＣＶ薬物物質および処置レジメンを開発する必要性が認識されている。

最近になってＦＤＡは、遺伝子型１のＣＨＣの処置に対して、共にＨＣＶ ＮＳ３／４プロテアーゼ阻害剤であるボセプレビルおよびテラプレビルの２種類の追加の製剤を承認した。商標ＶＩＣＴＲＥＬＩＳ（登録商標）で市販されているボセプレビルは、まだ処置を受けていないかまたは既にインターフェロンとリバビリンの療法を受けたが失敗している肝硬変を含む代償性肝疾患の成人患者（≧１８歳）の、インターフェロンおよびリバビリンと組み合わせた遺伝子型１のＣＨＣ感染症処置に適応される。商標ＩＮＣＩＶＥＫ（登録商標）で市販されているテラプレビルは、処置未経験であるかまたは既にインターフェロンベースの処置を受けた事前無応答者（ｐｒｉｏｒ ｎｕｌｌ ｒｅｓｐｏｎｄｅｒ）、部分応答者（ｐａｒｔｉａｌ ｒｅｓｐｏｎｄｅｒ）および再発者（ｒｅｌａｐｓｅｒ）を含む、肝硬変を含む代償性肝疾患の成人患者の遺伝子型１のＣＨＣ感染症処置に、インターフェロンおよびリバビリンと組み合わせて適応される。ボセプレビルとテラプレビルの両方は、ペグインターフェロンおよびリバビリンとの併用投与だけに承認されており、単剤療法またはリバビリン単独との併用投与にはいずれも承認されていない（ＩＮＣＩＶＥＫ（登録商標）（テラプレビル）ＦＤＡ承認ラベル、２０１２年６月改訂；ＶＩＣＴＲＥＬＩＳ（登録商標）（ボセプレビル）ＦＤＡ承認ラベル、２０１２年７月改訂）。

ボセプレビルとテラプレビルの両方の導入により、ＨＣＶ感染患者に利用可能な療法選択肢が増えたが、両方の処置レジメンに、特定の不利益がある。主な不利益は、ボセプレビルとテラプレビルのレジメンでは、まだペグインターフェロンの使用が必要であるということである。さらなる不利益を以下にまとめる。

ボセプレビル（ペグインターフェロンα−２ａおよびリバビリンと併用される）は、投薬レジメンが複雑であり、例えば８００ｍｇ（４×２００ｍｇ）を食事と共に毎日３回（７〜９時間ごとに）投与しなければならない。さらに、末期臨床研究では、ボセプレビルをペグインターフェロンおよびリバビリンと併用しても、ＳＶＲ率は６６％であることが示されている（Ｍａｎｎｓら、Ｌｉｖｅｒ Ｉｎｔ’ｌ（２０１２年）２７〜３１頁）。さらに、ボセプレビルレジメンは、４８週間投与しなければならず、このことは処置費用が非常に高価になることを意味する。最後に、ボセプレビルとペグインターフェロンおよびリバビリンの併用は、現在、ＨＣＶ遺伝子型１に感染している被験体に限定されている。

テラプレビルレジメン（ペグインターフェロンおよびリバビリンと併用される）は、７５０ｍｇ（２×３７５ｍｇ）を食事と共に毎日３回（７〜９時間離して）投薬するレジメンが必要である。テラプレビルとペグインターフェロンおよびリバビリンの組合せを１２週間投与された患者では、７９％のＳＶＲ率が報告された（Ｊａｃｏｂｓｏｎら、Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ．（２０１１年）３６４巻：２４０５〜２４１６頁）。しかし報告によれば、処置を受けた患者の約半数が、皮膚発疹または掻痒を発症し、少数の患者が、生命を危うくする皮膚状態である重症のスティーブンス−ジョンソン症候群を発症したことが明らかになっており、この場合にはそのレジメンを終了しなければならない。最後に、テラプレビルとペグインターフェロンおよびリバビリンの併用は、現在、ＨＣＶ遺伝子型１に感染している被験体に限定されている。処置期間は、ボセプレビルと比較してテラプレビルの方が短いが、２つのレジメンにかかる処置費用は、ほぼ同じである。

ボセプレビルおよびテラプレビルのレジメンによって追加の選択肢が得られたものの、これらの代替処置には、やはり不利益がある。さらに、ボセプレビルおよび／またはテラプレビルをペグインターフェロンおよびリバビリンと組み合わせた療法が失敗した遺伝子型１の患者は、望ましくないＮＳ３プロテアーゼ阻害剤耐性を発症する場合がある（例えば、Ｐａｗｌｏｔｓｋｙ、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ（２０１１年）５３巻（５号）：１７４２〜１７５１頁）。ウイルスブレークスルー率および／またはウイルス耐性率の低下に関連し、より有効で安全な、期間がより短い、許容できる改善された処置レジメンが必要である。特に、ＣＨＣ処置に有効であり、インターフェロンまたはペグインターフェロンを伴う処置レジメンと比較して副作用が少ない、インターフェロンを用いない処置レジメンが必要である。インターフェロン不適格またはインターフェロン不耐性の、ＣＨＣ感染症に罹患している患者には、やはりインターフェロンを用いない処置レジメンが必要である。

ＧＳ−７９７７（ソフォスブビルとも呼ばれ、以前はＰＳＩ−７９７７と呼ばれていた）は、現在、慢性ＨＣＶ感染症処置のために第２相／第３相試験にある治験用ヌクレオチド類似体である。

ＧＴ１、ＧＴ２またはＧＴ３ ＨＣＶの被験体に、４００ｍｇのＧＳ−７９７７を、リバビリンおよび必要に応じてペグインターフェロンありまたはなしに、８週間または１２週間投与して、その効力、安全性および耐容性を評価するために、いくつかの第２相臨床試験が実施されている。これらの試験結果と共に、インビトロ研究の場合の結果により、ＧＳ−７９７７をリバビリンと組み合わせて利用するＨＣＶ処置レジメンの、潜在的でかつこれまで未知であったいくつかの利点が明らかになった。これらの結果は、本明細書に開示し本願で特許請求する、ＨＣＶ感染症を処置するための方法および組成物の基盤となる。

Ｍａｎｎｓら、Ｌｉｖｅｒ Ｉｎｔ’ｌ（２０１２年）２７〜３１頁 Ｊａｃｏｂｓｏｎら、Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ．（２０１１年）３６４巻：２４０５〜２４１６頁 Ｐａｗｌｏｔｓｋｙ、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ（２０１１年）５３巻（５号）：１７４２〜１７５１頁

要旨
本明細書では、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンをＣ型肝炎ウイルスに感染している被験体に一定期間投与する工程を含む、該被験体を処置する方法を開示する。一態様では、該方法は、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンを含む、インターフェロンを用いない処置レジメンを被験体に投与する工程を含む。特定の一態様では、該方法は、上記期間が終了した後少なくとも１２週間、被験体のＨＣＶ ＲＮＡの量を検出不可能にするのに十分な方法である。

また本明細書では、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンを含む、被験体のＣ型肝炎ウイルス感染症を処置するのに有用な組成物を開示する。

ＧＳ−７９７７（４００ｍｇ、ＱＤ）とＲＢＶ（体重に基づき１０００／１２００ｍｇ、ＢＩＤ）の組合せを１２週間投与した、ＨＣＶ ＧＴ２／ＧＴ３の処置未経験患者の、処置中および処置終了（「ＥＯＴ」）から１２週間までの平均ＨＣＶ ＲＮＡ（ｌｏｇ_１０ＩＵ／ｍＬ）対時間の図（ＥＬＥＣＴＲＯＮ群１）。 ＧＳ−７９７７またはリバビリンで処置した、Ｓ２８２Ｔ変異がある１ｂ、１ａ、２ａ、２ｂ、３ａ、４ａおよび５ａのＮＳ５Ｂを含有するＨＣＶレプリコンについての、ＥＣ_５０の倍数変化（対応する野生型との比較）。 長期間の継代研究（ｐａｓｓａｇｉｎｇ ｓｔｕｄｙ）（１５〜３０日間）における、ＧＳ−７９７７、リバビリン、およびＧＳ−７９７７とリバビリンの組合せで処置する前および処置した後の、ＨＣＶレプリコンのＳ２８２位置における野生型の百分率。

詳細な説明
定義
句「１つの（ａ）」または「１つの（ａｎ）」の実体は、本明細書で使用される場合、その実体の１つまたは複数を指し、例えば１つの化合物（ａ ｃｏｍｐｏｕｎｄ）は、１つもしくは複数の化合物、または少なくとも１つの化合物を指す。したがって、用語「１つの（ａ）」（または「１つの（ａｎ）」）、「１つまたは複数の」および「少なくとも１つの」は、本明細書では交換可能に使用することができる。

用語「約」（「約（〜）」によって表される）は、ＧＳ−７９７７の量、リバビリンの量、またはＨＣＶ ＲＮＡの量に関係する場合を除き、その単純な通常の「およそ」の意味を有する。ＧＳ−７９７７の量、リバビリンの量、またはＨＣＶ ＲＮＡの量に関する場合、修飾語句「約」は、標準実験誤差を反映する。

用語「任意選択の」または「必要に応じて」は、本明細書で使用される場合、その後に記載の事象または環境が生じる場合があるが、生じる必要がない場合のあること、およびその記載が、その事象または環境が生じる場合と生じない場合を含むことを意味する。

用語「被験体」は、本明細書で使用される場合、限定されるものではないが、バッファロー、ネコ、ウシ、イヌ、ヒト、ラマ、猿人類、サル、マウス、ブタ、ラットおよびヒツジを含む哺乳動物を意味する。好ましくは、被験体はヒトである。

用語「有効量」は、本明細書で使用される場合、被験体のＨＣＶ感染症の症状を低減するのに十分な量を意味する。

用語「検出不可能な量」は、本明細書に記載のアッセイ方法によって決定される場合のＨＣＶ ＲＮＡの量を指し、これは約１５ＩＵ／ｍＬの検出限界（「ＬＯＤ」）未満である。

本明細書に記載の処置レジメンの１つに従って処置を受けた患者の持続性ウイルス学的応答（ＳＶＲ）は、ＨＣＶ処置レジメンが完了し、本明細書に記載のアッセイ方法に従って決定して、処置後の一定期間にＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能（すなわち、＜約１５ＩＵ／ｍＬ）である患者と定義される。ＳＶＲ−Ｎは、本明細書に開示のＨＣＶ処置レジメンの１つが完了した後、Ｎ週間にわたる持続性ウイルス学的応答の略語である。例えば、ＳＶＲ−４は、本明細書に開示のＨＣＶ処置レジメンの１つが完了した後、４週間にわたる持続性ウイルス学的応答の略語である。

用語「調製物」または「剤形」は、活性化合物の固体製剤および液体製剤の両方を含むことを企図し、当業者は、活性成分が、所望の用量および薬物動態パラメータに応じて様々な調製物で存在し得ることを理解されよう。

用語「賦形剤」は、本明細書で使用される場合、医薬組成物を調製するために使用され、一般に安全であり、非毒性の、生物学的にもその他の点でも望ましい化合物を指し、動物用の使用ならびにヒトへの薬学的使用に許容される賦形剤を含む。

ＲＶＲは、速やかなウイルス学的応答の略語であり、処置４週目に、血中のＨＣＶ ＲＮＡレベルが検出不可能であることを指す。ＲＶＲの存在は、ＨＣＶ ＧＴ−１患者におけるペグインターフェロン／リバビリンの組合せ処置による４８週間の全処置過程で、最終ＳＶＲを予測するものであると報告されている（Ｐｏｏｒｄａｄら、Ｃｌｉｎ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ．（２００８年）４６巻：７８〜８４頁）。

ＱＤは、その用量が１日１回投与されることを意味する。

ＢＩＤは、その用量が１日２回投与されることを意味する。

ＴＩＤは、その用量が１日３回投与されることを意味する。

ＱＩＤは、その用量が１日４回投与されることを意味する。

アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）の最も高い活性は、肝細胞および横紋（骨格および心臓の）筋細胞に見出される。血清ＡＬＴ活性の増大には、肝細胞の傷害または横紋筋の壊死が伴い得る。細胞が傷害を受けるかまたは死滅すると、ＡＬＴはサイトゾルから抜け出す。さらに、細胞壊死に続発して、または膜損傷を伴う細胞傷害の結果として、サイトゾルからＡＬＴの放出が生じ得る。ＡＬＴ活性の決定値は、肝臓損傷の相対的に高感度な指標である。血清中のＡＬＴ活性の増大機構には、損傷を受けた細胞からの酵素の放出、または薬物投与による酵素合成の増大などの酵素活性の誘導が挙げられる（Ｚｅｕｚｅｍら、Ａｌｉｍｅｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ． ２００６年１０月１５日；２４巻（８号）１１３３〜１１４９頁）。

インターロイキン２８Ｂ（ＩＬ２８Ｂ）遺伝子は、Ｉ型インターフェロンおよびＩＬ−１０ファミリーとの関係が密接でないサイトカインをコードする。ＩＬ２８Ｂ遺伝子、インターロイキン２８Ａ（ＩＬ２８Ａ）およびインターロイキン２９（ＩＬ２９）は、１９ｑ１３にマッピングされている染色体領域上にサイトカイン遺伝子クラスターを形成する、密接な関係がある３つのサイトカイン遺伝子である。この３つの遺伝子によってコードされるサイトカインの発現は、ウイルス感染によって誘導され得る。すべての３つのサイトカインは、インターロイキン１０受容体、ベータ（ＩＬ１０ＲＢ）およびインターロイキン２８受容体アルファ（ＩＬ２８ＲＡ）からなるヘテロ二量体のクラスＩＩのサイトカイン受容体と相互作用することが示されている（国立生物工学情報センター、Ｅｎｔｒｅｚ Ｇｅｎｅ Ｅｎｔｒｙ ｆｏｒ ＩＬ２８Ｂ、Ｇｅｎｅ ＩＤ：２８２６１７、２０１０年１０月２３日更新）。

ボディマス指数（「ＢＭＩ」）は、ヒトの体重および身長に基づく測定値であり、ヒトの身長に基づく健康体重を推定して平均身体構成を想定するのに使用される。ＢＭＩの単位はｋｇ／ｍ^２である。

ＬＯＤは、検出限界の略語である。ＬＯＤは、ＨＣＶ ＲＮＡ測定値に関して本明細書で使用される場合、一態様では約１ＩＵ／ｍＬ〜約６０ＩＵ／ｍＬ、より好ましくは約５ＩＵ／ｍＬ〜約３０ＩＵ／ｍＬ、さらにより好ましくは約１０ＩＵ／ｍＬ〜約２０ＩＵ／ｍＬである。特に好ましい一実施形態では、ＬＯＤは約１５ＩＵ／ｍＬである。

ＧＴは、遺伝子型の略語である。

ＩＵは、国際単位の略語であり、生物活性または作用に基づく物質の量の尺度である。

認識されているいくつかのＨＣＶ遺伝子型（１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０および１１）が存在し、これらはさらに異なるサブタイプ、１（１ａ、１ｂおよび１ｃ）、２（２ａ、２ｂ、２ｃ）、３（３ａおよび３ｂ）、４（４ａ、４ｂ、４ｃ、４ｄおよび４ｅ）、５（５ａ）、６（６ａ）、７（７ａおよび７ｂ）、８（８ａおよび８ｂ）、９（９ａ）、１０（１０ａ）および１１（１１ａ）に分類することができる。遺伝子型１は、北米および南米、欧州、アジア、オーストラリア、ならびにニュージーランドで見出された優勢型である。また遺伝子型２および３は、北米、欧州、オーストラリア、東アジアおよびアフリカのある地域にわたって広く分布している。アフリカのある地域では、遺伝子型４が優勢であり、他の地域（南アフリカなど）では、遺伝子型５が優勢である。本明細書に開示の方法は、ＨＣＶ遺伝子型のそれぞれの、特に各遺伝子型サブタイプの処置に、独立に効果的であることを企図される。

用語「インターフェロンを用いない」は、本明細書で使用される場合、インターフェロンまたはペグ化インターフェロンを被験体に投与することを含まない処置レジメンを指す。

ＧＳ−７９７７、すなわち２−（（（Ｓ）−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−４−フルオロ−３−ヒドロキシ−４−メチルテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパン酸（Ｓ）−イソプロピルは、Ｇｉｌｅａｄ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．から利用可能であり、米国特許第７，９６４，５８０号に記載され、特許請求されている（米国特許出願公開第２０１０／００１６２５１号、米国特許出願公開第２０１０／０２９８２５７号、米国特許出願公開第２０１１／０２５１１５２号および米国特許出願公開第２０１２／０１０７２７８号も参照）。ＧＳ−７９７７は、以下の構造を有する。

リバビリン、すなわち１−β−Ｄ−リボフラノシル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−カルボキサミドは、ｔｈｅ Ｍｅｒｃｋ Ｉｎｄｅｘ（第１２版）、モノグラフ番号８３６５に記載されている（米国特許第４，５３０，９０１号も参照）。

本明細書で使用される場合、「処置」または「処置する」は、有益なまたは所望の臨床結果を得るための手法である。有益なまたは所望の臨床結果には、検出可能であろうと検出不可能であろうと、症状の軽減、疾患程度の低下、安定した（すなわち悪化していない）疾患の状態、疾患の進行の遅延または緩徐、疾患状態の回復または緩和、および緩解（部分的でも全体的でも）が挙げられるが、それらに限定されない。また「処置」は、処置を受けていない場合に予測される生存期間と比較して、生存期間が延長することを意味し得る。「処置」は、障害の病状の発症を防止し、または障害の病状を変える意図で実施される介入である。ＨＣＶ感染症の「処置」という用語は、本明細書で使用される場合、ＨＣＶ感染症に関連するか、もしくはＨＣＶ感染症によって媒介される疾患もしくは状態、またはその臨床症状の処置または予防も含む。

実施形態
第１の実施形態は、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンをＣ型肝炎ウイルスに感染している被験体に一定期間投与する工程を含む、該被験体を処置する方法を対象とする。

第１の実施形態の第１の態様では、上記期間は、約２週間〜約１２週間、約３週間〜約１２週間、約４週間〜約１２週間、約５週間〜約１２週間、約６週間〜約１２週間、約７週間〜約１２週間、約８週間〜約１２週間、約９週間〜約１２週間、約１０週間〜約１２週間、約１１週間〜約１２週間、および約１２週間の中から選択される。一下位実施形態では、上記期間は１２週間である。別の下位実施形態では、上記期間は８週間である。

第１の実施形態の第２の態様では、ＧＳ−７９７７の有効量は、約１００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約６００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約６００ｍｇ、および約４００ｍｇから選択される日用量である。一下位実施形態では、日用量のＧＳ−７９７７は、被験体にＱＤ、ＢＩＤ、ＴＩＤまたはＱＩＤで投与される。別の下位実施形態では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、被験体にＱＤ、ＢＩＤ、ＴＩＤまたはＱＩＤで投与される。別の下位実施形態では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、被験体にＱＤで投与される。

第１の実施形態の第３の態様では、有効量のＧＳ−７９７７は、有効量のリバビリンと組み合わせて被験体に投与され、この場合、投与は同時または交互である。

第１の実施形態の第４の態様では、リバビリンの有効量は、約６００ｍｇ〜約１４００ｍｇおよび約８００ｍｇ〜約１２００ｍｇから選択される日用量である。一下位実施形態では、リバビリンの有効量は、日用量で約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇである。別の下位実施形態では、リバビリンの有効量は、被験体の体重に基づいて日用量で約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇである。別の下位実施形態では、リバビリンの有効量は、日用量で約８００ｍｇである。別の下位実施形態では、リバビリンの日用量は、被験体にＱＤ、ＢＩＤ、ＴＩＤまたはＱＩＤで投与される。さらなる一下位実施形態では、リバビリンの日用量は、被験体にＢＩＤで投与される。

第１の実施形態の第５の態様では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、日用量で約８００ｍｇ〜約１２００ｍｇのリバビリンと組み合わせて被験体に投与される。一下位実施形態では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、日用量で約８００ｍｇのリバビリンと組み合わせて被験体に投与される。別の下位実施形態では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、日用量で約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇのリバビリンと組み合わせて被験体に投与される。

第１の実施形態の第６の態様では、被験体は、ＨＣＶ遺伝子型１、２、３、４、５もしくは６、またはその任意の組合せに感染している。一下位実施形態では、被験体は、ＨＣＶ遺伝子型１、２もしくは３、またはその任意の組合せに感染している。

第１の実施形態の第７の態様では、被験体は、上記期間が終了した後少なくとも１２週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である。一下位実施形態では、被験体は、上記期間が終了した後少なくとも２４週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である。別の下位実施形態では、被験体は、上記期間が終了した後少なくとも３６週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である。さらなる一下位実施形態では、被験体は、上記期間が終了した後少なくとも４８週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である。

第１の実施形態の第８の態様では、被験体はヒトである。

第１の実施形態の第９の態様では、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンは、インターフェロンを用いない処置レジメンに従って被験体に投与される。一下位実施形態では、インターフェロンを用いない処置レジメンは、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンを被験体に上記期間投与することからなる。

第２の実施形態は、Ｃ型肝炎ウイルスに感染している被験体を処置する方法であって、一定期間の投与が終了した後少なくとも１２週間、該被験体のＨＣＶ ＲＮＡの量を検出不可能にするのに十分な有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンを、該被験体に該期間投与する工程を含む、方法を対象とする。

第２の実施形態の第１の態様では、上記期間は、約２週間〜約１２週間、約３週間〜約１２週間、約４週間〜約１２週間、約５週間〜約１２週間、約６週間〜約１２週間、約７週間〜約１２週間、約８週間〜約１２週間、約９週間〜約１２週間、約１０週間〜約１２週間、約１１週間〜約１２週間、および約１２週間の中から選択される。一下位実施形態では、上記期間は１２週間である。別の下位実施形態では、上記期間は８週間である。

第２の実施形態の第２の態様では、ＧＳ−７９７７の有効量は、約１００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約６００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約６００ｍｇ、および約４００ｍｇから選択される日用量である。一下位実施形態では、日用量のＧＳ−７９７７は、被験体にＱＤ、ＢＩＤ、ＴＩＤまたはＱＩＤで投与される。別の下位実施形態では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、被験体にＱＤ、ＢＩＤ、ＴＩＤまたはＱＩＤで投与される。別の下位実施形態では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、被験体にＱＤで投与される。

第２の実施形態の第３の態様では、有効量のＧＳ−７９７７は、有効量のリバビリンと組み合わせて被験体に投与され、この場合、投与は同時または交互である。

第２の実施形態の第４の態様では、リバビリンの有効量は、約６００ｍｇ〜約１４００ｍｇおよび約８００ｍｇ〜約１２００ｍｇから選択される日用量である。一下位実施形態では、リバビリンの有効量は、日用量で約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇである。別の下位実施形態では、リバビリンの有効量は、被験体の体重に基づいて日用量で約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇである。別の下位実施形態では、リバビリンの有効量は、日用量で約８００ｍｇである。別の下位実施形態では、リバビリンの日用量は、被験体にＱＤ、ＢＩＤ、ＴＩＤまたはＱＩＤで投与される。さらなる一下位実施形態では、リバビリンの日用量は、被験体にＢＩＤで投与される。

第２の実施形態の第５の態様では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、日用量で約８００ｍｇ〜約１２００ｍｇのリバビリンと組み合わせて被験体に投与される。一下位実施形態では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、日用量で約８００ｍｇのリバビリンと組み合わせて被験体に投与される。別の下位実施形態では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、日用量で約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇのリバビリンと組み合わせて被験体に投与される。

第２の実施形態の第６の態様では、被験体は、ＨＣＶ遺伝子型１、２、３、４、５もしくは６、またはその任意の組合せに感染している。一下位実施形態では、被験体は、ＨＣＶ遺伝子型１、２もしくは３、またはその任意の組合せに感染している。

第２の実施形態の第７の態様では、被験体は、上記期間が終了した後少なくとも２４週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である。一下位実施形態では、被験体は、上記期間が終了した後少なくとも３６週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である。別の下位実施形態では、被験体は、上記期間が終了した後少なくとも４８週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である。

第２の実施形態の第８の態様では、被験体はヒトである。

第２の実施形態の第９の態様では、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンは、インターフェロンを用いない処置レジメンに従って被験体に投与される。一下位実施形態では、インターフェロンを用いない処置レジメンは、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンを被験体に上記期間投与することからなる。

第３の実施形態は、Ｃ型肝炎ウイルスに感染しているヒトを処置する方法であって、一定期間の投与が終了した後少なくとも１２週間、該ヒトのＨＣＶ ＲＮＡの量を検出不可能にするのに十分な有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンを、該ヒトに該期間投与する工程を含む、方法を対象とする。

第３の実施形態の第１の態様では、上記期間は、約２週間〜約１２週間、約３週間〜約１２週間、約４週間〜約１２週間、約５週間〜約１２週間、約６週間〜約１２週間、約７週間〜約１２週間、約８週間〜約１２週間、約９週間〜約１２週間、約１０週間〜約１２週間、約１１週間〜約１２週間、および約１２週間から選択される。一下位実施形態では、上記期間は１２週間である。別の下位実施形態では、上記期間は８週間である。

第３の実施形態の第２の態様では、ＧＳ−７９７７の有効量は、約１００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約６００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約６００ｍｇ、および約４００ｍｇから選択される日用量である。一下位実施形態では、日用量のＧＳ−７９７７は、ヒトにＱＤ、ＢＩＤ、ＴＩＤまたはＱＩＤで投与される。別の下位実施形態では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、ヒトにＱＤ、ＢＩＤ、ＴＩＤまたはＱＩＤで投与される。別の下位実施形態では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、ヒトにＱＤで投与される。

第３の実施形態の第３の態様では、有効量のＧＳ−７９７７は、有効量のリバビリンと組み合わせて被験体に投与され、この場合、投与は同時または交互である。

第３の実施形態の第４の態様では、リバビリンの有効量は、約６００ｍｇ〜約１４００ｍｇおよび約８００ｍｇ〜約１２００ｍｇから選択される日用量である。一下位実施形態では、リバビリンの有効量は、日用量で約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇである。別の下位実施形態では、リバビリンの有効量は、ヒトの体重に基づいて日用量で約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇである。別の下位実施形態では、リバビリンの有効量は、日用量で約８００ｍｇである。別の下位実施形態では、リバビリンの日用量は、ヒトにＱＤ、ＢＩＤ、ＴＩＤまたはＱＩＤで投与される。さらなる一下位実施形態では、リバビリンの日用量は、ヒトにＢＩＤで投与される。

第３の実施形態の第５の態様では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、日用量で約８００ｍｇ〜約１２００ｍｇのリバビリンと組み合わせてヒトに投与される。一下位実施形態では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、日用量で約８００ｍｇのリバビリンと組み合わせてヒトに投与される。別の下位実施形態では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、日用量で約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇのリバビリンと組み合わせてヒトに投与される。

第３の実施形態の第６の態様では、ヒトは、ＨＣＶ遺伝子型１、２、３、４、５もしくは６、またはその任意の組合せに感染している。一下位実施形態では、被験体は、ＨＣＶ遺伝子型１、２もしくは３、またはその任意の組合せに感染している。

第３の実施形態の第７の態様では、ヒトは、上記期間が終了した後少なくとも２４週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である。一下位実施形態では、ヒトは、上記期間が終了した後少なくとも３６週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である。別の下位実施形態では、ヒトは、上記期間が終了した後少なくとも４８週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である。

第３の実施形態の第８の態様では、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンは、インターフェロンを用いない処置レジメンに従ってヒトに投与される。一下位実施形態では、インターフェロンを用いない処置レジメンは、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンを被験体に上記期間投与することからなる。

第４の実施形態は、Ｃ型肝炎ウイルスに感染しているヒトを処置する方法であって、一定期間の投与が終了した後少なくとも１２週間、該ヒトのＨＣＶ ＲＮＡの量を約１５ＩＵ／ｍＬ未満にするのに十分な有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンを、該ヒトに該期間投与する工程を含む、方法を対象とする。

第４の実施形態の第１の態様では、上記期間は、約２週間〜約１２週間、約３週間〜約１２週間、約４週間〜約１２週間、約５週間〜約１２週間、約６週間〜約１２週間、約７週間〜約１２週間、約８週間〜約１２週間、約９週間〜約１２週間、約１０週間〜約１２週間、約１１週間〜約１２週間、および約１２週間の中から選択される。一下位実施形態では、上記期間は約１２週間である。別の下位実施形態では、上記期間は約８週間である。

第４の実施形態の第２の態様では、ＧＳ−７９７７の有効量は、約１００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約６００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約６００ｍｇ、および約４００ｍｇから選択される日用量である。一下位実施形態では、日用量のＧＳ−７９７７は、ヒトにＱＤ、ＢＩＤ、ＴＩＤまたはＱＩＤで投与される。別の下位実施形態では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、ヒトにＱＤ、ＢＩＤ、ＴＩＤまたはＱＩＤで投与される。別の下位実施形態では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、ヒトにＱＤで投与される。

第４の実施形態の第３の態様では、有効量のＧＳ−７９７７は、有効量のリバビリンと組み合わせてヒトに投与され、この場合、投与は同時または交互である。

第４の実施形態の第４の態様では、リバビリンの有効量は、約６００ｍｇ〜約１４００ｍｇおよび約８００ｍｇ〜約１２００ｍｇから選択される日用量である。一下位実施形態では、リバビリンの有効量は、日用量で約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇである。別の下位実施形態では、リバビリンの有効量は、ヒトの体重に基づいて日用量で約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇである。別の下位実施形態では、リバビリンの有効量は、日用量で約８００ｍｇである。別の下位実施形態では、リバビリンの日用量は、ヒトにＱＤ、ＢＩＤ、ＴＩＤまたはＱＩＤで投与される。さらなる一下位実施形態では、リバビリンの日用量は、ヒトにＢＩＤで投与される。

第４の実施形態の第５の態様では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、日用量で約８００ｍｇ〜約１２００ｍｇのリバビリンと組み合わせてヒトに投与される。一下位実施形態では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、日用量で約８００ｍｇのリバビリンと組み合わせてヒトに投与される。別の下位実施形態では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、日用量で約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇのリバビリンと組み合わせてヒトに投与される。

第４の実施形態の第６の態様では、ヒトは、ＨＣＶ遺伝子型１、２、３、４、５もしくは６、またはその任意の組合せに感染している。一下位実施形態では、ヒトは、ＨＣＶ遺伝子型１、２もしくは３、またはその任意の組合せに感染している。

第４の実施形態の第７の態様では、ヒトは、上記期間が終了した後少なくとも２４週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が約１５ＩＵ／ｍＬ未満である。一下位実施形態では、ヒトは、上記期間が終了した後少なくとも３６週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が約１５ＩＵ／ｍＬ未満である。別の下位実施形態では、ヒトは、上記期間が終了した後少なくとも４８週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が約１５ＩＵ／ｍＬ未満である。

第４の実施形態の第８の態様では、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンは、インターフェロンを用いない処置レジメンに従ってヒトに投与される。一下位実施形態では、インターフェロンを用いない処置レジメンは、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンを被験体に上記期間投与することからなる。

第５の実施形態は、約４００ｍｇのＧＳ−７９７７および約８００ｍｇ〜約１２００ｍｇのリバビリンをＣ型肝炎ウイルスに感染しているヒトに一定期間投与する工程からなる、該ヒトを処置する方法を対象とする。

第５の実施形態の第１の態様では、上記期間は、約２週間〜約１２週間、約３週間〜約１２週間、約４週間〜約１２週間、約５週間〜約１２週間、約６週間〜約１２週間、約７週間〜約１２週間、約８週間〜約１２週間、約９週間〜約１２週間、約１０週間〜約１２週間、約１１週間〜約１２週間、および約１２週間の中から選択される。一下位実施形態では、上記期間は１２週間である。別の下位実施形態では、上記期間は８週間である。

第５の実施形態の第２の態様では、約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、ヒトに毎日投与される。一下位実施形態では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、ヒトにＱＤ、ＢＩＤ、ＴＩＤまたはＱＩＤで投与される。別の下位実施形態では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、ヒトにＱＤで投与される。

第５の実施形態の第３の態様では、約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、約８００ｍｇ〜約１２００ｍｇのリバビリンと組み合わせてヒトに投与され、この場合、投与は同時または交互である。

第５の実施形態の第４の態様では、約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇのリバビリンは、ヒトに毎日投与される。一下位実施形態では、日用量で約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇのリバビリンは、ヒトにＱＤ、ＢＩＤ、ＴＩＤまたはＱＩＤで投与される。別の下位実施形態では、日用量で約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇのリバビリンは、ヒトにＢＩＤで投与される。さらなる一下位実施形態では、日用量で１０００ｍｇまたは１２００ｍｇのリバビリンは、体重に基づいて被験体に投与される。

第５の実施形態の第５の態様では、約８００ｍｇのリバビリンは、ヒトに毎日投与される。一下位実施形態では、日用量で約８００ｍｇのリバビリンは、ヒトにＱＤ、ＢＩＤ、ＴＤまたはＱＩＤで投与される。別の下位実施形態では、日用量で約８００ｍｇのリバビリンは、ヒトにＢＩＤで投与される。

第５の実施形態の第６の態様では、ヒトは、ＨＣＶ遺伝子型１、２、３、４、５もしくは６、またはその任意の組合せに感染している。一下位実施形態では、ヒトは、ＨＣＶ遺伝子型１、２もしくは３、またはその任意の組合せに感染している。

第５の実施形態の第７の態様では、ヒトは、上記期間が終了した後少なくとも１２週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である。一下位実施形態では、ヒトは上記期間が終了した後少なくとも２４週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である。別の下位実施形態では、ヒトは、上記期間が終了した後少なくとも３６週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である。さらなる一下位実施形態では、ヒトは、上記期間が終了した後少なくとも４８週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である。

第６の実施形態は、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンを含む、被験体のＣ型肝炎ウイルス感染症を処置するのに有用な組成物を対象とする。

第６の実施形態の第１の態様では、組成物は、ペグインターフェロンを含まない。

第６の実施形態の第２の態様では、ＧＳ−７９７７の有効量は、約１００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約６００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約６００ｍｇ、および約４００ｍｇのＧＳ−７９７７を含み、被験体に毎日投与される。一下位実施形態では、組成物は、約４００ｍｇのＧＳ−７９７７を含み、被験体にＱＤで投与される。

第６の実施形態の第３の態様では、リバビリンの有効量は、約６００ｍｇ〜約１４００ｍｇまたは約８００ｍｇ〜約１２００ｍｇを含み、被験体に毎日投与される。一下位実施形態では、リバビリンの有効量は、約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇを含み、被験体に毎日投与される。別の下位実施形態では、リバビリンの有効量は、約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇであり、被験体の体重に基づいて該被験体に毎日投与される。別の下位実施形態では、リバビリンの有効量は、約８００ｍｇであり、該被験体に毎日投与される。別の下位実施形態では、組成物は、有効量のリバビリンを含み、被験体にＱＤ、ＢＩＤ、ＴＩＤまたはＱＩＤで投与される。さらなる一下位実施形態では、組成物は、有効量のリバビリンを含み、被験体にＢＩＤで投与される。

第６の実施形態の第４の態様では、組成物は、被験体にＱＤで投与される約４００ｍｇのＧＳ−７９７７および被験体にＢＩＤで投与される約８００ｍｇ〜約１２００ｍｇのリバビリンを含む。一下位実施形態では、組成物は、被験体にＱＤで投与される約４００ｍｇのＧＳ−７９７７および被験体にＢＩＤで投与される約８００ｍｇのリバビリンを含む。別の下位実施形態では、組成物は、被験体にＱＤで投与される約４００ｍｇのＧＳ−７９７７および被験体にＢＩＤで投与される約１００ｍｇ〜約１２００ｍｇのリバビリンを含む。

第６の実施形態の第５の態様では、組成物は、Ｃ型肝炎ウイルスに感染している被験体を一定期間処置した後、その期間が終了した後少なくとも１２週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量を検出不可能にすることができる。一下位実施形態では、組成物は、Ｃ型肝炎ウイルスに感染している被験体を一定期間処置した後、その期間が終了した後少なくとも２４週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量を検出不可能にすることができる。別の下位実施形態では、組成物は、Ｃ型肝炎ウイルスに感染している被験体を一定期間処置した後、その期間が終了した後少なくとも３６週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量を検出不可能にすることができる。さらなる一下位実施形態では、組成物は、Ｃ型肝炎ウイルスに感染している被験体を一定期間処置した後、その期間が終了した後少なくとも４８週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量を検出不可能にすることができる。

第６の実施形態の第６の態様では、組成物は、Ｃ型肝炎ウイルスに感染している被験体を一定期間処置した後、その期間が終了した後少なくとも１２週間、ＨＣＶ ＲＮＡを約１５ＩＵ／ｍＬ未満にすることができる。一下位実施形態では、組成物は、Ｃ型肝炎ウイルスに感染している被験体を一定期間処置した後、その期間が終了した後少なくとも２４週間、ＨＣＶ ＲＮＡを約１５ＩＵ／ｍＬ未満にすることができる。別の下位実施形態では、組成物は、Ｃ型肝炎ウイルスに感染している被験体を一定期間処置した後、その期間が終了した後少なくとも３６週間、ＨＣＶ ＲＮＡを約１５ＩＵ／ｍＬ未満にすることができる。さらなる一下位実施形態では、組成物は、Ｃ型肝炎ウイルスに感染している被験体を一定期間処置した後、その期間が終了した後少なくとも４８週間、ＨＣＶ ＲＮＡを約１５ＩＵ／ｍＬ未満にすることができる。

第７の実施形態は、Ｃ型肝炎ウイルス感染症の処置を必要としている被験体においてＣ型肝炎ウイルス感染症を処置するための、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンの使用を対象とする。

第７の実施形態の第１の態様では、使用は、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンを被験体に約２週間〜約１２週間、約３週間〜約１２週間、約４週間〜約１２週間、約５週間〜約１２週間、約６週間〜約１２週間、約７週間〜約１２週間、約８週間〜約１２週間、約９週間〜約１２週間、約１０週間〜約１２週間、約１１週間〜約１２週間、および約１２週間から選択される一定期間投与することを含む。一下位実施形態では、上記期間は１２週間である。別の下位実施形態では、上記期間は８週間である。

第７の実施形態の第２の態様では、ＧＳ−７９７７の有効量は、約１００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約６００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約６００ｍｇ、および約４００ｍｇから選択される日用量である。一下位実施形態では、日用量のＧＳ−７９７７は、被験体にＱＤ、ＢＩＤ、ＴＩＤまたはＱＩＤで投与される。別の下位実施形態では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、被験体にＱＤ、ＢＩＤ、ＴＩＤまたはＱＩＤで投与される。別の下位実施形態では、日用量で約４００ｍｇのＧＳ−７９７７は、被験体にＱＤで投与される。

第７の実施形態の第３の態様では、有効量のＧＳ−７９７７は、有効量のリバビリンと併用され、この場合、ＧＳ−７９７７およびリバビリンの投与は同時または交互である。

第７の実施形態の第４の態様では、リバビリンの有効量は、約６００ｍｇ〜約１４００ｍｇおよび約８００ｍｇ〜約１２００ｍｇから選択される日用量である。一下位実施形態では、リバビリンの有効量は、日用量で約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇである。別の下位実施形態では、リバビリンの有効量は、被験体の体重に基づいて、日用量で約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇである。別の下位実施形態では、リバビリンの有効量は、日用量で約８００ｍｇである。別の下位実施形態では、リバビリン日用量は、被験体にＱＤ、ＢＩＤ、ＴＩＤまたはＱＩＤで投与される。さらなる一下位実施形態では、リバビリン日用量は、被験体にＢＩＤで投与される。

第７の実施形態の第５の態様では、ＧＳ−７９７７の有効量は、ＱＤで約４００ｍｇであり、リバビリンの有効量は、ＢＩＤで約８００ｍｇ〜約１２００ｍｇである。一下位実施形態では、ＧＳ−７９７７の有効量は、ＱＤで約４００ｍｇであり、リバビリンの有効量は、ＢＩＤで約８００ｍｇである。別の下位実施形態では、ＧＳ−７９７７の有効量は、ＱＤで約４００ｍｇであり、リバビリンの有効量は、ＢＩＤで約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇである。

第７の実施形態の第６の態様では、被験体は、ＨＣＶ遺伝子型１、２、３、４、５もしくは６、またはその任意の組合せに感染している。一下位実施形態では、被験体は、ＨＣＶ遺伝子型１、２もしくは３、またはその任意の組合せに感染している。

第７の実施形態の第７の態様では、被験体は、上記期間が終了した後少なくとも１２週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である。一下位実施形態では、被験体は、上記期間が終了した後少なくとも２４週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である。別の下位実施形態では、被験体は、上記期間が終了した後少なくとも３６週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である。さらなる一下位実施形態では、被験体は、上記期間が終了した後少なくとも４８週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である。

第７の実施形態の第８の態様では、被験体は、上記期間が終了した後少なくとも１２週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が約１５ＩＵ／ｍＬ未満である。一下位実施形態では、被験体は、上記期間が終了した後少なくとも２４週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が約１５ＩＵ／ｍＬ未満である。一下位実施形態では、被験体は、上記期間が終了した後少なくとも３６週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が約１５ＩＵ／ｍＬ未満である。別の下位実施形態では、被験体は、上記期間が終了した後少なくとも４８週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が約１５ＩＵ／ｍＬ未満である。

第７の実施形態の第９の態様では、被験体はヒトである。

第７の実施形態の第１０の態様では、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンは、インターフェロンを用いない処置レジメンに従って使用される。一下位実施形態では、インターフェロンを用いない処置レジメンは、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンを被験体に一定期間投与することからなる。

参照によって本明細書に組み込まれる２０１１年８月２２日付けのＦＤＡ承認ラベルに従うと、ＣＯＰＥＧＵＳ（登録商標）（リバビリン）錠剤の推奨用量は、ペグインターフェロンと併用される場合、以下の表に示す通り、体重および処置を受けるＨＣＶ遺伝子型に依存する。

ペグインターフェロンとの併用に適応されるＣＯＰＥＧＵＳ（登録商標）の日用量は、８００ｍｇ〜１２００ｍｇであり、２回分割用量（ＢＩＤ）で経口投与される。用量は、ベースラインの疾患特徴（例えば、遺伝子型）、療法への応答、およびレジメンの耐容性に応じて被験体に対して個別化されるべきである。上記の説明ならびに下記の実施例に基づくと、リバビリンの有効量は、有効量のＧＳ−７９７７と併用される場合、体重に応じて日用量で１０００ｍｇまたは１２００ｍｇを含めて、８００ｍｇおよび１０００ｍｇ〜１２００ｍｇを含むことが企図される。

本明細書で報告したデータに基づくと、ＧＳ−７９７７の有効量は、ＱＤで４００ｍｇであり、これはＢＩＤ、ＴＩＤまたはＱＩＤで投与することもできる。ＧＳ−７９７７の有効量が、１００ｍｇ〜４００ｍｇおよびこの範囲内のあらゆる整数値を含み得ることも企図される。

ＧＳ−７９７７は、併用投与される場合、リバビリンと共同して被験体に投与される。すなわち、ＧＳ−７９７７の用量は、被験体がリバビリンの用量を投与されるのと同じ期間に投与される。同時または交互投与が考慮されるが、このことは、ＧＳ−７９７７とリバビリンが同じ期間に投与され、毎日の特定の投与順は、ＧＳ−７９７７が先でリバビリンが後であってよく、ＧＳ−７９７７とリバビリンを一緒に投与することもでき、またはリバビリンが先でＧＳ−７９７７が後であってもよい。リバビリンの経口（カプセル剤または錠剤形態）投与と共に、ＧＳ−７９７７は、カプセル剤もしくは錠剤形態、または任意の他の適切な単位剤形で経口投与してよい。当然のことながら、利用可能な場合には両方の薬剤の他種の投与、例えば、鼻腔用スプレーによる、頬側または舌下投与剤形による、経皮での、坐剤による、徐放剤形等による投与も企図される。活性成分を破壊することなく、かつ／または被験体に有効量のＧＳ−７９７７および／もしくは有効量のリバビリンが送達されるのを妨害することなく適切な投薬量が送達される限り、任意の投与形態が働く。

薬学的キャリア、希釈剤および賦形剤と共に適切な製剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ： Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ １９９５年、Ｅ． Ｗ． Ｍａｒｔｉｎ編、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ、第１９版、Ｅａｓｔｏｎ、Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａに記載されている。Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ １９９４年、Ａ． ＷａｄｅおよびＰ． Ｊ． Ｗｅｌｌｅｒ編、Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ、第２版、Ｌｏｎｄｏｎも参照されたい。熟練した製剤化学者は、特定の投与経路のための数々の製剤を提供するために、本明細書で企図される化合物を含有する組成物を不安定にすることなく、またはそれらの処置活性を損なうことなく、本明細書の教示の範囲内で製剤を改変することができる。

臨床試験のための定量的ＨＣＶ ＲＮＡ検査を、Ｒｏｃｈｅ ＣＯＢＡＳ（登録商標）ＡｍｐｌｉＰｒｅｐ／ＣＯＢＡＳ（登録商標）ＨＣＶ ＴａｑＭａｎ（登録商標）アッセイを使用し、標準化自動ＲＮＡ抽出システム、ならびに標準化対照および検定物質を使用して実施した。上記アッセイの確立されたＬＯＤは、１５ＩＵ／ｍＬであった（ＷＨＯ標準物質を用いた９５％ヒット率によって定義される）。血清試料を使用してＨＣＶ ＲＮＡレベルを測定した。

また、参照によって組み込まれる米国特許出願公開第２０１０／０２２６８８５号（米国特許出願第１２／３７６，１８０号）は、患者がＨＣＶ陰性状態を達成したかどうかを、ＨＣＶ ＲＮＡレベルを測定するＲＴ−ＰＣＲを使用して測定する方法を開示している。
ＧＳ−９７７とリバビリンの組合せのインビトロ抗ウイルス相乗作用
ＧＳ−７９７７とリバビリンの組合せによる抗ウイルス作用を、ＨＣＶ遺伝子型１ａレプリコンを使用して評価した（Ｒｏｂｉｎｓｏｎら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．（２０１０年）５４巻（８号）：３０９９〜３１０６頁）。細胞を、１０％ＨｙＣｌｏｎｅ ＦＢＳ、１００単位／ｍＬのペニシリン、１００μｇ／ｍＬのストレプトマイシンおよび０．１ｍＭ非必須アミノ酸を補充した、Ｇｉｂｃｏ（登録商標）ＧｌｕｔａＭＡＸを含むダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）を含有する細胞培養培地で増殖させた。レプリコン細胞を、０．５ｍｇ／ｍＬのＧｅｎｅｔｉｃｉｎ（登録商標）中で維持した。細胞を、密集度に達するまで３〜４日ごとに継代させた。すべての化合物を、１００％ＤＭＳＯに供給し、化合物の連続希釈を１００％ＤＭＳＯで実施した。３８４ウェルプレートの各ウェルに、２０００個の懸濁ＨＣＶレプリコン細胞および化合物溶液０．４μＬを含有する細胞培養培地（Ｇｅｎｅｔｉｃｉｎ（登録商標）なし）９０μＬを添加した。最終アッセイウェルのＤＭＳＯ濃度は、０．４４％であった。プレートを、３７℃において５％ＣＯ_２および湿度８５％で３日間インキュベートした。

ＣＣ_５０アッセイのために、３８４ウェルプレート中の培地を吸引し、ウェルをそれぞれ１×ＰＢＳ１００μＬで４回洗浄した。１×ＰＢＳ中４００ｎＭカルセインＡＭを含有する体積５０μＬの溶液を、各ウェルに添加し、プレートを室温で３０分間インキュベートした後、蛍光シグナル（励起４９０ｎｍ、発光５２０ｎｍ）を測定した。

ＥＣ_５０アッセイを、ＣＣ_５０アッセイと同じウェルで実施した。カルセイン−ＰＢＳ溶液を吸引し、体積２０μＬのＤｕａｌ−Ｇｌｏ（登録商標）ルシフェラーゼバッファーを各ウェルに添加した。プレートを室温で１０分間インキュベートし、Ｄｕａｌ−Ｇｌｏ（登録商標）Ｓｔｏｐ＆Ｇｌｏ（登録商標）基質およびＤｕａｌ−Ｇｌｏ（登録商標）Ｓｔｏｐ＆Ｇｌｏ（登録商標）バッファーの１：１００混合物を含有する体積２０μＬの溶液を、各ウェルに添加した。プレートを室温で１０分間インキュベートした後、発光シグナルを測定した。

組合せの研究実験データを、ＰｒｉｃｈａｒｄおよびＳｈｉｐｍａｎによって開発されたＭａｃＳｙｎｅｒｇｙ ＩＩプログラムを使用して、２つの化合物の相乗作用について分析した（Ｐｒｉｃｈａｒｄら、ＭａｃＳｙｎｇｅｒｇｙ（商標）ＩＩ、Ｖｅｒｓｉｏｎ １．０、ミシガン大学アナーバー校（Ａｎｎ Ａｒｂｏｒ）（１９９３年））。２つの化合物の相乗作用の定義を、表１Ａに提示する。

ＧＳ−７９７７とリバビリンの組合せは、３５．３±３．２ｎＭ^２％の量の相乗作用ボリューム（ｓｙｎｅｒｇｙ ｖｏｌｕｍｅ）を示し、これは弱い相乗的相互作用を示していた。ＧＳ−７９７７とリバビリンの組合せの作用を分析する細胞傷害性の研究によって、最高濃度の組合せ薬物で８５％を超える細胞生存率を示した（３２０ｎＭのＧＳ−７９７７、１６００ｎＭのリバビリン、細胞増殖に対して１４．０±４．４％阻害）（Ｈｅｂｎｅｒら、６３^ｒｄ Ａｎｎｕａｌ Ｍｅｅｔｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｓｔｕｄｙ ｏｆ Ｌｉｖｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅｓ、Ｐｏｓｔｅｒ １８７５、２０１２年１１月１２日も参照されたい）。これらの知見は、ＧＳ−７９７７とリバビリンとの併用投与が、ＧＳ−７９７７またはリバビリンの単剤療法と比較して、ウイルス抑制の増強を達成する潜在力があることを支持する。
ＧＳ−７９７７、リバビリンおよびＧＳ−７９７７とリバビリンの組合せに対するＳ２８２Ｔ変異体のインビトロ感受性
インビトロ研究により、Ｓ２８２Ｔが、ＨＣＶ遺伝子型１ａ、１ｂおよび２ａレプリコン細胞においてＧＳ−７９７７によって選択される一次変異であることが示された（Ｌａｍら、Ｊ． Ｖｉｒｏｌｏｇｙ（２０１１年）８５巻（２３号）：１２３３４〜１２３４２頁；Ｌａｍら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．（２０１２年）５６巻（６号）：３３５９〜３３６８頁）。ＮＳ５ＢにおけるＳ２８２Ｔ変異を、１ａ−Ｈ７７、１ｂ ｃｏｎ−１および２ａ ＪＦＨ１サブゲノムレプリコンにおける部位特異的変異誘発によって創製した。２ｂ、３ａ、４ａ、５ａまたは６ａのＮＳ５Ｂを含有する１ｂ ｃｏｎ−１ベースのキメラレプリコンも、Ｓ２８２Ｔ変異があるように工学的に作製した（Ｗｏｎｇら、Ｖｉｒｏｌｏｇｙ（２０１２年）４２９巻：５７〜６２頁参照）。ＧＳ−７９７７およびリバビリンに対するＳ２８２Ｔの複製能および薬物感受性を、一過性レプリコンアッセイで決定した。ＧＳ−７９７７およびリバビリンが個々に存在する状態、およびそれらが組み合わさって存在する状態で、ＧＴ２ａにおける５０％Ｓ２８２Ｔおよび５０％ＷＴの混合物を継代させることによって、ＧＳ−７９７７およびリバビリンに対するＳ２８２Ｔおよび野生型（ＷＴ）ＮＳ５Ｂの感受性をさらに研究した。変異体とＷＴの相対的百分率を、ディープシーケンシングによって評価した。

ＮＳ５ＢのＳ２８２Ｔ変異を１ｂ、１ａ、２ａ、２ｂ、３ａ、４ａおよび５ａのＨＣＶレプリコンに導入することによって、すべての７種類の遺伝子型についてＧＳ−７９７７に対する感受性が低下し、ＥＣ_５０値は、対応する遺伝子型由来の野生型と比較して２〜１６倍増大した。驚くべきことに、Ｓ２８２Ｔレプリコンは、これらの７種類の遺伝子型について、それらの対応する野生型よりもリバビリンを用いる処置に対して３〜１０倍感受性が高かった。ＥＣ_５０値は、遺伝子型６ａのＳ２８２Ｔ変異体ではシグナル対ノイズ比が低いことに起因して、算出されなかった。遺伝子型６ａの変異体は、薬物感受性データを得るのに十分には複製されなかった。これらの研究の結果を、以下の表１および図２に提示する。

ＧＴ２ａレプリコンの長期間の継代研究によって、ＧＳ−７９７７が単独でＳ２８２ＴよりもＷＴを大きく阻害することを示し、その結果、１５日間で９２％の変異体Ｓ２８２Ｔである集団が生じることが明らかになった。リバビリン単独では、ＷＴよりもＳ２８２Ｔを抑制し、その結果、１５日後に９６％のＷＴである集団が生じた。ＧＳ−７９７７とリバビリンの組合せも、ＷＴよりもＳ２８２Ｔを優先的に阻害し、その結果、３０日間の処置後に９１％のＷＴである集団が生じた。継代研究の結果を、図３に提示する（Ｈａｎら、６３^ｒｄ Ａｎｎｕａｌ Ｍｅｅｔｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｓｔｕｄｙ ｏｆ Ｌｉｖｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅｓ、Ｐｏｓｔｅｒ １０７８、２０１２年１１月１１日も参照されたい）。

したがって、Ｓ２８２Ｔレプリコンは、インビトロでＧＳ−７９７７に対して低い感受性を付与することが示されたが、該変異体レプリコンは、野生型を上回ってリバビリンに対する感受性を増大することが実証された。このことは、ＧＳ−７９７７とリバビリンの組合せによるＣＨＣ処置が、ＧＳ−７９７７単独による単剤療法と比較して、ウイルスブレークスルーおよび耐性の発生を低減し得ることを示唆している。リバビリンに対するＳ２８２Ｔ変異体の過感受性は、Ｓ２８２Ｔ変異体の出現の防止または遅延に関して、ＧＳ−７９７７およびリバビリンを含む組合せ処置に、単なる相加作用を上回る追加の利点をもたらすことができる。
処置レジメン−Ｐ７９７７−０２２１およびＰＲＯＴＯＮ臨床研究
第２ａ相の３つのコホートによるプラセボ対照研究（Ｐ７９７７−０２２１）により、処置未経験のＧＴ１のＨＣＶ被験体で、ＧＳ−７９７７（１００ｍｇ、２００ｍｇまたは４００ｍｇ、ＱＤ）をペグインターフェロンおよびリバビリンと組み合わせて４週間処置し、その後ＳＯＣペグインターフェロンおよびリバビリンによってさらに４４週間までの処置について評価した。すべての３つのＧＳ−７９７７処置群で高いＲＶＲ（８８〜９４％）が観察された。ＧＳ−７９７７を中断した後、抗ウイルス応答の持続力（ＳＶＲ−１２およびＳＶＲ−２４）は、４００ｍｇの処置群で最も高かった（それぞれ８６．７％および８０．０％）。ＳＶＲ−１２率およびＳＶＲ−２４率は、２００ｍｇのＧＳ−７９７７処置レジメンを受けた患者では、それぞれ７２．２％および８３．３％であり、ＧＳ−７９７７処置を受けたがＳＶＲを達成できなかった患者の大部分については、ＱＤ用量１００ｍｇのＧＳ−７９７７を投与していた。

第２ｂ相のＰＲＯＴＯＮ研究により、ＧＳ−７９７７、ペグインターフェロンおよびリバビリンの組合せを用いて、ＧＳ−７９７７の１日投薬レベルを２００ｍｇおよび４００ｍｇで１２週間処置し、その後ＳＯＣペグインターフェロンおよびリバビリンを用いてさらに３６週間までの処置について評価した。投薬レベル４００ｍｇのＧＳ−７９７７を休止したがなおペグインターフェロン／リバビリン処置を受けさせた後に、ウイルスブレークスルーはなかったのと比較して、投薬レベル２００ｍｇのＧＳ−７９７７を休止したがなおペグインターフェロン／リバビリン処置を受けさせた後に、より多数の被験体がウイルスブレークスルーを経験した。

上記研究により、日用量レベル２００ｍｇのＧＳ−７９７７と比較して、日用量レベル４００ｍｇのＧＳ−７９７７で効力の増強が示される。
処置レジメン−ＥＬＥＣＴＲＯＮ臨床研究
進行中の第２ａ相ＥＬＥＣＴＲＯＮ臨床研究によって、ＧＴ１、ＧＴ２またはＧＴ３のＨＣＶ感染症の被験体において、ＱＤで４００ｍｇのＧＳ−７９７７を、リバビリンおよび／またはペグインターフェロンと組み合わせて、または組み合わせずに８週間または１２週間投与して評価した。予備試験データは、ペグインターフェロンの存在に関わらず、処置未経験のＧＴ２またはＧＴ３ＨＣＶ患者をＧＳ−７９７７とリバビリンの組合せで処置した場合には、ＳＶＲ−１２が１００％であり、処置未経験のＧＴ１のＨＣＶ患者がＧＳ−７９７７およびリバビリンによる組合せ処置を受けた場合には、ＳＶＲ−１２が８４％であったことを実証している。比較として、処置未経験のＧＴ２／ＧＴ３のＨＣＶ患者がＧＳ−７９７７単剤療法を受けた場合には、６０％しかＳＶＲ−１２を達成できなかった。

ＥＬＥＣＴＲＯＮ試験のパート１では、処置未経験のＨＣＶ ＧＴ２またはＧＴ３患者において、リバビリン（ＲＢＶ）とだけ（体重により１０００／１２０００ｍｇ、ＢＩＤ）組み合わせた、かつ別個のアームでは、４週間、８週間または１２週間にわたる短縮期間のペグインターフェロンありで、上記リバビリンと組み合わせた、ＱＤで４００ｍｇのＧＳ−７９７７の１２週のレジメンを評価した。
群１：ＧＳ−７９７７（４００ｍｇ、ＱＤ）とＲＢＶ（１０００／１２００ｍｇ、ＢＩＤ）で１２週間（ペグインターフェロンなし）（ＧＴ２／ＧＴ３の処置未経験者）、ならびに
群２、３、４：ＧＳ−７９７７（４００ｍｇ、ＱＤ）とＲＢＶ（１０００／１２００ｍｇ、ＢＩＤ）で１２週間、およびＰＥＧ（毎週１８０μｇ）を１〜４週だけ／ＰＥＧ（毎週１８０μｇ）を１〜８週だけ／ＰＥＧ（毎週１８０μｇ）を１〜１２週（ＧＴ２／ＧＴ３の処置未経験者）。

ＥＬＥＣＴＲＯＮ試験のパート２では、追加の３０人の患者が、ＧＳ−７９７７単剤療法、ならびにＧＳ−７９７７、ＲＢＶおよびＰＥＧの組合せを用いる短縮期間の完全療法（ｔｏｔａｌ ｔｈｅｒａｐｙ）の調査レジメンに登録した。
群５：ＧＳ−７９７７（４００ｍｇ、ＱＤ）単剤療法で１２週間（ＧＴ２／ＧＴ３の処置未経験者）、
群６：ＧＳ−７９７７（４００ｍｇ、ＱＤ）とＰＥＧ（毎週１８０μｇ）およびＲＢＶ（１０００／１２００ｍｇ、ＢＩＤ）で８週間（ＧＴ２／ＧＴ３の処置未経験者）、ならびに
群７：ＧＳ−７９７７（４００ｍｇ、ＱＤ）とＲＢＶ（１０００／１２００ｍｇ、ＢＩＤ）で１２週間（ＧＴ１の無応答者）。

ＥＬＥＣＴＲＯＮ試験のパート３では、２つの追加のペグインターフェロンを用いないレジメンを、処置未経験のＨＣＶ ＧＴ１患者、および処置の経験があるＨＣＶ ＧＴ２またはＨＣＶ ＧＴ３患者で調査した。
群８：ＧＳ−７９７７（４００ｍｇ、ＱＤ）とＲＢＶ（１０００／１２００ｍｇ、ＢＩＤ）で１２週間（ＧＴ１の処置未経験者）、および
群９：ＧＳ−７９７７（４００ｍｇ、ＱＤ）とＲＢＶ（１０００／１２００ｍｇ、ＢＩＤ）で１２週間（ＧＴ２／ＧＴ３の処置経験者）。

ＥＬＥＣＴＲＯＮ試験のパート４では、ペグインターフェロンを用いない２つのさらなるレジメンを追加した。
群１０：ＧＳ−７９７７（４００ｍｇ、ＱＤ）とＲＢＶ（１０００／１２００ｍｇ、ＢＩＤ）で８週間（ＧＴ２／ＧＴ３の処置未経験者）、および
群１１：ＧＳ−７９７７（４００ｍｇ、ＱＤ）とＲＢＶ（８００ｍｇ、ＢＩＤ）で１２週間（ＧＴ２／ＧＴ３の処置未経験者）。

無応答者は、ペグインターフェロンおよびリバビリンによる処置の少なくとも１２週間後、ベースラインＨＣＶ ＲＮＡから＜２ｌｏｇ_１０ＩＵ／ｍＬ低下した患者として定義した。

処置経験患者は、ペグインターフェロンおよびリバビリンによる処置の少なくとも１２週間後、以下の応答のいずれかを有していた患者と定義した。（１）ベースラインＨＣＶ ＲＮＡから＜２ｌｏｇ_１０ＩＵ／ｍＬ低下、（２）ＨＣＶ ＲＮＡの≧ｌｏｇ_１０ＩＵ／ｍＬ低下、しかし処置終了時点にＨＣＶ ＲＮＡ＞定量限界（「ＬＯＱ」）、および（３）処置終了時点にＨＣＶ ＲＮＡ＜ＬＯＱ、しかしその後ＨＣＶ ＲＮＡ＞ＬＯＱ（再発者）。

ＥＬＥＣＴＲＯＮ試験の予備試験結果を以下に提示する。

ＥＬＥＣＴＲＯＮ群１〜９の患者集団および個体統計を、以下の表２Ａおよび２Ｂにまとめる。

処置未経験のＨＣＶ ＧＴ２／ＧＴ３群１〜５の患者の結果の概要を、検出限界（ＬＯＤ）未満の量のＨＣＶ ＲＮＡを有する患者の百分率に関するものとして、表３に提供する。

表３から、ＧＳ−７９７７およびＲＢＶで１２週間処置したすべての処置未経験のＨＣＶ ＧＴ２およびＧＴ３患者（群１〜４）では、全処置期間中（ＰＥＧありまたはなし）、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能であったことがわかる。ＧＳ−７９７７およびＲＢＶの組合せで処置したこのようなすべての患者（ＰＥＧありまたはなし）では、処置終了後１２週目にも２４週目にも、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能であった。

また表３により、ＧＳ−７９７７（４００ｍｇ、ＱＤ）単剤療法を１２週間受けた、すべてのＨＣＶ ＧＴ２／ＧＴ３の処置未経験患者（群５）で、全処置期間中、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能であったことが明らかである。しかし、ＧＳ−７９７７単剤療法を受けた患者の６０％しか、ＳＶＲ−１２およびＳＶＲ−２４を達成しなかった。

リバビリン単独は、ＨＣＶ ＲＮＡレベルに対してほとんどか全く作用しないことが報告されているので、群１（ＧＳ−７９７７＋ＲＢＶ）を群５（ＧＳ−７９７７単剤療法）と比較すると、ＧＳ−７９７７とリバビリンの組合せは、ＳＶＲ−４率、ＳＶＲ−８率、ＳＶＲ−１２率およびＳＶＲ−２４率における相乗的増大をもたらすようである。

表４は、処置未経験のＨＣＶ ＧＴ２／ＧＴ３患者（Ｎ＝１０）について、ＱＤで４００ｍｇのＧＳ−７９７７と、ＢＩＤで１０００／１２００ｍｇ（体重に基づく）のＲＢＶの組合せを受けた患者（群１）に関する、処置期間（１２週間）と処置後１２週間（Ｗ２４）までの平均ＨＣＶ ＲＮＡ値（ｌｏｇ_１０ＩＵ／ｍＬ）を示す。表４はまた、処置未経験のＨＣＶ ＧＴ２／ＧＴ３患者（Ｎ＝１０）について、ＱＤで４００ｍｇのＧＳ−７９７７だけによる１２週のレジメンを受けた患者（群５）に関する、処置期間（１２週間）の平均ＨＣＶ ＲＮＡ値（ｌｏｇ_１０ＩＵ／ｍＬ）を示す。用語「Ｄ１（６時間）」および「Ｄ１（１２時間）」は、それぞれ１日目の投薬後の１日目の６時間および１２時間になされた記録した測定値を指す。表４に提示のデータは、図１にも図示されている。

表４および図１のデータは、ＨＣＶ ＧＴ２／ＧＴ３の処置未経験患者を、ＧＳ−７９７７とＲＢＶの組合せ（上記の量）で処置すると、４〜１２週の処置期間中に検出限界未満の平均ＨＣＶ ＲＮＡレベル、ならびにＳＶＲ−１２が得られることを明示している。このデータは、また、ＧＳ−７９７７単剤療法を受けた患者でも、平均ＨＣＶ ＲＮＡ値が３〜１２週の処置期間中に検出限界未満であることを示す。しかし、また表４および図１は、ＧＳ−７９７７とリバビリンの組合せを１２週間受けた患者（群１）では、ＧＳ−７９７７による単剤療法を受けた患者（群５）と比較して、処置休止後１２週間にわたってより低い平均ＨＣＶ ＲＮＡレベルが維持されたことを示している。

これらの結果によって、ＧＳ−７９７７とリバビリンの組合せは、患者に、ペグインターフェロン処置を用いずにＨＣＶ処置を施すことができ、高いＳＶＲ−１２率を達成できるという点で有利であることが実証される。

すべての９つの完全に報告されたＥＬＥＣＴＲＯＮ試験コホートについて予備試験患者の結果の概要を、検出限界（ＬＯＤ）未満の量のＨＣＶ ＲＮＡを有する患者の百分率に関するものとして、表５にまとめる。

表５のデータは、ＧＳ−７９７７（４００ｍｇ、ＱＤ）とＲＢＶの組合せによって処置すると、ペグインターフェロンの存在に関わらず、処置未経験のＨＣＶ ＧＴ２／ＧＴ３患者（群１〜４、６）ではＳＶＲ−１２率が１００％であることを実証している。また表５のデータは、ペグインターフェロンなしにＧＳ−７９７７とＲＢＶの組合せで処置したＨＣＶ ＧＴｌの患者（群８）ではＳＶＲ−１２率が８４％であることを実証している。それとは対照的に、ＧＴ２／ＧＴ３の処置未経験患者に対するＧＳ−７９７７による単剤療法（群５）では、ＳＶＲ−１２率が６０％であった。

群１０に登録したすべての患者（処置未経験のＧＴ２／ＧＴ３のＨＣＶ被験体における８週間のＧＳ−７９７７＋リバビリンの併用療法）で、速やかなウイルス学的応答が達成され、処置中断や処置中のブレークスルーはなかった。

ＨＣＶに感染した被験体を、有効量のＧＳ−７９７７単独を投与するか、または有効量のＲＢＶと併用投与して処置することは、普通ならばペグインターフェロンに関連する副作用を回避できることを意味する。表６は、ＥＬＥＣＴＲＯＮ群１〜９の任意の処置群において、被験体の少なくとも１５％で報告された有害事象を提示している。

表６のデータによれば、ＧＳ−７９７７とリバビリンの組合せを包含する処置レジメン（群１、７、８、９）では、ペグインターフェロンも包含する処置レジメン（群２、３、４）と比較して、いくつかのタイプの有害事象の発生率（％）が低いと報告されたことが明らかである。ＧＳ−７９７７とリバビリンを組み合わせ、インターフェロンを用いない処置レジメンでは、例えば、以下の有害事象の発生率の低下が報告された：血液およびリンパ系障害（貧血を含む）、疼痛および悪寒、代謝および栄養障害（食欲低下を含む）、筋骨格および結合組織の障害（筋肉痛、背痛および関節痛を含む）、神経系障害（頭痛およびめまいを含む）、精神障害（不眠を含む）、呼吸器、胸部および縦隔の障害（呼吸困難を含む）、ならびに皮膚および皮下組織の障害（そう痒、皮膚乾燥および脱毛を含む）。

以下の表７のデータによれば、インターフェロンを用いない群１、５、７、８および９では、ペグインターフェロンを包含する処置レジメンを受けた群２、３、４および６と比較して、グレード３およびグレード４の血液学的異常の頻度が少なかったことが明らかである。

ここでは示していないが追加の結果により、処置期間（１２週間）中、およびデータが利用可能な範囲で処置期間終了後の期間中、ＥＬＥＣＴＲＯＮ群１〜５のすべての患者においてＡＬＴレベルの速やかな正常化が示されている。
ヒト臨床研究におけるＧＳ−７９７７耐性
現在まで、ＧＳ−７９７７による処置中にウイルス学的ブレークスルーは観察されなかったが、このことは、耐性に対する障壁が高いことを示唆している。ＧＳ−７９７７単独を包含するか、またはリバビリンおよび／もしくはペグインターフェロンと組み合わせたＧＳ−７９７７を包含する処置レジメンの、Ｐ７９７７−０２２１、ＰＲＯＴＯＮ、ＥＬＥＣＴＲＯＮ（群１〜９）およびＡＴＯＭＩＣ第２相ヒト臨床研究では、６２１人中５３人の患者が、ＧＳ−７９７７を含有する処置の休止後にウイルス再発を経験した。ウイルス再発試料の集団シーケンシング（ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ）は、Ｓ２８２Ｔが、５３人の患者のわずか１人に検出されたことを示しており、この患者は、ＧＴ２ｂであり、１２週間のＧＳ−７９７７単剤療法が完了してから４週間で再発した。ディープシーケンシングによって、再発時にこのＧＴ２ｂ患者で９９％のＳ２８２Ｔが明らかになった。集団およびクローン表現型分析では、ＧＴ２ｂ Ｓ２８２Ｔを含有する試料は、対応するベースラインウイルスと比較して、ＧＳ−７９７７に対して８〜１３倍感受性が低かったことが実証された。再発を経験した他の５２人の患者については、ベースラインおよび再発時のディープシーケンシングではＳ２８２Ｔが示されず、他の残基については、集団シーケンシングまたはディープシーケンシングではＧＳ−７９７７耐性に関連するとされる特定のＮＳ５Ｂ変異は同定されなかった（Ｓｖａｒｏｖｓｋａｉａら、６３^ｒｄ Ａｎｎｕａｌ Ｍｅｅｔｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｓｔｕｄｙ ｏｆ Ｌｉｖｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅｓ、Ｐｏｓｔｅｒ ７５３、２０１２年１１月１１日も参照されたい）。

上記のことにより、ＧＳ−７９７７は耐性障壁が高いことが示される。特に、Ｓ２８２Ｔ変異は、ＧＳ−７９７７とリバビリンを組み合わせた処置レジメンを受けたいかなる患者でも観察されなかった。
ＧＳ−７９７７とリバビリンおよび必要に応じてペグインターフェロンを組み合わせた処置レジメンに関するＳＶＲ−４とＳＶＲ−１２およびＳＶＲ−２４の一致
Ｆｌｏｒｉａｎらは、ペグインターフェロン／リバビリンの組合せ処置、ならびにペグインターフェロン、リバビリンおよびテラプレビルまたはボセプレビルを組み合わせた処置レジメンを包含する試験を包含する、ＨＣＶ臨床試験の大集団データベース全体で、ＳＶＲ−１２およびＳＶＲ−２４が一致し、ＳＶＲ−１２はＳＶＲ−２４に対して９８％の正の予測値を有すると報告している（Ｆｌｏｒｉａｎら、ＡＡＳＬＤ ２０１１、Ａｂｓｔｒａｃｔ ＬＢ−２８；Ｍａｒｔｉｎｏｔ−Ｐｅｉｇｎｏｕｘら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ（２０１０年）５１巻（４号）：１１２２〜１１２６頁も参照されたい）。

ＧＳ−７９７７を単独での、またはリバビリンおよび必要に応じてペグインターフェロンと組み合わせたＧＳ−７９７７による処置を少なくとも１２週間受けた、処置未経験のＧＴ１、ＧＴ２およびＧＴ３患者のＰＲＯＴＯＮ、ＥＬＥＣＴＲＯＮおよびＡＴＯＭＩＣ第２相研究のＨＣＶデータを評価した。４００ｍｇのＧＳ−７９７７で少なくとも１２週間処置を受けて、ＳＶＲ−４およびＳＶＲ−１２のデータ、またはＳＶＲ−４およびＳＶＲ−２４のデータを有する患者だけを分析の対象とした（患者５９６人中２５９人）。この分析によって、ＳＶＲ−４を達成し、処置後１２週のデータが利用可能であった患者では、すべてのレジメンにわたって、ＳＶＲ−４とＳＶＲ−１２およびＳＶＲ−２４の両方との間で９９〜１００％一致したことが見出された。これらの結果は、４００ｍｇのＧＳ−７９７７およびリバビリンで、ならびに必要に応じてペグインターフェロンを組み合わせて処置したＧＴ１、ＧＴ３およびＧＴ３のＨＣＶ患者では、ＳＶＲ−４がＳＶＲ−１２およびＳＶＲ−２４と高度に一致することを示している（Ｌａｗｉｔｚら、ＧＳ−７９７７ Ｐｈａｓｅ ２ Ｔｒｉａｌｓ： Ｃｏｎｃｏｒｄａｎｃｅ ｏｆ ＳＶＲ４ ｗｉｔｈ ＳＶＲ１２ ａｎｄ ＳＶＲ２４ ｉｎ ＨＣＶ Ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ １−３、ＥＡＳＬ（２０１２年４月１８〜２２日））。

上記は、本明細書に提示のＳＶＲデータが、ＳＶＲ−２４、ＳＶＲ−３６およびＳＶＲ−４８を含む長期ＳＶＲ率の予測値となり得ることを示唆している。

上記データは、ＧＳ−７９７７をリバビリンと併用投与すると（ペグインターフェロンありまたはなし）、ＨＣＶ ＧＴ１、ＧＴ２およびＧＴ３の患者においてＨＣＶ ＲＮＡおよび処置終了時応答（ｅｎｄ ｏｆ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｒｅｓｐｏｎｓｅ）（ＥＯＴＲ）の速やかな低減が引き出されたことを示している。ＧＳ−７９７７をリバビリンおよび必要に応じてペグインターフェロンと組み合わせた場合を含み、ＧＳ−７９７７による処置過程中にウイルスブレークスルーは観察されなかった。ＳＶＲ−１２は、ＧＳ−７９７７とリバビリンの組合せを１２週間受けたＨＣＶ ＧＴ２およびＧＴ３の処置未経験患者では１００％であり、ＧＳ−７９７７とリバビリンの組合せを１２週間受けたＨＣＶ ＧＴ１の処置未経験患者では８４％であったが、これに対してＧＳ−７９７７だけを投与したＨＣＶ ＧＴ２およびＧＴ３の処置未経験患者では、ＳＶＲ−１２は６０％であった。リバビリン単独は、ヒト臨床試験においてＨＣＶ ＲＮＡレベルにほとんどか全く影響を与えなかったことを考慮すると、上記臨床データおよびインビトロデータは、ＧＳ−７９７７とリバビリンの組合せが、ＨＣＶ ＲＮＡレベルを相乗的に低減することを実証している。

さらに、ＧＳ−７９７７をリバビリンと組み合わせて受けたＥＬＥＣＴＲＯＮ試験の処置アームでは、ペグインターフェロンも受けた処置アームと比較して、副作用の発生が少なかったことが報告された。このことは、ＧＳ−７９７７とリバビリンの組合せを用いるがインターフェロンを用いない処置が、ペグインターフェロンを包含する処置レジメンよりも利点を付与し得ることを示唆している。

またさらに、ＧＳ−７９７７に対して感受性が低いＳ２８２Ｔ変異を有するＨＣＶレプリコンが、リバビリンに対して高い感受性を呈することを示すインビトロ結果によって、ＧＳ−７９７７とリバビリンの組合せが、ＧＳ−７９７７による単剤療法と比較して耐性率の低下をもたらす処置レジメンを提供できることが示唆される。これまでに、ＧＳ−７９７７の単剤療法を受けた１人の患者で変異が観察されたことと比較して、ＧＳ−７９７７とリバビリンの併用療法を受けた患者では、Ｓ２８２Ｔ変異が観察されなかった。

本明細書に記載の方法に従って、ペグインターフェロンを用いずに有効な療法を提供する能力には、ＨＣＶ感染症に罹患している個体への治療選択肢を著しく改善する潜在性がある。

本発明の上の記載は、例示し説明するものであるが、本発明を網羅するものではないし、開示事項に本発明を厳密に限定するものでもない。上の教示に照らして修正および改変を加えることも可能であり、または本発明を実施することによって修正および改変を加えることができる。

Claims (46)

1. 有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンをＣ型肝炎ウイルスに感染している被験体に一定期間投与する工程を含む、該被験体を処置する方法。
2. 前記期間が約２週間〜約１２週間である、請求項１に記載の方法。
3. 前記期間が約８週間である、請求項１に記載の方法。
4. 前記期間が約１２週間である、請求項１に記載の方法。
5. ＧＳ−７９７７の前記有効量が、日用量で約１００ｍｇ〜約８００ｍｇである、請求項１に記載の方法。
6. ＧＳ−７９７７の前記有効量が、日用量で約４００ｍｇである、請求項５に記載の方法。
7. リバビリンの前記有効量が、日用量で約６００ｍｇ〜約１４００ｍｇである、請求項１に記載の方法。
8. リバビリンの前記有効量が、日用量で約８００ｍｇまたは約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇである、請求項７に記載の方法。
9. ＧＳ−７９７７の前記有効量が、日用量で約４００ｍｇであり、リバビリンの前記有効量が、日用量で約８００ｍｇまたは約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇである、請求項１に記載の方法。
10. 前記被験体が、ＨＣＶ遺伝子型１、２、３、４、５もしくは６、またはその任意の組合せに感染している、請求項１に記載の方法。
11. 前記被験体が、ＨＣＶ遺伝子型１、２もしくは３、またはその任意の組合せに感染している、請求項１０に記載の方法。
12. 前記被験体が、患者集団の一部であり、該患者集団の少なくとも１人の被験体が、前記期間が終了した後少なくとも１２週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である、請求項１に記載の方法。
13. 前記少なくとも１人の被験体が、前記期間が終了した後少なくとも２４週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である、請求項１２に記載の方法。
14. 前記少なくとも１人の被験体が、前記期間が終了した後少なくとも１２週間、ＨＣＶ ＲＮＡが約１５ＩＵ／ｍＬ未満である、請求項１２に記載の方法。
15. 前記少なくとも１人の被験体が、前記期間が終了した後少なくとも２４週間、ＨＣＶ ＲＮＡが約１５ＩＵ／ｍＬ未満である、請求項１４に記載の方法。
16. 前記被験体がヒトである、請求項１に記載の方法。
17. 前記有効量のＧＳ−７９７７および前記有効量のリバビリンが、インターフェロンを用いない処置レジメンに従って投与される、請求項１に記載の方法。
18. 前記インターフェロンを用いない処置レジメンが、前記有効量のＧＳ−７９７７および前記有効量のリバビリンを前記被験体に前記期間投与する工程からなる、請求項１７に記載の方法。
19. インターフェロンおよびペグインターフェロンが、前記期間中、前記被験体に投与されない、請求項１に記載の方法。
20. 有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンを含む、Ｃ型肝炎ウイルス感染症を処置するのに有用な組成物。
21. ペグインターフェロンを含まない、請求項２０に記載の組成物。
22. 被験体に毎日投与される約１００ｍｇ〜約８００ｍｇのＧＳ−７９７７および該被験体に毎日投与される約６００ｍｇ〜約１４００ｍｇのリバビリンを含む、請求項２０に記載の組成物。
23. 前記被験体に毎日投与される約４００ｍｇのＧＳ−７９７７および該被験体に毎日投与される約８００ｍｇまたは約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇのリバビリンを含む、請求項２２に記載の組成物。
24. 一定期間、Ｃ型肝炎ウイルスに感染している被験体を処置した後、該期間が終了した後少なくとも１２週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量を検出不可能にすることができる、請求項２０に記載の組成物。
25. 一定期間、Ｃ型肝炎ウイルスに感染している前記被験体を処置した後、該期間が終了した後少なくとも２４週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量を検出不可能にすることができる、請求項２４に記載の組成物。
26. 一定期間、Ｃ型肝炎ウイルスに感染している前記被験体を処置した後、該期間が終了した後少なくとも１２週間、ＨＣＶ ＲＮＡを約１５ＩＵ／ｍＬ未満にすることができる、請求項２４に記載の組成物。
27. 一定期間、Ｃ型肝炎ウイルスに感染している前記被験体を処置した後、該期間が終了した後少なくとも２４週間、ＨＣＶ ＲＮＡを約１５ＩＵ／ｍＬ未満にすることができる、請求項２６に記載の組成物。
28. Ｃ型肝炎ウイルス感染症の処置を必要としている被験体においてＣ型肝炎ウイルス感染症を処置するための、有効量のＧＳ−７９７７および有効量のリバビリンの使用。
29. 前記有効量のＧＳ−７９７７および前記有効量のリバビリンを、前記被験体に約２週間〜約１２週間の一定期間投与することを含む、請求項２８に記載の使用。
30. 前記期間が約８週間である、請求項２９に記載の使用。
31. 前記期間が約１２週間である、請求項２９に記載の使用。
32. ＧＳ−７９７７の前記有効量が、日用量で約１００ｍｇ〜約８００ｍｇである、請求項２８に記載の使用。
33. ＧＳ−７９７７の前記有効量が、日用量で約４００ｍｇである、請求項３２に記載の使用。
34. リバビリンの前記有効量が、日用量で約６００ｍｇ〜約１４００ｍｇである、請求項２８に記載の使用。
35. リバビリンの前記有効量が、日用量で約８００ｍｇまたは約１０００ｍｇ〜約１２００ｍｇである、請求項３４に記載の使用。
36. ＧＳ−７９７７の前記有効量が、日用量で約４００ｍｇであり、リバビリンの前記有効量が、日用量で約８００ｍｇまたは約１０００ｍｇ〜約１２０００ｍｇである、請求項２８に記載の使用。
37. 前記被験体が、ＨＣＶ遺伝子型１、２、３、４、５もしくは６、またはその任意の組合せに感染している、請求項２８に記載の使用。
38. 前記被験体が、ＨＣＶ遺伝子型１、２もしくは３、またはその任意の組合せに感染している、請求項３７に記載の使用。
39. 前記被験体が、患者集団の一部であり、該患者集団の少なくとも１人の被験体が、処置期間が終了した後少なくとも１２週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である、請求項２８に記載の使用。
40. 前記少なくとも１人の被験体が、前記処置期間が終了した後少なくとも２４週間、ＨＣＶ ＲＮＡの量が検出不可能である、請求項３９に記載の使用。
41. 前記少なくとも１人の被験体が、前記処置期間が終了した後少なくとも１２週間、ＨＣＶ ＲＮＡが約１５ＩＵ／ｍＬ未満である、請求項３９に記載の使用。
42. 前記少なくとも１人の被験体が、前記処置期間が終了した後少なくとも２４週間、ＨＣＶ ＲＮＡが約１５ＩＵ／ｍＬ未満である、請求項４１に記載の使用。
43. 前記被験体がヒトである、請求項２８に記載の使用。
44. 前記有効量のＧＳ−７９７７および前記有効量のリバビリンが、インターフェロンを用いない処置レジメンに従って投与される、請求項２８に記載の使用。
45. 前記インターフェロンを用いない処置レジメンが、前記有効量のＧＳ−７９７７および前記有効量のリバビリンを前記被験体に一定期間投与することからなる、請求項４４に記載の使用。
46. インターフェロンおよびペグインターフェロンが、処置期間の間に、前記被験体に投与されない、請求項２８に記載の使用。

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