JP2013537403A - 固形腫瘍の存在のマーカーとしてのEphA3の検出 - Google Patents
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Abstract
Description
本出願は、2010年6月18日に出願された米国特許仮出願第61/356,522号の恩典を主張し、この出願は参照により本明細書に組み入れられる。
Eph受容体チロシンキナーゼ(Eph)は、タンパク質をチロシン残基でリン酸化するキナーゼである受容体チロシンキナーゼ(RTK)の大きな群に属する。Ephおよびそれらの膜結合型エフリンリガンド(エフリン)は、細胞の位置決定および組織の組織化を制御する(Poliakov, et al., Dev Cell 7:465-80, 2004)。さまざまなEphおよびエフリンは、数あるパターン形成機能の中でも特に、血管発生において役割を果たすことが示されている。EphB4およびエフリン-B2のノックアウトは、毛細血管床を血管にリモデリングさせる能力の喪失(Poliakov, et al.、前記)および胚致死をもたらす。ある種のEph受容体およびエフリンの持続的発現は、新たに形成された成体微小血管でも観察されている(Brantley-Sieders, et al., Curr Pharm Des 10:3431-42, 2004;Adams, J Anat 202:105-12, 2003)。
本発明は一部には、ヒト末梢血試料におけるEphA3+非造血性非腫瘍細胞の発見に基づくものであり、固形腫瘍癌患者においてこれらの細胞の頻度は有意に増加している。これらの細胞のレベルは抗血管(anti-vascular)癌治療法の後に低下し、それ故に治療有効性の指標として役立つ。いくつかの態様において、末梢血におけるEphA3+非造血性非腫瘍細胞のレベルを利用して、腫瘍の存在を診断することができる。したがって、本発明は、固形腫瘍を有するか、または腫瘍を有する疑いのある患者の末梢血におけるEphA3+非造血性非腫瘍細胞の存在に関するスクリーニングの方法を提供する。
定義
本明細書で用いる場合、「固形腫瘍」とは、対象における新生物細胞を含む異常な組織塊のことを指す。固形腫瘍は良性であっても悪性であってもよい。本発明の方法および組成物を用いて検出および/またはモニターすることのできる固形腫瘍は、新血管形成によって特徴づけられる。腫瘍血管系(微小血管系とも称される)は、内皮細胞の急速な増殖、不良な壁構造、血漿タンパク質の透過性の増大、および、需要に応じて血流を増加させる能力が限られていることによって特徴づけられる。腫瘍血管系は、腫瘍塊の腫瘍細胞が、正常細胞と比較して増殖面での優位性を獲得することを可能にする。固形腫瘍は、それを形成する細胞の種類にちなんで命名される。固形腫瘍の例には、肉腫、癌腫(上皮腫瘍)、黒色腫および神経膠芽腫がある。
本発明は一部には、固形腫瘍を有する癌患者の末梢血における、EphA3を発現する非造血性非腫瘍細胞の発見に基づく。そのような細胞は、癌治療物質による治療後、例えば抗血管形成療法後に減少し、そのような患者における治療の治療有効性の指標として用いることができる。さらに、そのような細胞を、患者、例えば、癌の症状を有するか、またはさもなければ癌を有する疑いのある患者における固形腫瘍の存在を診断するために用いることもできる。
EphA3+非造血性非腫瘍細胞を有する癌患者は、患者由来の末梢血細胞上でのEphA3の発現を検出することによって同定することができる。
一般的に用いられる数多くのイムノアッセイを、EphA3発現を検出するために用いることができる。適用しうる抗体技術の一般的概要については、Harlow & Lane, Antibodies: A Laboratory Manual (1988)およびHarlow & Lane, Using Antibodies (1999)に記載がある。Methods in Cell Biology: Antibodies in Cell Biology, volume 37 (Asai, ed. 1993);Basic and Clinical Immunology (Stites & Terr, eds., 7th ed. 1991、およびCurrent Protocols in Immunology (Coligan, et al. Eds, John C. Wiley, 1999-present)を含む他の情報源も参照されたい。免疫学的結合アッセイには、ポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体のいずれを用いることもできる。
本発明との使用に適した抗体の一例は、mAb IIIA4の結合特異性を有する抗体である。モノクローナル抗体mAb IIIA4は、ネイティブEphA3球状エフリン結合ドメインと結合する(Smith et al., J. Biol. Chem. 279:9522-9531, 2004;およびVearing et al., Cancer Res. 65:6745-6754, 2005)。EphA3表面に対する高親和性mAb IIIA4結合は、EphA3とのエフリンA5相互作用の全体的な親和性にほとんど影響を及ぼさない。
いくつかの態様において、本発明との使用に適した抗体は、ヒトEphA3に対する高親和性結合を有する。本発明においては、抗体の解離定数(KD)が約10nM未満、例えば約5nM、または約2nM、または約1nM、またはそれ未満であるならば、抗体と抗原との間に高親和性結合が存在する。当業者に周知であるように、表面プラズモン共鳴アッセイ、飽和アッセイ、またはELISAもしくはRIAなどのイムノアッセイといった種々の方法を用いて、抗体のその標的抗原に対する結合親和性を決定することができる。結合親和性を決定するための例示的な方法は、Krinner et al., (2007) Mol. Immunol. Feb;44(5):916-25. (Epub 2006 May 11))に記載されているような、CM5センサーチップを用いるBIAcore(商標)2000装置(Biacore AB, Freiburg, Germany)での表面プラズモン共鳴解析によるものである。
他の態様において、EphA3の発現は、末梢血細胞において発現される、EphA3をコードするmRNAのレベルを検出することによって検出することができる。多くの場合には、RT-PCRなどの核酸増幅法を利用して、RNAの量を定量する。そのような態様において、典型的には、他の表面マーカーであるCD34、CD45、CD44、CD90、KDRの発現も評価する。そのような態様において、フローサイトメトリーなどによってまず選別した細胞の集団に対して、それがCD34などの表面マーカーを発現するかどうかを決定するために、増幅法を利用してもよい。
本発明はさらに、固形腫瘍を有するか、または固形腫瘍を有する疑いのある患者の血液における非造血性細胞、非腫瘍細胞上でのEphA3発現を評価するためのキットも提供する。キットは、EphA3に選択的に結合する1つまたは複数の抗体を含みうる。典型的な態様において、本発明のキットは、異なるエピトープでEphA3に結合する2つの抗体を含む。いくつかの態様において、この2つの抗体は検出可能な同じ標識で標識されている。または、2つの抗体を異なる検出可能な標識で標識してもよい。
腫瘍間質発現を例証するための一例として、ヒト前立腺癌の凍結腫瘍切片を免疫組織化学によって分析するために、マウスIIIA4抗体を用いた(腺房腺癌、n=8)(図1a)。並行処理した切片でIIIA4染色パターンの特異性を確認し(図1b)、60倍モル過剰量の組換え可溶性EphA3細胞外ドメインの存在下でIIIA4 mAbを用いたところ、抗EphA3シグナルは、二次抗体のみを用いて試験した対照切片で観察されたバックグラウンドレベルまで減少した(図1c)。さらに別の切片を、間質性および血管性の構成要素をそれぞれ顕示させるために、抗線維芽細胞活性化タンパク質(FAP)抗体mF19(図1d)および抗CD31抗体(図1e)を用いて分析した。
本実施例は、ヒト末梢血における、循環内皮細胞とは別個の細胞の集団上でEphA3が発現されることを示す。8mlのBD Vacutainer CPT Tubeを記載された通りに用いて(Duda, et al., Nature protocols 2:805-810, 2007)、正常志願者および癌患者から採取した末梢血の試料から末梢血単核細胞を単離した。各ドナーからの並行処理試料を、EphA3のみ(上のパネル)に関して分析するか(図2)、または多パラメーターフローサイトメトリーによって、MSCマーカーCD90、CD44およびKDRと合わせて(図2a)、もしくは内皮始原マーカーCD34、KDRおよびCD133の発現と合わせて(図2b)、EphA3の発現に関して分析した。試料のそれぞれ、ならびに対照試料において、合計1×106個ずつの細胞を分析した。後者には、アイソタイプを合致させた関連のない対照抗体を含む試料、FMO(1項目除外蛍光(fluorescence minus one))試料、および適切な検出器設定を決定するために用いた非染色試料を含めた。興味深いことに、EphA3+細胞はCD90+/CD44+/KDR+間質細胞集団内では見いだされたが(図2a)、CD45dim/CD34+/CD133+ CEP細胞集団では見いだされなかった(図2b)。
血液試料におけるCEPの濃度を推定するために、FITCコンジュゲート抗CD34、パシフィックブルーコンジュゲート抗CD45、Alexa 674コンジュゲート抗CD31、およびPEコンジュゲート抗CD133とともにインキュベートした1×106個の末梢血単球を、フローサイトメトリーによって逐次的に分析した。単一の細胞集団を特異的に分析するために、分析した細胞をゲート処理にかけて、シグナルの特異性を確認するために、上記に概略を示した対照試料を含めた(図3a)。生存している単一の細胞集団に対してゲートを調整した後に、α-EphA3 mAb IIIA4により、平行処理した試料からの単一の細胞集団を分析した(図3b)。
本実施例は、癌患者の末梢血において、CEPおよびEphA3+壁(非内皮血管)細胞の濃度が有意に増加していることを示す。
CEPおよびEphA3発現細胞の濃度は抗血管療法後に低下する。抗血管療法(アバスチン(Avastin))を受けている合計10人(n=10)の結腸癌患者からの末梢血試料を、治療前および治療を終了したその6週後に、mab IIIA4を用いてEphA3+細胞の存在に関して、およびCEPの存在に関して分析した。統計分析(Wilcoxonのマッチドペア符号付順位検定)により、治療後にこれらの患者の血液中のEphA3陽性細胞およびCEPの濃度の有意な低下が明らかになった(図5)。
脾臓B細胞とSP2/0細胞との融合による、マウスに対する組換えEphA3-Fc融合タンパク質による免疫処置を用いて、ヒトEphA3の細胞外ドメインに対する一群のマウスモノクローナル抗体を作製した。ハイブリドーマ上清を、組換えヒトEphA3細胞外ドメインに対する抗体結合、およびIIIA4によって認識されるEphA3上の部位に対する結合をめぐる競合に関してスクリーニングした。EphA3と特異的に結合し、かつIIIA4エピトープに対する結合について競合しない、SL-2、SL-5、SL-6およびSL-7と命名された4種のモノクローナル抗体が同定された。これらの抗体はそれぞれ、マウスIgG1アイソタイプ抗体である。
[本発明1001]
以下の段階を含む、固形腫瘍を有する患者を同定する方法:
固形腫瘍を有する可能性のある患者由来の末梢血単核細胞を含む試料を用意する段階;
該試料における正常を上回るEphA3 + 非造血性非腫瘍細胞のレベルを検出する段階であって、それにより、固形腫瘍を有する患者を同定する、段階。
[本発明1002]
EphA3 + 細胞がCD34 - であるかどうかを決定する段階をさらに含む、本発明1001の方法。
[本発明1003]
EphA3 + 細胞がCD45 - であるかどうかを決定する段階をさらに含む、本発明1001の方法。
[本発明1004]
EphA3 + 細胞がCD44、CD90、および/またはKDRを発現するかどうかを決定する段階をさらに含む、本発明1001の方法。
[本発明1005]
EphA3 + 細胞がCD34 - およびCD45 - であるかどうかを決定する段階をさらに含む、本発明1001の方法。
[本発明1006]
EphA3 + 細胞がCD44、CD90、および/またはKDRを発現するかどうかを決定する段階をさらに含む、本発明1005の方法。
[本発明1007]
患者が乳癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、結腸腺癌、腎細胞癌、移行上皮癌、前立腺腺癌、または黒色腫を有する、本発明1001〜1006のいずれかの方法。
[本発明1008]
EphA3+非造血性非腫瘍細胞のレベルを検出する段階が、該細胞の表面におけるEphA3発現を検出する段階を含む、本発明1001〜1006のいずれかの方法。
[本発明1009]
細胞の表面におけるEphA3発現が、フローサイトメトリーによって検出される、本発明1008の方法。
[本発明1010]
細胞の表面における発現を検出する段階が、EphA3に選択的に結合する第1の抗体と該細胞とを接触させることを含む、本発明1008の方法。
[本発明1011]
第1の抗体が結合するエピトープとは異なるエピトープでEphA3に選択的に結合する第2の抗体と前記細胞とを接触させることをさらに含む、本発明1010の方法。
[本発明1012]
第2の抗体が、第1の抗体と同じ検出可能な標識で標識されている、本発明1011の方法。
[本発明1013]
EphA3+非造血性非腫瘍細胞のレベルを検出する段階がRT-PCR反応を含む、本発明1001〜1006のいずれかの方法。
[本発明1014]
癌治療物質を患者に投与する段階をさらに含む、本発明1001〜1006のいずれかの方法。
[本発明1015]
患者が乳癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、結腸腺癌、腎細胞癌、移行上皮癌、前立腺腺癌、または黒色腫を有する、本発明1014の方法。
[本発明1016]
癌治療物質が抗血管(anti-vascular)治療物質である、本発明1014の方法。
[本発明1017]
抗血管治療物質が、血管内皮増殖因子(VEGF)アンタゴニストであるか、またはEphA3を活性化する抗体である、本発明1016の方法。
[本発明1018]
癌治療物質が、EphA3に選択的に結合する抗体である、本発明1014の方法。
[本発明1019]
以下の段階を含む、癌治療物質の有効性をモニターする方法:
癌治療物質による治療後に、固形腫瘍を有する患者由来の末梢血におけるEphA3+非造血性非腫瘍細胞のレベルを決定する段階;
末梢血におけるEphA3+非造血性非腫瘍細胞のレベルを、癌治療物質による治療前のレベルと比較する段階。
[本発明1020]
癌治療物質が抗血管治療物質である、本発明1019の方法。
[本発明1021]
抗血管治療物質が、VEGFアンタゴニストであるか、またはEphA3を活性化する抗体である、本発明1020の方法。
[本発明1022]
癌治療物質が、EphA3 + に選択的に結合する抗体である、本発明1019の方法。
[本発明1023]
EphA3 + 細胞がCD34 - であるかどうかを決定する段階をさらに含む、本発明1019の方法。
[本発明1024]
EphA3 + 細胞がCD45 - であるかどうかを決定する段階をさらに含む、本発明1019の方法。
[本発明1025]
EphA3 + 細胞がCD44、CD90、および/またはKDRを発現するかどうかを決定する段階をさらに含む、本発明1019の方法。
[本発明1026]
EphA3 + 細胞がCD34 - およびCD45 - であるかどうかを決定する段階をさらに含む、本発明1019の方法。
[本発明1027]
EphA3 + 細胞がCD44、CD90、および/またはKDRを発現するかどうかを決定する段階をさらに含む、本発明1026の方法。
[本発明1028]
EphA3 + 非造血性非腫瘍細胞のレベルを決定する段階が、該細胞の表面におけるEphA3発現を検出する段階を含む、本発明1019〜1027のいずれかの方法。
[本発明1029]
細胞の表面におけるEphA3発現が、フローサイトメトリーによって検出される、本発明1028の方法。
[本発明1030]
非造血性細胞の表面における発現を検出する段階が、EphA3に選択的に結合する第1の抗体と該細胞とを接触させることを含む、本発明1028の方法。
[本発明1031]
異なるEphA3エピトープに選択的に結合する第2の抗体と前記細胞とを接触させることをさらに含む、本発明1030の方法。
[本発明1032]
第1および第2の抗体が検出可能な同じ標識で標識されている、本発明1031の方法。
[本発明1033]
癌治療物質が、EphA3に選択的に結合する治療的抗体であり、かつEphA3+非造血性非腫瘍細胞のレベルを決定する段階が、該治療的抗体が結合するエピトープとは異なるエピトープに結合する抗体と該細胞とを接触させることを含む、本発明1019〜1027のいずれかの方法。
[本発明1034]
患者が乳癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、結腸腺癌、腎細胞癌、移行上皮癌、前立腺腺癌、または黒色腫を有する、本発明1019〜1027のいずれかの方法。
[本発明1035]
EphA3+の発現を検出する段階がRT-PCR反応を含む、本発明1019〜1027のいずれかの方法。
[本発明1036]
試料における非造血性細胞の存在を検出するためのキットであって、EphA3エピトープに選択的に結合する第1の抗体、および異なるEphA3エピトープに選択的に結合する第2の抗体を含む、前記キット。
[本発明1037]
第1および第2の抗体が検出可能な同じ標識で標識されている、本発明1036のキット。
[本発明1038]
CD34、CD45、CD90、およびKDRからなる群より選択される表面マーカーに結合する抗体をさらに含む、本発明1036のキット。
[本発明1039]
以下の段階を含む、患者由来の末梢血におけるEphA3 + 細胞の非造血性非腫瘍集団の存在または非存在を同定する方法:
患者由来の末梢血細胞を含む試料を用意する段階;
試料中の非造血性非腫瘍細胞におけるEphA3 + の発現の存在または非存在を検出する段階であって、非造血性非腫瘍細胞上のEphA3+発現の存在によって固形腫瘍の存在が示される、段階。
Claims (39)
- 以下の段階を含む、固形腫瘍を有する患者を同定する方法:
固形腫瘍を有する可能性のある患者由来の末梢血単核細胞を含む試料を用意する段階;
該試料における正常を上回るEphA3+非造血性非腫瘍細胞のレベルを検出する段階であって、それにより、固形腫瘍を有する患者を同定する、段階。 - EphA3+細胞がCD34-であるかどうかを決定する段階をさらに含む、請求項1記載の方法。
- EphA3+細胞がCD45-であるかどうかを決定する段階をさらに含む、請求項1記載の方法。
- EphA3+細胞がCD44、CD90、および/またはKDRを発現するかどうかを決定する段階をさらに含む、請求項1記載の方法。
- EphA3+細胞がCD34-およびCD45-であるかどうかを決定する段階をさらに含む、請求項1記載の方法。
- EphA3+細胞がCD44、CD90、および/またはKDRを発現するかどうかを決定する段階をさらに含む、請求項5記載の方法。
- 患者が乳癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、結腸腺癌、腎細胞癌、移行上皮癌、前立腺腺癌、または黒色腫を有する、請求項1〜6のいずれか一項記載の方法。
- EphA3+非造血性非腫瘍細胞のレベルを検出する段階が、該細胞の表面におけるEphA3発現を検出する段階を含む、請求項1〜6のいずれか一項記載の方法。
- 細胞の表面におけるEphA3発現が、フローサイトメトリーによって検出される、請求項8記載の方法。
- 細胞の表面における発現を検出する段階が、EphA3に選択的に結合する第1の抗体と該細胞とを接触させることを含む、請求項8記載の方法。
- 第1の抗体が結合するエピトープとは異なるエピトープでEphA3に選択的に結合する第2の抗体と前記細胞とを接触させることをさらに含む、請求項10記載の方法。
- 第2の抗体が、第1の抗体と同じ検出可能な標識で標識されている、請求項11記載の方法。
- EphA3+非造血性非腫瘍細胞のレベルを検出する段階がRT-PCR反応を含む、請求項1〜6のいずれか一項記載の方法。
- 癌治療物質を患者に投与する段階をさらに含む、請求項1〜6のいずれか一項記載の方法。
- 患者が乳癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、結腸腺癌、腎細胞癌、移行上皮癌、前立腺腺癌、または黒色腫を有する、請求項14記載の方法。
- 癌治療物質が抗血管(anti-vascular)治療物質である、請求項14記載の方法。
- 抗血管治療物質が、血管内皮増殖因子(VEGF)アンタゴニストであるか、またはEphA3を活性化する抗体である、請求項16記載の方法。
- 癌治療物質が、EphA3に選択的に結合する抗体である、請求項14記載の方法。
- 以下の段階を含む、癌治療物質の有効性をモニターする方法:
癌治療物質による治療後に、固形腫瘍を有する患者由来の末梢血におけるEphA3+非造血性非腫瘍細胞のレベルを決定する段階;
末梢血におけるEphA3+非造血性非腫瘍細胞のレベルを、癌治療物質による治療前のレベルと比較する段階。 - 癌治療物質が抗血管治療物質である、請求項19記載の方法。
- 抗血管治療物質が、VEGFアンタゴニストであるか、またはEphA3を活性化する抗体である、請求項20記載の方法。
- 癌治療物質が、EphA3+に選択的に結合する抗体である、請求項19記載の方法。
- EphA3+細胞がCD34-であるかどうかを決定する段階をさらに含む、請求項19記載の方法。
- EphA3+細胞がCD45-であるかどうかを決定する段階をさらに含む、請求項19記載の方法。
- EphA3+細胞がCD44、CD90、および/またはKDRを発現するかどうかを決定する段階をさらに含む、請求項19記載の方法。
- EphA3+細胞がCD34-およびCD45-であるかどうかを決定する段階をさらに含む、請求項19記載の方法。
- EphA3+細胞がCD44、CD90、および/またはKDRを発現するかどうかを決定する段階をさらに含む、請求項26記載の方法。
- EphA3+非造血性非腫瘍細胞のレベルを決定する段階が、該細胞の表面におけるEphA3発現を検出する段階を含む、請求項19〜27のいずれか一項記載の方法。
- 細胞の表面におけるEphA3発現が、フローサイトメトリーによって検出される、請求項28記載の方法。
- 非造血性細胞の表面における発現を検出する段階が、EphA3に選択的に結合する第1の抗体と該細胞とを接触させることを含む、請求項28記載の方法。
- 異なるEphA3エピトープに選択的に結合する第2の抗体と前記細胞とを接触させることをさらに含む、請求項30記載の方法。
- 第1および第2の抗体が検出可能な同じ標識で標識されている、請求項31記載の方法。
- 癌治療物質が、EphA3に選択的に結合する治療的抗体であり、かつEphA3+非造血性非腫瘍細胞のレベルを決定する段階が、該治療的抗体が結合するエピトープとは異なるエピトープに結合する抗体と該細胞とを接触させることを含む、請求項19〜27のいずれか一項記載の方法。
- 患者が乳癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、結腸腺癌、腎細胞癌、移行上皮癌、前立腺腺癌、または黒色腫を有する、請求項19〜27のいずれか一項記載の方法。
- EphA3+の発現を検出する段階がRT-PCR反応を含む、請求項19〜27のいずれか一項記載の方法。
- 試料における非造血性細胞の存在を検出するためのキットであって、EphA3エピトープに選択的に結合する第1の抗体、および異なるEphA3エピトープに選択的に結合する第2の抗体を含む、前記キット。
- 第1および第2の抗体が検出可能な同じ標識で標識されている、請求項36記載のキット。
- CD34、CD45、CD90、およびKDRからなる群より選択される表面マーカーに結合する抗体をさらに含む、請求項36記載のキット。
- 以下の段階を含む、患者由来の末梢血におけるEphA3+細胞の非造血性非腫瘍集団の存在または非存在を同定する方法:
患者由来の末梢血細胞を含む試料を用意する段階;
試料中の非造血性非腫瘍細胞におけるEphA3+の発現の存在または非存在を検出する段階であって、非造血性非腫瘍細胞上のEphA3+発現の存在によって固形腫瘍の存在が示される、段階。
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Cited By (1)
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---|---|---|---|---|
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