JP2013531681A - 非アルコール性脂肪肝疾患の予防および治療のためのアデノウイルスad36e4orf1タンパク質 - Google Patents
非アルコール性脂肪肝疾患の予防および治療のためのアデノウイルスad36e4orf1タンパク質 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2013531681A JP2013531681A JP2013518858A JP2013518858A JP2013531681A JP 2013531681 A JP2013531681 A JP 2013531681A JP 2013518858 A JP2013518858 A JP 2013518858A JP 2013518858 A JP2013518858 A JP 2013518858A JP 2013531681 A JP2013531681 A JP 2013531681A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- adenovirus
- e4orf1
- protein
- nucleic acid
- liver
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/162—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/10011—Adenoviridae
- C12N2710/10311—Mastadenovirus, e.g. human or simian adenoviruses
- C12N2710/10333—Use of viral protein as therapeutic agent other than vaccine, e.g. apoptosis inducing or anti-inflammatory
Abstract
Description
本願は、その全体において全ての目的のために参照により本明細書に援用される、2010年7月8日に出願された発明の名称が「非アルコール性脂肪肝疾患の予防および治療のためのアデノウイルスAd36 E4orf1タンパク質」である米国仮特許出願第61/362,443号の利益を主張する。
本発明の開発は、助成金番号R01 DK066164の国立衛生研究所からの助成金の下で、一部、政府により資金提供された。政府は本発明に対して一定の権利を有する。
肝臓は、脂肪代謝において主な役割を有し、通常、「正常レベル」までのみであるが脂質(脂肪)を蓄積する。肝細胞中の過剰な脂質の蓄積は、代謝的に有害であり、β酸化の低下またはリポタンパクの分泌の低下などの種々の肝機能障害により生じ得、肝臓脂質症を引き起こす。肝臓の多くの機能のうち別のものは、グルコースを循環(circulation)中に放出することである。健常個体においては、肝臓細胞は、血糖レベルを調節するためにグルコースを規則的に放出する。対照的に、糖尿病を有する個体においては、肝臓細胞は、グルコースを制御できずに放出し、血糖レベルが上昇する。そのため、肝臓細胞(肝細胞)からのグルコースの放出を低減することは、糖尿病の制御に非常に有効であり得る。
本発明は、Ad36感染は、肝臓病理および肝機能障害の発生率の低下に関連するという発見、ならびにAd36 E4orf1タンパク質は、遺伝子発現および生化学的経路を改変するために使用でき、肝機能の改善をもたらすというの発見に関する。
概観
本発明は、Ad36感染は、肝臓病理および肝機能不全の発生率の低下に関連するという発見、ならびにAd36 E4orf1タンパク質は、遺伝子発現および生化学的経路を改変するために使用でき、肝機能の改善をもたらすというの発見に関する。これらの発見に基づいて、非アルコール性脂肪肝疾患(NAFLD)は、Ad36または単離されたAd36 E4orf1タンパク質もしくは組換えAd36 E4orf1タンパク質を個体に投与することにより、治療または、さらには予防され得る。NAFLDは、高頻度にNASHへと進行するために、NAFLDの病理学的プロセスを治療または低減することにより、NASHへの進行を低減または予防し得ることが当該技術分野において周知である。したがって、本発明はまた、NASHを低減または予防するための方法を含む。多くのウイルスは重大な肝臓損傷を引き起こすが(25、26)、Ad36およびAd36 E4orf1は、驚くべきことに、多数の代謝経路を好ましく調節することにより肝臓を保護し、それにより、肝臓脂肪症および肝機能に対して有益な効果を有する。
本発明は、NAFLDを治療または予防し、肝臓からの過剰な脂質を低減し、血糖コントロールを改善し、肝機能障害を治療または予防するための治療方法を提供する。
本発明に従って投与されるAd36組成物は、種々の形態を有し得る。好ましくは、該組成物は、E4orf1またはその機能的バリアントを含む。例えば、Ad36組成物は、Ad36ウイルスまたは弱毒化されたバリアントであり得るか、あるいは熱殺傷もしくは漂白殺傷されたAd36または複製欠損組換えAd36などのAd36の不活性化された形態であり得る。Ad36組成物は、単離されたかまたは組換えのAd36タンパク質、好ましくはE4orf1タンパク質またはその機能的バリアントを含み得る。Ad36組成物は、E4orf1タンパク質またはその機能的バリアントをコードする核酸を含み得る。Ad36組成物は、E4orf1タンパク質のアナログ、例えば化学アナログまたは構造アナログを含み得る。
Ad36組成物は、単離されたかまたは組換えのAd36タンパク質、好ましくはE4orf1タンパク質またはその機能的バリアントを含み得る。
Ad36組成物は、Ad36のタンパク質、好ましくはE4orf1タンパク質またはその機能的バリアントをコードする単離されたまたは組換えの核酸またはベクターを含み得る。
必ずしも限定されないが、非経口(例えば、静脈内、動脈内、筋内、皮下の注入)、経口(例えば食餌)、局所、吸入(例えば、気管支内、鼻腔内または経口の吸入、点鼻薬)または経直腸を含む種々の投与経路が可能である。
Ad-36 E4 orf 1 DNA配列(配列番号:1)
本明細書に開示される試験の結果により、ヒトにおけるAd36感染と、より低い肝臓脂質レベルおよびより良好な血糖コントロールの間に関連があることが明らかとなった。結果はまた、Ad36 E4orf1タンパク質は、Ad36ウイルスの保護効果のメディエーターであること、ならびに該効果はアディポネクチンを含むいくつかの遺伝子の発現およびGlut2アバンダンスを改変することにより媒介される可能性があることを立証する。したがって、本明細書に開示されるこれらの試験は、Ad36、Ad36 E4orf1およびそれらの機能的バリアントは、NAFLDを治療または予防するため、哺乳動物の肝臓から過剰な脂肪を低減するため、血糖コントロールを改善するためおよび肝機能障害を治療または予防するために使用され得ることを示す。
ウイルス調製. Ad-36は、American Type Culture collection (ATCC Cat# VR913)から得られ、以前に記載され、使用されたように(45、44)、プラークが精製され、A549細胞(ヒト肺癌細胞株)中で増殖された。Ad-2もATCC (Cat #VR846)から得られ、A549細胞中で増殖された。ウイルス力価は、プラークアッセイ(45)および接種により決定され、プラーク形成単位(PFU)として表された。
グルコース: それぞれのマウス由来の2μLの血清は、Raichemグルコースオキシダーゼ法(R80038)を使用して、96ウェルプレート形式で測定した。500nmで吸光度を読んだ。インスリン: 超高感度マウスインスリンELISAキット(Ultra-sensitive mouse insulin ELISA kit)(Crystal Chem, # 90090)を使用してインスリンを測定した。Cardiochek脂質パネル試験片を使用してトリグリセリドを測定した。
抗体力価:
血清中の中和抗体の存在は、詳細に記載されるように(92)、中和抗体を決定するための高感度、特異的かつ黄金標準アッセイである「一定ウイルス減少血清(constant virus-decreasing serum)」法により決定した。簡潔に、熱不活性化試験血清を、96ウェルプレート中で1:2から1:512に連続希釈(2倍)した。それぞれのアデノウイルス作業ストックの全部で100TCID-50(50%組織培養感染量)をウェルのそれぞれに添加して、次いで37℃で1時間のインキュベーション後にA549細胞を添加した。それぞれの試験血清は、2重で行った(run)。血清対照(血清および細胞あり、ウイルスなし)、細胞対照(細胞のみ、ウイルスなし、血清なし)およびウイルス対照(細胞およびウイルスあり、血清なし)をそれぞれのアッセイに含ませた。プレートを37℃で13日間インキュベートして、CPE(細胞変性効果)の存在に注意した。1:8以上の希釈度におけるCPEなしの血清試料は、それぞれのウイルスに対する中和抗体の存在について陽性とみなし、該ウイルスでの感染前の証拠とした。1:8未満の力価を有する試料は、ウイルス抗体の存在について陰性とみなした。クオリティーチェックとして、それぞれのアッセイでウイルス逆滴定を行なった。
DNA単離: QIAMP DNA miniキット(# 51306)を使用してDNAを単離した。Ad36、Ad2のE4遺伝子についておよびマウスβアクチンについてもプライマーを設計した。PCRによりDNAを増幅した。プライマー配列は以下の通りである:
Ad36リバースプライマー: 5'-TCACTCTCAGCAGCAGCAGG-3';
Ad2フォワードプライマー: 5'-CCTAGGCAGGAGGGTTTTTC-3'、
Ad2リバースプライマー: 5'-ATAGCCCGGGGGAATACATA-3'
マウスβアクチンフォワードプライマー: 5'-GATCTTCATGGTGCTAGGAG-3'、
マウスβアクチンリバースプライマー: 5'-ACGTTGACATCCGTAAAGAC-3'。
16時間の絶食後、意識のあるマウスにDグルコース(2.5mg/体重g)を腹腔内注射した。グルコース注射(時間0)前、および注射の10、20、30、60、120および150分後に尾静脈から血液を採取した。グルコース測定器(glucometer) (Contour, Bayer)を使用して血糖を測定した。
免疫沈降: IR、IRS1およびIRS2の免疫沈降のために、組織試料を50mM HEPES (pH7.4)、2mMオルトバナジン酸ナトリウム、10mMフッ化ナトリウム、2mM EDTA、1% NP-40、0.25%デオキシコール酸ナトリウムおよびプロテアーゼインヒビターを含むバッファ中でホモジナイズした。次いで、ホモジネート(250μg)を3μgの一次抗体と共に免疫沈降させた。4〜20%勾配ゲルを使用して試料をSDS-PAGEに供し、PVDF膜に転写した。膜を抗リン抗体で免疫ブロットした。リン酸化-tyr-1322-IR-β(Millipore, # 04-300)および全IR-β受容体(Millipore, # 05-1104)、全IRS1 (Santacruz, # Sc-559)およびpIRS1-(tyr-989) (Santacruz, # Sc-17200)、pIRS1-(ser307) (Cell signaling, # 2381)、(Milipore, # 06-506)のIRS2および(Santacruz, # Sc-17195-R)のp-IRS2 (tyr-612)に対する抗体を使用した。
Ad36、Ad2およびmock感染した高脂肪食を与えたマウスのそれぞれからの3匹のマウスならびに対照として報告されるような(41)mock感染の食餌を与えた1匹のマウスの瞬間的に凍結した(flash frozen)肝臓試料に対してグリコーゲン染色を行なった。組織試料を、OCT封入培地に包埋し、8umの厚さにスライスした。過ヨウ素酸-シッフ染色(PAS)を使用してグリコーゲンを染色した。グリコーゲンの保存を高め、流動アーティファクト(streaming artifact)を防ぐことを補助するために、肝臓試料をカルノワ固定液(6部のエタノール、3部のクロロホルムおよび1部の氷酢酸)中、4℃で10分間固定した。固定の際、切片を蒸留水で数回すすいで洗浄し、次いで1%過ヨウ素酸溶液中、5分間室温でインキュベートした。蒸留水で洗浄後、シッフ試薬を添加して、11分間インキュベートした。全てのスライドを、冷却した流しっぱなしの水道水で10分間すすいだ。スライドを風乾して、パーマウント(permount)を使用してカバーガラスをかけた。グリコーゲンの染色は、切片にマゼンタ色を呈し、より濃い染色はより多くのグリコーゲンを示す。
Ad36およびヒト
4のコホートからの血清試料を、過去の感染の指示物質(indicator)としてのAd36抗体についてスクリーニングした。コホートは、A)HERITAGE家系研究(49)(n=671、白人および黒人の男性および女性)B)PBRC(ペニントンバイオメディカルリサーチセンター)研究(206人の白人および黒人の男性および女性)、C)MET研究(50、51)(n=45、思春期前の白人および黒人の男児および女児)、D)VIVA LA FAMILIA研究(52)(585人のヒスパニックの男児および女児)であった。Ad36抗体の広がり(prevalence)は、HERITAGE研究、PBRC研究、MET研究およびViva La Familia研究それぞれにおいて、13%、18%、22%および7%であった。より良い血糖コントロール(glycemic control)の種々の測定(インスリン感受性指数またはインスリンディスポジションインデックス(disposition index)を含む)が、年齢、性別、人種および肥満に関係なく、これらのコホートにおいて、Ad36感染と有意に関連した(例えば、表1および2は、PBRCおよびMETコホートを示す)。重要なことには、Ad36とより良い血糖コントロールの関連は、1500人を超える個体の種々の年齢群および人種のこれらのコホートにわたって、一貫して顕著であった。これらのデータは、Ad36感染がヒトにおいて血糖コントロールを改善し得ることを示唆した。
Ad36は食餌を与えたマウスにおいてインスリン感受性を改善する
年齢、体重および体脂肪を合わせた雌性C57BL/6JマウスにMockを感染させるか、Ad36もしくはAd2を感染させ、標準的な食餌で維持した。4週齢雌性C57B6/6Jマウスを、The Jackson Laboratories (Bar Harbour, Maine, USA)から購入した。1週間の馴化の後、総体脂肪を、Brucker Minispec mq10 NMR (Nuclear Magnetic Resonance)アナライザーにより測定した。マウスを、体重および体脂肪を合わせた3つの群に分割し、Ad36(N=3)もしくはAd2(対照として使用された一般的なヒトアデノウイルス;N=4)の107PFUを、鼻内的、経口的および腹腔内的に植え付けたか、または組織培養培地でmock感染させた(n=6)。マウスは、25℃で12時間の明暗サイクルにあり、1つの部屋にバイオセイフティーレベル2の封じ込め下で、マイクロアイソレーターケージに収容し、水および齧歯類の食餌(chow)(Purian LabDiet 5001)に自由にアクセスできるようにした。
Ad36は高脂肪の食餌を与えたマウスの高血糖を改善する
この実験は、Ad36が、食餌誘導性高血糖を引き起こす高脂肪(HF、60kcal%)の食餌を用いて糖尿病性になったマウスにおいて同様の効果を有するかどうかを調査した。
Ad36は脂肪組織の代謝プロフィールのマーカーを改善する
ウェスタンブロットを、上記するように、感染後20週の自由に食餌を与えた状態で屠殺されたHFの食餌を与えたマウスからの脂肪組織タンパク質を使用してs実施した(3匹マウス/群)。GAPDHを、ローディング(loading)対照として使用した。Ad36は、より多いAKTリン酸化、ならびにGlut4およびGlut1のより多いアバンダンスによって示されるように、PI3K経路および下流のグルコース取込みをアップレギュレートするようである。感染に応答して、Ad2群中の脂肪組織は、Mock群に比べてより多いマクロファージ浸潤を有したが(P<.05)、Ad36群では有さなかった。重要なことには、Ad36群は、重要なインスリン感作物質およびグルコース取込みの促進因子(53)および肝臓脂肪症の保護物質(54)(55)である、アディポネクチンの有意により多いアバンダンスを有した(図4)。アディポネクチンは、より高い分子量(MW)形態、中程度の分子量形態およびより低い分子量形態で存在するが、より高いMW形態が、インスリン感受性と最も強く関連する(56、57)。Ad36は、HFの食餌を与えたマウスの脂肪組織中の全ての形態のアディポネクチンのレベルを有意に増大させた(図7B)。Ad36によるアディポネクチンのアップレギュレーションは、Ad36で感染されたヒト脂肪組織の外植片中の有意により多いアディポネクチンのmRNAおよびタンパク質のアバンダンスを含め、一貫して観察された(12)。これらの変化は、包括的に、Ad36が、脂肪組織の代謝の質を改善することを示す。アディポネクチンの強い肝臓効果(54、55)を考慮すると、アディポネクチンは、Ad36の抗脂肪症効果の重要なメディエーターであると信じられる。
Ad36は脂肪症を低減し、肝臓中の代謝プロフィールを改善する
HFの食餌を与えたマウスの肝臓切片は、標準的な食餌を与えたマウスより、少ないグリコーゲンおよびより多い脂質を示した(図6A)。HFの食餌を与えたマウスの中で、Ad36感染マウスの肝臓は、Mock群に比べて増加したグリコーゲンおよび低下した脂質含有量によって示されるように、HFの食餌の有害な効果からのより高い保護を示した(図6A)(p<.02)。Ad36群の肝臓中のより低いGlut2アバンダンスおよびグルコース−6−ホスファターゼ(G6Pase)(図8)により、肝臓グルコース放出の減少が示唆され、これは、次いで、より良好な血糖コントロールに寄与するかもしれない。Ad36の肝臓は、脂肪症に対して肝臓を保護するためのアディポネクチンの公知の標的である、AMPKリン酸化がより多いことを示したが、Ad2群ではそうではなかった(54)。
体重損失なしに肝臓脂肪症を低減するためのAd36 E4orf1
別個の実験において、HepG2細胞またはマウス一次肝細胞を、E4orf1または空のpcDNAベクターでトランスフェクトした。HepG2細胞によるパルミテート酸化およびapoB分泌ならびに一次肝細胞による基礎量の(basal)グルコース産出およびグルカゴン刺激グルコース産出を、感染後48時間に測定した。
E4orf1はPPARγを誘導する
PPARγは、体が脂肪細胞を生成するプロセスである、脂肪生成(adipogenesis)の主なレギュレーターである。Ad36は、PPARγをアップレギュレートし、脂肪生成を誘導し、アディポネクチンを増加させ、血糖コントロールを改善する。この研究は、アディポネクチン発現が、PPARγ誘導または脂肪生成と独立で(uncoupled)あり得るかどうかを調査した。
E4orf1タンパク質はグルコース処理(disposal)を増強する
ドキシサイクリンに応答してE4orf1を誘導的に発現する安定な3T3−L1細胞株(3T3−E4)を、細胞シグナル伝達を研究し、かつAd36が3T3−L1前駆脂肪細胞(preadipocyte)においてグルコース取込みをアップレギュレートするためにE4orf1を必要とするかどうかを試験するために、開発した。mock感染細胞と比較して、Ad36は、基礎量のグルコース取込みを3倍だけ増加させるが、これは、E4orf1がsiRNAを用いてノックダウンされた場合失われた。これは、Ad36が、E4orf1を介してグルコース取込みを増強させることを示す。ヌルベクターを有する細胞と比較して、3T3−E4細胞は、誘導依存性様式で、グルコース取込みを増加した。E4orf1は、Ad36に誘導されるグルコース取込みの必須分子であるRasのアバンダンスおよび活性化を上昇させた。特に、E4orf1は、H−rasアイソフォームを活性化する。従って、E4orf1は、Ad36の抗高血糖効果を、単一のタンパク質にしぼる。
E4orf1は脂肪細胞および肝細胞中のグルコース処理を調節する
別個の実験において、3T3−L1前駆脂肪細胞または脂肪細胞、C2C12筋芽細胞またはHepG2肝細胞を、E4orf1を発現するV−5タグ化プラスミド(pcDNA−V5−AD36−E4orf1)またはヌルベクター(pcDNA−V5−DEST)でトランスフェクトした。
Claims (32)
- 患者に、治療有効量のアデノウイルス−36 E4orf1タンパク質もしくはその機能的バリアント、またはアデノウイルス−36 E4orf1もしくはその機能的バリアントをコードする核酸、またはアデノウイルス−36 E4orf1のアナログを投与する工程を含み、ここで、患者の症状が、前記投与後に改善する、個体における非アルコール性脂肪肝疾患の症状を治療または予防する方法。
- アデノウイルス−36 E4orf1タンパク質が投与され、アデノウイルス−36 E4orf1タンパク質のアミノ酸配列が、配列番号:2またはその機能的バリアントである、請求項1記載の方法。
- アデノウイルス−36 E4orf1タンパク質をコードする核酸が、アデノウイルス−36 E4orf1タンパク質の発現を可能にする様式で、哺乳動物にアデノウイルス−36 E4orf1タンパク質をコードする核酸配列を導入することによって投与される、請求項1記載の方法。
- 核酸配列が、エレクトロポレーション、DEAEデキストラントランスフェクション、リン酸カルシウムトランスフェクション、カチオン性リポソーム融合、プロトプラスト(proptoplast)融合、インビボ電場の形成、DNAコート化微粒子銃(microprojectile bombardment)、組換え複製欠損ウイルスを用いた注入(injection)、相同組換え、インビボ遺伝子治療、エキソビボ遺伝子治療、ウイルスベクター、および裸のDNA転移(naked DNA transfer)からなる群より選択される方法によって導入される、請求項3記載の方法。
- 核酸配列が、配列番号:1またはその機能的バリアントを含む、請求項3記載の方法。
- 前記個体がヒトである、請求項1記載の方法。
- 患者に、治療有効量のアデノウイルス−36 E4orf1タンパク質またはその機能的バリアントを投与する工程を含み、ここで、肝臓中の脂肪は、前記投与の後に低下する、個体の肝臓から過剰な脂肪を低減する方法。
- アデノウイルス−36 E4orf1タンパク質のアミノ酸配列が、配列番号:2またはその機能的バリアントである、請求項7記載の方法。
- アデノウイルス−36 E4orf1タンパク質が、アデノウイルス−36 E4orf1タンパク質の発現を可能にする様式で、哺乳動物にアデノウイルス−36 E4orf1タンパク質をコードする核酸配列を導入することによって投与される、請求項7記載の方法。
- 核酸配列が、エレクトロポレーション、DEAEデキストラントランスフェクション、リン酸カルシウムトランスフェクション、カチオン性リポソーム融合、プロトプラスト(proptoplast)融合、インビボ電場の形成、DNAコート化微粒子銃、組換え複製欠損ウイルスを用いた注入、相同組換え、インビボ遺伝子治療、エキソビボ遺伝子治療、ウイルスベクター、および裸のDNA転移からなる群より選択される方法によって導入される、請求項9記載の方法。
- 核酸配列が、配列番号:1またはその機能的バリアントを含む、請求項9記載の方法。
- 前記個体がヒトである、請求項7記載の方法。
- 患者に、治療有効量のAd36 E4orf1タンパク質またはその機能的バリアントを投与する工程を含み、ここで、インスリン感受性が、前記投与の後に上昇する、個体において血糖コントロールを改善する方法。
- アデノウイルス−36 E4orf1タンパク質が投与され、アデノウイルス−36 E4orf1タンパク質のアミノ酸配列が、配列番号:2またはその機能的バリアントである、請求項13記載の方法。
- アデノウイルス−36 E4orf1タンパク質をコードする核酸が、アデノウイルス−36 E4orf1タンパク質の発現を可能にする様式で、哺乳動物にアデノウイルス−36 E4orf1タンパク質をコードする核酸配列を導入することによって投与される、請求項13記載の方法。
- 核酸配列が、エレクトロポレーション、DEAEデキストラントランスフェクション、リン酸カルシウムトランスフェクション、カチオン性リポソーム融合、プロトプラスト(proptoplast)融合、インビボ電場の形成、DNAコート化微粒子銃、組換え複製欠損ウイルスを用いた注入、相同組換え、インビボ遺伝子治療、エキソビボ遺伝子治療、ウイルスベクター、および裸のDNA転移からなる群より選択される方法によって導入される、請求項15記載の方法。
- 核酸配列が、配列番号:1またはその機能的バリアントを含む、請求項15記載の方法。
- 前記個体がヒトである、請求項13記載の方法。
- 患者に、治療有効量のAd36 E4orf1タンパク質またはその機能的バリアントを投与する工程を含み、ここで、肝臓脂肪蓄積が前記投与の後に改善される、脂肪肝およびインスリン抵抗性を特徴とする肝機能不全を治療または予防する方法。
- 前記肝臓脂肪蓄積の改善が、脂質酸化の増大または肝臓からの脂質の輸送の増大を特徴とする、請求項19記載の方法。
- アデノウイルス−36 E4orf1タンパク質が投与され、アデノウイルス−36 E4orf1タンパク質のアミノ酸配列が、配列番号:2またはその機能的バリアントである、請求項19記載の方法。
- アデノウイルス−36 E4orf1タンパク質をコードする核酸が、アデノウイルス−36 E4orf1タンパク質の発現を可能にする様式で、哺乳動物にアデノウイルス−36 E4orf1タンパク質をコードする核酸配列を導入することによって投与される、請求項19記載の方法。
- 核酸配列が、エレクトロポレーション、DEAEデキストラントランスフェクション、リン酸カルシウムトランスフェクション、カチオン性リポソーム融合、プロトプラスト(proptoplast)融合、インビボ電場の形成、DNAコート化微粒子銃、組換え複製欠損ウイルスを用いた注入、相同組換え、インビボ遺伝子治療、エキソビボ遺伝子治療、ウイルスベクター、および裸のDNA転移からなる群より選択される方法によって導入される、請求項22記載の方法。
- 核酸配列が、配列番号:1またはその機能的バリアントを含む、請求項22記載の方法。
- 前記個体がヒトである、請求項19記載の方法。
- 患者に、治療有効量のAd36 E4orf1タンパク質またはその機能的バリアントを投与する工程を含み、ここで、非アルコール性脂肪性肝炎(NASH)の発生が低減または予防される、NASHを低減または予防する方法。
- 肝機能障害に由来する高血糖が、個体において低減される、請求項26記載の方法。
- アデノウイルス−36 E4orf1タンパク質が投与され、アデノウイルス−36 E4orf1タンパク質のアミノ酸配列が、配列番号:2またはその機能的バリアントである、請求項26記載の方法。
- アデノウイルス−36 E4orf1タンパク質をコードする核酸が、アデノウイルス−36 E4orf1タンパク質の発現を可能にする様式で、哺乳動物にアデノウイルス−36 E4orf1タンパク質をコードする核酸配列を導入することによって投与される、請求項26記載の方法。
- 核酸配列が、エレクトロポレーション、DEAEデキストラントランスフェクション、リン酸カルシウムトランスフェクション、カチオン性リポソーム融合、プロトプラスト(proptoplast)融合、インビボ電場の形成、DNAコート化微粒子銃、組換え複製欠損ウイルスを用いた注入、相同組換え、インビボ遺伝子治療、エキソビボ遺伝子治療、ウイルスベクター、および裸のDNA転移からなる群より選択される方法によって導入される、請求項28記載の方法。
- 核酸配列が、配列番号:1またはその機能的バリアントを含む、請求項28記載の方法。
- 前記個体がヒトである、請求項26記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US36244310P | 2010-07-08 | 2010-07-08 | |
US61/362,443 | 2010-07-08 | ||
PCT/US2011/043338 WO2012006512A1 (en) | 2010-07-08 | 2011-07-08 | Adenovirus ad36 e4orf1 protein for prevention and treatment of non-alcoholic fatty liver disease |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2013531681A true JP2013531681A (ja) | 2013-08-08 |
JP2013531681A5 JP2013531681A5 (ja) | 2014-08-21 |
JP5965397B2 JP5965397B2 (ja) | 2016-08-03 |
Family
ID=44629893
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2013518858A Expired - Fee Related JP5965397B2 (ja) | 2010-07-08 | 2011-07-08 | 非アルコール性脂肪肝疾患の予防および治療のためのアデノウイルスad36e4orf1タンパク質 |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US8951980B2 (ja) |
EP (1) | EP2590665B1 (ja) |
JP (1) | JP5965397B2 (ja) |
KR (1) | KR101831638B1 (ja) |
CN (1) | CN103052397B (ja) |
AU (1) | AU2011274537B9 (ja) |
CA (1) | CA2803787C (ja) |
ES (1) | ES2550962T3 (ja) |
HK (1) | HK1185261A1 (ja) |
NZ (1) | NZ606236A (ja) |
TW (1) | TWI531650B (ja) |
WO (1) | WO2012006512A1 (ja) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ES2618374T3 (es) | 2012-10-17 | 2017-06-21 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College | Composiciones y métodos para mejorar la absorción de glucosa |
US9354963B2 (en) * | 2014-02-26 | 2016-05-31 | Microsoft Technology Licensing, Llc | Service metric analysis from structured logging schema of usage data |
WO2015164312A1 (en) | 2014-04-23 | 2015-10-29 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College | SMALL MOLECULE ANALOGS OF E4orf1 |
GB201910299D0 (en) * | 2019-07-18 | 2019-09-04 | Aouadi Myriam | Medical uses, methods and uses |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2006082978A1 (ja) * | 2005-02-07 | 2006-08-10 | Ajinomoto Co., Inc. | アディポネクチンの分泌促進または誘導作用を有するアシルアミド化合物 |
WO2007064836A1 (en) * | 2005-11-30 | 2007-06-07 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College | Adenovirus 36 e4 orf 1 gene and protein and their uses |
JP2008509411A (ja) * | 2004-08-12 | 2008-03-27 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲー | 肝線維症の診断方法 |
JP2008273938A (ja) * | 2007-03-30 | 2008-11-13 | Shiseido Co Ltd | アディポネクチン産生促進剤 |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20060045919A1 (en) | 2004-08-27 | 2006-03-02 | Samueli Institute | Homeopathic compositions and methods for the treatment of cancer |
EP1977009B1 (en) * | 2005-12-27 | 2016-08-17 | Obetech, LLC | Adipogenic adenoviruses as a biomarker for disease |
-
2011
- 2011-07-08 JP JP2013518858A patent/JP5965397B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2011-07-08 WO PCT/US2011/043338 patent/WO2012006512A1/en active Application Filing
- 2011-07-08 ES ES11741354.2T patent/ES2550962T3/es active Active
- 2011-07-08 CA CA2803787A patent/CA2803787C/en not_active Expired - Fee Related
- 2011-07-08 CN CN201180033866.7A patent/CN103052397B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2011-07-08 NZ NZ606236A patent/NZ606236A/en not_active IP Right Cessation
- 2011-07-08 AU AU2011274537A patent/AU2011274537B9/en not_active Ceased
- 2011-07-08 TW TW100124173A patent/TWI531650B/zh not_active IP Right Cessation
- 2011-07-08 EP EP11741354.2A patent/EP2590665B1/en not_active Not-in-force
- 2011-07-08 US US13/178,986 patent/US8951980B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2011-07-08 KR KR1020137001869A patent/KR101831638B1/ko active IP Right Grant
-
2013
- 2013-11-12 HK HK13112652.9A patent/HK1185261A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2015
- 2015-01-06 US US14/590,262 patent/US20170340699A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008509411A (ja) * | 2004-08-12 | 2008-03-27 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲー | 肝線維症の診断方法 |
WO2006082978A1 (ja) * | 2005-02-07 | 2006-08-10 | Ajinomoto Co., Inc. | アディポネクチンの分泌促進または誘導作用を有するアシルアミド化合物 |
WO2007064836A1 (en) * | 2005-11-30 | 2007-06-07 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College | Adenovirus 36 e4 orf 1 gene and protein and their uses |
JP2008273938A (ja) * | 2007-03-30 | 2008-11-13 | Shiseido Co Ltd | アディポネクチン産生促進剤 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
JPN6015027448; Trovato, G. M. et al., , Liver Int.: 'Ad36 adipogenic adenovirus in human non-alcoholic fatty liver disease.' Liver Int. 30(2), 201002, pp. 184-190. * |
JPN6015027449; Atkinson, R. L. et al.: 'Human adenovirus-36 and non-alcoholic fatty liver disease.' Liver Int. 30(2), 201002, pp. 164-165. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20120027845A1 (en) | 2012-02-02 |
AU2011274537B9 (en) | 2017-02-23 |
AU2011274537A1 (en) | 2013-02-14 |
CA2803787C (en) | 2018-12-04 |
EP2590665A1 (en) | 2013-05-15 |
CA2803787A1 (en) | 2012-01-12 |
US8951980B2 (en) | 2015-02-10 |
CN103052397A (zh) | 2013-04-17 |
WO2012006512A1 (en) | 2012-01-12 |
EP2590665B1 (en) | 2015-09-16 |
AU2011274537B2 (en) | 2016-12-15 |
US20170340699A1 (en) | 2017-11-30 |
TWI531650B (zh) | 2016-05-01 |
NZ606236A (en) | 2014-09-26 |
JP5965397B2 (ja) | 2016-08-03 |
TW201217529A (en) | 2012-05-01 |
KR101831638B1 (ko) | 2018-02-23 |
HK1185261A1 (en) | 2014-02-14 |
ES2550962T3 (es) | 2015-11-13 |
CN103052397B (zh) | 2017-09-19 |
KR20130100262A (ko) | 2013-09-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Liao et al. | Myricetin possesses potential protective effects on diabetic cardiomyopathy through inhibiting IκBα/NFκB and enhancing Nrf2/HO-1 | |
Tomita et al. | Hepatic AdipoR2 signaling plays a protective role against progression of nonalcoholic steatohepatitis in mice | |
Shore et al. | Adiponectin attenuates allergen-induced airway inflammation and hyperresponsiveness in mice | |
Guo et al. | Cystathionine γ‐lyase deficiency aggravates obesity‐related insulin resistance via FoxO1‐dependent hepatic gluconeogenesis | |
ES2307729T3 (es) | Modulacion de un perfil lipidico con esteroides y agonistas de ppar alfa. | |
JP5965397B2 (ja) | 非アルコール性脂肪肝疾患の予防および治療のためのアデノウイルスad36e4orf1タンパク質 | |
Wan et al. | PGC1α protects against hepatic steatosis and insulin resistance via enhancing IL10‐mediated anti‐inflammatory response | |
US9937173B2 (en) | Method of treating obesity | |
Zilu et al. | Effects of XIAP on high fat diet-induced hepatic steatosis: a mechanism involving NLRP3 inflammasome and oxidative stress | |
US8058014B2 (en) | Method of diagnosing or predicting disease states in a subject using omentin 1 and omentin 2 | |
US20230012209A1 (en) | Methods of preventing or treating parkinson's disease by the farnesylation of paris | |
Malhotra et al. | Inhibition of p66ShcA redox activity in cardiac muscle cells attenuates hyperglycemia-induced oxidative stress and apoptosis | |
WO2015157500A1 (en) | Class iia hdac inhibitors for the treatment of infection | |
WO2011057331A1 (en) | A method for treating obesity | |
US10729634B2 (en) | Sex hormone-binding globulin for use as a medicament | |
US11752131B2 (en) | Methods and pharmaceutical compositions for the treatment of obesity | |
WO2011115106A1 (ja) | 擬似運動療法のための医薬 | |
WO2024036044A1 (en) | Compositions and methods for treating and preventing metabolic disorders | |
AU2013209580B2 (en) | Enhanced glycemic control using Ad36E4orf1 and AKT1 inhibitor | |
Tuvdendorj et al. | Metabolic consequences of ENPP1 over-expression in adipose tissue | |
MORTUZA et al. | INTEGRATED PHYSIOLOGY—INSULIN SECRETION IN VIVO | |
WO2016145532A1 (en) | Cmpf for the treatment or prevention of hepatic steatosis |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140702 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20140702 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20150629 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20150707 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20151006 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20151109 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20151222 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20160318 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20160609 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20160701 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5965397 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |