JP2013518606A - 新規使用 - Google Patents
新規使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2013518606A JP2013518606A JP2012552935A JP2012552935A JP2013518606A JP 2013518606 A JP2013518606 A JP 2013518606A JP 2012552935 A JP2012552935 A JP 2012552935A JP 2012552935 A JP2012552935 A JP 2012552935A JP 2013518606 A JP2013518606 A JP 2013518606A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- seq
- antibody
- leu
- val
- cdr
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
- C07K16/244—Interleukins [IL]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/06—Antigout agents, e.g. antihyperuricemic or uricosuric agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
Abstract
Description
LATELRSQSLQTLQG 配列番号89
SAKELRSQSIKTYSK 配列番号90
LRELRSVSLQTTQG 配列番号91
SPGPHSAQTEVIAT 配列番号92
ESGPHSANTEIIVK 配列番号93
a.完全フロイントアジュバント(cFA)中におけるヒトのIL−8、Gro−アルファ、Gro−ベータ、Gro−ガンマ、及びENA−78の混合物をマウスに注射する工程と、
b.不完全フロイントアジュバント(iFA)中におけるヒトのIL−8、Gro−アルファ、Gro−ベータ、Gro−ガンマ、及びENA−78の混合物を前記マウスに注射する工程と、
c.不完全フロイントアジュバント中におけるヒトのIL−8、Gro−アルファ、Gro−ベータ、Gro−ガンマ、及びENA−78の混合物並びに各MAPユニットが配列番号89〜93のポリペプチドに由来する1つの個別の配列を有する5つの多重抗原性ペプチド(MAP)のセットを前記マウスに注射する工程と、
d.前記マウスからB細胞を単離する工程と、
e.前記B細胞を骨髄細胞と融合させて、望ましい抗体を分泌する不死ハイブリドーマ細胞を形成する工程と、
f.前記ハイブリドーマの培養上清から抗体を単離する工程。
a.完全フロイントアジュバント中における各MAPユニットが配列番号89〜93のポリペプチドに由来する1つの個別の配列を有する5つの多重抗原性ペプチド(MAP)のセット(以下MAPセットとも称する)をマウスに注射する工程と、
b.不完全フロイントアジュバント中における前記MAPセットを前記マウスに注射する工程と、
c.不完全フロイントアジュバント中におけるヒトのIL−8、Gro−アルファ、Gro−ベータ、Gro−ガンマ、及びENA−78の全ての混合物、並びに前記MAPセットを前記マウスに注射する工程と、
d.前記マウスからB細胞を単離する工程と、
e.前記B細胞を骨髄細胞と融合させて、望ましい抗体を分泌する不死ハイブリドーマ細胞を形成する工程と、
f.前記ハイブリドーマの培養上清から抗体を単離する工程。
a.完全フロイントアジュバント中におけるヒト組換え精製ケモカイン(ヒトのIL−8、Gro−アルファ、Gro−ベータ、Gro−ガンマ、及びENA−78)のカクテルをマウスに注射する工程と、
b.不完全フロイントアジュバント中における前記ケモカインのカクテルを前記マウスに注射する工程と、
c.前記マウスからB細胞を単離する工程と、
d.前記B細胞を骨髄細胞と融合させて、望ましい抗体を分泌する不死ハイブリドーマ細胞を形成する工程と、
e.前記ハイブリドーマの培養上清から抗体を単離する工程。
i)Tyr32が、Ile、His、Phe、Thr、Asn、Cys、Glu若しくはAspに置換されている及び/又はGly33が、Tyr、Ala、Trp、Thr、Leu若しくはValに置換されている及び/又はMet34が、Ile、Val、若しくはTrpに置換されている及び/又はSer35が、His、Glu、Asn、Gln、Try若しくはThrに置換されている配列番号23記載のCDRH1又は配列番号23の変異体、
ii)Trp50が、Arg、Glu、Tyr、Gly、Gln、Val、Leu、Asn、Lys若しくはAlaに置換されている及び/又はIle51が、Leu、Val、Thr、Ser若しくはAsnに置換されている及び/又はAsn52が、Asp、Leu、Ser若しくはTyrに置換されている及び/又はTyr53が、Ala、Gly、Ser、Lys、Thr若しくはAsnに置換されている及び/又はSer54が、Asn、Thr、Lys、Asp若しくはGlyに置換されている及び/又はVal56が、Tyr、Arg、Glu、Asp、Gly、Ser若しくはAlaに置換されている及び/又はThr58が、Lys、Asn、Ser、Asp、Arg、Gly、Phe若しくはTyrに置換されている配列番号24記載のCDRH2又は配列番号24の変異体、
iii)Val102が、Tyr、His、Ile、Ser、Asp又はGlyに置換されている配列番号25記載のCDRH3又は配列番号25の変異体、
iv)Asn28が、Ser、Asp、Thr若しくはGluに置換されている及び/又はIle29が、Valに置換されている及び/又はTyr30が、Asp、Leu、Val、Ile、Ser、Asn、Phe、His、Gly若しくはThrに置換されている及び/又はSer31が、Asn、Thr、Lys若しくはGlyに置換されている及び/又はAsn32が、Phe、Tyr、Ala、His、Ser若しくはArgに置換されている及び/又はLeu33が、Met、Val、Ile若しくはPheに置換されている及び/又はAla34が、Gly、Asn、Ser、His、Val若しくはPheに置換されている配列番号26記載のCDRL1又は配列番号26の変異体、
v)Ala51が、Thr、Gly又はValに置換されている配列番号27記載のCDRL2又は配列番号27の変異体、並びに
vi)Gln89が、Ser、Gly、Phe若しくはLeuに置換されている及び/又はHis90が、Gln若しくはAsnに置換されており、Phe91が、Asn、Gly、Ser、Arg、Asp、His、Thr、Tyr又はValに置換されている及び/又はTrp92が、Asn、Tyr、Thr、Ser、Arg、Gln、His、Ala若しくはAspに置換されている及び/又はThr93が、Glu、Asn、Gly、His、Ser、Arg若しくはAlaに置換されている及び/又はThr94が、Asp、Tyr、Val、Leu、His、Asn、Ile、Trp、Pro若しくはSerに置換されている及び/又はTrp96が、Pro、Leu、Tyr、Arg、Ile若しくはPheに置換されている配列番号28記載のCDRL3又は配列番号28の変異体。
i)配列番号23記載のCDRH1、
ii)配列番号24記載のCDRH2、
iii)配列番号25記載のCDRH3、
iv)配列番号26記載のCDRL1、
v)配列番号27記載のCDRL2、
vi)配列番号28記載のCDRL3、
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Val、Ile又はGly
位置4 Leu又はVal
位置20 Leu、Ile、Met又はVal
位置22 Cys
位置24 Thr、Ala、Val、Gly又はSer
位置26 Gly
位置29 Ile、Phe、Leu又はSer
位置36 Trp
位置47 Trp又はTyr
位置48 Ile、Met、Val又はLeu
位置69 Ile、Leu、Phe、Met又はVal
位置71 Val、Ala又はLeu
位置78 Ala、Leu、Val、Tyr又はPhe
位置80 Leu又はMet、
位置90 Tyr又はPhe
位置92 Cys
位置94 Arg、Lys、Gly、Ser、His又はAsn、及び
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Ile、Leu又はVal
位置3 Val、Gln、Leu又はGlu
位置4 Met又はLeu
位置23 Cys
位置35 Trp
位置36 Tyr、Leu又はPhe
位置46 Leu、Arg又はVal
位置49 Tyr、His、Phe又はLys
位置71 Tyr又はPhe
位置88 Cys
位置98 Phe。
i)配列番号25記載のCDRH3、
ii)配列番号23記載のCDRH1、
iii)配列番号24記載のCDRH2、
iv)配列番号26記載のCDRL1、
v)配列番号27記載のCDRL2、
vi)配列番号28記載のCDRL3、
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Ile
位置4 Leu
位置20 Ile
位置22 Cys
位置24 Ala
位置26 Gly
位置29 Phe
位置36 Trp
位置47 Trp
位置48 Met
位置69 Phe
位置71 Leu
位置78 Ala
位置80 Leu
位置90 Tyr
位置92 Cys
位置94 Arg、及び
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Ile
位置3 Gln
位置4 Met
位置23 Cys
位置35 Trp
位置36 Tyr
位置46 Leu
位置49 Tyr
位置71 Tyr
位置88 Cys
位置98 Phe。
(i)配列番号23、24、及び25のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン重鎖の可変ドメインを少なくともコードする第1のDNA配列と、配列番号26、27、及び28のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン軽鎖の可変ドメインを少なくともコードする第2のDNA配列とにより前記単一の宿主細胞を形質転換する工程と、
(ii)前記形質転換された単一の宿主細胞において前記免疫グロブリン重鎖及び軽鎖が別々の分子として産生されるように、前記第1のDNA配列及び第2のDNA配列を発現させる工程と、
を含み、
更に、前記第1及び第2のDNA配列が、異なるベクター中に存在するように実施してもよく、前記第1及び第2のDNA配列が、単一のベクター中に存在するように実施してもよい方法に関する。
i)Tyr32が、Ile、His、Phe、Thr、Asn、Cys、Glu若しくはAspに置換されている及び/又はTry33が、Gly、Ala、Trp、Thr、Leu若しくはValに置換されている及び/又はMet34が、Ile、Val、若しくはTrpに置換されている及び/又はAsn35が、His、Glu、Ser、Gln、Try若しくはThrに置換されている配列番号29記載のCDRH1又は配列番号29の変異体、
ii)Asp50が、Arg、Glu、Trp、Tyr、Gly、Gln、Val、Leu、Asn、Lys若しくはAlaに置換されている及び/又はVal51が、Leu、Ile、Thr、Ser若しくはAsnに置換されている及び/又はAsn52が、Asp、Leu、Ser若しくはTyrに置換されている及び/又はAsp53が、Ala、Gly、Try、Ser、Lys、Thr若しくはAsnに置換されている及び/又はAsp54が、Asn、Thr、Lys、Ser若しくはGlyに置換されている及び/又はAsp56が、Tyr、Arg、Glu、Val、Gly、Ser若しくはAlaに置換されている及び/又はThr58が、Lys、Asn、Ser、Asp、Arg、Gly、Phe若しくはTyrに置換されている配列番号30記載のCDRH2又は配列番号30の変異体、
iii)Val102が、Tyr、His、Ile、Ser、Asp又はGlyに置換されている配列番号31記載のCDRH3又は配列番号32の変異体、
iv)Asp28が、Ser、Asn、Thr若しくはGluに置換されている及び/又はIle29が、Valに置換されている及び/又はArg30が、Try、Asp、Leu、Val、Ile、Ser、Asn、Phe、His、Gly若しくはThrに置換されている及び/又はAsn31が、Ser、Thr、Lys若しくはGlyに置換されている及び/又はTry32が、Phe、Asn、Ala、His、Ser若しくはArgに置換されている及び/又はLeu33が、Met、Val、Ile若しくはPheに置換されている及び/又はAsn34が、Ala、Asn、Ser、His、Val若しくはPheに置換されている配列番号32記載のCDRL1又は配列番号32の変異体、
v)Thr51が、Ala、Gly又はValに置換されている配列番号33記載のCDRL2又は配列番号33の変異体、並びに
vi)Gln89が、Ser、Gly、Phe若しくはLeuに置換されている及び/又はGln90が、His若しくはAsnに置換されており、Ala91が、Asn、Phe、Gly、Ser、Arg、Asp、His、Thr、Tyr又はValに置換されている及び/又はAsn92が、Trp、Tyr、Thr、Ser、Arg、Gln、His、Ala若しくはAspに置換されている及び/又はThr93が、Glu、Asn、Gly、His、Ser、Arg若しくはAlaに置換されている及び/又はLeu94が、Asp、Tyr、Val、Thr、His、Asn、Ile、Trp、Pro若しくはSerに置換されている及び/又はTrp96が、Pro、Leu、Tyr、Arg、Ile若しくはPheに置換されている配列番号34記載のCDRL3又は配列番号34の変異体。
i)配列番号29記載のCDRH1、
ii)配列番号30記載のCDRH2、
iii)配列番号31記載のCDRH3、
iv)配列番号32記載のCDRL1、
v)配列番号33記載のCDRL2、
vi)配列番号34記載のCDRL3、
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Val、Ile又はGly
位置4 Leu又はVal
位置20 Leu、Ile、Met又はVal
位置22 Cys
位置24 Thr、Ala、Val、Gly又はSer
位置26 Gly
位置29 Ile、Phe、Leu又はSer
位置36 Trp
位置47 Trp又はTyr
位置48 Ile、Met、Val又はLeu
位置69 Ile、Leu、Phe、Met又はVal
位置71 Val、Ala又はLeu
位置78 Ala、Leu、Val、Tyr又はPhe
位置80 Leu又はMet、
位置90 Tyr又はPhe
位置92 Cys
位置94 Arg、Lys、Gly、Ser、His又はAsn、及び
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Ile、Leu又はVal
位置3 Val、Gln、Leu又はGlu
位置4 Met又はLeu
位置23 Cys
位置35 Trp
位置36 Tyr、Leu又はPhe
位置46 Leu、Arg又はVal
位置49 Tyr、His、Phe又はLys
位置71 Tyr又はPhe
位置88 Cys
位置98 Phe。
i)配列番号31記載のCDRH3、
ii)配列番号29記載のCDRH1、
iii)配列番号30記載のCDRH2、
iv)配列番号32記載のCDRL1、
v)配列番号33記載のCDRL2、
vi)配列番号34記載のCDRL3、
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Val
位置4 Leu
位置20 Ile
位置22 Cys
位置24 Ala
位置26 Gly
位置29 Phe
位置36 Trp
位置47 Trp
位置48 Ile
位置69 Leu
位置71 Val
位置78 Ala
位置80 Met
位置90 Tyr
位置92 Cys
位置94 Arg、及び
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Ile
位置3 Gln
位置4 Met
位置23 Cys
位置35 Trp
位置36 Phe
位置46 Leu
位置49 Tyr
位置71 Tyr
位置88 Cys
位置98 Phe。
(i)配列番号29、30、及び31のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン重鎖の可変ドメインを少なくともコードする第1のDNA配列と、配列番号32、33、及び34のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン軽鎖の可変ドメインを少なくともコードする第2のDNA配列とにより前記単一の宿主細胞を形質転換する工程と、
(ii)前記形質転換された単一の宿主細胞において前記免疫グロブリン重鎖及び軽鎖が別々の分子として産生されるように、前記第1のDNA配列及び第2のDNA配列を発現させる工程と、
を含み、
更に、前記第1及び第2のDNA配列が、異なるベクター中に存在するように実施してもよく、前記第1及び第2のDNA配列が、単一のベクター中に存在するように実施してもよい方法に関する。
i)Asn32が、Ile、His、Phe、Thr、Tyr、Cys、Glu若しくはAspに置換されている及び/又はAsp33が、Try、Ala、Trp、Gly、Thr、Leu若しくはValに置換されている及び/又はIle34が、Met、Val、若しくはTrpに置換されている及び/又はAsn35が、His、Glu、Ser、Gln、Try若しくはThrに置換されている配列番号35記載のCDRH1又は配列番号35の変異体、
ii)Trp50が、Arg、Glu、Tyr、Gly、Gln、Val、Leu、Asn、Lys若しくはAlaに置換されている及び/又はIle51が、Leu、Val、Thr、Ser若しくはAsnに置換されている及び/又はPhe52が、Asp、Leu、Asn、Ser若しくはTyrに置換されている及び/又はGly53が、Ala、Tyr、Ser、Lys、Thr若しくはAsnに置換されている及び/又はAsp54が、Asn、Thr、Lys、Ser若しくはGlyに置換されている及び/又はSer56が、Tyr、Arg、Glu、Asp、Val、Ser若しくはAlaに置換されている及び/又はLys58が、Thr、Asn、Ser、Asp、Arg、Gly、Phe若しくはTyrに置換されている配列番号36記載のCDRH2又は配列番号36の変異体、
iii)Try102が、Val、His、Ile、Ser、Asp又はGlyに置換されている配列番号37記載のCDRH3又は配列番号37の変異体、
iv)Asp28が、Ser、Asn、Thr若しくはGluに置換されている及び/又はVal29が、Ileに置換されている及び/又はGly30が、Asp、Leu、Val、Ile、Ser、Asn、Phe、His、Try若しくはThrに置換されている及び/又はThr31が、Asn、Ser、Lys若しくはGlyに置換されている及び/又はAla32が、Phe、Tyr、Asn、His、Ser若しくはArgに置換されている及び/又はVal33が、Met、Leu、Ile若しくはPheに置換されている及び/又はAla34が、Gly、Asn、Ser、His、Val若しくはPheに置換されている配列番号38記載のCDRL1又は配列番号38の変異体、
v)Thr51が、Ala、Gly又はValに置換されている配列番号39記載のCDRL2又は配列番号39の変異体、並びに
vi)His89が、Gln、Ser、Gly、Phe若しくはLeuに置換されている及び/又はGln90が、His若しくはAsnに置換されており、Tyr91が、Asn、Gly、Ser、Arg、Asp、His、Thr、Phe又はValに置換されている及び/又はAsn92が、Trp、Tyr、Thr、Ser、Arg、Gln、His、Ala若しくはAspに置換されている及び/又はAsn93が、Glu、Thr、Gly、His、Ser、Arg若しくはAlaに置換されている及び/又はTyr94が、Asp、Thr、Val、Leu、His、Asn、Ile、Trp、Pro若しくはSerに置換されている及び/又はLeu96が、Pro、Trp、Tyr、Arg、Ile若しくはPheに置換されている配列番号40記載のCDRL3又は配列番号40の変異体。
i)配列番号35記載のCDRH1、
ii)配列番号36記載のCDRH2、
iii)配列番号37記載のCDRH3、
iv)配列番号38記載のCDRL1、
v)配列番号39記載のCDRL2、
vi)配列番号40記載のCDRL3、及び
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Val、Ile又はGly
位置4 Leu又はVal
位置20 Leu、Ile、Met又はVal
位置22 Cys
位置24 Thr、Ala、Val、Gly又はSer
位置26 Gly
位置29 Ile、Phe、Leu又はSer
位置36 Trp
位置47 Trp又はTyr
位置48 Ile、Met、Val又はLeu
位置69 Ile、Leu、Phe、Met又はVal
位置71 Thr、Val、Ala又はLeu
位置78 Ala、Leu、Val、Tyr又はPhe
位置80 Leu又はMet、
位置90 Tyr又はPhe
位置92 Cys
位置94 Thr、Arg、Lys、Gly、Ser、His又はAsn、
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Ile、Leu又はVal
位置3 Val、Gln、Leu又はGlu
位置4 Met又はLeu
位置23 Cys
位置35 Trp
位置36 Tyr、Leu又はPhe
位置46 Leu、Arg又はVal
位置49 Tyr、His、Phe又はLys
位置71 Tyr又はPhe
位置88 Cys
位置98 Phe。
i)配列番号37記載のCDRH3、
ii)配列番号35記載のCDRH1、
iii)配列番号36記載のCDRH2、
iv)配列番号38記載のCDRL1、
v)配列番号39記載のCDRL2、
vi)配列番号40記載のCDRL3、
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Val
位置4 Leu
位置20 Leu
位置22 Cys
位置24 Ala
位置26 Gly
位置29 Phe
位置36 Trp
位置47 Trp
位置48 Ile
位置69 Leu
位置71 Thr
位置78 Ala
位置80 Met
位置90 Tyr
位置92 Cys
位置94 Thr、及び
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Ile
位置3 Val
位置4 Met
位置23 Cys
位置35 Trp
位置36 Tyr
位置46 Leu
位置49 Tyr
位置71 Phe
位置88 Cys
位置98 Phe。
(i)配列番号35、36、及び37のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン重鎖の可変ドメインを少なくともコードする第1のDNA配列と、配列番号38、39、及び40のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン軽鎖の可変ドメインを少なくともコードする第2のDNA配列とにより前記単一の宿主細胞を形質転換する工程と、
(ii)前記形質転換された単一の宿主細胞において前記免疫グロブリン重鎖及び軽鎖が別々の分子として産生されるように、前記第1のDNA配列及び第2のDNA配列を発現させる工程と、
を含み、
更に、前記第1及び第2のDNA配列が、異なるベクター中に存在するように実施してもよく、前記第1及び第2のDNA配列が、単一のベクター中に存在するように実施してもよい方法に関する。
i)Tyr32が、Ile、His、Phe、Thr、Asn、Cys、Glu若しくはAspに置換されている及び/又はAsn33が、Gly、Tyr、Ala、Trp、Thr、Leu若しくはValに置換されている及び/又はIle34が、Met、Val、若しくはTrpに置換されている及び/又はHis35が、Ser、Glu、Asn、Gln、Try若しくはThrに置換されている配列番号41記載のCDRH1又は配列番号41の変異体、
ii)Try50が、Arg、Glu、Trp、Gly、Gln、Val、Leu、Asn、Lys若しくはAlaに置換されている及び/又はIle51が、Leu、Val、Thr、Ser若しくはAsnに置換されている及び/又はAsn52が、Asp、Leu、Ser若しくはTyrに置換されている及び/又はAsn53が、Ala、Gly、Ser、Lys、Thr若しくはTyrに置換されている及び/又はSer54が、Asn、Thr、Lys、Asp若しくはGlyに置換されている及び/又はGly56が、Tyr、Arg、Glu、Asp、Val、Ser若しくはAlaに置換されている及び/又はGly58が、Lys、Asn、Ser、Asp、Arg、Thr、Phe若しくはTyrに置換されている配列番号42記載のCDRH2又は配列番号42の変異体、
iii)Phe102が、Val、Tyr、His、Ile、Ser、Asp又はGlyに置換されている配列番号43記載のCDRH3又は配列番号43の変異体、
iv)Ser25が、Proに置換されている及び/又はThr26が、Ser若しくはAsnに置換されている及び/又はSer27Aが、SNDTE Asn、Asp、Thr若しくはGluに置換されている及び/又はIle27Bが、Leuに置換されている及び/又はVal27Cが、Asp、Leu、Tyr、Ile、Ser、Asn、Phe、His、Gly若しくはThrに置換されている及び/又はPro27Dが、His若しくはLeuに置換されている及び/又はAsn28が、Asp若しくはSerに置換されている及び/又はThr31が、Ser、Asn、Lys若しくはGlyに置換されている及び/又はHis32が、Phe、Tyr、Asn、Ala、Ser若しくはArgに置換されている及び/又はLeu33が、Met、Val、Ile若しくはPheに置換されている及び/又はGlu34が、His若しくはAsnに置換されている配列番号44記載のCDRL1又は配列番号44の変異体、並びに
v)Phe89が、Ser、Gly、Gln若しくはLeuに置換されている及び/又はGln90が、His若しくはAsnに置換されており、Ala91が、Phe、Asn、Gly、Ser、Arg、Asp、His、Thr、Tyr又はValに置換されている及び/又はSer92が、Asn、Tyr、Thr、Trp、Arg、Gln、His、Ala若しくはAspに置換されている及び/又はHis93が、Glu、Asn、Gly、Thr、Ser、Arg若しくはAlaに置換されている及び/又はVal94が、Asp、Tyr、Thr、Leu、His、Asn、Ile、Trp、Pro若しくはSerに置換されている及び/又はTrp96が、Pro、Leu、Tyr、Arg、Ile若しくはPheに置換されている配列番号46記載のCDRL3又は配列番号46の変異体。
i)配列番号41記載のCDRH1、
ii)配列番号42記載のCDRH2、
iii)配列番号43記載のCDRH3、
iv)配列番号44記載のCDRL1、
v)配列番号45記載のCDRL2、
vi)配列番号46記載のCDRL3、
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Val、Ile又はGly
位置4 Leu又はVal
位置20 Leu、Ile、Met又はVal
位置22 Cys
位置24 Thr、Ala、Val、Gly又はSer
位置26 Gly
位置29 Val、Ile、Phe、Leu又はSer
位置36 Trp
位置47 Trp又はTyr
位置48 Ile、Met、Val又はLeu
位置69 Ile、Leu、Phe、Met又はVal
位置71 Ile、Val、Ala又はLeu
位置78 Ala、Leu、Val、Tyr又はPhe
位置80 Leu又はMet
位置90 Tyr又はPhe
位置92 Cys
位置94 Arg、Lys、Gly、Ser、His又はAsn、及び
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Ile、Leu又はVal
位置3 Val、Gln、Leu又はGlu
位置4 Met又はLeu
位置23 Cys
位置35 Trp
位置71 Phe
位置88 Cys
位置98 Phe。
i)配列番号43記載のCDRH3、
ii)配列番号41記載のCDRH1、
iii)配列番号42記載のCDRH2、
iv)配列番号44記載のCDRL1、
v)配列番号45記載のCDRL2、
vi)配列番号46記載のCDRL3、
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Val
位置4 Leu
位置20 Met
位置22 Cys
位置24 Ala
位置26 Gly
位置29 Val
位置36 Trp
位置47 Trp
位置48 Ile
位置69 Leu
位置71 Ile
位置78 Ala
位置80 Met
位置90 Tyr
位置92 Cys
位置94 Arg、及び
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Val
位置3 Leu
位置4 Met
位置23 Cys
位置35 Trp
位置71 Phe
位置88 Cys
位置98 Phe。
(i)配列番号41、42、及び43のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン重鎖の可変ドメインを少なくともコードする第1のDNA配列と、配列番号44、45、及び46のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン軽鎖の可変ドメインを少なくともコードする第2のDNA配列とにより前記単一の宿主細胞を形質転換する工程と、
(ii)前記形質転換された単一の宿主細胞において前記免疫グロブリン重鎖及び軽鎖が別々の分子として産生されるように、前記第1のDNA配列及び第2のDNA配列を発現させる工程と、
を含み、
更に、前記第1及び第2のDNA配列が、異なるベクター中に存在するように実施してもよく、前記第1及び第2のDNA配列が、単一のベクター中に存在するように実施してもよい方法に関する。
i)Tyr32が、Ile、His、Phe、Thr、Asn、Cys、Glu若しくはAspに置換されている及び/又はTry33が、Gly、Ala、Trp、Thr、Leu若しくはValに置換されている及び/又はMet34が、Ile、Val、若しくはTrpに置換されている及び/又はAsn35が、His、Glu、Ser、Gln、Try若しくはThrに置換されている配列番号47記載のCDRH1又は配列番号47の変異体、
ii)Asp50が、Trp、Arg、Glu、Tyr、Gly、Gln、Val、Leu、Asn、Lys若しくはAlaに置換されている及び/又はIle51が、Leu、Val、Thr、Ser若しくはAsnに置換されている及び/又はAsn52が、Asp、Leu、Ser若しくはTyrに置換されている及び/又はAsn53が、Ala、Gly、Ser、Lys、Thr若しくはTyrに置換されている及び/又はAsn54が、Ser、Thr、Lys、Asp若しくはGlyに置換されている及び/又はAsn56が、Val、Tyr、Arg、Glu、Asp、Gly、Ser若しくはAlaに置換されている及び/又はAsn58が、Lys、Thr、Ser、Asp、Arg、Gly、Phe若しくはTyrに置換されている配列番号48記載のCDRH2又は配列番号48の変異体、
iii)Try102が、Val、His、Ile、Ser、Asp又はGlyに置換されている配列番号49記載のCDRH3又は配列番号49の変異体、
iv)Ser27Aが、Asn、Asp、Thr若しくはGluに置換されている及び/又はSer29が、Asp、Leu、Val、Ile、Tyr、Asn、Phe、His、Gly若しくはThrに置換されている及び/又はThr31が、Asn、Ser、Lys若しくはGlyに置換されている及び/又はPhe32が、Asn、Tyr、Ala、His、Ser若しくはArgに置換されている及び/又はLeu33が、Met、Val、Ile若しくはPheに置換されている配列番号50記載のCDRL1又は配列番号50の変異体、並びに
v)Gln89が、Ser、Gly、Phe若しくはLeuに置換されている及び/又はGln90が、His若しくはAsnに置換されており、Tyr91が、Asn、Gly、Ser、Arg、Asp、His、Thr、Phe又はValに置換されている及び/又はSer92が、Asn、Tyr、Thr、Trp、Arg、Gln、His、Ala若しくはAspに置換されている及び/又はGly93が、Glu、Asn、Thr、His、Ser、Arg若しくはAlaに置換されている及び/又はTyr94が、Asp、Thr、Val、Leu、His、Asn、Ile、Trp、Pro若しくはSerに置換されている及び/又はTrp96が、Pro、Leu、Tyr、Arg、Ile若しくはPheに置換されている配列番号52記載のCDRL3又は配列番号52の変異体。
i)配列番号47記載のCDRH1、
ii)配列番号48記載のCDRH2、
iii)配列番号49記載のCDRH3、
iv)配列番号50記載のCDRL1、
v)配列番号51記載のCDRL2、
vi)配列番号52記載のCDRL3、
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Val、Ile又はGly
位置4 Leu又はVal
位置20 Leu、Ile、Met又はVal
位置22 Cys
位置24 Thr、Ala、Val、Gly又はSer
位置26 Gly
位置29 Ile、Phe、Leu又はSer
位置36 Trp
位置47 Trp又はTyr
位置48 Ile、Met、Val又はLeu
位置69 Ile、Leu、Phe、Met又はVal
位置71 Val、Ala又はLeu
位置78 Ala、Leu、Val、Tyr又はPhe
位置80 Leu又はMet、
位置90 Tyr又はPhe
位置92 Cys
位置94 Arg、Lys、Gly、Ser、His又はAsn、及び
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Asn Ile、Leu又はVal
位置3 Val、Gln、Leu又はGlu
位置4 Met又はLeu
位置23 Cys
位置35 Trp
位置71 Tyr
位置88 Cys
位置98 Phe。
i)配列番号49記載のCDRH3、
ii)配列番号47記載のCDRH1、
iii)配列番号48記載のCDRH2、
iv)配列番号50記載のCDRL1、
v)配列番号51記載のCDRL2、
vi)配列番号52記載のCDRL3、
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Val
位置4 Leu
位置20 Ile
位置22 Cys
位置24 Ala
位置26 Gly
位置29 Phe
位置36 Trp
位置47 Trp
位置48 Ile
位置69 Leu
位置71 Val
位置78 Ala
位置80 Met
位置90 Tyr
位置92 Cys
位置94 Gly、及び
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Asn
位置3 Val
位置4 Leu
位置23 Cys
位置35 Trp
位置71 Tyr
位置88 Cys
位置98 Phe。
(i)配列番号47、48、及び49のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン重鎖の可変ドメインを少なくともコードする第1のDNA配列と、配列番号50、51、及び52のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン軽鎖の可変ドメインを少なくともコードする第2のDNA配列とにより前記単一の宿主細胞を形質転換する工程と、
(ii)前記形質転換された単一の宿主細胞において前記免疫グロブリン重鎖及び軽鎖が別々の分子として産生されるように、前記第1のDNA配列及び第2のDNA配列を発現させる工程と、
を含み、
更に、前記第1及び第2のDNA配列が、異なるベクター中に存在するように実施してもよく、前記第1及び第2のDNA配列が、単一のベクター中に存在するように実施してもよい方法に関する。
i)Tyr32が、Ile、His、Phe、Thr、Asn、Cys、Glu若しくはAspに置換されている及び/又はTry33が、Gly、Ala、Trp、Thr、Leu若しくはValに置換されている及び/又はMet34が、Ile、Val、若しくはTrpに置換されている及び/又はAsn35が、His、Glu、Ser、Gln、Try若しくはThrに置換されている配列番号53記載のCDRH1又は配列番号53の変異体、
ii)Asp50が、Trp、Arg、Glu、Tyr、Gly、Gln、Val、Leu、Asn、Lys若しくはAlaに置換されている及び/又はIle51が、Leu、Val、Thr、Ser若しくはAsnに置換されている及び/又はAsn52が、Asp、Leu、Ser若しくはTyrに置換されている及び/又はAsn53が、Ala、Gly、Ser、Lys、Thr若しくはTyrに置換されている及び/又はAsn54が、Ser、Thr、Lys、Asp若しくはGlyに置換されている及び/又はGly56が、Tyr、Arg、Glu、Asp、Val、Ser若しくはAlaに置換されている及び/又はAsn58が、Lys、Thr、Ser、Asp、Arg、Gly、Phe若しくはTyrに置換されている配列番号54記載のCDRH2又は配列番号54の変異体、
iii)Try102が、Val、His、Ile、Ser、Asp又はGlyに置換されている配列番号55記載のCDRH3又は配列番号55の変異体、
iv)Ser27Aが、Asn、Asp、Thr若しくはGluに置換されている及び/又はSer29が、Asp、Leu、Val、Ile、Tyr、Asn、Phe、His、Gly若しくはThrに置換されている及び/又はThr31が、Asn、Ser、Lys若しくはGlyに置換されている及び/又はTyr32が、Phe、Asn、Ala、His、Ser若しくはArgに置換されている及び/又はLeu33が、Met、Val、Ile若しくはPheに置換されている配列番号56記載のCDRL1又は配列番号56の変異体、並びに
v)Gln89が、Ser、Gly、Phe若しくはLeuに置換されている及び/又はGln90が、His若しくはAsnに置換されており、Phe91が、Asn、Gly、Ser、Arg、Asp、His、Thr、Tyr又はValに置換されている及び/又はSer92が、Asn、Tyr、Thr、Trp、Arg、Gln、His、Ala若しくはAspに置換されている及び/又はGly93が、Glu、Asn、Thr、His、Ser、Arg若しくはAlaに置換されている及び/又はTyr94が、Asp、Thr、Val、Leu、His、Asn、Ile、Trp、Pro若しくはSerに置換されている及び/又はTrp96が、Pro、Leu、Tyr、Arg、Ile若しくはPheに置換されている配列番号58記載のCDRL3又は配列番号58の変異体。
i)配列番号53記載のCDRH1、
ii)配列番号54記載のCDRH2、
iii)配列番号55記載のCDRH3、
iv)配列番号56記載のCDRL1、
v)配列番号57記載のCDRL2、
vi)配列番号58記載のCDRL3、
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Val、Ile又はGly
位置4 Leu又はVal
位置20 Leu、Ile、Met又はVal
位置22 Cys
位置24 Thr、Ala、Val、Gly又はSer
位置26 Gly
位置29 Ile、Phe、Leu又はSer
位置36 Trp
位置47 Trp又はTyr
位置48 Ile、Met、Val又はLeu
位置69 Ile、Leu、Phe、Met又はVal
位置71 Val、Ala又はLeu
位置78 Ala、Leu、Val、Tyr又はPhe
位置80 Leu又はMet、
位置90 Tyr又はPhe
位置92 Cys
位置94 Arg、Lys、Gly、Ser、His又はAsn、及び
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Asn Ile、Leu又はVal
位置3 Val、Gln、Leu又はGlu
位置4 Met又はLeu
位置23 Cys
位置35 Trp
位置71 Tyr
位置88 Cys
位置98 Phe。
i)配列番号55記載のCDRH3、
ii)配列番号53記載のCDRH1、
iii)配列番号54記載のCDRH2、
iv)配列番号56記載のCDRL1、
v)配列番号57記載のCDRL2、
vi)配列番号58記載のCDRL3、
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Val
位置4 Leu
位置20 Ile
位置22 Cys
位置24 Ala
位置26 Gly
位置29 Phe
位置36 Trp
位置47 Trp
位置48 Ile
位置69 Leu
位置71 Val
位置78 Ala
位置80 Met
位置90 Phe
位置92 Cys
位置94 Gly
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Asn
位置3 Val
位置4 Leu
位置23 Cys
位置35 Trp
位置71 Tyr
位置88 Cys
位置98 Phe。
(i)配列番号53、54、及び55のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン重鎖の可変ドメインを少なくともコードする第1のDNA配列と、配列番号56、57、及び58のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン軽鎖の可変ドメインを少なくともコードする第2のDNA配列とにより前記単一の宿主細胞を形質転換する工程と、
(ii)前記形質転換された単一の宿主細胞において前記免疫グロブリン重鎖及び軽鎖が別々の分子として産生されるように、前記第1のDNA配列及び第2のDNA配列を発現させる工程と、
を含み、
更に、前記第1及び第2のDNA配列が、異なるベクター中に存在するように実施してもよく、前記第1及び第2のDNA配列が、単一のベクター中に存在するように実施してもよい方法に関する。
i)Tyr32が、Ile、His、Phe、Thr、Asn、Cys、Glu若しくはAspに置換されている及び/又はTrp33が、Tyr、Ala、Gly、Thr、Leu若しくはValに置換されている及び/又はMet34が、Ile、Val、若しくはTrpに置換されている及び/又はHis35が、Ser、Glu、Asn、Gln、Try若しくはThrに置換されている配列番号59記載のCDRH1又は配列番号59の変異体、
ii)Arg50が、Trp、Glu、Tyr、Gly、Gln、Val、Leu、Asn、Lys若しくはAlaに置換されている及び/又はIle51が、Leu、Val、Thr、Ser若しくはAsnに置換されている及び/又はHis52が、Asn、Asp、Leu、Ser若しくはTyrに置換されている及び/又はSer53が、Ala、Gly、Try、Lys、Thr若しくはAsnに置換されている及び/又はAsp54が、Asn、Thr、Lys、Ser若しくはGlyに置換されている及び/又はAsp56が、Tyr、Arg、Glu、Val、Gly、Ser若しくはAlaに置換されている及び/又はAsn58が、Lys、Thr、Ser、Asp、Arg、Gly、Phe若しくはTyrに置換されている配列番号60記載のCDRH2又は配列番号60の変異体、
iii)Leu102が、Val、Tyr、His、Ile、Ser、Asp又はGlyに置換されている配列番号61記載のCDRH3又は配列番号61の変異体、
iv)Thr28が、Ser、Asp、Asn若しくはGluに置換されている及び/又はIle29が、Valに置換されている及び/又はGly30が、Asp、Leu、Val、Ile、Ser、Asn、Phe、His、Tyr若しくはThrに置換されている及び/又はThr31が、Asn、Ser、Lys若しくはGlyに置換されている及び/又はTrp32が、Asn、Phe、Tyr、Ala、His、Ser若しくはArgに置換されている及び/又はLeu33が、Met、Val、Ile若しくはPheに置換されている及び/又はAla34が、Gly、Asn、Ser、His、Val若しくはPheに置換されている配列番号62記載のCDRL1又は配列番号62の変異体、
v)Ala51が、Thr、Gly又はValに置換されている配列番号63記載のCDRL2又は配列番号63の変異体、並びに
vi)Gln89が、Ser、Gly、Phe若しくはLeuに置換されている及び/又はGln90が、His若しくはAsnに置換されており、Leu91が、Phe、Asn、Gly、Ser、Arg、Asp、His、Thr、Tyr又はValに置換されている及び/又はSer92が、Asn、Tyr、Thr、Trp、Arg、Gln、His、Ala若しくはAspに置換されている及び/又はSer93が、Glu、Asn、Gly、His、Thr、Arg若しくはAlaに置換されている及び/又はThr94が、Asp、Tyr、Val、Leu、His、Asn、Ile、Trp、Pro若しくはSerに置換されている及び/又はTrp96が、Pro、Leu、Tyr、Arg、Ile若しくはPheに置換されている配列番号64記載のCDRL3又は配列番号64の変異体。
i)配列番号59記載のCDRH1、
ii)配列番号60記載のCDRH2、
iii)配列番号61記載のCDRH3、
iv)配列番号62記載のCDRL1、
v)配列番号63記載のCDRL2、
vi)配列番号64記載のCDRL3、
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Val、Ile又はGly
位置4 Leu又はVal
位置20 Leu、Ile、Met又はVal
位置22 Cys
位置24 Thr、Ala、Val、Gly又はSer
位置26 Gly
位置29 Ile、Phe、Leu又はSer
位置36 Trp
位置47 Trp又はTyr
位置48 Ile、Met、Val又はLeu
位置69 Ile、Leu、Phe、Met又はVal
位置71 Val、Ala又はLeu
位置78 Ala、Leu、Val、Tyr又はPhe
位置80 Leu又はMet、
位置90 Tyr又はPhe
位置92 Cys
位置94 Ile、Arg、Lys、Gly、Ser、His又はAsn、及び
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Ile、Leu又はVal
位置3 Val、Gln、Leu又はGlu
位置4 Met又はLeu
位置23 Cys
位置35 Trp
位置36 Tyr、Leu又はPhe
位置46 Leu、Arg又はVal
位置49 Tyr、His、Phe又はLys
位置71 Tyr又はPhe
位置88 Cys
位置98 Phe。
i)配列番号61記載のCDRH3、
ii)配列番号59記載のCDRH1、
iii)配列番号60記載のCDRH2、
iv)配列番号62記載のCDRL1、
v)配列番号63記載のCDRL2、
vi)配列番号64記載のCDRL3、
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Val
位置4 Leu
位置20 Val
位置22 Cys
位置24 Ala
位置26 Gly
位置29 Phe
位置36 Trp
位置47 Trp
位置48 Ile
位置69 Leu
位置71 Val
位置78 Ala
位置80 Met
位置90 Tyr
位置92 Cys
位置94 Ile、及び
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Ile
位置3 Gln
位置4 Met
位置23 Cys
位置35 Trp
位置36 Tyr
位置46 Leu
位置49 Tyr
位置71 Phe
位置88 Cys
位置98 Phe。
(i)配列番号59、60、及び61のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン重鎖の可変ドメインを少なくともコードする第1のDNA配列と、配列番号62、63、及び64のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン軽鎖の可変ドメインを少なくともコードする第2のDNA配列とにより前記単一の宿主細胞を形質転換する工程と、
(ii)前記形質転換された単一の宿主細胞において前記免疫グロブリン重鎖及び軽鎖が別々の分子として産生されるように、前記第1のDNA配列及び第2のDNA配列を発現させる工程と、
を含み、
更に、前記第1及び第2のDNA配列が、異なるベクター中に存在するように実施してもよく、前記第1及び第2のDNA配列が、単一のベクター中に存在するように実施してもよい方法に関する。
i)Tyr32が、Ile、His、Phe、Thr、Asn、Cys、Glu若しくはAspに置換されている及び/又はAsn33が、Gly、Tyr、Ala、Trp、Thr、Leu若しくはValに置換されている及び/又はMet34が、Ile、Val、若しくはTrpに置換されている及び/又はHis35が、Ser、Glu、Asn、Gln、Try若しくはThrに置換されている配列番号65記載のCDRH1又は配列番号65の変異体、
ii)Ala50が、Arg、Glu、Tyr、Gly、Gln、Val、Leu、Asn、Lys若しくはTrpに置換されている及び/又はIle51が、Leu、Val、Thr、Ser若しくはAsnに置換されている及び/又はTyr52が、Asp、Leu、Ser若しくはAsnに置換されている及び/又はGly53が、Ala、Tyr、Ser、Lys、Thr若しくはAsnに置換されている及び/又はAsn54が、Ser、Thr、Lys、Asp若しくはGlyに置換されている及び/又はAsp56が、Tyr、Arg、Glu、Val、Gly、Ser若しくはAlaに置換されている及び/又はSer58が、Lys、Asn、Thr、Asp、Arg、Gly、Phe若しくはTyrに置換されている配列番号66記載のCDRH2又は配列番号66の変異体、
iii)Try102が、Val、His、Ile、Ser、Asp又はGlyに置換されている配列番号67記載のCDRH3又は配列番号67の変異体、
iv)Ser27Aが、Asn、Asp、Thr若しくはGluに置換されている及び/又はSer30が、Asp、Leu、Val、Ile、Tyr、Asn、Phe、His、Gly若しくはThrに置換されている及び/又はThr31が、Asn、Ser、Lys若しくはGlyに置換されている及び/又はTyr32が、Phe、Asn、Ala、His、Ser若しくはArgに置換されている及び/又はLeu33が、Met、Val、Ile若しくはPheに置換されている配列番号68記載のCDRL1又は配列番号68の変異体、並びに
v)Gln89が、Ser、Gly、Phe若しくはLeuに置換されている及び/又はGln90が、His若しくはAsnに置換されており、Phe91が、Asn、Gly、Ser、Arg、Asp、His、Thr、Tyr又はValに置換されている及び/又はSer92が、Asn、Tyr、Thr、Trp、Arg、Gln、His、Ala若しくはAspに置換されている及び/又はGly93が、Glu、Asn、Thr、His、Ser、Arg若しくはAlaに置換されている及び/又はTyr94が、Asp、Thr、Val、Leu、His、Asn、Ile、Trp、Pro若しくはSerに置換されている及び/又はTrp96が、Pro、Leu、Tyr、Arg、Ile若しくはPheに置換されている配列番号70記載のCDRL3又は配列番号70の変異体。
i)配列番号65記載のCDRH1、
ii)配列番号66記載のCDRH2、
iii)配列番号67記載のCDRH3、
iv)配列番号68記載のCDRL1、
v)配列番号69記載のCDRL2、
vi)配列番号70記載のCDRL3、
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Ala Val、Ile又はGly
位置4 Leu又はVal
位置20 Leu、Ile、Met又はVal
位置22 Cys
位置24 Thr、Ala、Val、Gly又はSer
位置26 Gly
位置29 Ile、Phe、Leu又はSer
位置36 Trp
位置47 Trp又はTyr
位置48 Ile、Met、Val又はLeu
位置69 Ile、Leu、Phe、Met又はVal
位置71 Val、Ala又はLeu
位置78 Ala、Leu、Val、Tyr又はPhe
位置80 Leu又はMet、
位置90 Tyr又はPhe
位置92 Cys
位置94 Arg、Lys、Gly、Ser、His又はAsn、及び
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Asn Ile、Leu又はVal
位置3 Val、Gln、Leu又はGlu
位置4 Met又はLeu
位置23 Cys
位置35 Trp
位置71 Tyr
位置88 Cys
位置98 Phe。
i)配列番号67記載のCDRH3、
ii)配列番号65記載のCDRH1、
iii)配列番号66記載のCDRH2、
iv)配列番号68記載のCDRL1、
v)配列番号69記載のCDRL2、
vi)配列番号70記載のCDRL3、
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Ala
位置4 Leu
位置20 Met
位置22 Cys
位置24 Ala
位置26 Gly
位置29 Phe
位置36 Trp
位置47 Trp
位置48 Ile
位置69 Leu
位置71 Val
位置78 Ala
位置80 Met
位置90 Tyr
位置92 Cys
位置94 Arg、及び
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Asn
位置3 Val
位置4 Leu
位置23 Cys
位置35 Trp
位置71 Tyr
位置88 Cys
位置98 Phe。
(i)配列番号65、66、及び67のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン重鎖の可変ドメインを少なくともコードする第1のDNA配列と、配列番号68、69、及び70のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン軽鎖の可変ドメインを少なくともコードする第2のDNA配列とにより前記単一の宿主細胞を形質転換する工程と、
(ii)前記形質転換された単一の宿主細胞において前記免疫グロブリン重鎖及び軽鎖が別々の分子として産生されるように、前記第1のDNA配列及び第2のDNA配列を発現させる工程と、
を含み、
更に、前記第1及び第2のDNA配列が、異なるベクター中に存在するように実施してもよく、前記第1及び第2のDNA配列が、単一のベクター中に存在するように実施してもよい方法に関する。
i)Tyr32が、Ile、His、Phe、Thr、Asn、Cys、Glu若しくはAspに置換されている及び/又はGly33が、Tyr、Ala、Trp、Thr、Leu若しくはValに置換されている及び/又はIle34が、Met、Val、若しくはTrpに置換されている及び/又はHis35が、Ser、Glu、Asn、Gln、Try若しくはThrに置換されている配列番号71記載のCDRH1又は配列番号71の変異体、
ii)Trp50が、Arg、Glu、Tyr、Gly、Gln、Val、Leu、Asn、Lys若しくはAlaに置換されている及び/又はIle51が、Leu、Val、Thr、Ser若しくはAsnに置換されている及び/又はAsn52が、Asp、Leu、Ser若しくはTyrに置換されている及び/又はAsn53が、Ala、Gly、Ser、Lys、Thr若しくはTyrに置換されている及び/又はThr54が、Asn、Ser、Lys、Asp若しくはGlyに置換されている及び/又はGlu56が、Tyr、Arg、Val、Asp、Gly、Ser若しくはAlaに置換されている及び/又はThr58が、Lys、Asn、Ser、Asp、Arg、Gly、Phe若しくはTyrに置換されている配列番号72記載のCDRH2又は配列番号72の変異体、
iii)Try102が、Val、His、Ile、Ser、Asp又はGlyに置換されている配列番号73記載のCDRH3又は配列番号73の変異体、
iv)Asn28が、Ser、Asp、Thr若しくはGluに置換されている及び/又はIle29が、Valに置換されている及び/又はTyr30が、Asp、Leu、Val、Ile、Ser、Asn、Phe、His、Gly若しくはThrに置換されている及び/又はSer31が、Asn、Thr、Lys若しくはGlyに置換されている及び/又はAsn32が、Phe、Tyr、Ala、His、Ser若しくはArgに置換されている及び/又はLeu33が、Met、Val、Ile若しくはPheに置換されている及び/又はAla34が、Gly、Asn、Ser、His、Val若しくはPheに置換されている配列番号74記載のCDRL1又は配列番号74の変異体、
v)Ala51が、Thr、Gly又はValに置換されている配列番号75記載のCDRL2又は配列番号75の変異体、
vi)Gln89が、Ser、Gly、Phe若しくはLeuに置換されている及び/又はHis90が、Gln若しくはAsnに置換されており、Phe91が、Asn、Gly、Ser、Arg、Asp、His、Thr、Tyr又はValに置換されている及び/又はTrp92が、Asn、Tyr、Thr、Ser、Arg、Gln、His、Ala若しくはAspに置換されている及び/又はGly93が、Glu、Asn、Thr、His、Ser、Arg若しくはAlaに置換されている及び/又はThr94が、Asp、Tyr、Val、Leu、His、Asn、Ile、Trp、Pro若しくはSerに置換されている及び/又はLeu96が、Pro、Trp、Tyr、Arg、Ile若しくはPheに置換されている配列番号76記載のCDRL3又は配列番号76の変異体。
i)配列番号71記載のCDRH1、
ii)配列番号72記載のCDRH2、
iii)配列番号73記載のCDRH3、
iv)配列番号74記載のCDRL1、
v)配列番号75記載のCDRL2、
vi)配列番号76記載のCDRL3、及び
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Val、Ile又はGly
位置4 Leu又はVal
位置20 Leu、Ile、Met又はVal
位置22 Cys
位置24 Thr、Ala、Val、Gly又はSer
位置26 Gly
位置29 Ile、Phe、Leu又はSer
位置36 Trp
位置47 Trp又はTyr
位置48 Ile、Met、Val又はLeu
位置69 Ile、Leu、Phe、Met又はVal
位置71 Val、Ala又はLeu
位置78 Ala、Leu、Val、Tyr又はPhe
位置80 Leu又はMet、
位置90 Tyr又はPhe
位置92 Cys
位置94 Arg、Lys、Gly、Ser、His又はAsn、及び
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Ile、Leu又はVal
位置3 Val、Gln、Leu又はGlu
位置4 Met又はLeu
位置23 Cys
位置35 Trp
位置36 Tyr、Leu又はPhe
位置46 Leu、Arg又はVal
位置49 Tyr、His、Phe又はLys
位置71 Tyr又はPhe
位置88 Cys
位置98 Phe。
i)配列番号73記載のCDRH3、
ii)配列番号71記載のCDRH1、
iii)配列番号72記載のCDRH2、
iv)配列番号74記載のCDRL1、
v)配列番号75記載のCDRL2、
vi)配列番号76記載のCDRL3、
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Ile
位置4 Leu
位置20 Ile
位置22 Cys
位置24 Ala
位置26 Gly
位置29 Leu
位置36 Trp
位置47 Trp
位置48 Met
位置69 Phe
位置71 Leu
位置78 Ala
位置80 Leu
位置90 Tyr
位置92 Cys
位置94 Lys、及び
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Ile
位置3 Gln
位置4 Met
位置23 Cys
位置35 Trp
位置36 Tyr
位置46 Leu
位置49 Tyr
位置71 Phe
位置88 Cys
位置98 Phe。
(i)配列番号71、72、及び73のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン重鎖の可変ドメインを少なくともコードする第1のDNA配列と、配列番号74、75、及び76のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン軽鎖の可変ドメインを少なくともコードする第2のDNA配列とにより前記単一の宿主細胞を形質転換する工程と、
(ii)前記形質転換された単一の宿主細胞において前記免疫グロブリン重鎖及び軽鎖が別々の分子として産生されるように、前記第1のDNA配列及び第2のDNA配列を発現させる工程と、
を含み、
更に、前記第1及び第2のDNA配列が、異なるベクター中に存在するように実施してもよく、前記第1及び第2のDNA配列が、単一のベクター中に存在するように実施してもよい方法に関する。
i)Asn32が、Ile、His、Phe、Thr、Tyr、Cys、Glu若しくはAspに置換されている及び/又はTyr33が、Gly、Ala、Trp、Thr、Leu若しくはValに置換されている及び/又はIle34が、Met、Val、若しくはTrpに置換されている及び/又はAsp35が、Ser、His、Glu、Asn、Gln、Try若しくはThrに置換されている配列番号77記載のCDRH1又は配列番号77の変異体、
ii)Trp50が、Arg、Glu、Tyr、Gly、Gln、Val、Leu、Asn、Lys若しくはAlaに置換されている及び/又はIle51が、Leu、Val、Thr、Ser若しくはAsnに置換されている及び/又はPhe52が、Asn、Asp、Leu、Ser若しくはTyrに置換されている及び/又はGly53が、Ala、Tyr、Ser、Lys、Thr若しくはAsnに置換されている及び/又はSer54が、Asn、Thr、Lys、Asp若しくはGlyに置換されている及び/又はAsn56が、Val、Tyr、Arg、Glu、Asp、Gly、Ser若しくはAlaに置換されている及び/又はLys58が、Thr、Asn、Ser、Asp、Arg、Gly、Phe若しくはTyrに置換されている配列番号78記載のCDRH2又は配列番号78の変異体、
iii)Val102が、Tyr、His、Ile、Ser、Asp又はGlyに置換されている配列番号79記載のCDRH3又は配列番号79の変異体、
iv)Asp28が、Ser、Asn、Thr若しくはGluに置換されている及び/又はVal29が、Ileに置換されている及び/又はGly30が、Asp、Leu、Val、Ile、Ser、Asn、Phe、His、Try若しくはThrに置換されている及び/又はSer31が、Asn、Thr、Lys若しくはGlyに置換されている及び/又はAla32が、Phe、Tyr、Asn、His、Ser若しくはArgに置換されている及び/又はVal33が、Met、Leu、Ile若しくはPheに置換されている及び/又はAla34が、Gly、Asn、Ser、His、Val若しくはPheに置換されている配列番号80記載のCDRL1又は配列番号80の変異体、
v)Ala51が、Thr、Gly又はValに置換されている配列番号81記載のCDRL2又は配列番号81の変異体、並びに
vi)Gln89が、Ser、Gly、Phe若しくはLeuに置換されている及び/又はGln90が、His若しくはAsnに置換されており、Tyr91が、Asn、Gly、Ser、Arg、Asp、His、Thr、Phe若しくはValに置換されている及び/又はSer92が、Asn、Tyr、Thr、Trp、Arg、Gln、His、Ala若しくはAspに置換されている及び/又はThr93が、Glu、Asn、Gly、His、Ser、Arg若しくはAlaに置換されている及び/又はTyr94が、Asp、Thr、Val、Leu、His、Asn、Ile、Trp、Pro若しくはSerに置換されている及び/又はLeu96が、Pro、Trp、Tyr、Arg、Ile若しくはPheに置換されている配列番号82記載のCDRL3又は配列番号82の変異体。
i)配列番号77記載のCDRH1、
ii)配列番号78記載のCDRH2、
iii)配列番号79記載のCDRH3、
iv)配列番号80記載のCDRL1、
v)配列番号81記載のCDRL2、
vi)配列番号82記載のCDRL3、
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Val、Ile又はGly
位置4 Leu又はVal
位置20 Leu、Ile、Met又はVal
位置22 Cys
位置24 Thr、Ala、Val、Gly又はSer
位置26 Gly
位置29 Ile、Phe、Leu又はSer
位置36 Trp
位置47 Trp又はTyr
位置48 Ile、Met、Val又はLeu
位置69 Ile、Leu、Phe、Met又はVal
位置71 Val、Ala又はLeu
位置78 Ala、Leu、Val、Tyr又はPhe
位置80 Leu又はMet、
位置90 Tyr又はPhe
位置92 Cys
位置94 Arg、Lys、Gly、Ser、His又はAsn、及び
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Ile、Leu又はVal
位置3 Val、Gln、Leu又はGlu
位置4 Met又はLeu
位置23 Ser又はCys
位置35 Trp
位置36 Tyr、Leu又はPhe
位置46 Leu、Arg又はVal
位置49 Tyr、His、Phe又はLys
位置71 Tyr又はPhe
位置88 Cys
位置98 Phe。
i)配列番号79記載のCDRH3、
ii)配列番号77記載のCDRH1、
iii)配列番号78記載のCDRH2、
iv)配列番号80記載のCDRL1、
v)配列番号81記載のCDRL2、
vi)配列番号82記載のCDRL3、
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Ile
位置4 Leu
位置20 Ile
位置22 Cys
位置24 Ala
位置26 Gly
位置29 Phe
位置36 Trp
位置47 Trp
位置48 Ile
位置69 Leu
位置71 Val
位置78 Ala
位置80 Met
位置90 Tyr
位置92 Cys
位置94 Arg、及び
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Ile
位置3 Val
位置4 Met
位置23 Ser
位置35 Trp
位置36 Tyr
位置46 Leu
位置49 Tyr
位置71 Phe
位置88 Cys
位置98 Phe。
(i)配列番号77、78、及び79のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン重鎖の可変ドメインを少なくともコードする第1のDNA配列と、配列番号80、81、及び82のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン軽鎖の可変ドメインを少なくともコードする第2のDNA配列とにより前記単一の宿主細胞を形質転換する工程と、
(ii)前記形質転換された単一の宿主細胞において前記免疫グロブリン重鎖及び軽鎖が別々の分子として産生されるように、前記第1のDNA配列及び第2のDNA配列を発現させる工程と、
を含み、
更に、前記第1及び第2のDNA配列が、異なるベクター中に存在するように実施してもよく、前記第1及び第2のDNA配列が、単一のベクター中に存在するように実施してもよい方法に関する。
i)Tyr32が、Ile、His、Phe、Thr、Asn、Cys、Glu若しくはAspに置換されている及び/又はTry33が、Gly、Ala、Trp、Thr、Leu若しくはValに置換されている及び/又はMet34が、Ile、Val、若しくはTrpに置換されている及び/又はTyr35が、His、Glu、Asn、Gln、Ser若しくはThrに置換されている配列番号83記載のCDRH1又は配列番号83の変異体、
ii)Thr50が、Gly、Tyr、Phe、Ile、Glu若しくはValに置換されている及び/又はVal51が、Leu、Ile、Thr、Ser若しくはAsnに置換されている及び/又はSer52が、Phe、Trp若しくはHisに置換されている及び/又はVal53が、Asp、Gly、Ser若しくはAsnに置換されている及び/又はGly54が、Serに置換されている及び/又はTyr56が、Ser、Thr、Asn、Asp若しくはArgに置換されている及び/又はLys58が、Asn、Thr、Ser、Asp、Arg、Gly、Phe若しくはTyrに置換されている配列番号84記載のCDRH2又は配列番号84の変異体、
iii)Try102が、Val、His、Ile、Ser、Asp又はGlyに置換されている配列番号85記載のCDRH3又は配列番号85の変異体、
iv)Ser29が、Val、Asn、Asp、Thr若しくはGluに置換されている及び/又はVal30が、Asp、Leu、Tyr、Ile、Ser、Asn、Phe、His、Gly若しくはThrに置換されている及び/又はSer31が、Asn、Thr、Lys若しくはGlyに置換されている及び/又はTyr32が、Phe、Asn、Ala、His、Ser若しくはArgに置換されている及び/又はMet33が、Leu、Val、Ile若しくはPheに置換されている配列番号86記載のCDRL1又は配列番号86の変異体、並びに
v)His89が、Gln、Ser、Gly、Phe若しくはLeuに置換されている及び/又はGln90が、His若しくはAsnに置換されており、Arg91が、Asn、Gly、Ser、Phe、Asp、His、Thr、Tyr若しくはValに置換されている及び/又はSer92が、Asn、Tyr、Thr、Trp、Arg、Gln、His、Ala若しくはAspに置換されている及び/又はSer93が、Tyr、Glu、Asn、Gly、His、Thr、Arg若しくはAlaに置換されている及び/又はPhe94が、Thr、Asp、Tyr、Val、Leu、His、Asn、Ile、Trp、Pro若しくはSerに置換されている及び/又はPro96が、Trp、Leu、Tyr、Arg、Ile若しくはPheに置換されている配列番号88記載のCDRL3又は配列番号88の変異体。
i)配列番号83記載のCDRH1、
ii)配列番号84記載のCDRH2、
iii)配列番号85記載のCDRH3、
iv)配列番号86記載のCDRL1、
v)配列番号87記載のCDRL2、
vi)配列番号88記載のCDRL3、
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Val、Ile又はGly
位置4 Leu又はVal
位置20 Leu、Ile、Met又はVal
位置22 Cys
位置24 Thr、Ala、Val、Gly又はSer
位置26 Gly
位置29 Ile、Phe、Leu又はSer
位置36 Trp
位置47 Trp
位置48 Ile、Met、Val又はLeu
位置69 Ile、Leu、Phe、Met又はVal
位置71 Arg
位置78 Ala、Leu、Val、Tyr又はPhe
位置80 Leu又はMet、
位置90 Tyr又はPhe
位置92 Cys
位置94 Arg、Lys、Gly、Ser、His又はAsn、及び
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Ile、Leu又はVal
位置3 Val、Gln、Leu又はGlu
位置4 Met又はLeu
位置23 Cys
位置35 Trp
位置71 Tyr
位置88 Cys
位置98 Phe。
i)配列番号85記載のCDRH3、
ii)配列番号83記載のCDRH1、
iii)配列番号84記載のCDRH2、
iv)配列番号86記載のCDRL1、
v)配列番号87記載のCDRL2、
vi)配列番号88記載のCDRL3、
vii)以下の残基を含んでなる重鎖フレームワーク:
位置2 Val
位置4 Leu
位置20 Leu
位置22 Cys
位置24 Ala
位置26 Gly
位置29 Phe
位置36 Trp
位置47 Trp
位置48 Val
位置69 Ile
位置71 Arg
位置78 Leu
位置80 Leu
位置90 Tyr
位置92 Cys
位置94 Arg、及び
viii)以下の残基を含んでなる軽鎖フレームワーク:
位置2 Ile
位置3 Val
位置4 Leu
位置23 Cys
位置35 Trp
位置71 Tyr
位置88 Cys
位置98 Phe。
(i)配列番号83、84、及び85のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン重鎖の可変ドメインを少なくともコードする第1のDNA配列と、配列番号86、87、及び88のCDRドメインを含んでなる免疫グロブリン軽鎖の可変ドメインを少なくともコードする第2のDNA配列とにより前記単一の宿主細胞を形質転換する工程と、
(ii)前記形質転換された単一の宿主細胞において前記免疫グロブリン重鎖及び軽鎖が別々の分子として産生されるように、前記第1のDNA配列及び第2のDNA配列を発現させる工程と、
を含み、
更に、前記第1及び第2のDNA配列が、異なるベクター中に存在するように実施してもよく、前記第1及び第2のDNA配列が、単一のベクター中に存在するように実施してもよい方法に関する。
インタクトな抗体
インタクトな抗体は、通常、少なくとも2本の重鎖及び軽鎖を含むヘテロ多量体の糖タンパク質である。IgMに加えて、インタクトな抗体は、2本の同一の軽(L)鎖及び2本の同一の重(H)鎖から構成される約150Kdaのヘテロ多量体の糖タンパク質である。典型的に、各軽鎖は、1つの共有ジスルフィド結合により重鎖に結合しているが、ジスルフィド結合の数は、異なる免疫グロブリンアイソタイプの重鎖間で変動する。また各重鎖及び軽鎖は、鎖内にもジスルフィド結合を有する。各重鎖は、一端に可変ドメイン(VH)を有し、続いて多数の定常領域を有する。各軽鎖は、可変ドメイン(VL)及び他の末端に定常領域を有し、軽鎖の定常領域は、重鎖の第1の定常領域と整列し、軽鎖可変ドメインは重鎖の可変ドメインと整列する。大部分の脊椎動物種に由来する抗体の軽鎖は、定常領域のアミノ酸配列に基いてカッパ及びラムダと呼ばれる2種類のうちの1つに帰属し得る。その重鎖の定常領域のアミノ酸配列によって、ヒト抗体は、5つの異なるクラス、IgA、IgD、IgE、IgG及びIgMに帰属し得る。IgG及びIgAは、サブクラス、IgG1、IgG2、IgG3及びIgG4、並びにIgA1及びIgA2に更に細分化することができる。種による変異体が存在し、マウス及びラットは少なくともIgG2a、IgG2bを有する。抗体の可変ドメインは、相補性決定領域(CDR)と呼ばれる特に変動性の高い特定の領域により抗体に結合特異性を付与する。可変領域のより保存されている部分をフレームワーク領域(FR)と呼ぶ。インタクトな重鎖及び軽鎖の可変ドメインは、各々、3つのCDRによって連結されている4つのFRを含む。各鎖のCDRは、FR領域に極近接して保持され、他の鎖のCDRと共に抗体の抗原結合部位の形成に寄与する。定常領域は、抗体の抗原に対する結合に直接関与する訳ではないが、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害(ADCC)、Fcγ受容体への結合を介する食作用、新生児Fc受容体(FcRn)を介する半減期/クリアランス速度、及び補体カスケードのC1q成分を介する補体依存性細胞傷害への関与等の様々なエフェクター機能を示す。ヒトIgG2定常領域は、古典的経路によって補体を活性化するか又は抗体依存性細胞性細胞傷害を媒介する能力を欠く。ヒトIgG4定常領域は、古典的経路によって補体を活性化する能力を欠き、且つ抗体依存性細胞性細胞傷害をほんのわずかしか媒介しない。これらエフェクター機能を本質的に欠く抗体を「非溶解性」抗体と呼ぶ場合もある。
ヒト抗体は、当業者に公知の多数の方法によって作製することができる。ヒト抗体は、ヒト骨髄腫又はマウス−ヒトヘテロ骨髄腫細胞株を用いてハイブリドーマ法により作製することができる。Kozbor J.Immunol 133,3001,(1984年)及びBrodeur,Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications,pp51−63(Marcel Dekker Inc,1987年)を参照されたい。別の方法としては、ファージライブラリ又はトランスジェニックマウスの使用が挙げられ、これらは両方ともヒトV領域レパートリーを利用する(Winter G,(1994年),Annu.Rev.Immunol 12,433−455、Green LL(1999年),J.Immunol.Methods 231,11−23)。
ヒトの疾患又は障害の治療におけるインタクトな非ヒト抗体の使用では、特に抗体を反復投与した際に、患者の免疫系が前記インタクトな非ヒト抗体を非自己として認識し、中和反応を開始する場合があるという潜在的な免疫原性の問題が十分に確立されている。完全なヒト抗体(上記を参照されたい)の開発に加えて、これら問題を克服するために長年にわたって様々な技術が開発されており、一般的に、免疫された動物、例えば、マウス、ラット、又はウサギからの非ヒト抗体の比較的容易な入手性を保持しながら、インタクトな治療用抗体における非ヒトアミノ酸配列の組成を減少させることを含む。概して、これを達成するために2つのアプローチが使用されている。第1は、キメラ抗体であり、これは、一般的に、ヒトの定常領域に融合された非ヒト(例えば、マウス等のげっ歯類)の可変ドメインを含む。抗体の抗原結合部位は可変領域内に局在するので、キメラ抗体は、抗原に対する結合親和性を保持するが、ヒトの定常領域のエフェクター機能を獲得するので、上記のようなエフェクター機能を発揮することができる。キメラ抗体は、典型的に、組換えDNA方法を使用して作製される。抗体(例えばcDNA)をコードするDNAは、従来の手順を使用して(例えば、本発明の抗体のH鎖及びL鎖の可変領域をコードする遺伝子に特異的に結合することができるオリゴヌクレオチドプローブを使用することにより)単離され、配列決定される。ハイブリドーマ細胞は、このようなDNAの典型的な起源として機能する。一旦単離されると、DNAは、発現ベクターに入れられ、次いで、発現ベクターが存在しなければ免疫グロブリンタンパク質を産生しない大腸菌、COS細胞、CHO細胞又は骨髄細胞等の宿主細胞にトランスフェクトされて、抗体を合成する。ヒトのL及びH鎖のコード配列を、対応する非ヒト(例えば、マウス)のH及びL定常領域の代わりに用いることによりDNAを改変してもよい。例えば、Morrison;PNAS 81,6851(1984年)を参照されたい。したがって、本発明の別の実施形態は、ヒトの定常領域(IgGアイソタイプ、例えば、IgG1であってよい)に融合している、配列番号2、6、又は10の配列を有するVHドメインと、配列番号4、8、又は12の配列を有するVLとを含むキメラ抗体を提供する。
本発明の特定の実施形態では、抗原結合断片である治療抗体を提供する。このような断片は、上記抗体のFab、Fd、Fab’、F(ab’)2、Fv、ScFv断片等のインタクトな抗体及び/又はヒト化抗体及び/又はキメラ抗体の機能的抗原結合断片であり得る。定常領域を欠く断片は、古典的経路によって補体を活性化するか又は抗体依存性細胞性細胞傷害を媒介する能力を欠く。従来より、このような断片は、例えば、パパイン消化によりインタクトな抗体をタンパク質分解することにより作製されるが(例えば、国際公開第94/29348号パンフレットを参照されたい)、組換え技術により形質転換された宿主細胞から直接産生させてもよい。ScFvの産生については、Birdら;(1988年)Science,242,423−426を参照されたい。更に、抗体断片は、下記のような様々な改変技術を使用して作製してもよい。
ヘテロコンジュゲート抗体は、本発明の実施形態を形成する誘導体である。ヘテロコンジュゲート抗体は、任意の便利な架橋法を使用して形成される、2つの共有結合した抗体で構成される。米国特許第4,676,980号を参照されたい。
また、本発明の抗体は、定常領域に任意の他の修飾を組み込んでもよい。例えば、これらの定常領域の保存されている位置における抗体のグリコシル化は、抗体機能、特に、上記のようなエフェクター機能に対する重要な作用を有することが知られている。例えば、Boydら(1996年),Mol.Immunol.32,1311−1318を参照されたい。1以上の炭水化物部分が付加、置換、欠失、又は修飾されている本発明の治療用抗体のグリコシル化変異体が考えられる。アスパラギン−X−セリン又はアスパラギン−X−トレオニンモチーフを導入すると炭水化物部分が酵素的に結合する可能性のある部位が作製されるので、抗体のグリコシル化を操作するために用いることができる。Rajuら(2001年)Biochemistry 40,8868−8876では、β−1,4−ガラクトシルトランスフェラーゼ及び/又はα,2,3シアリルトランスフェラーゼを用いる再ガラクトシル化及び/又は再シアリル化のプロセスを通してTNFR−IgGイムノアドヘシンの末端シアリル化が増加した。末端のシアリル化を増加させると、免疫グロブリンの半減期が延長されると考えられる。ほとんどの糖タンパク質と同様に、抗体は、典型的に、グリコフォームの混合物として自然界では産生される。抗体が真核生物、特に哺乳類細胞において産生されるとき、この混合物は特に明らかである。規定のグリコフォームを製造するために様々な方法が開発されている。Zhangら Science(2004年),303,371,Searsら,Science,(2001年)291,2344,Wackerら(2002年)Science,298 1790,Davisら(2002年)Chem.Rev.102,579,Hangら(2001年)Acc.Chem.Res 34,727を参照されたい。したがって、本発明は、規定の数(例えば、7以下、例えば、5以下、例えば、2つ又は1つ)の前記抗体のグリコフォームを含む本明細書に記載する複数の治療用抗体(例えばIgG1等のIgGアイソタイプであり得る)に関する。
本発明の抗体は、ヤギ(Pollockら(1999年),J.Immunol.Methods 231:147−157を参照されたい)、ニワトリ(Morrow KJJ(2000年)Genet.Eng.News 20:1−55を参照されたい)、マウス(Pollockら 上記を参照されたい)又は植物(Doran PM,(2000年)Curr.Opinion Biotechnol.11,199−204,Ma JK−C(1998年),Nat.Med.4;601−606,Baez Jら,BioPharm(2000年)13:50−54,Stoger Eら;(2000年)Plant Mol.Biol.42:583−590)等のトランスジェニック生物で産生させることができる。また、抗体は、化学合成によって作製することもできる。しかし、本発明の抗体は、典型的には、当業者に周知の組換え細胞培養技術を使用して作製される。抗体をコードするポリヌクレオチドを単離し、更に宿主細胞におけるクローニング(増幅)又は発現のためにプラスミド等の複製可能なベクターに挿入する。特に宿主細胞がCHO又はNS0である場合、1つの有用な発現系は、グルタミン酸合成酵素系(例えば、Lonza Biologicsにより販売されている)である(以下を参照されたい)。抗体をコードするポリヌクレオチドは、従来の手順(例えば、オリゴヌクレオチドプローブ)を使用して容易に単離され、配列決定される。使用することができるベクターとしては、プラスミド、ウイルス、ファージ、トランスポゾン、ミニ染色体が挙げられ、この中でもプラスミドが典型的な実施形態である。一般的に、このようなベクターは、発現を促進するために軽鎖及び/又は重鎖ポリヌクレオチドに機能的に連結しているシグナル配列、複製開始点、1以上のマーカー遺伝子、エンハンサーエレメント、プロモーター及び転写終結配列を更に含む。軽鎖及び重鎖をコードするポリヌクレオチドを別々のベクターに挿入し、(例えば、形質転換、トランスフェクション、エレクトロポレーション、又は形質導入により)同時に又は順次同じ宿主細胞に導入してもよく、必要に応じて、このような導入前に重鎖及び軽鎖の両方を同じベクターに挿入してもよい。
本発明の抗体は、成熟タンパク質のN末端に、特異的な切断部位を有する異種のシグナル配列を含む融合タンパク質として作製してもよい。シグナル配列は、宿主細胞により認識され、プロセシングされなければならない。原核生物の宿主細胞の場合、シグナル配列は、アルカリホスファターゼ、ペニシリナーゼ又は熱安定性エンテロトキシンIIリーダーであり得る。酵母分泌については、シグナル配列は、例えば酵母インベルターゼリーダー、α因子リーダー又は酸性ホスファターゼリーダーであり得る。例えば、国際公開第90/13646号パンフレットを参照されたい。哺乳類細胞系では、単純ヘルペスgDシグナル及びネイティブな免疫グロブリンシグナル配列(ヒトIg重鎖等)等のウイルス分泌リーダーが利用可能である。典型的に、シグナル配列は、リーディングフレームにおいて本発明の抗体をコードするポリヌクレオチドにライゲーションされる。
複製開始点は、ほとんどのグラム陰性菌に好適なpBR322、ほとんどの酵母に好適な2μプラスミド、ほとんどの哺乳類細胞に好適なSV40、ポリオーマ、アデノウイルス、VSV又はBPV等の様々なウイルス開始点が当技術分野において周知である。一般的に、複製開始点の成分は、大腸菌におけるベクターの増殖が必要でない限り、哺乳類の発現ベクターに組み込まれる必要はない。しかし、SV40 oriは、初期プロモータを含有しているため用いてもよい。
典型的な選択遺伝子は、(a)例えば、アンピシリン、ネオマイシン、メトトレキセート又はテトラサイクリン等の抗生物質又は他の毒素に対する耐性を付与するタンパク質、又は(b)栄養要求性の欠損を補完したり複合培地では入手不可能な栄養素を供給したりするタンパク質をコードするか、又は(c)これら両方の組合せである。選択スキームは、ベクターを含有しない宿主細胞の増殖を妨げることを含んでいてもよい。本発明の治療用抗体をコードする遺伝子による形質転換が成功した細胞は、例えば、同時に送達された選択マーカーにより付与された薬剤耐性により生存する。一例は、DHFR陰性宿主株において形質転換体が作製されるDHFR選択マーカーである(例えば、Page及びSydenham 1991年 Biotechnology 9:64−68を参照されたい)。この系では、DHFR遺伝子を本発明の抗体のポリヌクレオチド配列と共に同時送達し、次いで、ヌクレオシドの引抜き(withdrawal)によりDHFR陽性細胞を選択する。必要に応じて、DHFR阻害剤であるメトトレキセートを使用して、DHFR遺伝子を増幅させる形質転換体を選択する。DHFR遺伝子を本発明の抗体をコードする配列又はその機能的誘導体に機能的連結させることにより、DHFR遺伝子を増幅させて、対象となる望ましい抗体配列を同時に増幅させる。CHO細胞は、このDHFR/メトトレキセート選択に特に有用な細胞株であり、DHFR系を使用して宿主細胞を増幅及び選択する方法は当技術分野において十分に確立されている。Kaufman R.J.ら J.Mol.Biol.(1982年)159,601−621を参照されたい。概説については、Werner RG,Noe W,Kopp K,Schluter M,”Appropriate mammalian expression systems for biopharmaceuticals”,Arzneimittel−Forschung.48(8):870−80,1998年8月を参照されたい。更なる例は、グルタミン酸合成酵素発現系(Lonza Biologics)である。酵母で使用するのに適した選択遺伝子は、trp1遺伝子である。Stinchcombら Nature 282,38,1979年を参照されたい。
本発明の抗体を発現させるのに適したプロモーターは、前記抗体をコードするDNA/ポリヌクレオチドに機能的に連結される。原核生物の宿主のプロモーターとしては、phoAプロモーター、β−ラクタマーゼ及びラクトースプロモーター系、アルカリホスファターゼ、トリプトファン、及びTac等のハイブリッドプロモーターが挙げられる。酵母細胞で発現させるのに好適なプロモーターとしては、特に、3−ホスホグリセリン酸キナーゼ又は他の解糖系酵素、例えば、エノラーゼ、グリセルアルデヒド3リン酸デヒドロゲナーゼ、ヘキソキナーゼ、ピルビン酸デカルボキシラーゼ、ホスホフクルトキナーゼ、グルコース6リン酸イソメラーゼ、3−ホスホグリセリン酸ムターゼ、及びグルコキナーゼが挙げられる。誘導性酵母プロモーターとしては、特に、アルコール脱水素酵素2、イソチトクロームC、酸性ホスファターゼ、メタロチオネイン、及び窒素代謝又はマルトース/ガラクトース利用に関与する酵素が挙げられる。
適切な場合、例えば、高等真核生物で発現させる場合、上記プロモーターに位置することが見出されているものの代わり又はそれに加えて、更なるエンハンサーエレメントを含んでもよい。好適な哺乳類のエンハンサー配列としては、グロビン、エラスターゼ、アルブミン、フェトプロテイン、メタロチオニン及びインスリン由来のエンハンサーエレメントが挙げられる。あるいは、SV40エンハンサー、サイトメガロウィルス早期プロモーターエンハンサー、ポリオーマエンハンサー、バキュウイルスエンハンサー又はマウスIgG2a遺伝子座等の真核細胞ウイルスに由来するエンハンサーエレメントを用いてもよい(国際公開第04/009823号パンフレットを参照されたい)。このようなエンハンサーは、典型的に、ベクターにおいてプロモーターの上流の部位に位置するが、例えば、非翻訳領域内又はポリアデニル化シグナルの下流等、いずこに位置してもよい。エンハンサーの選択及び配置は、発現に使用される宿主細胞との好適な適合性に基づいてよい。
真核細胞系では、ポリアデニル化シグナルは、本発明の抗体をコードするポリヌクレオチドに機能的に連結される。このようなシグナルは、典型的に、オープンリーディングフレームの3’に配置される。哺乳類系では、非限定的なシグナルとしては、成長ホルモン、伸長因子1アルファ及びウイルスの(例えば、SV40)遺伝子、又はレトロウイルスの長い末端反復配列に由来するシグナルが挙げられる。酵母系では、ポリアデニル化/終結シグナルの非限定的な例としては、ホスホグリセリン酸キナーゼ(PGK)及びアルコール脱水素酵素1(ADH)遺伝子に由来するものが挙げられる。原核細胞系では、ポリアデニル化シグナルは、典型的には必要とされず、その代わりに、より短く且つより明確なターミネーター配列が通常使用される。ポリアデニル化/終結配列の選択は、発現に使用される宿主細胞との好適な適合性に基づいてよい。
上記に加えて、収率を高めるために使用することができる他の機構としては、クロマチンリモデリングエレメント、イントロン、及び宿主細胞に特異的なコドン修飾が挙げられる。本発明の抗体のコドン使用頻度を変化させて、転写物及び/又は生成物の収率を高めるように宿主細胞のコドンバイアスを適応させてもよい(例えば、Hoekemaら Mol Cell Biol 1987年 7(8):2914−24)。コドンの選択は、発現に使用される宿主細胞との好適な適合性に基づいてよい。
本発明の抗体をコードするベクターをクローニング又は発現させるのに好適な宿主細胞は、例えば、原核生物、酵母、又は高等真核生物の細胞である。好適な原核細胞としては、真性細菌が挙げられ、例えば、腸内細菌科、例えば大腸菌(E.coli)(例えば、ATCC31,446;31,537;27,325)等のエシェリキア属(Escherichia)、エンテロバクター属(Enterobacter)、エルウィニア属(Erwinia)、クレブシエラ属(Klebsiella)、プロテウス属(Proteus)、例えばネズミチフス菌(Salmonella typhimurium)等のサルモネラ属(Salmonella)、例えば霊菌(Serratia marcescans)等のセラシア属(Serratia)、及び赤痢菌属(Shigella)に加えて、枯草菌(B.subtilis)及びリケニホルミス菌(B.licheniformis)等のバチルス属(Bacilli)(旧東独国特許第266 710号明細書を参照されたい)、緑膿菌(P.aeruginosa)等のシュードモナス属(Pseudomonas)、及びストレプトミセス属(Streptomyces)等である。酵母宿主細胞の中でも出芽酵母(Saccharomyces cerevisiae)、分裂酵母(schizosaccharomyces pombe)、クリベロマイセス属(Kluyveromyces)(例えば、ATCC16,045;12,424;24178;56,500)、ヤロウイア属(yarrowia)(欧州特許第402,226号明細書)、ピキア・パストリス(Pichia Pastoris)(欧州特許第183,070号明細書、Pengら(2004年)J.Biotechnol.108:185−192も参照されたい)、カンジダ属(Candida)、トリコデルマ・リーシア(Trichoderma reesia)(欧州特許第244 234号明細書)、ペニシリン、トリポクラジウム属(Tolypocladium)、並びに偽巣性コウジ菌(A.nidulans)及びクロコウジカビ(A.niger)等のアスペルギルス属(Aspergillus)の宿主も考えられる。
本発明の治療用抗体をコードするベクターで形質転換された宿主細胞は、当業者に公知の任意の方法により培養することができる。宿主細胞は、スピナーフラスコ、振盪フラスコ、ローラーボトル、又は中空ファイバー系で培養することができるが、大規模に製造する場合、特に懸濁培養には撹拌槽型反応器又は袋型反応器(例えば、Wave Biotech,Somerset,New Jersey USA)を使用することが好ましい。典型的に、撹拌槽は、例えば、スパージャー、バッフル、又は低剪断インペラ等を用いるエアレーションに適応する。気泡塔及びエアリフト反応器については、空気又は酸素の気泡を用いて直接エアレーションを行ってもよい。宿主細胞を無血清培地で培養する場合、pluronic F−68等の細胞保護剤を培地に添加して、エアレーションプロセスに起因する細胞の損傷を防ぐのを補助することが好ましい。宿主細胞の特徴に応じて、足場依存性細胞株に対する成長基材としてマイクロキャリアを使用してもよく、細胞を懸濁培養に適応させてもよい(これが典型的である)。宿主細胞、特に脊椎動物の宿主細胞の培養は、バッチ、フェッドバッチ、反復バッチ処理(Drapeauら(1994年)cytotechnology 15:103−109を参照されたい)、延長バッチ処理、又は灌流培養等の様々な操作方式を利用してよい。組換え技術を用いて形質転換された哺乳類宿主細胞は、ウシ胎仔血清(FCS)を含む培地等の血清含有培地で培養してもよいが、このような宿主細胞は、Keenら(1995年)Cytotechnology 17:153−163に開示されているような合成無血清培地、又はProCHO−CDM若しくはUltraCHO(商標)(Cambrex NJ,USA)等の市販培地で培養されることが好ましく、これら培地には、必要な場合、グルコース等のエネルギー源及び組換えインスリン等の合成成長因子が添加される。宿主細胞の無血清培養は、これら細胞が無血清条件における成長に適応していることを必要とする場合がある。1つの適応アプローチは、血清含有培地中でこのような宿主細胞を培養し、宿主細胞が無血清条件に適応できるようになるように培養培地の80%を無血清培地に繰り返し交換することである(例えば、Scharfenberg Kら(1995年)Animal Cell technology:Developments towards the 21st century(Beuvery E.C.ら編),pp619−623,Kluwer Academic publishers)。
上記の通り精製された本発明の抗体の調製物は、上に概説したもの等のヒトの疾患及び障害の治療に使用するための医薬組成物に配合してもよい。典型的に、このような組成物は、公知であり且つ許容し得る薬務により要求される薬学的に許容し得る(すなわち、不活性)担体を更に含む。例えば、Remingtons Pharmaceutical Sciences,第16版(1980年)Mack Publishing Co.を参照されたい。このような担体の例としては、好適なバッファによりpH5〜8に緩衝されている生理食塩水、リンゲル液、又はデキストロース溶液等の無菌担体が挙げられる。(例えば、静脈内、腹腔内、皮内、皮下、筋肉内、門内に)注射又は持続注入するための医薬組成物は、目に見える粉粒体を含まないことが好ましく、0.1mg〜10gの治療用抗体、典型的には、5mg〜25mgの抗体を含み得る。このような医薬組成物を調製する方法は、当業者に周知である。1つの実施形態では、医薬組成物は、単位剤形中に本発明の治療用抗体を0.1mg〜10g含み、任意で使用説明書を共に含む。本発明の医薬組成物は、当業者に周知であるか又は当業者に明らかである方法に従って、投与前に再構成するために凍結乾燥(フリーズドライ)してもよい。本発明の実施形態がIgG1アイソタイプを有する本発明の抗体を含む場合、銅触媒によるこのアイソタイプの抗体の分解の程度を低下させるために医薬組成物にクエン酸塩(例えば、クエン酸ナトリウム)又はEDTA又はヒスチジン等の銅のキレート化剤を添加してもよい。欧州特許第0612251号明細書を参照されたい。
本発明は、ヒトのIL−8、Gro−アルファ、Gro−ベータ、Gro−ガンマ、GCP−2、NAP2及びENA−78からなる群より選択される4以下の抗原に結合する能力を有する抗体に関する。また、本発明は、ヒトのIL−8、Gro−アルファ、Gro−ベータ、Gro−ガンマ、GCP−2、NAP2及び/又はENA−78のうちの1以上の量の増加又は不均衡を特徴とする疾患又は障害、特に、COPD、変形性関節症、関節リウマチ、びらん性関節炎、喘息、アテローム性動脈硬化、炎症性腸疾患(潰瘍性大腸炎を含む)、乾癬、移植拒絶反応、痛風、癌、急性肺傷害、急性肺疾患、敗血症、ARDS、末梢動脈疾患、全身性硬化症、新生児性呼吸窮迫症候群、喘息及びCOPDの増悪、嚢胞性線維症、びまん性汎細気管支炎、再潅流傷害、及び/又は子宮内膜症を、前記抗体、前記抗体を含んでなる医薬組成物を用いて治療する方法、並びに前記抗体、前記抗体を含んでなる医薬組成物を製造する方法に関する。
複数の方法及びスキームを使用して、本発明のmAbを作製するためにマウスを免疫する。完全又は不完全フロイントアジュバント(cFA又はiFA)中で混合された多重抗原性ペプチド(MAP)及び/又はインタクトな標的ケモカイン(IL−8、Gro−α、−β、−γ及びENA−78)の様々な混合物を用い、改良反復免疫化多重部位(RIMMS)プロトコールに従って、SJL/JOrlCrlマウス系統においてmAbを作製した。
上記タイムラインによる2つの異なる免疫化プロトコールにより、本発明の幾つかのmAbを作製した:
1.最初の免疫化(0日目)は、cFA中で混合された全ての標的ケモカイン(各10μg)を複数回皮下注射(後四半身、背中、及び首)することからなる。続く4回の追加免疫は、iFA中で混合された全ての標的ケモカインの混合物(各10μg)からなっていた。5回目及びその後の全ての追加免疫は、iFA中における全ての標的ケモカイン及び5つ全ての直鎖状MAP(各10μg)のカクテルからなっていた。屠殺及び融合の3日前の最後の追加免疫は、PBS中における全ての標的ケモカイン及び直鎖状MAPからなっており、腹腔内(IP)注入を介して送達された。
2.最初の免疫化(0日目)は、cFA中で混合された5つ全ての直鎖状MAP(各10μg)を複数回皮下注射(後四半身、背中、及び首)することからなる。続く4回の追加免疫は、iFA中で混合された5つ全ての直鎖状MAPの混合物(各10μg)からなっていた。5回目及びその後の全ての追加免疫は、iFA中における5つ全ての直鎖状MAP及び全ての標的ケモカイン(各10μg)のカクテルからなっていた。屠殺及び融合の3日前の最後の追加免疫は、PBS中における5つ全ての直鎖状MAP及び全ての標的ケモカイン(各10μg)からなっており、腹腔内(IP)注入を介して送達された。
hCXCR2及びGα16でトランスフェクトされ、これらを安全に発現しているCHO−K1細胞におけるELR+ケモカイン誘導性[Ca2+]i−動員に対する抗体の中和作用を機能的に特性評価するために、マイクロタイタープレートに基いたカルシウム動員アッセイ、FLIPR(蛍光イメージングプレートリーダー、Molecular Devices,Sunnyvale CA,[Schroeder,1996])を使用した。
Sarau HM,Ames RS,Chambers J,Ellis C,Elshourbagy N,Foley JJら Identification,molecular cloning,expression,and characterization of a cysteinyl leukotrien receptor.Mol Pharmacol.1999;56:657−663.
配列番号1
5D2.2D10重鎖
QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYIFTAYGMSWVKQAPGKGLKWMGWINTYSGVPTYADHFKGRFDFSLETSASTAYLQINNLKNEDTATYFCARPTVVDPWYFDVWGTGTTVTVSS
配列番号2
5D2.2D10軽鎖
DIQMTQSPASLSVSVGETVTITCRASENIYSNLAWYQQKQGKSPQLLVYAATNLGDGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDFGSYYCQHFWTTPWTFGGGTKLEIK
配列番号3
1A1.4C6重鎖
EVQLQQSGPELVKPGASVKISCKASGYTFIDYYMNWVKQSQGKSLEWIGDVNPDDGDTTYNQQFKDKATLTVDKSSSTAYMELRSLTSEDSAVYYCARDDRTSGYFDVWGTGTTVTVSS
配列番号4
1A1.4C6軽鎖
DIQMTQSTSSLSASLGDRVTISCRASQDIRNYLNWFQQKPDGTVKLLIYYTSIVHSRVPSRFSGSGSGTDYSLTINNLDQEDIATYFCQQANTLPWTFGGGTKLETK
配列番号5
7A12.1F10重鎖
QVQLQQSGAELVKPGASVKLSCKASGYIFTSNDINWVRQRPEQGLEWIGWIFPGDNSTKFNEKFRDKATLTTDKSSSTAYMQLSGLTSEDSAVYFCATFYGSTYGYYFDYWGQGTTLTVSS
配列番号6
7A12.1F10軽鎖
DIVMTQSHKFMSTSVGDRVSITCKASQDVGTAVAWYQQKPGQSPKLLIYWTDTRHTGVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVESEDCVDYFCHQYNNYPLTFGAGTKLELK
配列番号7
9D12.1H4重鎖
EVQLQQSGPELVKPGASVRMSCKASGNTVIDYNIHWVKQSQGKSLEWIGYINPNSGGTGYNEKFKDKATLTINKSSSTAHMDLRSLTSEDSAVYYCTRFDFWGQGTTLTVSS
配列番号8
9D12.1H4軽鎖
DVLMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSTQSIVPVNGNTHLEWYLHKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYYCFQASHVPWTFGGGTKLEIK
配列番号9
2B12.1E1重鎖
EVQLQQSGPELVKPGASVKISCKASGYTFTDYYMNWVKQSHGKSLEWIGDINPNNGNTNYNQKFKGKATLTVDKSSSTAYMEFRSLTSEDSAVYYCAGLGRIFDYWGQGTTLTVSS
配列番号10
2B12.1E1軽鎖
ENVLTQSPAIMSASPGEKVTMTCRASSSVSSTFLHWYQQKSGASPKLWIYSTSDLASGVPARFSGSGSGTSYSLTISSVEAEDAATYYCQQYSGYPWTFGGGTKLEIK
配列番号11
17D1.1D2重鎖
EVQLQQSGPELVKPGASVKISCKASGYTFTDYYMNWLRQSHGKSLEWIGDINPNNGGTNYNQKFKNKATLTVDKSSSTAYMELRSLTSEDSAVFYCAGLGRIFDYWGQGTTLTVSS
配列番号12
17D1.1D2軽鎖
ENVLTQSPAIMSAFPGEKVTMTCRASSSVSSTYLHWYQQKSGASPKLWIYSTSDLASGVPARFSGSGSGTSYSLTISSVEAEDAATYYCQQFSGYPWTFGGGTKLEIK
配列番号13
1L132.23重鎖
QVQLQQPGAELVKPGASVKVSCKASGYTFTNYWMHWVRQRPGQGLEWIGRIHPSDNDTNYNQKFKDKATLTVDKSSNTAYMQLSSLTSEDSAVYYCAIGVYDGFIGLWGQGTSVTVSS
配列番号14
1L132.23軽鎖
DIQMTQSPASQSASLGESVTITCLASQTIGTWLAWYQQKPGKSPQLLIYAATRLADGVPSRFSGSGSGTKFSFKISSLQAEDFVSYYCQQLSSTPWTFGGGTKLEIK
配列番号15
1L351.17重鎖
QAYLQQSGAELVRPGASVKMSCKASGYTFTSYNMHWVKQTPRQGLEWIGAIYPGNGDTSYNQKFKGKATLTVDKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYFCARDLYYFDYWGQGTTLTVSS
配列番号16
1L351.17軽鎖
ENVLTQSPAIMSAFPGEKVTMTCRASSSVSSTYLHWYQQKSGASPKLWIYSTSDLASGVPARFSGSGSGTSYSLTISSVEAEDAATYYCQQFSGYPWTFGGGTKLEIK
配列番号17
2X352.3重鎖
QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTLTYYGIHWVTQTPGKGLNWMGWINTNTGEPTYVEEFKGRFAFSLETSASTAYLQITDLKNEDTATYFCAKATYDGYSDYWGQGTTLTVSS
配列番号18
2X352.3軽鎖
DIQMTQSPASLSVSVGESVTITCRASENIYSNLAWYQQKQGKSPQLLVYDATNLAHGVPSRFSGSGSGTQFSLRINSLQSEDFGSYYCQHFWGTPLTFGAGTRLELK
配列番号19
2X810.3重鎖
QIQLQQSGPEVVKPGASVKISCKASGYIFTDNYIDWVQQRPGQGLEWIGWIFPGSGNTKYNEKFKGKATLTVDTFSSTAYMQLSSLTSEDTAVYFCAREIDYDYDGFFDVWGAGTTVTVSS
配列番号20
2X810.3軽鎖
DIVMTPSHTFMSTSVGDRVIITSKASQDVGSAVAWYQQKPGQSPTLLIYWASTRHTGVPDRFTGSGSGTDFTLTISNLQSEDLADYFCQQYSTYPLTFGAGTKLELK
配列番号21
2X907.15重鎖
EVKLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFSDYYMYWVRQSPEKRLEWVATVSDVGSYTYYSGSVRGRFTISRDNAKNNLYLQMSSLQSEDTAIYYCSRDRTLDYWGQGTSVIVTS
配列番号22
2X907.15軽鎖
QIVLTQSPAIMSASPGEKVTITCNASSSVSYMHWFQQKPGTSPKLWIYSTSNLASGVPARFSGSGSGTSYSLTISRMEAEDAATYYCHQRSSFPPTFGGGTKLEIK
配列番号23
AYGMS
配列番号24
WINTYSGVPTYADHFKG
配列番号25
PTVVDPWYFDV
配列番号26
RASENIYSNLA
配列番号27
AATNLGD
配列番号28
QHFWTTPWT
配列番号29
DYYMN
配列番号30
DVNPDDGDTTYNQQFKD
配列番号31
DDRTSGYFDV
配列番号32
RASQDIRNYLN
配列番号33
YTSIVHS
配列番号34
QQANTLPWT
配列番号35
SNDIN
配列番号36
WIFPGDNSTKFNEKFRD
配列番号37
FYGSTYGYYFDY
配列番号38
KASQDVGTAVA
配列番号39
WTDTRHT
配列番号40
HQYNNYPLT
配列番号41
DYNIH
配列番号42
YINPNSGGTGYNEKFKD
配列番号43
FDF
配列番号44
RSTQSIVPVNGNTHLE
配列番号45
KVSNRFS
配列番号46
FQASHVPWT
配列番号47
DYYMN
配列番号48
DINPNNGNTNYNQKFKG
配列番号49
LGRIFDY
配列番号50
RASSSVSSTFLH
配列番号51
STSDLAS
配列番号52
QQYSGYPWT
配列番号53
DYYMN
配列番号54
DINPNNGGTNYNQKFKN
配列番号55
LGRIFDY
配列番号56
RASSSVSSTYLH
配列番号57
STSDLAS
配列番号58
QQFSGYPWT
配列番号59
NYWMH
配列番号60
RIHPSDNDTNYNQKFKD
配列番号61
GVYDGFIGL
配列番号62
LASQTIGTWLA
配列番号63
AATRLAD
配列番号64
QQLSSTPWT
配列番号65
SYNMH
配列番号66
AIYPGNGDTSYNQKFKG
配列番号67
DLYYFDY
配列番号68
RASSSVSSTYLH
配列番号69
STSDLAS
配列番号70
QQFSGYPWT
配列番号71
YYGIH
配列番号72
WINTNTGEPTYVEEFKG
配列番号73
ATYDGYSDY
配列番号74
RASENIYSNLA
配列番号75
DATNLAH
配列番号76
QHFWGTPLT
配列番号77
DNYID
配列番号78
WIFPGSGNTKYNEKFKG
配列番号79
EIDYDYDGFFDV
配列番号80
KASQDVGSAVA
配列番号81
WASTRHT
配列番号82
QQYSTYPLT
配列番号83
DYYMY
配列番号84
TVSDVGSYTYYSGSVRG
配列番号85
DRTLDY
配列番号86
NASSSVSYMH
配列番号87
STSNLAS
配列番号88
HQRSSFPPT
Claims (4)
- 以下の重鎖及び軽鎖の可変領域を含んでなる抗体:
(a)それぞれ、配列番号23、24、及び25、並びに配列番号26、27、及び28のCDRアミノ酸配列、又は配列番号23、24、25、26、27、及び28に列挙する配列の保存的配列修飾であり得る前記CDR配列のうちの1以上、あるいは
(b)それぞれ、配列番号29、30、及び31、並びに配列番号32、33、及び34のCDRアミノ酸配列、又は配列番号29、30、31、32、33、及び34に列挙する配列の保存的配列修飾であり得る前記CDR配列のうちの1以上、あるいは
(c)それぞれ、配列番号35、36、及び37、並びに配列番号38、39、及び40のCDRアミノ酸配列、又は配列番号35、36、37、38、39、及び40に列挙する配列の保存的配列修飾であり得る前記CDR配列のうちの1以上、あるいは
(d)それぞれ、配列番号41、42、及び43、並びに配列番号44、45、及び46のCDRアミノ酸配列、又は配列番号41、42、43、44、45、及び46に列挙する配列の保存的配列修飾であり得る前記CDR配列のうちの1以上、あるいは
(e)それぞれ、配列番号47、48、及び49、並びに配列番号50、51、及び52のCDRアミノ酸配列、又は配列番号47、48、49、50、51、及び52に列挙する配列の保存的配列修飾であり得る前記CDR配列のうちの1以上、あるいは
(f)それぞれ、配列番号53、54、及び55、並びに配列番号56、57、及び58のCDRアミノ酸配列、又は配列番号53、54、55、56、57、及び58に列挙する配列の保存的配列修飾であり得る前記CDR配列のうちの1以上、あるいは
(g)それぞれ、配列番号59、60、及び61、並びに配列番号62、63、及び64のCDRアミノ酸配列、又は配列番号59、60、61、62、63、及び64に列挙する配列の保存的配列修飾であり得る前記CDR配列のうちの1以上、あるいは
(h)それぞれ、配列番号65、66、及び67、並びに配列番号68、69、及び70のCDRアミノ酸配列、又は配列番号65、66、67、68、69、及び70に列挙する配列の保存的配列修飾であり得る前記CDR配列のうちの1以上、あるいは
(i)それぞれ、配列番号71、72、及び73、並びに配列番号74、75、及び76のCDRアミノ酸配列、又は配列番号71、72、73、74、75、及び76に列挙する配列の保存的配列修飾であり得る前記CDR配列のうちの1以上、あるいは
(j)それぞれ、配列番号77、78、及び79、並びに配列番号80、81、及び82のCDRアミノ酸配列、又は配列番号77、78、79、80、81、及び82に列挙する配列の保存的配列修飾であり得る前記CDR配列のうちの1以上、あるいは
(k)それぞれ、配列番号83、84、及び85、並びに配列番号86、87、及び88のCDRアミノ酸配列、又は配列番号83、84、85、86、87、及び88に列挙する配列の保存的配列修飾であり得る前記CDR配列のうちの1以上。 - 請求項1に記載の可変重鎖または軽鎖をコードするヌクレオチド配列を含んでなる、発現ベクター。
- 請求項1に記載の抗体を産生する、組換え宿主細胞。
- 治療上有効な量の請求項1に記載の抗体を用いて、ヒト患者におけるCOPD、変形性関節症、関節リウマチ、びらん性関節炎、喘息、アテローム性動脈硬化、炎症性腸疾患(潰瘍性大腸炎を含む)、乾癬、移植拒絶反応、痛風、癌、急性肺傷害、急性肺疾患、敗血症、ARDS、末梢動脈疾患、全身性硬化症、新生児性呼吸窮迫症候群、喘息及びCOPDの増悪、嚢胞性線維症、びまん性汎細気管支炎、再潅流傷害、又は子宮内膜症を治療又は予防する方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US30263610P | 2010-02-09 | 2010-02-09 | |
US61/302,636 | 2010-02-09 | ||
PCT/US2011/024123 WO2011100271A2 (en) | 2010-02-09 | 2011-02-09 | Novel uses |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2013518606A true JP2013518606A (ja) | 2013-05-23 |
JP2013518606A5 JP2013518606A5 (ja) | 2013-12-05 |
Family
ID=44368403
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012552935A Pending JP2013518606A (ja) | 2010-02-09 | 2011-02-09 | 新規使用 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20120315267A1 (ja) |
EP (1) | EP2534256A4 (ja) |
JP (1) | JP2013518606A (ja) |
CA (1) | CA2789416A1 (ja) |
WO (1) | WO2011100271A2 (ja) |
Cited By (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2018025982A1 (ja) * | 2016-08-05 | 2018-02-08 | 中外製薬株式会社 | Il-8関連疾患の治療用又は予防用組成物 |
US10472623B2 (en) | 2008-04-11 | 2019-11-12 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule capable of binding two or more antigen molecules repeatedly |
US10604561B2 (en) | 2016-09-16 | 2020-03-31 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-dengue virus antibodies, polypeptides containing variant Fc regions, and methods of use |
US10738111B2 (en) | 2014-12-19 | 2020-08-11 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-myostatin antibodies, polypeptides containing variant Fc regions, and methods of use |
US10919953B2 (en) | 2012-08-24 | 2021-02-16 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | FcgammaRIIB-specific Fc region variant |
US11046784B2 (en) | 2006-03-31 | 2021-06-29 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods for controlling blood pharmacokinetics of antibodies |
US11180548B2 (en) | 2015-02-05 | 2021-11-23 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods of neutralizing IL-8 biological activity |
US11236168B2 (en) | 2012-08-24 | 2022-02-01 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Mouse FcγammaRII-specific Fc antibody |
US11248053B2 (en) | 2007-09-26 | 2022-02-15 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method of modifying isoelectric point of antibody via amino acid substitution in CDR |
US11267868B2 (en) | 2013-04-02 | 2022-03-08 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Fc region variant |
US11359009B2 (en) | 2015-12-25 | 2022-06-14 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-myostatin antibodies and methods of use |
US11891432B2 (en) | 2018-03-15 | 2024-02-06 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-dengue virus antibodies having cross-reactivity to Zika virus and methods of use |
US11891434B2 (en) | 2010-11-30 | 2024-02-06 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule capable of binding to plurality of antigen molecules repeatedly |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
TWI612059B (zh) * | 2013-03-15 | 2018-01-21 | 美國禮來大藥廠 | 泛-ELR<sup>+</sup>CXC趨化因子抗體 |
WO2014146575A1 (en) * | 2013-03-19 | 2014-09-25 | Beijing Shenogen Pharma Group Ltd. | Antibodies and methods for treating estrogen receptor-associated diseases |
KR20160021125A (ko) * | 2013-05-17 | 2016-02-24 | 쌩뜨레 나티오날 데 라 르세르쉬 생띠끄 (씨. 엔. 알. 에스) | 항-cxcl1, cxcl7 및 cxcl8 항체 및 이들의 용도 |
US11485781B2 (en) * | 2017-08-17 | 2022-11-01 | Massachusetts Institute Of Technology | Multiple specificity binders of CXC chemokines |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008523083A (ja) * | 2004-12-08 | 2008-07-03 | イムノメディクス, インコーポレイテッド | 炎症性疾患および免疫調節不全疾患、感染性疾患、病的血管新生およびがんの免疫療法および検出のための方法および組成物 |
US7612181B2 (en) * | 2005-08-19 | 2009-11-03 | Abbott Laboratories | Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof |
CL2008001071A1 (es) * | 2007-04-17 | 2009-05-22 | Smithkline Beecham Corp | Metodo para obtener anticuerpo penta-especifico contra il-8/cxcl8, gro-alfa/cxcl1, gro-beta/cxcl2), gro-gama/cxcl3 y ena-78/cxcl5 humanas; anticuerpo penta-especifico; proceso de produccion del mismo; vector, hbridoma o celela que lo comprende; composicion farmceutica; uso para tratar copd, otras enfermedades. |
-
2011
- 2011-02-09 CA CA2789416A patent/CA2789416A1/en not_active Abandoned
- 2011-02-09 US US13/577,923 patent/US20120315267A1/en not_active Abandoned
- 2011-02-09 JP JP2012552935A patent/JP2013518606A/ja active Pending
- 2011-02-09 WO PCT/US2011/024123 patent/WO2011100271A2/en active Application Filing
- 2011-02-09 EP EP11742704.7A patent/EP2534256A4/en not_active Withdrawn
Cited By (23)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US11046784B2 (en) | 2006-03-31 | 2021-06-29 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods for controlling blood pharmacokinetics of antibodies |
US11248053B2 (en) | 2007-09-26 | 2022-02-15 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method of modifying isoelectric point of antibody via amino acid substitution in CDR |
US11371039B2 (en) | 2008-04-11 | 2022-06-28 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule capable of binding to two or more antigen molecules repeatedly |
US10472623B2 (en) | 2008-04-11 | 2019-11-12 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule capable of binding two or more antigen molecules repeatedly |
US11359194B2 (en) | 2008-04-11 | 2022-06-14 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule capable of binding two or more antigen molecules repeatedly |
US11891434B2 (en) | 2010-11-30 | 2024-02-06 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule capable of binding to plurality of antigen molecules repeatedly |
US11236168B2 (en) | 2012-08-24 | 2022-02-01 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Mouse FcγammaRII-specific Fc antibody |
US10919953B2 (en) | 2012-08-24 | 2021-02-16 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | FcgammaRIIB-specific Fc region variant |
US11267868B2 (en) | 2013-04-02 | 2022-03-08 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Fc region variant |
US10738111B2 (en) | 2014-12-19 | 2020-08-11 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-myostatin antibodies, polypeptides containing variant Fc regions, and methods of use |
US11454633B2 (en) | 2014-12-19 | 2022-09-27 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-myostatin antibodies, polypeptides containing variant Fc regions, and methods of use |
US11180548B2 (en) | 2015-02-05 | 2021-11-23 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods of neutralizing IL-8 biological activity |
US11359009B2 (en) | 2015-12-25 | 2022-06-14 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-myostatin antibodies and methods of use |
JP2019142968A (ja) * | 2016-08-05 | 2019-08-29 | 中外製薬株式会社 | Il−8関連疾患の治療用又は予防用組成物 |
WO2018025982A1 (ja) * | 2016-08-05 | 2018-02-08 | 中外製薬株式会社 | Il-8関連疾患の治療用又は予防用組成物 |
US11053308B2 (en) | 2016-08-05 | 2021-07-06 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for treating IL-8-related diseases |
JP7193803B2 (ja) | 2016-08-05 | 2022-12-21 | 中外製薬株式会社 | Il-8関連疾患の治療用又は予防用組成物 |
US11780912B2 (en) | 2016-08-05 | 2023-10-10 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Composition for prophylaxis or treatment of IL-8 related diseases |
JPWO2018025982A1 (ja) * | 2016-08-05 | 2019-02-14 | 中外製薬株式会社 | Il−8関連疾患の治療用又は予防用組成物 |
US10604561B2 (en) | 2016-09-16 | 2020-03-31 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-dengue virus antibodies, polypeptides containing variant Fc regions, and methods of use |
US10844113B2 (en) | 2016-09-16 | 2020-11-24 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-dengue virus antibodies, polypeptides containing variant Fc regions, and methods of use |
US11780908B2 (en) | 2016-09-16 | 2023-10-10 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-dengue virus antibodies, polypeptides containing variant FC regions, and methods of use |
US11891432B2 (en) | 2018-03-15 | 2024-02-06 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-dengue virus antibodies having cross-reactivity to Zika virus and methods of use |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2789416A1 (en) | 2011-08-18 |
WO2011100271A2 (en) | 2011-08-18 |
EP2534256A1 (en) | 2012-12-19 |
US20120315267A1 (en) | 2012-12-13 |
EP2534256A4 (en) | 2013-07-24 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2013518606A (ja) | 新規使用 | |
JP5441885B2 (ja) | 新規化合物 | |
RU2604189C2 (ru) | Биспецифические четырехвалентные антигенсвязывающие белки | |
JP5850860B2 (ja) | Cd127結合タンパク質 | |
US20110105724A1 (en) | Novel compounds | |
US20210017270A1 (en) | Antigen binding proteins to oncostatin m (osm) | |
US20220306760A1 (en) | Igm glycovariants | |
CA3024370A1 (en) | Anti-il-22r antibodies |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20131016 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20131016 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20131101 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20150106 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20150925 |