JP2013511714A - 光検出装置及び方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】この光検出システムは、波長範囲にわたって連続スペクトルを含むビームを放出する広帯域光源と、ビームの少なくとも一部分がサンプルに向かい、後方反射ビームが創出されるように、サンプルを位置決めする1つ以上のチャネルを含む流体セルと、サンプルから後方反射するビームの干渉スペクトルを解析するスペクトロメータと、を含む。
【選択図】図1
Description
ここで、k0は中心波長における波数、Lは路程(例えば、100μm)、及びΔnはRI変化である。一例では、セル内の空気を用いて位相変動を測定し、数2で表す検出限界を判定する。
δn=(σφ)/(2k0L) (数2)
ブロック148において、結果として得られる後方散乱ビームを捕捉する。加えて、流体セルの後に反射鏡を使用する場合、光が反射鏡によって反射され、ファイバ内で再び結合する。一例では、干渉パターンを測定するために、ビームの70パーセントをスペクトロメータに向かわせる。一実施例では、或る角度範囲にわたって後方散乱ビームが検出される。
温度制御システム及び可撓性角形シリカチューブを組み込むことにより、自由溶液分子相互作用感知用に、実施例1の分子相互作用センサを更に構成する。2つのタンパク質溶液を、蠕動ポンプ(Harvard Apparatusより入手した11plus)を用いて、最大12μL/分で微小チューブに注入した。その後、溶液をTコネクタ(IDEX Health & Science, Corp.より入手)によって混合し、角形可撓性溶融シリカ微小毛細管(アリゾナ州Polymicro Technologiesより入手)内に通した。広帯域光源(アイルランド、SUPERLUM製のSLD−371−HP2−DBUT−SM−PD−FC/APC)からのプローブビームを、Tコネクタの出口から約15cm下流に位置決めし、チューブからの後方反射光を、スペクトロメータ(Ocean Optics製のUSB4000)によって収集及び測定した。測定目的のため、フローを停止し、干渉スペクトルにおける位相変化を時間関数として測定した。
動的屈折率変化を測定する実験の設計を、図12に示す。3つのサンプル容器180、182、184を使用して、サンプル溶液を保持する。サンプル容器180、182、184からフローセル186内へのサンプルの流量を、弁188、190、192を用いて制御する。フローセル186は、100ミクロンの深さを有する内部フローチャネル(図示せず)を有している。反射の干渉スペクトルの測定は、フローセル186の測定チャネルの上面及び底面から行う。
ここで、Δnは屈折率変化、Δφは測定位相変化、k0は中心波長λ0(この場合は840nm)における2π/λ0で定義される中心波数、tはチャネル深さ(現在の設計で100μm)である。各濃度の定常状態領域における屈折率値の平均値を求め、平均屈折率変化をNaCl濃度の関数として評価する。感度に対応する線形適合は、1.25×10-5(RI/mM)の傾きを有する。システムの検出限界は、1.5×10-7RIUと測定された。感度は装置の設計に依存するのに対して、検出限界は、システムノイズの量、及び信号の僅かな変化を分解する能力に依存する。
実施例2に記載した配置を、ウシ血清アルブミン(BSA)溶液を用いる動的屈折率変化測定の実施に用いる。5パーセントBSA原液(50g/L)を希釈して、約23.7、47.4、及び94.7μMのSBA溶液を得る。異なる濃度の溶液を、測定フローセル内に順次流し込む。図16は、時間関数(横座標242)としての屈折率変化(縦座標240)、及びBSA濃度(横座標244)に対する屈折率(縦座標240)の変化を示す。曲線246との線形適合248は、約1.125×10-8RIU/nMの勾配又は感度を有する。
Claims (24)
- 1つ以上のサンプルを感知するための光検出システムであって、
波長範囲にわたって連続スペクトルを含むビームを放出する広帯域光源と、
前記ビームの少なくとも一部分が前記サンプルに向かい、後方反射ビームが創出されるように、前記サンプルを位置決めする1つ以上のチャネルを含む流体セルと、
前記サンプルからの前記後方反射ビームの干渉スペクトルを解析するスペクトロメータと、を含むシステム。 - 前記広帯域光源のスペクトル帯域幅が約10ナノメートルよりも大きい、請求項1に記載のシステム。
- 前記流体セルが、2つ以上の毛細管又は流体チャネルを含む、請求項1に記載のシステム。
- 2つ以上の毛細管又は流体チャネルのうちの少なくとも1つが、基準の役割を果たす、請求項3に記載のシステム。
- 2つ以上の毛細管又は流体チャネルのうちの少なくとも2つが、異なる直径を有する、請求項3に記載のシステム。
- 前記流体セルが、所定の温度変化を受けるように構成されている、請求項1に記載のシステム。
- 前記スペクトロメータが、2つ以上のサンプルからの1つ以上の信号を同時に解析する、請求項1に記載のシステム。
- 前記2つ以上のサンプルのうちの1つが基準の役割を果たす、請求項7に記載のシステム。
- 前記スペクトロメータが、二次元(2−D)スペクトロメータ、又は一次元(1−D)スペクトロメータである、請求項1に記載のシステム。
- 前記システムが、インラインプロセス監視システムで使用される、請求項1に記載のシステム。
- サンプルを解析するための光検出システムであって、
波長範囲にわたって連続スペクトルを含むビームを放出する広帯域光源と、
前記ビームを第1部分及び第2部分に分割するビームスプリッタと、
前記ビームの前記第1部分の少なくとも一部が前記サンプルに向かい、後方反射ビームが創出されるように、前記サンプルを位置決めする流体セルと、
前記後方反射ビームからの干渉スペクトルを解析するスペクトロメータと、を含むシステム。 - 分子変化、配座変化、又は相互作用を検出する方法であって、
波長範囲にわたって連続スペクトルを含むビームを放出する広帯域源を準備するステップと、
1つ以上のチャネルを含む流体セルを準備するステップと、
前記チャネルに導入された前記サンプルを前記ビームの少なくとも一部分と相互作用させて、結果的に生じる後方反射ビームを捕捉するステップと、
スペクトロメータを用いて前記後方反射ビームからの干渉スペクトルを解析するステップと、を含む方法。 - 前記ビームを第1部分と第2部分に分割して、前記ビームの第1部分を前記サンプルと相互作用させることで、結果的に後方反射ビームを創出するステップを更に含む、請求項12に記載の方法。
- 前記干渉スペクトルを、約1Hzから約1MHzの範囲の周波数で解析する、請求項12に記載の方法。
- 少なくとも2つの異なるサンプルを前記流体セル内に配置する、請求項12に記載の方法。
- 前記流体セル内で前記2つの異なるサンプルを混合するステップを更に含む、請求項15に記載の方法。
- 基準液及びサンプル溶液の干渉スペクトルを同時に測定するステップを更に含む、請求項12に記載の方法。
- 前記流体セル内の2つ以上のマイクロ流体チャネルに前記サンプルを配置するステップを更に含み、前記チャネルどうしが異なる直径を有する、請求項12に記載の方法。
- 前記干渉スペクトルのバックグラウンド干渉を補償するために、前記干渉スペクトルに基準信号を印加するステップを更に含む、請求項12に記載の方法。
- 第1生化学種を前記チャネルに導入し、次に第2生化学種を同じ前記チャネルに導入することによって前記サンプルを導入する、請求項12に記載の方法。
- 前記サンプルは液体を含む、請求項12に記載の方法。
- 前記流体セルの2つ以上の箇所の干渉スペクトルを解析するステップを含む、請求項12に記載の方法。
- 前記サンプルをインライン監視するステップを更に含む、請求項12に記載の方法。
- 1つ以上の生物−分子相互作用、タンパク質−タンパク質会合又は解離、多タンパク質複合体集合又は脱集合、DNA−DNA会合又は解離、分子凝集及び分離、DNA/RNA−タンパク質会合及び解離、タンパク質又はDNA変性及び多タンパク質競合を測定するステップを更に含む、請求項12に記載の方法。
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