JP2013505738A5 - - Google Patents

Claims (40)

1. ａ）第１の動物のインタクトの脳領域中の神経前駆細胞を医薬剤と接触させる工程；
   ｂ）該第１の動物および第２の対照動物を視覚刺激に曝露する工程；ならびに
   ｃ）該第１の動物における該神経前駆細胞の増殖割合および該第２の動物における神経前駆細胞の増殖割合を測定する工程
   を含む方法であって、該神経前駆被検細胞と該神経前駆対照細胞の間の増殖割合の相違により、神経増殖を調節し得る医薬剤として該医薬剤が同定される、方法。
2. 該インタクトの脳領域が視蓋を含む、請求項１記載の方法。
3. 該インタクトの脳領域が、嗅覚的入力、視覚的入力、および機械的感覚的（mechnosensory）入力から選択される群の１つ以上の処理に関与しているか、または行動的出力の媒介に関与している、請求項１記載の方法。
4. 該インタクトの脳領域が、終脳、中脳、菱脳／脊髄、網膜、または鼻窩の回路を含む、請求項１記載の方法。
5. 該第１の動物および該第２の動物が、アフリカツメガエルである、請求項１記載の方法。
6. 測定する工程が、該第１の動物および該第２の動物の視蓋中の細胞の数および型を数えることを含む、請求項１記載の方法。
7. 該神経前駆細胞を医薬剤と接触させる工程が、該医薬剤を該神経前駆細胞にエレクトロポレートすることを含む、請求項１記載の方法。
8. ａ）神経前駆被検細胞を、該神経前駆被検細胞中での１つ以上の遺伝子の発現を調節するのに有効な量の医薬剤と接触させる工程；
   ｂ）該神経前駆被検細胞の増殖割合、および該医薬剤と接触されなかった神経前駆対照細胞の増殖割合を測定する工程；ならびに
   ｃ）該神経前駆被検細胞の増殖割合と該神経前駆対照細胞の増殖割合を比較する工程
   を含む方法であって、該神経前駆被検細胞と該神経前駆対照細胞の間の増殖割合の相違により、該１つ以上の遺伝子が神経前駆細胞の増殖の調節物質として同定される、方法。
9. 該神経前駆被検細胞が第１の動物中にあり、該神経前駆対照細胞が第２の動物中にある、請求項８記載の方法。
10. 該神経前駆被検細胞および該神経前駆対照細胞が、それぞれ、該第１の動物および該第２の動物の各々のインタクトの脳領域中にある、請求項９記載の方法。
11. 該インタクトの脳領域が、嗅覚的入力、視覚的入力、もしくは機械的感覚的入力の処理に関与しているか、または行動的出力の媒介に関与している、請求項１０記載の方法。
12. 該インタクトの脳領域が、終脳、中脳、菱脳／脊髄、網膜、または鼻窩の回路を含む、請求項１０記載の方法。
13. 該第１の動物および該第２の動物が、アフリカツメガエルである、請求項１０記載の方法。
14. レポーター構築物を、該神経前駆被検細胞および該神経前駆対照細胞に導入する工程をさらに含む、請求項８記載の方法。
15. 該レポーター構築物が、蛍光タンパク質をコードする遺伝子を含む、請求項１４記載の方法。
16. 蛍光タンパク質が、神経前駆細胞中で特異的に発現する、請求項１５記載の方法。
17. 導入する工程が、該レポーター構築物をコードするプラスミドでトランスフェクトすることを含む、請求項１４記載の方法。
18. 測定する工程が、少なくとも１つの所定の期間の前および後に、細胞の数および型を数えることを含む、請求項８記載の方法。
19. 該神経前駆被検細胞を医薬剤と接触させる工程が、該医薬剤を該神経前駆被検細胞にエレクトロポレートすることを含む、請求項８記載の方法。
20. 該第１の動物および該第２の動物を視覚刺激に曝露する工程をさらに含む、請求項９記載の方法。
21. 該医薬剤が、化合物またはアンチセンスオリゴヌクレオチドを含む、請求項８記載の方法。
22. 該アンチセンスオリゴヌクレオチドが、ＳｉＲＮＡおよびｓｈＲＮＡおよび／またはモルホリノを含む、請求項２１記載の方法。
23. 該１つ以上の遺伝子が、配列番号：１〜６５１、あるいはその機能的短縮体（functional truncation）、改変体および／または置換体から選択される、請求項８記載の方法。
24. ａ）神経前駆被検細胞を医薬剤と接触させる工程；
    ｂ）該神経前駆被検細胞の増殖割合、および該医薬剤と接触されなかった神経前駆対照細胞の増殖割合を測定する工程；ならびに
    ｃ）該神経前駆被検細胞の増殖割合および該神経前駆対照細胞の増殖割合を比較する工程
    を含む方法であって、該神経前駆被検細胞と該神経前駆対照細胞の間の増殖割合の相違により、増殖を調節し得る医薬剤として該医薬剤が同定される、方法。
25. 該神経前駆被検細胞が第１の動物中にあり、該神経前駆対照細胞が第２の動物中にある、請求項２４記載の方法。
26. 該神経前駆被検細胞および該神経前駆対照細胞が、該第１の動物および該第２の動物の各々のインタクトの脳領域中にある、請求項２５記載の方法。
27. 該インタクトの脳領域が、嗅覚的入力、視覚的入力、もしくは機械的感覚的入力の処理に関与しているか、または行動的出力の媒介に関与している、請求項２６記載の方法。
28. 該インタクトの脳領域が、終脳、中脳、菱脳／脊髄、網膜、または鼻窩の回路を含む、請求項２６記載の方法。
29. 該第１の動物および該第２の動物が、アフリカツメガエルである、請求項２５記載の方法。
30. レポーター構築物を、該神経前駆被検細胞および該神経前駆対照細胞に導入する工程をさらに含む、請求項２４記載の方法。
31. 該レポーター構築物が、蛍光タンパク質をコードする遺伝子を含む、請求項３０記載の方法。
32. 蛍光タンパク質が、神経前駆細胞中で特異的に発現する、請求項３１記載の方法。
33. 導入する工程が、該レポーター構築物をコードするプラスミドでトランスフェクトすることを含む、請求項３０記載の方法。
34. 測定する工程が、少なくとも１つの所定の期間の前および後に、細胞の数および型を数えることを含む、請求項２４記載の方法。
35. 該神経前駆被検細胞を医薬剤と接触させる工程が、該医薬剤を該神経前駆被検細胞にエレクトロポレートすることを含む、請求項２４記載の方法。
36. 該第１の動物および該第２の動物を視覚刺激に曝露する工程をさらに含む、請求項２４記載の方法。
37. ａ）医薬剤を、配列番号：１〜６５１からなる群より選択される標的遺伝子あるいはその機能的短縮体、改変体および／または置換体を発現する被検細胞に投与する工程、ならびに
    ｂ）該医薬剤を投与された被検細胞における標的遺伝子の発現を、該医薬剤と接触させていない被検細胞における標的遺伝子の発現と比較する工程
    を含む方法であって、該医薬剤を投与されていない被検細胞と比較しての、該医薬剤を投与された被検細胞中の標的遺伝子の発現における相違により、神経増殖または神経分化の候補調節物質として該医薬剤が同定される、方法。
38. 該被検細胞および対照細胞が、神経前駆細胞である、請求項３７記載の方法。
39. インタクトの脳領域において神経発生の該候補調節物質を評価する工程をさらに含む、請求項３７記載の方法。
40. 該インタクトの脳領域が、アフリカツメガエルの視蓋である、請求項３９記載の方法。