JP2013166726A - 抗菌活性の高いポリペプチドとその抗菌活性を阻害しない多糖類との混合物を含有するフィルムまたはシートからなる創傷被覆材 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】配列番号1ないし配列番号11で表される抗菌活性の高いポリペプチドとその抗菌活性を阻害しない多糖類との混合物を含有するフィルムまたはシートからなる創傷被覆材。抗菌活性の高いポリペプチドとその抗菌活性を阻害しない多糖類との混合物を含有する創傷被覆材が提供された。
【選択図】なし
Description
さらに本発明は、これらの抗菌活性ポリペプチドを特定の多糖類と混合し、加工してもその抗菌活性を阻害することなく、安定なフィルムまたはシートからなる創傷被覆材を作成したことに特徴がある。
(1) 配列番号1ないし配列番号11からなるポリペプチドもしくはそのアミノ酸配列に対し95%以上の相同性を有するポリペプチドから選ばれた1種以上のポリペプチドまたはその薬理学的に許容される塩、およびプルランまたはデンプンからなる、フィルムまたはシート。
(2) 配列番号1もしくはそのアミノ酸配列に対し95%以上の相同性を有するポリペプチドまたはその薬理学的に許容される塩、およびプルランまたはデンプンからなる、フィルムまたはシート。
(3) 配列番号1からなるポリペプチドまたはその薬理学的に許容される塩およびプルランまたはデンプンからなる、フィルムまたはシート。
(4) 配列番号1からなるポリペプチドまたはその薬理学的に許容される塩およびプルランからなる、フィルムまたはシート。
(5) 配列番号1からなるポリペプチドまたはその薬理学的に許容される塩およびデンプンからなる、フィルムまたはシート。
(6) (1)ないし(5)に記載のフィルムまたはシートからなる、創傷被覆材。
その結果、上記の本発明のポリペプチドと特定の多糖類との混合物が、優れた抗菌活性を有することが下記の実施例1に示されるように明らかとなった。
本発明のポリペプチドは、キャッピング構造を付加しても良い。ここで、キャッピング構造は、ポリペプチドのN末端及び/又はC末端に、ポリペプチドの構造を安定化させることが知られている。
さらに物理化学的には高い水溶性を有し、増粘性、接着性、付着性、粘着性、造膜性、被膜性などに優れ、可食性である。このような性質から、一定量の水を加え加熱成型すると、生分解性/可食性のフィルムやカプセルなどを作ることができる。
SR−2(配列番号2) IFLHRLKRMRKRLKRKLRLW
SR−3(配列番号3) RLKRMRKRLKRKLRLWHRKRYK− Amide
SR−4(配列番号4) MLKLIFLHRLKRMRKRLKRKLR− Amide
SR−5(配列番号5) MLKLIFLHRLKRMRKRLKRK− Amide
SR−6(配列番号6) LKLIFLHRLKRMRKRLKRKL− Amide
SR−7(配列番号7) LIFLHRLKRMRKRLKRKLRL− Amide
SR−8(配列番号8) KLIFLHRLKRELRKRLKRKLR− Amide
SR−9(配列番号9) GRLKRMGKRLKRKIQKWARW− Amide
SR−10(配列番号10) KLIFLRELRRLRKRLKRKLR− Amide
SR−11(配列番号11) RLKRMRKRLKRKLRLW− Amide
ペクチンおよびその他各種の多糖類によるポリペプチドの抗菌活性への影響を検討した。本明細書において陽性対照であるトブラマイシンはTOBと呼ぶ。
(方法)
菌株には、グラム陽性菌として黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)およびグラム陰性菌として緑膿菌(Pseudomonas aeruginosa)、大腸菌(Escherichia coli)を用いた。1%アガロース入りミューラー・ヒントン・ブロス(Mueller-Hinton broth:MHB)培地に1%多糖類となるように混合し、培地をオートクレーブ滅菌した。
TOBおよび配列番号1で表されるポリペプチドを最終濃度の10倍に調整し、シャーレに1mL添加して、培地9mLと十分に混合して混釈培地を作製した(n=3)。
各菌株の菌数を最終濃度で10,000CFU/plate程度になるように塗布し、一晩培養した。
培養後、コロニーの生育を観察した。ポリペプチド未添加のものを陰性対照とし、TOB添加のものを陽性対照とした。さらに多糖類はプルラン、ペクチン、CMC、ローカストビーンガム、タラガム、デンプン、アガーを用いた。
結果の判定には、コロニーが生育した培地を『+』、生育を阻止した培地を『−』と表記し、2回の試験(n=3を2回)で生育と生育阻止と判定が分かれた培地は『±』と表記した。
プルランとデンプンは、3種の菌株において配列番号1で表されるポリペプチドの抗菌活性を阻害しなかった。プルランとデンプンの構成糖はグルコースのみであることから、グルコースは前記のポリペプチドの抗菌活性を阻害しないと考えられた。
グアーガムは、粘性が高く検討できなかった。しかし糖構成が同じローカストビーンガムやタラガムにより前記のポリペプチドの抗菌活性が阻害されていることから、グアーガムも同様に抗菌活性を阻害するものと考えられた。
なお化学的には、構成単位であるガラクツロン酸のカルボキシル基がメチルエステル化されたものをペクチン、メチルエステル化されていないものをペクチン酸と呼ぶが、天然物ではガラクツロン酸の一部がメチル化され、一部はカルボキシル基フリーで混在していることが多い。
Claims (6)
- 配列番号1ないし配列番号11からなるポリペプチドもしくはそのアミノ酸配列に対し95%以上の相同性を有するポリペプチドから選ばれた1種以上のポリペプチドまたはその薬理学的に許容される塩、およびプルランまたはデンプンからなる、フィルムまたはシート。
- 配列番号1もしくはそのアミノ酸配列に対し95%以上の相同性を有するポリペプチドまたはその薬理学的に許容される塩、およびプルランまたはデンプンからなる、フィルムまたはシート。
- 配列番号1からなるポリペプチドまたはその薬理学的に許容される塩およびプルランまたはデンプンからなる、フィルムまたはシート。
- 配列番号1からなるポリペプチドまたはその薬理学的に許容される塩およびプルランからなる、フィルムまたはシート。
- 配列番号1からなるポリペプチドまたはその薬理学的に許容される塩およびデンプンからなる、フィルムまたはシート。
- 請求項1ないし5のいずれか1項に記載のフィルムまたはシートからなる、創傷被覆材。
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JPS63109865A (ja) * | 1986-06-23 | 1988-05-14 | 東洋製薬化成株式会社 | 薬物を有効成分として含有するプルランフイルム製剤 |
WO2010101237A1 (ja) * | 2009-03-06 | 2010-09-10 | アンジェスMg株式会社 | ポリペプチド及びその抗菌または消毒用途 |
JP2011528029A (ja) * | 2008-07-16 | 2011-11-10 | ロケット・フルーレ | セル状フィルムを直接製造する方法 |
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2012
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Patent Citations (3)
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