JP2013106588A5 - - Google Patents

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  1. 親株の染色体DNA上にあるL−アスパラギン分解活性を有する蛋白質をコードする遺伝子に塩基の欠失、置換または付加が導入されたことにより、親株に比べ該蛋白質の活性が低下、または喪失しており、かつL−アスパラギンを生産する能力を有する微生物を培地に培養し、培養物中にL−アスパラギンを生成、蓄積させ、該培養物中からL−アスパラギンを採取することを特徴とするL−アスパラギンの製造法。
  2. 微生物が、親株に比べL−アスパラギン合成活性が増強した微生物である、請求項1記載の製造法。
  3. 微生物が、親株の染色体DNA上にあるL−アスパラギン取込活性を有する蛋白質をコードする遺伝子に塩基の欠失、置換または付加が導入されたことにより、親株に比べ該蛋白質の活性が低下、または喪失した微生物である、請求項1または2記載の製造法。
  4. 微生物が、親株に比べL−アスパラギン排出活性が増強した微生物である、請求項1〜3のいずれか1項に記載の製造法。
  5. 親株に比べL−アスパラギン排出活性が増強した微生物が、以下の[1]〜[6]のいずれかに記載のDNAを有する組換え体DNAで親株を形質転換して得られる微生物である、請求項4記載の製造法。
    [1]配列番号14で表されるアミノ酸配列を有する蛋白質をコードするDNA
    [2]配列番号14で表されるアミノ酸配列において、1〜20個のアミノ酸が欠失、置換または付加されたアミノ酸配列からなり、かつL−アスパラギン排出活性を有する蛋白質をコードするDNA
    [3]配列番号14で表されるアミノ酸配列と95%以上の同一性を有するアミノ酸配列からなり、かつL−アスパラギン排出活性を有する蛋白質をコードするDNA
    [4] 配列番号13で表される塩基配列を有するDNA
    [5]配列番号13で表される塩基配列と相補的な塩基配列からなるDNAとストリンジェントな条件でハイブリダイズし、かつL−アスパラギン排出活性を有する蛋白質をコードするDNA
    [6]配列番号13で表される塩基配列と95%以上の同一性を有する塩基配列からなり、かつL−アスパラギン排出活性を有する蛋白質をコードするDNA
  6. 微生物が、エシェリヒア属に属する微生物である、請求項1〜5のいずれか1項に記載の製造法。
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