JP2012235776A - 核酸回収量推定装置、及び、核酸回収量推定方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】核酸回収量推定装置100は、核酸を含む試料200を吐出吸引する吐出吸引部110と、試料200を吐出吸引部110で吐出吸引することによって、核酸を回収する回収部120と、試料200を吐出するときの吐出圧力と試料200を吸引するときの吸引圧力とを測定し、吐出圧力と吸引圧力との差分である差分圧力を測定する圧力測定部130と、差分圧力に基づいて、回収した核酸の回収量を推定する推定部140と、を備える。
【選択図】図1
Description
核酸を含む試料を吐出吸引する吐出吸引部と、
前記試料を前記吐出吸引部で吐出吸引することによって、前記核酸を回収する回収部と、
前記試料を吐出するときの吐出圧力と前記試料を吸引するときの吸引圧力とを測定し、当該吐出圧力と当該吸引圧力との差分である差分圧力を測定する圧力測定部と、
前記測定された差分圧力に基づいて、前記回収した核酸の回収量を推定する推定部と、を備える。
好ましくは、前記吐出吸引部は、前記試料を吐出した後、前記試料を高速で吸引し、さらに、低速で吸引する。
核酸を含む試料を吐出吸引して、前記試料を回収部に通過させて、前記試料から前記核酸を回収する回収工程と、
前記試料を吐出するときの吐出圧力と前記試料を吸引するときの吸引圧力とを測定し、当該吐出圧力と当該吸引圧力との差分である差分圧力を測定する圧力測定工程と、
前記測定された差分圧力に基づいて、前記回収した核酸の回収量を推定する推定工程と、を備える。
本発明の実施の形態1に係る核酸回収量推定装置は、核酸等の生体高分子を含む試料から核酸を回収する際に、核酸の回収量を推定するための装置である。本発明の実施の形態1に係る核酸回収量推定装置100は、図1及び図2に示すように、吐出吸引部110、回収部120、圧力測定部130、推定部140、チューブ111、フィルタ121等から構成される。
実施の形態1に係る核酸回収量推定装置100では、差分圧力が所定圧力以上になった際には、PCR法に必要な核酸の量を回収したものとして、核酸の回収を終了する場合について示した。本実施の形態では、差分圧力が、規定圧力に達しない場合には、核酸を含む試料200が不良であると判定する方法について説明する。以下に、本実施の形態に係る核酸回収量推定処理について、図8を参照して説明する。なお、実施の形態1に係る核酸回収量推定装置100と同様の構成、動作については、説明を適宜省略する。
差分圧力と核酸濃度との間に、どのような相関関係があるかを確認した。
まず、試薬1(2U プロテアーゼK、10mM Tris、5mM 塩化カルシウム、30%グリセロール、1%Nonidet P40、0.05%アジ化ナトリウム水溶液)に、試薬2(10mM Tris、1%Nonidet P40、0.05%アジ化ナトリウム水溶液)を添加して、混合試薬を作製した。次に、ヒト血液試料に混合試薬を添加した生体試料を所定容器に蓄えて、当該生体試料を吐出吸引した。生体試料から核酸を回収するために、図3A〜3Cに示す形状の回収部を用いた。核酸を回収するフィルタとして、メッシュサイズ(オープニング)60μmのPETメッシュシート TN255(サンプランテック社製)を使用した。また、吐出吸引を行うポンプとして、GASTIHGT(登録商標)1750 0.5ml(ハミルトン社製)を使用した。
一方で、差分圧力が3kPaを超える場合に、核酸の過剰な吸着による担体の目詰まり状態となる可能性があり、目詰まり状態となった場合は、次工程において溶液の吐出吸引が行えなくなり、担体から核酸を回収することが不能となる。従って、差分圧力が2.8kPaとなった際には、核酸濃度が10000copy/μl以上と推定されるため、差分圧力が2.8kPa以上になった時点で、吐出吸引を停止し、次工程に移ることで核酸の過剰な吸着による目詰まりを未然に防ぐことが出来ることがわかった。
110 吐出吸引部
111 チューブ
120 回収部
121 フィルタ
122 ノズルキャップ
130 圧力測定部
140 推定部
Claims (10)
- 核酸を含む試料を吐出吸引する吐出吸引部と、
前記試料を前記吐出吸引部で吐出吸引することによって、前記核酸を回収する回収部と、
前記試料を吐出するときの吐出圧力と前記試料を吸引するときの吸引圧力とを測定し、当該吐出圧力と当該吸引圧力との差分である差分圧力を測定する圧力測定部と、
前記測定された差分圧力に基づいて、前記回収した核酸の回収量を推定する推定部と、を備える、
ことを特徴とする核酸回収量推定装置。 - 前記推定部は、前記差分圧力と核酸回収量との相関情報を予め記憶し、当該差分圧力と当該相関情報とに基づいて、前記回収した核酸の回収量を推定する、
ことを特徴とする請求項1に記載の核酸回収量推定装置。 - 前記吐出吸引部は、前記試料を吐出した後、前記試料を高速で吸引し、さらに、低速で吸引する、
ことを特徴とする請求項1又は2に記載の核酸回収量推定装置。 - 前記核酸を含む試料に界面活性剤が含まれていることを特徴とする請求項1乃至3のいずれか一項に記載の核酸回収量推定装置。
- 前記核酸を含む試料にプロテアーゼが含まれていることを特徴とする請求項1乃至4のいずれか一項に記載の核酸回収量推定装置。
- 前記核酸を含む試料にタンパク質変性剤が含まれていることを特徴とする請求項1乃至5のいずれか一項に記載の核酸回収量推定装置。
- 前記回収部は、所定のメッシュサイズからなるフィルタを備え、前記試料を吐出吸引することによって前記試料を前記フィルタに通過させて前記核酸を回収する、
ことを特徴とする請求項1乃至6のいずれか一項に記載の核酸回収量推定装置。 - 前記推定部は、前記差分圧力の最大値が所定の値以上の場合、前記回収した核酸の回収量が所定量に達したと推定する、
ことを特徴とする請求項1乃至7のいずれか一項に記載の核酸回収量推定装置。 - 前記推定部は、同一の前記試料について所定の回数、前記吐出吸引部で吐出吸引を繰り返したのちの前記差分圧力の最大値が所定の値未満の場合、前記試料が不良試料であると推定する、
ことを特徴とする請求項1乃至8のいずれか一項に記載の核酸回収量推定装置。 - 核酸を含む試料を吐出吸引して、前記試料を回収部に通過させて、前記試料から前記核酸を回収する回収工程と、
前記試料を吐出するときの吐出圧力と前記試料を吸引するときの吸引圧力とを測定し、当該吐出圧力と当該吸引圧力との差分である差分圧力を測定する圧力測定工程と、
前記測定された差分圧力に基づいて、前記回収した核酸の回収量を推定する推定工程と、を備える、
ことを特徴とする核酸回収量推定方法。
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