JP2012207043A - Skin-whitening agent containing nigerooligosaccharide as active ingredient - Google Patents
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Description
本発明は、ニゲロオリゴ糖を有効成分とする美白剤に関する。さらに詳しくは、皮膚傷害に関わるインターロイキン６（ＩＬ−６）、腫瘍致死因子アルファ（ＴＮＦ−α）、および、皮膚の色に影響を与える色素であるメラニンの産生を抑制することにより、皮膚傷害の予防または治療のための抗炎症剤等として利用可能な、ニゲロオリゴ糖を有効成分とする美白剤に関する。 The present invention relates to a whitening agent containing nigerooligosaccharide as an active ingredient. More specifically, by inhibiting the production of interleukin 6 (IL-6), tumor lethal factor alpha (TNF-α), and melanin, which is a pigment affecting skin color, skin injury The present invention relates to a whitening agent comprising nigerooligosaccharide as an active ingredient, which can be used as an anti-inflammatory agent for the prevention or treatment of cerebral diseases.
なお、以下、ニゲロオリゴ糖、特にニゲロースを有効成分とする皮膚外用剤、抗炎症剤および化粧料に言及することもあるが、本発明は、ニゲロースを有効成分とする美白剤に関する。 Hereinafter, the skin external preparation, anti-inflammatory agent and cosmetics containing nigerooligosaccharide, particularly nigerose as an active ingredient may be referred to, but the present invention relates to a whitening agent containing nigerose as an active ingredient.
地表に届く電磁波（太陽光）は、紫外線が約６％、可視光線が約５２％、赤外線が約４２％を占めている。紫外線のうち、波長の短いＵＶ−Ｂ（２８０〜３１５ｎｍ）は約０．２％、波長の長いＵＶ−Ａ（３１５〜４００ｎｍ）は約５〜６％を占める。 Electromagnetic waves (sunlight) reaching the surface of the earth account for about 6% of ultraviolet rays, about 52% of visible rays, and about 42% of infrared rays. Among ultraviolet rays, short wavelength UV-B (280-315 nm) accounts for about 0.2%, and long wavelength UV-A (315-400 nm) accounts for about 5-6%.
皮膚に太陽光（紫外線）が当たると、ＵＶ−Ｂは表皮、ＵＶ−Ａは表皮を通過し真皮に達するとされる。日焼けを形成することでよく知られているＵＶ−Ｂが表皮角化細胞に曝露されると、直接的な反応として、細胞のアポトーシス、ＤＮＡ損傷や活性酸素種の生成を、間接的な反応では、ＴＮＦ−αやＩＬ−６といった炎症系サイトカインをはじめとする化学伝達物質を産生する生体免疫反応を引き起こす。長期間、連続的な太陽光（紫外線）の曝露や、皮膚の外部もしくは内部からの刺激を継続的に受けることによって、表皮角化細胞から炎症系サイトカインをはじめとする化学伝達物質が過剰に産生されると、皮膚の炎症、肥厚化、紅班や浮腫、色素沈着（サンタン）などのさまざまな障害を与える。 When sunlight (ultraviolet rays) hits the skin, UV-B passes through the epidermis, and UV-A passes through the epidermis and reaches the dermis. When UV-B, which is well known for forming sunburn, is exposed to epidermal keratinocytes, direct reactions include cell apoptosis, DNA damage, and generation of reactive oxygen species. Cause a biological immune reaction that produces chemical mediators including inflammatory cytokines such as TNF-α and IL-6. Excessive production of chemical mediators such as inflammatory cytokines from epidermal keratinocytes by continuous exposure to sunlight (ultraviolet rays) for a long period of time and continuous stimulation from outside or inside the skin. When done, it causes various disorders such as skin inflammation, thickening, erythema and edema, and pigmentation (suntan).
ＴＮＦ−αは多機能なサイトカインであり、表皮においては、主に、表皮角化細胞とランゲルハンス細胞より産出される。定常状態では、表皮角化細胞からの産生はほとんど示さないが、紫外線の照射などの外界からの刺激などにより産生され、ランゲルハンス細胞の機能調節などの炎症や免疫反応を引き起こし、また、血管内皮細胞の接着分子の発現誘導を介し、好中球やリンパ球の皮膚への浸潤を引き起こすとされる。ＩＬ−６は、ＴＮＦ−αと同様に、多機能なサイトカインであり、表皮角化細胞から産生され、表皮角化細胞の増殖や線維芽細胞からのコラーゲン、プロテオグリカンの産生およびコラーゲナーゼ分泌促進等に深く関与しているとされる。こういった炎症系サイトカインが過剰に産生されると、皮膚の炎症、皮膚肥厚等の皮膚のさまざまな障害を引き起こすとされる。そこで、過剰のＴＮＦ−αおよびＩＬ−６の産生を抑制することは、皮膚の炎症、皮膚肥厚等の皮膚傷害の治療および予防に有効であることが期待できる。 TNF-α is a multifunctional cytokine and is produced mainly from epidermal keratinocytes and Langerhans cells in the epidermis. In steady state, it shows almost no production from epidermal keratinocytes, but it is produced by external stimuli such as UV irradiation, causing inflammation and immune responses such as the regulation of Langerhans cell function, and vascular endothelial cells It is said to induce infiltration of neutrophils and lymphocytes into the skin through induction of the expression of adhesion molecules. IL-6 is a multifunctional cytokine, similar to TNF-α, produced from epidermal keratinocytes, proliferation of epidermal keratinocytes, production of collagen and proteoglycans from fibroblasts, and promotion of collagenase secretion, etc. It is said that it is deeply involved in. Excessive production of such inflammatory cytokines may cause various skin disorders such as skin inflammation and skin thickening. Therefore, it can be expected that suppressing the production of excess TNF-α and IL-6 is effective for the treatment and prevention of skin injuries such as skin inflammation and skin thickening.
また、メラニンは、ヒトの皮膚の色調に最も影響を与える色素であり、表皮においては、メラノサイト細胞で産生される生体色素である。皮膚に太陽光（紫外線）が当たると、メラノサイト細胞でメラニンが産生され、その周囲にある表皮細胞にメラニンが受け渡される。そして、メラニンは表皮細胞内の核の上に傘状に展開し、メラニンが紫外線を吸収することによって、核内のＤＮＡを守り、細胞のダメージを軽減する生体防御機構として働く。しかしながら、メラニンが過剰に産生された場合、皮膚の色の暗化、皮膚の“しみ”の原因となるので、過剰なメラニンを抑制することは、美白（美容）効果を高めるのに有効であることが期待できる。 Melanin is a pigment that most affects the color tone of human skin, and in the epidermis, it is a biological pigment produced by melanocyte cells. When sunlight (ultraviolet rays) hits the skin, melanin is produced in melanocyte cells, and melanin is delivered to the surrounding epidermal cells. Melanin develops in an umbrella shape on the nucleus in the epidermis cells, and melanin absorbs ultraviolet rays, thereby protecting the DNA in the nucleus and acting as a biological defense mechanism that reduces cell damage. However, excessive production of melanin causes darkening of the skin color and “bleaching” of the skin. Therefore, suppressing excessive melanin is effective in enhancing the whitening (beauty) effect. I can expect that.
ところで、これまで、オリゴ糖類、ピリドキシン３，４’−環状リン酸、カテキン類、モズク抽出物を有効成分として含有する製剤がＩＬ−６産生抑制作用を有することが判っている。（特許文献１〜４）また、α，α−トレハロースがＴＮＦ−α産生抑制作用を有することが開示されている。（特許文献５）しかし、ＩＬ−６とＴＮＦ−αのいずれについても産生を抑制する製剤については未だ知られていない。 By the way, it has been known that preparations containing oligosaccharides, pyridoxine 3,4'-cyclic phosphate, catechins and mozuku extract as active ingredients have an IL-6 production inhibitory action. (Patent Documents 1 to 4) Further, it is disclosed that α, α-trehalose has a TNF-α production inhibitory action. (Patent Document 5) However, a preparation that suppresses production of both IL-6 and TNF-α is not yet known.
本発明は、ＩＬ−６およびＴＮＦ−αのいずれのサイトカイン、メラニンの産生を顕著に抑制することのできる美白剤を提供することを目的とする。 An object of the present invention is to provide a whitening agent capable of remarkably suppressing production of any cytokine of IL-6 and TNF-α and melanin.
また、敏感肌とは、季節の変わり目、物理的な刺激、体調の変化や精神的なストレスといった内的外的要因で、通常の化粧品を使用すると刺激などのトラブルを感じてしまう肌のことをいう。敏感肌と感じる人たちは、肌荒れや乾燥などの肌トラブルを生じていることが多いため、本発明は、炎症系サイトカインの産生を抑制するので、炎症に起因する肌荒れ、乾燥肌を改善することが期待されるため、敏感肌用の化粧品としての効果が期待できる。 Sensitive skin is internal and external factors such as seasonal changes, physical irritation, physical condition changes and mental stress, and skin that causes irritation and other problems when using normal cosmetics. Say. Since people who feel sensitive skin often have skin problems such as rough skin and dryness, the present invention suppresses the production of inflammatory cytokines, thus improving rough skin and dry skin caused by inflammation. Therefore, the effect as a cosmetic for sensitive skin can be expected.
前記課題を解決するために鋭意検討した結果、オリゴ糖としてニゲロオリゴ糖を含有する製剤を皮膚に塗布することで、ＩＬ−６およびＴＮＦ−αの産生の抑制と、メラニン産生の抑制することができることを見出し、本発明を完成するに至った。 As a result of intensive studies to solve the above-mentioned problems, it is possible to suppress IL-6 and TNF-α production and melanin production by applying a preparation containing nigerooligosaccharide as an oligosaccharide to the skin. As a result, the present invention has been completed.
すなわち、本発明は、ニゲロースを有効成分として含む美白剤に関する。 That is, the present invention relates to a whitening agent containing nigerose as an active ingredient.
また、本発明の美白剤は、さらにニゲロシルグルコースまたはニゲロシルマルトースから選択される１または２以上の糖を含むことが好ましい。 The whitening agent of the present invention preferably further contains one or more sugars selected from nigerosyl glucose or nigerosyl maltose.
本発明によれば、ＩＬ−６およびＴＮＦ−αのいずれのサイトカイン、メラニンの産生を顕著に抑制することのできる美白剤を提供することができる。また、本発明は、炎症系サイトカイン、メラニンの産生を抑制するので、炎症に起因する肌荒れ、乾燥肌を改善することが可能であるとともに、美白効果に優れる。 ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, the whitening agent which can suppress significantly the production of any cytokine of IL-6 and TNF- (alpha) and melanin can be provided. In addition, since the present invention suppresses the production of inflammatory cytokines and melanin, it can improve rough skin and dry skin caused by inflammation and is excellent in whitening effect.
本発明は、ニゲロースを有効成分とする美白剤に関する。また、ニゲロシルグルコース、ニゲロシルマルトースから選択される１または２以上の糖を含むことが好ましい。 The present invention relates to a whitening agent containing nigerose as an active ingredient. Moreover, it is preferable that 1 or 2 or more sugars selected from nigerosyl glucose and nigerosyl maltose are included.
ニゲロオリゴ糖は、日本酒やみりんなどの発酵食品、ハチミツやその他の食品中に少量含有されている、天然に存在する非発酵性の糖質である。従来のアルデヒドデヒドロゲナーゼ阻害剤のような副作用はない。本発明のニゲロオリゴ糖は、分子中に１つ以上α−１，３−グルコシド結合を含む重合度２〜１０程度のオリゴ糖のことであり、α−１，３−グルコシド結合のみからなるオリゴ糖の他、α−１，３−グルコシド結合とそれ以外の結合とからなるオリゴ糖も含む。 Nigero-oligosaccharides are naturally occurring non-fermentable carbohydrates contained in small amounts in fermented foods such as sake and mirin, honey and other foods. There are no side effects like conventional aldehyde dehydrogenase inhibitors. The nigerooligosaccharide of the present invention is an oligosaccharide having a degree of polymerization of about 2 to 10 containing at least one α-1,3-glucoside bond in the molecule, and comprising only an α-1,3-glucoside bond. In addition, an oligosaccharide comprising an α-1,3-glucoside bond and other bonds is also included.
例えば、重合度２のオリゴ糖のニゲロース、重合度３のオリゴ糖のニゲロシルグルコース、重合度４のオリゴ糖のニゲロシルマルトースなどが例示されるが、特に限定されるものでない。本発明のニゲロオリゴ糖は、１種類のニゲロオリゴ糖だけでなく、２種以上のニゲロオリゴ糖の混合物でもよい。本発明のニゲロオリゴ糖は、食品および医薬として使用できるものであれば蛋白質、炭水化物、脂質などを含むことが出来る。さらにグルコース、フルクトース、ショ糖、乳糖、マルトース、トレハロース、マルトオリゴ糖、分岐オリゴ糖、他の糖類を含有させてもよい。 For example, nigerose of an oligosaccharide having a polymerization degree of 2, nigerosyl glucose of an oligosaccharide having a polymerization degree of 3, nigerosyl maltose of an oligosaccharide having a polymerization degree of 4 and the like are exemplified. The nigerooligosaccharide of the present invention may be not only one kind of nigerooligosaccharide but also a mixture of two or more kinds of nigerooligosaccharide. The nigerooligosaccharides of the present invention can contain proteins, carbohydrates, lipids and the like as long as they can be used as food and medicine. Further, glucose, fructose, sucrose, lactose, maltose, trehalose, maltooligosaccharide, branched oligosaccharide, and other saccharides may be contained.
本発明では、ニゲロースとして、（株）林原生物化学研究所製のニゲロース（純度９３％以上）、ニゲロオリゴ糖として、日本食品化工（株）製の日食テイストオリゴを使用しているが、本発明はなんらこれに限定されるものではない。なお、日食テイストオリゴは、水分２８％以下、固形分７２％以上で、ニゲロオリゴ糖含有量は４０％以上である。 In the present invention, nigerose (purity 93% or more) manufactured by Hayashibara Biochemical Laboratories Co., Ltd. is used as nigerose, and eclipse taste oligo manufactured by Nippon Shokuhin Kako Co., Ltd. is used as the nigerooligosaccharide. Is not limited to this. The eclipse taste oligo has a moisture content of 28% or less, a solid content of 72% or more, and a nigerooligosaccharide content of 40% or more.
本発明のニゲロオリゴ糖の含有率は特に限定されないが、２０％以上（日食テイストオリゴ添加量からの換算値）が好ましい。含有率が２０％未満の場合、ＩＬ−６およびＴＮＦ−αの産生抑制作用が得られにくくなる傾向がある。 Although the content rate of the nigerooligosaccharide of this invention is not specifically limited, 20% or more (converted value from the amount of solar eclipse taste oligo addition) is preferable. When the content is less than 20%, the production inhibitory action of IL-6 and TNF-α tends to be difficult to obtain.
また、ニゲロオリゴ糖の有効濃度が５％（日食テイストオリゴ添加量からの換算値）を超える場合、それに応じた効果の発現が望めない傾向がある。 Moreover, when the effective concentration of nigerooligosaccharide exceeds 5% (converted value from the amount of added eclipse taste oligo), there is a tendency that the effect according to the concentration cannot be expected.
本発明において、皮膚外用剤、抗炎症剤および化粧料は、ローション剤、乳剤、ゲル剤、ゾル剤、クリーム、軟膏、パウダー、スプレーなどの種々の形態とすることができる。また、とくに化粧料の形態で用いる場合は、化粧水、乳液、クリーム、美容液、パック剤、洗顔料などの皮膚用化粧料、メイクアップベースローション、メイクアップベースクリーム、ファンデーション、リキッドファンデーション、口紅などのメイクアップ化粧料、ハンドクリーム、レッグクリーム、ボディローション、ボディソープ、石鹸などの身体用化粧料、シャンプー、リンス、養毛剤などの頭髪用化粧料とすることができる。 In the present invention, the external preparation for skin, anti-inflammatory agent and cosmetic can be in various forms such as lotion, emulsion, gel, sol, cream, ointment, powder and spray. In particular, when used in the form of cosmetics, skin cosmetics such as lotion, milky lotion, cream, beauty essence, pack, face wash, makeup base lotion, makeup base cream, foundation, liquid foundation, lipstick Makeup cosmetics such as hand creams, leg creams, body lotions, body soaps, soaps, and other body cosmetics, and hair cosmetics such as shampoos, rinses, and hair nourishing agents.
つぎに、実験例にもとづいて、本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらによって何ら限定されるものではない。 Next, the present invention will be described in more detail based on experimental examples, but the present invention is not limited thereto.
実験例１（ニゲロオリゴ糖によるＩＬ−６およびＴＮＦ−α産生抑制効果の確認）
ヒト正常表皮細胞（クラボウ（株）製）を、ＥｐｉＬｉｆｅ−ＫＧ２培地（クラボウ（株）製）を用いて培養し、これを２４ウェルプレートに１０００ｃｅｌｌｓ／ｃｍ2の密度で播種し、コンフレント状態まで培養した。この培養細胞に、ニゲロオリゴ糖液（日食テイストオリゴ）を０、０．１、０．５、１．０％となるように添加した。２４時間後に、リン酸緩衝液（ＰＢＳ（−））で２回洗浄し、その後、ウェル内をＰＢＳ（−）に置換して、紫外線（ＵＶ−Ｂ）を５０ｍＪ／ｃｍ2照射した。照射後、ＰＢＳ（−）を除去し、培地を添加し、サンプルを再添加した。２４時間後、培地上清を採取し、遠心分離を行なって、浮遊物を除去した後に測定キット（ＩＬ−６測定用として、Quantikine Human IL-6（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｉｎｃ，社製）、ＴＮＦ−α測定用として、Quantikine Human TNF-α/TNFSF1A（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｉｎｃ，社製））を用いてＩＬ−６およびＴＮＦ−αの産生量を測定した。測定は２度行い、平均値を算出した。結果をそれぞれ表１、表２に示す。
Experimental Example 1 (Confirmation of IL-6 and TNF-α production inhibitory effect by nigerooligosaccharide)
Human normal epidermal cells (Kurabo Co., Ltd.) are cultured using EpiLife-KG2 medium (Kurabo Co., Ltd.), seeded in a 24-well plate at a density of 1000 cells / cm 2 and cultured to a confluent state. did. A nigerooligosaccharide solution (eclipse taste oligo) was added to the cultured cells so as to be 0, 0.1, 0.5, and 1.0%. After 24 hours, the plate was washed twice with a phosphate buffer solution (PBS (−)). Thereafter, the inside of the well was replaced with PBS (−), and ultraviolet (UV-B) was irradiated with 50 mJ / cm 2 . After irradiation, PBS (-) was removed, media was added, and samples were added again. After 24 hours, the culture supernatant was collected, centrifuged, and the suspended matter was removed. Then, a measurement kit (for measurement of IL-6, Quantikine Human IL-6 (R & D Systems Inc, manufactured by)), TNF-α For measurement, IL-6 and TNF-α production were measured using Quantikine Human TNF-α / TNFSF1A (R & D Systems Inc, manufactured by R & D Systems Inc.). The measurement was performed twice and the average value was calculated. The results are shown in Table 1 and Table 2, respectively.
表１および２に示す結果より、ニゲロオリゴ糖が、ＩＬ−６およびＴＮＦ−αの産生量を顕著に低下させることが判った。 From the results shown in Tables 1 and 2, it was found that nigero-oligosaccharide significantly reduced the production amounts of IL-6 and TNF-α.
実験例２（ニゲロオリゴ糖液のメラニン産生抑制効果の確認）
マウス由来Ｂ−１６メラノーマ細胞を、テオフィリン（和光純薬工業（株）製）０．９ｍＭ、ウシ胎児血清（フナコシ（株）製）１０％を含有するイーグル培地を用いて培養し、これを６０ｍｍディッシュ１枚あたり２０，０００ｃｅｌｌｓ播種し、播種２４時間後、培地交換を行った。その後、ニゲロオリゴ糖液（日食テイストオリゴ）を０、０．５、１、２、３、４および５％となるように添加した。３日間培養した後、各試験区の細胞を回収し、ＰＢＳ（−）洗浄、トリクロロ酢酸処理、エタノール洗浄を行い、残留物を窒素ガスで風乾させてメラニンを回収した。２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウムで溶解させた後、波長４００ｎｍの吸収を測定することにより、メラニン量の定量を行った。また、各試験区の細胞数を測定し、細胞１個あたりのメラニン量を算出し、各試験区の抑制率を算出した。測定は３度行い、平均値を算出した。結果を表３に示す。
Experimental Example 2 (Confirmation of melanin production inhibitory effect of nigerooligosaccharide solution)
Mouse-derived B-16 melanoma cells were cultured using Eagle's medium containing theophylline (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) 0.9 mM and fetal bovine serum (manufactured by Funakoshi Co., Ltd.) 10%. 20,000 cells were seeded per dish, and the medium was changed 24 hours after sowing. Thereafter, Nigero-oligosaccharide solution (eclipse taste oligo) was added to 0, 0.5, 1, 2, 3, 4 and 5%. After culturing for 3 days, the cells in each test group were collected, washed with PBS (−), treated with trichloroacetic acid and washed with ethanol, and the residue was air-dried with nitrogen gas to collect melanin. After dissolving with 2 mol / L sodium hydroxide, the amount of melanin was determined by measuring absorption at a wavelength of 400 nm. Moreover, the number of cells in each test group was measured, the amount of melanin per cell was calculated, and the inhibition rate of each test group was calculated. The measurement was performed three times and the average value was calculated. The results are shown in Table 3.
表３に示す結果より、ニゲロオリゴ糖の添加により、メラニン産生が顕著に抑制されることが判った。 From the results shown in Table 3, it was found that melanin production was remarkably suppressed by the addition of nigerooligosaccharide.
実験例３（皮膚化粧料のモニター試験）
無作為に抽出した２０〜５０歳代の敏感肌であると感じている合計５４名を被験者とし、表４〜６に示した処方例１〜３ならびに比較例１〜３の皮膚化粧料を通常の方法で連日２週間使用してもらった。
Experimental Example 3 (Skin cosmetic monitor test)
A total of 54 people who felt that they were randomly extracted sensitive skin in their 20s and 50s were subjects, and the skin cosmetics of Formulation Examples 1 to 3 and Comparative Examples 1 to 3 shown in Tables 4 to 6 were usually used. This method was used for 2 days every day.
２週間経過した後、皮膚の状態として、うるおい（乾燥状態）に対する改善効果、肌のきめに対する改善効果と、被験者が感じたモニター前後の肌状態を以下の基準で評価した。結果を表７に示す。なお、このモニター試験で皮膚に異常が生じた被験者は１名もいなかった。また、２週間にわたってそれぞれの皮膚化粧料はその状態に変化が生じることなく安定していた。 After two weeks, the skin condition was evaluated based on the following criteria: the improvement effect on moisture (dry state), the improvement effect on skin texture, and the skin condition before and after the monitor felt by the subject. The results are shown in Table 7. In this monitoring test, no subject had an abnormality on the skin. In addition, each skin cosmetic was stable for 2 weeks without any change in its state.
［うるおい（乾燥状態）に対する改善効果］
全顔、特に頬部の状態を目視で観察して、以下の評価基準にもとづいて評価した。
Ａ：改善された。
Ｂ：やや改善された。
Ｃ：変わらない。
Ｄ：やや悪化した。
Ｅ：悪化した。
[Improvement effect on moisture (dry condition)]
The condition of the entire face, particularly the cheeks, was visually observed and evaluated based on the following evaluation criteria.
A: Improved.
B: Slightly improved.
C: Not changed.
D: Slightly worsened.
E: Deteriorated.
［肌のきめに対する改善効果］
全顔、特に頬部の状態を目視で観察して、以下の評価基準にもとづいて評価した。
Ａ：改善された。
Ｂ：やや改善された。
Ｃ：変わらない。
Ｄ：やや悪化した。
Ｅ：悪化した。
[Improvement effect on skin texture]
The condition of the entire face, particularly the cheeks, was visually observed and evaluated based on the following evaluation criteria.
A: Improved.
B: Slightly improved.
C: Not changed.
D: Slightly worsened.
E: Deteriorated.
［肌状態の実感の評価］
Ａ：良くなった。
Ｂ：やや良くなった。
Ｃ：変わらない。
Ｄ：やや悪くなった。
Ｅ：悪くなった。
[Evaluation of skin condition]
A: It improved.
B: Slightly better.
C: Not changed.
D: Slightly worse.
E: It got worse.
表７に示されるように、うるおい（乾燥状態）に対する改善効果の評価において、処方例１〜３の皮膚化粧料を用いた場合には、約８９％の被験者が改善効果を感じたとの評価が得られたが、比較例１〜３の皮膚化粧料を用いた場合には、約５７％の被験者が改善効果を感じたに過ぎず、処方例１〜３の皮膚化粧料を用いた場合に、全顔、特に頬部のうるおい（乾燥状態）がより改善されたことがわかる。また、肌のきめに対する改善効果の評価において、処方例１〜３の皮膚化粧料を用いた場合には、約７２％の被験者が改善効果を感じたとの評価が得られたが、比較例１〜３の皮膚化粧料を用いた場合には、約４６％の被験者が改善効果を感じたに過ぎず、処方例１〜３の皮膚化粧料を用いた場合に、肌のきめがより改善されたことがわかる。さらに、被験者自身の肌状態の実感評価においても、処方例１〜３の皮膚化粧料を用いた場合には、約８０％の被験者が改善効果を感じたとの評価が得られたが、比較例１〜３の皮膚化粧料を用いた場合には、約４１％の被験者が改善効果を感じたに過ぎず、処方例１〜３の皮膚化粧料を用いた場合に、肌状態がより良くなったことが実感されたことがわかる。 As shown in Table 7, in the evaluation of the improvement effect on moisture (dry state), when the skin cosmetics of Formulation Examples 1 to 3 were used, it was evaluated that about 89% of the subjects felt the improvement effect. When the skin cosmetics of Comparative Examples 1 to 3 were used, about 57% of the subjects felt only an improvement effect, and the skin cosmetics of Formulation Examples 1 to 3 were used. It can be seen that the moisture (dry state) of the entire face, particularly the cheeks, was further improved. Moreover, in the evaluation of the improvement effect on skin texture, when the skin cosmetics of Formulation Examples 1 to 3 were used, it was evaluated that about 72% of subjects felt the improvement effect, but Comparative Example 1 When the skin cosmetics of ˜3 were used, only about 46% of the subjects felt an improvement effect, and when the skin cosmetics of prescription examples 1 to 3 were used, the skin texture was further improved. I understand that. Furthermore, in the actual evaluation of the subject's own skin condition, when the skin cosmetics of the prescription examples 1 to 3 were used, it was evaluated that about 80% of the subjects felt an improvement effect. When the skin cosmetics 1 to 3 were used, only about 41% of the subjects felt an improvement effect, and the skin condition was improved when the skin cosmetics of the prescription examples 1 to 3 were used. You can see that it was realized.
すなわち、本発明により、ニゲロオリゴ糖液を含む皮膚化粧料が、頬部のうるおい（乾燥状態）ならびに肌のきめを整え、改善し、肌機能の向上を発現することがわかる。さらに、このモニター試験で皮膚に異常が生じた被験者は１名もいなかったことと、被験者自身が肌状態の良化を実感できたことにより敏感肌の方にも安心して、使用していただけることがわかる。 That is, according to the present invention, it can be seen that the skin cosmetic containing the nigerooligosaccharide solution prepares and improves the moisture (dry state) of the cheeks and the texture of the skin, and expresses the improvement of the skin function. In addition, there are no subjects with skin abnormalities in this monitor test, and the subjects themselves can feel the improvement of their skin condition so that they can be used with peace of mind even for sensitive skin. I understand.
実験例４（ニゲロースによるＩＬ−６およびＴＮＦ−α産生抑制効果の確認）
ヒト正常表皮細胞（クラボウ（株）製）を、ＥｐｉＬｉｆｅ−ＫＧ２培地（クラボウ（株）製）を用いて培養し、これを２４ウェルプレートに１，０００ｃｅｌｌｓ／ｃｍ2の密度で播種し、コンフレント状態まで培養した。この培養細胞に、ニゲロース（（株）林原生物化学研究所製）をそれぞれ０、０．１、０．５、１．０％となるように添加した。２４時間後に、リン酸緩衝液（ＰＢＳ（−））で２回洗浄し、その後、ウェル内をＰＢＳ（−）に置換して、紫外線（ＵＶ−Ｂ）を５０ｍＪ／ｃｍ2照射した。照射後、ＰＢＳ（−）を除去し、培地を添加し、サンプルを再添加した。２４時間後、培地上清を採取し、遠心分離を行なって、浮遊物を除去した後に測定キット（ＩＬ−６測定用として、Quantikine Human IL-6（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｉｎｃ，社製）、ＴＮＦ−α測定用として、Quantikine Human TNF-α/TNFSF1A（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｉｎｃ，社製））を用いてＩＬ−６およびＴＮＦ−αの産生量を測定した。測定は２度行い、平均値を算出した。結果をそれぞれ表８および９に示す。
Experimental Example 4 (Confirmation of IL-6 and TNF-α production inhibitory effect by nigerose)
Human normal epidermal cells (Kurabo Co., Ltd.) are cultured using EpiLife-KG2 medium (Kurabo Co., Ltd.), seeded in a 24-well plate at a density of 1,000 cells / cm 2 , and in a confluent state. Until cultured. Nigerose (manufactured by Hayashibara Biochemical Laboratories Co., Ltd.) was added to the cultured cells so as to be 0, 0.1, 0.5, and 1.0%, respectively. After 24 hours, the plate was washed twice with a phosphate buffer solution (PBS (−)). Thereafter, the inside of the well was replaced with PBS (−), and ultraviolet (UV-B) was irradiated with 50 mJ / cm 2 . After irradiation, PBS (-) was removed, media was added, and samples were added again. After 24 hours, the culture supernatant was collected, centrifuged, and the suspended matter was removed. Then, a measurement kit (for measurement of IL-6, Quantikine Human IL-6 (R & D Systems Inc, manufactured by)), TNF-α For measurement, IL-6 and TNF-α production were measured using Quantikine Human TNF-α / TNFSF1A (R & D Systems Inc, manufactured by R & D Systems Inc.). The measurement was performed twice and the average value was calculated. The results are shown in Tables 8 and 9, respectively.
表８および９に示す結果より、ニゲロースが、ＩＬ−６およびＴＮＦ−αの産生量を顕著に低下させることが判った。特に、表１および２の結果と、表８および９の結果を比較すると、ニゲロオリゴ糖液よりも、ニゲロースの方が、ＩＬ−６産生抑制効果については０．５％以上添加した場合に顕著に効果を奏することが判り、ＴＮＦ−α産生抑制効果については０．１％の低濃度で効果を発現することが判った。 From the results shown in Tables 8 and 9, it was found that nigerose significantly reduced the production amounts of IL-6 and TNF-α. In particular, when comparing the results of Tables 1 and 2 with the results of Tables 8 and 9, nigerose is more prominent when added at 0.5% or more in terms of the IL-6 production inhibitory effect than the nigerooligosaccharide solution. It was found that there was an effect, and that the TNF-α production inhibitory effect was exhibited at a low concentration of 0.1%.
以下、各種の処方例を例示するが、本発明はなんらこれらに限定されるものではない。 Hereinafter, although various prescription examples are illustrated, this invention is not limited to these at all.
＜処方例４：クリーム＞
ニゲロオリゴ糖液 １．０
ヒアルロン酸ナトリウム ０．０１
グリセリルモノステアレート ３．０
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート ３．０
セタノール ２．０
スクワラン ３．０
２−エチルヘキサン酸グリセリル １０．０
グリセリン ７．０
エチルパラベン ０．１
精製水 残部
合計 １００
<Prescription Example 4: Cream>
Nigero-oligosaccharide solution 1.0
Sodium hyaluronate 0.01
Glyceryl monostearate 3.0
Polyoxyethylene (20) sorbitan monostearate 3.0
Cetanol 2.0
Squalane 3.0
Glyceryl 2-ethylhexanoate 10.0
Glycerin 7.0
Ethylparaben 0.1
Purified water balance 100
＜処方例５：クリーム＞
ニゲロオリゴ糖液 １．０
ステアリン酸 １０．０
セタノール ２．０
ラノリン １．０
ミリスチン酸イソプロピル ３．０
モノステアリン酸ポリエチレングリコール １．５
トリエタノールアミン ０．８
ソルビトール（７０％） ４．０
メチルパラベン ０．１
香料 ０．０１
精製水 残部
合計 １００
<Prescription Example 5: Cream>
Nigero-oligosaccharide solution 1.0
Stearic acid 10.0
Cetanol 2.0
Lanolin 1.0
Isopropyl myristate 3.0
Polyethylene glycol monostearate 1.5
Triethanolamine 0.8
Sorbitol (70%) 4.0
Methylparaben 0.1
Fragrance 0.01
Purified water balance 100
＜処方例６：リキッドファンデーション＞
ニゲロオリゴ糖液 １．０
ヒアルロン酸 ０．０１
グリセリルモノステアレート ２．０
ポリオキシエチレン（４）ラウリルエーテルリン酸ナトリウム ０．５
ステアリン酸 ５．０
ベヘニルアルコール １．０
ラノリン ２．０
スクワラン ５．０
２−エチルヘキサン酸グリセリル ４．０
顔料 １０．０
プロピレングリコール ７．０
トリエタノールアミン １．０
エチルパラベン ０．１
精製水 残部
合計 １００
<Prescription Example 6: Liquid Foundation>
Nigero-oligosaccharide solution 1.0
Hyaluronic acid 0.01
Glyceryl monostearate 2.0
Polyoxyethylene (4) sodium lauryl ether phosphate 0.5
Stearic acid 5.0
Behenyl alcohol 1.0
Lanolin 2.0
Squalane 5.0
Glyceryl 2-ethylhexanoate 4.0
Pigment 10.0
Propylene glycol 7.0
Triethanolamine 1.0
Ethylparaben 0.1
Purified water balance 100
＜処方例７：リキッドファンデーション＞
ニゲロオリゴ糖液 １．０
ラノリン ２．０
流動パラフィン ５．０
ステアリン酸 ２．０
セタノール １．０
グリセリン ２．０
スクワラン ５．０
２−エチルヘキサン酸グリセリル ４．０
顔料 １０．０
プロピレングリコール ７．０
トリエタノールアミン １．０
エチルパラベン ０．１
香料 ０．０１
精製水 残部
合計 １００
<Prescription Example 7: Liquid Foundation>
Nigero-oligosaccharide solution 1.0
Lanolin 2.0
Liquid paraffin 5.0
Stearic acid 2.0
Cetanol 1.0
Glycerin 2.0
Squalane 5.0
Glyceryl 2-ethylhexanoate 4.0
Pigment 10.0
Propylene glycol 7.0
Triethanolamine 1.0
Ethylparaben 0.1
Fragrance 0.01
Purified water balance 100
＜処方例８：乳液＞
ニゲロオリゴ糖液 １．０
ヒアルロン酸 ０．０１
ステアリン酸 ２．０
エタノール ０．５
流動パラフィン １０．０
ラノリン脂肪酸イソプロピル ３．０
ラノリン ４．０
スクワラン ５．０
セスキイソステアリン酸ソルビタン １．０
プロピレングリコール ５．０
トリエタノールアミン ０．６
エチルパラベン ０．１
香料 ０．０１
精製水 残部
合計 １００
<Prescription Example 8: Latex>
Nigero-oligosaccharide solution 1.0
Hyaluronic acid 0.01
Stearic acid 2.0
Ethanol 0.5
Liquid paraffin 10.0
Lanolin Fatty Acid Isopropyl 3.0
Lanolin 4.0
Squalane 5.0
Sorbitan sesquiisostearate 1.0
Propylene glycol 5.0
Triethanolamine 0.6
Ethylparaben 0.1
Fragrance 0.01
Purified water balance 100
＜処方例９：乳液＞
ニゲロオリゴ糖液 １．０
ステアリン酸 ３．５
エタノール ０．５
流動パラフィン ３．０
ラノリン ０．５
スクワラン ２．０
プロピレングリコール ３．０
トリエタノールアミン ０．８
エチルパラベン ０．１
カルボキシビニルポリマー１％液（アルカリ中和） ８．０
香料 ０．０１
精製水 残部
合計 １００
<Prescription Example 9: Latex>
Nigero-oligosaccharide solution 1.0
Stearic acid 3.5
Ethanol 0.5
Liquid paraffin 3.0
Lanolin 0.5
Squalane 2.0
Propylene glycol 3.0
Triethanolamine 0.8
Ethylparaben 0.1
Carboxyvinyl polymer 1% liquid (alkali neutralization) 8.0
Fragrance 0.01
Purified water balance 100
＜処方例１０：化粧水＞
ニゲロオリゴ糖液 １．０
ヒアルロン酸ナトリウム ０．０１
モノラウリン酸ポリオキシエチレン（２０）ソルビタン １．０
１，３−ブチレングリコール ３．０
ソルビトール（７０％） ２．０
ピロリドンカルボン酸ナトリウム液 ３．０
エタノール １５．０
アスコルビン酸 ０．１
メチルパラベン ０．１
香料 ０．０１
精製水 残部
合計 １００
<Formulation example 10: lotion>
Nigero-oligosaccharide solution 1.0
Sodium hyaluronate 0.01
Polyoxyethylene (20) sorbitan monolaurate 1.0
1,3-butylene glycol 3.0
Sorbitol (70%) 2.0
Sodium pyrrolidonecarboxylate solution 3.0
Ethanol 15.0
Ascorbic acid 0.1
Methylparaben 0.1
Fragrance 0.01
Purified water balance 100
＜処方例１１：化粧水＞
ニゲロオリゴ糖液 １．０
モノラウリン酸ポリオキシエチレン（２０）ソルビタン １．０
１，３−ブチレングリコール ５．０
ソルビトール（７０％） ２．０
ピロリドンカルボン酸ナトリウム液 ３．０
エタノール １５．０
アスコルビン酸 ０．１
メチルパラベン ０．１
色素 ０．０１
香料 ０．０１
精製水 残部
合計 １００
<Prescription Example 11: Lotion>
Nigero-oligosaccharide solution 1.0
Polyoxyethylene (20) sorbitan monolaurate 1.0
1,3-butylene glycol 5.0
Sorbitol (70%) 2.0
Sodium pyrrolidonecarboxylate solution 3.0
Ethanol 15.0
Ascorbic acid 0.1
Methylparaben 0.1
Dye 0.01
Fragrance 0.01
Purified water balance 100
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