JP2012139193A - 融合タンパク質 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】E型肝炎ウイルス様粒子構成タンパク質に少なくとも1種の異種タンパク質が挿入された融合タンパク質であって、前記異種タンパク質が挿入される位置が、前記E型肝炎ウイルス様粒子構成タンパク質がE型肝炎ウイルス様粒子を形成した際に前記E型ウイルス様粒子の粒子表面となる領域にある、前記E型肝炎ウイルス様粒子構成タンパク質と異種タンパク質との融合タンパク質。
【選択図】図1
Description
virus(BmNPV)等のバキュロウイルスを用いることが好ましい。また、発現ベクターに用いるバキュロウイルスを感染させる昆虫細胞として、SF9細胞、Tn5細胞等を用いることができる。さらに、昆虫細胞ではなく、カイコ等、昆虫そのものを用いることも可能である。
HEVG32712株由来ORF2を用いて、HEV-LP構成タンパク質と異種タンパク質との融合タンパク質の作製を行った。実施例1における異種タンパク質を配列番号:3に示した。該異種タンパク質は、N末端側からC末端側に向かって順にSpacer配列(アミノ酸配列:Gly-Gly-Gly-Ser)、Flagタグ配列(アミノ酸配列:Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys)、及びSpacer配列(アミノ酸配列:Gly-Gly-Gly-Ser)により構成されるものである。また、実施例1における融合タンパク質は、HEV-LP構成タンパク質におけるHEVのORF2にコードされるタンパク質のN末端から555番目のアミノ酸と556番目のアミノ酸との間に相当する位置に、該異種タンパク質が挿入されたものである。
さらに、実施例2として、異種タンパク質として日本脳炎ウイルスNakayama株のエピトープのうち、337番目〜345番目(配列番号:10)の9アミノ酸からなるタンパク質を有する融合タンパク質を作製した。実施例2の融合タンパク質は、HEV-LP構成タンパク質におけるHEVのORF2にコードされるタンパク質のN末端から555番目のアミノ酸と556番目のアミノ酸との間に相当する位置に、該異種タンパク質が挿入されたものである。
Claims (10)
- E型肝炎ウイルス様粒子構成タンパク質に少なくとも1種の異種タンパク質が挿入された融合タンパク質であって、
前記異種タンパク質が挿入される位置が、前記E型肝炎ウイルス様粒子構成タンパク質がE型肝炎ウイルス様粒子を形成した際に該E型ウイルス様粒子の粒子表面となる領域にある、
前記E型肝炎ウイルス様粒子構成タンパク質と前記異種タンパク質との融合タンパク質 - 前記E型肝炎ウイルス様粒子構成タンパク質が、E型肝炎ウイルスのORF2にコードされるタンパク質の一部のアミノ酸を欠失させたものであり、
前記異種タンパク質が、挿入される位置が以下の(a)〜(d)のいずれかである、
請求項1に記載の融合タンパク質
(a)前記E型肝炎ウイルスのORF2にコードされるタンパク質のN末端から484番目のアミノ酸と485番目のアミノ酸との間に相当する位置
(b)前記E型肝炎ウイルスのORF2にコードされるタンパク質のN末端から488番目のアミノ酸と489番目のアミノ酸との間に相当する位置
(c)前記E型肝炎ウイルスのORF2にコードされるタンパク質のN末端から533番目のアミノ酸と534番目のアミノ酸との間に相当する位置
(d)前記E型肝炎ウイルスのORF2にコードされるタンパク質のN末端から555番目のアミノ酸と556番目のアミノ酸との間に相当する位置 - 前記E型肝炎ウイルスのORF2にコードされるタンパク質が、以下の(e)〜(g)のいずれかである、請求項1又は2に記載の融合タンパク質
(e)配列番号:1に示すアミノ酸配列を含むタンパク質
(f)配列番号:1に示すアミノ酸配列において1又は数個のアミノ酸が欠失、挿入、又は付加されたアミノ酸配列を含み、E型肝炎ウイルスのキャプシドタンパク質になり得るタンパク質
(g)配列番号:1に示すアミノ酸配列に対して80%以上の相同性を有するアミノ酸配列を含み、E型肝炎ウイルスのキャプシドタンパク質になり得るタンパク質 - 前記E型肝炎ウイルス粒子構成タンパク質が、以下の(h)〜(j)のいずれかである、請求項1〜3いずれか一項に記載の融合タンパク質
(h)配列番号:2に示すアミノ酸配列を含むタンパク質
(i)配列番号:2に示すアミノ酸配列において1又は数個のアミノ酸が欠失、挿入、又は付加されたアミノ酸配列を含み、E型肝炎ウイルス様粒子を形成し得るタンパク質
(j)配列番号:2に示すアミノ酸配列に対して80%以上の相同性を有するアミノ酸配列を含み、E型肝炎ウイルス様粒子を形成し得るタンパク質 - 前記異種タンパク質が5個〜20個のアミノ酸から構成される、請求項1〜4いずれか一項に記載の融合タンパク質
- 前記異種タンパク質が免疫原性を有する、請求項1〜5いずれか一項に記載の融合タンパク質
- 前記融合タンパク質は、複数の該融合タンパク質が会合してウイルス様粒子を形成し得るものである、請求項1〜6いずれか一項に記載の融合タンパク質
- 請求項1〜7いずれか一項に記載の融合タンパク質が複数会合して構成されたウイルス様粒子
- 請求項1〜7いずれか一項に記載の融合タンパク質をコードする遺伝子を含み、前記融合タンパク質を発現させる発現ベクター
- 請求項1〜7に記載の融合タンパク質、及び/又は請求項8に記載のウイルス様粒子を含む医薬組成物
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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JP2021518342A (ja) * | 2018-03-13 | 2021-08-02 | ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニアThe Regents Of The University Of California | インスリンの経口送達のためのウイルス様ナノカプシド |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2010099547A1 (en) * | 2009-02-27 | 2010-09-02 | The Regents Of The University Of California | Multiple antigen delivery system using hepatitis e virus-like particle |
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- 2011-01-04 JP JP2011000285A patent/JP2012139193A/ja active Pending
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WO2010099547A1 (en) * | 2009-02-27 | 2010-09-02 | The Regents Of The University Of California | Multiple antigen delivery system using hepatitis e virus-like particle |
Non-Patent Citations (4)
Title |
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JPN6014028093; 臨床とウイルス, 2004年, 第32巻, p.362-371 * |
JPN6015011756; PNAS Vol. 106, No. 31, 2009, P. 12992-12997 * |
JPN6015011758; PNAS Vol. 106, No. 31, 2009, P. 12986-12991 * |
JPN6015011761; J. Biol. Chem. Vol. 285, No. 43, 2010, P. 33175-33183 * |
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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JP2021518342A (ja) * | 2018-03-13 | 2021-08-02 | ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニアThe Regents Of The University Of California | インスリンの経口送達のためのウイルス様ナノカプシド |
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