JP2011519995A - 器具クリーナー - Google Patents

Abstract

医療または歯科器具を洗浄するための組成物または濃縮物であって、 プロテアーゼと、生物静力学的に有効なフェノキシアルコールとの組み合わせを備え、前記フェノキシアルコールは、前記合成の常用溶液濃度において、緑膿菌（ＡＴＣＣ １５４４２）に対して選定されたフェノキシアルコールのＭＩＣを下回る濃度であり、それにもかかわらず、前記組成物は、６ｌｏｇの濃度の緑膿菌（ＡＴＣＣ １５４４２）を４時間以内に少なくとも１ｌｏｇ濃度減少させる効果がある。組成物または濃縮物は、さらなる加水分解酵素および／またはホウ素またはホウ素化合物を含んでもよい。

Description

臨床環境における器具の再処理には、多くの問題がある。患者やスタッフにクロス感染する危険が全くないように再利用するためには、器具が、確実に清潔で、殺菌され、安全でなければならない。特に歯科器具は、清浄度、無菌性、および安全性を損なうこと払拭することが特に難しい不溶性の気質を伴う使用において汚染する傾向がある。本発明は、そのような器具を洗浄する組成物及び方法を提供する。本発明は、主に歯科器具に関して説明されるが、歯科器具に限定することなく、例えば、所定の医療、科学器具、および食品加工器などの同様に洗浄困難な汚れで汚染した他の器具を洗浄することにも適している。

検出された汚れの種類は、生物学的（例えば、唾液、タンパク質、血液、脂質、細菌）、有機的（例えば、高分子強壮薬（polymeric restoratives））、および無機的（例えばアルガム）なものを含む。さらに、汚れと基質との起こり得る組み合わせは、ステンレススチールの外科用メスなどの平坦な表面への緩い結合から、カーボンスチールとの接着剤のような物理化学接着へ変化する。さらに取り除くことが困難なのは、ダイヤモンド・バーによって示されるような繊細な表面に付着した生物学的および非生物学的基質である。

汚れの付着は、回転系ツールについて言えば摩擦、または十分に洗浄されていない高圧蒸気殺菌法機器に起因するような熱を通じて増幅可能であり、タンパク質の変性および凝固をもたらす。例えば、バーは、例えば３０，０００ｒｐｍのような高速で使用され、２００℃の温度に達することもあり、バーの溝は、溝の中で焦げる骨／歯のペースト、血液、サルビア（saliva）、組成物およびアルガムの充填物で詰まるようになる。世界中の複数の保健機関は、ＨＩＶ対策として血液に接触した器具の迅速な除染を要求している（非特許文献１）。そのような除染は、多くの場合、塩素漂白剤、フェノール、ＱＵＡＴｓ、および、器具上のタンパク質をさらに凝固させる可能性がある他の化学物質を用いて実行される。

汚れの種類および組み合せにおけるこの多様性は、満足できる洗浄組成物の形成における重要な課題をもたらす。

不清潔な器具を確実に殺菌することは不可能であると広く認められている。そのため、器具の再処理は、最終的な殺菌（多くの歯科医院では、加圧減菌器による）の前に効果的な洗浄ステップを含む。従って、洗浄は、確実な殺菌ために、絶対的に最良実施例の洗浄でなくてはならない。

世界中の公衆衛生当局は、器具の再処理の洗浄ステップのための厳しい要求を課している（非特許文献２）。特に歯科臨床医に関しては、有効な洗浄が使用されない限り、歯内ツールを使い捨てにすることを要求している。そのような確実で有効な洗浄が難題であることは、文献において認知されている（非特許文献３および４）。

これまでの洗浄は、一般的に、ハンド・ブラシ／スクラブあり、またはなしの浸槽または超音波槽のいずれかにおける洗剤水溶液中の洗剤の使用を含んできた（非特許文献５）。

ハンド・ブラシおよびスクラブが、ある程度の確信をかき立ててもいのと同時に、非特許文献６によると、スクラブ用品は表面を傷つけないものでなくてはならないことを明記する（歯科バーを洗浄するためのワイヤブラシの明らかな例外を伴う）。ブラシにしてスクラブにしても、届きにくい表面の完全に均質で再現可能な洗浄を達成できず、確実に有効な洗浄のための唯一の要因にはなりえない。超音波の使用は、洗浄組成物が、特に汚れの再沈着に対して超音波処理環境のもとで有効でなくてはならないというさらなる要求を課す。

さらに、洗浄のために使用される洗剤は、微生物による浸槽の定着を防ぐために静菌性または菌性特性のいずれかを有することが望ましい。多くの好ましいバイオサイドは、タンパク質の変性、および凝固により作用するので、洗浄組成物においては使用できない。

医療関係者には、医療器具を洗浄するために、ガイドライン（非特許文献７および８)の警告に反して、陽イオンベースの洗剤として、バイオサイド特性を有する器具洗剤を使用することが知られており、明らかに望ましいとされる。英国の一部の診療所は、陽イオン手術用手洗洗剤を浸槽及び超音波槽内において洗浄濃縮物として使用してきた（非特許文献９）。

タンパク質が一般的に、生物学的汚れの除去のなかで最も難題であるとされることは、広く認められている。タンパク質を効果的に除去するには、効果的にリポおよび糖タンパク質を開裂するために、多くの場合アミラーゼとリパーゼとの組み合せにおいてプロテーゼが洗剤に含まれている必要がある。バイオサイドと酵素タンパク質とを一つの製剤に合成することは、強力な製剤の挑戦を提案する。特許文献１は、不希釈で適用され、処方される「酵素と合成できる」抗菌剤を使用してこれを達成している。

また、洗剤を希釈可能な（少なくとも１対１００）組成物、すなわち、濃縮物として、形成することは大変な利点である。

現在入手可能な生物静力学的特性を主張する洗剤はとても少ない。Ｅｎｄｏｚｙｍｅ(登録商標） ＡＷ（Ｒｕｈｏｆｆ社）は最大１０％のイソプロパノールを含有する。このイソプロパノールは、タンパク質を間裂し、保存中の酵素活性の損失および洗浄効果の連続的な減少を引き起こす。

スタッフに関する複数の職業安全衛生（「ＯＨ＆Ｓ」）の問題は、器具の再処理中に発生する。基準は、エアロゾルの形成と、洗浄因子へのスタッフの露出（非特許文献１０）とに対して、手作業での器具のスクラブを最小化または廃絶することがベストだと警告する。本発明は、ワイヤブラシとスクラブとによって、洗浄位置から最大１０ｍに液滴が飛散されることを確認した。

超音波槽および浸槽は、定期的に空にされ、新鮮な洗浄溶液を補充されるべきである。基準が、地域ごと（豪国、米国、英国のナショナルヘルスサービス（NHS））で多様化する中、どの場所も、口腔外科において処理された汚れた器具の全バッチのために前述した新鮮な洗浄溶液を使用していない。溶液は、スコットランドでは４時間、オーストラリアでは１日、器具の複数のバッチに再利用されることがある（非特許文献１１）。最悪の場合、報道によれば、診療所は、超音波槽の溶液の交換に５日間以上の間隔を有する（非特許文献８）。現在の発明者は、診療所での８時間の一日の労働時間の終わりに超音波槽の細菌レベルが１０Ｅ＋７ｃｆｕ／ｍｌ〜１０Ｅ＋１０ｃｆｕ／ｍｌであることを確認した。槽の状態が、暗く、湿って、約３５℃〜４０℃の範囲において豊富な栄養を含んでおり、細菌を培養するために使われる槽に近似していることを考慮に入れると、そのような高い細菌密度を見ることは驚きではない。

現在、補充の間に槽を消毒／殺菌することは要求されていない。従って、膨大な数の細菌が、前回の使用から持ち越される可能性がある。この細菌は、洗浄しづらい排水管と嵌合する排水口と供に組まれた超音波槽によって増殖する。さらに悪いことに、漏出および偶発的な人との接触の危険性が高い。

オーストラリア、米国、英国標準は、目に見えて汚れた槽を洗浄することに対して分別を示し、またその気持ちの悪い汚染が、洗浄前に除去されるべきであることを推奨する。最良の場合であっても、裸眼では見えない病原体およびそれらのコロニーは、槽および他の器具にクロス感染し、その場で増殖し次の患者やスタッフの両者への感染の危険性を創出しながら、汚れのレベルは、容易に過小評価されている。

洗浄製品によって、器具を消毒することを要求されていない中、効果的な抗菌または静菌特性が、器具のクロス感染とスタッフによる感染との危険性を限定し、歯科診察所の洗浄エリアの通常の衛生状態に貢献することができる。

別の考慮すべき問題は、再利用する医療器具を介して起こり得るｖＣＪＤ伝染についてである。歯科関係の文献には、この危険性が、三叉神経の末梢枝との密接な接触のために根幹治療中の歯内ファイルの使用に関連してきたとある(非特許文献１１)。加圧減菌器を繰り返し使っても、プリオンタンパク質を確実に変性または非活性化することはできないことは広く認めら照れている（非特許文献１２)。従って、洗浄周期の間にプリオン感染を非活性化することができる器具洗浄の製剤化が大変望ましい。

器具の効果的な洗浄は、ｖＣＪＤの伝染が拡大する危険性を減少させるキーステップであると信じられていることが認められている(非特許文献８)。パラショー（Parashos）は「プリオン病の危険性における最近の考慮は、使い捨ての歯内器具を取り扱うことを考慮すべきであるという見解に貢献してきた」と提示する。

要約すると、歯科器具は高価であり、使い捨てとしては考えられないが、今日まで、歯科器具の十分といえる洗浄方法は存在しない。現在、歯科器具は、ブラシされ、超音波槽内でプレ洗浄され、蒸気減菌されて再利用される。しかしながら、殆どの場合、バーやその他の複雑な歯科器具は、最良の洗浄の実践後でさえ、汚れが残る傾向があり、（蒸気減菌器では非活性化できない）プリオンのキャリアになり得る。同様の問題は、多数の手術器具、特に、殺菌加熱できない器具、または超音波ありでも、なしでも酸、アルカリ、または酵素によって除去できない生物膜基質内に耐殺菌プリソンが非難することができる器具において同様である。また、超音波槽および浸槽内の洗浄液の使用を長い周期で実践する現行方式が、交差感染と一般的なＯＨ＆Ｓ危険視点との双方から危険を提起することが広く認知されている。

従来技術の明細書全体の任意の考察は、そのような従来技術が周知である、またはその分野における共通の常識的知識の一部を形成することを承認するものとして考慮されるべきではない。

米国特許第６２３５６９２号明細書

Ｄｅｃｒｅｔｏ Ｌｅｇｉｓｌａｔｉｖｏ ２８／０９／１９９０： Ｎｏｒｍｅ ｄｉ ｐｒｏｔｅｚｉｏｎｅ ｄａｌ ｃｏｎｔａｇｉｏ ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌｅ ｄａ ＨＩＶ ｎｅｌｌｅ ｓｔｒｕｔｔｕｒｅ ｓａｎｉｔａｒｉｅ ｅｄ ａｓｓｉｓｔｅｎｚｉａｌｉ ｐｕｂｂｌｉｃｈｅ ｅ ｐｒｉｖａｔｅ． Ｇａｚｚｅｔｔａ Ｕｆｆｉｃｉａｌｅ Ｒｅｐｕｂｂｌｉｃａ ｌｔａｌｉａｎａ １９９０； ２３５：７８ｅ８０ Ｒｏｂｅｒｔ Ｋｏｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ． Ｈｙｇｉｅｎｉｃ Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｆｏｒ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｅｖｉｃｅｓ． Ｂｕｎｄｅｓｇｅｓｕｎｄｈｅｉｔｓｂｌａｔｔ−Ｇｅｓｕｎｄｈｅｉｔｓｆｏｒｓｃｈｕｎｇ−Ｇｅｓｕｎｄｈｅｉｔｓｓｃｈｕｔｚ ２００１；４４：１１１５−１１２６ Ｓｍｉｔｈ，Ａ．，Ｌｅｔｔｅｒｓ，Ｓ．，Ｌａｎｇｅ，Ａ．，Ｐｅｒｒｅｔｔ，Ｄ．，ＭｃＨｕｇｈ，Ｓ．，Ｂａｇｇ，Ｊ．，２００５． Ｒｅｓｉｄｕａｌ ｐｒｏｔｅｉｎ ｌｅｖｅｌｓ ｏｎ ｒｅｐｒｏｃｅｓｓｅｄ ｄｅｎｔａｌ ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ， ６１，２３７−２４１ Ｆ．Ｔｅｓｓａｒｏｌｏ ｅｔ ａｌ． Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｆｏｒ Ｄｅｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎ Ａｆｆｅｃｔ ｔｈｅ Ｃｌｅａｎｉｎｇ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｅｖｉｃｅｓ． Ａ Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ Ｅｌｅｃｔｒｏｎ Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ（２００７）６５，３２６−３３３ Ｂａｇｇ，Ｊ．，Ｓｗｅｅｎｅｙ，Ｃ．Ｐ．，Ｒｏｙ， Ｋ．Ｍ．，Ｓｈａｒｐ，Ｔ．，Ｓｍｉｔｈ，Ａ．，２００１，Ｃｒｏｓｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ Ｃｏｎｔｒｏｌ Ｍｅａｓｕｒｅｓ ａｎｄ ｔｈｅ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐａｔｉｅｎｔｓ ａｔ Ｒｉｓｋ ｏｆ Ｃｒｅｕｔｚｆｅｌｄｔ Ｊａｋｏｂ Ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎ ＵＫ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｄｅｎｔａｌ Ｐｒａｃｔｉｃｅ． Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｄｅｎｔａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ，１９１（２），８７−９０ ＡＳ４８１５：２００６ ＩＳＯ１５８８３，ＡＳ４１８７ Ｓｍｉｔｈ，Ａ．，Ｂａｇｇ，Ｊ．，ＭｃＨｕｇｈ， Ｓ．，２００６．Ｎｏ ｔｏ Ｃｈｌｏｒｈｅｘｉｄｉｎｅ（Ｌｅｔｔｅｒ ｔｏ Ｅｄｉｔｏｒ），Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｄｅｎｔａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ，２００，３１−３１ Ｂａｇｇ ｅｔ ａｌ，２００６，ｓｕｐｒａ ＡＳ４８１５：２００６ ＮＨＳ，Ｓｃｏｔｌａｎｄ，２００３，ＡＳ４８１５：２００６ Ｓｍｉｔｈ，Ａ．，Ｄｉｃｋｓｏｎ，Ｍ．，Ａｉｔｋｅｎ，Ｊ．，Ｂａｇｇ，Ｊ．，２００２，Ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄ ｄｅｎｔａｌ ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，５１，２３３− ２３５ Ｔａｙｌｏｒ，Ｄ．Ｍ．，１９９９，Ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｉｏｎｓ ｂｙ ｐｈｙｓｉｃａｌ ａｎｄ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｍｅａｎｓ． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，４３（Ｓｕｐｐ），Ｓ６９−Ｓ７６ Ｍｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ， １９９３ ｐｒＥＮ ＩＳＯ １５８８３−１：２００２ Ｖｉｃｔｏｒｉａ Ａ．Ｌａｗｓｏｎ，Ｊａｍｅｓ Ｄ．Ｓｔｅｗａｒｔ ａｎｄ Ｃｏｌｉｎ Ｌ． Ｍａｓｔｅｒｓ Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｄｅｔｅｒｇｅｎｔ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｐｒｏｔｏｃｏｌ ｔｈａｔ ｒｅｄｕｃｅｓ ｐｒｏｔｅａｓｅ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｐｒｉｏｎ ｐｒｏｔｅｉｎ ｌｏａｄ ａｎｄ ｉｎｆｅｃｔｉｖｉｔｙ ｆｒｏｍ ｓｕｒｇｉｃａｌ−ｓｔｅｅｌ ｍｏｎｏｆｉｌａｍｅｎｔｓ ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄ ｗｉｔｈ ａ ｈｕｍａｎ−ｄｅｒｉｖｅｄ ｐｒｉｏｎ ｓｔｒａｉｎ Ｊ Ｇｅｎ Ｖｉｒｏｌ ８８（２００７），２９０５−２９１４

従来技術のデメリットの少なくとも一つを克服、または改善する、あるいは、役立つ代替案を提供することが本発明の目的である。

より具体的には、歯科および医療器具、特に、基質で汚れた器具を洗浄する改善された組成物および方法を提供することが、本発明の目的である。

この内容が明確に他の意味を要求しない限り、明細書および請求項を通して、「備える」、「備えている」または同義語は、「限定することなく、含む」という意味といえるような、独占的または網羅的な意味とは反対の包括的な意味で解釈されるものとする。

第１態様によると、本発明は、医療または歯科器具を洗浄するための組成物であって、プロテアーゼと、前記組成物の常用溶液濃度になるように選択した生物静力学的に有効なフェノキシアルコールとの組み合わせを供え、フェノキシアルコールは、選定したフェノキシアルコールのＭＩＣを下回る濃度であり、それにもかかわらず、組み合わせは、６ｌｏｇの濃度の緑膿菌（ＡＴＣＣ １５４４２）を４時間以内に少なくとも５ｌｏｇの濃度に減少させる効果がある組成物を提供する。

第１態様を踏まえると、本発明は、プロテアーゼと、緑膿菌（ＡＴＣＣ １５４４２）に対するそのＭＩＣを下回る濃度の生物静力学的に有効なフェノキシアルコールとを含む、医療または歯科器具を洗浄するための組成物を提供し、その組成物は、６ｌｏｇの濃度の緑膿菌（ＡＴＣＣ １５４４２）を４時間以内で少なくとも１ｌｏｇ濃度を減少させる効果がある。

また、第一態様を踏まえると、本発明は、プロテアーゼと、黄色ブドウ球菌（ＡＴＣＣ ６５３８）に対するそのＭＩＣを下回る濃度において生物静力学的に有効なフェノキシアルコールとを含む、医療または歯科器具を洗浄する組成物を提供し、その組成物は、６ｌｏｇの濃度の黄色ブドウ球菌（ＡＴＣＣ ６５３８）を４時間以内に少なくとも１ｌｏｇ濃度減少させる効果がある。

好ましい実施形態では、組み合わせは、６ｌｏｇ濃度のシュードモナス菌を４時間以内に４ｌｏｇ濃度減少させる効果があり、少なくもとも黄色ブドウ球菌（ＡＴＣＣ ６５３８）に対する程度の効果があり、それは、好適な実施形態では、組み合わせは、６ｌｏｇ濃度のブドウ球菌を４時間以内に少なくとも２ｌｏｇ濃度減少させる効果がある。

好適な実施形態では、剪定したフェノキシアルコールは、フェノキシエタノールであり、少なくとも１００対１で希釈するための安定した濃縮物において、１０，０００ｐｐｍ、好ましくは３０，０００ｐｐｍより高い濃度において存在する。

これまで、フェノキシエタノールは、殺菌剤またはバイオスタット（biostat）として使用されてきた。そのようなものとして、耐性細菌、１０，０００ｐｐｍの黄色ブドウ球菌（ＡＴＣＣ ６５３８）に対してその最小阻止濃度（「ＭＩＣ」）を若干上回る１５，０００ｐｐｍの濃度で使用されてきた。微生物学におけるＭＩＣは、「一晩の培養後の微生物の目に見える成長を抑止する抗菌剤の最低濃度」と、定義される。ＭＩＣより低い濃度の場合、フェノキシアルコールは、微生物の繁殖を防止できない。黒色アスペルギルス（ＡＴＣＣ １６４０４）に対する２，５００ｐｐｍから、ブドウ球菌に対する１０，０００ｐｐｍまでのフェノキシエタノールのＭＩＣの範囲が一般的に容認されている（万能溶液Ｐｈｅｎｏｘｅｔｏｌ（登録商標）、Ｃｌａｒｉａｎｔ社）。

第２態様によると、本発明は、プロテアーゼと、選定したフェノキシアルコールの常用濃縮物に希釈する上での濃度における生物静力学的に有効なフェノキシアルコールとを含む濃縮物を備える第１態様と同様の組成物を提供し、それにもかかわらず、常用濃度の組み合わせは、６ｌｏｇ濃度の緑膿菌（ＡＴＣＣ １５４４２）を４時間以内に少なくとも１ｌｏｇ濃度減少させる効果がある。

第２態様を踏まえると、本発明は、プロテアーゼと生物静力学的に有効なフェノキシアルコールとを含む濃縮物をさらに提供し、その希釈物は、第１態様の組成物を提供する。

第２態様による本発明の好適な実施形態では、フェノキシアルコールは、フェノキシエタノールであり、１０，０００ｐｐｍ、より好ましくは３０，０００ｐｐｍを超える濃度の濃縮物の中に含まれる。濃縮物は、使用前に１００対１で希釈されるものである。希釈された濃縮物は、同条件下で既存のクリーナーでは達成不可能な基準を達成するように超音波槽内で器具を洗浄することができるだけでなく、槽内の微生物の濃度を低減することができる。本発明は、超音波槽の使用に限定するものではなく、組成物は、浸漬および別の手段によって適用される洗浄液等を使用する際も有効である。

第3態様によると、本発明は、1つ以上の加水分散酵素をさらに備える、第1態様の組成物を提供する。

加水分散酵素は、酵素のＥＣ分類番号においてＥＣ３に分類される。加水分散酵素は、それらが作用する結合に基づいてさらに複数のサブクラスに分類される：
・ＥＣ３．１： エステル結合（エステラーゼ： ヌクレアーゼ、ホスホジエステラーゼ、リパーゼ、ホスファターゼ）
・ＥＣ３．２： 糖類（グリコシラーゼ／ＤＮＡグリコシラーゼ、糖加水分解酵素）
・ＥＣ３．３： エーテル結合
・ＥＣ３．４： ペプチド結合（プロテアーゼ／ペプチダーゼ）
・ＥＣ３．５： 炭素−窒素結合、ペプチド結合以外
・ＥＣ３．６： 酸無水物（ヘリカーゼ、およびＧＴＰアーゼを含む酸無水物の加水分解）
・ＥＣ３．７： 炭素−炭素結合
・ＥＣ３．８： ハロゲン結合
・ＥＣ３．９： リン−窒素結合
・ＥＣ３．１０： 硫黄窒素結合
・ＥＣ３．１１： 炭素−リン結合
・ＥＣ３．１２： 硫黄−硫黄結合
・ＥＣ３．１３： 炭素−硫黄結合

第4態様によると、本発明は、ホウ素またはホウ素化合物をさらに備える、前述の態様のいずれか１つの組成物を提供する。

第５態様によると、本発明は、感染性プリオンタンパク質を非感染性ペプチドに分裂することができる、前述の態様のいずれか１つの組成物を提供する。

本発明は、ここでは主に、フェノキシアルコールとしてフェノキシエタノールの使用について説明されているが、フェノキシメタノールやプロパノールなどの他のフェノキシアルコール、または鎖状置換基アルコールが使用されてもよいことが理解できるだろう。フェノキシグループは、他の置換基を有し得る。当業者であれば、ここでの開示に基づいた簡単な実験によって適切なフェノキシアルコールを選択することができるだろう。

第６態様によると、本発明は、前述の態様のいずれか１つの溶液に汚れを露出するステップを備える、汚れた医療または歯科器具を洗浄する方法を提供する。

希釈組成物市場をリードする酵素洗浄製品との比較において、時間とともに緑膿菌（ＡＴＣＣ １５４４２）の細菌密度の濃度を減少させることで、本発明の希釈組成物の効果を示すグラフである。 希釈組成物市場をリードする酵素洗浄製品との比較において、時間とともにブドウ球菌（ＡＴＣＣ ６５６８）の密度の濃度を減少させることで、本発明の希釈組成物の効果を示すグラフである。 希釈組成物市場をリードする酵素洗浄製品との比較において、時間とともにミュータンス連鎖球菌の密度の濃度を減少させることで、本発明の希釈組成物の効果を示すグラフである。 １対１００の希釈されたＥｍＰｏｗｅｒ（登録商標）によって処理された後のバーの写真であり、器具の表面上にデブリ（debris）が明らかに見える。 ＥｍＰｏｗｅｒ(登録商標）と同じ希釈率の製剤Ｂが完全に全ての目に見える汚れを除去することを示す写真である。 表３を参照して実施された洗浄効果試験の結果を示す。 製剤２に露出させた後のＰｒＰｒｅｓプリオンタンパク質（Ｍ１０００の株）のウェスタンブロットを示す。ＰｒＰｒｅｓ信号の強度は、試験したすべての希釈物によって減少している。

ここで、本発明を、単に特定の例を参照しながらほんの一例としてより具体的に説明する。

前述したように、オーストラリアおよび英国の基準は、それぞれ、一日または半日間隔で超音波槽の洗浄液を交換することを推奨していた。使用した超音波洗浄液の不回避かつ立証済み（非特許文献１４）の汚染を前提として、本発明に係る組成物をこれまで歯科器具の洗浄に使用された市場をリードする組成物と抗菌効果を比較するために効能試験が発達した。この課題は、有機および無機負荷とともに、３つの一般的な細菌株を含んでいた。
［材料および方法］

本発明による製剤Ａ

本発明による製剤Ｂは、歯科技工士が使用する製剤の範例となる。

例Ａおよび例Ｂを、歯科器具の洗浄分野における４つのマーケットリーダーと比較する。それらのマーケットリーダーは、ＥｍＰｏｗｅｒ（登録商標）(Ｋｅｒｒ社)、Ｅｎｄｏｚｉｍｅ（登録商標） ＡＷ Ｐｌｕｓ (Ｒｕｈｏｆ社)、 Ｂｉｏｓｏｎｉｃ（登録商標）(Ｃｏｌｔｅｎｅ社)、 および Ｃｉｄｅｚｙｍｅ（登録商標） (Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｊｏｈｎｓｏｎ社)である。

クリーナー（表３）は、１００ｐｐｍのＡＯＡＣ硬水において１対１００で希釈された。（豪州ＴＧＯ ５４手順のように準備された）有機負荷を加え、５％（ｗ／ｗ）の酵母エキス、５％（ｗ／ｗ）の脱線移維素馬血（Oxoid）、および、馬の血液、卵黄、ムチンおよびアルブミン１０ｍＬ（の混合物で構成される（各調合液の一定量は、０．１ｍＬの各細菌接種を接種される（約１０^８ＣＦＵ／ｍＬ）（表４））。

サンプルは、２４時間、４０±１℃で培養される。それぞれ、最初の８時間に、１０分間高周波処理を含んだ。１ｍＬのサンプルが、１時間、４時間、８時間、そして２４時間後に抽出され、トリプトン大豆スープ（Tryptone Soya Broth）が中和剤（５％（ｗ／ｗ）のＴｗｅｅｎ８０（シグマ）、３％（ｗ／ｗ）のレシチン（シグマ）、０．１％（ｗ／ｗ）のＬ−ヒスチジン（シグマ）、および０．５％（ｗ／ｗ）のチオ硫酸ナトリウム（シグマ））と供に足された。中和させたサンプルは、ボルテックスされ、続いて生理食塩水で希釈され、トリプトン大豆寒天（Tryptone Soya Agar）（Oxoid）上で定量化された。プレートは、３７±１℃で４８時間培養された。

上記細菌は、植物性グラム陰性およびグラム陽性細菌の試験として認知されている。それらは比較的殺菌するのが難しい耐性細菌である。
［結果］

結果を表５ａ、表５ｂ、表５ｃおよび添付図１、図２、図３にそれぞれ示す。

表５ａでは、希釈した酵素クリーナーに露出後に、緑膿菌（ＡＴＣＣ １５４４２）の細菌濃度が変化する。

表５ｂでは、希釈した酵素クリーナーに露出後に、黄色ブドウ球菌（ＡＴＣＣ ６５３８）の細菌濃度が変化する。

表５ｃでは、希釈した酵素クリーナーに露出後に、ミュータンス連鎖球菌の細菌濃度が変化する。

図１に示すように、緑膿菌（ＡＴＣＣ １５４４２）の場合、最初の濃度は６ｌｏｇであった。１時間後には、３〜６の組成物の微生物濃度が高くなった。その後、微生物濃度は４時間上がり続け、２４時間後にはかなり高くなった。対照的に本発明による製剤ＡおよびＢ双方は、４時間以内に微生物濃度が２ｌｏｇ減少し、２４時間の試験を通して減少し続けた。サンプルＡおよびＢのフェノキシエタノール濃度はＭＩＣを大きく下回っており、大変な驚きである。プロテアーゼもフェノキシエタノール単独もこれらの濃度では減少を達成しなかった。試された他の有機体の結果は、劇的さにはかけるが同等であった。本発明による組成物ＡおよびＢだけが、４時間ごとに少なくとも１ｌｏｇの微生物を減少させた。Ｃｉｄｅｚｙｍｅ（登録商標）およびＥｍｐｏｗｅｒ（登録商標）は、黄色ブドウ球菌については４時間に渡っていくらかの減少を達成したが、それは１ｌｏｇ以下であり、本発明の組成物によって達成された減少には全く及ばなかった。

本発明の組成物は、それぞれのケースにおいて時間とともに微生物濃度を減少させるのに効果的だった唯一のものであり、試した種類に渡って最も広範囲の抗菌カスペクトラムを示した。シュードモナス菌は遍在し、希釈されたクリーナーに使われる飲料水供給内に存在する最耐性グラム陰性細菌である。この研究に使用された黄色ブドウ球菌および緑膿菌株は、それぞれ最耐性グラム陽性およびグラム陰性細菌であり、日常的に病院の殺菌剤（ＡＯＡＣ試験方法）を試すために使用される。

超音波槽は、通常閉鎖されて操作される。暗く、４０℃以下で、汚れた器具から洗浄され、余りある栄養素が存在する環境である閉ざされた超音波洗浄槽内の状態は細菌の生育に理想的である。試験した殆どの製品では、細菌密度がｌｏｇ１０〜ｌｏｇ１１ｃｆｕ／ｍｌレベルに達し、細菌の生育を抑止しなかった。

多くの診療所では、超音波槽でプレ浸液後に器具のブラッシングが行われることも明記すべきである。そのよう手順の間に散布される汚染された噴霧や液滴が、大幅なＯＨＳ／感染リスクを生み出す。

ある事務所のレイアウトにおける器具再処理エリアは、画定されたクリーンおよびアンクリーンエリアを有さず、それにより、この液滴が、殺菌済の器具の保管パックまで汚染する可能性がある。
［洗浄効果］

初期スクリーニング試験−主力製品の洗浄効果

標準化された汚れ試験が、超音波エネルギーの恩恵を受けない洗浄効果における試験製品を選別するために使用された。ブラウンＳＴＦ「Ｌｏａｄ Ｃｈｅｃｋ」試験ストリップ（アルバートブラウン社、英国）が、病院の洗浄機の再現性のある、厳格な検証試験として容認されている。この試験ストリップは、２つのタイプのタンパク質、一炭水化物および過酸化脂質を含む、サロゲートの汚れで構成される。
［材料および方法］

６つの器具クリーナー（表３）は、４０±１℃において、１００ｐｐｍの合成ＡＯＡＣ硬水で１対１００に希釈された。１００ｍＬの希釈された製品の溶液それぞれは、別の１２０ｍＬのグラスビーカーに分配された。ブラウンＳＴＦ負荷試験インジケータが、各ストリップを半分にカットすることにより用意され、２枚のマッチするブラウンＳＴＦの四角片が作られた。１つの四角片が、ビーカーの壁に対してまっすぐに立つように各ビーカーの中に配置された。カウントダウンタイマーを１０分でスタートした。

１０分後、ブラウンＳＴＦ四角片をビーカーから取り除き、最小限攪拌しながら清浄水に浸して慎重にリンスして、乾燥および写真のために、乾いた白色のペーパータオルの上に置いた。

洗浄剤の有効性を、除去された赤色のサロゲート汚れの割合の関数として測定した。
［結果］

製剤ＡおよびＢだけが、完全にストリップから汚れを除去する能力を示した。Ｃｉｄｅｚｙｍｅ（登録商標）（Ｊｏｈｎｓｏｎ ＆ Ｊｏｈｎｓｏｎ社）およびＥｍＰｏｗｅｒ（登録商標）（Ｋｅｒｒ社）も、ある程度の効果を示したが、試験した７つの製品の中で、製剤Ｂだけが、その製剤の有効性を通じて難題であるサロゲート医療汚れを除去することができた。他の６つの製品のバラつきのある性能は、（手作業または超音波の「スクラブ」などの）力学的な洗浄力に依存することを示す。Ｂｉｏｓｏｎｉｃ（登録商標）は、水のみよりも劣る洗浄効果を示した。
［最悪の場合の汚れ比較： ＥｍＰｏｗｅｒと製剤Ｂ］

製剤Ｂが、洗浄効果のための最初の選別試験に合格したことを判別し、ＥｍＰｏｗｅｒが、「残りなかではベスト」だったことを判別して、特に歯科環境における最悪の場合のシナリオが考案された。

「最悪の場合」のシナリオでは、洗浄が非常に困難な歯科課題を提示することに対して、基質と塗布された汚れとの両方を考慮する必要があった。同時に、その課題は、見た目の清浄度だけが、信頼性のある殺菌または消毒を実現するために要求されるところであることを考慮すると、現実的であり、結果として生じる手順である必要があった。

歯科技工士との広範囲におよぶ相談と文献の分析との後、最悪な場合の器具表面の典型として、ダイアモンドバーが選ばれた。丸いヘッドのタングステンカーバイドおよびカーボンスチールバーは、人工の汚れの試験基質として広く使用されてきたが、それらは、小さな噛合および隙間のない、より簡単なカット面を提示し、標準的な手順に従ってより簡単に洗浄できることが分かった。

同様に歯内ファイルは、洗浄が難しいと報告されてきた。しかしながら、ファイルの形状とステンレススチール（親水性表面）が、洗浄工程においてダイアモンドバーより非常に小さな課題であることが分かった。

ダイアモンドバーの複雑な表面は、結構な量のダイアモンド粉で覆われながら、全く不規則であって、汚れ除去には最も難題な表面であった。使用中の摩擦熱の発生と合わさり、変性タンパク性の化学的接着する可能性が非常に高い。

試験汚れは、医療洗浄消毒器用の多くの欧州標準試験汚れから影響を受けた（非特許文献１５）。その試験汚れには、複数のタンパク質（血清アルブミン、卵黄）、粘膜炭水化物（ムチン）、および脂質の源が含まれる。試験汚れは、表面のファセット(facets)および隙間に浸透するように低い粘度に調整され、基質上に焼き付けれて、タンパク質を変性させ、接着性を増加させた。
［材料および方法］

卵黄 １０％（ｗ／ｗ）
１％ アルブミン １０％（ｗ／ｗ）
１％ ムチン １０％（ｗ／ｗ）
合成ブロス ６８％（ｗ／ｗ）
青溶剤 ２％（ｗ／ｗ）

汚れの粘度は、バーの隙間に確実に汚れが浸透するように約６００ｍＰａに調整された。

表６に示すように、製剤ＢおよびＥｍＰｏｗｅｒ（登録商標）を、ダイアモンドおよびカーボンスチールバーに対して様々な希釈率で超音波槽内において試験を行った。対照は、４０℃の飲料水内で超音波処理された。
[結果]

各処理後のバーの清浄度は、１０：汚れの完全な目視上除去、０：感知できない除去として、０〜１０のスケールで定量的に評価された。括弧内数字は、処理の反復数である。
［考察］

「製剤ベース」の洗浄効果に関して製剤Ｂの優位点を実例説明するのと同時に、（抗菌性および洗浄試験の両方の領域を統合して）薬剤Ｂに最も近いライバルＥｍＰｏｅｗｒと比較した。超音波の援助とともに、洗浄することが非常に難しい汚れに対して試験した際、製剤Ｂは、推奨使用希釈において目に見える汚れを全く残さなかった。Ｅｍｐｏｗｅｒ（登録商標）は、確かに水や超音波のみよりも良好であったが、全てのケースにおいて目に見える汚れが残った。

課題量の人工汚れをダイアモンドバー上に配置することは、複雑な表面形状のおかげで容易であった。反対に、厳密な乾燥−焼付モードを使用時でさえ、歯内治療のファイル、リーマー、およびブローチ上に十分な量の汚れを配置することは不可能であった。このような状態のもと、1対１００で希釈された製剤Ｂ内で２分間超音波洗浄した後、器具は見た目上清浄であった。

上述の組成物では、プロテアーゼおよびフェノキシエタノールが、同一の比率で存在するが、この比率は大幅に変わってもよい。酵素とフェノキシエタノールの比が、２：１〜１：２でも同様の結果が得られた。好ましい製剤は、一つのプロテアーゼだけより、アミラーゼ、Ｌｉｐｏｌａｓａｅ（登録商標）、およびことによるとセルラーゼのような酵素の混合物を含む。好ましくは、水混和性溶液でない組み合わせが１つの洗剤として含まれる。補足的に、香料や染料が追加されてもよい。当業者であれば、そのような追加物の相対量が広域にわたって異なってもよいことを認識し、本発明の要旨を逸脱することなく使用されてもよい代替物に気付くことだろう。

本発明の伝染性プリオンタンパク質の洗浄効果を、非特許文献１６に記載の方法論を利用して試験した。

病気の動物から得た１０％の脳ホモジネートの１マイクログラムを、５０℃、９８マイクロリットルの、１対１００で希釈された製剤Ｂに足した。図７は、実験結果をまとめている。この好ましくない酵素洗剤対プリオンタンパク質の比（１００対１）でさえ、プリオンタンパク質濃度が少なくとも２．５Ｌｏｇ減少した。酵素洗剤対プリオンタンパク質の実際の比は少なくとも１０，０００対１であるから、感染性プリオンタンパク質の分裂比における比例する増大と、医療器具が推奨希釈比および温度で製剤Ｂのより処理される際のプリオン伝染力の完全な除去とを期待できる。

Claims (20)

1. プロテアーゼと、
   生物静力学的に有効なフェノキシアルコールと、
   の組み合わせを備える医療または歯科器具を洗浄するための組成物であって、
   前記フェノキシアルコールは、前記合成の常用溶液濃度において、緑膿菌（ＡＴＣＣ １５４４２）に対して選定されたフェノキシアルコールのＭＩＣを下回る濃度であり、
   それにもかかわらず、前記組み合わせは、６ｌｏｇの濃度の緑膿菌（ＡＴＣＣ １５４４２）を4時間以内に少なくとも１ｌｏｇ濃度減少させる効果があることを特徴とする組成物。
2. プロテアーゼと、
   緑膿菌（ＡＴＣＣ １５４４２）に対してそのＭＩＣを下回る濃度の生物学的に有効なフェノキシアルコールと、
   を含む医療または歯科器具を洗浄するための組成物であって、
   当該組成物は、６ｌｏｇの濃度の緑膿菌（ＡＴＣＣ １５４４２）を、4時間以内に少なくとも１ｌｏｇ濃度を減少させる効果があることを特徴する組成物。
3. 前記組み合わせが、６ｌｏｇの濃度のシュードモナス菌を、４時間以内に少なくとも２ｌｏｇ濃度減少させる効果があることを特徴とする請求項１または２に記載の組成物。
4. プロテアーゼと、
   黄色ブドウ球菌（ＡＴＣＣ ６５３８）に対してそのＭＩＣを下回る濃度の生物学的に有効なフェノキシアルコールと、
   を含む医療または歯科器具を洗浄するための組成物であって
   当該組成物は、６ｌｏｇ濃度の黄色ブドウ球菌（ＡＴＣＣ ６５３８）を、４時間以内に少なくとも１ｌｏｇ濃度減少させる効果があることを特徴とする組成物。
5. 前記組み合わせが、６ｌｏｇ濃度のブドウ球菌を4時間以内に少なくとも２ｌｏｇ濃度を減少させる効果があることを特徴とする請求項４に記載の組成物。
6. 前記組み合わせが、黄色ブドウ球菌（ＡＴＣＣ ６５３８）に対して少なくとも効果があることを特徴とする請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
7. 選定されたフェノキシアルコールが、１０，０００ｐｐｍより高い濃度で存在するフェノキシエタノールであることを特徴とする請求項１〜６のいずれかに一項に記載の組成物。
8. フェノキシエタノールが、１００対１より希釈したものを対象とした安定した濃縮物内に、３０，０００ｐｐｍ以上の濃度において存在することを特徴とする請求項４に記載の組成物。
9. プロテアーゼと、
   常用濃度に希釈する際に、フェノキシアルコールが、選定されたフェノキシアルコールの緑膿菌（ＡＴＣＣ １５４４２）に対するMIC以下の濃度になるような所定濃度において生物静力学的に有効なフェノキシアルコールと、
   を含み、
   それにもかかわらず、常用濃度での組み合わせは、６ｌｏｇ濃度の緑膿菌（ＡＴＣＣ １５４４２）を４時間以内に少なくとも１ｌｏｇ濃度を減少させる効果があることを特徴とする濃縮物。
10. プロテアーゼと、
    希釈する際に請求項１〜９のいずれかに記載の組成物を提供する生物静力学的に有効なフェノキシアルコールと、
    を含むことを特徴とする濃縮物。
11. フェノキシアルコールが、フェノキシエタノールであって、１０，０００ｐｐｍを上回る濃度で濃縮物内に存在することを特徴とする請求項９または１０に記載の濃縮物。
12. フェノキシアルコールが、フェノキシエタノールであって、３０，０００ｐｐｍを上回る濃度で濃縮物内に存在することを特徴とする請求項１１に記載の濃縮物。
13. 当該濃縮物が、使用前に１００対１より薄く希釈することを意図されることを特徴とする請求項９〜１２のいずれか一項に記載の濃縮物。
14. １つ以上の加水分解酵素をさらに含むことを特徴とする請求項９〜１３のいずれか一項に記載の濃縮物。
15. ホウ素またはホウ素化合物をさらに含むことを特徴とする請求項９〜１４のいずれか一項に記載の濃縮物。
16. 感染性プリオンタンパク質を非感染性ペプチドに間裂することができることを特徴とする請求項９〜１５のいずれか一項に記載の濃縮物。
17. 超音波槽内で使用されることを特徴とする請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
18. 汚れた医療または歯科器具を洗浄する方法であって、
    請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物に汚れを露出するステップを備えることを特徴とする方法。
19. 超音波槽内で使用されることを特徴とする請求項９〜１６のいずれか一項に記載の組成物。
20. 汚れた医療または歯科器具を洗浄する方法であって、
    請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物に汚れを露出するステップを備えることを特徴とする方法。