JP2011518940A - ヒドラジド架橋を有するポリ−α(1→4)グルコピラノース−ベースのマトリクス - Google Patents
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Abstract
Description
本願は、2008年4月28日に出願された、「Low Molecular Weight Poly−α(1−4)Glucopyranose−Based Matrices with Hydrazide Crosslinking」を名称とする米国仮特許出願第61/125,712号の優先権を主張する。当該出願の開示内容を引用することによって本願に援用する。
本発明は、体内で使用するための生体適合性及び生分解性を有するマトリクスに関する。この生分解性マトリクスは、細胞物質を含み、in vivoで細胞骨格として使用され得るか、又は、該マトリクスから放出され得る治療用化合物を含んでいてもよい。
高分子ヒドロゲルマトリクスは、様々な病状の治療に有用な生体材料として記載されている(例えば、米国特許第5,529,914号、第5,854,382号、第6,007,833号、第6,051,248号、第6,153,211号、第6,316,522号、第6,818,018号、および第7,070,809号を参照)。用いられる高分子材料に応じて、これらのマトリクスは、生体安定性を有しているか、又は、移植期間後に生分解可能であってよい。これらのマトリクスを形成するために用いられる高分子材料は、生体適合性があることが望ましく、これは、高分子材料が、ヒドロゲルが設置又は形成された生物に、生物学的に逆作用しないことを意味している。このため、一般に、これらのin vivoでの存在または濃度によって、体に望ましくない副作用を生じさせる産物に分解するような生体分解性材料の使用は、回避されることが望ましい。これらの望ましくない副作用には、免疫反応、肝臓において分解産物が毒を形成すること、または、体内の細胞もしくは組織に与える他の有害影響を引き起こす、もしくは誘発することが含まれる。
本発明は、例えば病状の治療のために体内で使用可能な、生体適合性および生分解性を有するマトリクスに関する。このマトリクスは、穏やかな条件下で架橋され得る多糖ベースの物質から形成される。この物質は、本発明の幾つかの実施形態下では、細胞又は治療用巨大分子といった反応しやすい生体物質の封入に特に適している。具体的には、マトリクスは、ポリ−α(1→4)グルコピラノースを含む高分子材料と、反応性ヒドラジド基とから形成される。反応性ヒドラジド基は、架橋されたマトリクスの連結基(linking groups)を形成するために用いられる。このマトリクスは、生体適合性に欠けた低分子量架橋成分若しくは活性剤、又は、生物に対して潜在的に毒性を有している低分子量架橋成分若しくは活性剤を用いずに、形成され得る。任意で、マトリクスに生物活性剤を含む微粒子が含まれていてもよい。
図1は、時間の経過に伴うマルトデキストリンベースのマトリクスからのプラスミドDNAの放出を示すグラフである。
本明細書に記載される本発明の実施形態は、包括的なものであることを意図するものでもなく、または、本発明を以下の詳細な説明に開示される正確な形態に限定することを意図するものでもない。むしろ、これらの実施形態は、当業者が本発明の原理および実施について評価および理解することが可能なように、選択および記載されたものである。
アンバーバイアル瓶の中で、無水ジメチルスルホキシド(DMSO)(20.0mL)に、計量したマルトデキストリン(5.00g、30.84mmol)を溶解した。活性化剤、1,1’−カルボニルジイミダゾール(CDI)(2.50g、15.42mmol)を計量し、25mLのDMSOに溶解させた。CDI溶液を、マルトデキストリンを含むバイアル瓶の中にゆっくりとピペットで入れ、磁気スタラーで攪拌しながら、室温で25分間活性化を続けた。また、無水ヒドラジン(9.68mL,308.38mmol)を、シリンジを介して、CDI/マルトデキストリン反応溶液に加えた。この反応は2〜3時間続けた。反応が完了すると、溶液を脱イオン水で希釈し、Spectra/Por MWCO 1000透析管(VWR International)の中に入れた。脱イオン水中での透析を36時間行なった。生成物をチューブから取り出し、凍結乾燥して白色粉末にした。TNBSアミンアッセイにより、ポリマー1グラム当たり負荷平準1.3mmolのヒドラジドが示された。
アンバーバイアル瓶の中で、実施例1に述べたように無水DMSO(12mL)に、計量したマルトデキストリン(3.00g、18.5mmol)を溶解した。活性化剤、1,1’−カルボニルジイミダゾール(CDI)(1.50g、9.25mmol)を計量し、25mLのDMSOに溶解させた。CDI溶液を、マルトデキストリンを含むバイアル瓶の中にゆっくりとピペットで入れ、磁気スタラーで攪拌しながら、室温で25分間活性化を続けた。また、コハク酸ジヒドラジド(13.52g、95.5mmol)を80mLの脱イオン水中に溶解した。活性化が終了すると、コハク酸ジヒドラジド溶液をCDI/マルトデキストリン溶液中に注ぎ、2時間反応させた。反応が終了すると、溶液を、36時間、Spectra/Por MWCOの中で脱イオン水に対して透析した。得られた物質を凍結乾燥して、最終的に白色粉末を得た。陽子NMRにより、マルトデキストリン1グラム当たり負荷1.548mmolのコハク酸ヒドラジドが示された。
アンバーバイアル瓶の中で、無水テトラヒドロフラン(THF)25mLに、ポリ(エチレングリコール)3350(5.00g、1.49mmol:PEG3350)を溶解した。予め5mLのTHFに溶解していたCDI(0.81g、5mmol)をゆっくりとPEG3350溶液に加えた。磁気スタラーで攪拌しながら、室温で2.5時間活性化を続けた。また、コハク酸ジヒドラジド(4.36g、29.8mmol)を、90mLの200mM酢酸ナトリウム緩衝液pH5.8に溶解した。コハク酸ジヒドラジド溶液をCDI/PEG3350溶液に加え、一晩かけて反応させた。生成物をSpectra/Por MWCO 1000透析管に入れて精製を行なった。生成物を脱イオン水で2日間透析した。澄んだ溶液が管から取り除かれ、凍結乾燥により綿毛のような白色固体を得た。生成物は4℃で保存した。構造解析は重水素クロロホルム(CdCl3 )による 1H−NMRを用いて行なった。結果は、PEG3350がコハク酸ヒドラジド基で完全に誘導体化されたことを示した(PEG33501分子あたり二つのヒドラジド基)。
アンバーバイアル瓶の中で、実施例1に述べたように無水DMSO(15mL)に、計量したマルトデキストリン(2.00g、12.3mmol)を溶解した。別途、アジピン酸ジヒドラジド(10.74g、61.7mmol)を15mLの脱イオン水を含む35mLのDMSO中に溶解した。アジピン酸ジヒドラジド溶液を、溶解を助けるために50℃で2時間攪拌した。アジピン酸ジヒドラジド溶液は乳白色のままであった。CDI(1.00g、6.17mmol)を8mLのDMSOに溶解して、マルトデキストリン溶液中に入れた。マルトデキストリンの活性化を20分間行なった。マルトデキストリン溶液をアジピン酸ジヒドラジド溶液中にゆっくり注いだ。反応は磁気スタラーで攪拌しながら55℃で一晩行なった。生成物をSpectra/Por MWCO 1000透析管に入れて精製を行なった。透析は2日行なった。透析が終わると、生成物を凍結乾燥して綿毛のような白色粉末を得た。
アンバーバイアル瓶の中で、実施例1に述べたようにマルトデキストリン(5.00g、30.8mmol)を0.05M酢酸ナトリウム緩衝液pH5.0(30mL)中に溶解した。溶液を5〜10℃に15分間冷却した。アンバージャーを使う前に、新鮮な0.45M過ヨウ素酸ナトリウム溶液をすぐに作り、同様に5〜10℃に冷却した。冷却した過ヨウ素酸塩溶液(17.1mL,7.71mmol)をゆっくりと冷却したマルトデキストリン溶液中に注いだ。反応は氷浴中で2時間かけて、磁気スタラーで攪拌しながら行なった。その時間の最後に、3mLのエチレングリコールにより反応溶液の反応を止めた。精製するために、粗溶液をSpectra/Por MWCO 1000透析管中に注ぎ、脱イオン水で2日間透析した。精製した溶液を凍結乾燥して白色粉末を得た。
0.5MNaHCO3 及び0.05MK2 CO3 を含む緩衝液を作製した。約125mLのこの緩衝液を125mLのDMSOと混合した。アンバーバイアル瓶の中で、実施例1に述べたようにマルトデキストリン(10.00g、61.7mmol)をDMSO/緩衝液混合液中に溶解した。TEMPO(2,2,6,6−テトラメチルピペリジニルオキシ、遊離基)(0.96g、6.17mmol)及びテトラブチルアンモニウムクロライド(TBACl)(1.71g、6.17mmol)を、マルトデキストリン/DMSO/緩衝液に加え、溶解した。N−クロロスクシニミド(NCS)(10.29g、77mmol)をマルトデキストリン溶液に、ゆっくりと発熱を最低限に抑える条件で加えた。反応は室温で3時間行なった。Spectra/Por MWCO 1000透析管中で脱イオン水により溶液を36時間透析することで精製した。最終生成物を凍結乾燥して綿毛のような白色の粉末を得た。さらなる解析は行なわなかった。
アンバーバイアル瓶の中で、ポリ(エチレングリコール)540(2.00g、3.70mmol;PEG540)を10mLの無水テトラヒドロフラン(THF)中に完全に溶解した。5mLのTHFに予め溶解したCDI(1.50g、9.25mmol)をPEG540溶液にゆっくり加えた。活性化は、磁気スタラーで攪拌しながら、室温で2.5時間行なった。また、コハク酸ジヒドラジド(5.41g、37.0mmol)を90mLの200M酢酸ナトリウム緩衝液pH5.8に溶解した。コハク酸ジヒドラジド溶液をPEG540/CDI溶液に加え、一晩反応させた。Spectra/Por MWCO 500透析管中に生成物を入れて、精製を行なった。透析は脱イオン水を用いて2日行なった。澄んだ溶液を管から取り除き、凍結乾燥して、綿毛のような白色固体を得た。生成物は4℃で保存した。重水素クロロホルム(CdCl3 )を用いた1H−NMRにより構造解析を行なった。結果は、PEG540がコハク酸ヒドラジド基で完全に誘導体化されたことを示した。
アンバーバイアル瓶中で、実施例3に記載のように、PEG3350(10.00g、2.99mmol)を100mLの無水テトラヒドロフラン(THF)中に完全に溶解した。予め5mLのTHF中に溶解したCDI(1.06g、6.57mmol)をゆっくりとPEG3350溶液に加えた。活性化は、磁気スタラーで攪拌しながら、室温で2.5時間行なった。また、ヒドラジン(1.4mL、44.8mmol)を200M酢酸ナトリウム緩衝液pH5.8中に溶解した。ヒドラジン溶液をPEG3350/CDI溶液に加え、一晩反応させた。Spectra/Por MWCO 1000透析管中に生成物を入れて精製を行なった。透析は脱イオン水で2日間行なった。澄んだ溶液を管から取り除き、凍結乾燥して、綿毛のような白色の固体を得た。生成物は4℃で保存した。
実施例2で得たマルトデキストリン−スクシニルヒドラジドを脱イオン水に250mg/mLとなるように溶解した。実施例5で得たマルトデキストリンアルデヒドも水に250mg/mLとなるように溶解した。二つの溶液を一緒に1:1の割合でガラス板上にピペットで移して混ぜた。これら二つの溶液が接触するとすぐに重合が起こった。ゲルは強固で透明であった。
PEG2000−スクシニルヒドラジドを脱イオン水に500mg/mLとなるように溶解した。実施例5で得たマルトデキストリンアルデヒドも水に500mg/mLとなるように溶解した。二つの溶液を一緒に1:1の割合でガラス板上にピペットで移して混ぜた。透明で、かなり均質のゲルが形成され、ゲル中には泡が存在していた。
実施例1で得たマルトデキストリン−ヒドラジドを脱イオン水に500mg/mLとなるように溶解した。実施例5で得たマルトデキストリンアルデヒドも水に500mg/mLとなるように溶解した。二つの溶液を一緒に1:1の割合でガラス板上にピペットで移して混ぜた。ガラス板上では、互いの溶液が接触するとすぐに重合が起き、若干かすんだゲルが得られた。このかすみは、組成物の急速な重合のため、十分な攪拌が不可能だったためである。溶液中のマルトデキストリンベースの試薬の濃度を低くし、二重の急速に動くシリンジを用いれば、より均質なゲルが得られた。これらの試薬から得られたゲルは、ピペットで移したもの、及び、二重の急速に動くシリンジを用いたもののいずれにおいて、とても硬いマトリクスを形成した。
実施例11で得たマルトデキストリン−アジポ−ヒドラジドを脱イオン水に250mg/mLとなるように溶解した。実施例5で得たマルトデキストリンアルデヒドもまた、水に250mg/mLとなるように溶解した。これら二つの溶液を共に1:1の割合でガラス板上にピペットで移して混ぜた。ガラス板上では、互いの溶液が接触してすぐに重合した。ゲルは透明で弾性があった。
アンバーバイアル瓶中で、マルトデキストリン(3.00g,18.5mmol)をDMSO(12mL)中に溶解した。活性化剤、1,1’−カルボニルジイミダゾール(CDI)(1.50g,9.25mmol)を25mLのDMSO中に溶解した。この溶液を、マルトデキストリンを含む瓶中にゆっくりとピペットで入れ、磁気スタラーで撹拌しながら、室温で25分間活性化を続けた。また、L−グルタミン酸 γ−ヒドラジド(1.49g,9.25mmol)を15mLの脱イオン水中に溶解した。この溶液を55℃で25分間撹拌した。活性化が終了すると、L−グルタミン酸 γ−ヒドラジドをマルトデキストリン溶液に注ぎ込み、室温で2時間撹拌した。その後、この溶液を、Spectra/Por MWCOの透析チューブ中で36時間、脱イオン水中で透析した。その後生成物を凍結乾燥した。
gWiz−GFPプラスミドDNA(5757bps,Aldevron,Fargo,ND)を、LabelIT(登録商標)試薬(Mirus Bio,Madison,WI)を用いてCy−3蛍光タグでラベルした。Cy−3ラベルした21bpのsiRNAをAmbion(Austin,TX)から購入した。実施例1に記載されたヒドラジド マルトデキストリン−ヒドラジド(MD−Hyd)を水に100mg/mL又は200mg/mLとなるように溶解した。実施例5に記載されたマルトデキストリン−アルデヒド(MD−Ald)を水に50mg/mL又は100mg/mLとなるように溶解した。100μLのMD−Ald溶液をマイクロ遠心チューブのキャップに加え、50μg(10μl)の蛍光ラベルしたプラスミドDNAとともに、又は50pmol(10μl)の蛍光ラベルしたsiRNAとともに、混合した。100μLのMD−Hydを加え、ピペッティングによって混合した。溶液を10分間ゲル化させると、ゲル中の最終濃度は、MD−Hyd/MD−Aldが50/25又は100/50mg/mlであった。
3つのアミン反応性の小さい分子の架橋剤をMD−Hydと反応させ、ヒドロゲルを形成させた。全ての架橋剤をPierce Biotechnology(Rockford,IL)から購入した。Β−[Tris(hydroxymethyl)phosphino]propionic acid(THPP,MW=196Da)は、第一級アミン及び第二級アミンと反応する三官能性架橋剤である。Dimethyl adipimidate(DMA,MW=245Da)は、アミノ基と反応する二官能性イミドエステルである。Bis[sulfosuccinimidyl]suberate(BS3 ,MW=572Da)は、第一級アミンと反応する二官能性NHS−エステルである。実施例1に記載されたMD−Hydを、リン酸緩衝生理食塩水(PBS,pH7.4)に500mg/mLとなるように溶解した。THPP、DMA及びBS3 をPBSに50mg/mLとなるように溶解した。100μLのMD−Hydを、マイクロ遠心キャップ中のそれぞれの架橋溶液の100μLに個々に加えた。そしてピペッティングにより混合した。その結果、全ての架橋剤において10分以内に安定なゲルが形成された。
本実施例では、実施例1、5、14及び15に記載の試薬を使用した。MD−Hyd(100mg)及びプラスミドDNA(120μg)を180μLのPBSに溶解した。PBS中の500mg/mLのTHPP20μLを、MD−Hyd/DNA溶液とボルテックスにより混合した。その後、混合した溶液を、2×100μLの分量にてプラスチックプレートに移し、10分間ゲル化させた。その後、それぞれの100μlゲルを4つに分けた。その結果、約500mg/mLの濃度のMD−Hydと、15μgのプラスミドDNAとを有する25μLのゲルとなった。その後、ゲルを、1600U/Lのブタのアミラーゼを含む200μLのPBS、又はブタのアミラーゼを含まない200μLのPBS中に置いた。選択された時間おきに溶出バッファーを除去し、新鮮なバッファーに取り替えた。溶出液中のプラスミドDNAの量を、等量の溶出液と1μg/mLの臭化エチジウム溶液とを混合し、蛍光プレートリーダーで励起光535nm、発光605nmにて読み取ることにより、測定した。結果を図3に示す。アミラーゼに触れていないゲルからは、プラスミドDNAがほとんど放出されなかった。アミラーゼ中でインキュベートされたゲルは、24日後に、プラスミドDNAの0次放出を示した。
本実施例では、実施例1、5、14及び15に記載された試薬を使用した。ポリエチレンイミン(PEI,25kDa,分岐した)をシグマ(St.Louis,MO)から取得した。実施例1に記載したMD−HydをPBS(pH=7.4)に1000mg/mLとなるように溶解した。等量のCy−3ラベルしたDNA水溶液とPEI水溶液とを混ぜ、10μg/mlのDNAと6μg/mLのPEIとを含む混合液を生成させることにより、PEI/DNA ポリプレックスを調製した。その後、最終濃度がDNA1mg/mL、PEI600μg/mLとなるように、ポリプレックスを真空下で遠心した。5mgのDNA又はBS3 を60μLのポリプレックス溶液に溶解した。その後、60μLのMD−Hydと混合し、ヒドロゲルを生成させた。その後、これらのゲルを6等分に分割し、最終濃度が500mg/mLのMD−Hyd、及び10μgのポリプレックスDNAを含むゲルとした。その後、ゲルを、0.07mg/mLのブタのアミラーゼを含む500μLのPBS又はこのアミラーゼを含まない500μLのPBS中に置いた。選択した時間ごとにバッファーを除去し、新鮮なバッファーに取り替えた。放出されたポリプレックスDNAの量は、蛍光プレートリーダーを用いて、544nmの励起光及び590nmの発光により測定した。
実施例1で得たマルトデキストリン−ヒドラジドをPBS中で溶解し、以下の濃度の溶液を調製した:100mg/mLおよび200mg/mL。実施例7で得たマルトデキストリンアルデヒドもまた、PBS中で溶解し、以下の濃度の溶液を調製した:100mg/mL、200mg/mL、及び400mg/mL。これらの溶液を0.45μmのシリンジフィルターに通してフィルター滅菌した。
マルトデキストリン−ヒドラジドとマルトデキストリン−アルデヒドとを材料として形成されたマルトデキストリンマトリクスの分解率を理解するため、分解実験を行なった。
マルトデキストリンベースの試薬を、細胞の存在下で反応させ、生体分解性の細胞骨格を作製した。
マルトデキストリンベースの試薬と、フォトマトリクスタンパク質とを反応させ、反応性の発光基を解してマトリクス材料と結合したマトリクスタンパク質を有する生体分解性マトリクスを形成させた。その後、このマトリクスに細胞を接種し、細胞骨格を作製した。
実施例1で得たマルトデキストリン−ヒドラジドを、PBS中に200mg/mLとなるように溶解した。また、実施例5で得たマルトデキストリンアルデヒドを、PBS中に200mg/mLとなるように溶解した。また、ヘパリンアルデヒドを、PBS中に200mg/mLとなるように溶解した。これらの溶液を、0.45μmシリンジフィルターに通してフィルター滅菌した。
酸化マルトデキストリン(実施例5により調製)及びヒドラジドから誘導体化されたポリ(エチレングリコール)(実施例8により調製)から形成したマトリクスの物理的特性を、圧縮力試験及び膨潤性試験により測定した。このゲルの圧縮力を、TAXT2(商標)テクスチュア分析器を使用して、圧縮力を測定するために用いられる直径5mmのボールプローブにより試験した。この方法は、0.5mm/秒の速度で、4gの引金作用により試験した。プローブは、標準の深さと比較して、材料の深さの25%まで圧縮された。この結果を表2に示す。
Claims (26)
- 上記リンカーセグメントが、下記の化学式III及び化学式IVから選択される、請求項1に記載の生体適合性及び生分解性のある架橋された重合体マトリクス。
化学式IVにおいて、Q3 及びQ4 は単量体単位α(1→4)グルコピラノース重合体を示すか、又は、Q3 及びQ4 のうち少なくとも一つがα(1→4)グルコピラノース重合体の単量体単位であって、Q3 及びQ4 のうちの一つがα(1→4)グルコピラノース重合体とは異なる重合体成分の一部分を示し、R6 は共有結合か、又は、環状、直鎖状又は分岐した炭素含有基を示し、該炭素含有基は酸素及び窒素から選択されるヘテロ原子を有する。 - 親水性であり生体適合性を有する重合体を含む第2の重合体セグメントを含む、請求項1に記載の生体適合性及び生分解性のある架橋された重合体マトリクス。
- 上記第2の重合体セグメントが、ポリ(ビニルピロリドン)(PVP)、ポリ(エチレンオキシド)(PEO)、ポリ(エチルオキサゾリン)、ポリ(酸化プロピレン)(PPO)、ポリ(メタ)アクリルアミド(PAA)及びポリ(メタ)アクリル酸、ポリ(エチレングリコール)(PEG)、テトラエチレングリコール、トリエチレングリコール、トリメチロールプロパンエトキシレート、ペンタエリスリトールエトキシレート、PEG−PPO(ポリエチレングリコール及びポリ酸化プロピレンの共重合体)、セグメント化された親水性ウレタン並びにポリビニルアルコールからなる群より選択される、親水性であり生体適合性を有する化合物を含む、請求項3に記載の生体適合性及び生分解性のある架橋された重合体マトリクス。
- 上記リンカーセグメントがエステル基をさらに含む、請求項1に記載の生体適合性及び生分解性のある架橋された重合体マトリクス。
- 生物活性剤を含む、請求項1に記載の生体適合性及び生分解性のある架橋された重合体マトリクス。
- 生物活性剤を含む微粒子を含む、請求項6に記載の生体適合性及び生分解性のある架橋された重合体マトリクス。
- 上記生物活性剤が、細胞への核酸の導入を促進するキャリア成分と結合している核酸を含む、請求項6に記載の生体適合性及び生分解性のある架橋された重合体マトリクス。
- 上記生物活性剤が、ポリペプチド、多糖類及びポリヌクレオチドから選択される、請求項6に記載の生体適合性及び生分解性のある架橋された重合体マトリクス。
- ウイルス粒子及び細胞からなる群より選択される生体粒子を含む、請求項1に記載の生体適合性及び生分解性のある架橋された重合体マトリクス。
- マトリクスが細胞接着因子をさらに含み、細胞がマトリクス中で上記細胞接着因子に付着している、請求項1に記載の生体適合性及び生分解性のある架橋された重合体マトリクス。
- 上記細胞接着因子が、フィブロネクチン、ビトロネクチン、ラミニンA、ラミニンB1、ラミニンB2、コラーゲンI及びトロンボスポンジン並びにそれらの有効成分である、請求項11に記載の生体適合性及び生分解性のある架橋された重合体マトリクス。
- 上記細胞接着因子が、上記リンカーセグメントを介してマトリクスに共有結合しているか、又は、反応基を介してマトリクスに共有結合している、請求項11に記載の生体適合性及び生分解性のある架橋された重合体マトリクス。
- 上記ポリ−α(1→4)グルコピラノース重合体セグメントが、マトリクス中に、マトリクスを形成する固体の全量に対して50重量%以上である、請求項1に記載の生体適合性及び生分解性のある架橋された重合体マトリクス。
- 第1のペンダント反応基を有するα(1→4)グルコピラノース重合体及び、上記第1のペンダント反応基に対して反応性を有する第2のペンダント反応基を有する第2の重合体を含み、
上記第1のペンダント反応基又は上記第2のペンダント反応基のどちらかがヒドラジド基を含み、
上記ヒドラジド基又は上記第2のペンダント反応基が、α(1→4)グルコピラノース重合体に対して0.05〜約1.0の範囲の置換度を有し、
ヒドラジド基を有していない方の上記第1のペンダント反応基又は上記第2のペンダント反応基がヒドラジド反応基を有し、
上記第2の重合体の成分は、α(1→4)グルコピラノース重合体、又はα(1→4)グルコピラノース重合体とは異なる成分を含む、生体適合性及び生分解性のある架橋された重合体マトリクスを形成するためのシステム。 - 上記ヒドラジド反応基が、アルデヒド、ハロゲン化アシル、NHS−エステル、カルボキシル酸、イミダゾール、ヒドロキシルメチルホスフィン及び不飽和エステルからなる群より選択される基である、請求項15に記載のシステム。
- 上記α(1→4)グルコピラノース重合体がペンダントヒドラジド基を含む、請求項15に記載のシステム。
- 上記α(1→4)グルコピラノース重合体が、0.1〜約1.0の置換度の範囲で、第1のペンダント反応基又は第2のペンダント反応基を有する、請求項15に記載のシステム。
- 上記α(1→4)グルコピラノース重合体、上記第2の重合体、又はその両方が、500,000Da以下の分子量である、請求項15に記載のシステム。
- R2 及びR3 が−(CH2 )n −基であり、nが1〜12である、請求項20に記載のシステム。
- 上記第2の重合体の成分がペンダントアルデヒド基を含むα(1→4)グルコピラノース重合体である、請求項15に記載のシステム。
- 第1のペンダント反応基を含むα(1→4)グルコピラノース重合体を、上記第1のペンダント反応基と反応性を有する第2のペンダント反応基を含む第2の成分を接触させるステップを含み、
上記第1のペンダント反応基又は上記第2のペンダント反応基が、ヒドラジド基を含むが、ヒドラジド反応基を含むヒドラジド基は含まず、
上記ヒドラジド基又は上記第2のペンダント反応基が、α(1→4)グルコピラノース重合体に対して0.05〜約1.0の範囲の置換度を有し、
上記第2の重合体の成分は、α(1→4)グルコピラノース重合体、又はα(1→4)グルコピラノース重合体とは異なる成分を含む、生体適合性及び生分解性のある架橋された重合体マトリクスを形成する方法。 - 上記接触させるステップが、上記α(1→4)グルコピラノース重合体及び上記第2の成分を含むマトリクス形成材料を含む水溶液組成物であって、上記マトリクス形成材料を20mg/mL〜約500mg/mLの範囲で含む水溶液組成物中で行なわれる、請求項23に記載の方法。
- 上記接触させるステップがin vivo又はin situで行なわれる、請求項23に記載の方法。
- 対象の状態を処置する方法であって、
請求項1に記載の生体適合性及び生分解性のある架橋された重合体マトリクスを、体の標的位置にて設置するか、又は形成するステップを含み、上記体内では、標的位置にて上記マトリクスが時間をかけて分解し、かつ上記標的位置にある重合体マトリクスの存在が上記状態を処置しうる、方法。
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