JP2011504105A - ポックスウイルス腫瘍細胞崩壊性ベクター - Google Patents
ポックスウイルス腫瘍細胞崩壊性ベクター Download PDFInfo
- Publication number
- JP2011504105A JP2011504105A JP2010533511A JP2010533511A JP2011504105A JP 2011504105 A JP2011504105 A JP 2011504105A JP 2010533511 A JP2010533511 A JP 2010533511A JP 2010533511 A JP2010533511 A JP 2010533511A JP 2011504105 A JP2011504105 A JP 2011504105A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- poxvirus
- gene
- virus
- fcu1
- cells
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
- C12N15/863—Poxviral vectors, e.g. entomopoxvirus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
- A61K35/768—Oncolytic viruses not provided for in groups A61K35/761 - A61K35/766
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/45—Transferases (2)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/50—Hydrolases (3) acting on carbon-nitrogen bonds, other than peptide bonds (3.5), e.g. asparaginase
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/24011—Poxviridae
- C12N2710/24111—Orthopoxvirus, e.g. vaccinia virus, variola
- C12N2710/24122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/24011—Poxviridae
- C12N2710/24111—Orthopoxvirus, e.g. vaccinia virus, variola
- C12N2710/24132—Use of virus as therapeutic agent, other than vaccine, e.g. as cytolytic agent
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/24011—Poxviridae
- C12N2710/24111—Orthopoxvirus, e.g. vaccinia virus, variola
- C12N2710/24141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2710/24143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
本発明は、欠損F2L遺伝子を含んでなるポックスウイルス、そのポックスウイルスを含んでなる組成物、ならびに治療目的、より詳細には癌治療のための、そのような組成物およびポックスウイルスの方法および使用に関する。
Description
腫瘍細胞崩壊性ウイルスとは、腫瘍依存性の自己永続という固有の性質を有する、癌の治療に用いられる新規な治療薬の一種である(HERMISTON. A demand for next-generation oncolytic adenoviruses. Current opinion in molecular therapeutics. 2006, vol.8, no.4, p.322-30.)。腫瘍細胞崩壊性ウイルスは、悪性細胞中において、選択的に複製が可能であり、従って従来の癌治療より潜在的にはるかに高いレベルの効力および特異性を提供する(FISHER. Striking out at disseminated metastases: the systemic delivery of oncolytic viruses. Current opinion in molecular therapeutics. 2006, vol.8, no.4, p.301-13.)。これらのウイルスを用いることにより、ウイルスが複製する際にウイルスの宿主細胞を溶解するとの利点を有する。癌細胞は、抗ウイルス性インターフェロン経路が不活性化されているか、またはウイルス複製が妨げられずに進行することを可能とする腫瘍抑制遺伝子の変異を有することから、多くのウイルスにとって理想的な宿主である(CHERNAJOVSKY, et al. Fighting cancer with oncolytic viruses. British medical journal 2006, vol.332, no.7534, p.170-2.)。
米国特許第5364773号(バイロジェネティクスコーポレーション(VIROGENETICS CORPORATION)社(トロイ、米国ニューヨーク州)15/11/1994には、修飾された組換えポックスウイルス、より詳細には組換えポックスウイルスが、病原性の弱毒化および安全性の増強を示すように、不活性化された、必須でないウイルスコード化コード遺伝子機能を有するワクシニアウイルスが記載されている。具体的には、病原性因子をコードするオープンリーディングフレームを欠失させることにより、または病原性因子をコードするオープンリーディングフレームの挿入による不活化により、遺伝子機能が不活化される。より詳細には、この特許には、J2R、B13R+B14R、A26L、A56R、C7L−K1L、およびI4Lのオープンリーディングフレームが不活化されているワクシニアウイルスが記載されている。このウイルス(NYVAC)は外来核酸用のベクターとして遺伝子操作することができ、宿主動物に免疫学的応答を誘導するためのワクチンとして使用することができる。しかしながら、NYVACは、ほとんどの哺乳類細胞中において効率的に複製することができず、腫瘍細胞崩壊性ウイルスとして使用することができない(XIANGZHI, et al. Vaccinia virus K1L protein supports viral replication in human and rabbit cells through a cell-type-specific set of its ankyrin repeat residues that are distinct from its binding site for ACAP2. Journal of virology. 2006, vol.353, no.1, p.220-233.)。
haromyces cerevisiae: cloning, structure and expression of wild-type and mutant alleles. Gene. 1990, vol.88, no.2, p.149-57に開示されているS.セレビシエFUR1遺伝子によってコードされているものは、引用することにより本明細書の開示の範囲とされる。参考として、遺伝子の配列および対応するUPRTaseの配列は、文献および専門データバンク(SWISSPROT、EMBL、Genbank、およびMedline等)に見出すことができる。
(i)本発明によるポックスウイルスを細胞へ導入する工程、
(ii)前記細胞を、前記ポックスウイルスの産生を可能にする適切な条件下において培養する工程、および
(iii)前記ポックスウイルスを細胞培養から回収する工程
を含む。
F2Lを欠失させるためのシャトルプラスミドを、ワクシニアウイルス株コペンハーゲン(受入番号M35027)のDNAを使用して構築した。F2LのDNA隣接領域をPCRによって増幅した。F2Lの上流隣接領域のプライマーは、5’−CGC GGA TCC GAA AGC GAT GAA CTA AAT GTT C−3’(配列番号7、下線はBamHI部位)、および5’−TCC CCC GGG GTT AGT TTC CTT AAC AAA TCT AAC−3’(配列番号8、下線はSmaI部位)であった。下流領域用のプライマーは、5’−GCC TGG CCA ACA AAT AGA GGA GAT CAA GGG T−3’(配列番号9、下線はMscI部位)、および5’−GCC CAG CTG ACC ACT ACA TCA ATT TTA CAA AAG−3’(配列番号10、下線はPvuII部位)であった。増幅されたDNA断片を、制限酵素SmaI/BamHIまたはMscI/PvuIIで消化し、PpolyIIIプラスミドの対応する部位にライゲーションした。F2Lの下流隣接領域の反復領域を、プライマー5’−GCC GCA TGC TCC AGA ATT GAT CAT AGT GGA TA−3’(配列番号11、下線はSphI部位)、および5’−GCT CTA GAG TTA GTT TCC TTA ACA AAT CTA AC−3’(配列番号12、下線はXbaI部位)を使用して、PCRによって増幅し、PpolyIIIプラスミドに挿入した。反復領域は、欠失ウイルスの産生中に選択カセットを除去するために使用される。pH5Rワクシニアプロモーターの制御下にあるGFP/GPT融合遺伝子に対応する選択カセットを、PpolyIIIプラスミドのSmaI/SphI部位に挿入した。取得されたプラスミドは、F2L遺伝子を欠失しているためpΔF2Lと名づけられた組換えシャトルプラスミドである。
CEF細胞を、0.1MOIのVVTK−FCU1(ワクシニアウイルス、J2R遺伝子を欠損、合成プロモーターp11k7.5の制御下でFCU1遺伝子を発現する)コペンハーゲン株に感染させ、2時間、37℃でインキュベートし、その後組換えシャトルプラスミド(0.2μg)のCaCl2共沈物で形質移入した。細胞を48時間、37℃でインキュベートした。その後、出現ウイルスの希釈液を使用して、終濃度が15μg/mlのヒポキサンチン、終濃度が250μg/mlのキサンチン、および終濃度が250μg/mlのミコフェノール酸を含有する選択培地中でCEF細胞を感染させた。蛍光性(GFP)および陽性(GPT選択)プラークを単離し、GPT選択培地の存在下でCEF細胞の選択を数ラウンド行って選択した。VVTK−FCU1の存在または非存在を、欠失領域内部のプライマーを用いた40サイクルのPCRによって決定した。親ウイルスの除去後、二重欠失ウイルスを使用して、GPT選択培地を用いずにCEFに感染させ、選択カセットを除去した。非蛍光性プラークを単離し、2サイクルでCEFを選択した。最終組換えVVウイルスをCEF中で増幅させて精製し、ウイルス株をプラークアッセイによりCEFに滴定した。
ヒト腫瘍細胞を、0.0001MOIのそれぞれの組換えVVで形質導入した。合計3×105細胞/ウエルを、6ウエル培養皿上の、種々の濃度の5−FCを含有する2ml培地にプレーティングした。その後、細胞を5日間37℃で培養し、生細胞をトリパンブルー排除法によって計数した。図1および図2に記載された結果は、FCU1活性が、J2RおよびF2L遺伝子を欠損するウイルスよりも、J2R遺伝子を欠損するウイルスと等しいことを示す。
分裂細胞またはコンフルエント細胞を、6−ウエルプラーク中で、100PFUのウイルス(ほぼ0.0005MOI)に感染させた。10%FCSで補完された2mlの培地を分裂細胞に、補完されていない培地をコンフルエント細胞に添加した。細胞を、感染48時間後に回収した。細胞を−20℃で保管し、超音波処理してウイルスを放出させ、CEF細胞にプラーク滴定することによってウイルスも定量化した。分裂細胞とコンフルエント細胞との比率は、全ての細胞において類似する。ウイルスVVTK/FCU1およびVVTK−F2L−/FCU1は両方とも、コンフルエント細胞より分裂細胞においてより多く複製する。
雌Swissヌードマウスは、チャールスリバーラボラトリーズ(Charles River Laboratories)社から取得した。本研究で使用された動物は、年齢が同じ(6週齢)であり、体重は20〜23gの範囲であった。Swissヌードマウスの側腹に、5x106LoVo細胞/100μLを皮下(s.c.)注射した。腫瘍の直径が50〜70mm3に達した時、in vivo実験用に、マウスを盲検法で無作為化し、表示ベクターで処置した。
VV−FCU1およびVVTK−F2L−/FCU1の存在を、腫瘍試料および器官試料のウイルス滴定によって評価した。1×106PFUのウイルスを、確立した皮下LoVo腫瘍を保持するヌードマウスに尾部静脈内注射によって静脈内(i.v.)注射した。感染後14日目にマウスを犠牲にし、腫瘍および他の器官を収集および計量した。腫瘍および器官をPBS中でホモジナイズし、以前に記述されているように、力価をCEFで決定した。ウイルス力価を、ミリグラムの組織に標準化した。表2および3に記載された結果(ウイルス力価の範囲は、組織1mg当たりのpfuで表されている)によれば、本発明によるウイルスが、14日後にはほとんどの腫瘍で見出されることを示す。上述した同じ条件による2回目の実験では、感染後6日目および21日目にマウスを犠牲にした。図6に記載された結果によれば、ウイルスVVTK−/FCU1およびVVTK−F2L−/FCU1が両方とも、VVTK−/FCU1の場合の尾部を除き、分析された他の器官より腫瘍において約1000から10000倍多いウイルスで腫瘍を標的にすることを示す。少量のVVTK−/FCU1が、肺、脾臓、腎臓、およびリンパ節で検出され(10pfu/mg未満)、6日目の皮膚、尾部、および骨髄、ならびに21日目の皮膚および尾部でより多くが検出される。対照的に、VVTK−F2L−/FCU1は、より高い腫瘍特異性を示し、6日目の肺、脾臓、腎臓、リンパ節、および皮膚、ならびに21日目の皮膚および尾部に少量だけ検出される。
ウイルス病原性を、Swissヌードマウス(図7)および免疫応答性B6D2マウス(6週齢、チャールスリバー社製)(図8)の両方に対して行った生存研究で評価した。マウス1匹当たり100μLの緩衝液中の1.107または1.108PFUの全ウイルスを、マウスに静脈内注射した。実験期間中はマウスを毎日観察した。Swissヌードマウス(図7)では、1×108PFUのVVTK−/FCU1を注射すると、感染3日後には動物の40%が死亡する結果となった。残りのマウスは、感染後50日目から80日目の間に死亡した。VVTK−F2L−/FCU1の投与は、それほど病原性ではなく、大多数の動物は65日目から115日目の間に死亡した(p<0.05)。毒性があるという証拠は、107pfuの両ウイルスでは観察されていない。108pfuのVVTK−/FCU1を静脈内注射した後、マウスは全て死亡した。VVTK−F2L−/FCU1で処置した群では、VVTK−/FCU1感染マウスと比較して、生存率が92%に著しく延長した(p<0.00005)。従って、これの結果は、二重欠失ウイルスVVTK−F2L−/FCU1を用いた場合の毒性の減少を実証する。
Swissヌードマウスに、1.106(図9)または1.107のPFU(図10)の各ウイルスを静脈内注射した。尾部病変を週1回計数した。図9(A)に示されているように、VVTK−/FCU1を注射され、感染後13日目のマウスでは平均8個の痘疹を有するマウスと比較して(p<0.001)、1.106PFUのVVTK−F2L−/FCU1を注射されたマウスは、1個未満の痘疹/マウスを有する。結果は、図9(B)に示されているように、注射後34日目では類似しており、VVTK−F2L−/FCU1(p<0.0001)の場合のほぼ一つと比較して、VVTK−/FCU1では痘疹は平均4個である。感染後15日目には、1.107PFUのVVTK−/FCU1を注射された平均10個の痘疹/マウスを有するマウスと比較して、1.107PFUのVVTK−F2L−/FCU1を注射されたマウスは、平均3.5個の痘疹/マウスをそれぞれ有する(図10(A))。感染後31日目には、VVTK−/FCU1を注射された平均7個の痘疹/マウスを有するマウスと比較して、VVTK−F2L−/FCU1を注射されたマウスは、平均3.5個の痘疹/マウスをそれぞれ有する(図10(A))。VVTK/FCU1とWTK−F2L−/FCU1との痘疹数の差は、統計学的に有意である(p<0.05)。痘疹形成は、尾部におけるウイルス複製と相関しており、病原性および毒性とも相関している。VVTK−F2L−/FCU1の静脈内注射は、単一欠失TKウイルスより毒性が少ない。
統計分析は、ノンパラメトリックのマンホイットニーU検定およびSTATISTICA 7.1ソフトウェア(スタットソフト(StatSoft, Inc.)社製)を用いて実施した。P<0.05は、統計学的に有意であるとみなした。
Claims (30)
- 欠損F2L遺伝子を含んでなる、ポックスウイルス。
- 前記ポックスウイルスが、欠損J2R遺伝子を更に含んでなる、請求項1に記載のポックスウイルス。
- 前記ポックスウイルスが、チョルドポックスウイルス亜科に属するものである、請求項1または2に記載のポックスウイルス。
- 前記ポックスウイルスが、ワクシニアウイルス種に属するものである、請求項3に記載のポックスウイルス。
- 前記ポックスウイルスが、ワクシニアウイルス株コペンハーゲンである、請求項4に記載のポックスウイルス。
- 前記ポックスウイルスが、目的の核酸を更に含んでなる、請求項1〜5のいずれか一項に記載のポックスウイルス。
- 前記目的の核酸が、治療用分子をコードする少なくとも一つの目的の配列を含んでなる、請求項6に記載のポックスウイルス。
- 前記目的の核酸が、自殺遺伝子を含んでなる、請求項7に記載のポックスウイルス。
- 前記自殺遺伝子が、少なくともシトシンデアミナーゼ活性を有するタンパク質をコードするものである、請求項8に記載のポックスウイルス。
- 前記自殺遺伝子が、FCY1、FCA1、もしくはCodA、またはその類似体である、請求項9に記載のポックスウイルス。
- 少なくともシトシンデアミナーゼ活性を有する前記タンパク質が、配列番号2に表されているFCU1−8ポリペプチドおよびその類似体である、請求項9に記載のポックスウイルス。
- 前記自殺遺伝子が、少なくとも一つのシトシンデアミナーゼ活性および一つのウラシルホスホリボシルトランスフェラーゼ活性を有するタンパク質をコードするものである、請求項8に記載のポックスウイルス。
- 前記自殺遺伝子が、配列番号3(coda::upp)、配列番号1(FCU1)、またはFCY1::FUR1のアミノ酸配列に表されるアミノ酸配列を実質的に含んでなるポリペプチドをコードするものである、請求項12に記載のポックスウイルス。
- 前記ポックスウイルスが、パーミアーゼをコードする遺伝子を含んでなる核酸配列を更に含んでなる、請求項1〜13のいずれか一項に記載のポックスウイルス。
- パーミアーゼが、S.セレビシエのプリンパーミアーゼまたはシトシンパーミアーゼである、請求項14に記載のポックスウイルス。
- パーミアーゼが、FCY2およびFur4ならびにそれらの類似体を含んでなる群から選択されるものである、請求項15に記載のポックスウイルス。
- 前記ポックスウイルスが、前記目的の核酸の発現に必要なエレメントを更に含んでなる、請求項6〜13のいずれか一項に記載のポックスウイルス。
- 前記ポックスウイルスが、パーミアーゼをコードする遺伝子を含んでなる核酸配列の発現に必要なエレメントを更に含んでなる、請求項14〜16のいずれか一項に記載のポックスウイルス。
- 請求項1〜18のいずれか一項に記載のポックスウイルスの製造方法であって、
(i)請求項1〜18のいずれか一項に記載のポックスウイルスを細胞へ導入する工程、
(ii)前記細胞を、前記ポックスウイルスの産生を可能にする適切な条件下において培養する工程、および
(iii)前記ポックスウイルスを前記細胞培養から回収する工程
を含む、製造方法。 - 薬学上許容される賦形剤と組み合わせて、本請求項1〜18のいずれか一項に記載のポックスウイルスを含んでなる、組成物。
- 5−フルオロシトシンの細胞毒性効果を増強する一つまたは複数の物質と組み合わせた、請求項20に記載の組成物。
- 5−フルオロシトシンの細胞毒性効果を増強する前記物質が、好ましくはPALA、レフルノミド、およびA771726からなる群から選択されるものであり、ピリミジンのデノボ生合成経路の酵素を阻害する薬物である、請求項21に記載の組成物。
- 5−フルオロシトシンの細胞毒性効果を増強する前記物質がメトトレキサートである、請求項21に記載の組成物。
- 薬剤を製造するための、請求項1〜18のいずれか一項に記載のポックスウイルスまたは請求項20〜23のいずれか一項に記載の組成物の使用。
- 癌治療用の薬剤を製造するための、請求項24に記載の使用。
- 請求項1〜18のいずれか一項に記載のポックスウイルス、または請求項20〜23のいずれか一項に記載の組成物が、その治療を必要とする宿主生物または細胞に投与されることを特徴とする、疾患の治療方法。
- 前記ポックスウイルスまたは組成物が全身経路で投与されるものである、請求項26に記載の方法。
- 薬学上許容される量のプロドラッグが前記宿主生物または細胞に投与される追加の工程を更に含んでなる、請求項26または27に記載の方法。
- 前記プロドラッグが、前記ポックスウイルスまたは組成物の投与の好ましくは少なくとも3日後、より好ましくは少なくとも4日後、および更により好ましくは少なくとも5日後に投与されるものである、請求項28に記載の方法。
- 前記プロドラッグが、前記ポックスウイルスまたは組成物の投与の7日後に投与されるものである、請求項29に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP07301556 | 2007-11-19 | ||
EP07301556.2 | 2007-11-19 | ||
PCT/EP2008/009721 WO2009065547A2 (en) | 2007-11-19 | 2008-11-17 | Poxviral oncolytic vectors |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2011504105A true JP2011504105A (ja) | 2011-02-03 |
JP2011504105A5 JP2011504105A5 (ja) | 2011-12-08 |
JP5710262B2 JP5710262B2 (ja) | 2015-04-30 |
Family
ID=40548531
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2010533511A Expired - Fee Related JP5710262B2 (ja) | 2007-11-19 | 2008-11-17 | ポックスウイルス腫瘍細胞崩壊性ベクター |
Country Status (22)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9180150B2 (ja) |
EP (1) | EP2212423B1 (ja) |
JP (1) | JP5710262B2 (ja) |
KR (1) | KR101542275B1 (ja) |
CN (1) | CN101868546B (ja) |
AU (1) | AU2008328258B2 (ja) |
BR (1) | BRPI0820578A2 (ja) |
CA (1) | CA2705873C (ja) |
CO (1) | CO6210761A2 (ja) |
CR (1) | CR11520A (ja) |
DK (1) | DK2212423T3 (ja) |
EC (1) | ECSP10010287A (ja) |
ES (1) | ES2535633T3 (ja) |
HK (1) | HK1141314A1 (ja) |
HR (1) | HRP20150360T1 (ja) |
IL (1) | IL204539A (ja) |
MX (1) | MX2010005273A (ja) |
NZ (1) | NZ584201A (ja) |
PL (1) | PL2212423T3 (ja) |
RU (2) | RU2508401C2 (ja) |
WO (1) | WO2009065547A2 (ja) |
ZA (1) | ZA201004286B (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2021511060A (ja) * | 2018-01-26 | 2021-05-06 | ユニバーシティ オブ ピッツバーグ − オブ ザ コモンウェルス システム オブ ハイヤー エデュケイション | 腫瘍治療を改善するための、腫瘍微小環境における代謝モジュレーターの発現 |
Families Citing this family (26)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2010081766A1 (en) | 2009-01-13 | 2010-07-22 | Transgene Sa | Use of a saccharomyces cerevisiae mitochondrial nucleic acids fraction for immune stimulation |
JP5855564B2 (ja) | 2009-05-12 | 2016-02-09 | トランジェーヌ、ソシエテ、アノニムTransgene S.A. | オルソポックスウイルスの製造および精製方法 |
NZ596325A (en) | 2009-07-10 | 2013-11-29 | Transgene Sa | Biomarker for selecting patients and related methods |
WO2013004658A1 (en) | 2011-07-01 | 2013-01-10 | Transgene Sa | Formulations of 5-fluorocytosine and uses thereof. |
TWI690322B (zh) | 2012-10-02 | 2020-04-11 | 法商傳斯堅公司 | 含病毒的調配物及其使用 |
ES2909957T3 (es) | 2014-07-16 | 2022-05-11 | Transgene | Virus oncolítico para la expresión de moduladores de puntos de control inmunitarios |
KR102504758B1 (ko) * | 2014-07-16 | 2023-02-28 | 트랜스진 | 종양 세포 붕괴성 바이러스와 면역 체크포인트 조절제의 배합물 |
DK3226894T3 (da) | 2014-12-01 | 2019-10-21 | Transgene Sa | Stabile flydende vacciniavirus-formuleringer |
WO2016131945A1 (en) | 2015-02-20 | 2016-08-25 | Transgene Sa | Combination product with autophagy modulator |
EP3261669B1 (en) | 2015-02-25 | 2022-08-03 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Use of inactivated nonreplicating modified vaccinia virus ankara (mva)as monoimmunotherapy or in combination with immune checkpoint blocking agents for solid tumors |
CN116173193A (zh) | 2015-04-17 | 2023-05-30 | 纪念斯隆凯特琳癌症中心 | Mva或mvaδe3l作为抗实体瘤的免疫治疗剂的应用 |
SG11201807022XA (en) | 2016-02-25 | 2018-09-27 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Recombinant mva or mvadele3l expressing human flt3l and use thereof as immuno-therapeutic agents against solid tumors |
EP3419648A4 (en) | 2016-02-25 | 2019-09-11 | Memorial Sloan-Kettering Cancer Center | ATTENUATED REPLICATION-VACCINE VIRUSES WITH THYMIDINE KINASE DELETION WITH AND WITHOUT EXPRESSION OF FLT3L OR HUMAN GM-CSF FOR ANTICANCER IMMUNOTHERAPY |
US20190134190A1 (en) | 2016-05-04 | 2019-05-09 | Transgene Sa | Combination therapy with cpg tlr9 ligand |
AU2017311380A1 (en) * | 2016-08-09 | 2019-03-28 | City Of Hope | Chimeric poxvirus compositions and uses thereof |
EP3522920A2 (en) | 2016-10-10 | 2019-08-14 | Transgene SA | Immunotherapeutic product and mdsc modulator combination therapy |
ES2905478T3 (es) | 2016-12-28 | 2022-04-08 | Transgene Sa | Virus oncolíticos y moléculas terapéuticas |
EP3621646A4 (en) | 2017-05-12 | 2021-06-02 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | VACCINIA VIRUS MUTANTS FOR CANCER IMMUNOTHERAPY |
SG11201912429RA (en) | 2017-06-21 | 2020-01-30 | Transgene Sa | Personalized vaccine |
WO2019020543A1 (en) | 2017-07-28 | 2019-01-31 | Transgene Sa | ONCOLYTIC VIRUSES EXPRESSING AGENTS TARGETING METABOLIC IMMUNE MODULATORS |
JP7391831B2 (ja) * | 2017-08-11 | 2023-12-05 | シティ・オブ・ホープ | Car t細胞標的を発現する腫瘍溶解性ウイルス、及びその使用 |
AU2019412516A1 (en) | 2018-12-28 | 2021-07-15 | Transgene | M2-defective poxvirus |
WO2022148736A1 (en) | 2021-01-05 | 2022-07-14 | Transgene | Vectorization of muc1 t cell engager |
WO2023213763A1 (en) | 2022-05-02 | 2023-11-09 | Transgene | Poxvirus encoding a binding agent comprising an anti- pd-l1 sdab |
WO2023213764A1 (en) | 2022-05-02 | 2023-11-09 | Transgene | Fusion polypeptide comprising an anti-pd-l1 sdab and a member of the tnfsf |
WO2024003353A1 (en) | 2022-07-01 | 2024-01-04 | Transgene | Fusion protein comprising a surfactant-protein-d and a member of the tnfsf |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5364773A (en) * | 1991-03-07 | 1994-11-15 | Virogenetics Corporation | Genetically engineered vaccine strain |
US20030031681A1 (en) * | 1999-05-28 | 2003-02-13 | Mccart J. Andrea | Combined growth factor-deleted and thymidine kinase-deleted vaccinia virus vector |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5225336A (en) * | 1989-03-08 | 1993-07-06 | Health Research Incorporated | Recombinant poxvirus host range selection system |
EP1367128A1 (en) * | 1991-03-07 | 2003-12-03 | Connaught Technology Corporation | Genetically engineered vaccine strain |
KR100242671B1 (ko) * | 1991-03-07 | 2000-03-02 | 고돈 에릭 | 유전학적으로 처리한 백신 균주 |
US20030044384A1 (en) * | 1997-10-09 | 2003-03-06 | Pro-Virus, Inc. | Treatment of neoplasms with viruses |
US6897057B1 (en) * | 1999-08-31 | 2005-05-24 | The General Hospital Corporation | Cell-specific and/or tumor-specific promoter retargeting of herpes γ 34.5 gene expression |
MXPA05013879A (es) * | 2003-06-18 | 2006-06-27 | Genelux Corp | Virus de la vaccinia recombinantes modificados y otros microorganismos, y usos de los mismos. |
PL2212345T3 (pl) * | 2007-11-19 | 2016-07-29 | Transgene Sa | Onkolityczne wektory pokswirusowe |
-
2008
- 2008-11-17 RU RU2010124613/10A patent/RU2508401C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2008-11-17 CN CN2008801168337A patent/CN101868546B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2008-11-17 KR KR1020107010821A patent/KR101542275B1/ko active IP Right Grant
- 2008-11-17 NZ NZ584201A patent/NZ584201A/en not_active IP Right Cessation
- 2008-11-17 JP JP2010533511A patent/JP5710262B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2008-11-17 CA CA2705873A patent/CA2705873C/en not_active Expired - Fee Related
- 2008-11-17 ES ES08851361.9T patent/ES2535633T3/es active Active
- 2008-11-17 PL PL08851361T patent/PL2212423T3/pl unknown
- 2008-11-17 DK DK08851361T patent/DK2212423T3/en active
- 2008-11-17 WO PCT/EP2008/009721 patent/WO2009065547A2/en active Application Filing
- 2008-11-17 EP EP08851361.9A patent/EP2212423B1/en not_active Not-in-force
- 2008-11-17 MX MX2010005273A patent/MX2010005273A/es active IP Right Grant
- 2008-11-17 BR BRPI0820578-7A patent/BRPI0820578A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2008-11-17 US US12/743,412 patent/US9180150B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2008-11-17 RU RU2013129678/10A patent/RU2557312C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2008-11-17 AU AU2008328258A patent/AU2008328258B2/en not_active Ceased
-
2010
- 2010-03-16 IL IL204539A patent/IL204539A/en active IP Right Grant
- 2010-06-17 ZA ZA2010/04286A patent/ZA201004286B/en unknown
- 2010-06-18 CO CO10073787A patent/CO6210761A2/es not_active Application Discontinuation
- 2010-06-18 CR CR11520A patent/CR11520A/es not_active Application Discontinuation
- 2010-06-18 EC EC2010010287A patent/ECSP10010287A/es unknown
- 2010-08-17 HK HK10107869.1A patent/HK1141314A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2015
- 2015-03-30 HR HRP20150360TT patent/HRP20150360T1/hr unknown
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5364773A (en) * | 1991-03-07 | 1994-11-15 | Virogenetics Corporation | Genetically engineered vaccine strain |
US20030031681A1 (en) * | 1999-05-28 | 2003-02-13 | Mccart J. Andrea | Combined growth factor-deleted and thymidine kinase-deleted vaccinia virus vector |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
ERBS,P. ET AL: "Modified vaccinia virus Ankara as a vector for suicide gene therapy", CANCER GENE THER, vol. 15, no. 1, JPN6013040308, 2008, pages 18 - 28, XP002524702, ISSN: 0002607883, DOI: 10.1038/SJ.CGT.7701098 * |
GOEBEL,S.J. ET AL: "The complete DNA sequence of vaccinia virus", VIROLOGY, vol. 179, no. 1, JPN6013040316, 1990, pages 247 - 66, XP023051853, ISSN: 0002607885, DOI: 10.1016/0042-6822(90)90294-2 * |
ZHANG,Q. ET AL: "Eradication of solid human breast tumors in nude mice with an intravenously injected light-emitting", CANCER RES, vol. 67, no. 20, JPN6013040309, 2007, pages 10038 - 46, XP002505303, ISSN: 0002607884, DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-07-0146 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2021511060A (ja) * | 2018-01-26 | 2021-05-06 | ユニバーシティ オブ ピッツバーグ − オブ ザ コモンウェルス システム オブ ハイヤー エデュケイション | 腫瘍治療を改善するための、腫瘍微小環境における代謝モジュレーターの発現 |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5710262B2 (ja) | ポックスウイルス腫瘍細胞崩壊性ベクター | |
JP5710261B2 (ja) | ポックスウイルス腫瘍細胞崩壊性ベクター | |
JP6657115B2 (ja) | ポックスウイルス腫瘍細胞崩壊性ベクター | |
US9687515B2 (en) | Poxviral oncolytic vectors |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20111024 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20111024 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20130816 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20131118 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20131125 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20131216 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20131224 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20140115 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20140122 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140212 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20140919 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20141219 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20150119 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20150206 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20150304 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5710262 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |