JP7391831B2 - Ｃａｒ ｔ細胞標的を発現する腫瘍溶解性ウイルス、及びその使用 - Google Patents
Ｃａｒ ｔ細胞標的を発現する腫瘍溶解性ウイルス、及びその使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP7391831B2 JP7391831B2 JP2020507619A JP2020507619A JP7391831B2 JP 7391831 B2 JP7391831 B2 JP 7391831B2 JP 2020507619 A JP2020507619 A JP 2020507619A JP 2020507619 A JP2020507619 A JP 2020507619A JP 7391831 B2 JP7391831 B2 JP 7391831B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- virus
- strain
- cells
- vaccinia virus
- nucleic acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 244000309459 oncolytic virus Species 0.000 title claims description 61
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 title claims description 53
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 claims description 199
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 101
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 52
- 108010019670 Chimeric Antigen Receptors Proteins 0.000 claims description 37
- 241000700626 Cowpox virus Species 0.000 claims description 37
- 241000700665 Sheeppox virus Species 0.000 claims description 35
- 241000621172 Pseudocowpox virus Species 0.000 claims description 34
- 241000700638 Raccoonpox virus Species 0.000 claims description 27
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 27
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 19
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 19
- 241001455645 Rabbitpox virus Species 0.000 claims description 18
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 16
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 15
- 101100383038 Homo sapiens CD19 gene Proteins 0.000 claims description 14
- 230000011664 signaling Effects 0.000 claims description 12
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 10
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 10
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 claims description 10
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 claims description 10
- 108020004440 Thymidine kinase Proteins 0.000 claims description 9
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 9
- 102000006601 Thymidine Kinase Human genes 0.000 claims description 7
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 6
- 241000700635 Orf virus Species 0.000 claims description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 8
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 claims 1
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 142
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 140
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 73
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 69
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 67
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 43
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 43
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 40
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 description 33
- 241000700629 Orthopoxvirus Species 0.000 description 30
- 241000700639 Parapoxvirus Species 0.000 description 30
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 27
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 24
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 18
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 16
- 241000191927 Rabbitpox virus Utrecht Species 0.000 description 15
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 15
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 15
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 14
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 14
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 description 14
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 14
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 13
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 13
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 13
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 12
- 108091007741 Chimeric antigen receptor T cells Proteins 0.000 description 11
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 11
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 11
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 description 10
- 102100034922 T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Human genes 0.000 description 10
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 10
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 10
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 10
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 9
- 230000000174 oncolytic effect Effects 0.000 description 9
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 9
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 7
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 7
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 7
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 6
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 6
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 5
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 description 5
- 231100000070 MTS assay Toxicity 0.000 description 5
- 238000000719 MTS assay Methods 0.000 description 5
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 5
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 5
- 206010046865 Vaccinia virus infection Diseases 0.000 description 5
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 5
- 102000052116 epidermal growth factor receptor activity proteins Human genes 0.000 description 5
- 108700015053 epidermal growth factor receptor activity proteins Proteins 0.000 description 5
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 5
- 238000013537 high throughput screening Methods 0.000 description 5
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 5
- YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N n-[3-[[6-[3-(trifluoromethyl)anilino]pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]cyclopropanecarboxamide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(NC=2N=CN=C(NC=3C=C(NC(=O)C4CC4)C=CC=3)C=2)=C1 YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000013605 shuttle vector Substances 0.000 description 5
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 5
- 208000007089 vaccinia Diseases 0.000 description 5
- 210000001266 CD8-positive T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 4
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 4
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 210000003071 memory t lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 4
- 230000005909 tumor killing Effects 0.000 description 4
- GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4,6-dichloropyrimidine-5-carbaldehyde Chemical group NC1=NC(Cl)=C(C=O)C(Cl)=N1 GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 3
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 3
- 102100020873 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 3
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 3
- 101150003725 TK gene Proteins 0.000 description 3
- 230000005880 cancer cell killing Effects 0.000 description 3
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 3
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 3
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 3
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 3
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101001057504 Homo sapiens Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Proteins 0.000 description 2
- 101001055144 Homo sapiens Interleukin-2 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 2
- 101001023379 Homo sapiens Lysosome-associated membrane glycoprotein 1 Proteins 0.000 description 2
- 241000700588 Human alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 2
- 102100026878 Interleukin-2 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 102100035133 Lysosome-associated membrane glycoprotein 1 Human genes 0.000 description 2
- 241000700559 Molluscipoxvirus Species 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 241000700625 Poxviridae Species 0.000 description 2
- 108091081062 Repeated sequence (DNA) Proteins 0.000 description 2
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700646 Vaccinia virus WR Species 0.000 description 2
- 241000700647 Variola virus Species 0.000 description 2
- 241000700574 Yatapoxvirus Species 0.000 description 2
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- GUAHPAJOXVYFON-ZETCQYMHSA-N (8S)-8-amino-7-oxononanoic acid zwitterion Chemical compound C[C@H](N)C(=O)CCCCCC(O)=O GUAHPAJOXVYFON-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150011225 5L gene Proteins 0.000 description 1
- 241000877350 Alphaentomopoxvirus Species 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000711404 Avian avulavirus 1 Species 0.000 description 1
- 241000700663 Avipoxvirus Species 0.000 description 1
- 208000028564 B-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 241000700576 Betaentomopoxvirus Species 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000700664 Capripoxvirus Species 0.000 description 1
- 241001206544 Cervidpoxvirus Species 0.000 description 1
- 241000557333 Chipmunk parvovirus Species 0.000 description 1
- 241000282552 Chlorocebus aethiops Species 0.000 description 1
- 241000709687 Coxsackievirus Species 0.000 description 1
- 241000543397 Crocodylidpoxvirus Species 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 108700039887 Essential Genes Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 102000018251 Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 108010091358 Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 229940076838 Immune checkpoint inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102000037984 Inhibitory immune checkpoint proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091008026 Inhibitory immune checkpoint proteins Proteins 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 208000031671 Large B-Cell Diffuse Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 241000700563 Leporipoxvirus Species 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 208000025205 Mantle-Cell Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 241000712079 Measles morbillivirus Species 0.000 description 1
- 241000700560 Molluscum contagiosum virus Species 0.000 description 1
- 241000700627 Monkeypox virus Species 0.000 description 1
- 241000700562 Myxoma virus Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 241000702263 Reovirus sp. Species 0.000 description 1
- 241000837158 Senecavirus A Species 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- 241000700568 Suipoxvirus Species 0.000 description 1
- 241000404000 Tanapox virus Species 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 208000003721 Triple Negative Breast Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241001536558 Yaba monkey tumor virus Species 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 208000032852 chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000004940 costimulation Effects 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 206010012818 diffuse large B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 201000003444 follicular lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150106093 gpt gene Proteins 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 239000012274 immune-checkpoint protein inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 238000010820 immunofluorescence microscopy Methods 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000011221 initial treatment Methods 0.000 description 1
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000001985 kidney epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 1
- -1 means that the cell Chemical class 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 238000007481 next generation sequencing Methods 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000590 oncogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 238000009522 phase III clinical trial Methods 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 238000013081 phylogenetic analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000007480 sanger sequencing Methods 0.000 description 1
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 1
- 229940083538 smallpox vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 208000003265 stomatitis Diseases 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 208000022679 triple-negative breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
- A61K35/768—Oncolytic viruses not provided for in groups A61K35/761 - A61K35/766
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/17—Lymphocytes; B-cells; T-cells; Natural killer cells; Interferon-activated or cytokine-activated lymphocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4611—T-cells, e.g. tumor infiltrating lymphocytes [TIL], lymphokine-activated killer cells [LAK] or regulatory T cells [Treg]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/463—Cellular immunotherapy characterised by recombinant expression
- A61K39/4631—Chimeric Antigen Receptors [CAR]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- A61K39/464411—Immunoglobulin superfamily
- A61K39/464412—CD19 or B4
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
- C07K14/7051—T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
- C12N7/02—Recovery or purification
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5256—Virus expressing foreign proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55516—Proteins; Peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/58—Medicinal preparations containing antigens or antibodies raising an immune response against a target which is not the antigen used for immunisation
- A61K2039/585—Medicinal preparations containing antigens or antibodies raising an immune response against a target which is not the antigen used for immunisation wherein the target is cancer
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
- C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/03—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a transmembrane segment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/33—Fusion polypeptide fusions for targeting to specific cell types, e.g. tissue specific targeting, targeting of a bacterial subspecies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/24011—Poxviridae
- C12N2710/24021—Viruses as such, e.g. new isolates, mutants or their genomic sequences
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/24011—Poxviridae
- C12N2710/24032—Use of virus as therapeutic agent, other than vaccine, e.g. as cytolytic agent
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/24011—Poxviridae
- C12N2710/24111—Orthopoxvirus, e.g. vaccinia virus, variola
- C12N2710/24121—Viruses as such, e.g. new isolates, mutants or their genomic sequences
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/24011—Poxviridae
- C12N2710/24111—Orthopoxvirus, e.g. vaccinia virus, variola
- C12N2710/24132—Use of virus as therapeutic agent, other than vaccine, e.g. as cytolytic agent
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/24011—Poxviridae
- C12N2710/24111—Orthopoxvirus, e.g. vaccinia virus, variola
- C12N2710/24141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2710/24143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/24011—Poxviridae
- C12N2710/24111—Orthopoxvirus, e.g. vaccinia virus, variola
- C12N2710/24151—Methods of production or purification of viral material
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/24011—Poxviridae
- C12N2710/24211—Parapoxvirus, e.g. Orf virus
- C12N2710/24221—Viruses as such, e.g. new isolates, mutants or their genomic sequences
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/24011—Poxviridae
- C12N2710/24211—Parapoxvirus, e.g. Orf virus
- C12N2710/24232—Use of virus as therapeutic agent, other than vaccine, e.g. as cytolytic agent
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/24011—Poxviridae
- C12N2710/24211—Parapoxvirus, e.g. Orf virus
- C12N2710/24241—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2710/24243—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/24011—Poxviridae
- C12N2710/24211—Parapoxvirus, e.g. Orf virus
- C12N2710/24251—Methods of production or purification of viral material
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/32011—Picornaviridae
- C12N2770/32021—Viruses as such, e.g. new isolates, mutants or their genomic sequences
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/32011—Picornaviridae
- C12N2770/32022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/32011—Picornaviridae
- C12N2770/32032—Use of virus as therapeutic agent, other than vaccine, e.g. as cytolytic agent
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Virology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Mycology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Hematology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
［０００１］ がんは、米国における死因の第２位を占める。近年、免疫チェックポイント阻害剤、キメラ抗原レセプターを備えるＴ細胞（ＣＡＲ Ｔ細胞）、及び腫瘍溶解性ウイルスを含む、がん免疫療法が大きく進展した。腫瘍溶解性ウイルスは、健康な細胞を損傷せずに、がん細胞に感染し、そのがん細胞中で複製し、最終的にはそのがん細胞を死滅させる、天然由来の、又は遺伝子改変された、ウイルスである。
［０００２］ 腫瘍溶解性ウイルスは、健康な細胞を損傷せずに、がん細胞に感染し、そのがん細胞中で複製し、最終的にはそのがん細胞を死滅させる、天然由来の、又は遺伝子改変された、ウイルスである（非特許文献１，２）。メラノーマが切除不能なＩＩＩＢ期、ＩＩＩＣ期、又はＩＶ期の患者４３６人を対象とした、腫瘍溶解性単純ヘルペスウイルスＴ－ＶＥＣの、最近完了した第ＩＩＩ相臨床試験では、主要な評価項目が満たされ、Ｔ－ＶＥＣを投与された患者で持続的な効果が認められたのは、１６．３％であったのに対し、ＧＭ－ＣＳＦを投与された患者では２．１％であったこと、が報告された（非特許文献３）。本臨床試験の結果に基づき、ＦＤＡは２０１５年１０月２７日にＴ－ＶＥＣを承認した。
［０００３］ アデノウイルス、単純ヘルペスウイルス１、ニューカッスル病ウイルス、レオウイルス、麻疹ウイルス、コクサッキーウイルス、セネカバレーウイルス、ワクシニアウイルス等、少なくとも８つの異なる種由来の腫瘍溶解性ウイルス構築物が、臨床試験の様々な段階で試験されている。腫瘍溶解性ウイルスは、がん患者では忍容性が良好であることが、明らかである。しかしながら、単独治療としての腫瘍溶解性ウイルスの臨床的利益は、限られている（非特許文献５）。腫瘍溶解性ウイルスの安全性に関する懸念により、前臨床試験、及び臨床試験で共に用いられてきたのは、（天然で無毒であるか、又は遺伝子工学により弱毒化されているかのいずれかの）高度に弱毒化された腫瘍溶解性ウイルスのみである。現在では、腫瘍溶解性ウイルスの安全性が十分に確立されたため、抗腫瘍効果を最大に発揮しうる腫瘍溶解性ウイルスを設計し、試験することができるようになった。強力な腫瘍崩壊効果を発揮する、腫瘍溶解性ウイルスは、腫瘍抗原を多量に放出することで、強力な免疫療法効果をもたらす。
［０００４］ ポックスウイルスファミリーの原型であるワクシニアウイルスは、天然痘ワクチンとして用いられ、１９及び２０世紀だけで５億人が死亡したと推定される天然痘を、根絶した。すなわち、紛れもなく、最も成功した、生きた生物製剤である。ワクシニアウイルスの安全性は、世界中の何百万人もの人々で、十分に実証された。ワクシニアウイルスはまた、実験室でウイルス性腫瘍溶解が示された、最初の腫瘍溶解性ウイルスである。腫瘍溶解性ウイルスとしてのワクシニアウイルスは、多くの臨床試験で検証されており、末期がん患者での忍容性が良好であることが示されてきた（非特許文献２）。いくつかの研究では、腫瘍溶解活性に関して、ワクシニアウイルスはアデノウイルスより優れていることが示された（非特許文献６）が、当該アデノウイルスは、最もよく研究されてきた腫瘍溶解性ウイルス種の１つであり、中国で、がん治療に承認された、最初の腫瘍溶解性ウイルスである（非特許文献７）。ワクシニアウイルスの他、アライグマポックスウイルス（ｒａｃｃｏｏｎｐｏｘ ｖｉｒｕｓ）（非特許文献８）、羊痘ウイルス（ｏｒｆ ｖｉｒｕｓ）（非特許文献９）、粘液腫ウイルス（ｍｙｘｏｍａ ｖｉｒｕｓ）（非特許文献１０）等の、ポックスウイルスファミリーの他のウイルスもまた、腫瘍溶解性ウイルスとして、検証された。
Chen NG & Szalay AA (2011)Oncolytic virotherapy of cancer. Cancer Managment in Man: Chemotherapy,Biological Therapy, Hyperthermia and Supporting Measures, Cancer Growth andProgression, ed Minev BR (Springer, New York), Vol 13, pp 295-316.
Chen NG & Szalay AA (2010)Oncolytic vaccinia virus: a theranostic agent for cancer. Future Virol.5(6):763-784.
Andtbacka RH, et al. (2015)Talimogene Laherparepvec Improves Durable Response Rate in Patients WithAdvanced Melanoma. J Clin Oncol 33(25):2780-2788.
Anonymous (2015) First OncolyticViral Therapy for Melanoma. Cancer discovery.
Russell SJ, Peng KW, & Bell JC(2012) Oncolytic virotherapy. Nat Biotechnol 30(7):658-670.
Thorne SH, et al. (2007) Rationalstrain selection and engineering creates a broad-spectrum, systemicallyeffective oncolytic poxvirus, JX-963. J Clin Invest 117(l l):3350-3358.
Yu W & Fang H (2007) Clinicaltrials with oncolytic adenovirus in China. Curr Cancer Drug Targets 7(2):141-148.
Evgin L, et al. (2010) PotentOncolytic Activity of Raccoonpox Virus in the Absence of Natural Pathogenicity.Mol Ther.
Rintoul JL, et al. (2012) ORFV: anovel oncolytic and immune stimulating parapoxvirus therapeutic. Mol Ther20(6): 1148-1157.
Chan WM & McFadden G (2014)Oncolytic Poxviruses. Annu Rev Virol 1(1): 119-141.
［０００５］ 本明細書の記載は、配列番号１、又は配列番号２と、少なくとも７０％（８０％、８５％、９０％、９５％、９８％）の配列同一性がある（又は、ＴＫ遺伝子の欠損により改変された、配列番号１、又は配列番号２と、少なくとも７０％（８０％、８５％、９０％、９５％、９８％）の配列同一性がある）ヌクレオチド配列、及びさらに、ヒトＣＤ１９、又はその部分をコードするヌクレオチド配列、を含む、組換えキメラポックスウイルス、に関する。当該組換えポックスウイルスは腫瘍溶解性であり、特定のがん細胞に感染することができ、かつ、当該細胞を殺傷することができる。また、感染細胞に、細胞表面ＣＤ１９（又は、細胞表面に発現されることができる、ＣＤ１９の部分）を発現させることもできる。ＣＤ１９が発現すると、ＣＤ１９を標的とするＣＡＲ Ｔ細胞（ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞）による殺傷に対して細胞が脆弱になる。すなわち、組換えキメラポックスウイルス、又はＣＤ１９の全体、又は部分をコードする導入遺伝子を含む、他の腫瘍溶解性ウイルス（まとめて「ＣＤ１９を発現する腫瘍溶解性ウイルス」）を、ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞とともに、又は連続して、投与することにより、様々ながんを治療することができる。場合によっては、ＣＤ１９を発現する腫瘍溶解性ウイルスで最初に処置した後、細胞が感染し、ＣＤ１９を発現できるようになるまで時間が経過した後（例えば、１、２、３、４、５日以上）、ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞で処置するのが、好ましい。一方、又は両方の処置を繰り返すことができる。
［０００６］ 一態様では、導入遺伝子、例えば、ヒトＣＤ１９（ＵｎｉＰｒｏｔ ＩＤ Ｐ１５３９１）の全体、又は部分をコードする、発現カセット中の導入遺伝子を含む、組換え腫瘍性ウイルスが提供される。ＣＤ１９の発現部分とは、細胞表面に発現されることができ、かつ、抗ＣＤ１９抗体によって認識されうる部分をいう。
［０００７］ 他の態様では、治療が必要な被験体のがんを処置する方法であって、本明細書に記載のキメラポックスウイルスを、及び、同時に、又はその後、ＣＤ１９を標的とするＣＡＲを発現するＴ細胞を、治療有効量で、被験体に投与する工程を含み、当該被験体のがんを処置する、方法が提供される。いくつかの実施形態では、がんは、例えば、Ｂ細胞がん、ＡＬＬ、ＣＬＬ、又はＢ－ＮＨＬ、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、又はマントル細胞リンパ腫である。
［０００８］ 一態様では、配列番号１、又は配列番号２と、少なくとも７０％（８０％、８５％、９０％、９５％又は９８％）の配列同一性があるヌクレオチド配列としては：（ｉ）牛痘ウイルス（ｃｏｗｐｏｘ ｖｉｒｕｓ）Ｂｒｉｇｈｔｏｎ株、アライグマポックスウイルス（ｒａｃｃｏｏｎｐｏｘ ｖｉｒｕｓ）Ｈｅｒｍａｎ株、ウサギポックスウイルス（ｒａｂｂｉｔｐｏｘ ｖｉｒｕｓ）Ｕｔｒｅｃｈｔ株、ワクシニアウイルスＷＲ株、ワクシニアウイルスＩＨＤ株、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株、ワクシニアウイルスＣＬ株、ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株、ワクシニアウイルスＡＳ株、羊痘ウイルス（ｏｒｆ ｖｉｒｕｓ）ＮＺ２株、及び偽牛痘ウイルス（ｐｓｅｕｄｏｃｏｗｐｏｘ ｖｉｒｕｓ）ＴＪＳ株からなる群から選択される、少なくとも２つのポックスウイルス株由来の核酸断片；（ｉｉ）１又はそれ以上の抗がん核酸配列；又は（ｉｉｉ）検出可能な部分をコードする核酸配列があげられる。
［０００９］ 他の態様では、配列番号１と、少なくとも７０％（８０％、８５％、９０％、９５％又は９８％）の配列同一性があるヌクレオチド配列としては：（ｉ）牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、ワクシニアウイルスＷＲ株、ワクシニアウイルスＩＨＤ株、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株、ワクシニアウイルスＣＬ株、ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株、及びワクシニアウイルスＡＳ株由来の核酸断片；（ｉｉ）１又はそれ以上の抗がん核酸配列；又は（ｉｉｉ）検出可能な部分をコードする核酸配列があげられる。
［００１０］ 他の態様では、配列番号２と、少なくとも７０％の配列同一性があるヌクレオチド配列としては：（ｉ）羊痘ウイルスＮＺ２株、及び偽牛痘ウイルスＴＪＳ株由来の核酸断片；（ｉｉ）１又はそれ以上の抗がん核酸配列；又は（ｉｉｉ）検出可能な部分をコードする核酸配列があげられる。
［００１１］ 他の態様では、配列番号３と、少なくとも７０％（８０％、８５％、９０％、９５％又は９８％）の配列同一性があるヌクレオチド配列としては：（ｉ）牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、ワクシニアウイルスＷＲ株、ワクシニアウイルスＩＨＤ株、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株、ワクシニアウイルスＣＬ株、ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株、及びワクシニアウイルスＡＳ株由来の核酸断片；（ｉｉ）１又はそれ以上の抗がん核酸配列；又は（ｉｉｉ）検出可能な部分をコードする核酸配列があげられる。
［００１２］ 一態様では、配列番号１、又は配列番号２と、少なくとも７０％（８０％、８５％、９０％、９５％又は９８％）の配列同一性があるヌクレオチド配列としては：（ｉ）牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、ワクシニアウイルスＷＲ株、ワクシニアウイルスＩＨＤ株、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株、ワクシニアウイルスＣＬ株、ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株、ワクシニアウイルスＡＳ株、羊痘ウイルスＮＺ２株、及び偽牛痘ウイルスＴＪＳ株からなる群から選択される、少なくとも２つのポックスウイルス株由来の核酸断片；（ｉｉ）１又はそれ以上の抗がん核酸配列；（ｉｉｉ）１又はそれ以上の核酸結合配列；又は（ｉｖ）検出可能な部分をコードする核酸配列があげられる。
［００１３］ 他の態様では、配列番号１と、少なくとも７０％（８０％、８５％、９０％、９５％又は９８％）の配列同一性があるヌクレオチド配列としては：（ｉ）牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、ワクシニアウイルスＷＲ株、ワクシニアウイルスＩＨＤ株、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株、ワクシニアウイルスＣＬ株、ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株、ワクシニアウイルスＡＳ株由来の核酸断片；（ｉｉ）１又はそれ以上の抗がん核酸配列；（ｉｉｉ）１又はそれ以上の核酸結合配列；又は（ｉｖ）検出可能な部分をコードする核酸配列があげられる。
［００１４］ 他の態様では、配列番号２と、少なくとも７０％（８０％、８５％、９０％、９５％又は９８％）の配列同一性があるヌクレオチド配列としては：（ｉ）羊痘ウイルスＮＺ２株、及び偽牛痘ウイルスＴＪＳ株由来の核酸断片；（ｉｉ）１又はそれ以上の抗がん核酸配列；（ｉｉｉ）１又はそれ以上の核酸結合配列；又は（ｉｖ）検出可能な部分をコードする核酸配列があげられる。
［００１５］ 他の態様では、配列番号３と、少なくとも７０％（８０％、８５％、９０％、９５％又は９８％）の配列同一性があるヌクレオチド配列としては：（ｉ）牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、ワクシニアウイルスＷＲ株、ワクシニアウイルスＩＨＤ株、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株、ワクシニアウイルスＣＬ株、ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株、ワクシニアウイルスＡＳ株由来の核酸断片；（ｉｉ）１又はそれ以上の抗がん核酸配列；（ｉｉｉ）１又はそれ以上の核酸結合配列；又は（ｉｖ）検出可能な部分をコードする核酸配列があげられる。
［００２８］ 本明細書は、ヒトＣＤ１９の全体、又は部分を発現する組換え腫瘍溶解性ウイルスに関する。当該ウイルスは、腫瘍溶解性、又は他の腫瘍溶解性ウイルスであるキメラポックスウイルス組成物由来である。適当な組換え腫瘍溶解性ウイルスは、２０１７年８月９日に出願され、参照により本明細書に組み込まれる、ＰＣＴ／ＵＳ２０１７／４６１６３に記載されるように、ヒトＣＤ１９、又はその部分をコードする配列を含む、発現カセットを、キメラウイルス、又は他の腫瘍溶解性ウイルスに挿入することにより、作製することができる。
［００２９］ 用語「組換え」は、例えば、細胞、又は核酸、タンパク質、又はベクターに参照して用いられる場合、細胞、核酸、タンパク質、又はベクターが、異種の核酸、若しくはタンパク質の導入により、又は天然の核酸、若しくはタンパク質の改変により、改変されたか、又は当該細胞がそのように改変された細胞に由来することをいう。
［００３０］ 用語「ウイルス」又は「ウイルス粒子」は、ウイルス学における、通常の意味に従って用いられ、ウイルスゲノム（例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡ、一本鎖、二本鎖）、ウイルスカプシド、及び関連タンパク質、を含むビリオン、並びにエンベロープを備えるウイルス（例えば、ヘルペスウイルス、ポックスウイルス）の場合、脂質、及び場合により宿主細胞膜成分を含むエンベロープ、及び／又はウイルスタンパク質をいう。
［００３１］ 用語「ポックスウイルス」は、ウイルス学における、通常の意味に従って用いられ、脊椎動物、及び無脊椎動物に感染し、当該宿主の細胞質中で複製することができる、ポックスウイルス科の種をいう。いくつかの実施形態では、ポックスウイルスビリオンは、直径が約２００ｎｍ、長さが約３００ｎｍの大きさで、通常、１３０～３７５キロベースの、ＤＮＡの単一の線状二本鎖のセグメントにゲノムが存在する。用語ポックスウイルスとしては、ポックスウイルス科のすべての属があげられる（例えば、ベータエントモポックスウイルス（betaentomopoxvirus）、ヤタポックスウイルス（yatapoxvirus）、セルビドポックスウイルス（cervidpoxvirus）、ガンマエントポックスウイルス（gammaentomopoxvirus）、レポリポックスウイルス（leporipoxvirus）、スイポックスウイルス（suipoxvirus）、molluscipoxvirus、crocodylidpoxvirus、アルファエントモポックスウイルス（alphaentomopoxvirus）、カプリポックスウイルス（capripoxvirus）、オルソポックスウイルス、アビポックスウイルス（avipoxvirus）、及びパラポックスウイルス）が、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、当該ポックスウイルスは、オルソポックスウイルス（例えば、天然痘ウイルス、ワクシニアウイルス、牛痘ウイルス、サル痘ウイルス）、パラポックスウイルス（例えば、羊痘ウイルス、偽牛痘ウイルス、ウシ流行性口内炎ウイルス（bovine popular stomatitis virus））、ヤタポックスウイルス（例えば、タナポックスウイルス、ヤバサル腫瘍ウイルス（yaba monkey tumor virus））、又はmolluscipoxvirus（例えば、伝染性軟属腫ウイルス）である。いくつかの実施形態では、当該ポックスウイルスは、オルソポックスウイルス（例えば、牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、ワクシニアウイルスＷＲ株、ワクシニアウイルスＩＨＤ株、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株、ワクシニアウイルスＣＬ株、ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株、又はワクシニアウイルスＡＳ株）である。いくつかの実施形態では、ポックスウイルスはパラポックスウイルス（例えば、羊痘ウイルスＮＺ２株、又は偽牛痘ウイルスＴＪＳ株）である。
［００３２］ 用語「キメラ」は、キメラポックスウイルスに関連して用いられる場合、ウイルス学における、通常の意味に従って用いられ、２又はそれ以上の異なる微生物（例えば、同一のサブファミリー由来の２つのウイルス、異なるサブファミリー由来の２つのウイルス）に由来する、核酸断片を結合して作製される、ハイブリッド微生物（例えば、キメラポックスウイルス）をいう。いくつかの実施形態では、少なくとも２つの核酸断片は各々、複製に必要な必須遺伝子を含む。その実施形態を含む本明細書で提供されるキメラポックスウイルスは、１又はそれ以上の導入遺伝子（すなわち、ウイルスゲノムが固有に備えるのではない核酸配列）を含んでよい。例えば、その実施形態を含む本明細書で提供されるキメラポックスウイルスとしては、抗がん核酸配列、核酸結合配列、検出可能な部分をコードする核酸配列、又はそれらのいかなる組合せがあげられうる。いくつかの実施形態では、キメラポックスウイルスは、抗がん核酸配列、核酸結合配列、及び検出可能な部分をコードする核酸配列を含む核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、キメラポックスウイルスは、抗がん核酸配列、及び検出可能な部分をコードする核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、キメラポックスウイルスは、核酸結合配列、及び検出可能な部分をコードする核酸配列を含む核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、キメラポックスウイルスは、抗がん核酸配列、及び核酸結合配列を含む核酸配列を含む。
［００３３］ 用語「牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株」は、その一般的な通常の意味に従って用いられ、同一、又は類似の名称のウイルス株、並びにその機能的断片、及びその相同体をいう。当該用語は、牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株の活性を（例えば、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、又は１００％以内）維持する、組換え、又は天然の牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、又はその変異体を含む。当該用語は、組換え、又は天然の牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、又はその変異体を包含し、そのゲノムは牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株ゲノムと、配列同一性がある（例えば、牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株ゲノムと、約６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、又は１００％の同一性がある）。牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株は、牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株の活性、発現、細胞標的化、又は感染能を調節する（例えば、牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株と比較すると、増加、又は減少する）突然変異アミノ酸がある変異体をいう。牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株は、本明細書に記載のように改変することができる。いくつかの実施形態では、牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株は、ＡＴＣＣ（アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション）参照番号ＡＴＣＣ ＶＲ－３０２（商標）によって同定されたウイルス株、その変異体、又は相同体をいう。
［００３４］ 用語「アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株」は、その一般的な通常の意味に従って用いられ、同一、又は類似の名称のウイルス株、並びにその機能的断片、及びその相同体をいう。当該用語は、アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株の活性を（例えば、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、又は１００％以内）維持する、組換え、又は天然のアライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株、又はその変異体を含む。当該用語は、組換え、又は天然のアライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株、又はその変異体を包含し、そのゲノムは、アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株ゲノムと、配列同一性がある（例えば、アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株ゲノムと、約６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、又は１００％の同一性がある）。アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株は、アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株の活性、発現、細胞標的化、又は感染能を調節する（例えば、アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株と比較すると、増加、又は減少する）突然変異アミノ酸がある変異体をいう。アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株は、本明細書に記載のように改変することができる。いくつかの実施形態では、アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株は、ＡＴＣＣ参照番号ＡＴＣＣ ＶＲ－８３８（商標）によって同定されたウイルス株、その変異体又は相同体をいう。
［００３５］ 用語「ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株」は、その一般的な通常の意味に従って用いられ、同一、又は類似の名称のウイルス株、並びにその機能的断片、及びその相同体をいう。当該用語は、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株の活性を（例えば、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、又は１００％以内）維持する、組換え、又は天然のウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、又はその変異体を含む。当該用語は、組換え、又は天然のウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、又はその変異体を包含し、そのゲノムは、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株ゲノムと、配列同一性がある（例えば、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株と、約６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、又は１００％の同一性がある）。ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株は、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株の活性、発現、細胞標的化、又は感染能を調節する（例えば、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株と比較すると、増加、又は減少する）突然変異アミノ酸がある変異体をいう。ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株は、本明細書に記載のように改変することができる。いくつかの実施形態では、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株は、ＡＴＣＣ参照番号ＡＴＣＣ ＶＲ－１５９１（商標）によって同定されたウイルス株、その変異体又は相同体をいう。
［００３６］ 用語「ワクシニアウイルスＷＲ株」は、その一般的な通常の意味に従って用いられ、同一、又は類似の名称のウイルス株、並びにその機能的断片、及びその相同体をいう。当該用語は、ワクシニアウイルスＷＲ株の活性を（例えば、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、又は１００％以内）維持する、組換え、又は天然のワクシニアウイルスＷＲ株、又はその変異体を含む。当該用語は、組換え、又は天然のワクシニアウイルスＷＲ株、又はその変異体を包含し、そのゲノムは、ワクシニアウイルスＷＲ株ゲノムと、配列同一性がある（例えば、ワクシニアウイルスＷＲ株と、約６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、又は１００％の同一性がある）。ワクシニアウイルスＷＲ株は、ワクシニアウイルスＷＲ株の活性、発現、細胞標的化、又は感染能を調節する（例えば、ワクシニアウイルスＷＲ株と比較すると、増加、又は減少する）突然変異アミノ酸がある変異体をいう。ワクシニアウイルスＷＲ株は、本明細書に記載のように改変することができる。いくつかの実施形態では、ワクシニアウイルスＷＲ株は、ＡＴＣＣ参照番号ＡＴＣＣ ＶＲ－１３５４（商標）によって同定されたウイルス株、その変異体又は相同体をいう。
［００３７］ 用語「ワクシニアウイルスＩＨＤ株」は、その一般的な通常の意味に従って用いられ、同一、又は類似の名称のウイルス株、並びにその機能的断片、及びその相同体をいう。当該用語は、ワクシニアウイルスＩＨＤ株の活性を（例えば、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、又は１００％以内）維持する、組換え、又は天然のワクシニアウイルスＩＨＤ株、株、又はその変異体を含む。当該用語は、組換え、又は天然のワクシニアウイルスＩＨＤ株、又はその変異体を包含し、そのゲノムは、ワクシニアウイルスＩＨＤ株ゲノムと、配列同一性がある（例えば、ワクシニアウイルスＩＨＤ株と、約６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、又は１００％の同一性がある）。ワクシニアウイルスＩＨＤ株は、ワクシニアウイルスＩＨＤ株の活性、発現、細胞標的化、又は感染能を調節する（例えば、ワクシニアウイルスＩＨＤ株と比較すると、増加、又は減少する）突然変異アミノ酸がある変異体をいう。ワクシニアウイルスＩＨＤ株は、本明細書に記載のように改変することができる。いくつかの実施形態では、ワクシニアウイルスＩＨＤ株は、ＡＴＣＣ参照番号ＡＴＣＣ ＶＲ－１５６（商標）によって同定されたウイルス株、その変異体又は相同体をいう。
［００３８］ 用語「ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株」は、その一般的な通常の意味に従って用いられ、同一、又は類似の名称のウイルス株、並びにその機能的断片、及びその相同体をいう。当該用語は、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株の活性を（例えば、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、又は１００％以内）維持する、組換え、又は天然のワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株、又はその変異体を含む。当該用語は、組換え、又は天然のワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株、又はその変異体を包含し、そのゲノムは、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株と、配列同一性がある（例えば、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株と、約６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、又は１００％の同一性がある）。ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株は、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株の活性、発現、細胞標的化、又は感染能を調節する（例えば、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株と比較すると、増加、又は減少する）突然変異アミノ酸がある変異体をいう。ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株は、本明細書に記載のように改変することができる。いくつかの実施形態では、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株は、ＡＴＣＣ参照番号ＡＴＣＣ ＶＲ－１５４９（商標）によって同定されたウイルス株、その変異体又は相同体をいう。
［００３９］ 用語「ワクシニアウイルスＣＬ株」は、その一般的な通常の意味に従って用いられ、同一、又は類似の名称のウイルス株、並びにその機能的断片、及びその相同体をいう。当該用語は、ワクシニアウイルスＣＬ株の活性を（例えば、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、又は１００％以内）維持する、組換え、又は天然のワクシニアウイルスＣＬ株、又はその変異体を含む。当該用語は、組換え、又は天然のワクシニアウイルスＣＬ株、又はその変異体を包含し、そのゲノムは、ワクシニアウイルスＣＬ株ゲノムと、配列同一性がある（例えば、ワクシニアウイルスＣＬ株と、約６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、又は１００％の同一性がある）。ワクシニアウイルスＣＬ株は、ワクシニアウイルスＣＬ株の活性、発現、細胞標的化、又は感染能を調節する（例えば、ワクシニアウイルスＣＬ株と比較すると、増加、又は減少する）突然変異アミノ酸がある変異体をいう。ワクシニアウイルスＣＬ株は、本明細書に記載のように改変することができる。いくつかの実施形態では、ワクシニアウイルスＣＬ株は、ＡＴＣＣ参照番号ＡＴＣＣ ＶＲ－１７７４（商標）によって同定されたウイルス株、その変異体又は相同体をいう。
［００４０］ 用語「ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株」は、その一般的な通常の意味に従って用いられ、同一、又は類似の名称のウイルス株、並びにその機能的断片、及びその相同体をいう。当該用語は、ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株の活性を（例えば、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、又は１００％以内）維持する、組換え、又は天然のワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株、又はその変異体を含む。当該用語は、組換え、又は天然のワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株、又はその変異体を包含し、そのゲノムは、ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株ゲノムと、配列同一性がある（例えば、ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株と、約６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、又は１００％の同一性がある）。ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株は、ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株の活性、発現、細胞標的化、又は感染能を調節する（例えば、ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株と比較すると、増加、又は減少する）突然変異アミノ酸がある変異体をいう。ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株は、本明細書に記載のように改変することができる。いくつかの実施形態では、ワクシニアウイルスＷＲ株は、ＡＴＣＣ参照番号ＡＴＣＣ ＶＲ－１１８（商標）によって同定されたウイルス株、その変異体又は相同体をいう。
［００４１］ 用語「ワクシニアウイルスＡＳ株」は、その一般的な通常の意味に従って用いられ、同一、又は類似の名称のウイルス株、並びにその機能的断片、及びその相同体をいう。当該用語は、ワクシニアウイルスＡＳ株の活性を（例えば、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、又は１００％以内）維持する、組換え、又は天然のワクシニアウイルスＡＳ株、又はその変異体を含む。当該用語は、組換え、又は天然のワクシニアウイルスＡＳ株、又はその変異体を包含し、そのゲノムは、ワクシニアウイルスＡＳ株ゲノムと、配列同一性がある（例えば、ワクシニアウイルスＷＲ株と、約６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、又は１００％の同一性がある）。ワクシニアウイルスＡＳ株は、ワクシニアウイルスＡＳ株の活性、発現、細胞標的化、又は感染能を調節する（例えば、ワクシニアウイルスＡＳ株と比較すると、増加、又は減少する）突然変異アミノ酸がある変異体をいう。ワクシニアウイルスＡＳ株は、本明細書に記載のように改変することができる。いくつかの実施形態では、ワクシニアウイルスＡＳ株は、ＡＴＣＣ参照番号ＡＴＣＣ ＶＲ－２０１０（商標）によって同定されたウイルス株、その変異体又は相同体をいう。
［００４２］ 用語「羊痘ウイルスＮＺ２株」は、その一般的な通常の意味に従って用いられ、同一、又は類似の名称のウイルス株、並びにその機能的断片、及びその相同体をいう。当該用語は、羊痘ウイルスＮＺ２株の活性を（例えば、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、又は１００％以内）維持する、組換え、又は天然の羊痘ウイルスＮＺ２株、又はその変異体を含む。当該用語は、組換え、又は天然の羊痘ウイルスＮＺ２株、又はその変異体を包含し、そのゲノムは、羊痘ウイルスＮＺ２株と、配列同一性がある（例えば、ワクシニアウイルスＷＲ株と、約６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、又は１００％の同一性がある）。羊痘ウイルスＮＺ２株は、羊痘ウイルスＮＺ２株の活性、発現、細胞標的化、又は感染能を調節する（例えば、羊痘ウイルスＮＺ２株と比較すると、増加、又は減少する）突然変異アミノ酸がある変異体をいう。羊痘ウイルスＮＺ２株は、本明細書に記載のように改変することができる。いくつかの実施形態では、羊痘ウイルスＮＺ２株 は、ＡＴＣＣ参照番号ＡＴＣＣ ＶＲ－１５４８（商標）によって同定されたウイルス株、その変異体又は相同体をいう。
［００４３］ 「偽牛痘ウイルスＴＪＳ株」は、その一般的な通常の意味に従って用いられ、同一、又は類似の名称のウイルス株、並びにその機能的断片、及びその相同体をいう。当該用語は、偽牛痘ウイルスＴＪＳ株の活性を（例えば、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、又は１００％以内）維持する、組換え、又は天然の偽牛痘ウイルスＴＪＳ株、又はその変異体を含む。当該用語は、組換え、又は天然の偽牛痘ウイルスＴＪＳ株、又はその変異体を包含し、そのゲノムは、偽牛痘ウイルスＴＪＳ株と、配列同一性がある（例えば、ワクシニアウイルスＷＲ株と、約６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、又は１００％の同一性がある）。偽牛痘ウイルスＴＪＳ株は、偽牛痘ウイルスＴＪＳ株の活性、発現、細胞標的化、又は感染能を調節する（例えば、偽牛痘ウイルスＴＪＳ株と比較すると、増加、又は減少する）突然変異アミノ酸がある変異体をいう。偽牛痘ウイルスＴＪＳ株は、本明細書に記載のように改変することができる。いくつかの実施形態では、偽牛痘ウイルスＴＪＳ株は、ＡＴＣＣ参照番号ＡＴＣＣ ＶＲ－６３４（商標）によって同定されたウイルス株、その変異体又は相同体をいう。
［００４４］ いくつかの実施形態では、牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株は、牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株 ＡＴＣＣ ＶＲ－３０２（商標）である。いくつかの実施形態では、アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株は、アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株 ＡＴＣＣ ＶＲ－８３８（商標）である。いくつかの実施形態では、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株は、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株 ＡＴＣＣ ＶＲ－１５９１（商標）である。いくつかの実施形態では、ワクシニアウイルスＷＲ株は、ワクシニアウイルスＷＲ株ＡＴＣＣ ＶＲ－１３５４（商標）である。いくつかの実施形態では、ワクシニアウイルスＩＨＤ株は、ワクシニアウイルスＩＨＤ株ＡＴＣＣ ＶＲ－１５６（商標）である。いくつかの実施形態では、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株は、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株ＡＴＣＣ ＶＲ－１５４９（商標）である。いくつかの実施形態では、ワクシニアウイルスＣＬ株は、ワクシニアウイルスＣＬ株ＡＴＣＣ ＶＲ－１７７４（商標）である。いくつかの実施形態では、ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株は、ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株 ＡＴＣＣ ＶＲ－１１８（商標）である。いくつかの実施形態では、ワクシニアウイルスＡＳ株は、ワクシニアウイルスＡＳ株ＡＴＣＣ ＶＲ－２０１０（商標）である。いくつかの実施形態では、羊痘ウイルスＮＺ２株は、羊痘ウイルスＮＺ２株ＡＴＣＣ ＶＲ－１５４８（商標）である。いくつかの実施形態では、偽牛痘ウイルスＴＪＳ株は、偽牛痘ウイルスＴＪＳ株ＡＴＣＣ ＶＲ６３４（商標）である。
Ｉ． キメラポックスウイルス組成物
［００４５］ 一態様では、配列番号１、又は配列番号２と、少なくとも７０％（７５％、８０％、８５％、９０％、９２％、９４％、９６％、９８％、又は９９％）の配列同一性があるヌクレオチド配列、及び細胞表面に発現しうる、ヒトＣＤ１９、又はその部分、をコードするヌクレオチド配列、を含むキメラポックスウイルスが提供される。いくつかの実施形態では、配列番号１、又は配列番号２と、少なくとも７０％同一性がある配列としては、牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、ワクシニアウイルスＷＲ株、ワクシニアウイルスＩＨＤ株、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株、ワクシニアウイルスＣＬ株、ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株、ワクシニアウイルスＡＳ株、羊痘ウイルスＮＺ２株、及び偽牛痘ウイルスＴＪＳ株を含む群から選択される、少なくとも２つのポックスウイルス株由来のヌクレオチド配列（「核酸断片」）があげられる。
［００４５］ 一態様では、配列番号１、又は配列番号２と、少なくとも７０％（７５％、８０％、８５％、９０％、９２％、９４％、９６％、９８％、又は９９％）の配列同一性があるヌクレオチド配列、及び細胞表面に発現しうる、ヒトＣＤ１９、又はその部分、をコードするヌクレオチド配列、を含むキメラポックスウイルスが提供される。いくつかの実施形態では、配列番号１、又は配列番号２と、少なくとも７０％同一性がある配列としては、牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、ワクシニアウイルスＷＲ株、ワクシニアウイルスＩＨＤ株、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株、ワクシニアウイルスＣＬ株、ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株、ワクシニアウイルスＡＳ株、羊痘ウイルスＮＺ２株、及び偽牛痘ウイルスＴＪＳ株を含む群から選択される、少なくとも２つのポックスウイルス株由来のヌクレオチド配列（「核酸断片」）があげられる。
［００４６］ 本明細書に記載の、キメラ腫瘍溶解性ポックスウイルスは、機能的シグナル伝達ドメインを欠損するが、細胞外ドメイン、及び膜貫通ドメインを含む、切断型ヒトＣＤ１９（ＣＤ１９ｔ）をコードする、導入遺伝子を含む。当該切断型ヒトＣＤ１９は、以下のアミノ酸配列である配列番号Ｃ：
（又は、少なくとも当該配列番号と、９５％、９７％、９８％、又は９９％同一の配列）を含む。ある場合には、当該ＣＤ１９ｔは、配列番号Ｃのアミノ酸２２～３２３を含むか、又はからなる。配列番号３のアミノ酸１～２１は、シグナル伝達ドメインであり、異なるシグナル伝達ドメインで、置換できる。すなわち、当該腫瘍崩壊ウイルスは、発現制御配列（例えば、初期プロモーター）に作動可能に連結された、切断型ヒトＣＤ１９をコードするヌクレオチド配列、を含む配列を含む。
［００４７］ いくつかの実施形態では、当該核酸断片は、牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、ワクシニアウイルスＷＲ株、ワクシニアウイルスＩＨＤ株、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株、ワクシニアウイルスＣＬ株、ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株、及びワクシニアウイルスＡＳ株に由来する。
［００４８］ いくつかの実施形態では、当該核酸配列は、牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、及びアライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、当該核酸配列は、牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、及びウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、当該核酸配列は、牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、及びワクシニアウイルスＷＲ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、当該核酸配列は、牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、及びワクシニアウイルスＩＨＤ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、当該核酸配列は、牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、及びワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、当該核酸配列は、牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、及びワクシニアウイルスＣＬ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、当該核酸配列は、牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、及びワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、当該核酸配列は、牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、及びワクシニアウイルスＡＳ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、当該核酸配列は、牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、及び羊痘ウイルスＮＺ２株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、当該核酸配列は、牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、及び偽牛痘ウイルスＴＪＳ株由来の核酸断片を含む。
［００４９］ いくつかの実施形態では、核酸配列は、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、及びワクシニアウイルスＷＲ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、及びワクシニアウイルスＩＨＤ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、及びワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、及びワクシニアウイルスＣＬ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、及びワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、及びワクシニアウイルスＡＳ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、及び羊痘ウイルスＮＺ２株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、及び偽牛痘ウイルスＴＪＳ株由来の核酸断片を含む。
［００５０］ いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＷＲ株、及びワクシニアウイルスＩＨＤ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＷＲ株、及びワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＷＲ株、及びワクシニアウイルスＣＬ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＷＲ株、及びワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＷＲ株、及びワクシニアウイルスＡＳ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＷＲ株、及び羊痘ウイルスＮＺ２株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＷＲ株、及び偽牛痘ウイルスＴＪＳ株由来の核酸断片を含む。
［００５１］ いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＩＨＤ株、及びワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＩＨＤ株、及びワクシニアウイルスＣＬ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＩＨＤ株、及びワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＩＨＤ株、及びワクシニアウイルスＡＳ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＩＨＤ株、及び羊痘ウイルスＮＺ２株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＩＨＤ株、及び偽牛痘ウイルスＴＪＳ株由来の核酸断片を含む。
［００５２］ いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株、及びワクシニアウイルスＣＬ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株、及びワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株、及びワクシニアウイルスＡＳ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株、及び羊痘ウイルスＮＺ２株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株、及び偽牛痘ウイルスＴＪＳ株由来の核酸断片を含む。
［００５３］ いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＣＬ株、及びワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＣＬ株、及びワクシニアウイルスＡＳ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＣＬ株、及び羊痘ウイルスＮＺ２株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＣＬ株、及び偽牛痘ウイルスＴＪＳ株由来の核酸断片を含む。
［００５４］ いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株、及びワクシニアウイルスＡＳ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株、及び羊痘ウイルスＮＺ２株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスLederle-Chorioallantoic株、及び偽牛痘ウイルスＴＪＳ株由来の核酸断片を含む。
［００５５］ いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＡＳ株、及び羊痘ウイルスＮＺ２株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、ワクシニアウイルスＡＳ株、及び偽牛痘ウイルスＴＪＳ株由来の核酸断片を含む。いくつかの実施形態では、核酸配列は、羊痘ウイルスＮＺ２株、及び偽牛痘ウイルスＴＪＳ株由来の核酸断片を含む。
ＩＩ． ＣＤ１９を標的とするキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）
［００５６］ これまで、米国特許第７，４４６，１７９号、及びPark et al. 2016 Blood 128:4035を含む、様々なＣＤ１９ ＣＡＲの報告があり、それらに記載されているものを用いることができる。ＣＤ１９ ＣＡＲとしては、ＣＤ１９と結合するｓｃＦｖ、例えば、ＦＭＣ６３（Zola et al. 1991 Immunol Cell Biol 69:411）、又はＳＪ２５Ｃ１（Bejcek et al. 1995 Cancer Research 55:2346）をあげることができ、これらはいずれも商業的に利用可能である。
［００５６］ これまで、米国特許第７，４４６，１７９号、及びPark et al. 2016 Blood 128:4035を含む、様々なＣＤ１９ ＣＡＲの報告があり、それらに記載されているものを用いることができる。ＣＤ１９ ＣＡＲとしては、ＣＤ１９と結合するｓｃＦｖ、例えば、ＦＭＣ６３（Zola et al. 1991 Immunol Cell Biol 69:411）、又はＳＪ２５Ｃ１（Bejcek et al. 1995 Cancer Research 55:2346）をあげることができ、これらはいずれも商業的に利用可能である。
［００５７］ 本明細書に記載されるのは、ＣＡＲをコードする核酸分子であって、当該ＣＡＲは、以下の：ＣＤ１９を標的とするｓｃＦｖ（例えば、以下の配列番号Ｄ
）、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体；ＣＤ４膜貫通ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体、ＣＤ８膜貫通ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体、ＣＤ２８膜貫通ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体、ＣＤ３ゼータ膜貫通ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体、から選択される膜貫通ドメイン；共刺激ドメイン、例えば、ＣＤ２８共刺激ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体；４－１ＢＢ共刺激ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体；又は、ＣＤ２８共刺激ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体、及び４－１ＢＢ共刺激ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体；並びに、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体、を含む。
［００５８］ 様々な実施形態では、共刺激ドメインは、ＣＤ２８共刺激ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体、４－１ＢＢ共刺激ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体、ＯＸ共刺激ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体、からなる群から選択される。ある実施形態では、４－１ＢＢ共刺激ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体、が存在する。いくつかの実施形態では、２つの共刺激ドメイン、例えば、ＣＤ２８共刺激ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体、及び４－１ＢＢ共刺激ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体が存在する。様々な実施形態では、１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸の改変は、置換である。
［００５９］ いくつかの場合には、共刺激ドメインと、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインの間、及び／又は２つの共刺激ドメインの間に、１～６のアミノ酸の短い配列（例えば、ＧＧ Ｇ）が存在する。
［００６０］ さらなる実施形態では、当該ＣＡＲは、ＣＤ１９を標的とするｓｃＦｖ；ＣＤ２８共刺激ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変された、その変異体、４－１ＢＢ共刺激ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変された、その変異体、ＯＸ共刺激ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変された、その変異体、からなる群から選択される２つの異なる共刺激ドメイン；ＣＤ２８共刺激ドメイン、又は１～２のアミノ酸が改変された、その変異体、４－１ＢＢ共刺激ドメイン、又は１～２のアミノ酸が改変された、その変異体、ＯＸ共刺激ドメイン、又は１～２のアミノ酸が改変された、その変異体、からなる群から選択される２つの異なる共刺激ドメイン；ＣＤ１９ｓｃＦｖ、又は１～２のアミノ酸が改変された、その変異体；ＣＤ４膜貫通ドメイン、又は１～２のアミノ酸が改変された、その変異体、ＣＤ８膜貫通ドメイン、又は１～２のアミノ酸が改変された、その変異体、ＣＤ２８膜貫通ドメイン、又は１～２のアミノ酸が改変された、その変異体、ＣＤ３ゼータ膜貫通ドメイン、又は１～２のアミノ酸が改変された、その変異体、から選択される膜貫通ドメイン；共刺激ドメイン、例えば、ＣＤ２８共刺激ドメイン、又は１～５（１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体；４－１ＢＢ共刺激ドメイン、又は１～５（１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体；又は、ＣＤ２８共刺激ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体、及び４－１ＢＢ共刺激ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体；並びに、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメイン、又は１～２のアミノ酸が改変された、その変異体；ＣＤ１９ｓｃＦｖ、又はその変異体と、膜貫通ドメインとの間に位置するスペーサー領域（例えば、当該スペーサー領域は、配列番号２～１２及び４２（表３）からなる群から選択されるアミノ酸配列、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変された、その変異体を含む）；ＩｇＧヒンジ領域を含む、当該スペーサー；１～１５０のアミノ酸を含む、当該スペーサー領域；スペーサー不存在；配列番号２４のアミノ酸配列を含む、４－１ＢＢシグナル伝達ドメイン、配列番号２１のアミノ酸配列を含む、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメイン、及び当該共刺激ドメインと当該ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメイン、又はその変異体との間に位置する３～１５個のアミノ酸のリンカー、を含む。共刺激ドメインが２つの場合の特定の実施形態では、１つは４－１ＢＢ共刺激ドメインであり、もう１つはＣＤ２８、及びＣＤ２８ｇｇから選択される共刺激ドメインである。いくつかの実施形態では、様々な実施形態では、１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸の改変は、置換、例えば、保存的置換である。
［００６１］ 本明細書の開示はまた、キメラ抗原レセプターをコードする発現カセットを含むベクターにより、形質導入されたヒトＴ細胞の集団であって、当該キメラ抗原レセプターが：ＣＤ１９を標的とするｓｃＦｖ；ＣＤ４膜貫通ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体、ＣＤ８膜貫通ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体、ＣＤ２８膜貫通ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体、ＣＤ３ゼータ膜貫通ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体、から選択される膜貫通ドメイン；共刺激ドメイン、例えば、ＣＤ２８共刺激ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体；４－１ＢＢ共刺激ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体；又は、ＣＤ２８共刺激ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体、及び４－１ＢＢ共刺激ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体；並びに、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメイン、又は１～５（例えば、１、又は２）のアミノ酸が改変（例えば、置換）された、その変異体、を含む。様々な実施形態では、当該ヒトＴ細胞の集団は、中心記憶Ｔ細胞（ＴＣＭ細胞）を含み、例えば、ヒトＴ細胞のうち、少なくとも２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％が、ＴＣＭ細胞であるか、又は当該Ｔ細胞の集団は、中心記憶Ｔ細胞、ナイーブＴ細胞、及び幹中心記憶細胞（ＴＣＭ／ＳＣＭ／Ｎ細胞）を含み、例えば、当該Ｔ細胞の少なくとも２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％が、ＴＣＭ／ＳＣＭ／Ｎ細胞である。いずれの場合も、当該Ｔ細胞集団は、ＣＤ４＋細胞、及びＣＤ８＋細胞をともに含む（例えば、ＣＤ３＋Ｔ細胞の少なくとも２０％が、ＣＤ４＋であり、かつ、ＣＤ３＋Ｔ細胞の少なくとも３％が、ＣＤ８＋であり、かつ、少なくとも７０、８０、又は９０％がＣＤ４＋、又はＣＤ８＋である；当該ＣＤ３＋細胞の、少なくとも１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、５０％、６０％が、ＣＤ４＋であり、当該ＣＤ３＋細胞の、少なくとも４％、５％、８％、１０％、２０％が、ＣＤ８＋細胞である）。
［００６２］ 本明細書の記載はまた、患者のがんを処置する方法であって、自己、又は同種ヒトＴ細胞の集団（例えば、中心記憶Ｔ細胞（ＴＣＭ細胞）、又は少なくとも当該細胞の２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％は、中心記憶Ｔ細胞、ナイーブＴ細胞、及び幹中心記憶細胞の組合せ（すなわち、Ｔ細胞はＴＣＭ／ＳＣＭ／Ｎ細胞）を含む、自己又は同種Ｔ細胞）を、投与する工程を含む方法である。いずれの場合も、Ｔ細胞の集団は、キメラ抗原レセプターをコードする発現カセットを含むベクターによって形質導入された、ＣＤ４＋細胞、及びＣＤ８＋細胞をともに含む（例えば、ＣＤ３＋Ｔ細胞の少なくとも２０％が、ＣＤ４＋であり、かつ、ＣＤ３＋Ｔ細胞の少なくとも３％が、ＣＤ８＋であり、かつ、少なくとも７０、８０、又は９０％がＣＤ４＋、又はＣＤ８＋である；当該ＣＤ３＋細胞の、少なくとも１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、５０％、６０％が、ＣＤ４＋であり、当該ＣＤ３＋細胞の、少なくとも４％、５％、８％、１０％、２０％が、ＣＤ８＋細胞である）。
［００６３］ ＣＤ１９ ＣＡＲは、ＣＤ１９結合ドメイン（例えば、ＣＤ１９ｓｃＦｖ）と膜貫通ドメインとの間に位置するスペーサー領域を含むことができる。様々な、異なるスペーサーを用いることができる。それらのいくつかとして、ヒトＦｃ領域の少なくとも部分、例えば、ヒトＦｃ領域のヒンジ部分、又はＣＨ３ドメイン、又は、それらの変異体があげられる。以下の表１は、本明細書に記載のＣＡＲで用いられうる、様々なスペーサーを提供する。
表１：スペーサーの例
表１：スペーサーの例
［００６５］ 「アミノ酸の改変」とは、タンパク質又はペプチド配列における、アミノ酸の置換、挿入、及び／又は欠失を意味し、「アミノ酸の置換」、又は「置換」とは、親ペプチド、又はタンパク質配列における、特定の位置のアミノ酸を、他のアミノ酸で置換することをいう。置換は、得られるタンパク質中のアミノ酸を、非保存的（すなわち、コドンを、特定の大きさ、又は特性があるアミノ酸のグループに属するアミノ酸から、他のグループに属するアミノ酸に、変化させることにより）に、又は保存的（すなわち、コドンを、特定の大きさ、又は特性があるアミノ酸のグループに属するアミノ酸から、同一グループに属するアミノ酸に、変化させることにより）に、変化させるように行うことができる。そのような保存的な変化では、一般に、結果として生じるタンパク質の構造、及び機能の変化はより少なくなる。以下は、様々なアミノ酸グループ分けの例である：１）非極性Ｒ基があるアミノ酸：アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、トリプトファン、メチオニン；２）非荷電の極性Ｒ基があるアミノ酸：グリシン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン；３）荷電の極性Ｒ基があるアミノ酸（ｐＨ６．０で負に荷電）：アスパラギン酸、グルタミン酸；（４）塩基性アミノ酸（ｐＨ６．０で正に荷電）：リジン、アルギニン、ヒスチジン（ｐＨ６．０）。他のグループ分けとしては、フェニル基があるアミノ酸：フェニルアラニン、トリプトファン、及びチロシンであってよい。
［００６６］ 本明細書で考察される、免疫グロブリンにおけるアミノ酸の位置に関する、番号付けは、ＥＵインデックス、又はＥＵ番号付けスキームに従う（本明細書中にその全体が援用される、Kabat et al. 1991 Sequences of
Proteins of Immunological Interest, 5th Ed., United States Public Health
Service, National Institutes of Health, Bethesda）。当該ＥＵインデックス、又はＫａｂａｔの文献に記載されるＥＵインデックス、又はＥＵ番号付けスキームは、ＥＵ抗体の番号付けをいう（Edelman et al. 1969 Proc Natl Acad
Sci USA 63:78-85）。
Proteins of Immunological Interest, 5th Ed., United States Public Health
Service, National Institutes of Health, Bethesda）。当該ＥＵインデックス、又はＫａｂａｔの文献に記載されるＥＵインデックス、又はＥＵ番号付けスキームは、ＥＵ抗体の番号付けをいう（Edelman et al. 1969 Proc Natl Acad
Sci USA 63:78-85）。
［００６７］ 様々な膜貫通ドメインを用いることができる。表２には、適当な膜貫通ドメインの例が収録される。スペーサードメインが存在する場合、膜貫通ドメインは、当該スペーサードメインのカルボキシ末端に位置する。
表２： 膜貫通ドメインの例
表３： ＣＤ３ゼータドメインと共刺激ドメインの例
がんの腫瘍溶解性免疫療法用の新規で強力なキメラポックスウイルス
［００６９］ 以下に、組換えウイルスに感染した細胞で、ヒトＣＤ１９を発現する、組換えキメラポックスウイルスの調製に用いうる、腫瘍溶解性アンカーである、キメラポックスウイルスを記載する。当該組換えウイルスはがん細胞に感染し、ＣＤ１９を発現させるからである。当該感染細胞は、ＣＤ１９指向性のＣＡＲにより、標的化されることができる。
［００６９］ 以下に、組換えウイルスに感染した細胞で、ヒトＣＤ１９を発現する、組換えキメラポックスウイルスの調製に用いうる、腫瘍溶解性アンカーである、キメラポックスウイルスを記載する。当該組換えウイルスはがん細胞に感染し、ＣＤ１９を発現させるからである。当該感染細胞は、ＣＤ１９指向性のＣＡＲにより、標的化されることができる。
［００７０］ 組換えポックスウイルスを作製するのに用いられる、キメラポックスウイルスでは、異なるウイルス種由来の好ましい特徴が組み合わせられうるため、個々の野生型ウイルスよりも優れる。オルソポックスウイルスとパラポックスウイルスは抗原的に異なり、本研究で生成された、強力なキメラオルソポックスウイルスと強力なキメラパラポックスウイルスは、同じ治療計画で組み合わせると、最大の治療効果を達成しうる。２０１７年８月９日に出願された国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１７／４６１６３号で詳細に説明されるように、分離株＃３３（配列番号１）、及び＃１８９（配列番号２）を含むキメラポックスウイルスを、キメラオルソポックスウイルス、及びキメラパラポックスウイルスのプールから生成した。分離株＃３３、及び＃１８９を含む、いくつかのキメラオルソポックスウイルス、及びパラポックスウイルス分離株の殺傷能は、各親野生型ウイルスと比較して、ＮＣＩ６０がん細胞株のパネルでは、優れていた。
［００７１］ キメラウイルスプールの生成及び各キメラウイルスの単離
牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、ワクシニアウイルスＩＨＤ株、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株、ＣＬ、Lederle-Chorioallantoic株、及びワクシニアウイルスＡＳ株を、各ウイルスの感染多重度（ＭＯＩ）を０．０１で、ＣＶ－１細胞に共感染させて、キメラオルソポックスウイルスのプールを作製した。ＭＤＢＫ細胞を羊痘ウイルスＮＺ２株、及び偽牛痘ウイルスＴＪＳ株に、ＭＯＩを０．１で共感染させて、キメラパラポックスウイルスのプールを作製した。本出願人のパイロット実験では、ＣＶ－１細胞は、本実験で用いた全てのオルソポックスウイルスに感受性であり、羊痘ウイルス、及び偽牛痘ウイルスは、ともにＭＤＢＫ細胞に感染して、プラークを形成することを示す。
牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、ワクシニアウイルスＩＨＤ株、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株、ＣＬ、Lederle-Chorioallantoic株、及びワクシニアウイルスＡＳ株を、各ウイルスの感染多重度（ＭＯＩ）を０．０１で、ＣＶ－１細胞に共感染させて、キメラオルソポックスウイルスのプールを作製した。ＭＤＢＫ細胞を羊痘ウイルスＮＺ２株、及び偽牛痘ウイルスＴＪＳ株に、ＭＯＩを０．１で共感染させて、キメラパラポックスウイルスのプールを作製した。本出願人のパイロット実験では、ＣＶ－１細胞は、本実験で用いた全てのオルソポックスウイルスに感受性であり、羊痘ウイルス、及び偽牛痘ウイルスは、ともにＭＤＢＫ細胞に感染して、プラークを形成することを示す。
［００７２］ キメラオルソポックスウイルスプールに感染したＣＶ－１細胞、及びキメラパラポックスウイルスプールに感染したＭＤＢＫ細胞から、１００のキメラオルソポックスウイルスプラーク、及び１００のキメラパラポックスウイルスプラークを、各々採取した。これらの２００のプラークをさらに２回、各細胞でプラーク精製し、クローン精製した個々のキメラウイルス分離株を２００株得た。ウイルス分離株♯１４－１１３は、キメラオルソポックスウイルス分離株であり、ウイルス分離株♯１１４－２１３は、キメラパラポックスウイルス分離株である。
［００７３］ ＮＣＩ－６０細胞株におけるハイスループットスクリーニングによる新規の強力なキメラポックスウイルス分離株の同定
キメラオルソポックスウイルス２００株、及びキメラパラポックスウイルス２００株、並びに親ウイルス株１１株、及び対照腫瘍溶解性ウイルス２株（ＧＬＶ－１ｈ６８、及びＯｎｃｏＶＥＸ ＧＦＰ）の腫瘍細胞殺傷活性を評価し、ＮＣＩ－６０細胞株のパネルで比較した（表４）。ＧＬＶ－１ｈ６８は、最もよく研究されている腫瘍溶解性ワクシニアウイルスの１つであり、現在臨床開発中である。ＯｎｃｏＶＥＸ ＧＦＰは、腫瘍溶解性単純ヘルペスウイルス１型であり、かつ、ＦＤＡが承認した最初の腫瘍溶解性ウイルスである、Ｔ－ＶＥＣと骨格が同じである。各細胞株を、各ウイルスにＭＯＩを０．０１で感染させた。感染９６時間後の細胞生存率を、ＭＴＳアッセイを用いて、測定した。このハイスループットスクリーニング実験で用いたウイルス量（ＭＯＩ ０．０１）を意図的に低くして、強力な新規ウイルス分離株が目立つように最適化して、接着細胞株（ＮＣＩ－６０パネルの細胞株の大部分は接着細胞である）における細胞殺傷能を比較した。しかしながら、懸濁細胞株で、有意かつ一貫した細胞殺傷能を観察するには、このウイルス量は低すぎた。そこで、６つの白血病細胞株からの結果は、ウイルス比較分析には含めなかった。
キメラオルソポックスウイルス２００株、及びキメラパラポックスウイルス２００株、並びに親ウイルス株１１株、及び対照腫瘍溶解性ウイルス２株（ＧＬＶ－１ｈ６８、及びＯｎｃｏＶＥＸ ＧＦＰ）の腫瘍細胞殺傷活性を評価し、ＮＣＩ－６０細胞株のパネルで比較した（表４）。ＧＬＶ－１ｈ６８は、最もよく研究されている腫瘍溶解性ワクシニアウイルスの１つであり、現在臨床開発中である。ＯｎｃｏＶＥＸ ＧＦＰは、腫瘍溶解性単純ヘルペスウイルス１型であり、かつ、ＦＤＡが承認した最初の腫瘍溶解性ウイルスである、Ｔ－ＶＥＣと骨格が同じである。各細胞株を、各ウイルスにＭＯＩを０．０１で感染させた。感染９６時間後の細胞生存率を、ＭＴＳアッセイを用いて、測定した。このハイスループットスクリーニング実験で用いたウイルス量（ＭＯＩ ０．０１）を意図的に低くして、強力な新規ウイルス分離株が目立つように最適化して、接着細胞株（ＮＣＩ－６０パネルの細胞株の大部分は接着細胞である）における細胞殺傷能を比較した。しかしながら、懸濁細胞株で、有意かつ一貫した細胞殺傷能を観察するには、このウイルス量は低すぎた。そこで、６つの白血病細胞株からの結果は、ウイルス比較分析には含めなかった。
［００７４］ 表４．ＮＣＩ－６０細胞株のカタログ
［００７６］ 新規ポックスウイルス分離株＃３３、及び＃１８９のゲノムＤＮＡを、精製ビリオンから単離し、１０００ｘを上回る範囲で、Ｉｌｌｕｍｉｎａ Ｈｉｓｅｑ ２５００を用いた次世代シークエンシングを行った。ギャップをＰＣＲ増幅し、サンガー配列決定により配列決定した。＃３３ゲノムの１８９，４１５塩基対（ｂｐｓ）を、完全に配列決定し、１８９のゲノムで、１３８，２０３ｂｐｓが得られた。ＧｅｎＢａｎｋに対する初期ＢＬＡＳＴ（Intitial BLAST）では、＃３３、及び＃１８９のゲノム配列がともに、ＧｅｎＢａｎｋのどのゲノム配列とも同一ではないことが示された。＃３３は、オルソポックスウイルス株のうち、ワクシニアウイルス株に最も近い。＃１８９は、親パラポックスウイルスの１つである羊痘ウイルスＮＺ２株に、極めて近い。羊痘ウイルスＮＺ２株で同定されたすべてのＯＲＦのヌクレオチド配列は、＃１８９のものと同一である。羊痘ウイルスＮＺ２株と比較すると、＃１８９のゲノムの６７５５位に１の「Ｇ」が挿入されている。逆方向末端反復領域には、１の反復配列エレメントのコピーが欠失し、＃１８９ゲノムに１の他の反復配列エレメントのコピーが挿入されている。全体として、＃３３及び＃１８９はいずれも、新規で固有なポックスウイルス分離株である。
［００７７］ 全てのがん細胞株を、ＲＰＭＩ－１６４０（Mediatech、Manassas、VA）で増殖させた。アフリカミドリザル腎線維芽細胞（ＣＶ－１）、及び牛腎上皮細胞（ＭＤＢＫ）をAmerican Type Culture Collection（ＡＴＣＣ； Rockville,MD,USA）から入手し、ＤＭＥＭ（Mediatech,Manassas,VA）で増殖させた。全ての培地に、１０％ＦＢＳ（Mediatech,Manassas,VA）、及び１％ペニシリン－ストレプトマイシン溶液（Mediatech,Manassas,VA）を添加した。細胞を５％ＣＣ下、３７℃で培養した。
［００７８］ ウイルス：牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、ワクシニアウイルスＷＲ株、ワクシニアウイルスＩＨＤ株、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株、ＣＬ、Lederle-Chorioallantoic株、及びワクシニアウイルスＡＳ株、又は羊痘ウイルスＮＺ２株、偽牛痘ウイルスＴＪＳ株は、ＡＴＣＣから購入した。すべてのオルソポックスウイルス株は、ＣＶ－１細胞で増殖させ、滴定した。パラポックスウイルス株を、ＭＤＢＫ細胞で、増殖させ、滴定した。
［００７９］ キメラオルソポックスウイルス及びキメラパラポックスウイルスのプールの生成、ならびに個々のクローン性キメラウイルス分離株の分離：牛痘ウイルスＢｒｉｇｈｔｏｎ株、アライグマポックスウイルスＨｅｒｍａｎ株、ウサギポックスウイルスＵｔｒｅｃｈｔ株、ワクシニアウイルスＷＲ株、ワクシニアウイルスＩＨＤ株、Ｅｌｓｔｒｅｅ株、ＣＬ株、Lederle-Chorioallantoic株、及びワクシニアウイルスＡＳ株を、ウイルス当たり０．０１の感染多重度（ＭＯＩ）で、ＣＶ－１細胞に共感染させて、キメラオルソポックスウイルスのプールを、生成した。ＭＤＢＫ細胞を、羊痘ウイルスＮＺ２株、及び偽牛痘ウイルスＴＪＳ株にＭＯＩを０．１で共感染させて、キメラパラポックスウイルスのプールを作製した。感染３日後に感染細胞を採取した。初期キメラオルソポックスウイルスプールを、さらに、ＣＶ－１細胞で、０．１のＭＯＩで３回、継代し、初期キメラパラポックスウイルスプールを、さらに、ＭＤＢＫ細胞で、０．１のＭＯＩで３回、継代した。３回さらに継代した。１００のキメラオルソポックスウイルスプラークを、最終キメラオルソポックスウイルスプールに感染したＣＶ－１細胞から採取し、１００のキメラパラポックスウイルスプラークを、最終キメラパラポックスウイルスプールに感染したＭＤＢＫ細胞から、採取した。当該２００のプラークをさらに２回、各細胞でプラーク精製し、クローン精製したキメラウイルス分離株２００株を各々得た。
［００８０］ ＮＣＩ－６０がん細胞株、並びにＰＡＮＣ１、ＭＩＡ ＰａＣａ－２、ＢｘＰＣ３、ＦＧ、Ｃａｐａｎ－２、及びＳｕ．８６．８６を含む膵がん細胞株のパネルを、滅菌条件下、ｅｐＭｏｔｉｏｎ５０７５液体ハンドラー（Eppendorf）を用いて、９６穴プレート（固形腫瘍細胞株は、３０００細胞／穴、白血病細胞株は、５０００細胞／穴）に分注し、５％（ｖ／ｖ）ＣＯ２下、３７℃で一晩インキュベートした。その後、細胞を、ＭＯＩを０．０１で、キメラオルソポックスウイルス及びキメラパラポックスウイルス分離株２００株、並びに親ウイルス１１株、及び対照腫瘍溶解性ウイルスＧＬＶ－１ｈ６８、及びＯｎｃｏＶＥＸ ＧＦＰ２株に共感染させた。ＭＴＳアッセイ（Promega）を用いて、感染９６時間後の細胞生存率を測定した。自動化ＢＭＧ ＰＨＥＲＡＳＴＡプレートリーダー（BMG Labtech）を用いて、４９０ｎｍでの吸光度を、測定した。各実験を二重に行った。Ｍｏｃｋ感染細胞の細胞生存率を１００％とした。
［００８１］ ＭＫ －４５、ＯＣＵＭ－２Ｍ、及びＫＡＴＯ－３の各細胞を、一穴当たり３，０００細胞の濃度で９６穴プレートに播種し、５％（ｖ／ｖ）ＣＯ２下、３７℃で一晩インキュベートした。細胞を、ＭＯＩを０．０１、０．１、及び１で、＃３３、＃１８９、ＧＬＶ－１ｈ６８、及びＯｎｃｏＶＥＸ ＧＦＰに感染させた。ＭＴＳアッセイを用いて、３７℃、５％（ｖ／ｖ）ＣＯ２下で、細胞生存率を、４日間毎日モニターした。
［００８２］ WizardゲノムDNA精製キット（Promega）を用いて、精製ビリオンから＃３３、及び＃１８９のゲノムＤＮＡを抽出し、超音波処理を行って、断片化した。ライブラリーの調製には、ＫＡＰＡ ＬＴＰライブラリー調製キットを用いた。配列決定は、Illumina Hiseq 2500を用いて行った。
膵がん細胞株におけるハイスループットスクリーニング
［００８３］ ＮＣＩ－６０がん細胞株は、８つの異なる臓器由来の固形がんしか含まない（表４参照）。ＮＣＩ－６０がん細胞株から得られた結果が、他の臓器の固形がんで再現されることを検討するため、６種類の膵がん細胞株（ＢｘＰＣ３、ＦＧ、ＭＩＡ ＰａＣａ－２、Ｃａｐａｎ－２、ＰＡＮＣ－１、及びＳＵ．８６．８６）に、ＮＣＩ－６０がん細胞株のハイスループットスクリーニングで用いたウイルスと同じウイルスを、ＭＯＩを０．１で、感染させた。ＭＴＳアッセイを用いて、感染９６時間後の細胞生存率を再度測定した。全てのキメラオルソポックスウイルス分離株のうち、キメラオルソポックスウイルス分離株＃１７、及び＃３３の細胞殺傷能が最良であり、全てのキメラパラポックスウイルス分離株のうち、キメラパラポックスウイルス分離株＃１８９の細胞殺傷能が最良であった。表５、図３、及び図４に示すように、それらは、各親ウイルス株、並びに対照ウイルスＧＬＶ－１ｈ６８、及びＯｎｃｏＶＥＸ ＧＦＰの膵臓がん細胞株の殺傷能よりも、すべて良好であった。すなわち、ＮＣＩ－６０がん細胞株で得られた結果の、膵臓がん細胞株のパネルにおける再現性は、極めて良好であった。
表５：膵がん細胞の生存
［００８３］ ＮＣＩ－６０がん細胞株は、８つの異なる臓器由来の固形がんしか含まない（表４参照）。ＮＣＩ－６０がん細胞株から得られた結果が、他の臓器の固形がんで再現されることを検討するため、６種類の膵がん細胞株（ＢｘＰＣ３、ＦＧ、ＭＩＡ ＰａＣａ－２、Ｃａｐａｎ－２、ＰＡＮＣ－１、及びＳＵ．８６．８６）に、ＮＣＩ－６０がん細胞株のハイスループットスクリーニングで用いたウイルスと同じウイルスを、ＭＯＩを０．１で、感染させた。ＭＴＳアッセイを用いて、感染９６時間後の細胞生存率を再度測定した。全てのキメラオルソポックスウイルス分離株のうち、キメラオルソポックスウイルス分離株＃１７、及び＃３３の細胞殺傷能が最良であり、全てのキメラパラポックスウイルス分離株のうち、キメラパラポックスウイルス分離株＃１８９の細胞殺傷能が最良であった。表５、図３、及び図４に示すように、それらは、各親ウイルス株、並びに対照ウイルスＧＬＶ－１ｈ６８、及びＯｎｃｏＶＥＸ ＧＦＰの膵臓がん細胞株の殺傷能よりも、すべて良好であった。すなわち、ＮＣＩ－６０がん細胞株で得られた結果の、膵臓がん細胞株のパネルにおける再現性は、極めて良好であった。
表５：膵がん細胞の生存
新規キメラオルソポックスウイルス分離株＃３３及びキメラパラポックスウイルス分離株＃１８９は、胃がん細胞株において強力な細胞殺傷能を呈する
［００８４］ ＮＣＩ－６０がん細胞株、及び膵がん細胞株パネルのハイスループットスクリーニングの結果に基づき、新たなキメラオルソポックスウイルス分離株＃３３、及びキメラパラポックスウイルス分離株＃１８９を選択して、さらなる特徴付けに供した。分離株＃３３、及び＃１８９の腫瘍細胞殺傷活性を、３つの胃がん細胞株でさらに検討した。ＭＫＮ－４５、ＯＣＵＭ－２Ｍ、及びＫＡＴＯ－３細胞を、ＭＯＩを０．０１、０．１、及び１で、＃３３、＃１８９、ＧＬＶ－１ｈ６８、及びＯｎｃｏＶＥＸ ＧＦＰで感染させた。ＭＴＳアッセイを用いて、細胞生存率を、４日間毎日モニターした。ＭＫＮ－４５、及びＯＣＵＭ－２Ｍ細胞株は、＃３３株に対して最も感受性が高く、ＯｎｃｏＶＥＸ ＧＦＰに対する感受性は中程度であり、ＧＬＶ－１ｈ６８に対する感受性は最も低かった。一方、ＫＡＴＯ－３は、０．０１の低ＭＯＩで、ＯｎｃｏＶＥＸ ＧＦＰに対して最も感受性が高かったが、＃３３、＃１８９、及びＯｎｃｏＶＥＸ ＧＦＰは、高ＭＯＩ（０．１、及び１）では、ＫＡＴＯ－３細胞を等しく殺傷した。ＫＡＴＯ‐３細胞は、ＧＬＶ－１ｈ６８に対して最も感受性が低かった。全体として、＃３３は、最も効率的に胃がん細胞株を殺傷させた一方で、ＧＬＶ－１ｈ６８の胃がん細胞株の殺傷能は、最低であった（図５Ａ～Ｃ）。
［００８４］ ＮＣＩ－６０がん細胞株、及び膵がん細胞株パネルのハイスループットスクリーニングの結果に基づき、新たなキメラオルソポックスウイルス分離株＃３３、及びキメラパラポックスウイルス分離株＃１８９を選択して、さらなる特徴付けに供した。分離株＃３３、及び＃１８９の腫瘍細胞殺傷活性を、３つの胃がん細胞株でさらに検討した。ＭＫＮ－４５、ＯＣＵＭ－２Ｍ、及びＫＡＴＯ－３細胞を、ＭＯＩを０．０１、０．１、及び１で、＃３３、＃１８９、ＧＬＶ－１ｈ６８、及びＯｎｃｏＶＥＸ ＧＦＰで感染させた。ＭＴＳアッセイを用いて、細胞生存率を、４日間毎日モニターした。ＭＫＮ－４５、及びＯＣＵＭ－２Ｍ細胞株は、＃３３株に対して最も感受性が高く、ＯｎｃｏＶＥＸ ＧＦＰに対する感受性は中程度であり、ＧＬＶ－１ｈ６８に対する感受性は最も低かった。一方、ＫＡＴＯ－３は、０．０１の低ＭＯＩで、ＯｎｃｏＶＥＸ ＧＦＰに対して最も感受性が高かったが、＃３３、＃１８９、及びＯｎｃｏＶＥＸ ＧＦＰは、高ＭＯＩ（０．１、及び１）では、ＫＡＴＯ－３細胞を等しく殺傷した。ＫＡＴＯ‐３細胞は、ＧＬＶ－１ｈ６８に対して最も感受性が低かった。全体として、＃３３は、最も効率的に胃がん細胞株を殺傷させた一方で、ＧＬＶ－１ｈ６８の胃がん細胞株の殺傷能は、最低であった（図５Ａ～Ｃ）。
［００８５］ 表６（略語として、ＩＭＶ：細胞内成熟ウイルス；ＩＥＶ：細胞内エンベロープウイルス；ＥＥＶ：細胞外エンベロープウイルス）に示されるように、すべての配列決定がなされたＣｈＰＶに存在する９０個の遺伝子は、公知の機能と共にリストアップされている。遺伝子は、ＶＡＣＶ－ＣＯＰに対応する遺伝子にちなんで命名される。星印＊は、２つのＥｎＰＶにも存在する遺伝子を示す。表３は、その全体が全ての目的のために参照により本明細書に組み込まれるＧｕｂｓｅｒら（Gubser, C, Hue, S., Kellam, P., and Smith, G.L.(2004). Poxvirus genomes: a phylogenetic analysis. J Gen Virol 85, 105-117）から編集される。
［００８６］ 表６．コードポックスウイルスの最小遺伝子相補体（Complement）
組換えキメラポックスウイルスの構築
外来遺伝子発現カセットを＃３３キメラポックスウイルスゲノムへ挿入するシャトルベクターの構築
［００８７］ チミジンキナーゼ（ＴＫ）シャトルベクターを構築するために、Q5 High-Fidelity 2X Master Mix（New England Biolabs,Ipswich,ＭＡ）、及び以下のプライマー：
外来遺伝子発現カセットを＃３３キメラポックスウイルスゲノムへ挿入するシャトルベクターの構築
［００８７］ チミジンキナーゼ（ＴＫ）シャトルベクターを構築するために、Q5 High-Fidelity 2X Master Mix（New England Biolabs,Ipswich,ＭＡ）、及び以下のプライマー：
を用いて、＃３３ゲノムＤＮＡ由来の＃３３キメラポックスウイルスの７ＸＴ遺伝子の左右の隣接配列を、ＰＣＲで増幅した。２つの断片を、オーバーラッピング伸長による遺伝子スプライシング法を用いて、連結した。得られた断片をＮｄｅｌ、及びＥｃｏＲＩで消化し、同一切断型プラスミドｐＧＰＴにクローニングして、ｐ３３ＮＣ－ＴＫを得た。シャトルベクター中のＴＫの隣接配列を、配列決定により確認した。ｐ３３ＮＣ－ＴＫは、Ｓａｃｌ、Ｓａｉｌ、ＢａｍＨＩ、Ｎｈｅｌ、及びＮｏｔｌで分離したTKの左右の隣接配列、並びに一過性優性選択マーカーとしての、ワクシニアウイルス（ＶＡＣＶ）初期プロモーターｐ７．５Ｅにより駆動される大腸菌グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ｇｐｔ）遺伝子を含む。
［００８８］ Ｆ１４．５Ｌシャトルベクターも同様に、構築した。＃３３キメラポックスウイルスのＦ１４．５Ｌ遺伝子の左右の隣接配列を、Q5 High-Fidelity 2X Master Mix（New England Biolabs,Ipswich,ＭＡ）、及び以下のプライマー：
を用いて、＃３３ゲノムＤＮＡからＰＣＲで増幅した。２つの断片を、オーバーラッピング伸長による遺伝子スプライシング法を用いて、連結した。得られた断片を、Ｎｄｅｌ、及びＥｃｏＲＩで消化し、同一切断型プラスミドｐＧＰＴにクローニングして、ｐ３３ＮＣ－Ｆ１４．５Ｌを得た。シャトルベクター中のＦ１４．５Ｌの隣接配列を、配列決定により確認した。ｐ３３ＮＣ－Ｆ１４．５Ｌは、Ｈｉｎｄｌｌ、Ｓａｃｌ、Ｘｈｏｌ、ＢａｍＨＩ、Ｎｈｅｌ、及びＮｏｔｌで分離したＦ１４．５Ｌの左右の隣接配列、並びに一過性優性選択マーカーとしての、ＶＡＣＶ初期プロモーターｐ７．５Ｅにより駆動される大腸菌ｇｐｔ遺伝子を含む。
ＣＤ１９ｔを発現する組換えキメラポックスウイルスは、ＣＤ１９を標的とするＣＡＲの標的を提供する
［００８９］ 以下の実験では、２つの乳がん細胞株、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８ｗｔ（トリプルネガティブ乳がん細胞株）、親株、及びシグナル伝達ドメイン（ＭＤＡ－ＭＢ－４６８－ＣＤ１９ｔ）欠損切断型ヒトＣＤ１９を発現するように改変されたＭＤＡ－ＭＢ－４６８の変異体を、用いた。図６に示すように、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８－ＣＤ１９ｔはＣＤ１９ｔを発現する。ＣＤ１９を標的とするＣＡＲを発現するように改変されたＴ細胞（以下により詳細に記載）も用いた。これらのＴ細胞によって発現されるＣＡＲは、図７に模式的に示されるが、ＣＤ１９を標的とするｓｃＦｖ、及びＩｇＧ４スペーサー、ＣＤ２８膜貫通ドメイン、ＣＤ２８共刺激ドメイン、及びＣＤ３ゼータを含む。このＣＡＲ、及び切断ＥＧＦＲをコードする配列を、レンチウイルスベクターに挿入し、この組換えベクターを用いて、ＰＢＭＣを形質導入した。切断型ＥＧＦＲは、ＣＡＲの発現のマーカーとして、用いることができる。図８に示すように、Mock形質転換ＰＢＭＣ、及びＣＤ１９ ＣＡＲを発現する組換えレンチウイルスで形質転換されたＰＢＭＣによる、ＥＧＦＲ発現を、切断型ＥＧＦＲと比較すると、当該形質転換細胞は、導入遺伝子を効果的に発現することが示される。
［００８９］ 以下の実験では、２つの乳がん細胞株、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８ｗｔ（トリプルネガティブ乳がん細胞株）、親株、及びシグナル伝達ドメイン（ＭＤＡ－ＭＢ－４６８－ＣＤ１９ｔ）欠損切断型ヒトＣＤ１９を発現するように改変されたＭＤＡ－ＭＢ－４６８の変異体を、用いた。図６に示すように、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８－ＣＤ１９ｔはＣＤ１９ｔを発現する。ＣＤ１９を標的とするＣＡＲを発現するように改変されたＴ細胞（以下により詳細に記載）も用いた。これらのＴ細胞によって発現されるＣＡＲは、図７に模式的に示されるが、ＣＤ１９を標的とするｓｃＦｖ、及びＩｇＧ４スペーサー、ＣＤ２８膜貫通ドメイン、ＣＤ２８共刺激ドメイン、及びＣＤ３ゼータを含む。このＣＡＲ、及び切断ＥＧＦＲをコードする配列を、レンチウイルスベクターに挿入し、この組換えベクターを用いて、ＰＢＭＣを形質導入した。切断型ＥＧＦＲは、ＣＡＲの発現のマーカーとして、用いることができる。図８に示すように、Mock形質転換ＰＢＭＣ、及びＣＤ１９ ＣＡＲを発現する組換えレンチウイルスで形質転換されたＰＢＭＣによる、ＥＧＦＲ発現を、切断型ＥＧＦＲと比較すると、当該形質転換細胞は、導入遺伝子を効果的に発現することが示される。
［００９０］ キメラポックスウイルス＃３３を、切断型ＣＤ１９組換え腫瘍溶解性ウイルス（３３－ＣＤ１９ｔ）を発現するように設計した。ＣＤ１９を発現しない、ＭＤＡ－ＭＢ－４８腫瘍細胞を、異なるＭＯＩで、組換え腫瘍溶解性ウイルス３３－ＣＤ１９ｔ、及び模擬Mock形質転換Ｔ細胞に曝露した。図９の上のパネルに示されるように、組換え腫瘍溶解性ウイルス３３－ＣＤ１９ｔのレベルが高まると、ＣＤ１９発現が高まり、細胞数が低下した。図９の下のパネルは、ＭＤＡ－ＭＢ－４８腫瘍細胞を、異なるＭＯＩで、組換え腫瘍溶解性ウイルス３３－ＣＤ１９ｔ、及びＣＤ１９標的化ＣＡＲを発現する、形質転換Ｔ細胞に曝露した場合の結果を示す。ＣＤ１９ｔを発現するＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞の数は、大幅に減少したことが明らかである。
［００９１］ 図１０は、長期殺傷アッセイにおける、ＩＬ－２（下段）、及びＩＦＮ－γ（上段）のレベルを測定した実験結果を示す。本実験では、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞を、組換え腫瘍溶解性ウイルス３３－ＣＤ１９ｔのみ；組換え腫瘍溶解性ウイルス３３ＣＤ１９ｔ、及びMock形質転換Ｔ細胞；又は、組換え腫瘍溶解性ウイルス３３－ＣＤ１９ｔ及びＣＤ１９標的ＣＡＲを発現する形質転換Ｔ細胞に曝露した。
［００９２］ 図１１は、細胞殺傷アッセイで得られた細胞培養物の一連の画像である。本実験では、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞を、Mock形質転換Ｔ細胞、又はＣＤ１９標的ＣＡＲを発現する形質転換Ｔ細胞の存在下で、ＭＯＩ＝１の組換え腫瘍溶解性ウイルス３３－ＣＤ１９ｔに、曝露した。当該画像の上部は、組換え腫瘍溶解性ウイルス３３－ＣＤ１９ｔの非存在下で培養されたＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞、又はＣＤ１９標的ＣＡＲを発現する形質転換されたＴ細胞のいずれかである。
［００９３］ 図１２は、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞、又はＭＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞を、組換え腫瘍溶解性ウイルス３３－ＣＤ１９ｔのみ（異なるＭＯＩで）；組換え腫瘍溶解性ウイルス３３－ＣＤ１９ｔ（異なるＭＯＩで）、及びMock形質転換Ｔ細胞；又は組換え腫瘍溶解性ウイルス３３－ＣＤ１９ｔ（異なるＭＯＩで）、及びＣＤ１９標的ＣＡＲを発現する形質転換Ｔ細胞、と共に培養した、長期細胞殺傷アッセイの結果を示す。腫瘍細胞殺傷、及びＣＤ１９ｔ発現を測定した。
［００９４］ 総じて、本実施例の実験から、１）組換え腫瘍溶解性ウイルス３３－ＣＤ１９ｔに曝露されたＭＤＡ－ＭＢ－４８細胞におけるＣＤ１９ｔ発現は、ＭＯＩが増えると、高まる；２）ＣＤ１９－ＣＡＲ Ｔ細胞の存在下で組換え腫瘍溶解性ウイルス３３－ＣＤ１９ｔに曝露されたＭＤＡ－ＭＢ－４８細胞のＴ細胞は、ＭＯＩが増えると、ＩＬ－２、及びＩＦＮ－γの産生レベルが高まる；及び、３）ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞は、組換え腫瘍溶解性ウイルス３３－ＣＤ１９１に曝露されたＭＤＡ－ＭＢ－４８細胞に効能がある、ことが示された。
ＣＤ１９ｔを発現する組換えキメラポックスウイルスを、ＣＤ１９ ＣＡＲと併用すると、ＴＮＢＣ異種移植モデルに効果を発揮する
［００９５］ 図１３に示すように、腫瘍溶解性ウイルスは、ＣＤ１９ｔを固形腫瘍に効果的に送達し、ｉｎ ｖｉｔｒｏでＣＤ１９－ＣＡＲ Ｔ細胞を活性化させることができる。図１３パネルＡは、ワクシニア腫瘍溶解性ウイルス［ＣＦ３３－（ＳＥ）ｈＣＤ１９ｔ］の概略図であり、Ｊ２Ｒ遺伝子座に、チミジンキナーゼ遺伝子を置換して、挿入された合成初期プロモーター（ＰＳＥ）の制御下での、切断型ヒトＣＤ１９（ＣＤ１９ｔ）の取り込みを示す。図１３パネルＢは、ＯＶ１９ｔを、ＭＯＩを０．０２５（左）、及びＭＯＩを１（中央）で、２４時間感染させたＭＤＡＭＢ－４６８細胞、又はレンチウイルスを形質導入してＣＤ１９ｔを安定発現させた細胞（右）の、免疫蛍光顕微鏡検査を示す。画像の倍率は１０ｘ、挿入画像の倍率は４０ｘである。図１３パネルＣは、ＭＯＩを増加させた、ＯＶ１９ｔ感染２４時間後のフローサイトメトリーで測定した、ＭＤＡ－ＭＢ４６８腫瘍細胞上のＣＤ１９ｔの細胞表面発現、及びワクシニアウイルスの細胞内発現を示す、ＦＡＣＳプロットのセットである。図１３パネルＤは、ＯＶ１９ｔを、示されたＭＯＩで共培養してから、２４、４８、及び７２時間後の、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８腫瘍細胞のＣＤ１９ｔ（左）、ワクシニア（中央）、及び生存率（右）の定量を示す。パネルＥは、Ｍｏｃｋ （非形質導入）、又はＣＤ１９－ＣＡＲ Ｔ細胞を、エフェクター：腫瘍（E:T）比率１：２で、ＯＶ１９ｔの示したＭＯＩでの処理の有無により、腫瘍細胞と共培養してから２４時間後の、ＣＤ２５（左）、及びＣＤ１３７（右）発現の定量を示す。
［００９５］ 図１３に示すように、腫瘍溶解性ウイルスは、ＣＤ１９ｔを固形腫瘍に効果的に送達し、ｉｎ ｖｉｔｒｏでＣＤ１９－ＣＡＲ Ｔ細胞を活性化させることができる。図１３パネルＡは、ワクシニア腫瘍溶解性ウイルス［ＣＦ３３－（ＳＥ）ｈＣＤ１９ｔ］の概略図であり、Ｊ２Ｒ遺伝子座に、チミジンキナーゼ遺伝子を置換して、挿入された合成初期プロモーター（ＰＳＥ）の制御下での、切断型ヒトＣＤ１９（ＣＤ１９ｔ）の取り込みを示す。図１３パネルＢは、ＯＶ１９ｔを、ＭＯＩを０．０２５（左）、及びＭＯＩを１（中央）で、２４時間感染させたＭＤＡＭＢ－４６８細胞、又はレンチウイルスを形質導入してＣＤ１９ｔを安定発現させた細胞（右）の、免疫蛍光顕微鏡検査を示す。画像の倍率は１０ｘ、挿入画像の倍率は４０ｘである。図１３パネルＣは、ＭＯＩを増加させた、ＯＶ１９ｔ感染２４時間後のフローサイトメトリーで測定した、ＭＤＡ－ＭＢ４６８腫瘍細胞上のＣＤ１９ｔの細胞表面発現、及びワクシニアウイルスの細胞内発現を示す、ＦＡＣＳプロットのセットである。図１３パネルＤは、ＯＶ１９ｔを、示されたＭＯＩで共培養してから、２４、４８、及び７２時間後の、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８腫瘍細胞のＣＤ１９ｔ（左）、ワクシニア（中央）、及び生存率（右）の定量を示す。パネルＥは、Ｍｏｃｋ （非形質導入）、又はＣＤ１９－ＣＡＲ Ｔ細胞を、エフェクター：腫瘍（E:T）比率１：２で、ＯＶ１９ｔの示したＭＯＩでの処理の有無により、腫瘍細胞と共培養してから２４時間後の、ＣＤ２５（左）、及びＣＤ１３７（右）発現の定量を示す。
［００９６］ 図１４に示されるように、ＯＶ１９ｔ腫瘍溶解性ウイルスは、腫瘍細胞におけるＣＤ１９ｔの発現を推進でき、これにより、ｉｎ ｖｉｔｒｏにおける、ＣＤ１９－ＣＡＲ Ｔ細胞の活性化、及び細胞毒性が再志向される。図１４パネルＡは、Ｅ：Ｔ比を１：１、ＯＶ１９ｔの示したＭＯＩでの処理の有無により、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８腫瘍細胞との共培養１６時間後の、CD8+CAR+T細胞における、細胞表面ＣＤ１０７ａ（左）、及び細胞内ＩＦＮｙ発現（右）を示す、代表的なフローサイトメトリー分析である。図１４パネルBは、ＯＶ１９ｔの示したＭＯＩでの処理の有無により、共培養２４、４８、及び７２時間後に収集した上清を、ＥＬＩＳＡで測定した、ＩＦＮｙ産生を示す。図１４パネルＣは、Ｍｏｃｋ、又はＣＤ１９－ＣＡＲ Ｔ細胞を、ＯＶ１９ｔの示したＭＯＩでの処理の有無により、ＭＤＡＭＢ－４６８腫瘍細胞との共培養２４、４８、又は７２時間後に比較する、フローサイトメトリーによって評価した、腫瘍殺傷アッセイを示す。図１４パネルＤは、パネルＣに記載された殺傷アッセイでの腫瘍細胞上のＣＤ１９ｔ発現を示し、パネルＤは、OV１９ｔを示したＭＯＩで処理した腫瘍細胞、及びＴ細胞の共培養で、収集した上清におけるウイルス力価を示す。
［００９７］ 図１５に示すように、ＯＶ１９ｔとＣＤ１９－ＣＡＲ Ｔ細胞との併用療法は、ＴＮＢＣ異種移植モデルで、効果が示された。図１５パネルＡは、マウスを皮下ＭＤＡ－ＭＢ－４６８腫瘍（５×１０６細胞）で生着させ、１匹当たり０、１０５、１０６、又は１０７プラーク形成単位（ｐｆｕ）で腫瘍内処理し、処理後３日目（左）、７日目（中央）、又は１０日目（右）に回収し、フローサイトメトリーにより、ＣＤ１９ｔ発現の定量化を行ったことを示す。（＋）は、予めレンチウイルスで形質導入してＣＤ１９１を安定発現させたＭＤＡ－ＭＢ－４６８腫瘍を示す。図１５パネルＢは、０日目に、皮下にＭＤＡ－ＭＢ４６８腫瘍（５ｘ１０６細胞）があるＮＳＧマウスを、３６日目に、ＯＶ１９ｔ（１０７ｐｆｕ）で処理した、腫瘍体積（ｍｍ３）を示す。４６日目、マウスを、Ｍｏｃｋ、又はＣＤ１９－ＣＡＲ Ｔ細胞（５ｘ１０６細胞）のいずれかで処理した。図１５パネルＣは、パネルＢに記載されたin vivo実験における、７３日目の平均腫瘍体積を示す。図１５パネルＤは、難治性固形腫瘍にＣＡＲ標的を導入するためにＯＶを利用する併用療法の概念を示す概略図である。
Claims (14)
- 機能的シグナル伝達ドメインが欠損した、切断型ヒトＣＤ１９をコードするヌクレオチド配列を含む、組換え腫瘍溶解性ウイルスであって、前記切断型ヒトＣＤ１９をコードするヌクレオチド配列が、プロモーターに作動可能に連結され、かつ、ここで、前記組換え腫瘍溶解性ウイルスは、配列番号１又は配列番号２と少なくとも９０％同一であるヌクレオチド配列を含むがチミジンキナーゼをコードする配列は欠損している、組換え腫瘍溶解性ウイルス。
- 配列番号１又は配列番号２と少なくとも９５％同一であるヌクレオチド配列を含むがチミジンキナーゼをコードする配列は欠損している、請求項１に記載の、組換え腫瘍溶解性ウイルス。
- 配列番号１又は配列番号２と少なくとも９８％同一であるヌクレオチド配列を含むがチミジンキナーゼをコードする配列は欠損している、請求項１に記載の、組換え腫瘍溶解性ウイルス。
- ウイルスがキメラポックスウイルスであり、前記キメラポックスウイルスが、牛痘ウイルス（ｃｏｗｐｏｘ ｖｉｒｕｓ）Ｂｒｉｇｈｔｏｎ株、アライグマポックスウイルス（ｒａｃｃｏｏｎｐｏｘ ｖｉｒｕｓ）Ｈｅｒｍａｎ株、ウサギポックスウイルス（ｒａｂｂｉｔｐｏｘ ｖｉｒｕｓ）Ｕｔｒｅｃｈｔ株、ワクシニアウイルスＷＲ株、ワクシニアウイルスＩＨＤ株、ワクシニアウイルスＥｌｓｔｒｅｅ株、ワクシニアウイルスＣＬ株、ワクシニアウイルスＬｅｄｅｒｌｅ－Ｃｈｏｒｉｏａｌｌａｎｔｏｉｃ株、ワクシニアウイルスＡＳ株、羊痘ウイルス（ｏｒｆ ｖｉｒｕｓ）ＮＺ２株、及び偽牛痘ウイルス（ｐｓｅｕｄｏｃｏｗｐｏｘ ｖｉｒｕｓ）ＴＪＳ株からなる群から選択される、少なくとも２つのポックスウイルス株の、少なくとも１００個の連続したヌクレオチドを含む、請求項１に記載の、組換え腫瘍溶解性ウイルス。
- プロモーターが、ウイルス初期プロモーターである、請求項１に記載の、組換え腫瘍溶解性ウイルス。
- プロモーターがポックスウイルス初期プロモーターである、請求項１に記載の、組換え腫瘍溶解性ウイルス。
- 機能的シグナル伝達ドメインが欠損した、切断型ヒトＣＤ１９は、以下の：
MPPPRLLFFLLFLTPMEVRPEEPLVVKVEEGDNAVLQCLKGTSDGPTQQLTWSRESPLKPFLKLSLGLPGLGIHMRPLAIWLFIFNVSQQMGGFYLCQPGPPSEKAWQPGWTVNVEGSGELFRWNVSDLGGLGCGLKNRSSEGPSSPSGKLMSPKLYVWAKDRPEIWEGEPPCVPPRDSLNQSLSQDLTMAPGSTLWLSCGVPPDSVSRGPLSWTHVHPKGPKSLLSLELKDDRPARDMWVMETGLLLPRATAQDAGKYYCHRGNLTMSFHLEITARPVLWHWLLRTGGWKVSAVTLAYLIFCLCSLVGILHLQRALVLRRKR
で表されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の、組換え腫瘍溶解性ウイルス。 - がん患者を治療するための請求項１～７のいずれか一項に記載された組換え腫瘍溶解性ウイルスを含む医薬組成物であって、ここで、同時に、又はその後、ヒトＣＤ１９を標的とする、キメラ抗原レセプター（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞集団を患者に投与するための、医薬組成物。
- Ｔ細胞集団が、ＣＡＲをコードするレンチウイルスベクターで形質導入された、Ｔ細胞を含む、請求項８に記載の、医薬組成物。
- Ｔ細胞集団が、ＣＡＲをコードするＲＮＡ分子で形質転換された、Ｔ細胞を含む、請求項９に記載の、医薬組成物。
- Ｔ細胞集団が、組換え腫瘍溶解性ウイルスの投与後、１～２０日、投与される、請求項９に記載の、医薬組成物。
- Ｔ細胞集団が、組換え腫瘍溶解性ウイルスの投与後、５～１００日、投与される、請求項９に記載の、医薬組成物。
- がんが、固形腫瘍である、請求項８に記載の、医薬組成物。
- 固形腫瘍が、卵巣がん、又は膵がんである、請求項１３に記載の、医薬組成物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2023198483A JP2024052737A (ja) | 2017-08-11 | 2023-11-22 | Ｃａｒ ｔ細胞標的を発現する腫瘍溶解性ウイルス、及びその使用 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201762544707P | 2017-08-11 | 2017-08-11 | |
| US62/544,707 | 2017-08-11 | ||
| PCT/US2018/046313 WO2019033030A1 (en) | 2017-08-11 | 2018-08-10 | ONCOLYTIC VIRUS EXPRESSING A CAR-T CELL TARGET AND USES THEREOF |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2023198483A Division JP2024052737A (ja) | 2017-08-11 | 2023-11-22 | Ｃａｒ ｔ細胞標的を発現する腫瘍溶解性ウイルス、及びその使用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2020530303A JP2020530303A (ja) | 2020-10-22 |
| JP7391831B2 true JP7391831B2 (ja) | 2023-12-05 |
Family
ID=63405452
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2020507619A Active JP7391831B2 (ja) | 2017-08-11 | 2018-08-10 | Ｃａｒ ｔ細胞標的を発現する腫瘍溶解性ウイルス、及びその使用 |
| JP2023198483A Pending JP2024052737A (ja) | 2017-08-11 | 2023-11-22 | Ｃａｒ ｔ細胞標的を発現する腫瘍溶解性ウイルス、及びその使用 |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2023198483A Pending JP2024052737A (ja) | 2017-08-11 | 2023-11-22 | Ｃａｒ ｔ細胞標的を発現する腫瘍溶解性ウイルス、及びその使用 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20200215132A1 (ja) |
| EP (1) | EP3664841A1 (ja) |
| JP (2) | JP7391831B2 (ja) |
| CN (1) | CN111163803A (ja) |
| WO (1) | WO2019033030A1 (ja) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20230027475A1 (en) * | 2019-09-13 | 2023-01-26 | adMare Therapeutics Society | Anti-oncolytic virus antigen antibodies and methods of using same |
| US20210077554A1 (en) * | 2019-09-13 | 2021-03-18 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Methods of Neoplasm Treatment Utilizing Complementary Oncolytic Viruses and CAR T-Cells |
| US11110165B2 (en) | 2019-10-10 | 2021-09-07 | Ricardo Rosales Ledezma | Therapeutic vaccine for the treatment of papillomavirus lesions |
| EP4093416A1 (en) * | 2020-01-21 | 2022-11-30 | Ansun Biopharma, Inc. | Delivery of sialidase to cancer cells, immune cells and the tumor microenvironment |
| CN112143711B (zh) * | 2020-09-29 | 2021-07-23 | 杭州荣谷生物科技有限公司 | 重组痘瘤病毒、药物组合物及其构建方法和应用 |
| WO2022215762A1 (ko) * | 2021-04-05 | 2022-10-13 | 주식회사 바이오녹스 | 바이러스 벡터 유래 항암요법 표적 단백질 및 이에 특이적으로 결합하는 결합 분자 또는 이의 단편 |
| CA3216079A1 (en) * | 2021-04-05 | 2022-10-13 | Bionoxx Inc. | Chimeric antigen receptor targeting oncolytic virus-derived protein, immunocyte expressing same, and uses of both |
| WO2024038175A1 (en) * | 2022-08-18 | 2024-02-22 | Transgene | Chimeric poxviruses |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016009017A1 (en) | 2014-07-16 | 2016-01-21 | Institut Gustave-Roussy | Combination of oncolytic virus with immune checkpoint modulators |
| WO2017075440A1 (en) | 2015-10-30 | 2017-05-04 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Targeted cancer therapy |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1334188B1 (en) | 2000-11-07 | 2006-08-30 | City of Hope | Cd19-specific redirected immune cells |
| DK2212423T3 (en) * | 2007-11-19 | 2015-03-16 | Transgene Sa | oncolytic poxvirus vectors |
| EP3587446A1 (en) * | 2014-09-19 | 2020-01-01 | City of Hope | Costimulatory chimeric antigen receptor t cells targeting il13 r alpha 2 |
| MA44909A (fr) * | 2015-09-15 | 2018-07-25 | Acerta Pharma Bv | Association thérapeutique d'un inhibiteur du cd19 et d'un inhibiteur de la btk |
-
2018
- 2018-08-10 EP EP18760190.1A patent/EP3664841A1/en active Pending
- 2018-08-10 CN CN201880064280.9A patent/CN111163803A/zh active Pending
- 2018-08-10 US US16/637,909 patent/US20200215132A1/en active Pending
- 2018-08-10 JP JP2020507619A patent/JP7391831B2/ja active Active
- 2018-08-10 WO PCT/US2018/046313 patent/WO2019033030A1/en unknown
-
2023
- 2023-11-22 JP JP2023198483A patent/JP2024052737A/ja active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016009017A1 (en) | 2014-07-16 | 2016-01-21 | Institut Gustave-Roussy | Combination of oncolytic virus with immune checkpoint modulators |
| WO2017075440A1 (en) | 2015-10-30 | 2017-05-04 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Targeted cancer therapy |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US20200215132A1 (en) | 2020-07-09 |
| EP3664841A1 (en) | 2020-06-17 |
| WO2019033030A1 (en) | 2019-02-14 |
| JP2020530303A (ja) | 2020-10-22 |
| CN111163803A (zh) | 2020-05-15 |
| JP2024052737A (ja) | 2024-04-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP7391831B2 (ja) | Ｃａｒ ｔ細胞標的を発現する腫瘍溶解性ウイルス、及びその使用 | |
| US7767209B2 (en) | Modified vaccinia virus Ankara (MVA) mutant and use thereof | |
| AU2011209175B2 (en) | Vaccinia virus mutants containing the major genomic deletions of MVA | |
| JP2019131572A (ja) | 強靭なｔ細胞用のｐｒ１３．５プロモータ及び抗体応答 | |
| WO2013038066A1 (en) | Modified oncolytic vaccinia virus | |
| US20220056480A1 (en) | Modified orthopoxvirus vectors | |
| JP5933565B2 (ja) | 組み換え改変ワクシニアウイルスアンカラインフルエンザワクチン | |
| TW202203966A (zh) | 用於防範ｃｏｖｉｄ－１９之以減毒的痘病毒載體為底質之疫苗 | |
| JP2024038194A (ja) | 癌細胞、免疫細胞及び腫瘍微小環境へのシアリダーゼの送達 | |
| EP2326712B1 (en) | Viral strains derived from the vaccinia virus lister vacv-107 and uses thereof | |
| Melamed et al. | Attenuation and immunogenicity of host-range extended modified vaccinia virus Ankara recombinants | |
| US11344589B2 (en) | Genetically engineered vaccinia viruses | |
| DK2635687T3 (en) | MODULE IMMUNE RESPONSES USING POXVIRUS K4 PROTEIN | |
| Wang et al. | Characterization of an attenuated TE3L-deficient vaccinia virus Tian Tan strain | |
| JP7274138B2 (ja) | Ｓｃｒ欠失ワクシニアウイルス | |
| KR20230101747A (ko) | 외피외 바이러스 생산이 증가한 신규한 백시니아 바이러스 변이주 | |
| WO2009082594A2 (en) | Secreted/cell bound poxvirus proteins and methods of use thereof as vaccines and anti-viral agents | |
| Jeng | Discovery and Characterization of a Tanapoxvirus Encoded Human Neuregulin Mimetic | |
| McCart et al. | 10 Vaccinia Viral Vectors | |
| Goodbody | CAMELPOX VIRUS |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20210803 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20220614 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20220621 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20220920 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20221121 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20221220 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20230322 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20230621 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230818 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20231024 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20231122 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7391831 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |