JP2010536349A - 低アレルギー性分子 - Google Patents
低アレルギー性分子 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2010536349A JP2010536349A JP2010521321A JP2010521321A JP2010536349A JP 2010536349 A JP2010536349 A JP 2010536349A JP 2010521321 A JP2010521321 A JP 2010521321A JP 2010521321 A JP2010521321 A JP 2010521321A JP 2010536349 A JP2010536349 A JP 2010536349A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- bet
- mal
- car
- amino acid
- region
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Ceased
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/415—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Botany (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Description
患者の血清:
PFSを患っている、およびPFSを患っていないシラカンバ花粉アレルギー患者を、典型的な病歴、陽性皮膚プリックテストおよび放射性アレルギー吸着試験(RAST)のクラス3以上によって選択した。相対的なBet v 1およびMal d 1とのIgE結合と臨床症状との相互関係を、両方の患者グループに対して、対応する抗原を用いてELISAで確認した。
BM1,2,3,5を、Bet v 1a(X15877)の変異断片をPCR増幅することによって生成した。クローニングに用いられたinternal mismatch primerは:
Mut10F 5’CGCCATTGTTTTCAATTACGAAAaTGAGttCACCTCTGagATC3’(配列番号8),
Mut30F 5’GATGGCGATAATCTCaTTCCAAAGaTTGCACCCCAA3’(配列番号9),
Mut30R 5’ATGGCTTGGGGTGCAAtCTTTGGAAtGAGATTATCG3’(配列番号10),
Mut57F 5’ATTAAGAAGATCAcCTTTggCGAAGGCTTC3’(配列番号11),
Mut57R 5’GAAGCCTTCGccAAAGgTGATCTTCTTAAT3’(配列番号12),
Mut125F 5’CACACCAAAGGTaACatTGAGaTcAAGGCAGAGCAG3’(配列番号13),
Mut125R 5’CTGCTCTGCCTTgAtCTCAatGTtACCTTTGGTGTG3’(配列番号14)であった。
発現プラスミドを大腸菌BL21(DE3)pLysS細胞(Stratagene)にて形質転換し、上記大腸菌を、アンピシリン100mg/Lを補充したLB培地内において、37℃にて、OD600が0.8となるまで成育した。培地を16℃まで冷却し、イソプロピル−β−D−チオガラクトピラノシド(IPTG)を0.3mM加えることでタンパク質発現を引き起こした。18時間培養した後、低速度遠心分離で細胞を取り出し、適切なlysis bufferに再懸濁した。BM1,2,3,5は6xHisTag融合タンパク質で発現し、固定化金属アフィニティークロマトグラフィーによって、可溶細菌溶解物から精製された(非特許文献20)。組換えタンパク質を10mMリン酸ナトリウムバッファ(pH7.4)で透析し、−20℃で保管した。
大腸菌溶解物および精製されたタンパク質を、15%ゲルを用いる、変性したドデシル硫酸ナトリウム−ポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS−PAGE)により分析した。タンパク質は、クーマシープリリアントブルーR−250(Biorad)で染色して可視化された。
タンパク質の円偏光二色性(CD)スペクトルは、Neslab RTE−111M温度コントロールシステム(Thermo Neslab社)が取り付けられたJASCO J−810分光偏光計(Jasco)を用い、5mMリン酸ナトリウム(pH7.4)にて記録された。得られた曲線は、基準線(ベースライン)が補正された。補正された結果を所定波長における平均残差モル楕円率[θ]MRWとして示した。CDシグナルを正規化するためのタンパク質濃度はOD280にて判定された。
モデリングは、比較モデリングツールMODELLERを用いて行い、ProSa2003によって評価された。全てのモデルはPDB構造ファイル1bv1(Bet v 1)に基づき、PyMOL0.98を用いて示された。
IgEのELISA実験を行うべく、Maxisorpプレート(NUNC)は、ウェル毎に、PBS50μl中のアレルゲンを滴定し、4℃で1晩おいてコートされた。プレートは、TBS、pH7.4、0.05%(v/v)Tween、1%(w/v)BSAにてブロックされ、1:5で希釈した患者の血清で1晩、4℃にてインキュベートされた。37℃で1時間、4℃で1時間インキュベートした後、結合IgEをアルカリンホスファターゼで共役した抗ヒトIgEモノクローナル抗体(BD Biosciences Pharmingen)で検出した。
本実施例の目的は、リンゴに対するBet v 1関連PFSの発症症状の原因となる、交差反応を起こしうるB細胞エピトープの識別である。したがって、変異アレルゲンBM1,2,3,5は、Mal d 1.0108の特定のエピトープを、Bet v 1a配列の対応する位置に移植することで設計される(図1A)。
Claims (14)
- Bet v 1aまたはBet v 1aと少なくとも40%の同一性を有するアレルゲンからなる低アレルギー性分子であって、
Bet v 1aのアミノ酸100〜125の領域内において、または上記領域に対応するBet v 1aと少なくとも40%の同一性を有するアレルゲンの領域内において少なくとも1つのアミノ酸残基の変異を有し、
上記少なくとも1つのアミノ酸残基の変異は、Bet v 1aの位置114またはBet v 1aと少なくとも40%の同一性を有するアレルゲンの位置114でのアミノ酸残基の変異である、低アレルギー性分子。 - Bet v 1aまたはBet v 1aと少なくとも40%の同一性を有するアレルゲンからなる低アレルギー性分子であって、
Bet v 1aのアミノ酸100〜125の領域内において、または上記領域に対応するBet v 1aと少なくとも40%の同一性を有するアレルゲンの領域内において、少なくとも4つのアミノ酸残基の変異を有する、低アレルギー性分子。 - Bet v 1aと少なくとも40%の同一性を有する上記アレルゲンは、Bet v 1aと免疫学的に交差反応を起こしうるものであることを特徴とする、請求項1または2に記載の分子。
- Bet v 1aと少なくとも40%の同一性を有する上記アレルゲンは、
Dau c 1、特にDau c 1.0101(U47087),Dau c 1.0102(D88388),Dau c 1.0104(Z81362),Dau c 1.0105(Z84376),Dau c 1.0201(AF456481)またはDau c 1.0103(Z81361)、Api g 1,特にApi g 1.0101(Z48967)またはApi g 1.0201(Z75662)、Pet c 1(X12573)、Cas s 1(AJ417550))、Que a 1(P85126)、Mal d 1,特にMal d 1.0101(X83672),Mal d 1.0102(Z48969),Mal d 1.0109(AY026910),Mal d 1.0105(AF124830),Mal d 1.0106(AF124831),Mal d 1.0108(AF126402),Mal d 1.0103(AF124823),Mal d 1.0107(AF124832),Mal d 1.0104(AF124829),Mal d 1.0201(L42952),Mal d 1.0202(AF124822),Mal d 1.0203(AF124824),Mal d 1.0207(AY026911),Mal d 1.0205(AF124835),Mal d 1.0204(AF124825),Mal d 1.0206(AF020542),Mal d 1.0208(AJ488060),Mal d 1.0302(AY026908),Mal d 1.0304(AY186248),Mal d 1.0303(AY026909),Mal d 1.0301(Z72425),Mal d 1.0402(Z72427),Mal d 1.0403(Z72428)またはMal d 1.0401(Z72426)、Pyr c 1,特にPyr c 1.0101(O65200)、Pru av 1,特にPru av 1.0101(U66076),Pru av 1.0202(AY540508),Pru av 1.0203(AY540509)またはPru av 1.0201(AY540507)、Pru p 1(DQ251187)、Rub i 1.0101(DQ660361)、Pru ar 1,特にPru ar 1.0101(U93165)、Cor a 1,特にCor a 1.0401(AF136945),Cor a 1.0404(AF323975),Cor a 1.0402(AF323973),Cor a 1.0403(AF323974),Cor a 1.0301(Z72440),Cor a 1.0201(Z72439),Cor a 1/5(X70999),Cor a 1/11(X70997),Cor a 1/6(X71000)またはCor a 1/16(X70998)、Bet v 1d(X77266)、Bet v 1l(X77273)、Bet v 1a1−6(非特許文献1)、Bet v 1g(X77269)、Bet v 1f(X77268)、Bet v 1j(X77271)、Bet v 1e(X77267)、Bet v 1b(X77200)、Bet v 1c(X77265)、Bet v 1.0101(X15877)、Bet v 1.0901(X77272)、Bet v 1.1101(X77599)、Bet v 1.1201(X77600)、Bet v 1.1301(X77601)、Bet v 1.1401(X81972)、Bet v 1.1501(Z72429)、Bet v 1.1601(Z72437)、Bet v 1.1701(Z72430)、Bet v 1.1801(Z72431)、Bet v 1.1901(Z72433)、Bet v 1.2001(Z72434)、Bet v 1.2101(Z72435)、Bet v 1.2201(Z72438)、Bet v 1.2301(Z72436)、Bet v 1.2401(Z80100)、Bet v 1.2501(Z80101)、Bet v 1.2601(Z80102)、Bet v 1.2701(Z80103)、Bet v 1.2901(Z80105)、Bet v 1.3001(Z80106)、Aln g 1(S50892)、Car b 1,特にCar b 1.0301(Z80169),Car b 1.0302(Z80170),Car b 1.0103(Z80159),Car b 1.0105(Z80161),Car b 1.0104(Z80160),Car b 1/1a,Car b 1.0101(X66932),Car b 1.0102(X66918),Car b 1/1b,Car b 1/2,Car b 1.0106a(Z80162),Car b 1.0106b(Z80163),Car b 1.0106c(Z80164),Car b 1.0106d(Z80165),Car b 1.0107a(Z80166),Car b 1.0107b(Z80167),Car b 1.0201(X66933)またはCar b 1.0108(Z80168)、Gly m 4.0101(X60043)、Vig r 1.0101(AY792956)、Ara h 8.0101(AY328088)、Asp ao PR10(X62103)、Bet p 1a(AB046540)、Bet p 1b(AB046541)、Bet p 1c(AB046542)、Fag s 1(AJ130889)、Cap ch 17kD a(AJ879115)、Cap ch 17kD b(AJ878871)、Fra a 1.0101(AY679601)、およびTar o 18kD(AF036931)からなる群より選択されていることを特徴とする、請求項1〜3のいずれか1項に記載の分子。 - 上記少なくとも1つのアミノ酸残基における、または上記少なくとも4つのアミノ酸残基における少なくとも1つの変異は、アミノ酸の置換、欠失、または付加であることを特徴とする、請求項1〜4のいずれか1項に記載の分子。
- Bet v 1aの変異領域、または上記変異領域に対応するBet v 1aと少なくとも40%の同一性を有するアレルゲンの変異領域は、Bet v 1aの領域における、または上記領域に対応するBet v 1aと少なくとも40%の同一性を有するアレルゲンの領域における、アミノ酸の位置105〜120、好ましくはアミノ酸の位置108〜118、より好ましくはアミノ酸の位置109〜116を含むことを特徴とする、請求項1〜5のいずれか1項に記載の分子。
- 上記少なくとも1つの変異が、上記領域とBet v 1aおよびBet v 1aと少なくとも40%の同一性を有するアレルゲンからなる群より選択された別のアレルゲンの対応する領域とが置換されることを含むことを特徴とする、請求項1〜6のいずれか1項に記載の分子。
- 上記分子がBet v 1からなり、Bet v 1のアミノ酸の位置109〜116が、上記アミノ酸の位置109〜116に対応するMal d 1の領域と置換されていることを特徴とする、請求項1〜7のいずれか1項に記載の分子。
- 上記分子がMal d 1からなり、Mal d 1のアミノ酸の位置109〜116が、上記アミノ酸の位置109〜116と対応するBet v 1の領域と置換されていることを特徴とする、請求項1〜7のいずれか1項に記載の分子。
- 請求項1〜9のいずれか1項に記載の低アレルギー性分子をコードしている、核酸分子。
- 請求項10に記載の核酸分子を含有する、ベクター。
- 請求項1〜9のいずれか1項に記載の低アレルギー性分子を含有する、ワクチン製剤。
- さらに、薬学的に使用可能な、賦形剤、希釈剤、アジュバントおよびキャリアの少なくとも1つを含有することを特徴とする、請求項12に記載の製剤。
- アレルギーの予防および治療の少なくとも一方のためのワクチンを製造するための、請求項1〜9のいずれか1項に記載の低アレルギー性分子の、使用。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP07450145A EP2028188A1 (en) | 2007-08-21 | 2007-08-21 | Hypoallergenic molecules |
PCT/EP2008/005324 WO2009024208A1 (en) | 2007-08-21 | 2008-06-30 | Hypoallergenic molecules |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2010536349A true JP2010536349A (ja) | 2010-12-02 |
Family
ID=38959656
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2010521321A Ceased JP2010536349A (ja) | 2007-08-21 | 2008-06-30 | 低アレルギー性分子 |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9040054B2 (ja) |
EP (2) | EP2028188A1 (ja) |
JP (1) | JP2010536349A (ja) |
AU (1) | AU2008290883B2 (ja) |
CA (1) | CA2696691C (ja) |
DK (1) | DK2190865T3 (ja) |
ES (1) | ES2488669T3 (ja) |
WO (1) | WO2009024208A1 (ja) |
Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2588136A2 (en) * | 2010-07-02 | 2013-05-08 | Charité Universitätsmedizin Berlin | Linear ige peptide epitopes of hazelnut allergen cor a 1 and celery antigen api 1 |
EP2402030A1 (en) * | 2010-07-02 | 2012-01-04 | Charité Universitätsmedizin Berlin | Linear IgE peptide epitopes of celery allergen api 1 |
FI20115375A0 (fi) | 2011-04-18 | 2011-04-18 | Teknologian Tutkimuskeskus Vtt Oy | Uudet hypoallergeenit |
FI20115374A0 (fi) | 2011-04-18 | 2011-04-18 | Teknologian Tutkimuskeskus Vtt Oy | Uudet hypoallergeenit |
ITMI20111489A1 (it) * | 2011-08-03 | 2013-02-04 | Lofarma Spa | Varianti ipoallergeniche dell'allergene maggiore mal d 1 di malus domestica |
CA3044074A1 (en) * | 2016-11-16 | 2018-05-24 | Immunomic Therapeutics, Inc. | Nucleic acids for treatment of allergies |
EP4134674A1 (en) | 2021-08-13 | 2023-02-15 | Euroimmun Medizinische Labordiagnostika AG | Methods and reagents for detecting an antibody to a ses ipr-10 allergen |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2002506648A (ja) * | 1998-03-16 | 2002-03-05 | アルク−アベーロ アクティーゼルスカブ | 突然変異体組換えアレルゲン |
JP2009521910A (ja) * | 2005-12-29 | 2009-06-11 | ロファルマ ソシエタ ペル アチオニ | BetulaVerrucosa花粉の主要アレルゲンの低アレルギー性変種 |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004039834A2 (en) * | 2002-11-01 | 2004-05-13 | Alk-Abelló A/S | Recombinant protein variants |
-
2007
- 2007-08-21 EP EP07450145A patent/EP2028188A1/en not_active Withdrawn
-
2008
- 2008-06-30 ES ES08773765.6T patent/ES2488669T3/es active Active
- 2008-06-30 US US12/674,195 patent/US9040054B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2008-06-30 WO PCT/EP2008/005324 patent/WO2009024208A1/en active Application Filing
- 2008-06-30 CA CA2696691A patent/CA2696691C/en not_active Expired - Fee Related
- 2008-06-30 DK DK08773765.6T patent/DK2190865T3/da active
- 2008-06-30 EP EP08773765.6A patent/EP2190865B1/en active Active
- 2008-06-30 JP JP2010521321A patent/JP2010536349A/ja not_active Ceased
- 2008-06-30 AU AU2008290883A patent/AU2008290883B2/en not_active Ceased
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2002506648A (ja) * | 1998-03-16 | 2002-03-05 | アルク−アベーロ アクティーゼルスカブ | 突然変異体組換えアレルゲン |
JP2009521910A (ja) * | 2005-12-29 | 2009-06-11 | ロファルマ ソシエタ ペル アチオニ | BetulaVerrucosa花粉の主要アレルゲンの低アレルギー性変種 |
Non-Patent Citations (5)
Title |
---|
JPN6013015384; J.Allergy Clin.Immunol.,2007,120,p.374-80 * |
JPN6013015387; FASEB J.,1998,12,p.231-42 * |
JPN6013015388; Mol.Immunol.,1999 Feb,36(3),p.155-67 * |
JPN6014023013; Curr.Opin.Struct.Biol.,1995 Apr,5(2),p.229-35 * |
JPN6014023015; Clin.Exp.Allergy,2005 Dec,35(12),p.1638-44 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU2008290883B2 (en) | 2013-01-10 |
EP2028188A1 (en) | 2009-02-25 |
CA2696691C (en) | 2016-04-19 |
US20110217334A1 (en) | 2011-09-08 |
US9040054B2 (en) | 2015-05-26 |
EP2190865B1 (en) | 2014-05-07 |
CA2696691A1 (en) | 2009-02-26 |
DK2190865T3 (da) | 2014-07-07 |
WO2009024208A9 (en) | 2009-06-18 |
ES2488669T3 (es) | 2014-08-28 |
AU2008290883A1 (en) | 2009-02-26 |
EP2190865A1 (en) | 2010-06-02 |
WO2009024208A1 (en) | 2009-02-26 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2010536349A (ja) | 低アレルギー性分子 | |
Pomés | Relevant B cell epitopes in allergic disease | |
Asturias et al. | Engineering of major house dust mite allergens Der p 1 and Der p 2 for allergen‐specific immunotherapy | |
Schulten et al. | Pru p 3, the nonspecific lipid transfer protein from peach, dominates the immune response to its homolog in hazelnut | |
JP6104885B2 (ja) | 低刺激性アレルゲン | |
Campana et al. | Hypoallergenic derivatives of the major birch pollen allergen Bet v 1 obtained by rational sequence reassembly | |
Hofer et al. | Tackling Bet v 1 and associated food allergies with a single hybrid protein | |
Wallner et al. | Allergy multivaccines created by DNA shuffling of tree pollen allergens | |
JP2006520184A (ja) | 組換えタンパク質変種 | |
JP4446887B2 (ja) | オオアワガエリ花粉アレルゲンPhlP7に基づく低アレルゲン性アレルギーワクチン | |
JP2016539950A (ja) | 細菌表面受容体タンパク質由来の免疫原性組成物およびワクチン | |
RU2624030C2 (ru) | ГИПОАЛЛЕРГИЧЕСКИЕ ВАРИАНТЫ Mal d 1, ГЛАВНОГО АЛЛЕРГЕНА Malus domectica | |
AU2004205160A1 (en) | Hypoallergenic polypeptides based on fish parvalbumin | |
US9133253B2 (en) | Ricin vaccine and methods of making thereof | |
US20180002387A1 (en) | Variants of group 5 allergens of the true grasses having reduced allergeneity due to mutagenesis of proline residues | |
US20140121356A1 (en) | Hypoallergenic mutant polypeptides based on fish parvalbumin | |
AU2022323847A1 (en) | Hypoallergenic peanut allergens, production and use thereof | |
EP2281836B9 (en) | Hybrid proteins from Parietaria judaica major allergens and uses thereof | |
Bhattacharya | Gaurab Sircar1, 2, 3, Moumita Bhowmik2, Rajat Kanti Sarkar1, Nazanin Najafi3, Angira Dasgupta4, Margarete Focke-Tejkl3, Irene Mittermann3, Rudolf Valenta3, 5, 6, Kashinath Bhattacharya1, and | |
EP1558740A2 (en) | Recombinant protein variants |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20110527 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20130402 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20130628 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20130705 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20130722 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20130729 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20131001 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20140610 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20141009 |
|
RD02 | Notification of acceptance of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7422 Effective date: 20141009 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20141009 |
|
A911 | Transfer of reconsideration by examiner before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20141104 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20141209 |
|
A045 | Written measure of dismissal of application |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A045 Effective date: 20150421 |