JP2010500874A - 有機液体中に荷電した核酸を溶解させるための方法 - Google Patents
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Abstract
Description
a)水性の第二液体中に核酸の溶液を提供する工程、
b)第二液体中で核酸と不溶性の錯体を形成する錯体形成因子を第二液体に加えることによって、核酸を沈殿させる工程、
c)第二液体から錯体を取り出す工程、
d)両親媒性化合物から構成されるか、または、両親媒性化合物を含む第三液体中に、錯体を溶解させる工程、および
e)第三液体を第一液体と混合する工程
を包含する。
a)水混和性の溶媒を用いて液体から核酸を抽出する工程であって、この工程は、水不混和性の液体を水混和性の溶媒と接触させることによってなされ、そして、この水混和性の溶媒は、1以上の塩を含む、工程;
b)水混和性の溶媒を、水不混和性の液体から分離する工程;および
c)水混和性の溶媒から核酸を単離する工程
を包含する。
a)上記方法のうちの一つを用いて、食品の1以上の水不混和性成分から核酸を単離する工程;および
b)核酸を分析する工程
を包含する。
10gのニシン精子DNA(HS−DNA)を、1LのTE(脱イオン水中、10mmol/lのTrisHCl、1mmol/lのEDTA、pH8)中に溶解させた。撹拌しながら、100mlのCTAB溶液(脱イオン水中100mmol/lのCTAB)を加えた。形成した沈殿物(CTAB−HS−DNA)を、遠心分離により沈降させ、そして、室温で乾燥させた。
約1mgのCTAB−HS−DNAを、1.4mlのEppendorf反応容器に移した。1mlのガソリン(プレミアムガソリン、BP)、ディーゼル燃料(BP)、鉱油、ヒマワリ油(スーパーマーケット)、菜種油(スーパーマーケット)、麦芽油(スーパーマーケット)またはオリーブ油(スーパーマーケット)を、各Eppendorf反応容器に加えた。次いで、これらの反応容器を激しく振り、その後、15000×gで5分間遠心分離した。全ての反応容器中で沈殿物が観察された。
1gのCTAB−HS−DNAを、50mlの1−ブタノールに溶解させた。100μlの溶液を、1.4mlのEppendorf反応容器に移した。1mlのガソリン、ディーゼル、鉱油、ヒマワリ油、菜種油、麦芽油またはオリーブ油を、各Eppendorf反応容器に加えた。次いで、これらの反応容器を激しく振り、その後、15000×gで5分間遠心分離した。全ての反応容器中で沈殿物が観察された。
約20mgのCTAB−HS−DNAを、1.4mlのEppendorf反応容器に移した。1000μl、500μl、200μl、100μl、50μlまたは20μlのエチレングリコールモノブチルエーテル(EGE)を、各Eppendorf反応容器に加えた。次いで、これらの反応容器を激しく振り、その後、15000×gで5分間遠心分離した。いずれの反応容器においても沈殿物が観察されなかった。CTAB−HS−DNAは完全に溶解された。
2gのCTAB−HS−DNAを、50mlのEGEに溶解させた。100μlおよび500μlの溶液を、2mlのEppendorf反応容器に移した。それぞれ、900μlおよび500μlのガソリン、ディーゼル、鉱油、ヒマワリ油、菜種油、麦芽油またはオリーブ油を、各Eppendorf反応容器に加えた。次いで、これらの反応容器を激しく振り、その後、15000×gで5分間遠心分離した。いずれの反応容器においても沈殿物が観察されなかった。CTAB−HS−DNAは完全に溶解された。
20mgのCTAB−HS−L−DNAを、1mlのEGEに溶解させた。そのうち100μlを、100mlのガソリン、ディーゼル、鉱油、ヒマワリ油または菜種油に溶解させた。DNAを抽出するために、得られた溶液のうち1mlを、1.4mlのEppendorf反応容器に移した。そこに、50μlのSDS−飽和エタノールを加え、激しく振り、15000×gで5分間遠心分離した。上清を捨てた。生じたペレットに1mlのハプテンを加えた。次いで、反応容器を激しく振り、再度、15000×gで5分間遠心分離した。上清を捨て、そして、ペレットを1mlの0.1 TE(TE1部、脱イオン水9部)中に取った。
20mgのCTAB−HS−L−DNAを、1mlのEGEに溶解させた。そのうち100μlを、100mlのディーゼル燃料、鉱油、ヒマワリ油または菜種油に溶解させた。各サンプル1mlを取り、4℃、室温、40℃および80℃にて24時間インキュベートした。DNAを抽出するために、50μlのSDS−飽和エタノールをサンプルに加え、激しく振り、そして、15000×gで5分間遠心分離した。上清を捨てた。生じたペレットに1mlのハプテンを加え、激しく振り、そして、15000×gで5分間遠心分離した。上清を捨て、そして、ペレットを1mlの0.1 TE中に取った。このようにして得られたHS−DNAおよびL−DNAの水溶液のうち2.5μlを用いて、ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)を行った。この目的のために、合成により調製したL−DNA特異的なプライマー1および2を使用した。PCRは、上述のPeqlab製のキットを用い、25μlの総容量にて行った。プライマーの濃度は、各場合、プライマー毎に200nMであり、そして、55℃のアニーリング温度を用い、30サイクルを行った。解析は、10%(w/v)のポリアクリルアミドゲル上でのゲル電気泳動と、その後の銀染色により行った。全サンプルにおいてL−DNAが検出された。DNAを加えなかった、ガソリン、ディーゼル、鉱油、ヒマワリ油および菜種油からの抽出物をコントロールとして用いた。コントロールにおいては、L−DNAは検出されなかった。この実験は、水不混和性の液体に溶解させたDNAが、冷却することなく、さらに、高温の場合でさえも、長期間にわたり安定であることを示す。
10gのココナッツ油脂(スーパーマーケット)を、加熱により液化させた。約50℃まで冷却させた後、100μlのEGE中2%(w/v)CTAB−HS−L−DNAを加え、そして混合した。この油脂を、4℃まで冷却することにより固化させた。
100μlのSDS−飽和エタノールを、室温にて、1.4mlプラスチック製反応チューブ内の、1mlのディーゼル、ガソリン、菜種油およびヒマワリ油の各々2サンプルに加え、そして、これらのサンプルを30秒間振り、次いで、4℃にて1時間インキュベートした。相を分離させるために、サンプルを4℃、最高加速度(約16000×g)にて15分間遠心分離した。全サンプルにおいて、わずかなペレットが確認された。液相を除き、そして、ペレットを、1mlのn−ヘプタンと混合した。サンプルを約20〜30秒間混合し、次いで、4℃、最高加速度(約16000×g)にて2分間遠心分離した。上清を除いて捨てた。反応チューブを逆さにして、約10〜20分間静置させて、ペレットを乾燥させた。ペレットを、0.02%のTween20を含む100μlの0.1×TEに溶解させた。サンプル中のDNA含量を、λDNA検量プロットを用い、製造業者の情報に従って行ったPicoGreenアッセイ(PicoGreen(登録商標)dsDNA Quantitation Kit,カタログ番号P11496,Invitrogen GmbH,Technologiepark Karlsruhe,Emmy−Noether Strasse 10,76131 Karlsruhe)によって決定した。全てのサンプルにおいて核酸が検出された、濃度は、1ng/ml〜7ng/mlの間であった(表1を参照のこと)。
Claims (48)
- 水不混和性の液体に核酸を溶解させるための方法であって、該方法は、両親媒性の液体中に錯体形成因子と共に存在している核酸を、水不混和性の液体と混合する工程を包含する、方法。
- 水不混和性の有機の第一液体中に荷電した核酸を溶解させるための方法であって、該方法は、以下の工程:
a)水性の第二液体中に該核酸の溶液を提供する工程、
b)該第二液体中で該核酸と不溶性の錯体を形成する錯体形成因子を該第二液体に加えることによって、該核酸を沈殿させる工程、
c)該第二液体から該錯体を取り出す工程、
d)両親媒性化合物から構成されるか、または、両親媒性化合物を含む第三液体中に、該錯体を溶解させる工程、および
e)該第三液体を該第一液体と混合する工程
を包含する、方法。 - 前記錯体形成因子が、カチオン性界面活性剤または有機アミン、特に、第四級アミンである、請求項1または2に記載の方法。
- 前記第四級アミンが、臭化セチルトリメチルアンモニウム(CTAB)である、請求項3に記載の方法。
- 前記錯体形成因子が、工程b)の前記第二液体に、溶解した形態で加えられる、請求項2〜4のいずれかに記載の方法。
- 前記核酸が、合成により調製された、既知配列を有する核酸である、請求項1〜5のいずれかに記載の方法。
- 前記核酸が、各々、5〜100ヌクレオチドの鎖長、好ましくは、10〜80ヌクレオチドの鎖長、特に好ましくは、15〜60ヌクレオチドの鎖長を有する、請求項1〜6のいずれかに記載の方法。
- 前記核酸が、DNAまたはRNAから構成される、請求項1〜7のいずれかに記載の方法。
- 前記核酸が、アンチセンスDNAまたはsiRNAである、請求項1〜8のいずれかに記載の方法。
- 前記核酸が、ヒト遺伝子の配列の少なくとも一部分を含む、請求項1〜9のいずれかに記載の方法。
- 前記核酸が、一本鎖または二本鎖の形状を有する、請求項1〜10のいずれかに記載の方法。
- 工程c)における前記錯体を取り除く工程が、遠心分離または濾過によってなされる、請求項1〜11のいずれかに記載の方法。
- 前記両親媒性化合物が有機溶媒である、請求項1〜12のいずれかに記載の方法。
- 前記両親媒性化合物が少なくとも1つのエーテル基を含む、請求項1〜13のいずれかに記載の方法。
- 前記両親媒性化合物が少なくとも1つのヒドロキシル基を含む、請求項1〜14のいずれかに記載の方法。
- 前記両親媒性化合物が、式HO−R1−O−R2によって記述され得、ここで、R1およびR2が、各場合において、1〜100個の炭素原子を有する炭化水素残基である、請求項1〜15のいずれかに記載の方法。
- 前記両親媒性化合物が、エチレングリコールモノブチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテル、または、エチレングリコールモノメチルエーテルである、請求項1〜16のいずれかに記載の方法。
- 0.1mg/mlより高い、特に、1mg/mlより高い、好ましくは、10mg/mlより高い、前記第三液体中の核酸の濃度が生じるような量で、前記錯体が該第三液体中に溶解される、請求項1〜17のいずれかに記載の方法。
- 前記第一液体が、植物性または動物性の油または油脂である、請求項1〜18のいずれかに記載の方法。
- 前記第一液体が、20℃において、固体、特に、蝋である、請求項1〜19のいずれかに記載の方法。
- 前記第一液体が、内燃機関のための燃料である、請求項1〜18のいずれかに記載の方法。
- 前記第一液体が、鉱物油脂、鉱物油、または、鉱物油の蒸留液、もしくは、蒸留液の残留物、特に、ディーゼル燃料、軽油、重油、トルエン、ベンゼンまたはガソリンである、請求項1〜21のいずれかに記載の方法。
- 荷電した、合成により調製された核酸と、両親媒性化合物とが内部に溶解された水不混和性の有機液体であって、該核酸は、錯体形成因子によって錯体形成されており、かつ、既知配列を有する、液体。
- 前記錯体形成因子が、カチオン性界面活性剤または有機アミン、特に、第四級アミンである、請求項23に記載の液体。
- 前記第四級アミンが、臭化セチルトリメチルアンモニウム(CTAB)である、請求項24に記載の液体。
- 前記核酸が、各々、5〜100ヌクレオチドの鎖長、好ましくは、10〜80ヌクレオチドの鎖長、特に好ましくは、15〜60ヌクレオチドの鎖長を有する、請求項23〜25のいずれかに記載の液体。
- 前記核酸が、DNAまたはRNAから構成される、請求項23〜26のいずれかに記載の液体。
- 前記核酸が、アンチセンスDNAまたはsiRNAである、請求項23〜27のいずれかに記載の液体。
- 前記核酸が、ヒト遺伝子の配列の少なくとも一部分を含む、請求項23〜28のいずれかに記載の液体。
- 前記核酸が、一本鎖または二本鎖の形状を有する、請求項23〜29のいずれかに記載の液体。
- 前記両親媒性化合物が有機溶媒である、請求項23〜30のいずれかに記載の液体。
- 前記両親媒性化合物が少なくとも1つのエーテル基を含む、請求項23〜31のいずれかに記載の液体。
- 前記両親媒性化合物が少なくとも1つのヒドロキシル基を含む、請求項23〜32のいずれかに記載の液体。
- 前記両親媒性化合物が、式HO−R1−O−R2によって記述され得、ここで、R1およびR2が、各場合において、1〜100個の炭素原子を有する炭化水素残基である、請求項23〜33のいずれかに記載の液体。
- 前記両親媒性化合物が、エチレングリコールモノブチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテル、または、エチレングリコールモノメチルエーテルである、請求項23〜34のいずれかに記載の液体。
- 前記核酸が、0.1mg/mlより高い、特に、1mg/mlより高い、好ましくは、10mg/mlより高い濃度で存在する、請求項23〜35のいずれかに記載の液体。
- 前記液体が、植物性または動物性の油または油脂である、請求項23〜36のいずれかに記載の液体。
- 前記液体が、20℃において、固体、特に、蝋である、請求項23〜37のいずれかに記載の液体。
- 前記液体が、内燃機関のための燃料である、請求項23〜37のいずれかに記載の液体。
- 前記液体が、鉱物油脂、鉱物油、または、鉱物油の蒸留液、もしくは、蒸留液の残留物、特に、ディーゼル燃料、軽油、重油、トルエン、ベンゼンまたはガソリンである、請求項23〜39のいずれかに記載の液体。
- 前記核酸を検出して前記液体を同定するための方法を行うための、請求項23〜40のいずれかに記載の液体の使用。
- 前記核酸の配列が同定される、請求項41に記載の使用。
- 前記核酸の配列の同定が、配列決定、ハイブリダイゼーションによってなされるか、または、ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)を行うことによってなされる、請求項42に記載の使用。
- 請求項23〜40のいずれかに記載の液体を含む、薬学的組成物。
- 局所適用のために設計された、請求項44に記載の薬学的組成物。
- 水不混和性の液体から核酸を単離するための方法であって、該方法は、以下の工程:
a)水混和性の溶媒を用いて該液体から該核酸を抽出する工程であって、該工程は、該水不混和性の液体を該水混和性の溶媒と接触させることによってなされ、そして、該水混和性の溶媒が、1以上の塩を含む、工程;
b)該水混和性の溶媒を、該水不混和性の液体から分離する工程;および
c)該水混和性の溶媒から該核酸を単離する工程
を包含する、方法。 - 水不混和性の液体から核酸を単離するための方法であって、該方法は、該液体を、1以上の塩を含みかつ該水不混和性の液体中に溶解する溶媒と混合することにより、該核酸を沈殿させる工程を包含する、方法。
- 食品を分析するための方法であって、該方法は、以下の工程:
a)請求項46または47に記載の方法のうちの一方を用いて、該食品の1以上の水不混和性成分から核酸を単離する工程;および
b)該核酸を分析する工程
を包含する、方法。
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Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
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