JP2010217553A - 画像生成装置及び画像生成方法 - Google Patents

Abstract

【課題】鮮明な生体組織の画像を生成できるようにする。
【解決手段】画像生成装置１は、各撮像点ＱＣについて、標準位置Ｚ１及び別位置Ｚ２における標準撮像画像ＰＣ１及び別撮像画像ＰＣ２をそれぞれ繋ぎ合わせることにより、標準画像Ｐ１と別撮像画像ＰＣ２とを生成する。また画像生成装置１は、標準画像Ｐ１を基に、包埋材１０３に気泡ＢＢが含まれているか否かを判定し、当該気泡ＢＢが含まれていた部分について、標準画像Ｐ１を別画像Ｐ２に置き換えて生体組織画像ＰＲを生成する。これにより画像生成装置１は、ほぼ全体が鮮明な生体組織画像ＰＲを生成することができる。
【選択図】図６

Description

本発明は画像生成装置及び画像生成方法に関し、例えば生体組織を撮像して生体組織画像を生成する画像生成装置に適用して好適なものである。

従来、生体組織を基に病理診断を行う場合には、生体組織をスライドガラス上に固定した病理スライドガラスを作成し、医師が顕微鏡等を用いて当該病理スライドガラスを観察していた。

近年では、利便性等の観点から、スライドガラス上の生体組織を予め撮像する画像生成装置を用いて当該生体組織の画像を生成しておき、当該画像を表示して医師に病理診断をさせる手法も提案されている（例えば、特許文献１参照）。

かかる画像生成装置では、一般に、ディジタルカメラと同様の撮像原理により画像データを生成する。また画像生成装置では、撮像素子の画素数やレンズの画角等の制約により、複数の撮像点を設定して撮像範囲を少しずつ移動しながら生体組織の一部を順次撮像し、撮像した画像をつなぎ合わせるといった手法が用いられている。

特開２００６−２９２９９９公報（第１図）

ところで病理スライドガラスは、ガラスプレート上に薄くスライスした生体組織が載せられ、所定の包埋材が塗布された上でカバーガラスが被されるようになされている。このとき病理スライドガラスは、包埋材中に気泡が含まれてしまうことがある。

包埋材中に気泡が含まれる場合、気泡と包埋材との屈折率の違いにより、気泡が存在する位置と存在しない位置とで焦点位置が異なることになる。このため画像生成装置は、病理スライドガラスを撮像した場合、気泡がある箇所については、焦点が合わずにぼやけた画像となる等、生体組織の画像を正しく得ることができないという問題があった。

本発明は以上の点を考慮してなされたもので、鮮明な生体組織の画像を生成し得る画像生成装置及び画像生成方法を提案しようとするものである。

かかる課題を解決するため本発明の画像生成装置においては、スライスされた生体組織がスライドガラスの置載面上に搭載され当該生体組織が包埋材及びカバーガラスにより被覆されてなる病理スライドガラスから得られる光を、所定の撮像レンズにより集光し画像を生成する撮像部と、撮像レンズの光軸方向に関し、病理スライドガラスに対する撮像レンズの焦点の相対位置を変化させる焦点移動部と、相対位置のうち、光軸上における包埋材中に気泡が含まれないときに撮像レンズの焦点を生体組織に合わせる標準位置と、当該標準位置よりも光軸上における包埋材中に気泡が含まれるときにレンズの焦点を生体組織に合わせる位置に近接した別位置とを、それぞれ取得する焦点位置取得部と、焦点移動部により撮像レンズの焦点の相対位置を標準位置及び別位置にそれぞれ設定したときの標準画像及び別画像を撮像部によりそれぞれ生成させる撮像制御部と、病理スライドガラスにおける気泡の存在箇所を表す気泡情報を取得する気泡情報取得部と、気泡情報を基に、標準画像における気泡以外の部分と別画像における気泡に相当する部分とを合成した生体組織画像を生成する画像生成部とを設けるようにした。

これにより本発明の画像生成装置は、標準画像における気泡が有る部分を特定した上で、より鮮明な別画像に置き換えて生体組織画像を生成することができる。

また本発明の画像生成方法においては、スライスされた生体組織がスライドガラスの置載面上に搭載され当該生体組織が包埋材及びカバーガラスにより被覆されてなる病理スライドガラスと撮像レンズとの相対位置として、撮像レンズの光軸上における包埋材中に気泡が含まれないときに撮像レンズの焦点を生体組織に合わせる標準位置を取得する標準位置取得ステップと、相対位置として、標準位置よりも光軸上における包埋材中に気泡が含まれるときにレンズの焦点を生体組織に合わせる位置に近接した別位置を取得する別位置取得ステップと、撮像レンズの光軸方向に関し、病理スライドガラスに対する撮像レンズの焦点の相対位置を標準位置及び別位置にそれぞれ移動させる移動ステップと、相対位置を標準位置及び別位置にそれぞれ移動させたときの、生体組織から得られる光を撮像レンズにより集光し標準画像及び別画像をそれぞれ生成する画像生成ステップと、病理スライドガラスにおける気泡の存在箇所を表す気泡情報を取得する気泡情報取得ステップと、気泡情報を基に、標準画像における気泡以外の部分と別画像における気泡に相当する部分とを合成した生体組織画像を生成する画像生成ステップとを設けるようにした。

これにより本発明の画像生成方法では、標準画像における気泡が有る部分を特定した上で、より鮮明な別画像に置き換えて生体組織画像を生成することができる。

本発明によれば、標準画像における気泡が有る部分を、より鮮明な別画像に置き換えて生体組織画像を生成することができる。かくして本発明は、鮮明な生体組織の画像を生成し得る画像生成装置及び画像生成方法を実現できる。

病理スライドガラスの構成を示す略線図である。 病理スライドガラスの構成を示す略線図である。 病理スライドガラスの構成を示す略線図である。 画像生成装置の構成を示す略線図である。 測定点及び撮像点の設定の説明に供する略線図である。 画像の合成の説明に供する略線図である。 画像生成処理手順を示すフローチャートである。 画像生成システムの構成を示す略線図である。 焦点情報生成装置の構成を示す略線図である。 第１受光器の構成を示す略線図である。 対物レンズをＺ方向へ移動させたときの信号波形を示す略線図である。 対物レンズをＺ方向へ移動させたときの信号波形を示す略線図である。 焦点位置検出処理手順を示すフローチャートである。 気泡情報により表される測定点ごとの気泡の有無を示す略線図である。 第２の実施の形態による画像生成処理手順を示すフローチャートである。

以下、発明を実施するための形態（以下実施の形態とする）について、図面を用いて説明する。なお、説明は以下の順序で行う。
１．第１の実施の形態（合焦位置が一定の例）
２．第２の実施の形態（合焦位置が一定でない例）
３．他の実施の形態

＜１．第１の実施の形態＞
［１−１．病理スライドガラスの構成］
本発明にかかる撮像装置について説明する前に、撮像対象となる生体組織を保持する病理スライドガラス１００の構成について、図１（Ａ）〜（Ｃ）に示す断面図を用いその作成過程に沿って説明する。

実際上病理スライドガラス１００は、まず略薄板状のガラス材料でなるスライドガラス１０１の置載面１０１Ａ上に、薄くスライスされた生体組織１０２が広げられた状態でほぼ中央に置かれる（図１（Ａ））。

スライドガラス１０１は、図における横方向の長さが約７５［ｍｍ］、奥行き方向の長さが約２５［ｍｍ］となっており、厚さ（すなわち図における上下方向の長さ）が約２［ｍｍ］となっている。

生体組織１０２は、図における横方向及び奥行き方向の長さがいずれも約１５［ｍｍ］であり、厚さが約３〜５［μｍ］程度となっている。また生体組織１０２は、所定の染色処理がなされており、光の屈折率が約１．３〜１．５となることが知られている。以下では、生体組織１０２の上面を撮像面１０２Ａと呼ぶ。

続いて病理スライドガラス１００は、スライドガラス１０１の置載面１０１Ａにおいて、生体組織１０２を覆うように包埋材１０３が塗布され（図１（Ｂ））、さらに生体組織１０２を上方から覆うようにカバーガラス１０４が被される（図１（Ｃ））。

その後包埋材１０３は、固まることにより、スライドガラス１０１に対し生体組織１０２及びカバーガラス１０４を固定する。かくして病理スライドガラス１００が完成する。

カバーガラス１０４は、図における横方向の長さが約４０［ｍｍ］、奥行き方向の長さが約２４［ｍｍ］となっており、厚さが約０．１２〜０．１７［ｍｍ］となっている。

包埋材１０３は、カバーガラス１０４が被された状態における厚さが約１０［μｍ］程度となっている。また包埋材１０３及びカバーガラス１０４における光の屈折率は、いずれも約１．５となるようになされている。

因みに第１の実施の形態では、カバーガラス１０４の上面１０４Ａから生体組織１０２までの距離（以下これをカバー距離ＤＣと呼ぶ）が一定であると仮定する。

ところで病理スライドガラス１００は、理想的には、図１（Ｃ）の一部を拡大した図２（Ａ）に示すように、生体組織１０２とカバーガラス１０４との間が包埋材１０３により満たされた状態となる。

この病理スライドガラス１００は、図２（Ａ）と対応する図２（Ｂ）に上面図を示すように、カバーガラス１０４及び包埋材１０３（いずれも図示せず）を介して、生体組織１０２を観察し得る状態となっている。

しかしながら実際の病理スライドガラス１００は、図２（Ａ）と対応する図３（Ａ）に断面図を示すように、包埋材１０３中に気泡ＢＢが入ってしまう場合がある。

このとき病理スライドガラス１００は、気泡ＢＢが入っている部分において、生体組織１０２とカバーガラス１０４との間を、包埋材１０３に代わる空気等の気体が占めている。

ここで、包埋材１０３の屈折率は約１．５であり、気泡ＢＢの屈折率は約１である。このため、包埋材１０３と気泡ＢＢとの境界面では、光が屈折されると考えられる。この結果、病理スライドガラス１００を上面から見た場合、図２（Ｂ）と対応する図３（Ｂ）に示すように、気泡ＢＢが存在する箇所は当該気泡ＢＢが存在しない箇所と見え方が相違することになる。

また、カバーガラス１０４の上面１０４Ａから生体組織１０２までの光路を想定した場合、気泡ＢＢが有る場合と無い場合とでは、それぞれの光学的な長さ（いわゆる光路長）が相違する。

このときの光路長差は、包埋材１０３の厚さが約１０［μｍ］であり、当該包埋材１０３と気泡ＢＢとの屈折率差が約０．５で有るため、両者を乗じた約５［μｍ］となる。

このように病理スライドガラス１００は、スライドガラス１０１の置載面１０１Ａ上において、生体組織１０２が包埋材１０３を介してカバーガラス１０４により覆われた構成となっている。また包埋材１０３には、気泡ＢＢが含まれる可能性がある。

［１−２．画像生成装置の構成］
次に、病理スライドガラス１００を撮像して画像を生成する画像生成装置１について説明する。画像生成装置１は、図４に示すように、統括制御部２により全体を統括制御するようになされている。

統括制御部２は、図示しないＣＰＵ(Central Processing Unit)と、各種プログラム等が格納されるＲＯＭ(Read Only Memory)と、当該ＣＰＵのワークメモリとして用いられるＲＡＭ(Random Access Memory)とによって構成されている。

撮像装置３は、生体組織１０２に焦点を合わせて撮像するものの、撮像素子の制約等により、１回の撮像処理により撮像可能な範囲が当該生体組織１０２の全撮像範囲１０２ＡＲ（図２（Ｂ））よりも狭い。

このため画像生成装置１では、図５に示すように、病理スライドガラス１００上で互いにほぼ等間隔となる複数の撮像点ＱＣが設定されている。この撮像点ＱＣは、画像生成装置１における１回の撮像範囲ＡＣの大きさを基に、互いに隣接する撮像範囲ＡＣ同士を僅かに重ねるように定められている。

これに応じてＸＹステージ２０は、病理スライドガラス１００を所定の可動ステージ２０Ａに固定した状態で、当該可動ステージ２０Ａを図の左右方向（以下Ｘ方向と呼ぶ）及び手前又は奥へ向かう方向（以下Ｙ方向と呼ぶ）へ移動し得るようになされている。

実際上統括制御部２は、撮像点ＱＣの位置に応じた撮像点位置情報を有しており、これを駆動制御部３へ供給する。駆動制御部３は、撮像点位置情報を基に位置制御信号を生成してＸＹステージ２０へ供給することにより、病理スライドガラス１００が固定された可動ステージ２０ＡをＸ方向及びＹ方向へ移動させる。

撮像レンズ５は、統括制御部２及び駆動制御部３の制御の下で、アクチュエータ６により撮像光の光軸に沿った方向（以下これをＺ方向と呼ぶ）に移動され、これに伴い撮像レンズ５の焦点ＦＣをＺ方向に移動し得るようになされている。

また画像生成装置１は、図示しない光源から病理スライドガラス１００に対し光を照射する。撮像レンズ５は、このとき病理スライドガラス１００により反射された光又は当該病理スライドガラスを透過した光（以下これを撮像光ＬＣと呼ぶ）を集光し、撮像部８へ導くようになされている。このとき撮像光ＬＣは、焦点ＦＣにおける像を表すことになる。

撮像部８は、ＣＭＯＳ（Complementary Metal Oxide Semicondactor）等の撮像素子を有しており、当該撮像素子により撮像光ＬＣに基づいた撮像画像ＰＣを生成し、これを画像処理部１０へ供給するようになされている。このとき撮像画像ＰＣは、撮像点ＱＣを中心とした撮像範囲ＡＣの画像を表している。

画像処理部１０は、画像データに対し種々の処理を施し得るようになされており、画像を記憶する記憶部１１、画像の合成処理を行う合成処理部１２及び気泡ＢＢの箇所を判別する気泡箇所判別部１３により構成されている。

記憶部１１は、撮像画像ＰＣ等の画像を記憶するようになされている。合成処理部１２は、複数の画像における指定された範囲同士を繋ぎ合わせて１枚の画像に合成する合成処理を行い得るようになされている。気泡箇所判別部１３は、画像データにおける気泡ＢＢの箇所を判別するようになされている（詳しくは後述する）

画像処理部１０は、合成処理部１２により複数の撮像画像ＰＣを基に合成処理を行うことにより、生体組織画像ＰＲを生成し、これを図示しない外部機器へ出力する。

このように画像生成装置１は、撮像部８により撮像した撮像画像ＰＣを基に生体組織画像ＰＲを生成するようになされている。

［１−３．生体組織画像の生成］
ところで病理スライドガラス１００の包埋材１０３には、上述したように気泡ＢＢが含まれる場合がある（図３（Ａ）及び（Ｂ））。このとき病理スライドガラス１００では、上述したように、当該気泡ＢＢが無い場合と対比して、カバーガラス１０４の上面１０４Ａから生体組織１０２までの光路長が約５［μｍ］相違する。

このことは、画像生成装置１において、焦点ＦＣを生体組織１０２に合わせる最適な撮像レンズ５の位置（以下これを合焦位置と呼ぶ）が、包埋材１０３内に気泡ＢＢが有る場合と無い場合とで、約５［μｍ］相違することを意味している。

また第１の実施の形態では、上述したように、カバー距離ＤＣが一定であると仮定している。このため画像生成装置１は、いずれか１カ所の撮像点ＱＣにおいて撮像レンズ５の焦点ＦＣを生体組織１０２に合わせておけば、すべての撮像点ＱＣにおいて焦点ＦＣを生体組織１０２に合わせることが可能となる。

そこで画像生成装置１は、事前の測定作業等により、包埋材１０３内に気泡ＢＢが無い場合の合焦位置（以下これを標準位置Ｚ１と呼ぶ）と、当該気泡ＢＢが有る場合の合焦位置（以下これを別位置Ｚ２と呼ぶ）とを予め設定し、所定の記憶部に記憶している。

ところで画像生成装置１は、撮像画像ＰＣを生成する前の段階では、気泡ＢＢの有無や形成されている箇所について知ることができない。

そこで画像生成装置１は、各撮像点ＱＣについて、撮像レンズ５を標準位置Ｚ１に移動させて標準撮像画像ＰＣ１を生成すると共に、当該撮像レンズ５を別位置Ｚ２に移動させて別撮像画像ＰＣ２も生成するようになされている。

具体的に画像生成装置１は、駆動制御部３を介してＸＹステージ４における可動ステージ４Ａの位置を制御することにより、撮像レンズ５の光軸上に各撮像点ＱＣを順次位置させながら、標準撮像画像ＰＣ１及び別撮像画像ＰＣ２を順次生成する。

このとき画像処理部１０は、各撮像点ＱＣの位置を表す位置情報と対応づけて、標準撮像画像ＰＣ１及び別撮像画像ＰＣ２をそれぞれ記憶部１１に記憶させる。

画像処理部１０は、全ての撮像点ＱＣについて標準撮像画像ＰＣ１及び別撮像画像ＰＣ２を取得すると、合成処理部１２により、全ての標準撮像画像ＰＣ１を繋ぎ合わせる結合処理を行い、図６（Ａ）に示す標準画像Ｐ１を生成する。

このとき標準画像Ｐ１は、気泡ＢＢが無い部分については、撮像レンズ５の焦点ＦＣが生体組織１０２に合うため鮮明になるものの、気泡ＢＢが有る部分については、当該焦点ＦＣが生体組織１０２に合わないためぼやけた状態となる。

また画像処理部１０は、合成処理部１２により、全ての別撮像画像ＰＣ２を繋ぎ合わせる結合処理を行い、図６（Ｂ）に示す別画像Ｐ２を生成する。

このとき別画像Ｐ２は、標準画像Ｐ１の場合と反対に、気泡ＢＢが有る部分については、焦点ＦＣが生体組織１０２に合うため鮮明になるものの、気泡ＢＢが無い部分については、当該焦点ＦＣが生体組織１０２に合わないためぼやけた状態となる。

次に画像処理部１０は、気泡箇所判別部１３により、標準画像Ｐ１を基に、包埋材１０３に気泡ＢＢが含まれているか否かを判定すると共に、当該気泡ＢＢが存在する測定点ＱＭを識別し、その位置を表す情報を気泡情報として統括制御部２へ供給する。

一般に、標準画像Ｐ１において、気泡ＢＢが形成されていれば、その境界線は必ず閉じた領域を形成することになる。また包埋材１０３と気泡ＢＢとの境界線は、その太さがほぼ一様となることが知られている。

さらに包埋材１０３は、液状のときに気泡ＢＢとの境界面で表面張力が作用するため、当該気泡ＢＢとの境界線における曲率が比較的大きくなる。また撮像レンズ５の焦点ＦＣが生体組織１０２に合っていない場合、一般に撮像画像ＤＣはぼやけた画像となる。このようにぼやけた画像は、鮮鋭度が低いため、周波数成分が低くなる傾向にある。

そこで気泡箇所判別部１３は、標準画像Ｐ１において、閉じた領域ＡＢを形成する曲線ＮＢに関し所定の条件が満たされる場合に、当該曲線ＮＢを境界線として、領域ＡＢに渡って気泡ＢＢが存在すると判別するようになされている。

この条件は、［条件１］閉じた領域ＡＢを形成する曲線ＮＢが存在し、［条件２］曲線ＮＢの線幅が所定範囲内に収まり、［条件３］曲線ＮＢの曲率が所定値以下であり、［条件４］領域ＡＢ内で画像の周波数成分が領域ＡＢ外と大きく相違すること、である。

続いて画像処理部１０は、合成処理部１２により、標準画像Ｐ１における領域ＡＢの範囲外の部分と別画像Ｐ２における領域ＡＢの範囲内の部分とを合成することにより、図６（Ｃ）に示す生体組織画像ＰＲを生成する。

この生体組織画像ＰＲは、標準画像Ｐ１において気泡ＢＢの存在により鮮明な画像が得られなかった部分（すなわち領域ＡＢの範囲内）を、別画像Ｐ２において鮮明な画像が得られている対応部分に置き換えて補完した画像となっている。

具体的に画像生成装置１の統括制御部２は、図７に示すフローチャートに従い、標準撮像画像ＰＣ１及び別撮像画像ＰＣ２を基に、生体組織画像ＰＲを生成するようになされている。

すなわち統括制御部２は、図示しない操作部や外部機器等から所定の画像生成命令を取得すると、画像生成処理手順ＲＴ１を開始し、ステップＳＰ１へ移る。

ステップＳＰ１において統括制御部２は、駆動制御部３を介してＸＹステージ２０の可動ステージ２０Ａを適宜移動させながら、各撮像点ＱＣについて標準撮像画像ＰＣ１及び別撮像画像ＰＣ２をそれぞれ生成し、次のステップＳＰ２へ移る。

ステップＳＰ２において統括制御部２は、画像処理部１０の合成処理部１２により複数の標準撮像画像ＰＣ１を結合して１枚の標準画像Ｐ１を生成し、また複数の別撮像画像ＰＣ２を結合して１枚の別画像Ｐ２を生成して、次のステップＳＰ３へ移る。

ステップＳＰ３において統括制御部２は、画像処理部１０の気泡箇所判別部１３により、標準画像Ｐ１に、曲線ＮＢにより閉じられた領域ＡＢが有るか否かを判定する。ここで肯定結果が得られると、このことは［条件１］が満たされることを表しており、このとき統括制御部２は次のステップＳＰ４へ移る。

ステップＳＰ４において統括制御部２は、画像処理部１０の気泡箇所判別部１３により、標準画像Ｐ１における曲線ＮＢの線幅が所定範囲内（例えば３画素以上７画素以下等）であるか否かを判定する。ここで肯定結果が得られると、このことは［条件２］が満たされることを表しており、このとき統括制御部２は次のステップＳＰ５へ移る。

ステップＳＰ５において統括制御部２は、画像処理部１０の気泡箇所判別部１３により、曲線ＮＢの曲率が所定値以下か否かを判定する。ここで肯定結果が得られると、このことは［条件３］が満たされることを表しており、このとき統括制御部２は次のステップＳＰ６へ移る。

ステップＳＰ６において統括制御部２は、画像処理部１０の気泡箇所判別部１３により、領域ＡＢ内と領域ＡＢ外とで、標準画像Ｐ１の周波数成分が大きく相違するか否かを判定する。ここで肯定結果が得られると、このことは［条件１］〜［条件４］が全て満たされることを表しており、このとき統括制御部２は次のステップＳＰ７へ移る。

ステップＳＰ７において統括制御部２は、画像処理部１０の合成処理部１２により、標準画像Ｐ１における領域ＡＢの範囲外の部分と別画像Ｐ２における領域ＡＢの範囲内の部分とを合成することにより、生体組織画像ＰＲ（図６（Ｃ））を生成する。その後統括制御部２は、ステップＳＰ９へ移って画像生成処理手順ＲＴ１を終了する。

また、ステップＳＰ３〜６において否定結果が得られた場合、上述した［条件１］〜［条件４］のうち１つ以上が満たされていないことを表している。このとき統括制御部２は、標準画像Ｐ１に気泡ＢＢは存在しないものと判断し、次のステップＳＰ８へ移る。

ステップＳＰ８において統括制御部２は、標準画像Ｐ１をそのまま生体組織画像ＰＲとし、その後ステップＳＰ９へ移って画像生成処理手順ＲＴ１を終了する。

このように画像処理部１０は、統括制御部２の制御に基づき、標準画像Ｐ１から気泡ＢＢが形成されている領域ＡＢを判別し、当該領域ＡＢの画像を別画像Ｐ２と置き換えることにより、生体組織画像ＰＲを生成するようになされている。

［１−４．動作及び効果］
以上の構成において、画像生成装置１は、各撮像点ＱＣについて、撮像レンズ５を標準位置Ｚ１に移動させて標準撮像画像ＰＣ１を生成すると共に、当該撮像レンズ５を別位置Ｚ２に移動させて別撮像画像ＰＣ２を生成し、画像処理部１０へ供給する。

画像処理部１０は、合成処理部１２により全ての標準撮像画像ＰＣ１を繋ぎ合わせる結合処理を行い、標準画像Ｐ１（図６（Ａ））を生成する。また画像処理部１０は、合成処理部１２により全ての別撮像画像ＰＣ２を繋ぎ合わせる結合処理を行い、別画像Ｐ２（図６（Ｂ））を生成する。

続いて画像処理部１０は、標準画像Ｐ１を基に、気泡箇所判別部１３により包埋材１０３に気泡ＢＢが含まれているか否かを判定する。ここで画像処理部１０は、包埋材１０３に気泡ＢＢが含まれていた場合、合成処理部１２により標準画像Ｐ１を別画像Ｐ２に置き換えて生体組織画像ＰＲ（図６（Ｃ））を生成する。

これにより画像生成装置１は、標準画像Ｐ１の一部が気泡ＢＢの存在により不鮮明であったとしても、ほぼ全体が鮮明な生体組織画像ＰＲを生成することができる。

ここで病理スライドガラス１００では、包埋材１０３の厚さが約１０［μｍ］の場合、包埋材１０３の表面張力等の作用により、気泡ＢＢがあるときの合焦位置が、当該気泡ＢＢがないときの合焦位置に対し一様に約５［μｍ］相違する（図３（Ａ））。

このため、標準位置Ｚ１で撮像した標準画像ＰＣ１において気泡ＢＢの影響により不鮮明であった部分については、当該標準位置Ｚ１から約５［μｍ］離れた別位置Ｚ２で撮像した別画像ＰＣ２において鮮明に表れる。

画像生成装置１は、この関係を利用して、標準画像ＰＣ１において気泡ＢＢの箇所を特定し、当該気泡ＢＢの部分のみを別画像ＰＣ２に置き換えるだけで、気泡ＢＢの有無や位置に拘わらずほぼ全体が鮮明な生体組織画像ＰＲを得ることができる。

このとき画像生成装置１は、標準画像ＰＣ１及び別画像ＰＣ２といった２種類の画像を合成するだけで良い。このため画像生成装置１は、各撮像点ＱＣにおいて２枚の撮像画像を生成するのみで良く、撮像レンズ５のＺ方向への移動等、撮像処理に要する時間を必要最小限に抑えることができる。

また画像生成装置１は、標準画像ＰＣ１から気泡ＢＢの有無及びその位置を判別することができるので、当該気泡ＢＢの有無及びその位置を判別するための光学部品等を別途設ける必要がなく、装置全体を簡易に構成することができる。

このとき画像処理部１０の気泡箇所判定部１３は、［条件１］〜［条件４］を組み合わせることにより、気泡ＢＢを精度良く判別することができるので、当該気泡ＢＢの誤判別により生体組織画像ＰＲを却って不鮮明にしてしまう危険性が極めて低い。

この結果、画像生成装置１により生成された生体組織画像ＰＲを用いることにより、診断等において気泡ＢＢの存在により生体組織１０２を正しく観察できない、といった問題を未然に防止することができる。これにより、病理スライドガラス１００を撮像し直して生体組織画像ＰＲを生成し直し、あるいは他の病理スライドガラス１００を用いて別途生体組織画像ＰＲを新たに生成する、といった手間の発生を抑えることができる。

さらに画像合成部１２は、生体組織画像ＰＲに曲線ＮＢを敢えて残したままとしている。これにより生体組織画像ＰＲは、例えば当該曲線ＮＢを消去した場合にその消去痕の画像が不自然となり診断等に悪影響を与えてしまう恐れが無い。また生体組織画像ＰＲは、気泡ＢＢに相当する部分の画像を合成したことを積極的に通知することができ、当該合成が行われたことを認識させた上で診断等を行わせることができる。

以上の構成によれば、画像生成装置１は、各撮像点ＱＣについて、標準位置Ｚ１及び別位置Ｚ２における標準撮像画像ＰＣ１及び別撮像画像ＰＣ２をそれぞれ繋ぎ合わせることにより、標準画像Ｐ１と別撮像画像ＰＣ２とを生成する。また画像生成装置１は、標準画像Ｐ１を基に、包埋材１０３に気泡ＢＢが含まれているか否かを判定し、当該気泡ＢＢが含まれていた部分について、標準画像Ｐ１を別画像Ｐ２に置き換えて生体組織画像ＰＲを生成する。これにより画像生成装置１は、ほぼ全体が鮮明な生体組織画像ＰＲを生成することができる。

＜２．第２の実施の形態＞
第２の実施の形態では、第１の実施の形態と同様、病理スライドガラス１００を撮像対象とするため、当該病理スライドガラス１００の構成については説明を省略する（図１〜図３）。

ただし第２の実施の形態では、カバー距離ＤＣが一定ではなく、部分ごとに相違すると仮定する。

そこで第２の実施の形態では、図８に示すように、第１の実施の形態と同様の画像生成装置１と、焦点位置検出装置２１とにより構成される画像生成システム２０により、生体組織画像ＰＲを生成するようになされている。

焦点位置検出装置２１は、病理スライドガラス１００において所定間隔ごとに設定された測定点ＱＭ（図５）について、標準位置Ｚ１及び別位置Ｚ２をそれぞれ検出するようになされている。

因みに病理スライドガラス１００では、例えば撮像範囲ＡＣが約１［ｍｍ］四方とされ、これに応じて撮像点ＱＣも約１［ｍｍ］間隔で配置され、また測定点ＱＭが約２５０［μｍ］間隔で配置されるようになされている。

焦点位置検出装置２１は、標準位置Ｚ１及び別位置Ｚ２を表す情報と測定点ＱＭを表す情報とを対応付けて焦点情報ＩＦとし、これを画像生成装置１へ供給するようになされている。

これに応じて画像生成装置１は、焦点情報ＩＦを基に撮像レンズ５の位置を制御しながら標準撮像画像ＰＣ１及び別撮像画像ＰＣ２を順次撮像し、最終的に生体組織画像ＰＲを生成するようになされている。

［２−１．焦点位置検出装置の構成］
焦点情報生成装置２１は、図９に示すように、統括制御部２２により全体を統括制御するようになされている。

統括制御部２２は、図示しないＣＰＵと、各種プログラム等が格納されるＲＯＭと、当該ＣＰＵのワークメモリとして用いられるＲＡＭとによって構成されている。

焦点情報ＩＦを生成する場合、統括制御部２２は、レーザダイオード等でなる光源３１から所定波長の発散光でなる光ビームＬＭを出射させ、これをコリメータレンズ３２により平行光に変換させて偏光ビームスプリッタ（ＰＢＳ）３３へ入射させる。

偏光ビームスプリッタ３３は、光の偏光方向に応じて透過率が相違する反射透過面３３Ｓにおいて、Ｐ偏光の光ビームをほぼ全て透過すると共に、Ｓ偏光の光ビームをほぼ全て反射するようになされている。

実際上偏光ビームスプリッタ３３は、反射透過面３３Ｓにより光ビームＬＭをほぼ全て透過させ、１／４波長板３４へ入射させる。

１／４波長板３４は、光を直線偏光と円偏光との間で相互変換し得るようになされており、例えばＰ偏光でなる光ビームＬＭを左円偏光に変換し、対物レンズ３５へ入射させる。

対物レンズ３５は、画像生成装置１の撮像レンズ５と同様の光学的特性を有しており、光ビームＬＭを集光して病理スライドガラス１００へ照射する。また対物レンズ３５は、統括制御部２２及び駆動制御部２３の制御の下で、アクチュエータ３６により光ビームＬＭの光軸に沿った方向（以下これをＺ方向と呼ぶ）に移動され、これに伴い光ビームＬＭの焦点ＦＭをＺ方向に移動し得るようになされている。因みに対物レンズ３５のＺ方向に関する位置は、撮像レンズ５のＺ方向に関する位置と対応するようになされている。

ＸＹステージ３０は、画像生成装置１のＸＹステージ４と同様に構成されている。すなわちＸＹステージ３０は、病理スライドガラス１００を所定の可動ステージ３０Ａに固定した状態で、当該可動ステージを図の左右方向（以下Ｘ方向と呼ぶ）及び手前又は奥へ向かう方向（以下Ｙ方向と呼ぶ）へ移動し得るようになされている。

実際上統括制御部２２は、測定点ＱＭの位置に応じた測定点位置情報を有しており、これを駆動制御部２３へ供給する。これに応じて駆動制御部２３は、測定点位置情報を基に位置制御信号を生成してＸＹステージ３０へ供給することにより、病理スライドガラス１００が固定された可動ステージ３０ＡをＸ方向及びＹ方向へ移動させる。

この結果ＸＹステージ３０は、光ビームＬＭの光軸（図中一点鎖線で示す）を、病理スライドガラス１００における測定点ＱＭに合わせることができる。

光ビームＬＭは、病理スライドガラス１００において反射され、反射光ビームＬｒとなる。このとき反射光ビームＬｒは、円偏光における回転方向が反転されるため、右円偏光となる。反射光ビームＬｒは、光ビームＬＭと反対方向へ進行し、対物レンズ３５により平行光に変換され、１／４波長板３４へ入射される。

１／４波長板３４は、右円偏光でなる反射光ビームＬｒをＳ偏光（すなわち直線偏光）に変換し、偏光ビームスプリッタ３３へ入射させる。

偏光ビームスプリッタ３３は、反射透過面３３ＳにおいてＳ偏光でなる反射光ビームＬｒをほぼ全て反射し、ビームスプリッタ（ＢＳ）４１へ入射させる。

ビームスプリッタ４１は、反射透過面３１Ｓにより光ビームを約半分の割合で透過すると共に残りの約半分を反射するようになされている。実際上ビームスプリッタ４１は、反射光ビームＬｒを約半分の割合で透過することにより第１反射光ビームＬｒ１とし、これをマルチレンズ４２へ入射させる。

マルチレンズ４２は、第１反射光ビームＬｒ１を集光すると共に非点収差を持たせ、第１受光器４３へ照射する。

第１受光器４３は、図１０に示すように、格子状に配置された４つの受光領域４３Ａ、４３Ｂ、４３Ｃ及び４３Ｄを有しており、その中心点３３Ｑに第１反射光ビームＬｒ１の光軸が位置するよう取付位置等が調整されている。

第１受光器４３は、各受光領域４３Ａ、４３Ｂ、４３Ｃ及び４３Ｄにより第１反射光ビームＬｒ１の一部をそれぞれ受光し、その受光量に応じた第１受光信号Ｓ１Ａ、Ｓ１Ｂ、Ｓ１Ｃ及びＳ１Ｄをそれぞれ生成して信号処理部２４へ供給するようになされている。

またビームスプリッタ４１は、反射光ビームＬｒを約半分の割合で反射することにより第２反射光ビームＬｒ２とし、これを乱反射成分除去部４４へ入射させる。

乱反射成分除去部４４は、集光レンズ４５、ピンホール板４６及びコリメータレンズ４７により構成されている。

集光レンズ４５は、第２反射光ビームＬｒ２を集光し、ピンホール板４６へ照射する。ピンホール板４６は、第２反射光ビームＬｒ２の焦点近傍に、当該第２反射光ビームＬｒ２の光軸を中心とした微小な通過孔４６Ｈが設けられている。

第２反射光ビームＬｒ２は、集光レンズ４５により集光され、ピンホール板４６の通過孔４６Ｈを通過した後、発散光となりコリメータレンズ４７へ入射される。このとき第２反射光ビームＬｒ２のうち集光レンズ４５により集光された焦点近傍以外の部分は、ピンホール板４６により遮断されることになる。

コリメータレンズ４７は、第２反射光ビームＬｒ２を平行光に変換し、集光レンズ４８へ入射させる。集光レンズ４８は、第２反射光ビームＬｒ２を集光し、第２受光器４９へ入射させる。

第２受光器４９は、第２反射光ビームＬｒ２の光量に応じた受光信号Ｓ２を生成し、これを信号処理部２４へ供給するようになされている。

信号処理部２４は、後述する焦点情報生成処理を行うことにより、測定点ＱＭにおける焦点情報ＩＦを生成するようになされている。

このように焦点情報生成装置２１では、光ビームＬＭの光軸を測定点ＱＭに合わせて病理スライドガラス１００に照射し、このとき生じる反射光ビームＬｒを第１反射光ビームＬｒ１及び第２反射光ビームＬｒ２に分離する。その後焦点情報生成装置２１は、第１反射光ビームＬｒ１については非点収差を持たせて受光し、第２反射光ビームＬｒ２についてはピンホール板４６の通過孔４６Ｈを通過させた上で受光するようになされている。

［２−２．焦点情報の生成］
次に、各測定点ＱＭについての焦点情報ＩＦの生成について説明する。

［２−２−１．気泡が含まれていない場合］
統括制御部２２は、第１受光器４３及び第２受光器４９によりそれぞれ第１受光信号Ｓ１Ａ〜Ｓ１Ｄ及びＳ２を生成させながら、アクチュエータ３６により対物レンズ３５を病理スライドガラス１００の遠方から近づけるようにＺ方向へ一定速度で移動させていく。

このとき信号処理部２４は、第１受光器４３により生成された第１受光信号Ｓ１Ａ〜Ｓ１Ｄを基に、次に示す（１）式に従い和信号ＳＳを生成し、これを統括制御部２２へ供給する。この和信号ＳＳは、第１反射光ビームＬｒ１の全光量を表している。

ここで、図２（Ａ）及び（Ｂ）に示したように、包埋材１０３に気泡ＢＢが含まれていない場合を想定する。このとき和信号ＳＳは、図１１（Ａ）に示すように、対物レンズ３５のＺ方向に関する位置に応じて値が変動する。

ここでアクチュエータ３６は、一定速度で対物レンズ３５を移動させている。このため図１１における横軸は、時間軸を表すと共に、Ｚ方向における対物レンズ３５の相対的な位置、すなわちＺ方向における焦点ＦＭの相対的な位置をも表している。

図１１（Ａ）から分かるように、和信号ＳＳは、位置Ｚ１１を中心に比較的大きな信号レベルのピーク波形を形成しており、また位置Ｚ１３を中心に中程度の信号レベルでなるピーク波形を形成している。

この和信号ＳＳにおけるピークは、光ビームＬＭが比較的高い反射率で反射されていること、すなわち当該光ビームＬＭの焦点ＦＭが、互いに屈折率が相違する２種類の物質同士の境界面に位置していることを表している。

病理スライドガラス１００において、カバーガラス１０４の屈折率（約１．５）は、上面１０４Ａにおいて、周囲に存在する空気の屈折率（約１）と大きく相違している。このことから、和信号ＳＳにおける位置Ｚ１１を中心としたピークは、このとき光ビームＬＭの焦点ＦＭがカバーガラス１０４の上面１０４Ａに位置していることを表している。

また位置Ｚ１３を中心としたピークは、光ビームＬＭが比較的低い反射率で反射されていることを表している。すなわちこのピークは、このとき光ビームＬＭの焦点ＦＭが、光の透過率が比較的低くその一部を反射させるような物質内、すなわち生体組織１０２内に位置していることを表している。

因みにカバーガラス１０４と包埋材１０３との屈折率は、いずれも約１．５でほぼ同等となっている。このため光ビームＬＭは、カバーガラス１０４と包埋材１０３との境界面では殆ど反射されない。

このように和信号ＳＳでは、対物レンズ３５が位置Ｚ１１にあり光ビームＬＭの焦点ＦＭがカバーガラス１０４の上面１０４Ａに位置するときに大きなピークが表れる。また和信号ＳＳでは、対物レンズ３５が位置Ｚ１３にあり焦点ＦＭが生体組織１０２内にあるときに中程度のピークが表れる。

また信号処理部２４は、第１受光器４３において対角状に配置された受光領域による受光信号同士をそれぞれ加算した値同士の対角差分値として、次に示す（２）式により差信号ＳＤを生成し、これを統括制御部２２へ供給する。

差信号ＳＤは、（２）式において、光ディスク装置における非点収差法に基づいたフォーカスエラー信号と同様の算出原理により算出されている。

この差信号ＳＤは、図１１（Ａ）と対応する図１１（Ｂ）に示すように、和信号ＳＳと同様、対物レンズ３５のＺ方向に関する位置に応じて値が変動する。

図１１（Ｂ）から分かるように、差信号ＳＤは、位置Ｚ１１を中心に比較的大きな信号レベルでなる正及び負のピークが連続して表れる、いわゆるＳ字曲線を形成している。

差信号ＳＤのＳ字曲線は、位置Ｚ１１を挟むように負のピーク及び正のピークが表れており、当該位置Ｚ１１において値「０」となっている。これは、対物レンズ３５が位置Ｚ１１にあるとき、光ビームＬＭの焦点ＦＭがカバーガラス１０４の上面１０４Ａに位置していることを表している。

また差信号ＳＤは、位置Ｚ１３近傍における値が変動している。これは、光ビームＬＭが比較的低い反射率でランダムに反射されていることを表している。このとき光ビームＬＭの焦点ＦＭは、光の透過率が比較的低くその一部を反射させるような物質内、すなわち生体組織１０２内に位置していると考えられる。

ところで、焦点情報生成装置２１において、光ビームＬＭがカバーガラス１０４の上面１０４Ａや下面１０４Ｂのように一様な面により反射された場合、当該光ビームＬＭはほぼ一様に反射される。このため反射光ビームＬｒは、乱反射成分が殆ど含まれない。

また焦点情報生成装置２１では、ビームスプリッタ４１において、反射光ビームＬｒの光量をほぼ２等分するように第１反射光ビームＬｒ１及び第２反射光ビームＬｒ２に分離している。このため、ビームスプリッタ４１から出射された直後の第１反射光ビームＬｒ１及び第２反射光ビームＬｒ２の光量は、ほぼ等しい。

第２反射光ビームＬｒ２は、集光レンズ４５により集光された際、乱反射成分が殆ど含まれないことから、そのほぼ全ての成分が焦点に集光される。このため当該第２反射光ビームＬｒ２は、ピンホール板４６の通過孔４６Ｈにより殆ど遮断されることなく通過する。

この結果、第２受光器４９に到達する第２反射光ビームＬｒ２の光量は、第１受光器４３に到達する第１反射光ビームＬｒ１の光量とほぼ等しくなる。

一方、生体組織１０２は、当該生体組織１０２に含まれる細胞等の構造が一様でないため、光ビームＬＭの一部を乱反射することになる。

従って、生体組織１０２により反射された反射光ビームＬｒには、乱反射成分が含まれる。ビームスプリッタ４１は、この乱反射成分含んだ反射光ビームＬｒを第１反射光ビームＬｒ１及び第２反射光ビームＬｒ２に分離する。すなわち第１反射光ビームＬｒ１及び第２反射光ビームＬｒ２にも乱反射成分が含まれる。

第１受光器４３は、乱反射成分が含まれる第１反射光ビームＬｒ１を途中で減衰若しくは遮断されることなく受光する。

一方、第２反射光ビームＬｒ２に含まれる乱反射成分は、集光レンズ４５により集光された際に、ある程度は集光されるものの、その焦点近傍にはかならずしも集光されない。このため第２反射光ビームＬｒ２は、乱反射成分除去部４４のピンホール板４６により乱反射成分が遮断される。

この結果、第２受光器４９に到達する第２反射光ビームＬｒ２は、乱反射成分が除去されたものとなる。これに伴い第２受光器４９に到達する第２反射光ビームＬｒ２の光量は、第１受光器４３に到達する第１反射光ビームＬｒ１の光量よりも少なくなる。

このため、包埋材１０３に気泡ＢＢが含まれていない病理スライドガラス１００に近づけるよう対物レンズ３５をＺ方向へ移動させた場合、第２受光器４９により生成される第２受光信号Ｓ２は、図１１（Ｃ）のような信号波形となる。

この図１１（Ｃ）において、第２信号Ｓ２は、位置Ｚ１１を中心に図１１（Ａ）と同程度の信号レベルでなるピーク波形を形成しているものの、位置Ｚ１３を中心に、図１１（Ａ）よりも低い信号レベルでなる小規模なピーク波形を形成する。

すなわち対物レンズ３５が位置Ｚ１１にあるとき、光ビームＬＭの焦点ＦＭがカバーガラス１０４の上面１０４Ａに位置しており、反射光ビームＬｒには乱反射成分が殆ど含まれない。このため第２信号Ｓ２は、和信号ＳＳとほぼ同等の信号レベルとなっている。

一方対物レンズ３５が位置Ｚ１３にあるとき、光ビームＬＭの焦点ＦＭが生体組織１０２内に位置しており、反射光ビームＬｒには乱反射成分がある程度含まれる。このため第２信号Ｓ２は、和信号ＳＳよりも低い信号レベルとなっている。

ここで、次に示す（３）式のように、第２信号Ｓ２を和信号ＳＳで除算した値は、反射光ビームＬｒにおける乱反射以外の成分（以下これを一様反射成分と呼ぶ）の比率を表すことになる。以下この比率を一様反射率ＲＥと呼ぶ。

この一様反射率ＲＥは、図１１（Ｄ）に示すように、光ビームＬＭが一様な境界面で反射された場合には比較的高い値となり、光ビームＬＭの一部が乱反射された場合、すなわち光ビームＬＭの焦点ＦＭが生体組織１０２内にあるときに比較的低い値となる。

そこで信号処理部２４は、この（３）式に従い一様反射率ＲＥを算出し、統括制御部２２へ供給する。

統括制御部２２は、和信号ＳＳが所定の閾値ＴＨ２（図１１（Ａ））よりも大きく、且つ一様反射率ＲＥが所定の閾値ＴＨ３（図１１（Ｄ））よりも小さいときに、光ビームＬＭの焦点ＦＭが生体組織１０２内に合っていると判断するようになされている。因みに閾値ＴＨ２及びＴＨ３は、実験結果等を基にそれぞれ適宜定められた値である。

統括制御部２２は、このときの対物レンズ３５の位置Ｚ１３を、包埋材１０３に気泡ＢＢが含まれていないときに撮像レンズ５の焦点ＦＣを生体組織１０２に合わせ得る標準位置Ｚ１とする。

［２−２−２．気泡が含まれる場合の各信号の波形］
一方、包埋材１０３に気泡ＢＢが含まれていた場合（図３（Ａ）及び（Ｂ））、和信号ＳＳ及び差信号ＳＤの波形は、図１１（Ａ）及び（Ｂ）とそれぞれ対応する図１２（Ａ）及び（Ｂ）に示すように、気泡ＢＢが含まれていない場合とは異なる形状となる。

また第２信号Ｓ２及び一様反射率ＲＥの波形も、図１１（Ｃ）及び（Ｄ）とそれぞれ対応する図１２（Ｃ）及び（Ｄ）に示すように、気泡ＢＢが含まれていない場合とは異なる形状となる。

図１２（Ａ）における和信号ＳＳは、位置Ｚ１１と対応する位置Ｚ２１近傍において、図１１（Ａ）の場合と同様の波形となっている。しかしながら和信号ＳＳは、図１１（Ａ）と異なり、位置Ｚ２２近傍において位置Ｚ２１近傍と同様のピーク波形を形成している。また和信号ＳＳは、位置Ｚ２３近傍において位置Ｚ２１近傍におけるピークよりもやや小さいピーク波形を形成し、さらに一部の信号レベルが変動している。

位置Ｚ２２の近傍に形成されたピークは、カバーガラス１０４の下面１０４Ｂと気泡ＢＢとの境界面に起因したものと考えられる（図３（Ａ））。また位置Ｚ２３の近傍に形成されたピークは、気泡ＢＢと生体組織１０２との境界面に起因したものと考えられる。

すなわち包埋材１０３に気泡ＢＢが含まれていた場合、和信号ＳＳには、位置Ｚ２２及びＺ２３において、当該気泡ＢＢが含まれていない場合には発生しないピークがそれぞれ表れる。

また図１２（Ｂ）における差信号ＳＤの波形は、位置Ｚ２１近傍において図１１（Ｂ）における位置Ｚ１１の近傍と同様の形状である。しかしながら差信号ＳＤの波形は、図１１（Ｂ）と異なり、位置Ｚ２２近傍及び位置Ｚ２３近傍において、それぞれ位置Ｚ２１近傍と同様のＳ字曲線を形成している。

すなわち包埋材１０３に気泡ＢＢが含まれていた場合、差信号ＳＤには、位置Ｚ２２及びＺ２３において、当該気泡ＢＢが含まれていない場合には発生しないＳ字曲線がそれぞれ表れる。

さらに図１２（Ｃ）における第２信号Ｓ２の波形は、位置Ｚ２１、Ｚ２２及びＺ２３において和信号ＳＳとほぼ同形状となっているものの、位置Ｚ２３における変動部分の信号レベルがやや低くなっている。

すなわち対物レンズ３５が位置Ｚ２１にあるとき、光ビームＬＭの焦点ＦＭがカバーガラス１０４の上面１０４Ａに位置しており、反射光ビームＬｒには乱反射成分が殆ど含まれない。このため第２信号Ｓ２は、和信号ＳＳとほぼ同等の信号レベルとなっている。

一方対物レンズ３５が位置Ｚ２３近傍にあるとき、光ビームＬＭの焦点ＦＭが生体組織１０２内に位置しており、反射光ビームＬｒには乱反射成分がある程度含まれる。この乱反射成分は乱反射成分除去部４４により除去されるため、第２信号Ｓ２は、和信号ＳＳよりも低い信号レベルとなっている。これに応じて一様反射率ＲＥ（図１２（Ｄ））の波形は、位置Ｚ２３の近傍において、位置Ｚ２１及びＺ２２における値よりも低くなるときがある。

そこで統括制御部２２は、まず差信号ＳＤ（図１２（Ｂ））が位置Ｚ２１以外の位置Ｚ２２及びＺ２３においてＳ字曲線を形成する場合、気泡ＢＢが存在すると判定する。

続いて統括制御部２２は、和信号ＳＳが閾値ＴＨ２（図１２（Ａ））よりも大きく、且つ一様反射率ＲＥが閾値ＴＨ３（図１２（Ｄ））よりも小さくなる位置を位置Ｚ２３とする。このとき統括制御部２２は、当該位置Ｚ２３を、包埋材１０３に気泡ＢＢが含まれているときに撮像レンズ５の焦点ＦＣを生体組織１０２に合わせ得る別位置Ｚ２とする。

［２−２−３．焦点位置検出処理手順］
実際上統括制御部２２は、図１３に示すフローチャートに従って焦点位置検出処理を行うようになされている。

すなわち統括制御部２２は、図示しない操作部からの操作指示等に基づいて焦点位置検出処理手順ＲＴ２を開始し、ステップＳＰ１１へ移る。

ステップＳＰ１１において統括制御部２２は、駆動制御部２３を介してＸＹステージ３０の移動ステージを移動させ、光ビームＬＭの光軸を病理スライドガラス１００の測定点ＱＭに合わせて、次のステップＳＰ１２へ移る。

ステップＳＰ１２において統括制御部２２は、駆動制御部２３を介してアクチュエータ３６により対物レンズ３５をＺ方向に移動させながら、信号処理部２４により和信号ＳＳ及び差信号ＳＤをそれぞれ算出させ、次のステップＳＰ１３へ移る。

ステップＳＰ１３において統括制御部２２は、最初に和信号ＳＳの値が閾値ＴＨ１よりも大きくなるとき又は差信号ＳＤがＳ字曲線を形成するときの対物レンズ３５の位置を位置Ｚ１１とし、次のステップＳＰ１４へ移る。

このとき位置Ｚ１１は、位置Ｚ２１と同一の位置を表しており、光ビームＬＭの焦点ＦＭがカバーガラス１０４の上面１０４Ａに合うような位置となる。

ステップＳＰ１４において統括制御部２２は、和信号ＳＳが閾値ＴＨ２以上となり、且つ一様反射率ＲＥが閾値ＴＨ３未満となる位置Ｚを検出し、次のステップＳＰ１５へ移る。

ステップＳＰ１５において統括制御部２２は、位置Ｚ１１以外で差信号ＳＤにＳ字曲線が表れたか否か、すなわち正負双方のピークが表れたか否かを判定する。ここで否定結果が得られると、このことは測定点ＱＭでは気泡ＢＢを検出できなかったことを表しており、このとき統括制御部２２は次のステップＳＰ１６へ移る。

ステップＳＰ１６において統括制御部２２は、ステップＳＰ１４で検出した位置Ｚを標準位置Ｚ１とし、測定点ＱＭを表す情報と標準位置Ｚ１を表す情報とが対応付けられた焦点情報ＩＦを生成して、次のステップＳＰ１７へ移る。

ステップＳＰ１７において統括制御部２２は、測定点ＱＭに気泡ＢＢが無いと判定し、測定点ＱＭを表す情報と気泡ＢＢが無い旨を表す情報とが対応付けられた気泡情報ＩＢを生成して、次のステップＳＰ２０へ移って焦点位置検出処理手順ＲＴ２を終了する。

一方、ステップＳＰ１５において肯定結果が得られると、このことは測定点ＱＭで気泡ＢＢを検出できたことを表しており、このとき統括制御部２２は次のステップＳＰ１８へ移る。

ステップＳＰ１８において統括制御部２２は、ステップＳＰ１４で検出した位置Ｚを別位置Ｚ２とし、測定点ＱＭを表す情報と別位置Ｚ２を表す情報とが対応付けられた焦点情報ＩＦを生成して、次のステップＳＰ１９へ移る。

ステップＳＰ１９において統括制御部２２は、測定点ＱＭに気泡ＢＢが有ると判定し、測定点ＱＭを表す情報と気泡ＢＢが有る旨を表す情報とが対応付けられた気泡情報ＩＢを生成して、次のステップＳＰ２０へ移って焦点位置検出処理手順ＲＴ２を終了する。

統括制御部２２は、複数の測定点ＱＭについて焦点位置検出処理手順ＲＴ２を実行し、各測定点ＱＭについて焦点情報ＩＦ及び気泡情報ＩＢを生成する。

この気泡情報ＩＢは、例えば図１４に示すように、病理スライドガラス１００において気泡ＢＢがある箇所を特定し得る情報となる。因みに図１４では、気泡ＢＢがない測定点ＱＭを黒い丸印で表し、気泡ＢＢがある測定点ＱＭを白い丸印で表している。

このように統括制御部２２は、和信号ＳＳ及び差信号ＳＤを基に、各測定点ＱＭにおける気泡ＢＢの有無を判定した上で、標準位置Ｚ１又は別位置Ｚ２を検出して焦点情報ＩＦを生成すると共に、気泡情報ＩＢを生成するようになされている。

［２−３．生体組織画像の生成］
上述したように画像生成システム２０では、焦点情報生成装置２１から供給される焦点情報ＩＦ及び気泡情報ＩＢを基に、画像生成装置１により生体組織画像ＰＲを生成するようになされている。

ただし第２の実施の形態では、画像生成装置１の統括制御部２により、各測定点ＱＭについて検出された標準位置Ｚ１及び別位置Ｚ２を基に、各撮像点ＱＣについての標準位置Ｚ１及び別位置Ｚ２をそれぞれ算出するようになされている。

因みに統括制御部２は、例えば撮像範囲ＡＣ（図５）の範囲内に含まれる全ての測定点ＱＭについて検出された標準位置Ｚ１の平均値をとることにより、撮像点ＱＣの標準位置Ｚ１を算出することができる。また統括制御部２は、撮像点ＱＣの別位置Ｚ２についても同様に算出することができる。

また統括制御部２は、気泡情報ＩＢを基に、標準画像Ｐ１に気泡ＢＢが存在するか否かを判定し、また当該気泡ＢＢのおおよその位置を特定した上で、当該標準画像Ｐ１における気泡ＢＢの詳細な位置を検出するようになされている。

具体的に画像生成装置１の統括制御部２は、図７と対応する図１５のフローチャートに従い、標準撮像画像ＰＣ１及び別撮像画像ＰＣ２を基に、生体組織画像ＰＲを生成するようになされている。

すなわち統括制御部２は、図示しない操作部や外部機器等から所定の画像生成命令を取得すると、画像生成処理手順ＲＴ３を開始し、ステップＳＰ２１へ移る。

ステップＳＰ２１において統括制御部２は、焦点情報ＩＦとして取得した測定点ＱＭの標準位置Ｚ１及び別位置Ｚ２を基に、各撮像点ＱＣの標準位置Ｚ１及び別位置Ｚ２をそれぞれ算出し、次のステップＳＰ２２へ移る。

ステップＳＰ２２において統括制御部２２は、駆動制御部３を介してＸＹステージ２０の可動ステージ２０Ａを適宜移動させながら、各撮像点ＱＣについて標準撮像画像ＰＣ１及び別撮像画像ＰＣ２をそれぞれ生成し、次のステップＳＰ２３へ移る。

ステップＳＰ２３において統括制御部２は、画像処理部１０の合成処理部１２により複数の標準撮像画像ＰＣ１を結合して１枚の標準画像Ｐ１を生成し、また複数の別撮像画像ＰＣ２を結合して１枚の別画像Ｐ２を生成して、次のステップＳＰ２４へ移る。

ステップＳＰ２４において統括制御部２は、気泡情報ＩＢを基に、標準画像Ｐ１に気泡ＢＢが含まれるか否かを判定する。ここで肯定結果が得られると、このことは標準画像Ｐ１及び別画像Ｐ２を合成して生体組織画像ＰＲを生成する必要があることを表しており、このとき統括制御部２は次のステップＳＰ２５へ移る。

ステップＳＰ２５において統括制御部２は、気泡情報ＩＢを用い、気泡ＢＢが存在する測定点ＱＭの位置情報を基に、当該気泡ＢＢと包埋材１０３との境界線のおおよその位置
を認識し、次のステップＳＰ２６へ移る。

因みに統括制御部２は、例えば互いに隣接する２つの測定点ＱＭにおいて、一方に気泡ＢＢが有り他方に気泡ＢＢが無い場合、当該２つの測定点ＱＭの間に境界線が存在すると認識することができる。

ステップＳＰ２６において統括制御部２は、認識したおおよその位置を基に、標準画像Ｐ１における詳細な境界線の位置を算出し、次のステップＳＰ２７へ移る。

ステップＳＰ２７において統括制御部２は、画像処理部１０の合成処理部１２により、標準画像Ｐ１における境界線の外側の部分と別画像Ｐ２における境界線の内側の部分とを合成することにより、生体組織画像ＰＲ（図６（Ｃ））を生成する。その後統括制御部２は、ステップＳＰ２９へ移って画像生成処理手順ＲＴ３を終了する。

一方、ステップＳＰ２４において否定結果が得られると、このことは標準画像Ｐ１と別画像Ｐ２とを合成する必要がないことを表している。このとき統括制御部２は、次のステップＳＰ２８へ移る。

ステップＳＰ２８において統括制御部２は、標準画像Ｐ１をそのまま生体組織画像ＰＲとし、その後ステップＳＰ２９へ移って画像生成処理手順ＲＴ３を終了する。

この結果画像生成装置１は、病理スライドガラス１００における合焦位置が一様でなかったとしても、部分ごとの焦点が合った標準画像Ｐ１及び別画像Ｐ２をそれぞれ生成した上で、鮮明な生体組織画像ＰＲを生成することができる。

［２−４．動作及び効果］
以上の構成において、画像生成システム２０では、焦点位置検出装置２１により測定点ＱＭごとに標準位置Ｚ１又は別位置Ｚ２を検出して焦点情報ＩＦを生成すると共に、気泡情報ＩＢを生成する。

これに応じて画像生成装置１は、各測定点ＱＭの標準位置Ｚ１及び別位置Ｚ２を基に各撮像点ＱＣの標準位置Ｚ１及び別位置Ｚ２をそれぞれ求めた上で、標準撮像画像ＰＣ１及び別撮像画像ＰＣ２をそれぞれ生成し、画像処理部１０へ供給する。

画像処理部１０は、合成処理部１２により各撮像点ＱＣにおける標準撮像画像ＰＣ１及び別撮像画像ＰＣ２をそれぞれ繋ぎ合わせる結合処理を行い、標準画像Ｐ１及び別画像Ｐ２をそれぞれ生成する。

続いて画像処理部１０は、標準画像Ｐ１を基に、気泡箇所判別部１３により包埋材１０３に気泡ＢＢが含まれているか否かを判定する。ここで画像処理部１０は、包埋材１０３に気泡ＢＢが含まれていた場合、合成処理部１２により標準画像Ｐ１を別画像Ｐ２に置き換えて生体組織画像ＰＲを生成する。

これにより画像生成システム２０は、標準画像Ｐ１の一部が気泡ＢＢの存在により不鮮明であったとしても、ほぼ全体が鮮明な生体組織画像ＰＲを生成することができる。

ところで包埋材１０３に気泡ＢＢが含まれていた場合、当該気泡ＢＢとカバーガラス１０４又は生体組織１０２との境界面における反射率が比較的高くなる。これに伴い和信号ＳＳ及び差信号ＳＤの値は、気泡ＢＢが含まれていなかった場合に存在しなかったピークやＳ字曲線を形成する（図９（Ａ）及び（Ｂ））。

一方、病理スライドガラス１００において、光ビームＬＭは、生体組織１０２内でのみその一部が乱反射され、他の境界面等では殆ど乱反射されることが無い。このため焦点情報生成装置２では、光ビームＬＭの焦点が生体組織１０２内にあるときのみ、乱反射成分除去部３４により乱反射成分が除去された第２反射光ビームＬｒ２の光量が、第１反射光ビームＬｒ１の光量よりも低下する。

そこで焦点位置検出装置２１は、和信号ＳＳに対する第２信号の比率を表す一様反射率ＲＥを判断指標として用いることにより、光ビームＬＭの焦点ＦＭが生体組織１０２内にある位置Ｚ、すなわち標準位置Ｚ１又は別位置Ｚ２を確実に検出することができる。

特に画像生成装置１は、撮像部８においてＣＭＯＳ型の撮像素子を用いる場合、各画素からの画像データの読出速度が比較的低いため、当該画像データを用いた焦点調整処理を行うと合焦処理に多大な時間を要してしまうと考えられる。

また撮像レンズ５は、例えばＮＡを０．８とした場合、焦点深度が約１［μｍ］のように極めて短くなる。このため画像生成装置１は、当該撮像レンズ５の焦点が生体組織１０２に合った画像を生成するべく、実際の病理スライドガラス１００を用いてカバー距離ＤＭを測定することが望ましい。

これに対し画像生成システム２０では、焦点情報生成装置２１により、実際の病理スライドガラス１００を用いて予め焦点情報ＩＦを生成する。これにより画像生成システム２０では、画像生成装置１において、画像データの読出速度等に左右されることなく、撮像レンズ５の焦点を病理スライドガラス１００における生体組織１０２に確実に合わせることが可能となる。

このとき画像生成装置１は、予め各測定点ＱＭについて標準位置Ｚ１又は別位置Ｚ２が分かっているので、これを基に撮像点ＱＣについての標準位置Ｚ１及び別位置Ｚ２を算出した上で、撮像レンズ５の焦点を短時間で生体組織１０２に合わせることができる。これにより画像生成システム２０は、１枚の病理スライドガラス１００について生体組織画像ＰＲを生成し終えるまでの所要時間を大幅に短縮することができる。

また画像生成装置１は、気泡情報ＩＢを基に、気泡ＢＢの有無及び当該気泡ＢＢと包埋材１０３との境界線のおおよその位置を認識することができる。このため画像生成装置１は、第１の実施の形態と比較して演算処理負荷を大幅に削減でき、短時間で気泡ＢＢの詳細な位置を検出できるので、生体組織画像ＰＲを生成し終えるまでの所要時間を大幅に短縮することができる。

さらに画像生成システム２０の画像生成装置１は、他の点についても、第１の実施の形態における画像生成装置１と同様の作用効果を奏し得る。

以上の構成によれば、画像生成システム２０は、焦点位置検出装置２１により測定点ＱＭごとに標準位置Ｚ１又は別位置Ｚ２を検出する。画像生成装置１は、各撮像点ＱＣについて、標準位置Ｚ１及び別位置Ｚ２における標準撮像画像ＰＣ１及び別撮像画像ＰＣ２をそれぞれ繋ぎ合わせることにより、標準画像Ｐ１と別撮像画像ＰＣ２とを生成する。また画像生成装置１は、包埋材１０３に気泡ＢＢが含まれている部分について、標準画像Ｐ１を別画像Ｐ２に置き換えて生体組織画像ＰＲを生成する。これにより画像生成システム２０は、ほぼ全体が鮮明な生体組織画像ＰＲを生成することができる。

＜３．他の実施の形態＞
なお上述した第１の実施の形態においては、気泡ＢＢが有るときに撮像レンズ５の焦点が生体組織１０２に合う位置を別位置Ｚ２とする場合について述べた。

本発明はこれに限らず、当該別位置Ｚ２については、気泡ＢＢが有るときに少なくとも標準位置Ｚ１よりも撮像レンズ５の焦点が生体組織１０２に合う位置に近づいた位置であれば良い。この場合、当該気泡ＢＢがある部分について、少なくとも標準画像Ｐ１よりも鮮明化された生体組織画像ＰＲを得ることができる。

また上述した第１の実施の形態においては、気泡箇所判別部１３により判別された気泡ＢＢの位置を基に、標準画像Ｐ１及び別画像Ｐ２を合成する場合について述べた。

本発明はこれに限らず、例えば第２の実施の形態と同様に、他の検出装置等により検出された気泡ＢＢの位置を基に、標準画像Ｐ１及び別画像Ｐ２を合成するようにしても良い。

さらに上述した第１の実施の形態においては、標準画像Ｐ１を基に気泡ＢＢの有無及び当該気泡ＢＢの位置を検出するようにした場合について述べた。

本発明はこれに限らず、別画像Ｐ２を基に気泡ＢＢの有無及び当該気泡ＢＢの位置を検出するようにしても良い。第２の実施の形態についても同様である。

また上述した第１の実施の形態においては、［条件１］〜［条件４］の全てを満たす場合に気泡ＢＢが存在すると判定するようにした場合について述べた。

本発明はこれに限らず、例えば［条件１］及び［条件２］を満たす場合等、種々の条件を単独又は組み合わせて用いることにより気泡ＢＢが存在すると判定するようにしても良い。

さらに上述した第１の実施の形態においては、標準位置Ｚ１及び別位置Ｚ２がいずれも既知である場合について述べた。

本発明はこれに限らず、標準位置Ｚ１及び別位置Ｚ２の少なくとも一方について、所定の焦点検出機構等を用いて検出するようにしても良い。

さらに上述した第２の実施の形態では、画像生成装置１と焦点情報生成装置２１とが分離した画像生成システム２０を構成する場合について述べた。

本発明はこれに限らず、例えば画像生成装置１に光源３１、対物レンズ３５、第１受光器４３及び第２受光器４９等を組み込むなどして一体に構成しても良い。

さらに上述した第２の実施の形態においては、焦点情報生成装置２１により、カバー距離ＤＭを表す焦点情報ＩＦ及び気泡ＢＢの有無を表す気泡情報ＩＢの双方を生成するようにした場合について述べた。

本発明はこれに限らず、例えば画像生成装置１において気泡情報生成部１３により気泡ＢＢの位置等を検出する場合に、焦点情報生成装置２１が焦点情報ＩＦのみを生成するようにしても良い。

さらに上述した第２の実施の形態においては、焦点情報生成装置２１の乱反射成分除去部４４を集光レンズ４５、ピンホール板４６及びコリメータレンズ４７により構成し、第２反射光ビームＬｒ２に含まれる乱反射成分を除去する場合について述べた。

本発明はこれに限らず、他の種々の光学素子又はその組み合わせにより乱反射成分除去部を構成し、第２反射光ビームＬｒ２に含まれる乱反射成分を除去するようにしても良い。

さらに上述した第２の実施の形態においては、標準位置Ｚ１及び別位置Ｚ２をそれぞれ算出する際、和信号ＳＳに対する第２受光信号Ｓ２の比率を表す一様反射率ＲＥが閾値ＴＨ３未満となるときを位置Ｚ３として判別するようにした場合について述べた。

本発明はこれに限らず、例えば和信号ＳＳ及び第２受光信号Ｓ２の差分値が所定の閾値以上となるとき等、和信号ＳＳ及び第２受光信号Ｓ２における様々な相違の度合いを基に位置Ｚ３を判別するようにしても良い。この場合、ピンホール板３６により散乱光が遮断され第２受光信号Ｓ２の値が和信号ＳＳの値よりも小さいことを用いて位置Ｚ３を判別できれば良い。

さらに上述した第１の実施の形態においては、撮像レンズ５をアクチュエータ６によりＺ方向に移動させ、ＸＹステージ４はＺ方向に関し移動させない場合について述べた。

本発明はこれに限らず、例えば撮像レンズ５を固定し、ＸＹステージ４の可動ステージ４ＡをＺ方向にも移動させる（すなわちＸＹＺステージとする）ようにしても良い。要は、光ビームＬＣの焦点ＦＣの病理スライドガラス１００に対する相対的な位置を、Ｚ方向に変化させ得れば良い。第２の実施の形態においても同様であり、さらには焦点情報生成装置２１の対物レンズ３５及びＸＹステージ３０についても同様である。

さらに上述した実施の形態においては、病理スライドガラス１００において複数の撮像点ＱＣを設定する場合について述べた（図１３）。本発明はこれに限らず、例えば撮像装置３において１回の撮像処理により生体組織１０２の全撮像範囲を撮像できる場合には、撮像点ＱＣを１箇所のみ設定しても良い。測定点ＱＭについては、撮像点ＱＣと同等以下の間隔で配置されていれば良い。

さらに上述した実施の形態においては、生体組織１０２を撮像対象とする場合について述べた。本発明はこれに限らず、他の種々の物を撮像対象としても良い。この場合、当該撮像対象は、光ビームＬＭの一部を乱反射する性質を有していれば良い。これにより焦点情報生成装置２は、一様反射率ＲＥを基に位置Ｚ３を検出することができる。

さらに上述した第１の実施の形態においては、撮像部としての撮像部８と、焦点移動部としてのアクチュエータ６及び駆動制御部３と、焦点位置取得部としての統括制御部２と、撮像制御部としての統括制御部２と、気泡情報取得部としての気泡箇所判別部１３と、画像生成部としての合成処理部１２とによって画像生成装置としての画像生成装置１を構成する場合について述べた。

しかしながら本発明はこれに限らず、その他種々の構成でなる撮像部と、焦点移動部と、焦点位置取得部と、撮像制御部と、気泡情報取得部と、画像生成部とによって画像生成装置を構成するようにしても良い。

本発明は、気泡が介在する可能性がある撮像対象を撮像して画像を生成する種々の画像生成装置でも利用できる。

１……画像生成装置、２……統括制御部、３……駆動制御部、４……ＸＹステージ、５……撮像レンズ、６……アクチュエータ、８……撮像部、１０……画像処理部、１１……記憶部、１２……合成処理部、１３……気泡箇所判別部、２０……画像生成システム、２１……焦点情報生成装置、２２……統括制御部、２３……駆動制御部、２４……信号処理部、３０……ＸＹステージ、３５……対物レンズ、３６……アクチュエータ、４１……ビームスプリッタ、４３……第１受光器、４４……乱反射成分除去部、４５……集光レンズ、４６……ピンホール板、４９……第２受光器、１００……病理スライドガラス、１０１……スライドガラス、１０２……生体組織、１０３……包埋材、１０４……カバーガラス、ＱＭ……測定点、ＱＣ……撮像点、ＢＢ……気泡、ＬＭ……光ビーム、Ｌｒ……反射光ビーム、Ｌｒ１……第１反射光ビーム、Ｌｒ２……第２反射光ビーム、ＦＭ……焦点、Ｓ１Ａ〜Ｓ１Ｄ……第１受光信号、ＳＳ……和信号、ＳＤ……差信号、Ｓ２……第２受光信号、ＲＥ……一様反射率。

Claims (9)

1. スライスされた生体組織がスライドガラスの置載面上に搭載され当該生体組織が包埋材及びカバーガラスにより被覆されてなる病理スライドガラスから得られる光を、所定の撮像レンズにより集光し画像を生成する撮像部と、
   上記撮像レンズの光軸方向に関し、上記病理スライドガラスに対する上記撮像レンズの焦点の相対位置を変化させる焦点移動部と、
   上記相対位置のうち、上記光軸上における上記包埋材中に気泡が含まれないときに上記撮像レンズの焦点を上記生体組織に合わせる標準位置と、当該標準位置よりも上記光軸上における上記包埋材中に気泡が含まれるときに上記レンズの焦点を上記生体組織に合わせる位置に近接した別位置とを、それぞれ取得する焦点位置取得部と、
   上記焦点移動部により上記撮像レンズの焦点の相対位置を上記標準位置及び上記別位置にそれぞれ設定したときの標準画像及び別画像を上記撮像部によりそれぞれ生成させる撮像制御部と、
   上記病理スライドガラスにおける上記気泡の存在箇所を表す気泡情報を取得する気泡情報取得部と、
   上記気泡情報を基に、上記標準画像における上記気泡以外の部分と上記別画像における上記気泡に相当する部分とを合成した生体組織画像を生成する画像生成部と
   を有する画像生成装置。
2. 上記標準画像又は上記別画像の少なくとも一方において、上記包埋材と上記気泡との境界線により形成される閉じた領域の内部を上記気泡の存在箇所として検出し上記気泡情報を生成する気泡情報生成部
   をさらに有し、
   上記気泡情報取得部は、
   上記気泡箇所検出部から上記気泡情報を取得する
   請求項１に記載の画像生成装置。
3. 上記気泡情報生成部は、
   上記閉じた領域を形成する上記境界線の線幅が所定の範囲内である場合に、当該境界線の内部を上記気泡の存在箇所として検出する
   請求項２に記載の画像生成装置。
4. 上記気泡情報生成部は、
   上記閉じた領域内における周波数成分と当該閉じた領域外の周波数成分との比較結果を基に当該閉じた領域内を上記気泡の存在箇所として検出する
   請求項２に記載の画像生成装置。
5. 上記焦点位置取得部は、
   上記相対位置のうち、上記光軸上における上記包埋材中に気泡が含まれるときに上記レンズの焦点を上記生体組織に合わせる位置を、上記別位置として取得する
   請求項１に記載の画像生成装置。
6. 上記焦点位置取得部は、
   所定の光ビームを集光する対物レンズと、
   上記光ビームが上記病理スライドガラスにより反射されてなる反射光ビームを第１反射光ビーム及び第２反射光ビームに分離する分離部と、
   上記第１反射光ビームを受光し第１受光信号を生成する第１受光部と、
   上記第２反射光ビームに含まれる乱反射成分を除去する乱反射成分除去部と、
   上記乱反射成分除去部を通過した上記第２反射光ビームを受光し第２受光信号を生成する第２受光部と、
   上記病理スライドガラスに対する上記対物レンズの焦点の相対位置を変化させたときの上記第１受光信号及び上記第２受光信号を基に、上記撮像レンズの焦点が上記生体組織に合うときの上記撮像レンズの位置を検出する合焦位置検出部と
   を有する請求項１に記載の画像生成装置。
7. 上記合焦位置検出部は、
   上記第１受光信号に対する上記第２受光信号の比率が所定閾値以下となったときに、上記対物レンズの焦点が上記生体組織に合っていると判別する
   請求項６に記載の画像生成装置。
8. 上記乱反射成分除去部は、
   上記第２反射光ビームを集光する集光レンズと、
   上記集光レンズにより集光された上記第２反射光ビームの焦点近傍以外の部分を遮断するピンホール板と
   を有する請求項６に記載の画像生成装置。
9. スライスされた生体組織がスライドガラスの置載面上に搭載され当該生体組織が包埋材及びカバーガラスにより被覆されてなる病理スライドガラスと撮像レンズとの相対位置として、上記撮像レンズの光軸上における上記包埋材中に気泡が含まれないときに上記撮像レンズの焦点を上記生体組織に合わせる標準位置を取得する標準位置取得ステップと、
   上記相対位置として、上記標準位置よりも上記光軸上における上記包埋材中に気泡が含まれるときに上記レンズの焦点を上記生体組織に合わせる位置に近接した別位置を取得する別位置取得ステップと、
   上記撮像レンズの光軸方向に関し、上記病理スライドガラスに対する上記撮像レンズの焦点の相対位置を上記標準位置及び上記別位置にそれぞれ移動させる移動ステップと、
   上記相対位置を上記標準位置及び上記別位置にそれぞれ移動させたときの、上記生体組織から得られる光を上記撮像レンズにより集光し標準画像及び別画像をそれぞれ生成する画像生成ステップと、
   上記病理スライドガラスにおける上記気泡の存在箇所を表す気泡情報を取得する気泡情報取得ステップと、
   上記気泡情報を基に、上記標準画像における上記気泡以外の部分と上記別画像における上記気泡に相当する部分とを合成した生体組織画像を生成する画像生成ステップと
   を有する画像生成方法。
   

Images