JP2010197369A - ヘモグロビンA1c測定装置 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】HbA1cから糖化ペプチドを切り出した後、残存するHbを高分子電解質を含む沈殿剤により沈殿し、沈殿物を除去することで、Hbを含まない糖化ペプチド溶液を得る工程を含むことを特徴とするHbA1c測定装置を提供する。
【選択図】 図1
Description
塩化マグネシウム:600mmol/L
PEG:600g/L
最も望ましい実施形態により、電位差計測方式のセンサーを用いて濃度の異なる全血試料を測定し、検量線を作成した。検量線の傾きを測定感度と定義し、最も望ましい実施形態(実施例1)と、Hb除去機構を含まない形態での感度の比較を行った結果、Hb除去機構を含まない形態では、ネルンストの式から算出される感度の理論値(−59.2mV/dec)と比較して大きく低下し、感度は−4.3mV/decであった(図9)。一方、最も望ましい実施形態では理論値に近い感度−56.3mV/decが得られ(図10)、除去機構を含まない形態での感度と比較して、13倍程度の感度向上が確認された。
沈殿剤としてSDSと塩化マグネシウムを用い、それぞれの濃度を振って混合することで、種々の組成の沈殿剤を作製した。各種組成の沈殿剤とHbを含む試料とを反応させ沈殿を生じた後遠心分離を行い、上澄み液に含まれるHb濃度を測定することで、沈殿能力の評価を行った。Hb濃度の測定は吸光度法を用いて行った。結果を図11に示す。SDS濃度が320〜640mmol/L、塩化マグネシウム濃度が300〜600mmol/Lの範囲で、各々の濃度が高いほど残存するHb濃度を減少できる(沈殿させやすい)傾向がみられ、SDS濃度640mmol/L,塩化マグネシウム濃度600mmol/Lで、最も効果的にHbを沈殿することができた。
実施例2で最適化した組成の沈殿剤に対して、タンパク質の沈殿剤として一般的に用いられるPEG(平均分子量6,000)をさらに添加し、実施例2と同様の方法で沈殿能力の評価を行った。結果を図12に示す。PEG濃度が高くなるほど沈殿できるHb濃度は向上し、PEG濃度600g/Lで残存するHbは分光法の検出限界値以下まで減少した。
2 Hb沈殿容器
3 沈殿物分離機構
4 HbA1c測定容器
5 HbA1c測定機構
6 Hb測定機構
7 Hb測定容器
8 検体分配機構
Claims (12)
- ヘモグロビンA1cから糖化ペプチドを遊離させる遊離機構と、該遊離機構で処理した液体からヘモグロビンを除去する前処理機構と、
を備えたことを特徴とするヘモグロビンA1c測定装置。 - 請求項1記載のヘモグロビンA1c測定装置において、
前記前処理機構は、ヘモグロビンを沈殿させる沈殿剤と、該沈殿剤により沈殿した沈殿物と糖化ペプチドを含む液体を分離する沈殿物分離機構と、
を備えたことを特徴とするヘモグロビンA1c測定装置。 - 請求項2記載のヘモグロビンA1c測定装置において、
前記沈殿物分離機構は、ろ紙,フィルタ,膜,多孔質材料,カラムの少なくともいずれかから選択される、ろ過材を備えたことを特徴とするヘモグロビンA1c測定装置。 - 請求項3記載のヘモグロビンA1c測定装置において、
前記ろ過材が、セルロース,ポリ塩化ビニル,ポリビニリデン,ポリプロピレン,ガラス,石英の少なくともいずれかから選択された、1種または2種以上の物質からなることを特徴とするヘモグロビンA1c測定装置。 - 請求項2記載のヘモグロビンA1c測定装置において、
前記沈殿剤が、高分子電解質,界面活性剤,無機塩,有機塩,タンパク質変性剤から選択された1種以上の物質からなることを特徴とするヘモグロビンA1c測定装置。 - 請求項5記載のヘモグロビンA1c測定装置において、
前記沈殿剤が、ドデシル硫酸塩,デキストラン硫酸塩,ヘパリン塩からなる群から選択された物質と、マグネシウム塩,カルシウム塩,亜鉛塩からなる群から選択された物質の組合せからなることを特徴とするヘモグロビンA1c測定装置。 - 請求項2記載のヘモグロビンA1c測定装置において、
前記沈殿物分離機構が、沈殿生成後、上澄み部分を抽出する上澄み抽出機構を備えたことを特徴とするヘモグロビンA1c測定装置。 - 請求項7記載のヘモグロビンA1c測定装置において、
前記上澄み抽出機構が、ピペッタ,シリンジ,ノズル,チューブから選択される吸引機構を備えることを特徴とするヘモグロビンA1c測定装置。 - 請求項2記載のヘモグロビンA1c測定装置において、
前記沈殿物分離機構は遠心分離機構を備えることを特徴とするヘモグロビンA1c測定装置。 - 請求項1記載のヘモグロビンA1c測定装置において、
前記前処理機構を二つ以上備えたことを特徴とするヘモグロビンA1c測定装置。 - 請求項1記載のヘモグロビンA1c測定装置において、
ヘモグロビン測定部とヘモグロビンA1c測定部が一続きに接続され、Hb測定部での測定が完了した検体がHbA1c測定部に送液されることで連続して同じ検体を測定することを特徴とするHbA1c測定装置。 - 導入された検体を二つ以上の流路に分割する機構を備え、同時に複数の測定部に送液できることを特徴とする請求項10記載のHbA1c測定装置。
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