JP2010160152A - 混成化反応のモニタリングが可能なバイオチップ、バイオチップ上の混成化反応をモニタリングする装置、バイオチップ上の混成化モニタリング方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】蛍光検出を通じたサンプル分析と混成化反応に対するリアルタイムモニタリングとが可能に構成されたバイオチップ、蛍光検出を通じたサンプル分析のために、混成化反応を行う間にバイオチップ上での混成化反応をリアルタイムモニタリング可能な装置、及び1つのバイオチップで蛍光検出を通じたサンプル分析とバイオチップ上での混成化反応に対するリアルタイムモニタリングを可能にする方法である。これにより、1つのバイオチップ基板上に蛍光検出法による検出のための高密度プローブと表面プラズモン共鳴方式の検出のためのプローブとが共存する。
【選択図】図5
Description
11 透明基板、
12 金属薄膜、
13 サンプル溶液、
20 プリズム、
20a 光入射面、
20b 光出射面、
25 光検出器。
Claims (51)
- 透明基板と、
前記透明基板上に形成されたものであって、蛍光物質を有するサンプルに結合されて蛍光検出法によってサンプル分析に用いられる分析用プローブを有する第1プローブ領域と、
前記透明基板上に形成されたものであって、SPR−検出法によって混成化反応のモニタリングに用いられるモニタリング用プローブを有する第2プローブ領域と、
前記第2プローブ領域と前記透明基板との間に介在された金属薄膜と、
を含むバイオチップ。 - 前記第2プローブ領域と前記金属薄膜との間に介在された透明誘電体層をさらに含むことを特徴とする請求項1に記載のバイオチップ。
- 前記透明誘電体層は、二酸化硅素、ダイアモンド及びガラス状カーボンのうち、少なくとも1つの材料からなることを特徴とする請求項2に記載のバイオチップ。
- 前記透明誘電体層の厚さは、1Åないし1μmであることを特徴とする請求項2または3に記載のバイオチップ。
- 前記第2プローブ領域は、前記第1プローブ領域内に位置するように配されることを特徴とする請求項1から4のいずれかに記載のバイオチップ。
- 前記第2プローブ領域は、前記第1プローブ領域外部の透明基板上に配されることを特徴とする請求項1から4のいずれかに記載のバイオチップ。
- 前記透明基板の表面上に金属整列マークが配され、前記第2プローブ領域は、前記整列マーク上に形成されることを特徴とする請求項1から6のいずれかに記載のバイオチップ。
- 前記第2プローブ領域は、前記透明基板上に突出されて配されることを特徴とする請求項1から7のいずれかに記載のバイオチップ。
- 前記透明基板の表面に溝が形成されており、前記第2プローブ領域は前記溝内に形成されていることを特徴とする請求項1から8のいずれかに記載のバイオチップ。
- 前記透明基板の表面と前記第2プローブ領域の表面とを同じ高さに形成するか、または前記第2プローブ領域を透明基板の表面内側に形成することを特徴とする請求項9に記載のバイオチップ。
- 前記第2プローブ領域の大きさは、少なくとも1μm×1μmであることを特徴とする請求項1から10のいずれかに記載のバイオチップ。
- 前記透明基板上に複数の第2プローブ領域が配されることを特徴とする請求項1から11のいずれかに記載のバイオチップ。
- 前記第1プローブ領域は、分析用プローブとしてDNAオリゴマーを有することを特徴とする請求項1から12のいずれかに記載のバイオチップ。
- 前記第2プローブ領域のモニタリング用プローブは、前記第1プローブ領域の分析用プローブを代表するように、前記第1プローブ領域の分析用プローブから選択されたものであるか、または前記第1プローブ領域の平均的な分析用プローブを代表するように操作されたものであることを特徴とする請求項1から13のいずれかに記載のバイオチップ。
- 前記第2プローブ領域上のモニタリング用プローブに結合されるサンプルが第1プローブ領域上の分析用プローブブに結合されるサンプルと同種であることを特徴とする請求項14に記載のバイオチップ。
- 前記第2プローブ領域上のモニタリング用プローブに結合されるサンプルが第1プローブ領域上の分析用プローブに結合されるサンプルと異種であることを特徴とする請求項14に記載のバイオチップ。
- 前記第2プローブ領域のモニタリング用プローブはバイオチップの製作直前に分析用プローブと共にバイオチップに同時に導入されて固定されていることを特徴とする請求項1から16のいずれかに記載のバイオチップ。
- 前記第2プローブ領域のモニタリング用プローブは、混成化反応進行時にバイオチップに導入され、自己組立法の原理によって前記金属薄膜の表面に自ら結合されるように形成されたことを特徴とする請求項1から17のいずれかに記載のバイオチップ。
- バイオチップと結合してバイオチップ上に混成化反応を起こすチャンバと、
バイオチップで表面プラズモン共鳴を起こすようにバイオチップの下部に光を提供するためのプリズムと、
バイオチップから反射された光を検出する光検出器と、
前記光検出器からの信号によって混成化反応の進行程度を分析して混成化条件を制御するプロセッサーと、
を含むバイオチップの混成化反応モニタリング装置。 - 前記バイオチップは、蛍光検出法によるサンプル分析に用いられる分析用プローブを有する第1プローブ領域と、SPR−検出法による混成化モニタリングに用いられるモニタリング用プローブを有する第2プローブ領域を同時に有することを特徴とする請求項19に記載の混成化反応モニタリング装置。
- 前記チャンバ内で前記第1プローブ領域上の分析用プローブとサンプルとの結合及び第2プローブ領域上のモニタリング用プローブとサンプルとの結合が、いずれも発生することを特徴とする請求項20に記載の混成化反応モニタリング装置。
- 前記分析用プローブにのみ結合される実際サンプルと前記モニタリング用プローブにのみ結合されるモニタリング用サンプルとが同時に、前記チャンバの内部に供給されることを特徴とする請求項20に記載の混成化反応モニタリング装置。
- 前記モニタリング用サンプルは、分析用プローブに結合されるサンプルより分子量の大きな材料を使用することを特徴とする請求項22に記載の混成化反応モニタリング装置。
- 前記モニタリング用サンプルとして金(gold)ナノ粒子、蛋白質またはポリマーと結合されたオリゴマーを使用することを特徴とする請求項23に記載の混成化反応モニタリング装置。
- 前記チャンバは互いに独立した第1チャンバと第2チャンバとを含み、前記第1チャンバと第2チャンバとで各々独立して混成化反応が起こることを特徴とする請求項19に記載の混成化反応モニタリング装置。
- 前記バイオチップは、蛍光検出法によるサンプル分析に用いられる分析用プローブを有する第1プローブ領域と、SPR−検出法による混成化モニタリングに用いられるモニタリング用プローブを有する第2プローブ領域とを同時に有することを特徴とする請求項25に記載の混成化反応モニタリング装置。
- 前記第1プローブ領域は前記第1チャンバと対応し、前記第2プローブ領域は前記第2チャンバと対応することを特徴とする請求項26に記載の混成化反応モニタリング装置。
- 前記第1チャンバには前記分析用プローブに結合されるサンプルが供給され、前記第2チャンバには前記モニタリング用プローブに結合されるモニタリング用サンプルが供給されることを特徴とする請求項27に記載の混成化反応モニタリング装置。
- 前記プロセッサーは、前記光検出器の検出結果を、以前に光検出器からあらかじめ得たデータと比較することによって、混成化反応の進行程度を定量的に分析することを特徴とする請求項19から28のいずれかに記載の混成化反応モニタリング装置。
- 前記プロセッサーは、混成化反応が進行する間に、以前にあらかじめ得た最適の混成化条件についての情報を前記光検出器の検出結果と比較して、混成化条件を最適化させることを特徴とする請求項19から29のいずれかに記載の混成化反応モニタリング装置。
- 第1プローブ領域と第2プローブ領域とが透明基板上に各々形成されており、前記第2プローブ領域と前記透明基板との間に金属薄膜が形成されているバイオチップを提供する段階と、
前記バイオチップをチャンバに配置し、前記チャンバ内にサンプルを供給することによって、混成化反応を進行する段階と、
チャンバ内で混成化反応が進行する間に、SPR−検出法を通じて第2プローブ領域上での混成化反応の進行による光吸収入射角の変化を検出する段階と、
光吸収入射角の変化に基づいてバイオチップ上での混成化反応の進行程度を分析する段階と、
混成化反応が完結された後、第1プローブ領域上の混成化反応結果を蛍光検出法によって分析する段階と、を含むバイオチップ上の混成化モニタリング方法。 - 前記第1プローブ領域は、蛍光検出法によるサンプル分析に用いられる分析用プローブを有し、前記第2プローブ領域は、SPR−検出法による混成化モニタリングに用いられるモニタリング用プローブを有することを特徴とする請求項31に記載の混成化モニタリング方法。
- 前記第1プローブ領域は、分析用プローブとしてDNAオリゴマーを有することを特徴とする請求項31または32に記載の混成化モニタリング方法。
- 前記第2プローブ領域のモニタリング用プローブは、前記第1プローブ領域の分析用プローブを代表するように、前記第1プローブ領域の分析用プローブから選択されたものであるか、または前記第1プローブ領域の平均的な分析用プローブを代表するように操作されたことを特徴とする請求項32または33に記載の混成化モニタリング方法。
- 前記第2プローブ領域上のモニタリング用プローブに結合されるサンプルが、第1プローブ領域上の分析用プローブに結合されるサンプルと同種であることを特徴とする請求項34に記載の混成化モニタリング方法。
- 前記第2プローブ領域上のモニタリング用プローブに結合されるサンプルが、第1プローブ領域上の分析用プローブに結合されるサンプルと異種であることを特徴とする請求項34に記載の混成化モニタリング方法。
- 前記分析用プローブに結合される実際サンプルと前記モニタリング用プローブにのみ結合されるモニタリング用サンプルとが同時にチャンバの内部に供給されることを特徴とする請求項36に記載の混成化モニタリング方法。
- 前記モニタリング用サンプルは、分析用プローブに結合されるサンプルより分子量の大きい材料を使用することを特徴とする請求項37に記載の混成化モニタリング方法。
- 前記モニタリング用サンプルとして金(gold)ナノ粒子、蛋白質またはポリマーと結合されたオリゴマーを使用することを特徴とする請求項38に記載の混成化モニタリング方法。
- 互いに分離された第1チャンバ及び第2チャンバが1つのバイオチップに結合されることを特徴とする請求項31から39のいずれかに記載の混成化モニタリング方法。
- 前記第1プローブ領域は前記第1チャンバと対応するように形成され、前記第2プローブ領域は前記第2チャンバと対応するように形成されることを特徴とする請求項40に記載の混成化モニタリング方法。
- 前記第1プローブ領域は蛍光検出法によるサンプル分析に用いられる分析用プローブを有し、前記第2プローブ領域はSPR−検出法による混成化モニタリングに用いられるモニタリング用プローブを有することを特徴とする請求41に記載の混成化モニタリング方法。
- 前記第1プローブ領域は分析用プローブとしてDNAオリゴマーを有することを特徴とする請求項42に記載の混成化モニタリング方法。
- 前記第2プローブ領域のモニタリング用プローブは、前記第1プローブ領域の分析用プローブを代表するように、前記第1プローブ領域の分析用プローブから選択されたものであるか、または前記第1プローブ領域の平均的な分析用プローブを代表するように操作されたものであることを特徴とする請求項42または43に記載の混成化モニタリング方法。
- 前記第1チャンバと第2チャンバとに同じサンプルが供給されることを特徴とする請求項44に記載の混成化モニタリング方法。
- 前記第1チャンバには前記分析用プローブに結合される実際サンプルが供給され、前記第2チャンバには前記モニタリング用プローブに結合されるモニタリング用サンプルが供給されることを特徴とする請求項42から45のいずれかに記載の混成化モニタリング方法。
- 前記モニタリング用サンプルは分析用プローブに結合されるサンプルより分子量の大きい材料を使用することを特徴とする請求項46に記載の混成化モニタリング方法。
- 前記モニタリング用サンプルとして金(gold)ナノ粒子、蛋白質またはポリマーに結合されたオリゴマーを使用することを特徴とする請求項47に記載の混成化モニタリング方法。
- SPR−検出法を通じて第2プローブ領域上での混成化反応の進行による光吸収入射角の変化を検出する前記段階は、
前記バイオチップの下部にプリズムを配置する段階と、
前記プリズムを通じてバイオチップ内の少なくとも第2プローブ領域に光を照射する段階と、
光検出器を通じて反射光の強度を観察して光吸収入射角の変化を検出する段階と、
を含むことを特徴とする請求項31から48のいずれかに記載の混成化モニタリング方法。 - バイオチップ上での混成化反応の進行程度を分析する前記段階は、光吸収入射角の変化を以前にあらかじめ得たデータと比較することによって、混成化反応の進行程度を定量的に分析することを含むことを特徴とする請求項49に記載の混成化モニタリング方法。
- 混成化反応が進行する間に、以前にあらかじめ得た最適の混成化条件についての情報を前記光吸収入射角の変化と比較して混成化条件を最適化させる段階をさらに含むことを特徴とする請求項50に記載の混成化モニタリング方法。
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