JP2010138100A - 歯周病予防または治療用組成物 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 鶏血藤またはその抽出物を有効成分とする歯周病予防または治療用組成物。該組成物は、洗口含漱剤、歯磨き剤またはパップ剤の形態で使用され得る。また本発明は、鶏血藤またはその抽出物を有効成分とする破骨細胞の分化・延命抑制剤および活性酸素種除去剤を提供する。
【選択図】 図1
Description
1.鶏血藤またはその抽出物を有効成分とする歯周病予防または治療用組成物。
2.洗口含漱剤の形態で使用される、前記1に記載の歯周病予防または治療用組成物。
3.歯磨き剤の形態で使用される、前記1に記載の歯周病予防または治療用組成物。
4.パップ剤の形態で使用される、前記1に記載の歯周病予防または治療用組成物。
5.鶏血藤またはその抽出物を有効成分とする破骨細胞の分化・延命抑制剤。
6.鶏血藤またはその抽出物を有効成分とする活性酸素種除去剤。
7.鶏血藤またはその抽出物を有効成分とするインプラント周囲炎(ペリインプラントタイティス)予防または治療用組成物。
また本発明によれば、鶏血藤またはその抽出物を有効成分とする破骨細胞の分化・延命抑制剤および活性酸素種除去剤を提供することができる。
本発明でいう鶏血藤は、公知の生薬であり、例えば、マメ科に属する密花豆(Spatholobus suberectus Dunn)、光葉密花豆(S. harmandii Gagnep)、紅血藤(S. sinensis Chun et T, Chen)、香花崖豆藤(Millettia dielsianaHarms)、豊城崖豆藤(M. nitida Benth. var. hirsutissima Z. Wei)、崖豆藤(M. gentiliana Level)、美麗根崖豆藤(M. speciosa Champ.)、網絡崖豆藤(M. reticulata benth)、常春油麻藤(Mucuna sempervirens Hemsl.)、白花油麻藤(M. birdwoodiana Tutcher)、褐毛藜豆(M. castanea Merr)、巴豆藤(Craspedolobium schochii Harms)、マツブサ科に属する内南五味子(Kadsura interior A.C. Smith)、異型南五味子(K. heteroclita (Roxb.) Craib)、鉄箍散(Schisandra propinqua (Wall.) Baill. var. sinensis Oliv.)を包含する。
また、鶏血藤またはその抽出物を洗口含嗽剤、歯磨き剤あるいはパップ剤として用いる場合、鶏血藤またはその抽出物の含有量は、例えば2〜8質量%であるのが好ましい。
ヒトの歯肉粘膜上皮はループ状の毛細血管が豊富であり、生体との親和性の高い本発明の組成物は、該上皮から容易に吸収されると考えられる。
鶏血藤抽出液は、1Lの水に200g(20%w/v)の鶏血藤を加え95℃で3時間加熱したものを鶏血藤20%抽出液とし、これを適宜PBSで希釈し、以下の実験に供試した。
なお、鶏血藤は密花豆Spatholobus suberectus DUNNの乾燥茎を実験に供した。
6週齢のC57BL/6マウス72匹を、24匹ずつ非感染コントロール群、PG感染コントロール群およびPG感染+鶏血藤投与(実験群)の3群に分け、それぞれにサルファメトキサゾールおよびトリメトプリムを含む飲料水を1週間投与し、口腔常在菌を除菌した。体内の抗菌薬を排出させるため3日間イオン交換水で飼育後、1週間に3回、1回につき約1×109個のPG菌体を含む2.5%カルボキシメチルセルロース溶液0.1mlを、PG感染コントロール群ならびに実験群に接種した。菌接種の完了と同時に、実験群には8%鶏血藤水抽出液を飲料水として供与し、その他はイオン交換水を飲料水とした。
感染終了後から1週間ごとに6週間にわたり各群から4匹ずつ抽出・屠殺し、右側頭部について当該骨格標本を作製し、上顎歯槽骨の吸収量を実体顕微鏡観察下で行った。左側頭部はギ酸ホルマリンで脱灰後、病理標本を作製し、ヘマトキシリン-エオシン染色あるいは酒石酸抵抗性酸性フォスファターゼ(TRAP)染色を行い、炎症の状態や破骨細胞の出現について検討した。
図2は、破骨細胞出現数の経時的変化を示すグラフである。
図3は、破骨細胞数算定の算定区域を示す図であり、マウス上顎第一臼歯より第三臼歯に隣接する歯槽骨(黒線で囲まれた範囲)に出現した破骨細胞数を算定した。
図4は、マウス歯周組織のTRAP染色像である。
また、図2の結果から、第1臼歯近心根から第3臼歯の遠心根を囲む歯槽骨面に認められた破骨細胞(osteoclast)は、PG感染コントロール群に明らかに多く、また実験経過に伴いその数は増加傾向を示したが、実験群は非感染コントロール群と相違はみられなかった。
一方、図4に示す病理標本において、非感染コントロール群、PG感染コントロール群及び実験群のいずれにも臼歯部歯間乳頭の粘膜上皮内と上皮直下にごく僅かの炎症細胞浸潤(好中球とリンパ球)が散見された。しかし、PG感染コントロール群では、非感染コントロール群に比べ歯槽骨面に吸収窩が多く認められ、実験期間の経過に伴い骨量の減少が観察された。実験群の歯槽骨には著しい変化はなく、非感染コントロール群ほぼ同様の所見であった。
0.2%、2%もしくは8%鶏血藤抽出液またはPBSの5mlに、OD600=1に調整したPGのPBS懸濁液の0.05mlを加え、0分、1分、15分または60分放置した。その後、サンプルを10倍希釈し、含まれる生菌数を培養法で計測した。培養は37℃嫌気条件(15%CO2、15%H2、70%N2)下で5日間行なった。結果を図5に示す。
図5の結果から、鶏血藤抽出液にPGを混合し60分間ベンチトップで放置すると、鶏血藤を加えないコントロール対して、鶏血藤0.2%濃度で約55%、2%濃度で約15%、8%濃度で約0.1%のレベルまで生菌数の減少が検出されたことから、鶏血藤は、濃度並びに時間依存的に、PGに対して抗菌効果を示すことが明らかとなった。
骨髄由来の単球・マクロファージ等の破骨細胞の前駆細胞はMacrophage-Colony Stimulating Factor(M-CSF)の存在下でReceptor activator of NF-κB ligand (RANKL)の刺激により破骨細胞に分化することが知られている。マウス骨髄細胞も、M-CSF添加培地でRANKLのドナーであるMC3T3-G2/PA6細胞と共培養することで破骨細胞に分化する。そこで、破骨細胞の分化過程における鶏血藤の影響を検討する目的でマウス破骨細胞形成系に各種濃度の鶏血藤抽出液を添加し、破骨細胞の形成誘導に対する鶏血藤の影響を検討した。
図6の結果から、培地中に鶏血藤抽出液を添加しなかったコントロール群に比べ、鶏血藤抽出液0.1%および0.01%添加群では破骨細胞数がそれぞれ約100%および50%に減少し(p<0.01)、有意な発育抑制が検出された。以上の結果は、鶏血藤抽出液は、M-CSFとRANKL依存的な骨髄細胞から破骨細胞への分化を阻害することを示している。なお、前記鶏血藤抽出液のパーセントは、培地中の鶏血藤濃度である。
Receptor activator of NF-κB ligand (RANKL)やMacrophage-Colony Stimulating Factor(M-CSF)は破骨細胞の分化に必須であり、また破骨細胞の生存を延長することが知られている。破骨細胞をRANKL添加培地で培養すると、未添加培地と比べた場合に比べその寿命が大幅に延長する。一方、RANKL未添加培地中の破骨細胞は急速に死滅する。そこで、RANKLによる成熟破骨細胞生存に対する鶏血藤の影響を検討した。
その後、破骨細胞を、次の3種類の培地で48時間培養した。
1.RANKL未添加α-MEM培地
2.RANKL(200μg/ml)、M-CSF(100μg/ml)添加α-MEM
3.RANKL(200μg/ml)、M-CSF(100μg/ml)および各種濃度の鶏血藤抽出液の添加α-MEM
培養後、成熟破骨細胞マーカーである酒石酸抵抗性酸性フォスファターゼ(TRAP)の染色を行った。TRAP陽性で3核以上の細胞を生存破骨細胞としてカウントし、観察された破骨細胞数をstudent-t検定で比較した。結果を図7に示す。
図7の結果から、鶏血藤抽出液を最終濃度0.1%、0.01%、および0.001%濃度で培地に添加した実験群では、RANKL添加により寿命が延長した陽性コントロール群に比べ生存する破骨細胞数がそれぞれ約30%、40%および80%と有意に減少した(p<0.01)。これは、培養過程で細胞が死滅したことを示すものである。
電子スピン共鳴(ESR)法によるフリーラジカル検出:
ヒドロキシルラジカルはフェントン反応(FeSO4にH2O2添加)を用いて発生させ、また、スーパーオキサイドラジカルはhypoxanthineにXanthine oxidase添加して発生させた。発生した各フリーラジカルはラジカル補足試薬DMPOで補足した後、電子スピン共鳴(ESR)装置(JES-RE 3X X-band、日本電子)を用いて検出した(対照群)。フリーラジカル消去活性実験は、このラジカル発生系に各種生薬、またはスーパーオキサイドディスムターゼ(SOD)およびdeferoxamine(DFX)を加え、補足されたラジカルのESRシグナル強度を比較検討した。
サンプル調製法と手技:
ESRによるヒドロキシルラジカルの検出は、リン酸緩衝液(PBS, pH7.0)185μl内に10-4M FeSO4 25μl、8.8M DMPO(5.5-Dimethyl-1-Pyrriline-N-Oxide、同人化学)を15μl加えた混合液に、10-4M H2O2 (和光)25μl加えて反応させ、1分後にESRフラットセルに130μl吸引、ESRレゾネーター内に装着して測定開始した。
ヒドロキシルラジカル消去活性実験は、リン酸緩衝液(PBS, pH7.0)135μl、生薬ないしdeferoxamine (NOVARTIS) 25μl、10-4M FeSO4 25μl、8.8M DMPO (5.5-Dimethyl-1-Pyrriline-N-Oxide、同人化学)を15μl加えた混合液に、10-4M H2O2 (和光)25μl加えて反応させ、1分後にESRフラットセルに130μl吸引、ESRレゾネーター内に装着して測定開始した。
ESRによるスーパーオキサイドラジカルの検出は、リン酸緩衝液(PBS, pH7.0)135μl内に0.01U/1ml Xanthine oxidase(Roche) 25μl、0.2mM DTPA(SIGMA) 25μl、 8.8M DMPO (5.5-Dimethyl-1-Pyrriline-N-Oxide、同人化学)を15μl加えた混合液に、10-5M hypoxanthine(SIGMA)を25μl加えて反応させ、1分後にESRフラットセルに130μl吸引、ESRレゾネーター内に装着して測定開始した。
スーパーオキサイドラジカル消去活性実験におけるフリーラジカルの検出は、リン酸緩衝液(PBS, pH7.0)135μl内に0.01U/1ml Xanthine oxidase、25μl、0.2mM DTPA(SIGMA) 25μl、各種生薬ないしSOD25μl、8.8M DMPO (5.5-Dimethyl-1-Pyrriline-N-Oxide、同人化学)を15μl加えた混合液に、10-5M hypoxanthine(SIGMA)を25μl加えて反応させ、1分後にESRフラットセルに130μl吸引、ESRレゾネーター内に装着して測定開始した。
ESR装置の測定条件:
磁場変調幅;0.063 mT、掃引幅;5 mT、掃引時間;1 min、時定数;0.03 sec、マイクロ波出力;8 mW、磁場;335.5±5 mT、受信感度;7.9×10に設定した。
結果を図8〜図11に示す。
図8〜図11の結果から、鶏血藤は著しく強力な活性酸素種除去効果を示すことが分かる。なお抑制率とは、対照群に対する活性酸素種の除去割合である。
Claims (7)
- 鶏血藤またはその抽出物を有効成分とする歯周病予防または治療用組成物。
- 洗口含漱剤の形態で使用される、請求項1に記載の歯周病予防または治療用組成物。
- 歯磨き剤の形態で使用される、請求項1に記載の歯周病予防または治療用組成物。
- パップ剤の形態で使用される、請求項1に記載の歯周病予防または治療用組成物。
- 鶏血藤またはその抽出物を有効成分とする破骨細胞の分化・延命抑制剤。
- 鶏血藤またはその抽出物を有効成分とする活性酸素種除去剤。
- 鶏血藤またはその抽出物を有効成分とするインプラント周囲炎(ペリインプラントタイティス)予防または治療用組成物。
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Cited By (3)
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---|---|---|---|---|
JP2012041291A (ja) * | 2010-08-18 | 2012-03-01 | Institute Of Physical & Chemical Research | 歯周病の治療または予防剤 |
JP2014024771A (ja) * | 2012-07-25 | 2014-02-06 | Kanpo Shika Igaku Kenkyusho:Kk | 歯周病予防・治療用組成物及び化粧品用保存剤 |
CN104800340A (zh) * | 2015-05-19 | 2015-07-29 | 李汶峰 | 一种治疗痹症的中药 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0597649A (ja) * | 1991-08-07 | 1993-04-20 | Tsuneo Nanba | 化粧料 |
CN1931339A (zh) * | 2006-08-28 | 2007-03-21 | 邓伟民 | 一种治疗骨质疏松症的药物及其生产方法 |
JP2007238485A (ja) * | 2006-03-07 | 2007-09-20 | Lotte Holdings Ltd | メチオニナーゼ阻害剤及びそれを含有する口腔用組成物並びに飲食品 |
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Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0597649A (ja) * | 1991-08-07 | 1993-04-20 | Tsuneo Nanba | 化粧料 |
JP2007238485A (ja) * | 2006-03-07 | 2007-09-20 | Lotte Holdings Ltd | メチオニナーゼ阻害剤及びそれを含有する口腔用組成物並びに飲食品 |
CN1931339A (zh) * | 2006-08-28 | 2007-03-21 | 邓伟民 | 一种治疗骨质疏松症的药物及其生产方法 |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2012041291A (ja) * | 2010-08-18 | 2012-03-01 | Institute Of Physical & Chemical Research | 歯周病の治療または予防剤 |
JP2014024771A (ja) * | 2012-07-25 | 2014-02-06 | Kanpo Shika Igaku Kenkyusho:Kk | 歯周病予防・治療用組成物及び化粧品用保存剤 |
CN104800340A (zh) * | 2015-05-19 | 2015-07-29 | 李汶峰 | 一种治疗痹症的中药 |
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