JP2009541281A - キチンマイクロ粒子を含む組成物およびそれらの医学的使用 - Google Patents
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Abstract
Description
a)キチンマイクロ粒子組成物;
b)感染性因子由来の抗原;および
c)更なるアジュバント;
を含む。このキットは、更に、送達用のデバイスを含んでいてもよい。
表1は、異なるMSP119ワクチン調合物で鼻内的に免疫されたマウスの生存率を示している。CMP、キチンマイクロ粒子;CTB、コレラトキシンBサブユニット;MSP119、メロゾイト表面たんぱく質−1の19キロダルトン−カルボキシル末端フラグメント。4匹のBALB/cマウスのグループが0日目、14日目、28日目および42日目にMSP119プラスCMPもしくはCTBで、又はMSP119プラスCMPとCTBとの両方で経鼻的に免疫された。マウスは、最終免疫を行ってから30日目に、1匹のマウス当たり1×104個のP.yoelii−pRBCがチャレンジ投与された。
キチンはN−アセチル−D−グルコサミンのポリマーである。キチンは、本来、豊富ポリサッカリド(abundant polysaccharide)であり、カニ、エビ、ロブスター、甲イカおよび昆虫の外骨格ならびに真菌に存在する角質物質を含む。容易に入手可能で好適なキチンのソースはエビの殻から得られる。キチンのこれらのソース又は他のソースのどれもが、本発明により使用するためのCMP調製物を調製するのに適している。代替的に、前記CMPは、天然ソースからの抽出に代わるものとして、化学又は酵素技術により合成することもできる。この手法は、より均質な生成物をもたらすという利点を有する。
上で検討されているキチンマイクロ粒子調製物に加え、本発明による組成物は、更に、感染性因子由来の抗原を含んでいてよい。その感染性因子は、細菌感染症、真菌感染症、ウイルス感染症又は寄生虫感染症を媒介するものであってよい。本明細書で検討されているように、特には更なる別のアジュバントを伴った、CMPアジュバントと抗原との組み合わせは、その感染性因子による感染を治療又は予防するのに有用な相乗的応答をもたらす組成物を提供することができる。
好適な実施形態においては、本発明の組成物は、マラリア、インフルエンザ又はHIVを治療又は予防するために使用される。
http://www.niaid.nih.gov/daids/vaccine/pdf/compendium.pdf
で入手可能である。
本明細書に記載されている組成物は、感染性因子による個体の感染によって引き起こされる一連の状態の治療又は予防を用途として適用することができる。
マウス
BALB/cマウス(6−8週齢、n=4/グループ)を使用した。
免疫は、指示されている場合には100マイクログラムのCMPおよび5マイクログラムのCTBと混合された10マイクログラムのMSP119を含有する合計で20マイクロリットルが鼻内に与えられた。
抗体を測定するために、マウスが第0日目、第21日目、第42日目および第56日目に免疫された。特異的IgGが最終免疫をしてから28日目に測定された。
チャレンジ投与は、最終免疫を行ってから30日後に与えられた1×104個の生きたP.yoelii YM寄生赤血球(pRBC)のi.v.注射により行われた。尾の血液サンプルから採取した赤血球の感染率(%)を調べる顕微鏡分析により寄生虫血症を毎日モニタリングした。最小でも10000個の細胞を計数した。それらのマウスの生存についての観測が行われた。
P.yoeliiのチャレンジ投与からの生存
可溶性MSP1抗原での経鼻的ワクチン接種からの生存は生存率を高めず、4匹すべてのマウスが感染後10日目までに死亡した。MSP1とアジュバントとしてCTBかCMPかのどちらかでのワクチン接種はこの成果を有意には改善しなかった。しかし、CMPおよびCTBの両方と混合されたこのペプチドでのワクチン接種は感染防御効果の有意な増強をもたらし、4匹のうち3匹のマウスが感染後の15日目に生存していた(表1)。これらのマウスは第30日目まで生き続け、この後、これらのマウスは死亡した。
マウスが第0日目、第21日目、第42日目および第56日目に免疫された。抗MSP119抗体の力価が最終免疫を行ってから28日後に決定された。組み換え抗原(rA)、MSP119単独での鼻内ワクチン接種は有意な特異的IgG産生を誘発しなかった。CTBアジュバントの付加はそれよりも良好な応答をもたらしたが、最良の抗体力価はCTBアジュバントとCMPアジュバントとの両方が含んだ併用ワクチンで達成され、この場合には、CTBを単独で加えた場合よりも4倍多いIgGをもたらした(図1)。単独で投与された場合には、どちらのアジュバントも特異的IgGをもたらさなかった。
前記併用ワクチン(10μgのMSP119+5μgのCTB+100μgのμ)を用いて行われる免疫頻度の影響を試験するため、3種類の異なるプロトコルを試験した:
(1)3週間に2回(IN2−2)、合計で2回の鼻内免疫。
(2)2回/週を3週間(IN2−6)、合計で6回の鼻内免疫。
(3)3回/週を3週間(IN3−9)、合計で9回の鼻内免疫。
得られた実験データは、鼻内的に送達することができる可能性のあるマラリアワクチンを指示している。これらの知見は、経鼻的なアジュバントであるCTBおよびCMPが相乗的に相互作用することを示している。キチンマイクロ粒子(CMP)の付加は経鼻的なワクチンの効能を改善する。これは、効果的なサブユニットワクチンを作り出すためには、免疫応答を刺激することができ、且つ、抗原に対する自然免疫寛容閾値(threshold)、特には成熟タンパク質の複雑な3D構造を欠いた単純な組み換えペプチドに対する自然免疫寛容閾値を克服することができる強力なアジュバントの付加を必要とするため、重要な知見である。多くのそのようなサブユニットワクチンは、望ましい免疫応答を引き出すために必要なそのような強力なアジュバントの付加又は大量のアジュバントの付加と関わり合いを有する毒性および局所的反応のため、制限されている。CMPは比較的無害の材料であって、非炎症性であり、そのような局所的又は全身的な反応を引き起こす可能性が低い。CMPの付加がワクチンの効能を改善するという知見は、ワクチン設計への重要な貢献である。
本明細書で挙げられている参考文献は、すべて、参照により明確に本明細書に組み入れられる。
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Claims (38)
- 感染性因子由来の抗原、キチンマイクロ粒子調製物(CMP)および更なるアジュバントを含む組成物。
- 前記組成物がワクチン組成物である、請求項1に記載の組成物。
- 前記感染性因子が細菌感染症、真菌感染症、ウイルス感染症又は寄生虫感染症を媒介する、請求項1又は2に記載の組成物。
- 感染性因子由来の抗原、キチンマイクロ粒子調製物(CMP)および更なるアジュバントを含む組成物の使用であって、該感染性因子により媒介される状態を予防又は治療するための薬剤を調製するための前記組成物の使用。
- 前記状態が細菌感染症、真菌感染症、ウイルス感染症又は寄生虫感染症である、請求項4に記載の使用。
- 前記薬剤が1週間につき少なくとも2回患者に投与するためのものである、請求項4又は5に記載の使用。
- 前記薬剤が1週間につき少なくとも3回患者に投与するためのものである、請求項6に記載の使用。
- 前記薬剤が経粘膜的又は非経粘膜的な送達経路を介して投与するためのものである、請求項4〜7のいずれか一項に記載の使用。
- 前記経粘膜的な送達経路が鼻内送達、舌下送達、経口送達、点眼剤での送達又は吸入による送達である、請求項8に記載の使用。
- 前記非経粘膜的な送達経路が注射による送達である、請求項8に記載の使用。
- 前記注射が皮下注射又は筋肉内注射である、請求項10に記載の使用。
- 前記薬剤が、感染するリスクを負った患者に対して予防的に投与するためのものである、請求項4〜11のいずれか一項に記載の使用。
- 前記リスクを負った患者が高齢者、未熟児、幼児、移植患者、免疫抑制患者、化学療法患者、日和見感染に罹患するリスクを負った入院患者、人工呼吸器を使用している患者、嚢胞性線維症患者又はエイズに罹患している患者である、請求項12に記載の使用。
- 前記状態がPseudomonas aeruginosa、Streptococcus種、Haemophilus influenza、Klebsiella pneumoniae、Yersinia enteocolitica、Salmonella、Listeria、Mycobacteria種による細菌感染症である、請求項6〜13のいずれか一項に記載の使用。
- 前記Streptococcus種がStreptococcus pneumoniae、Streptococcus pyrogenes又はStreptococcus agalactiaeである、請求項14に記載の使用。
- 前記マイコバクテリア種がMycobacterium tuberculosis又はMycobacterium lepraeである、請求項14に記載の使用。
- 前記状態が細菌性肺炎、例えば機械換気に関連した肺炎又は嚢胞性線維症関連感染症などである、請求項5〜15のいずれか一項に記載の使用。
- 前記状態が中耳炎である、請求項5〜15のいずれか一項に記載の使用。
- 前記寄生虫感染症がLeishmania種およびSchistosoma種又はPlasmodium種による感染症である、請求項5〜13のいずれか一項に記載の使用。
- 前記真菌感染症が侵襲性肺アスペルギルス症および侵襲性肺カンジダ症、Pneumocystis carinii肺炎、又はCoccidioidesもしくはCrytococcusである、請求項5〜13のいずれか一項に記載の使用。
- 前記状態が肺のウイルス感染症である、請求項5〜13のいずれか一項に記載の使用。
- 前記ウイルス感染症が呼吸器合胞体ウイルス細気管支炎、インフルエンザウイルス、ライノウイルス又はヒト免疫不全ウイルス(HIV)による感染によって引き起こされる、請求項21に記載の使用。
- 前記状態が癌である、請求項5〜12のいずれか一項に記載の使用。
- 前記癌がウイルスにより引き起こされる、請求項23に記載の使用。
- 前記ウイルスがヒトパピローマウイルスであって前記状態が子宮頸癌であるか、又は前記ウイルスがB型肝炎ウイルスであって前記状態が肝臓癌である、請求項24に記載の使用。
- 前記キチンマイクロ粒子が10μm未満の平均直径を有している、請求項3〜25のいずれか一項に記載の使用。
- 前記キチンマイクロ粒子が5μmより小さい平均直径を有している、請求項26に記載の使用。
- 前記キチンマイクロ粒子が少なくとも1μmの直径の平均サイズを有している、請求項27に記載の使用。
- 前記キチンマイクロ粒子が、カニ、エビ、ロブスター、甲イカの外骨格、ならびに昆虫および真菌から誘導される、請求項3〜28のいずれか一項に記載の使用。
- 前記キチンマイクロ粒子が精製されたキチンを超音波処理又はミリングすることにより得ることができる、請求項3〜29のいずれか一項に記載の使用。
- 前記キチンマイクロ粒子が担体粒子をN−アセチル−D−グルコサミン、キチン又はキチンのフラグメントでコーティングすることにより得ることができる、請求項3〜30のいずれか一項に記載の使用。
- 脱アセチル化された前記CMP組成物中におけるキチンを形成している単位が全単位のうちの20%未満を構成している、請求項3〜31のいずれか一項に記載の使用。
- 前記薬剤が、体重1kgにつき0.01mg〜100mgの間の活性化合物の量で患者に投与するためのものである、請求項3〜32のいずれか一項に記載の使用。
- 前記薬剤がヒトに投与するためのものである、請求項3〜33のいずれか一項に記載の使用。
- 前記キチンマイクロ粒子調製物が、1つ又はそれ以上の薬剤学的に許容可能な賦形剤、担体、推進剤、緩衝剤、安定剤、等張化剤、保存剤又は酸化防止剤を含む、請求項3〜34のいずれか一項に記載の使用。
- 前記キチンマイクロ粒子を投与するための送達デバイスであって:
a)請求項1〜3のいずれか一項に記載の組成物のレザバー;
b)患者の口内又は鼻内に位置付けることができるように適合化された送達用オリフィス;および
c)前記レザバーと前記送送達オリフィスとの間に設けられたバルブであって、該バルブを操作して前記キチンマイクロ粒子の送達を制御することができるように成されているバルブ;
を含む、前記デバイス。 - 生物体が引き起こす状態に対する免疫力を与えるために患者に同時的又は逐次的に投与するための:
a)キチンマイクロ粒子調製物;
b)感染性因子由来の抗原;および
c)更なるアジュバント;
を含む、キット。 - 送達デバイスを更に含む、請求項37に記載のキット。
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