JP2008541768A - ウィルスベクターを使用した標的化遺伝子送達方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本出願は、米国特許法第119条(e)項に基づいて、2005年6月1日に出願された米国仮特許出願第60/686,215号、及び2005年11月19日に出願された米国仮特許出願第60/738,078号(これらは共に、参照により本明細書に明確に援用される)に対して優先権を主張する。
これは標的細胞を組み換えレトロウィルスに感染させることを含む。他の態様では、組み換えレトロウィルスと、様々なベクターと、組み換えレトロウィルスを産生する構築物とが提供される。
うちの少なくとも1つが、蛍光タンパク質等のレポーター遺伝子である。幾つかの実施の形態では、蛍光タンパク質は緑色蛍光タンパク質である。
ウィルスコアがサイトゾルに侵入することが可能になる。逆転写及び産物の核への移動の後に、ウィルスのゲノムが標的の細胞ゲノムに統合され、導入遺伝子を組み込む。
別途定義されない限り、本明細書中で使用される技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって共通して理解されるものと同じ意味である。例えば、Singleton et al., Dictionary of Microbiology and Molecular Biology 2nd ed., J. Wiley
& Sons (New York, NY 1994)、Sambrook et al., Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Springs Harbor Press (Cold Springs Harbor, NY 1989)を参照のこと。本明細書中に記載されるものと同様な又は同等な任意の方法、装置、及び材料を本発明の実施に使用することができる。
、ホスホロチオエート、メチルホスホネート、ホスホロジチオエート、架橋ホスホロチオエート、又はスルトン結合等の改変結合のいずれか、及びこのような結合の組合せから成っているかにかかわらず、任意の核酸を指す。
生理的状態を既に患っている患者、及び疾患又は障害又は望ましくない生理的状態を予防するべきである患者が挙げられる。「治療」は疾患を完全に取り除く必要はなく、また患者が疾患又は障害に罹るのを完全に予防する必要もない。
et al. Hum Gene Ther 1999;10:1479-1489、Case SS, Price MA, Jordan CT et al. Proc Natl Acad Sci USA 1999;96:2988-2993、Uchida N, Sutton RE, Friera AM et al. Proc Natl Acad Sci USA 1998;95:11939-11944、Miyoshi H, Smith KA, Mosier DE et al. Science 1999;283:682-686、Sutton RE, Wu HT, Rigg R et al.著「Human immunodeficiency virus type 1 vectors efficiently transduce human hematopoietic stem cells」J Virol 1998;72:5781-5788。
の実施形態では、2A要素をコードするポリヌクレオチドは、ベクターの中で発現されるタンパク質をコードするポリヌクレオチドの間に組み込まれる。
融合分子(FM)は、組み換えウィルスのエンベロープに組み込むことができる分子であり、適した条件下で、目的の遺伝子の標的細胞への侵入を可能にする膜融合を誘導する。融合分子はウィルス、好ましくは組み換えレンチウィルスを偽型にすることができることが好ましく、このようにしてウィルスエンベロープに組み込むことができる。好ましくは、FMは標的細胞のウィルス感染を直接媒介しないが、一度ウィルスがエンドサイトーシス経路に侵入しても、融合を誘導するその能力は依然として維持される。したがって、FMは細胞表面分子と結合する能力を自然に有し得るが、結合能が低いか、又は低減されたFMが非特異的な形質導入を低減するのに好ましい。好ましくは、FMはウィルス糖タンパク質である。さらに、FMは濃縮を可能にする超遠心分離に耐性があることが好ましく、このことはin vivoでの遺伝子送達にとって重要である。
子として利用することができる。αウィルスのように、フラビウィルスはクラスII融合分子を使用して感染を媒介する(Mukhopadhyay et al. (2005) Rev. Microbio. 3, 13- 22)。prM(約165個のアミノ酸)及びE(約495個のアミノ酸)は、フラビウィルスの糖タンパク質である。また、DVに対するリガンド結合ポケットはよく特徴付けられている。興味深いことに、マンノース特異的なレクチンであるDC−SIGN(樹状細胞特異的なICAMグラッビング非インテグリン(ICAM-grabbing non-integrin))は、DV Eタンパク質上の炭水化物残基と特異的に相互作用し、ウィルスの侵入を高めることが示唆されている(Mukhopadhyay et al. (2005) Nat. Rev. Microbio. 3, 13-22)。このDV Eタンパク質のみによってエンベロープを形成したレンチウィルスは潜在的にDCを標的化することができる。TBE及びDV Eタンパク質並びに記載される他の融合分子のリガンド結合ポケットは、以下の様式で結合能を欠損させ、融合能を有するように改変され得る。
(1998))。好ましくは、HAmu等の結合欠損バージョンのFPV HA(図3A)を使用する(A. H. Lin et al., Hum. Gene. Ther. 12, 323 (2001))。HAmu媒介性の融合は一般的に受容体結合と独立していると考えられている(D. Lavillette, S. J. Russell, F. L. Cosset, Curr. Opin. Biotech. 12, 461 (2001))。
S. Wang, R. J. Kuhn, E. G. Strauss, S. Ou, J. H. Strauss, J. Virol. 66, 4992 (1992))。SINには、融合に関与する第1のタンパク質(E1)及び細胞結合に関与する第2のタンパク質(E2)の2つの膜貫通タンパク質が含まれる(S. Mukhopadhyay, R. J. Kuhn, M. G. Rossmann, Nature Rev. Microbio. 3, 13 (2005))。SINは、腫瘍レトロウィルス及びレンチウィルスの両方を偽型にするものとして知られている。
子の両方を有するウィルスを調製し、それらの選択性及び/又は標的細胞膜の通過を促進する能力に関して試験する。選択性を測定するための対照として、親和性分子を示さないウィルスを使用することができる一方で、親和性分子と野生型の糖タンパク質とを示すウィルスを突然変異体における力価効果を試験するための対照として使用することができる。親和性分子の結合パートナーを発現する細胞が、標準的な感染試験を使用してウィルスにより形質導入される。規定時間後、例えば形質導入の48時間後、細胞を回収することができ、例えばFACSによって、突然変異型のFMを含むウィルスに感染した細胞の割合を求めることができる。ウィルスに感染した細胞の割合を算出することによって、選択性に値を付けることができる。同様に、突然変異型のFMを含むウィルスに感染した細胞の割合を対応する野生型のFMを含むウィルスに感染した細胞の割合で割ることによって、ウィルス価に対する突然変異の効果を定量化することができる。好ましい突然変異体により、選択性と感染価との最良の組合せが与えられる。FMが選択されれば、FMによって包まれたウィルスが濃縮されることを確認することで、ウィルス濃度分析を行い得る。ウィルス上清を回収し、超遠心分離で濃縮する。ウィルスのストック溶液の限界希釈及び親和性分子の結合パートナーを発現する細胞の形質導入によって、ウィルス価を求めることができる。
かで、未結合のウィルスを取り除き、一定分量の細胞を分析する。それから、これらの一定分量の細胞からDNAを抽出し、LTR特異的なプライマーを使用して半定量を行う。LTR特異的なDNA産物の出現により、ウィルスの侵入及び脱殻の成功が示される。
本発明の好ましい実施形態において、ウィルス表面には、膜結合した親和性分子を含む細胞特異的な結合決定基が含まれる。標的細胞上の表面分子、例えば受容体タンパク質と選択的に結合する親和性分子を選択する。好ましくは、結合は高親和性結合であり、幾つかの実施形態では、解離定数は10-6〜10-12Mの範囲であり得る。しかし、他の実施形態では、より低い親和性結合、又はより高い親和性結合が可能である。
きる。したがって、幾つかの実施形態では、エンドサイトーシスを誘発する能力を有する一方で、特定の標的細胞型に対する結合特異性を維持する親和性分子が選択される。同様に、同じ抗体−抗原対が異なる細胞において異なるエンドサイトーシス経路を刺激することができ、これにより異なる細胞において目的の遺伝子の送達を促進するための異なる能力が得られる。上述した融合分子に対する分析を改変して、様々な抗体、又は他の親和性分子が特定の標的細胞への目的の遺伝子の送達を媒介するための能力を比較することができる。
幾つかの実施形態において、細胞特異的な結合決定基は抗体である。抗体は、既知の方法を使用して、標的細胞上の任意の所望の細胞表面分子に対して作製され得る。抗体は、免疫応答を最小限にするのに適切な種で産生することができる。他の実施形態では、ヒト化抗体又はキメラ抗体を調製して使用する。例えば、抗体はマウス、ウサギ又は他の動物で作製し、可変領域をヒトの抗体の定常領域と組合せることができる。さらに、多くの抗体が市販され、標的細胞上の標的分子に基づいて選択することができる。
を促進する。それから、全カセットをpCDNA3(Invitrogen)等の発現ベクターにクローン化することができる。パッケージング細胞の表面上の抗体発現の効率は、FACS染色によって分析することができる。
他の実施形態において、親和性分子は、標的細胞上の細胞表面の受容体と結合するリガンド、好ましくはペプチド又はタンパク質リガンド、あるいは標的細胞上の細胞表面リガンドと結合する受容体であり得る。親和性分子が可溶性リガンド又は受容体である場合、親和性分子は、膜貫通ドメイン又は膜に固定させる他の成分を有する融合分子として構築することが好ましい。好適なリガンドは、例えばホルモン、成長因子等を含む。非抗体の親和性分子の1つの具体例は幹細胞因子である。
好ましい実施形態において、1つ又は複数のベクターを使用して、標的細胞に所望のポリヌクレオチドを導入する。このベクターは、自身の組み換えレトロウィルスの様々な成分と、目的の遺伝子と、融合分子と、親和性分子と、パッケージング細胞では供給されないウィルスの産生に必要な任意の成分をコードするポリヌクレオチド配列とを含む。典型的に、これらのポリヌクレオチドは、必要に応じて、パッケージング細胞及び標的細胞におけるコード配列の発現に関する1つ又は複数の調節要素の制御下にある。真核細胞の発現ベクターは当該技術分野で既知であり、多くの商業的供給源から入手できる。
asignaウィルス(TaV)(Szymczak et al. (2004) Nat. Biotechnol. 22, 589-594)由来の2A様配列と連結されたフリン開裂部位配列(RAKR)をコードするオリゴヌクレオチド(Fang et al. Nat. Biotech 23, 584-590 (2005))を使用して、多シストロン性ベクターの遺伝子要素を分ける。所望の組み換えレトロウィルスを合成するのに使用される特定の多シストロン性ベクターの有効性は、標準的なプロトコルを使用して、それぞれの遺伝子の発現を検出することによって容易に試験することができる。
(1989))、Coffin et al.「Retroviruses」 Cold Spring Harbor Laboratory Press, N. Y. (1997))、及び「RNA Viruses: A Practical Approach」(Alan J. Cann, Ed., Oxford
University Press, (2000))に記載されるような、制限エンドヌクレアーゼ消化、ライゲーション、形質転換、プラスミド精製及びDNAシークエンシングの標準的な技法が含まれる。
ー配列が現在知られている(グロビン、エラスターゼ、アルブミン、α−フェトプロテイン、及びインスリン)。好ましくは、真核細胞ウィルス由来のエンハンサーが使用される。例としては、複製起点の後半部分(late side)(100〜270bp)のSV40エンハンサー、サイトメガロウィルスの早期プロモーターエンハンサー、複製起点の後半部分におけるポリオーマのエンハンサー、及びアデノウィルスのエンハンサーが挙げられる。エンハンサーは、抗原特異的なポリヌクレオチド配列に対して5’位又は3’位でベクターにスプライシングすることができるが、プロモーターから5’位に位置することが好ましい。
ベクターのうちの1つがコアウィルスをコードする(「ウィルスベクター」)。本発明に使用するのに好適である利用可能なウィルスベクターが非常に多く存在し、これにはPfeifer A, Verma IM(2001)著「Gene Therapy: promises and problems」(Annu. Rev. Genomics Hum. Genet. 2:177-211)に記載されるようなヒトの遺伝子治療への適用のため
に同定したものが含まれる。好適なウィルスベクターとしては、レトロウィルス由来のベクター、例えばモロニーマウス白血病ウィルス(MLV)由来ベクター等のRNAウィルスに基づくベクターが挙げられ、またより複雑なレトロウィルス由来ベクター、例えばレンチウィルス誘導性ベクターが挙げられる。ヒトの免疫不全ウィルス(HIV−1)誘導性ベクターは、このカテゴリーに属している。他の例としては、HIV−2に由来するレンチウィルスベクター、ネコ免疫不全ウィルス(FIV)、ウマ伝染性貧血ウィルス、サル免疫不全ウィルス(SIV)及びマエディ/ビスナウィルスが挙げられる。
白血病ウィルスに基づいている。さらなる実施形態では、ベクターはマウスの幹細胞ウィルスに基づいている(Hawley, R. G., et al. (1996) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:10297-10302、Keller, G., et al. (1998) Blood 92:877-887、Hawley, R. G., et al. (1994) Gene Ther. 1 : 136-138)。ウィルスベクターは、Choi, JK、Hoanga, N、Vilardi,
AM、Conrad, P、Emerson, SG、Gewirtz, AM(2001)(Stem Cells 19, No. 3, 236-246)に記載されるようなハイブリッドウィルスに基づくこともできる。
関係であることが好ましく、このことにより、遺伝子が標的細胞に組み込まれる場合、特定の様式で目的の遺伝子の発現が調節される。或る特定の実施形態では、有用な転写調節配列は、時間的及び空間的の両方で、活性に関して高度に調節されるものである。
al. Gene 32:409-417 (1984)及びDobson et al. Nucleic Acids Res. 10:2635-2637 (1982)を参照のこと)のプロモーターが挙げられる。
et al. MoI. Cell Biol. 8:3058-3064 (1988)及びTakadera et al. MoI. Cell Biol. 9:2173-2180 (1989)を参照のこと)、ミオゲニン(Yee et al.著「Genes and Development」7:1277-1289 (1993))、thy1(Gundersen et al. Gene 113:207-214 (1992))が挙げられる。さらに、プロモーターは、遺伝子を誘導発現させるように選択することができる。誘導発現に対する多くの系が当該技術分野で既知であり、これにはテトラサイクリン応答系及びlacオペレーター−リプレッサー系が含まれる。プロモーターの組合せを使用して、目的の遺伝子の所望の発現を得ることができることも考えられる。当業者は、生物体、及び/又は目的の標的細胞における遺伝子の所望の発現パターンに基づいて、プロモーターを選択することができる。
ウィルスベクターの一部として使用されるRNAポリメラーゼII又はRNAポリメラーゼIII(Pol II又はIII)のプロモーターは誘導性であり得る。任意の好適な誘導性Pol II又はIIIのプロモーターを本発明の方法に使用することができる。特に好適なPol II又はIIIのプロモーターには、Ohkawa及びTaira著「Human Gene Therapy」(Vol. 11, pp 577-585 (2000))並びにMeissner et al著「Nucleic Acids Research」(Vol. 29, pp 1672- 1682 (2001))(参照により本明細書中に援用される)において提示されるテトラサイクリン応答性プロモーターが含まれる。
は負の位置効果からの外因性遺伝子を遮断することができる。
ウィルスは、ウィルスを目的の遺伝子の送達が望まれる標的細胞に接触させる任意の方法で、細胞に送達することができる。好ましい実施形態では、好適な量のウィルスが、例えば、体内への注射によって、動物に直接(in vivoで)導入される。1つのこのような実施形態では、ウィルス粒子が動物の末梢血流に注入される。標的細胞を含む器官へ直接注入する等の他の注入位置も好適である。例えば、頭蓋内注入又は肝内注入を使用して、ウィルスをそれぞれ脳及び肝臓に送達することができる。特定の状況及び標的細胞の性質に応じて、例えば吸入、又は上皮組織との直接接触(例えば、眼、口又は肌との接触)を含む他の手段によって、導入を行うことができる。
本明細書中に開示される組み換えレトロウィルスを使用して、目的の遺伝子を送達するために、多種多様な細胞を標的化することができる。標的細胞は、一般的に目的の遺伝子及び所望の効果に基づいて選択される。
任意の分子であり得る。好ましくは、標的分子は、受容体等のペプチド又はポリペプチドである。しかし他の実施形態では、標的分子は、炭水化物又は結合パートナーにより認識することができる他の分子であり得る。標的分子に対する結合パートナーが既知である場合、親和性分子として使用することができる。しかし、結合分子が知られていない場合、標準的な手法を使用して、標的分子に対する抗体を産生することができる。したがって抗体は、親和性分子として、又は親和性分子を形成するために使用することができる。
CD34は、ヒトの造血幹細胞(HSC)マーカーである。HSCは、ウィルス媒介性遺伝子導入によって抗原特異的な免疫細胞に分化させるようにプログラムすることができる。CD34+HSCへの標的化された遺伝子送達によりin vivoでの遺伝子導入ができるが、in vitroで使用することもできる。したがって、様々な貧血症、白血病、リンパ腫、及び血小板障害等の広範囲の血液疾患は、開示の方法と適切なポリヌクレオチドをHSCに送達するベクターとを使用して治療することができる。HSCにおける発現が様々な血液疾患の治療に有益であるタンパク質をコードするポリヌクレオチドが当業者には明らかである。
Amu等のFMと共に使用され、in vivo又はin vitroのいずれかで、目的の遺伝子をCD34+細胞に送達させることができる。
動物腫瘍モデル及び癌患者における腫瘍特異的なキラー(CD8)及びヘルパー(CD4)T細胞応答を誘導するのに樹状細胞(DC)が広く使用されている(Schuler et al.
Curr. Top. Microbiol. 281, 137-178 (2003))。抗原の標的化及びこれらの成熟の誘導は、in situのDCワクチン化のアプローチの一部である。したがって、本明細書に記載されるようなウィルスを使用して、in vivoでDCに対するレンチウィルスベクターを標的化することは治療的に利用され、例えば、メラノーマ及びHIVを治療するのに利用することができる。DEC−205がリンパ組織で豊富に発現されるので、DEC−205エンドサイトーシス受容体は、DCにおける好ましい標的表面抗原であり、抗原提示の効率を有意に改善し得る(Bonifaz, L.C. et al. J Exp. Med. 199, 815-824 (2004))。好ましくは、IgG1の定常領域と共に抗DEC205抗体由来の可変領域を含む抗DEC−205抗体が、親和性分子としてウィルス粒子の表面上に示され、TNFα又はCD40L等の抗原タンパク質及び成熟刺激性分子の両方をコードする遺伝子をDCへ同時に送達させることができる。成熟シグナルは、親和性分子として抗CD40抗体を使用することによって、抗原遺伝子と共に送達することもできる。
本発明の方法を使用してトランスジェニック動物を作ることができる。幾つかの実施形態では、成体動物における特定の細胞を標的化し、これらの細胞で発現させるべき遺伝子をコードするポリヌクレオチドを送達する。他の実施形態において、卵母細胞或いは1つ又は複数の胚細胞が、上記のように産出された組み換えウィルスに感染される。ウィルスが、発生過程の動物のゲノムに組み込まれる目的の遺伝子をコードするポリヌクレオチドを送達し、何代にもわたって伝達することができる。当業者は、感染方法及び感染の後の細胞の処理方法が細胞が得られる動物の種類によって変わること、並びに特定の細胞型への遺伝子の送達を標的化する能力により、in vivo又はin vitroで遺伝子が送達されることを認識している。
本発明の方法を使用して、多種多様の疾患又は障害を予防又は治療することができる。本発明の方法による治療又は予防の効果のある疾患又は障害としては、癌、自己免疫疾患、ウィルス、細菌、真菌、寄生虫等による感染が挙げられるが、これらに限定されない。幾つかの実施形態では、目的の遺伝子を標的細胞へ送達する組み換えレトロウィルスを使用することによって疾患が治療されるが、この遺伝子の発現により、細胞又は動物における機能不全に全体として対処するタンパク質又は他の分子が産出される。
細胞株に送達される。例えば、siRNA分子をコードする遺伝子は、病原体のライフサイクルに関する遺伝子を阻害するか、又は過剰に産出されるタンパク質の発現を低減するか、又は疾患若しくは障害の進行に関与する過程を妨げるために供給される。他の実施例では、天然分子と競合させることによって特定の細胞活性を阻害するか、又は天然分子の活性を相乗的に作用させ、若しくは促進させる細胞活性を高める遺伝子が送達される。
本明細書中に記載の方法は、RNA分子のベクター媒介性の送達を可能にし、また標的細胞における小さいRNA分子の送達及び発現に特に適している。本発明の幾つかの実施形態によれば、RNA分子が標的細胞に送達され、それから標的遺伝子の発現を下方調節するために標的細胞内で発現される。標的遺伝子を下方調節する能力には、特定の遺伝子の生物学的機能を同定することを含む、多くの治療用途及び研究用途がある。RNA分子を標的細胞に送達し、その後、標的細胞内のRNA分子が発現することによって、培養細胞及び哺乳動物生物体の両方において、任意の多くの遺伝子の発現をノックダウン(又は下方調節)することが可能になる。幾つかの実施形態では、病原体ウィルス等の病原体のライフサイクルに必要であるか、又は疾患若しくは障害に直接又は間接的に寄与する遺伝子が、siRNAを有する標的細胞において下方調節される。
Nat. Rev. Genet. 2: 110-119 (2001)を参照のこと)。
I内在性膜糖タンパク質;C型肝炎:CD81、低濃度リポタンパク質受容体;HIV(レトロウィルス科):CD4、CXCR4、ヘパラン硫酸グルコアミノグリカン;HSV:ヘパラン硫酸グルコアミノグリカン、PVR、HveB、HveC;インフルエンザウィルス:シアル酸;麻疹:CD46、CD55;ポリオウィルス:PVR、HveB、HveC;ヒトパピローマウィルス:インテグリン。当業者は、本発明が現在知られている受容体(又は他の分子)による使用に限定されないことを認識するであろう。新規の細胞受容体及び補助受容体が見出されれば、本発明の方法はこのような配列に適用することができる。
上記で示されるように、表面の樹状細胞マーカーに対する様々な細胞特異的な結合決定基が、抗原をコードする遺伝子をDCへ送達する組み換えレトロウィルスの産生に使用するために考案されている。例えば、ヒト抗DEC−205抗体(αhDEC−205)に対するハイブリドーマ細胞株は、ATCCから入手可能である(ATCC番号:CRL−2460)。癌(例えば、Mart−1)又は別の疾患/障害(例えばウィルス感染)等に対する免疫応答が望まれる抗原をコードする遺伝子が、上述された方法を使用して、DCに送達され得る。この抗原に対する遺伝子は、複数のベクター又は好ましくは多シストロンベクター系を使用して、TNFα/CD40L等の刺激分子及び/又はGFP等のレポーター分子をコードする遺伝子を伴い得る。
他の実施形態において、開示された方法を使用して、腫瘍又は他の異常細胞の成長を処理することができる。例えば前立腺癌及び乳癌を含む様々な癌に対する腫瘍関連抗原が知られている。幾つかの乳癌では、例えば、Her−2受容体が、癌細胞の表面上で過剰発現される。多くの腫瘍関連抗原が検討されている(例えば、Boon T, Cerottini JC, Vandeneynde B, Vanderbruggen P, Vanpel A, Annual Review Of Immunology 12: 337-365, 1994、Renkvist N, Castelli C, Robbins PF, Parmiani G. Cancer Immunology Immunotherapy 50: (1) 3-15 MAR 2001)。したがって、幾つかの実施形態では、既知の腫瘍関連抗原に対する抗体を使用して、親和性分子を調製する。
の標的分子に対する親和性分子を合成することによって、幅広い疾患を治療するのに適合され得る。次に、目的の遺伝子を標的細胞に送達するために、膜結合した親和性分子及び融合分子を有する組み換えレトロウィルスをアセンブリする。
ヒトにおいて、共通のγ鎖(γc)における遺伝子異常により、X連鎖重症複合型免疫不全(X−SCID)が引き起こされる。治療を行わなければ、X−SCID患者は重度の感染症に苦しめられ、発育障害が起こり、通常生後1年以内で死に至る。この疾患に対する根本的な治療処置は遺伝子治療であることが一般的に認められている。開示されるようなレトロウィルスを使用して、in vitroで共通のγc遺伝子を精製したCD34+造血幹細胞(HSC)に送達し、免疫系を再構築するために、γc形質導入したHSCを患者に移し戻すことができる。他の実施形態では、組み換えウィルスがin vivoで与えられ、X−SCIDを治療するために、CD34+幹細胞が標的化される。γc
遺伝子が送達される場合、標的細胞に対して組み換えレトロウィルスを特異的に標的化するためにSCFを使用することができる。
が増幅され、上記のように、レンチウィルスベクターにクローン化される。293細胞等のパッケージング細胞が、レンチウィルスベクター、並びに親和性分子及び融合分子をコードする1つ又は複数のベクターでトランスフェクトされる。SCFを保有するウィルス又はHSCを標的化する別の親和性分子及び融合分子(SINmu等)を回収及び濃縮する。注射によって、γc欠損患者にこのウィルスが投与される。動員(mobilization)のあり、又はなしで試験を行い、HSCを循環血に移すことができる。それから末梢リンパ細胞を6〜8週間分析し、成熟T細胞及び成熟B細胞の存在を検出することができる。
他の実施形態において、組み換えレトロウィルスを使用して、T細胞受容体又はB細胞受容体等の免疫細胞受容体をコードするポリヌクレオチドをヒトの幹細胞に送達する。それから、幹細胞がT細胞又はB細胞等の成熟免疫細胞に発展し、これらの特異性は、幹細胞が形質導入された受容体により決定される。一実施形態では、疾患又は障害を患う患者が、このアプローチを使用して所望の特異性を有する免疫細胞を発生することによって治療される。抗原は、疾患又は障害に関連することがこれまでに知られている場合があるか、又は当該技術分野で既知の任意の方法で同定され得る。例えば、腫瘍関連抗原等の患者が患っている種類の癌に対する抗原が既知であり得る。腫瘍関連抗原は全く限定されず、これには、例えば治療される患者由来の癌細胞で同定される抗原が含まれる。
容体を同定することができる。T細胞受容体は、患者において形成される免疫細胞の種類に応じて、細胞傷害性T細胞、ヘルパーT細胞、又はその両方から同定することができる。例えば、細胞傷害性T細胞が患者において形成される場合、T細胞受容体はCTLから同定される。一方で、ヘルパーT細胞が形成される場合、T細胞受容体はヘルパーT細胞から同定される。以下に示されるように、幾つかの実施形態では、CTL由来のT細胞受容体及びヘルパーT細胞由来のT細胞受容体の両方が用いられる。
[実施例]
以下の実験方法が、以下の実施例1〜実施例5で使用される。
膜結合したヒトのIgG1の軽鎖及び重鎖の定常領域のcDNAが増幅され、pBudCE4.1ベクター(Invitrogene)のヒトのCMVプロモーター及びEF1αプロモー
ターそれぞれの下流に挿入された。それからマウスの抗CD20抗体(クローン2H7)の軽鎖及び重鎖の可変領域が、PCR増幅を使用してクローン化され、対応する定常領域の上流に直接挿入された。得られる構築物をpαCD20として表した。ヒトのIgα及びIgβのcDNAもpBudCE4.1ベクター(Invitrogene)にクローン化され、pIgαβが得られた。
標準的なリン酸カルシウム沈殿法を使用して、293T細胞をトランスフェクトすることによって、レンチウィルスを創出した。それぞれ2.5μgのpαCD20、pIgαβ、及びパッケージベクタープラスミド(pMDLg/pRRE及びpRSV−Rev)と共に、適切なレンチウィルスベクタープラスミド(5μg)で6cmの培養皿中の293T細胞(約80%の密集生)をトランスフェクトした(Sandrin et al. Curr. Top. Microbio. Immunol. 281:137 (2003))。トランスフェクトの48時間及び72時間後に、ウィルス上清を集菌し、0.45μm孔径のフィルターで濾過した。
VSVG偽型化レンチウィルスを介した安定な形質導入によって、293T/CD20細胞株が形成された。ヒトのCD20のcDNAが、プラスミドFUW(GFP without
FUGW; Lois et al. Science 295:868-872 (2002))におけるヒトユビキチンCプロモーターの下流でクローン化され、FUW−CD20を構築した。それから、レンチウィルスベクターFUW−CD20をVsVgで偽型にし、293Tを形質導入するのに使用した。得られた細胞を細胞選別にかけ、293T/CD20として表される均一な集団のCD20+細胞を得た。
細胞(293T/CD20又は293T(0.1×106))を4℃で30分、500μLのウィルス上清とインキュベートし、4mlの冷PBSで洗浄した。それから、細胞を以下の3つの抗体で染色した:αCD20を染色する抗ヒトIgG抗体(BD Pharmingen)、CD20を染色する抗ヒトCD20抗体(BD Pharmingen)、及びHAmuを染色する抗FPV HAポリクローナル抗体(H.-D. Klenck(Institute of Virology; Philipps- University, Marburg, Germany)から得られる)又はSINmuを染色する抗タグ抗体(Roche)。染色後、蛍光活性化細胞選別(FACS)によって細胞を分析した。
293T/CD20細胞(0.2×106/ウェル)又は293T細胞(0.2×106/ウェル)を24ウェル培養皿でプレート培養し、Beckman Allegra 6R遠心器を使用して、30℃で90分間、2,500rpmでウィルス上清(0.5ml
/ウェル)でスピン感染させた。それから、培地を取り除き、新鮮培地に置き換え、37℃でさらに3日間、5%のCO2の存在下でインキュベートした。GFP+細胞の割合をFACSにより求めた。形質導入価を、線形応答を示す希釈範囲で測定した。
293T/CD20細胞(0.2×106)及び0.5mLのウィルス上清を用量勾配の抗ヒトCD20抗体(BD Pharmingen)又はNH4Clの非存在下又は存在下で8時間、インキュベートした。培地を新鮮培地に置き換え、37℃でさらに2日間、5%のCO2の存在下でインキュベートした。FACS分析を使用して、形質導入の効率を定量化した。
293T細胞(0.1×106)を一過性にトランスフェクトして、GFPと、表面のαCD20と、融合タンパク質(HAmu又はSINmuのいずれか)とを発現させ、293T/CD20細胞(0.1×106)を共に混合し、標準PBS(pH=7.4)で2回洗浄して、37℃で30分間、5%のCO2で150μlの低pHのPBS(pH=5.0)又は標準pHのPBS(pH=7.4)(対照として)中でインキュベートした。それから、細胞を広く洗浄し、1日間標準培地で培養した。GFPフィルターセットを備える落射蛍光顕微鏡によって、細胞を視覚化させた。in vitroでヒトの初代B細胞の形質導入が標的化された。
6〜8週齢のRAG-/-γc -/-の雌マウス(Taconic)を360度全身照射した。翌日、100×106個の新鮮なヒトのPBMC(AllCells, LLC)が、それぞれのマウスへの尾静脈注射によって伝播された。6時間後、濃縮ウィルス(100×106(TU/マウス))又はPBS(対照として)が尾静脈を介してこれらのマウスに投与された。2日後、心臓穿刺によってこれらのマウスから全血を採取し、ヒトのCD3及びCD20に対して、細胞を染色して、それから、CD3、CD20及びGFPの発現をFACSにより分析した。マウスは、大学の規則に従って、カルフォルニア工科大学(the California Institute of Technology)の動物施設における無菌環境下で、混合抗生物質スルファメタキサゾールと経口懸濁剤トリメトプリム(Hi-Tech Pharmacal)とで維持された。
本発明の幾つかの実施形態によれば、親和性分子の基礎として機能するために選択された抗体の1つは、現在B細胞リンパ腫の治療に使用されているバージョンである抗CD20抗体(αCD20)である。生理学的に、CD20が、発生における前駆B細胞の段階、及びB細胞の成熟過程を通して発現され、造血幹細胞はCD20を発現しない。B細胞がプラズマ細胞に成熟する場合、CD20発現が低減される。したがって、CD20は、例えばB細胞リンパ腫及び白血病の治療に理想的な標的である。ヒトの膜結合したIgG定常領域を有するマウス/ヒトのキメラ抗CD20抗体をコードする構築物(pαCD20)が、上記のように形成された。抗体の表面での発現に必要な2つの関連するタンパク
質であるヒトのIgα及びIgβをコードする遺伝子がpIgαβとして表す構築物にクローン化された(図1)。
et al. Science 295:868-872 (2002))、ウィルスのgag、pol、及びrev遺伝子をコードするプラスミド、pαCD20、pIgαβ、及びpFM(HAmu又はSINmuのいずれかであるFMをコードするプラスミド)による293細胞の同時トランスフェクトによって達成された。FUGWは、GFPレポーター遺伝子を働かせるヒトのユビキチン−Cプロモーターを保有する自己不活性化した、複製能力がないレンチウィルスベクターである(C. Lois, E. J. Hong, S. Pease, E. J. Brown, D. Baltimore, Science 295, 868 (2002))。対照として、水疱性口内炎ウィルス(VSVG)に由来するエンベロープ糖タンパク質を認識及び融合タンパク質として使用した。
次に、細胞特異的な様式での、αCD20保有ウィルスによる、CD20を発現する細胞内への遺伝子送達の有効性を試験した。GFP発現を使用して、形質導入効率を測定した。様々な表面タンパク質を保有するウィルスを含む上清を、CD20を発現する標的細胞及び対照としての293T細胞とインキュベートした。形質導入の4日後、標的化の効率をFACSにより分析した。図5A(右端のパネル)は、FUGW/αCD20+HAmuウィルス粒子が293T/CD20細胞の16%を特異的に形質導入し得ることを示している。左側のパネルは、形質導入にはビリオン上にHAmuの存在が必要であるが、
おそらくはHAmuのそのリガンド(シアル酸)との弱い残りの結合のために、αCD20を欠失しているビリオンによるバックグラウンド形質導入が幾らか存在していたことを示す。FUGW/αCD20+HAmu(新鮮ウィルス上清、非濃縮)に対する力価は、約1×105形質導入単位(TU)/mLであると推測された。線形応答を示した希釈範囲におけるGFP+細胞の割合によりこの力価を求めた。293T細胞は、僅かなバックグラウンド感染レベルを示したが、FUGW/αCD20+Hamuによる特異的な形質導入は示さなかった(図5A、下のパネル)。
た細胞を用いた同様の実験では非常に低いレベルの融合が得られたことから、αCD20とCD20との間の相互作用は融合の可能性を劇的に増大させる。αCD20/CD20の相互作用が細胞膜を極めて近づけて、これにより融合タンパク質の作用を促進させる。
人工的に生成された細胞株のCD20に特異的な形質導入を媒介する系の能力を確立し、CD20抗原を天然で保有している細胞である初代ヒトBリンパ細胞の特異的な形質導入を調査した。新鮮で非分画のヒト末梢血単核細胞(PBMC)をFUGW/αCD20+SINmuで形質導入し、それからリポ多糖(LPS)で刺激して、B細胞集団を増大させた。4日後、細胞をCD19(B細胞マーカー)、CD20及びGFPの発現を調べるために染色した(図6A)。35%を超える細胞が、記載の培養条件下においてCD20+B細胞であった。これらの大部分はGFP+であった。反対に、CD20-の非B細胞の中でGFP+の細胞は実質的に検出されず、このことにより形質転換がCD20発現に厳密に依存していることが確認された。別の対照実験では、新鮮なPBMCをFUGW/αCD20+SINmuで形質転換した後、ホリボール−12−ミリスチン酸−13−酢酸塩(PMA)とイオノマイシンとで刺激して、T細胞を増殖させた。これらのT細胞のFACS分析はGFPの発現を示さず(図7)、このことにより形質導入の特異性が確認された。
標的化方法はレンチウィルスベクターFUGWに限定されないことを実証するために、異なるプロモーター構造を有する2つのさらなるレンチウィルスベクターを評価した。Kohn et al.は、関連のマトリクス付着領域を有する免疫グロブリン重鎖エンハンサー(Eμ)をヒトのサイトメガロウィルス(CMV)プロモーター(CCMV)又はマウスのホスホグリセリン酸キナーゼプロモーター(CPGK)を保有するレンチベクターに組み込んでいる(C. Lutzko et al. J. Virol. 77, 7341-51 (2003))。それから、2つのレンチウィルスベクターをこの系に適合させ、組み換えレンチウィルスCCMV/αCD20+SINmu及びCPGK/αCD20+SINmuを調製した。これらのウィルス上清を有するPBMC誘導性B細胞の形質導入は、これまでにFUGWで観察されたものと同様の結果を示した(図6A)。ゲノムPCR増幅によって、GFP導入遺伝子の安定な統合を検出した(図6B)。
次に、in vivoで特異的な形質導入の媒介における、この系の有効性を試験した。この目的のために、ヒトのPBMCを異種移植したマウスモデルを使用した。新鮮なヒトのPBMC(100×106/マウス)を尾静脈注射によって放射性免疫不全RAG2-/-γc -/-マウスに移した。ヒトの細胞を移して6時間後、αCD20とSINmuとを保有する改変レンチウィルスを尾静脈を介して投与した。2日後、これらのマウスの全血を採取し、表面抗原とGFP発現とに関して細胞を分析した。
の3つの集団でGFP発現の徴候を示さなかった(図6C)。これに対して、FUGW/αCD20+SINmuを注射したマウスから単離したCD20+細胞の少なくとも40%でGFP発現が観察された一方で、他の2つの集団では形質導入が検出されなかった。
レンチウィルスベクターを標的化する表面の抗体等の親和性分子の使用を評価するために、抗CD20抗体に関して上記されたように、マウスのDEC−205受容体に対する膜結合した抗体(αmDEC−205として表される)を調製した。αmDEC−205は、樹状細胞(DC)で豊富に発現したエンドサイトーシス受容体である。
単鎖の膜結合形態の抗体(scAbm)が、標的化組み換えレンチウィルスの親和性分子として開発された。scAbmは一般的に、柔軟性のあるペプチドリンカーで連結された重鎖及び軽鎖の可変ドメインを有するように設計される。またこれらは、細胞表面に固定するために、N末端にシグナルペプチド、及びC末端に膜貫通ドメインを保有している。考案されたわずかに異なるバージョンのscAbmがscαCD20として表される。このscAbmは、(GGGGSGGGS)2ペプチドと連結された抗CD20抗体の重鎖及び軽鎖の可変ドメインと、ヒトのIgG1のヒンジCH2−CH3ドメインを含む二量化領域と、膜貫通ドメインと、細胞表面上でこのキメラタンパク質を示すヒトのHLA−A2の細胞質尾部とから成る。
Ines, C. et al. J. Immunol. 163, 3948-3956(1999))における二量化ドメインのないこれらのバージョンのscAbmと比較した場合、より高いレベルの表面抗体の発現が得
られた。このことは、ジスルフィドと連結された二量化ドメインの包含に部分的に起因している可能性があり、これが表面上のscAbmの安定性を改善させ得る。
(1)抗体以外の表面タンパク質を使用して、レンチウィルスベクターを標的化することができるか否か、及び(2)細胞特異的な形質導入のために、CD20以外の表面受容体を標的とすることができるか否かに取り組む実験を行った。
他の表面受容体−リガンド相互作用を標的化を達成するのに利用することができるか否かを研究した。幹細胞因子(SCF)は、細胞表面上のタンパク質チロシンキナーゼ受容体であるcキットと相互作用し、造血を調節する(Shimizu, YJ. et al. J Immunol. 156, 3443-34491996))。SCFのcキットとの結合により、エンドソーム過程を介したcキットの迅速な内在化が引き起こされることが見出された(Jahn, T. et al. Oncogene 21,
4508- 4520(2002))。Casimir et al.は、膜結合ヒトSCFを同種指向性レトロウィルスに組み込むことができることを示し、得られたウィルスがcキット発現ヒト細胞を特異的に形質導入することができることを見出した(Chandrashekran, A., et al. Blood 104, 2697- 2703(2004))。エンベロープタンパク質Ecoがヒトの細胞表面上で発現したmCATを認識することができないので、元の同種指向性ウィルスはヒト細胞に感染しない(「the mCAT derived from rodent cells is the viral receptor for Eco」; Coffin, J.M. et al. (1997). Retroviruses (New York, Cold Spring Harbor Laboratory Press))。組み換えレンチウィルス及びレトロウィルスを標的化するためにSCFと協調するHAmu及びSINmuの能力を評価した。
Claims (35)
- ポリヌクレオチドを標的細胞に送達する方法であって、前記方法は、
前記標的細胞を組み換えレトロウィルスに感染させる工程
を含み、前記組み換えレトロウィルスは、送達される前記ポリヌクレオチドと、レンチウィルスの5’長末端反復領域(LTR)由来のR配列及びU5配列と、自己不活性化したレンチウィルスの3’LTRと、融合分子と、細胞特異的な結合決定基とを含む、方法。 - 前記融合分子がpH感受性である、請求項1に記載の方法。
- 前記融合分子がクラスI融合因子である、請求項1に記載の方法。
- 前記融合分子がクラスII融合因子である、請求項1に記載の方法。
- 前記融合分子がウィルス糖タンパク質である、請求項1に記載の方法。
- 前記融合分子の結合能が低減している、請求項5に記載の方法。
- 前記融合分子が、ラッサ熱ウィルス、ダニ媒介性脳炎ウィルス、デングウィルス、B型肝炎ウィルス、狂犬病ウィルス、セムリキ森林ウィルス、ロスリバーウィルス、アウラウィルス、ボルナ病ウィルス、ハンターンウィルス、及びSARS−CoVウィルスから成るウィルスの群の1つに由来するウィルス糖タンパク質を含む、請求項5に記載の方法。
- 前記細胞特異的な結合決定因子がタンパク質を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記細胞特異的な結合決定因子が抗体を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記抗体がヒトIgG1の軽鎖定常領域と重鎖定常領域とを含む、請求項9に記載の方法。
- 前記細胞特異的な結合決定因子が、免疫グロブリンαと免疫グロブリンβとをさらに含む、請求項11に記載の方法。
- 前記抗体が単鎖抗体である、請求項9に記載の方法。
- 前記単鎖抗体が、別のタンパク質由来の膜貫通ドメインと融合される、請求項12に記載の方法。
- 前記抗体が、抗CD20抗体、抗CD34抗体、及び抗DEC−205抗体から成る群より選択される、請求項9に記載の方法。
- 前記5’LTR配列がHIV由来である、請求項1に記載の方法。
- 前記自己不活性化3’LTRが、そのエンハンサー配列が欠失したU3要素を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記自己不活性化3’LTRが、改変されたHIVの3’LTRである、請求項16に記載の方法。
- 前記組み換えレトロウィルスが偽型である、請求項1に記載の方法。
- 前記ポリヌクレオチドが目的の遺伝子である、請求項1に記載の方法。
- 前記標的細胞が癌細胞である、請求項1に記載の方法。
- 送達される前記ポリヌクレオチドと、前記R配列及びU5配列と、前記自己不活性化したレンチウィルスの3’LTRとを含むベクター、前記融合分子をコードする遺伝子を含むベクター、及び前記細胞特異的な結合決定基をコードする遺伝子を含むベクターでパッケージング細胞株をトランスフェクトする工程、並びに
組み換えレトロウィルスを前記パッケージング細胞株から回収する工程
をさらに含む、請求項1に記載の方法。 - 前記パッケージング細胞株が293細胞株である、請求項21に記載の方法。
- レンチウィルスの5’長末端配列(LTR)由来のR配列及びU5配列を有する核酸と、
自己不活性化したレンチウィルスの3’LTRと、
融合分子、及び膜結合した細胞特異的な結合決定基と
を含む、組み換えレトロウィルス。 - 前記融合分子がウィルス糖タンパク質である、請求項23に記載の組み換えレトロウィルス。
- 前記融合分子がpH感受性である、請求項23に記載の組み換えレトロウィルス。
- 前記融合分子が突然変異型のヘマグルチニンである、請求項23に記載の組み換えレトロウィルス。
- 前記融合分子がSINである、請求項23に記載の組み換えレトロウィルス。
- 前記細胞特異的な結合決定基がタンパク質を含む、請求項23に記載の組み換えレトロウィルス。
- 前記細胞特異的な結合決定基が抗体を含む、請求項23に記載の組み換えレトロウィルス。
- 前記抗体がヒトのIgG1である、請求項29に記載の組み換えレトロウィルス。
- 前記細胞特異的な結合決定基が、免疫グロブリンαと免疫グロブリンβとをさらに含む、請求項30に記載の組み換えレトロウィルス。
- 前記抗体が単鎖抗体である、請求項29に記載の組み換えレトロウィルス。
- 前記ウィルス構築物が少なくとも1つの目的の遺伝子をさらに含む、請求項29に記載の組み換えレトロウィルス。
- 前記目的の遺伝子がレポーター遺伝子である、請求項33に記載の組み換えレトロウィルス。
- 前記目的の遺伝子がsiRNA分子をコードする、請求項33に記載の方法。
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---|---|
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---|---|
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2015107888A1 (ja) * | 2014-01-14 | 2015-07-23 | 国立大学法人鹿児島大学 | 幹細胞における腫瘍化原因細胞の新たな標識法と治療法 |
JP2017527308A (ja) * | 2014-09-08 | 2017-09-21 | ミカエラ アーント | 細胞の細胞質への分子の送達のための構築物 |
Families Citing this family (62)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2963118B1 (en) | 2005-06-01 | 2017-08-09 | California Institute of Technology | Method of targeted gene delivery using viral vectors |
WO2008011636A2 (en) | 2006-07-21 | 2008-01-24 | California Institute Of Technology | Targeted gene delivery for dendritic cell vaccination |
US8119772B2 (en) | 2006-09-29 | 2012-02-21 | California Institute Of Technology | MART-1 T cell receptors |
BRPI0813194B8 (pt) * | 2007-08-03 | 2021-05-25 | Centre Nat Rech Scient | kit, partículas de vetor lentiviral, composição de vetores plasmídicos, antígeno derivado de hiv-1 quimérico, proteína de envelope de vsv-g, moléculas de ácido nucleico, composição imunogênica e uso de um vetor lentiviral |
JP2012521786A (ja) | 2009-03-30 | 2012-09-20 | モウント シナイ スクール オフ メディシネ | インフルエンザウイルスワクチン及びその使用 |
CA2800182A1 (en) | 2009-05-26 | 2010-12-02 | Mount Sinai School Of Medicine | Monoclonal antibodies against influenza virus generated by cyclical administration and uses thereof |
US20110015256A1 (en) * | 2009-07-16 | 2011-01-20 | Ihab Mamdouh Ishak Sadek | Delivery of restriction endonucleases to treat hiv, cancer, and other medical conditions |
EP2770061B1 (en) | 2009-07-24 | 2018-10-24 | Immune Design Corp. | Non-integrating lentiviral vectors |
BR112012020839A2 (pt) | 2010-02-18 | 2017-11-21 | Sinai School Medicine | vacinas para uso na profilaxe e tratamento de doença de vírus da influenza |
CN102939103A (zh) | 2010-03-30 | 2013-02-20 | 西奈山医学院 | 流感病毒疫苗及其应用 |
CA2832307A1 (en) | 2011-04-08 | 2012-10-18 | Immune Design Corp. | Immunogenic compositions and methods of using the compositions for inducing humoral and cellular immune responses |
CA2849434A1 (en) | 2011-09-20 | 2013-03-28 | Mount Sinai School Of Medicine | Influenza virus vaccines and uses thereof |
US8859256B2 (en) | 2011-10-05 | 2014-10-14 | Genelux Corporation | Method for detecting replication or colonization of a biological therapeutic |
US20140087362A1 (en) | 2012-03-16 | 2014-03-27 | Aladar A. Szalay | Methods for assessing effectiveness and monitoring oncolytic virus treatment |
US8323662B1 (en) | 2012-03-30 | 2012-12-04 | Immune Design Corp. | Methods useful for generating highly mannosylated pseudotyped lentiviral vector particles comprising a Vpx protein |
CN104583231B (zh) | 2012-03-30 | 2021-02-26 | 免疫设计公司 | 具有对表达dc-sign的细胞改善的转导效率的慢病毒载体粒子 |
US9713635B2 (en) | 2012-03-30 | 2017-07-25 | Immune Design Corp. | Materials and methods for producing improved lentiviral vector particles |
US20130280170A1 (en) | 2012-04-20 | 2013-10-24 | Aladar A. Szalay | Imaging methods for oncolytic virus therapy |
US10316289B2 (en) * | 2012-09-06 | 2019-06-11 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Methods of producing T memory stem cell populations |
US20140140959A1 (en) | 2012-10-05 | 2014-05-22 | Aladar A. Szalay | Energy Absorbing-Based Diagnostic and Therapeutic Methods Employing Nucleic Acid Molecules Encoding Chromophore-Producing Enzymes |
US9968670B2 (en) | 2012-12-18 | 2018-05-15 | Icahn School Of Medicine At Mount Sinai | Influenza virus vaccines and uses thereof |
US9908930B2 (en) | 2013-03-14 | 2018-03-06 | Icahn School Of Medicine At Mount Sinai | Antibodies against influenza virus hemagglutinin and uses thereof |
GB201308772D0 (en) * | 2013-05-15 | 2013-06-26 | Imp Innovations Ltd | Vectors |
US10238700B2 (en) | 2014-01-02 | 2019-03-26 | Genelux Corporation | Oncolytic virus adjunct therapy with agents that increase virus infectivity |
UA121866C2 (uk) * | 2014-08-06 | 2020-08-10 | Астеллас Фарма Інк. | АНТИТІЛО ДО Ig<font face="Symbol">b </font>ЛЮДИНИ |
DK3207130T3 (da) | 2014-10-14 | 2019-11-11 | Halozyme Inc | Sammensætninger af Adenosin Deaminase-2 (ADA2), varianter deraf og fremgangsmåder til anvendelse af samme |
EP3247389A4 (en) | 2015-01-23 | 2019-10-30 | Icahn School of Medicine at Mount Sinai | INFLUENZAVIRUSSCHUTZIMPFPLÄNE |
WO2017004130A1 (en) * | 2015-06-29 | 2017-01-05 | Regents Of The University Of Minnesota | Degradation or neutralization of apobec3b by simian immunodeficiency virus vif |
KR20180074699A (ko) | 2015-11-09 | 2018-07-03 | 이뮨 디자인 코포레이션 | 이종 핵산을 발현하는 rna 레플리콘의 발현 및 투여를 위한 레트로바이러스 벡터 |
MX2018010061A (es) | 2016-02-23 | 2019-07-04 | Immune Design Corp | Preparaciones de vectores retrovirales de genomas multiples, y metodos y sistemas para producir y usar las mismas. |
EP3712273A1 (en) * | 2016-04-08 | 2020-09-23 | Krystal Biotech, LLC | Compositions for the treatment of wounds, disorders, and diseases of the skin |
US11185555B2 (en) | 2016-04-11 | 2021-11-30 | Noah James Harrison | Method to kill pathogenic microbes in a patient |
KR102536850B1 (ko) | 2016-04-15 | 2023-05-26 | 알파인 이뮨 사이언시즈, 인코포레이티드 | Icos 리간드 변이체 면역조절 단백질 및 그의 용도 |
JP7527758B2 (ja) | 2016-04-15 | 2024-08-05 | アルパイン イミューン サイエンシズ インコーポレイテッド | Cd80バリアント免疫調節タンパク質およびその使用 |
CN109641041A (zh) | 2016-06-15 | 2019-04-16 | 西奈山伊坎医学院 | 流感病毒血细胞凝集素蛋白及其用途 |
CA3032120A1 (en) | 2016-07-28 | 2018-02-01 | Alpine Immune Sciences, Inc. | Cd155 variant immunomodulatory proteins and uses thereof |
US11471488B2 (en) | 2016-07-28 | 2022-10-18 | Alpine Immune Sciences, Inc. | CD155 variant immunomodulatory proteins and uses thereof |
US11834490B2 (en) | 2016-07-28 | 2023-12-05 | Alpine Immune Sciences, Inc. | CD112 variant immunomodulatory proteins and uses thereof |
JP2020500010A (ja) | 2016-10-20 | 2020-01-09 | アルパイン イミューン サイエンシズ インコーポレイテッド | 分泌性バリアント免疫調節タンパク質および改変細胞療法 |
US11920156B2 (en) | 2017-02-09 | 2024-03-05 | Indapta Therapeutics, Inc. | Engineered natural killer (NK) cells and compositions and methods thereof |
EP4306537A3 (en) | 2017-03-16 | 2024-03-06 | Alpine Immune Sciences, Inc. | Pd-l1 variant immunomodulatory proteins and uses thereof |
US11732022B2 (en) | 2017-03-16 | 2023-08-22 | Alpine Immune Sciences, Inc. | PD-L2 variant immunomodulatory proteins and uses thereof |
EP3596114A2 (en) | 2017-03-16 | 2020-01-22 | Alpine Immune Sciences, Inc. | Cd80 variant immunomodulatory proteins and uses thereof |
US11254733B2 (en) | 2017-04-07 | 2022-02-22 | Icahn School Of Medicine At Mount Sinai | Anti-influenza B virus neuraminidase antibodies and uses thereof |
WO2019079520A2 (en) | 2017-10-18 | 2019-04-25 | Alpine Immune Sciences, Inc. | ICOS VARIANT LIGAND IMMUNOMODULATORY IMMUNOMODULATORY PROTEINS, COMPOSITIONS AND METHODS THEREOF |
CA3094345A1 (en) | 2018-04-12 | 2019-10-17 | Krystal Biotech, Inc. | Compositions and methods for the treatment of autosomal recessive congenital ichthyosis |
US11505782B2 (en) | 2018-06-04 | 2022-11-22 | Calidi Biotherapeutics, Inc. | Cell-based vehicles for potentiation of viral therapy |
WO2019236633A2 (en) | 2018-06-04 | 2019-12-12 | Calidi Biotherapeutics, Inc. | Cell-based vehicles for potentiation of viral therapy |
US12065476B2 (en) | 2018-06-15 | 2024-08-20 | Alpine Immune Sciences, Inc. | PD-1 variant immunomodulatory proteins and uses thereof |
US11242528B2 (en) | 2018-08-28 | 2022-02-08 | Actym Therapeutics, Inc. | Engineered immunostimulatory bacterial strains and uses thereof |
WO2020068862A1 (en) | 2018-09-24 | 2020-04-02 | Krystal Biotech, Inc. | Compositions and methods for the treatment of netherton syndrome |
JP7329593B2 (ja) | 2018-11-06 | 2023-08-18 | カリディ・バイオセラピューティクス・インコーポレイテッド | 細胞媒介性腫瘍溶解性ウイルス治療のための増強された系 |
JP7541516B2 (ja) | 2018-11-21 | 2024-08-28 | インダプタ セラピューティクス インコーポレイテッド | ナチュラルキラー(nk)細胞サブセットの増大のための方法ならびに関連する組成物および方法 |
CA3120868A1 (en) | 2018-11-30 | 2020-06-04 | Alpine Immune Sciences, Inc. | Cd86 variant immunomodulatory proteins and uses thereof |
US12024709B2 (en) | 2019-02-27 | 2024-07-02 | Actym Therapeutics, Inc. | Immunostimulatory bacteria engineered to colonize tumors, tumor-resident immune cells, and the tumor microenvironment |
SG11202108459QA (en) | 2019-02-27 | 2021-09-29 | Actym Therapeutics Inc | Immunostimulatory bacteria engineered to colonize tumors, tumor-resident immune cells, and the tumor microenvironment |
MX2021014304A (es) | 2019-05-23 | 2022-02-21 | Massachusetts Inst Technology | Descubrimiento de ligandos y suministro de genes a traves de la presentacion en superficie retroviral. |
KR20230088306A (ko) | 2020-04-22 | 2023-06-19 | 인답타 세라뷰틱스 인코포레이티드 | 자연 살해(nk) 세포 조성물 및 이를 생성하는 방법 |
WO2022147481A1 (en) | 2020-12-30 | 2022-07-07 | Ansun Biopharma Inc. | Combination therapy of an oncolytic virus delivering a foreign antigen and an engineered immune cell expressing a chimeric receptor targeting the foreign antigen |
US11779660B2 (en) | 2021-04-02 | 2023-10-10 | Krystal Biotech, Inc. | Viral vectors for cancer therapy |
WO2023220603A1 (en) | 2022-05-09 | 2023-11-16 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Vectors and methods for in vivo antibody production |
WO2023240124A1 (en) | 2022-06-07 | 2023-12-14 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Pseudotyped viral particles for targeting tcr-expressing cells |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004067710A2 (en) * | 2003-01-21 | 2004-08-12 | Salk Institute For Biological Studies | Compositions and methods for tissue specific targeting of lentivirus vectors |
JP2004532645A (ja) * | 2000-11-17 | 2004-10-28 | ユニバーシティー オブ ロチェスター | 真核細胞において免疫グロブリン分子を製造および同定するインビトロにおける方法 |
JP2005514326A (ja) * | 2001-07-10 | 2005-05-19 | コリクサ コーポレイション | ミクロスフェア中に封入されたタンパク質およびアジュバントを送達するための組成物および方法 |
Family Cites Families (42)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5168062A (en) | 1985-01-30 | 1992-12-01 | University Of Iowa Research Foundation | Transfer vectors and microorganisms containing human cytomegalovirus immediate-early promoter-regulatory DNA sequence |
US4937190A (en) | 1987-10-15 | 1990-06-26 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Translation enhancer |
US5298420A (en) * | 1990-08-03 | 1994-03-29 | Tanox Biosystems, Inc. | Antibodies specific for isotype specific domains of human IgM and human IgG expressed or the B cell surface |
CA2145063A1 (en) * | 1992-09-22 | 1994-03-31 | Cambridge Genetics Limited | Recombinant viruses displaying a nonviral polypeptide on their external surface |
US6534051B1 (en) * | 1992-11-20 | 2003-03-18 | University Of Medicine And Dentistry Of New Jersey | Cell type specific gene transfer using retroviral vectors containing antibody-envelope fusion proteins and wild-type envelope fusion proteins |
AU4594996A (en) | 1994-11-30 | 1996-06-19 | Chiron Viagene, Inc. | Recombinant alphavirus vectors |
US20040258688A1 (en) * | 1995-01-31 | 2004-12-23 | Daniel Hawiger | Enhanced antigen delivery and modulation of the immune response therefrom |
EP0840797B1 (en) * | 1995-07-25 | 2014-09-03 | Crucell Holland B.V. | Methods and means for targeted gene delivery |
US6013516A (en) | 1995-10-06 | 2000-01-11 | The Salk Institute For Biological Studies | Vector and method of use for nucleic acid delivery to non-dividing cells |
US5910434A (en) * | 1995-12-15 | 1999-06-08 | Systemix, Inc. | Method for obtaining retroviral packaging cell lines producing high transducing efficiency retroviral supernatant |
FR2747046B1 (fr) | 1996-04-05 | 1998-06-19 | Univ Paris Curie | Nouveaux vaccins issus de plasmovirus |
US6432699B1 (en) | 1997-03-28 | 2002-08-13 | New York University | Viral vectors having chimeric envelope proteins containing the IgG-binding domain of protein A |
US6531123B1 (en) * | 1997-05-01 | 2003-03-11 | Lung-Ji Chang | Lentiviral vectors |
ZA988446B (en) | 1997-09-18 | 2000-03-22 | Res Dev Foundation | Production of vaccines using arthropod vectored viruses. |
AU9399498A (en) * | 1997-09-18 | 1999-04-05 | Trustees Of The University Of Pennsylvania, The | Receptor-binding pocket mutants of influenza a virus hemagglutinin for use in targeted gene delivery |
US6218181B1 (en) | 1998-03-18 | 2001-04-17 | The Salk Institute For Biological Studies | Retroviral packaging cell line |
US7078483B2 (en) * | 1998-04-29 | 2006-07-18 | University Of Southern California | Retroviral vectors including modified envelope escort proteins |
CA2366054A1 (en) * | 1999-03-16 | 2000-09-21 | Wayne A. Marasco | Lentiviral vector system for high quantity screening |
JP4637368B2 (ja) | 1999-04-14 | 2011-02-23 | ノバルティス バクシンズ アンド ダイアグノスティックス,インコーポレーテッド | アルファウイルスに基づくベクター系を利用する免疫応答を生成するための組成物および方法 |
EP1046651A1 (en) | 1999-04-19 | 2000-10-25 | Koninklijke Universiteit Nijmegen | Composition and method for modulating dendritic cell-T interaction |
AU6930200A (en) * | 1999-08-27 | 2001-03-26 | Regents Of The University Of California, The | Use of lentiviral vectors for antigen presentation in dendritic cells |
DE60043708D1 (de) | 1999-10-13 | 2010-03-04 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Verfahren zur erhaltung zellimmuneantworten gegen proteinen |
US6627442B1 (en) | 2000-08-31 | 2003-09-30 | Virxsys Corporation | Methods for stable transduction of cells with hiv-derived viral vectors |
EP1201750A1 (en) * | 2000-10-26 | 2002-05-02 | Genopoietic | Synthetic viruses and uses thereof |
WO2002070651A2 (en) | 2001-03-02 | 2002-09-12 | Merck & Co., Inc. | Viral reporter particles |
AU2002330022B2 (en) | 2001-09-13 | 2007-07-12 | California Institute Of Technology | Method for producing transgenic birds and fish |
US7737124B2 (en) | 2001-09-13 | 2010-06-15 | California Institute Of Technology | Method for expression of small antiviral RNA molecules with reduced cytotoxicity within a cell |
US7195916B2 (en) | 2001-09-13 | 2007-03-27 | California Institute Of Technology | Method for expression of small antiviral RNA molecules within a cell |
US7919309B2 (en) * | 2001-09-13 | 2011-04-05 | California Institute Of Technology | Method for expression of small antiviral RNA molecules within a cell |
US6863884B2 (en) * | 2002-05-01 | 2005-03-08 | Cell Genesys, Inc. | Pseudotyped retroviral vectors |
US7455833B2 (en) | 2002-07-15 | 2008-11-25 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and compositions for treating viral infections using antibodies and immunoconjugates to aminophospholipids |
DE60322070D1 (de) | 2002-08-16 | 2008-08-21 | Dept Of Medical Sciences Minis | Rekombinante bcg-vakzine |
AU2003297474A1 (en) * | 2002-12-18 | 2004-07-14 | Salk Institute For Biological Studies | Methods of inhibiting gene expression by rna interference |
US20050112139A1 (en) | 2003-10-23 | 2005-05-26 | Nmk Research, Llc | Immunogenic composition and method of developing a vaccine based on factor H binding sites |
WO2005113584A1 (en) | 2004-04-29 | 2005-12-01 | Board Of Regents, University Of Texas System | Methods and compositions comprising protein l immunoglobulin binding domains for cell-specific targeting |
WO2005118802A2 (en) | 2004-06-03 | 2005-12-15 | The Regents Of The University Of California | Targeting pseudotyped retroviral vectors |
GB0417494D0 (en) | 2004-08-05 | 2004-09-08 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vaccine |
US7429481B2 (en) | 2004-09-14 | 2008-09-30 | University Of Pittsburgh | Targeting viruses using a modified sindbis glycoprotein |
US7606802B2 (en) * | 2004-12-22 | 2009-10-20 | Sap Ag | Preserving log files in a distributed computing environment |
EP2963118B1 (en) * | 2005-06-01 | 2017-08-09 | California Institute of Technology | Method of targeted gene delivery using viral vectors |
WO2008011636A2 (en) | 2006-07-21 | 2008-01-24 | California Institute Of Technology | Targeted gene delivery for dendritic cell vaccination |
HUE036103T2 (hu) | 2007-12-11 | 2018-06-28 | Univ North Carolina Chapel Hill | Polipurin szakaszon módosított retrovirális vektorok |
-
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2014
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Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2004532645A (ja) * | 2000-11-17 | 2004-10-28 | ユニバーシティー オブ ロチェスター | 真核細胞において免疫グロブリン分子を製造および同定するインビトロにおける方法 |
JP2005514326A (ja) * | 2001-07-10 | 2005-05-19 | コリクサ コーポレイション | ミクロスフェア中に封入されたタンパク質およびアジュバントを送達するための組成物および方法 |
WO2004067710A2 (en) * | 2003-01-21 | 2004-08-12 | Salk Institute For Biological Studies | Compositions and methods for tissue specific targeting of lentivirus vectors |
Non-Patent Citations (6)
Title |
---|
JPN6011058622; J Virol., 1998年, 第72巻, 9873-9880ページ * |
JPN6011058624; J Cell Biol., 2005年4月11日, 第169巻, 167-177ページ * |
JPN6011058627; GARRY CE et al., Proteomics computational analyses suggest that the carboxyl terminal glycoproteins * |
JPN6012050911; J Virol., 2001年, 第75巻, 8016-8020ページ * |
JPN6012050912; J Virol., 1998年, 第72巻, 9873-9880ページ * |
JPN6012050913; Hum Gen Ther., 2005年2月, 第16巻, 223-234ページ * |
Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2015107888A1 (ja) * | 2014-01-14 | 2015-07-23 | 国立大学法人鹿児島大学 | 幹細胞における腫瘍化原因細胞の新たな標識法と治療法 |
JPWO2015107888A1 (ja) * | 2014-01-14 | 2017-03-23 | 国立大学法人 鹿児島大学 | 幹細胞における腫瘍化原因細胞の新たな標識法と治療法 |
JP2017527308A (ja) * | 2014-09-08 | 2017-09-21 | ミカエラ アーント | 細胞の細胞質への分子の送達のための構築物 |
US10442863B2 (en) | 2014-09-08 | 2019-10-15 | Lutana Gmbh | Construct for the delivery of a molecule into the cytoplasm of a cell |
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