JP2008237122A - Stirring device - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は攪拌装置に係り、特に、試料に溶液を供給しつ、攪拌羽根を用いて試料と溶液とを攪拌し、試料の攪拌により発生した廃棄物を排出する攪拌装置に関する。 The present invention relates to a stirrer, and more particularly to a stirrer that supplies a solution to a sample, stirs the sample and the solution using a stirring blade, and discharges waste generated by stirring the sample.
多細胞生物の細胞や組織の一部、或いは微生物を人工的な環境下で増殖させる方法として培養が採用されている。すなわち、培養により、タンパク質や核酸、その他の特定細胞や組織を大量に抽出したり、菌類、藻類、原生動物、細菌類等の微生物を大量に発生させたりすることが可能となる。なお、本発明に係る培養の対象となる試料は、上記の細胞や組織、又は微生物に限らず、培養により増殖される全てのものを含む。 Culture is adopted as a method for growing a part of cells and tissues of a multicellular organism or a microorganism in an artificial environment. That is, by culturing, it becomes possible to extract a large amount of proteins, nucleic acids, and other specific cells and tissues, and to generate a large amount of microorganisms such as fungi, algae, protozoa, and bacteria. Note that the sample to be cultured according to the present invention is not limited to the above-described cells, tissues, or microorganisms, but includes all those grown by culture.
この培養には、可溶性栄養源を含む液体中で増殖させる液体培養という増殖様態を採る場合がある。例えば、血液等の細胞や組織、乳酸、有機酸、核酸、酵素等の微生物を増殖させる場合である。この液体培養には、衝撃に対して脆弱な細胞を増殖させる場合に用いられる静置培養、振とう培養、攪拌培養などがある。 This culture may take a growth mode called liquid culture in which the culture is grown in a liquid containing a soluble nutrient source. For example, when cells such as blood and tissues, microorganisms such as lactic acid, organic acid, nucleic acid, and enzyme are grown. This liquid culture includes stationary culture, shaking culture, stirring culture, and the like used when proliferating cells vulnerable to impact.
振とう培養とは、0.5Hz〜数Hz程度の頻度で培養容器を振動させ増殖速度を向上させる方法である。特許文献1に、振とう培養に関する例を示す。ここでは、細胞や組織等の試料の恒温振とうによる培養方法とその装置が開示されている。このように、振とう培養では、培養すべき細胞や組織等を培地中に注入した三角フラスコ等の容器に入れ、この容器を振とう機の振とう台上に載上して振動を加えるものである。その他、タッパーやシャーレ等の容器において少ない液量で振とうさせるシーソー振とう培養、遠沈管等を転倒攪拌する変動形揺動による振とう培養等がある。
Shaking culture is a method of improving the growth rate by vibrating the culture vessel at a frequency of about 0.5 Hz to several Hz.
また、攪拌培養とは、攪拌子又はスクリュー等の翼の回転により細胞や微生物等の試料と培地とを混合させる方法である。この混合により細胞や微生物等の試料を培地成分に接触させ、攪拌しない静置培養法と比較して増殖速度を上げることができる。さらに、液体培地を強制的に攪拌して深い液内で行う培養を特に液体深部培養といい、例えば微生物たんぱく質の生産などに用いられている。 Stirring culture is a method in which a sample such as cells or microorganisms is mixed with a medium by rotating a blade such as a stirrer or a screw. By this mixing, samples such as cells and microorganisms are brought into contact with the medium components, and the growth rate can be increased as compared with a stationary culture method without stirring. Furthermore, culture in which a liquid medium is forcibly stirred and carried out in a deep liquid is called liquid deep culture, and is used, for example, for the production of microbial proteins.
この液体深部培養においては、培養槽内に各種の攪拌翼を設置し、この攪拌翼を回転軸に取り付けて回転させ、培養槽内の液体培地に下記の旋回流を発生させて混合する方法が一般的である。図12に、一般的な培養槽及び培養槽内に設けられた攪拌翼の例を示す。図12(a)の培養槽30には、攪拌軸34に取り付けられた櫂型翼31を、図12(b)には、図12(a)のE−E断面を示す。この櫂型翼31は培養槽30内に水平回転流35を発生させる。図12(c)の培養槽30には、攪拌軸34に取り付けられたプロペラ型翼32を、図12(d)には、図12(c)のF−F断面を示す。このプロペラ型翼32は水平回転流35に加えて半径方向の流れである放射流36も発生させる。
In this submerged culture, various stirring blades are installed in the culture tank, and the stirring blade is attached to a rotating shaft and rotated, and the following swirl flow is generated in the liquid medium in the culture tank and mixed. It is common. FIG. 12 shows an example of a general culture tank and a stirring blade provided in the culture tank. 12 (a) shows a
また、液体培養には、その培地添加のタイミングによる分類として、回分培養、半回分培養、連続培養がある。回分培養とは、いわゆるバッチ処理方法であり、1回ごとに新たな培地を用意して培養を行う方法である。また、半回分培養とは、培養中に培地自体や倍地中の特定の成分を添加する培養方法である。さらに、連続培養とは、一定の速度で培養器に培地を供給し、同時に同量の培養液を排出させる培養方法である。この連続培養は、他の培養方法と比較して培養環境を一定に保ちやすく、生産性が安定するという特徴を有する。例えば微生物たんぱく質の生産に用いられる攪拌翼を用いた攪拌培養は、上記の培養法のうち回分培養により行われるのが一般的である。 Moreover, liquid culture includes batch culture, semi-batch culture, and continuous culture as classification according to the timing of addition of the medium. Batch culture is a so-called batch processing method, in which a new medium is prepared for each culture and cultured. Semi-batch culture is a culture method in which the medium itself or specific components in the medium are added during the culture. Furthermore, continuous culture is a culture method in which a medium is supplied to the incubator at a constant rate and simultaneously the same amount of culture medium is discharged. This continuous culture is characterized in that the culture environment is easily kept constant and the productivity is stable as compared with other culture methods. For example, stirring culture using a stirring blade used for production of a microbial protein is generally performed by batch culture among the above culture methods.
さらに、培養には、所望の細胞や組織或いは微生物を、血液などの多細胞生物の一部から、又は自然界から採取された土壌や水などから分離させ適切な培地により培養して増殖させる粗培養がある。この場合には、培養の前段階として細胞や組織或いは微生物に付着した付着物を分離させる工程が行われる。また、混合物から純物質を物理的或いは化学的に分離する、例えば、細胞の場合には、細胞の塊から所望の単細胞を分離する単離といわれる工程が行われる。また、この単離とは、例えば、微粉末を含む紛体を液体中で洗浄して分離する場合など、多細胞生物の細胞や組織の一部、或いは微生物以外の物質を分離する場合も含まれる。なお、本発明に係る試料の洗浄には、この粗培養や細胞などの単離が含まれ、さらに一般の物質を対象とした洗浄も含まれる。 Furthermore, the culture is a rough culture in which desired cells, tissues or microorganisms are separated from a part of multicellular organisms such as blood or from soil or water collected from the natural world, and are cultured in an appropriate medium for growth. There is. In this case, a step of separating the adhering matter attached to the cells, tissues or microorganisms is performed as a pre-stage of the culture. Further, a pure substance is physically or chemically separated from the mixture. For example, in the case of cells, a process called isolation is performed to separate desired single cells from a cell mass. In addition, this isolation includes the case of separating a part of cells or tissues of a multicellular organism or a substance other than a microorganism, for example, when a powder containing fine powder is washed and separated in a liquid. . In addition, the washing | cleaning of the sample which concerns on this invention includes isolation | separation of this rough culture, a cell, etc., and also the washing | cleaning for common substances.
一方、特許文献2には、攪拌混合装置および殺菌装置および洗浄装置が開示されている。ここでは、紛体を短時間で均一に溶解又は加熱溶融させ、加熱により流動性を向上させ攪拌混合装置、及び短時間で殺菌又は減菌が可能な殺菌装置、及び短時間で洗浄可能な洗浄装置が開示されている。
On the other hand,
上述した振とう培養では、容器全体を振動させるため、容器内の液体培地の流動が均一ではなく部分的なむらが発生する。また、試料と液体培地とは、同じように流動するため混合効果が低い。また、振とう培養は、三角フラスコ等の容器を用いる回分培養であり、試料への溶液の供給と試料から排出される廃棄物の処理とを連続して安定的に行うことは難しい。 In the shaking culture described above, the entire container is vibrated, so the flow of the liquid medium in the container is not uniform, and partial unevenness occurs. Moreover, since the sample and the liquid medium flow in the same manner, the mixing effect is low. In addition, the shaking culture is a batch culture using a container such as an Erlenmeyer flask, and it is difficult to stably and continuously supply the solution to the sample and treat the waste discharged from the sample.
また、上述した攪拌培養では、攪拌翼の回転により試料と液体培地との混合効果は得られるが、培地の粘度が高い場合には、回転軸や培養槽の周囲に混合が不十分な部分が発生し、混合効果にむらが生じる。一方、培地の粘度が低い場合には、攪拌翼を回転させると培養槽内の培地全体が、水平回転流等の旋回流を起こし攪拌力が低下する。また、攪拌翼の回転により発生するせん断力で試料を損傷する虞がある。さらに、上述した攪拌培養は一般的に回分培養により行われ、試料への溶液の供給と試料から排出される廃棄物の処理とを連続して安定的に行うことは難しい。 In addition, in the agitation culture described above, the mixing effect of the sample and the liquid medium can be obtained by the rotation of the agitation blade, but when the viscosity of the medium is high, there is insufficient mixing around the rotating shaft and the culture tank. Occurs and the mixing effect becomes uneven. On the other hand, when the viscosity of the medium is low, when the stirring blade is rotated, the entire medium in the culture tank causes a swirling flow such as a horizontal rotating flow and the stirring force is reduced. In addition, the sample may be damaged by the shearing force generated by the rotation of the stirring blade. Furthermore, the agitation culture described above is generally performed by batch culture, and it is difficult to continuously and stably supply the solution to the sample and treat the waste discharged from the sample.
本願の目的は、かかる課題を解決し、試料と溶液とをより均一に攪拌し、培養された試料又は洗浄された試料を連続して安定的に得る攪拌装置を提供することである。 An object of the present application is to solve such a problem, and to provide a stirring device that stirs a sample and a solution more uniformly and obtains a cultured sample or a washed sample continuously and stably.
上記目的を達成するため、本発明に係る攪拌装置は、試料が含まれた溶液が流通する流通路をその内部に有するケーシングと、ケーシング内に配置され振動源に接続された軸部と、軸部の回りに取り付けられ、軸部の振動によりその軸方向に振動して試料を攪拌させる攪拌羽根と、ケーシングの内周面から突出し、流通路を複数の攪拌室に仕切る仕切り板と、攪拌羽根を包囲するように取り付けられ、攪拌室を内部攪拌室と外部攪拌室とに区分し、試料の攪拌により発生した廃棄物を通過させる濾過部材と、溶液を流通させる溶液供給管と、溶液供給管と連結し、溶液を内部攪拌室に供給する溶液供給口と、濾過部材を通過した廃棄物を含む排液を外部攪拌室から排出する排液排出口と、を備えることを特徴とする。 In order to achieve the above object, a stirrer according to the present invention includes a casing having therein a flow passage through which a solution containing a sample flows, a shaft portion disposed in the casing and connected to a vibration source, a shaft Agitating blades that are attached around the part and vibrate in the axial direction by the vibration of the shaft part to stir the sample, a partition plate that protrudes from the inner peripheral surface of the casing and partitions the flow path into a plurality of stirring chambers, and the stirring blades The stirring chamber is divided into an internal stirring chamber and an external stirring chamber, a filtering member that allows waste generated by stirring the sample to pass therethrough, a solution supply pipe that circulates the solution, and a solution supply pipe And a solution supply port for supplying the solution to the internal stirring chamber, and a drainage discharge port for discharging the drainage liquid containing the waste that has passed through the filter member from the external stirring chamber.
また、本発明に係る攪拌装置は、溶液には、試料の培養に用いられる培養液が含まれ、試料の攪拌により発生した廃棄物を排液排出口から排出させることが好ましい。 In the stirring device according to the present invention, it is preferable that the solution includes a culture solution used for culturing the sample, and waste generated by stirring the sample is discharged from the drainage outlet.
また、本発明に係る攪拌装置は、溶液には、付着物が付着した試料の洗浄に用いられる洗浄液が含まれ、試料の攪拌により分離した付着物を廃棄物として排液排出口から排出させることが好ましい。 In the stirring device according to the present invention, the solution includes a cleaning liquid used for cleaning the sample to which the adhered matter is attached, and the adhered matter separated by stirring the sample is discharged as waste from the drainage outlet. Is preferred.
また、本発明に係る攪拌装置は、試料を排出させる試料排出口を備え、溶液供給口と排液排出口と濾過部材とが、複数の攪拌室にそれぞれ設けられ、仕切り板は流体が流通する開口を有し、複数の攪拌室を通過した試料を試料排出口から排出させることが好ましい。 In addition, the stirring device according to the present invention includes a sample discharge port for discharging the sample, a solution supply port, a drainage discharge port, and a filtering member are provided in each of the plurality of stirring chambers, and fluid flows through the partition plate. It is preferable to discharge the sample having an opening and having passed through the plurality of stirring chambers from the sample discharge port.
また、本発明に係る攪拌装置は、溶液供給管が、外部から仕切り板を貫通して溶液を内部攪拌室に供給することが好ましい。 In the stirring device according to the present invention, the solution supply pipe preferably feeds the solution to the internal stirring chamber through the partition plate from the outside.
また、本発明に係る攪拌装置は、排液を流通させて排液排出口と連結する排液排出管を備え、排液排出管が、仕切り板を貫通して排液を外部攪拌室から排出することが好ましい。 Further, the stirring device according to the present invention includes a drainage discharge pipe that circulates drainage and connects to a drainage discharge port, and the drainage discharge pipe passes through the partition plate and discharges the drainage from the external stirring chamber. It is preferable to do.
また、本発明に係る攪拌装置は、攪拌濾過部材が、軸部との間に開口を有する仕切り板を介してケーシングの内周面と接続し、ケーシングの内部には、流通路を攪拌濾過部材と仕切り板とにより仕切られた複数の攪拌室が設けられることが好ましい。 Further, in the stirring device according to the present invention, the stirring and filtering member is connected to the inner peripheral surface of the casing through a partition plate having an opening between the shaft portion, and a flow passage is provided inside the casing. It is preferable to provide a plurality of stirring chambers partitioned by a partition plate.
さらに、本発明に係る攪拌装置は、軸部が複数の軸に分割され、隣接する軸の端部同士が、バネ及びダンパを介して接続され、軸の振動数をそれぞれ変化させることが好ましい。 Further, in the stirring device according to the present invention, it is preferable that the shaft portion is divided into a plurality of shafts, and end portions of adjacent shafts are connected to each other via a spring and a damper to change the frequency of the shaft.
上記構成により、本発明に係る攪拌装置は、攪拌室に試料が含まれた溶液を供給する溶液供給口と、廃棄物を含む排液を排出する排液排出口とを有し、試料への溶液の供給と試料から排出される廃棄物の排出とを安定的に連続処理することが可能となる。また、試料は、軸部の振動によりその軸方向に振動して試料を攪拌させる攪拌羽根により、後述する周期的に反転する流れが溶液内に発生し、攪拌室内でのより均一な攪拌による混合効果が発生する。 With the above configuration, the stirring device according to the present invention has a solution supply port for supplying a solution containing the sample in the stirring chamber, and a drainage discharge port for discharging the drainage liquid containing waste, It is possible to stably and continuously process the supply of the solution and the discharge of the waste discharged from the sample. In addition, the sample is mixed in the stirring chamber by more uniform stirring because a periodically reversing flow, which will be described later, is generated in the solution by a stirring blade that vibrates in the axial direction by the vibration of the shaft and stirs the sample. An effect occurs.
以上のように、本発明に係る攪拌装置によれば、試料と溶液とを効果的に攪拌し、培養された試料又は洗浄された試料を連続して安定的に得ることが可能となる。 As described above, according to the stirrer according to the present invention, it is possible to stir the sample and the solution effectively and obtain the cultured sample or the washed sample continuously and stably.
以下に、図面を用いて本発明に係る攪拌装置につき、詳細に説明する。 Below, the stirring apparatus which concerns on this invention is demonstrated in detail using drawing.
(第1の実施形態)
まず、本攪拌装置1の構成について説明する。図1に、攪拌装置1の第1の実施形態の概略構成を示す。また、図2に、図1のA−A断面を示す。本実施形態の攪拌装置1は、ケーシング2、軸部4、攪拌羽根5、仕切り板6、濾過部材10、溶液供給管11、溶液供給口12、及び排液排出口13から構成される。また、攪拌装置1には、軸部4と接続し、軸部4をその軸方向に振動させる振動源3が設けられる。また、攪拌装置1には、試料を攪拌室7内に供給する試料供給口17及び試料を攪拌室7から排出させる試料排出口16が設けられる。
(First embodiment)
First, the configuration of the stirring
ケーシング2は、その内部に細胞や微生物等の試料が含まれた溶液が流通する流通路22を有する。本実施形態では、この流通路22は、仕切り板6により複数の攪拌室7に分割される。図1では、この流通路22は4つの攪拌室7及び1つの試料排出室23から構成されるが、この攪拌室7の数は4つに限らず任意の数で良い。また、試料排出室23は設けられず、最外部の攪拌室7に試料排出口16が設けられ、そこから試料が排出されても良い。仕切り板6は、ケーシング2の内面から突出して設けられる。また、仕切り板6は、図2に示すように、内部に開口部21を有する環状の板であり、ケーシング2の内部の軸部4との間には隙間がある。軸部4は、この仕切り板6の開口部21内を貫通する。また、軸部4はケーシング2の内部にシール材18でシールされて挿入される。攪拌室7は、図2に示すように円形に取り付けられた濾過部材10により、内部攪拌室8と外部攪拌室9とに区分される。この濾過部材10が、攪拌羽根5を包囲するように取り付けられ、攪拌羽根5は内部攪拌室8の内部に納められる。なお、攪拌羽根5は、図1では各攪拌室7に2枚ずつ配置されるが、その枚数はこれに限らない。
The
この濾過部材10にはフィルタが貼られる。濾過部材10は、後述するように、試料を通過させず、廃棄物を通過させる役割を有する。従って、このフィルタの網目は、その役割に適した大きさのものが選択されるが、試料及び廃棄物のスケールによりミクロレベルの粗さの網目(ファインメッシュ)が選択されても良い。また、フィルタは、例えば、ステンレス製、セラミック製から成るが、これに限らず高分子(ナノフィルタ膜)等であっても良い。このフィルタにより、攪拌羽根5による攪拌により培養される試料は、この濾過部材10で堰き止められ、攪拌室7を順次移動して試料排出室23へと向かい、試料の攪拌により発生した廃棄物、例えば、試料の老廃物は、この濾過部材10を通過して外部に排出される。また、付着物が付着した試料は、この濾過部材10で堰き止められ、攪拌室7を順次移動して試料排出室23へと向かい、試料から分離された付着物はこの濾過部材10を通過して外部に排出される。
A filter is affixed to the
本実施形態では、溶液供給管11、溶液供給口12及び排液排出口13は、攪拌室7ごとに設けられる。図3に、溶液供給管11及び溶液供給口12につき、図1の一部分を拡大した断面で示す。溶液供給管11は、仕切り板6の板厚内に埋め込まれ、ケーシング2の外部とケーシング2の内部の内部攪拌室8とを連通する。また、溶液供給管11のケーシング2の内部側には溶液供給口12が設けられ、内部攪拌室8と流通する。また、図1に示すように、排液排出口13はケーシング2を貫通して設けられ、ケーシング2の内部の外部攪拌室9とケーシング2の外部とを連通する。図4に、排液の排出についての他の実施例を示す。この実施例では、排液排出管14は、仕切り板6の板厚内に埋め込まれ、ケーシング2の内部の外部攪拌室9とケーシング2の外部とを連通する。また、排液排出管14のケーシング2の内部側には排液吸引口20が設けられ、排液は排液吸引口20から吸引されて排液排出口19から排出される。本実施形態では、図2に示すように、これら溶液供給管11、溶液供給口12及び排液排出口13,19は、攪拌室7ごとに各々1箇所に設けられるが、その個数はこれに限らず2箇所以上であっても良い。
In the present embodiment, the
このように、攪拌装置1は、各攪拌室7に培養液を含む溶液を供給する手段と廃棄物を含む排液を排出する手段とを備える。これらの手段により、試料への溶液の供給と試料から発生する排液の排出とを連続処理する連続培養が可能となる。また、粗培養や単離の場合においても、付着物が付着した細胞の塊や微粉末を含む紛体が、洗浄液を含む溶液を供給する手段と付着物を含む排液を排出する手段により、試料への溶液の供給と試料から発生する排液の排出とを連続処理する連続処理が可能となる。
As described above, the stirring
培養される試料とは、例えば、血液等の細胞や組織、乳酸、有機酸、核酸、酵素等の微生物であるが、これらの細胞や組織、又は微生物に限らず、培養により増殖される全てのものを含む。また、この試料が含まれた溶液とは、これらの試料を培養するために必要な培養液である。これらの試料は、攪拌装置1のケーシング2の内部で供給される培養液により細胞を構成する物質を合成し、それを組み立てることにより新たな細胞を作り出し増殖する。従って、培養液には、この試料の増殖に必要な栄養源が含まれる。栄養源としては、例えば炭水化物類、油類、有機酸類といった炭素源、尿素などの窒素源、無機塩類などが挙げられる。また、細胞の増殖は環境因子の影響を受ける。環境因子には温度、圧力、光線、pH、浸透圧、溶存酸素などがある。連続培養では、これらの環境因子を常に適切な状態に維持することができ、安定的な培養が可能となる。
The sample to be cultured is, for example, a cell or tissue such as blood, or a microorganism such as lactic acid, organic acid, nucleic acid, or enzyme, but is not limited to such a cell or tissue or microorganism, Including things. Moreover, the solution containing this sample is a culture solution necessary for culturing these samples. These samples synthesize a substance that constitutes a cell with a culture solution supplied inside the
洗浄される試料とは、培養される前段階の細胞や組織、微生物、或いは純物質を物理的或いは化学的に分離する場合の混合物が含まれる。また、洗浄される試料には、単離される細胞の塊が含まれ、微粉末を分離する紛体も含まれる。溶液に含まれる洗浄液とは、こういった単離や分離を促進するものを総称する。勿論、洗浄液には細胞や組織、微生物などの生物の場合には、培養に用いられる培養液も含まれる。 The sample to be washed includes a mixture in the case of physically or chemically separating cells, tissues, microorganisms, or pure substances in a previous stage to be cultured. Further, the sample to be washed contains a lump of cells to be isolated, and also includes a powder that separates fine powder. The cleaning liquid contained in the solution is a generic term for those that promote such isolation and separation. Of course, in the case of organisms such as cells, tissues, and microorganisms, the washing solution includes a culture solution used for culture.
次に、図1を用いて本攪拌装置1の1の培養方法について説明する。試料を含んだ溶液は、まず試料供給口17から供給される。この溶液は、仕切り板6の内側の開口部21を通じて試料供給口17側の攪拌室7から試料排出口16側の攪拌室7へと順次移動していく。試料の供給が完了すると、軸部4に接続された攪拌羽根5が振動源3により軸方向に振動する。一方、各攪拌室7の溶液供給管11からは培養液が供給され、溶液供給口12から内部攪拌室8へと注入される。この軸方向の振動により、溶液内の試料と注入された培養液に含まれる栄養源とが混合される。この混合される際に、溶液には攪拌羽根5により乱流が発生し、内部攪拌室8全体にわたり、後述するほぼ均一な混合が行われる。試料は、この混合により培養液に含まれる栄養源等を摂取し増殖する。そして、試料は成長に伴い排泄物を排出する。また、この排泄物は溶液中の培養に不要なものとともに廃棄物として、内部攪拌室8から濾過部材10を通過して外部攪拌室9へと移動する。一方、試料自体は濾過部材10を通過できないため内部攪拌室8内に留まる。この廃棄物を含む溶液は排液として外部攪拌室9に連通する排液排出口13から排出される。
Next, the
この攪拌羽根5が軸方向に振動する攪拌方法は、攪拌羽根5が往復運動を行い、その運動方向が連続して反転することに特徴がある。すなわち、試料を含む溶液は、攪拌羽根5の往復運動により「折りたたみ」と「引き伸ばし」とを繰り返し、局所的な混合が促進される。この混合は、さらにケーシング2内部の流通路22が仕切り板6で仕切られることでより効果が発揮され、攪拌室7の内部においてより均一な攪拌による混合効果が発生する。また、この攪拌方法は、細胞や組織或いは微生物にとってより損傷の危険性の少ない好ましい攪拌方法である。すなわち、流体に水平回転流等の旋回流を起こす従来の攪拌方法では、攪拌翼の回転により発生するせん断力が試料を損傷する虞がある。また、試料は旋回流ともなって移動させられストレスが発生する。一方、本攪拌方法の「折りたたみ」及び「引き伸ばし」は、試料に対する圧力の変化であり、せん断力と比較して損傷の危険性は少ない。また試料は局所的な圧力の変化であり、旋回流と比較して試料の移動はより少なくストレスが少ない。
The stirring method in which the
本実施形態では、試料を含んだ溶液を試料供給口17から加圧しながら供給する。従って、試料は、この圧力により時間の経過と共に試料排出口16側へと移動してゆく。そして、一定期間の経過後に、試料排出室23へと移動し、資料排出口16から排出される。このように、本実施形態の攪拌装置1によれば、試料は、各攪拌室7を移動しながら、その都度、培養液の供給と廃棄物の排出とを受けて増殖を重ね、試料を連続して安定的に培養することが可能である。また、増殖した試料を順次取り出すことが可能となる。
In the present embodiment, a solution containing a sample is supplied from the
また、本実施形態の攪拌装置1は、試料の洗浄に用いることができる。すなわち、採取された試料には付着物が付着している場合があり、洗浄液が含まれる溶液により上述した要領で攪拌羽根5により攪拌する。攪拌羽根5の軸方向の振動により、溶液内の試料と注入された洗浄液とが混合される。この混合される際に、溶液には攪拌羽根5により乱流が発生し、内部攪拌室8全体にわたってほぼ均一に混合が行われる。この混合により試料に付着した付着物が分離される。そして、この付着物は廃棄物として、内部攪拌室8から濾過部材10を通過して外部攪拌室9へと移動する。一方、試料自体は濾過部材10を通過できないため内部攪拌室8内に留まる。この付着物は排液として外部攪拌室9に連通する排液排出口13から排出される。この洗浄液の供給と廃棄物の排出とを攪拌室7ごとに行い攪拌することで、試料からの付着物の分離を連続して安定的に行うことが可能となる。
Moreover, the stirring
本実施形態では、試料を含んだ溶液を試料供給口17から加圧しながら供給する。従って、付着物が付着した試料は、この圧力により時間の経過と共に試料排出口16側へと移動してゆく。その間に付着物は次第に分離され、一定期間の経過後に試料排出室23へと移動し、試料排出口16から排出される。このように、本実施形態の攪拌装置1によれば、試料から付着物を連続的に分離させることが可能であり、付着物が分離された試料を順次取り出すことが可能となる。
In the present embodiment, a solution containing a sample is supplied from the
(第2の実施形態)
図5に、攪拌装置の第2の実施形態の概略構成を示す。また、図6に、図1のB−B断面を示す。本実施形態の攪拌装置100は、攪拌室7がそれぞれ独立して試料の攪拌を行う構成である。すなわち、仕切り板26は、軸部4とシール材24により接続され、攪拌室7相互は溶液が流通しない。また、図1に示す、試料供給口17、試料排出室23及び試料排出口16は設けられない。なお、上記第1の実施形態と同一の構成には同一の符号を付し、その説明を省略する。
(Second Embodiment)
In FIG. 5, schematic structure of 2nd Embodiment of a stirring apparatus is shown. FIG. 6 shows a BB cross section of FIG. The stirring
本実施形態では、試料の供給及び排出は、溶液供給管11を通じて溶液供給口12から行われる。すなわち、溶液供給口12からの試料を含んだ溶液の供給が完了した後、溶液供給口12から溶液を連続して供給して試料を増殖させる。試料の増殖が所定の程度になると、溶液供給口12から試料を含んだ溶液を吸引して溶液供給管11を通じてケーシング2の外部に排出する。
In the present embodiment, the sample is supplied and discharged from the
このように、本実施形態では、複数の攪拌室7が独立して試料の培養又は洗浄を行い、それぞれが同一の軸部4により攪拌される。これにより、攪拌室7には、異なる種類の試料を供給することができ、それらを同時に培養又は洗浄することが可能となる。また、洗浄して付着物を分離した後に培養する試料の場合には、洗浄の工程と培養の工程とを1つの攪拌装置100により連続して安定的に行うことが可能となる。
Thus, in this embodiment, the plurality of stirring
(第3の実施形態)
図7に、攪拌装置の第3の実施形態の概略構成を示す。また、図8に図7のC−C断面を示す。本実施形態の攪拌装置200は、第1の実施形態の攪拌装置1に攪拌濾過部材15が付加されたものである。攪拌濾過部材15は、円環状の仕切り板6の内部の開口部21に設けられる円環状の部材であり、外側が仕切り板6に固定され、内側が軸部4に固定される。なお、上記第1の実施形態と同一の構成には同一の符号を付し、その説明を省略する。
(Third embodiment)
In FIG. 7, schematic structure of 3rd Embodiment of a stirring apparatus is shown. FIG. 8 shows a CC cross section of FIG. The stirring
この攪拌濾過部材15は、それが取り付けられる仕切り板6とともに攪拌室7を仕切る要素となる。従って、仕切り板6と協働して攪拌室7での攪拌羽根5の攪拌による混合効果を上げる。また、攪拌濾過部材15の内側は、軸部4と接続されるために、軸部4の軸方向の振動にともない軸方向に振動する。一方、攪拌濾過部材15の外側は仕切り板6により固定されているため振動しない。これにより、攪拌濾過部材15は、その両側の攪拌室7の内部の溶液に攪拌羽根5とは異なる振動による乱流を発生させる。
The stirring
この攪拌濾過部材15にはフィルタが貼られる。攪拌濾過部材15は、試料を通過させ役割を有する。従って、このフィルタの網目は、その役割に適した大きさのものが選択されるが、試料及び廃棄物のスケールによりミクロレベルの粗さの網目(ファインメッシュ)が選択されても良い。また、フィルタは、例えば、ステンレス製、セラミック製から成るが、これに限らず高分子(ナノフィルタ膜)等であっても良い。
A filter is attached to the stirring
本実施形態は、例えば結合した細胞の塊を攪拌羽根5及び攪拌濾過部材15により単離させて抽出する場合にも用いられる。すなわち、攪拌濾過部材15のフィルタの網目の粗さを、細胞の塊は通過させず単離された細胞を通過させるように調節する。また、試料は、この振動する攪拌濾過部材15に接触することで結合力が弱まるか、或いは結合力が切れて単離が促進される。
This embodiment is also used when, for example, the bound cell mass is isolated and extracted by the
また、この攪拌濾過部材15の網目の粗さを、試料供給口17側を粗くし、試料排出口16側を細かくすることができる。これにより、試料供給口17から加圧された細胞の塊は内部攪拌室8で分離され、より小さな塊となったものから試料排出口16側へと移動し、試料排出口16から排出される。
Further, the mesh of the stirring
また、この攪拌濾過部材15は、上述したように、試料を通過させる役割を有するが、フィルタ自身が振動することで、試料や廃棄物のフィルタの網目への目詰まりが起きにくいという特徴を有する。
Further, as described above, the stirring and filtering
(第4の実施形態)
図9に、攪拌装置の第4の実施形態を示す。本実施形態の攪拌装置300は、第1の実施形態の攪拌装置1の軸部4にダンパ25及びバネ26が取り付けられたものである。また、このダンパ25及びバネ26による構成は、図5に示す第2の実施形態、又は図7に示す第3の実施形態に組み込んでも良い。なお、上記第1の実施形態と同一の構成には同一の符号を付し、その説明を省略する。
(Fourth embodiment)
FIG. 9 shows a fourth embodiment of the stirring device. The stirring
図10に、軸部4の一部に取り付けられたダンパ25及びバネ26をそれぞれ記号により示す。このように、軸部4は、軸部4a及び軸部4bに離間して切り離され、それぞれの端部においてダンパ25及びバネ26を介して直列に接続される。このダンパ25及びバネ26により、その試料供給口17側の軸部4aの振動数を、その試料排出口16側の軸部4bの振動数に対して低減された値とすることが可能となる。
In FIG. 10, the
図11に、ダンパ25及びバネ26の1つの実施例を示す。ダンパ25には例えば粘弾性材27を用いた機構を用いた構成とし、バネ26には、例えばスプリング28を用いた構成とすることができる。この実施例では、軸部4aには振動子29が取り付けられ固定される。一方、軸部4bには、この振動子29を包み込む凹部37が軸部4bの内部に設けられる。この振動子29は、本実施例では板状であるが、例えば棒状などの他の断面形状であっても良い。この振動子29と凹部37との隙間には粘弾性材27が埋め込まれる。この粘弾性材27は、接着などの手段により凹部37の壁面に固定される。また、振動子29が凹部37の内部に埋め込まれる長さ(図11中のL)は後述する粘弾性材27によるエネルギ吸収量により決定される。さらに、軸部4aと軸部4bとは、バネ26の一種であるスプリング28により接続される。このスプリング28は、軸部4aと軸部4bとの相対的な移動に対して弾性変形をし、復元力により元の間隔に戻す役割を有する。スプリング28は、図11では振動子29の左右に2個配置されているが、その個数はこれに限らない。
FIG. 11 shows an embodiment of the
この粘弾性材27は、流体のような粘性とスプリングのような弾性とを併せ持った力学的挙動をする高分子材料である。図11において、軸部4bが軸部4aに対して矢印で示す方向に振動すると、振動子29と軸部4aとの間に設けられた粘弾性材27はせん断力を受けてせん断変形する。粘弾性材27は、このせん断変形により塑性化し、この非線形な挙動により運動エネルギを吸収して熱エネルギに変換する。従って、試料供給口17側の軸部4aの振動エネルギ(E0)は、この粘弾性材27により一部熱エネルギ(δE)となる。このエネルギ吸収により、試料排出口16側の軸部4bに伝達される振動エネルギ(Ex)は、Ex=E0−δEに減衰される。この減衰された振動エネルギにより、試料排出口16側の軸部4bの振動数は、試料供給口17側の軸部4aの振動数より低減された値となる。
The
本実施形態のように軸部4を分割し、分割された軸部4a及び4bの端部にダンパ25及びバネ26を取り付けることで、複数の攪拌室7のうちその内部の攪拌羽根5の振動の振動数(或いは周期)を異ならせることが可能となる。これにより、初期の攪拌室7では比較的低い振動数による攪拌を行い、試料が移動した後の攪拌室7では比較的高い振動数による攪拌を行うことができる。また、振動源3の位置を試料供給口17側に設置することで、初期の攪拌室7では比較的高い振動数による攪拌を行い、試料が移動した後の攪拌室7では比較的低い振動数による攪拌を行うことができる。また、図5に示す第2の実施形態の場合には、それぞれ独立した攪拌室7のうち、その内部の攪拌羽根5の振動数(或いは周期)を異ならせ、例えば、それぞれ要求される振動数が異なる攪拌及び洗浄を同時に行うことも可能となる。なお、図9では、ダンパ25及びバネ26を取り付ける位置は2箇所となっているが、この取付け位置及び個数は、上述した攪拌装置300の使用方法により決定される。
The
1,100,200,300 攪拌装置、2 ケーシング、3 振動源、4,4a,4b 軸部、5 攪拌羽根、6,26 仕切り板、7 攪拌室、8 内部攪拌室、9 外部攪拌室、10 濾過部材、11 溶液供給管、12 溶液供給口、13,19 排液排出口、14 排液排出管、15 攪拌濾過部材、16 試料排出口、17 試料供給口、18、24 シール材、20 排液吸引口、21 開口部、22 流通路、23 試料排出室、25 ダンパ、26 バネ、27 粘弾性材、28 スプリング、29 振動子、30 培養槽、31 櫂型翼、32 プロペラ型翼、33 平羽根タービン型翼、34 攪拌軸、35 水平回転流、36 放射流、37 凹部。 1,100,200,300 Stirring device, 2 casing, 3 vibration source, 4,4a, 4b shaft, 5 stirring blade, 6,26 partition plate, 7 stirring chamber, 8 internal stirring chamber, 9 external stirring chamber, 10 Filtration member, 11 Solution supply pipe, 12 Solution supply port, 13, 19 Drainage discharge port, 14 Drainage discharge pipe, 15 Stirring filtration member, 16 Sample discharge port, 17 Sample supply port, 18, 24 Sealing material, 20 Drainage Liquid suction port, 21 opening, 22 flow path, 23 sample discharge chamber, 25 damper, 26 spring, 27 viscoelastic material, 28 spring, 29 vibrator, 30 culture tank, 31 saddle type wing, 32 propeller type wing, 33 Flat blade turbine blade, 34 stirring shaft, 35 horizontal rotating flow, 36 radial flow, 37 recess.
Claims (9)
ケーシング内に配置され振動源に接続された軸部と、
軸部の回りに取り付けられ、軸部の振動によりその軸方向に振動して試料を攪拌させる攪拌羽根と、
ケーシングの内周面から突出し、流通路を複数の攪拌室に仕切る仕切り板と、
攪拌羽根を包囲するように取り付けられ、攪拌室を内部攪拌室と外部攪拌室とに区分し、試料の攪拌により発生した廃棄物を通過させる濾過部材と、
溶液を流通させる溶液供給管と、
溶液供給管と連結し、溶液を内部攪拌室に供給する溶液供給口と、
濾過部材を通過した廃棄物を含む排液を外部攪拌室から排出する排液排出口と、
を備えることを特徴とする攪拌装置。 A casing having therein a flow passage through which a solution containing the sample flows,
A shaft portion disposed in the casing and connected to a vibration source;
A stirring blade that is attached around the shaft portion and vibrates in the axial direction by the vibration of the shaft portion to stir the sample;
A partition plate protruding from the inner peripheral surface of the casing and partitioning the flow passage into a plurality of stirring chambers;
A filtration member attached to surround the stirring blades, dividing the stirring chamber into an internal stirring chamber and an external stirring chamber, and allowing a waste generated by stirring the sample to pass through,
A solution supply pipe for circulating the solution;
A solution supply pipe connected to the solution supply pipe and supplying the solution to the internal stirring chamber;
A drainage outlet for draining waste liquid containing waste that has passed through the filter member from the external stirring chamber;
A stirrer comprising:
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