JP2006288201A - 微生物の流加培養方法及び流加培養装置 - Google Patents
微生物の流加培養方法及び流加培養装置 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2006288201A JP2006288201A JP2005107093A JP2005107093A JP2006288201A JP 2006288201 A JP2006288201 A JP 2006288201A JP 2005107093 A JP2005107093 A JP 2005107093A JP 2005107093 A JP2005107093 A JP 2005107093A JP 2006288201 A JP2006288201 A JP 2006288201A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- culture
- fed
- respiratory quotient
- medium
- batch
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
- C12M41/30—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration
- C12M41/34—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration of gas
Abstract
【解決手段】呼吸商に基づいて基質流加の制御を行う微生物の流加培養方法。呼吸商に基づいて基質流加の制御を行う微生物の流加培養方法を用いて微生物の増殖特性を評価する方法。呼吸商に基づいて基質流加の制御を行う微生物の流加培養方法を用いて培地の性能を評価する方法。呼吸商に基づいて基質流加の制御を行う微生物の流加培養方法を用いて培養装置の性能を評価する方法。前記呼吸商は、質量分析により求めた、流入気体及び排出気体中の酸素及び二酸化炭素濃度から算出する。流加培養装置。
【選択図】なし
Description
(1)酵母の増殖もしくは目的物質生産を数式モデル化し、培地流加を関数として最適化する方法、
(2)培養中の菌体量を連続的に測定して培地流加を菌体量から計算して行う方法、
(3)酵母の発生するアルコールを液中もしくは排気ガス中で連続的に測定して培地流加にフィードバックする方法、
(4)培養中の排気ガスから簡易的に酵母の呼吸活性(呼吸商)を測定し、ある程度の制御幅を用いて、その範囲内で他の要因(酸素消費速度など)で培地流加を最適化する方法(特公昭56-46825号公報(特許文献1)、 J. E. Claes, J. F. Van impe: Bioprocess Engineering, 22, 195-200(2000)(非特許文献1))。
[請求項1]呼吸商に基づいて基質流加の制御を行う微生物の流加培養方法であって、
前記呼吸商は、質量分析により求めた、流入気体及び排出気体中の酸素及び二酸化炭素濃度から算出することを特徴とする上記方法。
[請求項2]質量分析により、流入気体及び排出気体中の不活性ガス濃度もさらに求め、
得られた不活性ガス濃度を内部標準として前記呼吸商を算出する請求項1に記載の方法。
[請求項3]不活性ガスが、窒素、ヘリウム、ネオン、アルゴン、クリプトン、キセノン、またはラドンである請求項2に記載の方法。
[請求項4]基質流加の制御は、微生物の単位時間当たりの産生量が最大になるように行う請求項1〜3のいずれか1項に記載の方法。
[請求項5]基質流加の制御は、PID制御により行う請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。
[請求項6]質量分析が、磁場固定型質量分析計を用いるものである請求項1〜5のいずれか1項に記載の方法。
[請求項7]呼吸商に基づいて基質流加の制御を行う微生物の流加培養方法を用いて微生物の増殖特性を評価する方法であって、
前記呼吸商は、質量分析により求めた、流入気体及び排出気体中の酸素及び二酸化炭素濃度から算出することを特徴とする上記方法。
[請求項8]微生物の増殖特性の評価は、培養時間と微生物数との関係に基づいて行う請求項7に記載の方法。
[請求項9]呼吸商に基づいて基質流加の制御を行う微生物の流加培養方法を用いて培地の性能を評価する方法であって、
前記呼吸商は、質量分析により求めた、流入気体及び排出気体中の酸素及び二酸化炭素濃度から算出することを特徴とする上記方法。
[請求項10]培地の性能の評価は、培養時間と微生物数との関係に基づいて行う請求項9に記載の方法。
[請求項11]呼吸商に基づいて基質流加の制御を行う微生物の流加培養方法を用いて培養装置の性能を評価する方法であって、
前記呼吸商は、質量分析により求めた、流入気体及び排出気体中の酸素及び二酸化炭素濃度から算出することを特徴とする上記方法。
[請求項12]培養装置の性能の評価は、培養時間と微生物数との関係に基づいて行う請求項11に記載の方法。
[請求項13]微生物の培養容器、
前記培養容器に培地を流加するためのポンプ、
前記培養容器へ流入する気体中の酸素及び二酸化炭素濃度、並びに前記培養容器から排出される気体中の酸素及び二酸化炭素濃度を計測するための質量分析装置、並びに
前記流入気体及び排出気体中の酸素及び二酸化炭素濃度から呼吸商を算出し、かつ前記ポンプによる培地の流加を制御するための手段
を含む流加培養装置。
[請求項14]前記ポンプが、プランジャーポンプまたはペリスタポンプである請求項13に記載の装置。
[請求項15]前記質量分析装置が、磁場固定型質量分析計である請求項13または14に記載の装置。
[請求項16]前記質量分析装置は、流入気体及び排出気体中の不活性ガス濃度も計測できる請求項13または14に記載の装置。
[請求項17]培地流加制御は、PID制御により行う請求項13〜16のいずれか1項に記載の装置。
本発明は、呼吸商に基づいて基質流加の制御を行う微生物の流加培養方法に関する。本発明において、微生物は、呼吸商を求められる微生物であれば、特に、制限はなく、好気性の微生物であればよい。好気性の微生物として、酵母を挙げることができるが、酵母以外に、細菌では、例えば、大腸菌、枯草菌、緑膿菌および酢酸菌などを挙げることができ、放線菌では、例えば、ストレプトミセス、アクチノミセスおよびノカルディアなどを挙げることができ、酵母以外の真菌としては、子嚢菌、担子菌および不完全菌などを挙げることができる。
また、流加する基質の種類及び組成は、培養する微生物の種類に応じて適宜決定することができる。
以下、微生物が酵母である場合を例として説明する。
本発明は、呼吸商に基づいて基質流加の制御を行う微生物の流加培養方法を用いて微生物の増殖特性を評価する方法を包含する。本発明の微生物の増殖特性を評価する方法は、呼吸商を、質量分析により求めた流入気体及び排出気体中の酸素及び二酸化炭素濃度から算出することを特徴とする。呼吸商を、質量分析により求めた流入気体及び排出気体中の酸素及び二酸化炭素濃度から算出する方法は、上述のとおりである。
さらに本発明は、呼吸商に基づいて基質流加の制御を行う微生物の流加培養方法を用いて培地の性能を評価する方法を包含する。本発明の培地の性能を評価する方法は、呼吸商を、質量分析により求めた流入気体及び排出気体中の酸素及び二酸化炭素濃度から算出することを特徴とする。呼吸商を、質量分析により求めた流入気体及び排出気体中の酸素及び二酸化炭素濃度から算出する方法は、上述のとおりである。
本発明は、呼吸商に基づいて基質流加の制御を行う微生物の流加培養方法を用いて培養装置の性能を評価する方法をも包含する。本発明の培養装置の性能を評価する方法は、前記呼吸商を、質量分析により求めた流入気体及び排出気体中の酸素及び二酸化炭素濃度から算出することを特徴とする。呼吸商を、質量分析により求めた流入気体及び排出気体中の酸素及び二酸化炭素濃度から算出する方法は、上述のとおりである。
本発明の流加培養装置は、(1)微生物の培養容器、(2)前記培養容器に培地を流加するためのポンプ、(3)前記培養容器へ流入する気体中の酸素及び二酸化炭素濃度、並びに前記培養容器から排出される気体中の酸素及び二酸化炭素濃度を計測するための質量分析装置、並びに(4)前記流入気体及び排出気体中の酸素及び二酸化炭素濃度から呼吸商を算出し、かつ前記ポンプによる培地の流加を制御するための手段を含む。
一般的に連続培養法は(1)酵母の比増殖速度を計算して一定量を流加・引き抜きする方法(ケモスタット)、系内の菌体量を一定に保つように連続培養状態(定常状態)を継続する方法(タービドスタット)がある。ここで、酵母の呼吸活性は連続培養状態(定常状態)であっても変化する可能性があり、それに起因する比増殖速度(もしくは対糖収率)のわずかな変化が培養の継続と共に大きな変化となって系内の酵母菌体量が減少する(Washout)もしくは増加する現象が見られる。この危険性を最小限にするためにも本呼吸商による培地流加制御は有効と考えられ、例えば(1)連続培養状態(定常状態)において培地流加は呼吸商による制御で、培養液引き抜きは流加量と同量とする(ケモスタット)、(2)連続培養状態(定常状態)において培地流加は呼吸商による制御で、引き抜きは濁度または誘電率計などで制御する(タービドスタット)の両方への応用も包含する。
(1)供試菌株
酵母(S.cervisiae)野生株IFO 10611、IFO 1089、IFO 1332、YNN27およびこれらの変異株 M 及びRの2株を用いた。
以下の装置をそれぞれ目的に合わせて用いた(図4参照)。
・培養発酵槽:エイブル社製5Lジャーファメンター(Jar)及び500L培養発酵槽(TP)
・培地流加ポンプ:ATTO高社製分解能ペリスタティックポンプ(ジャーファメンター用)及び高速液体クロマトグラフィー用プランジャーポンプ
・磁場固定型質量分析計:アルコシステム社製ARCO-2000磁場固定型質量分析計
・カザミノ酸含有合成培地(組成は表1のとおり)
表1に示した組成で、グルコース及びその他の成分をそれぞれ別に滅菌して使用した。微量元素溶液としては、EDTA・2Na15g、ZnSO4・7H2O5.75g、MnCl2・4H2O0.32g、CuSO4・6H2O0.50g、CoCl2・6H2O0.47g、Na2MoO4・2H2O0.48g、CaCl2・2H2O2.9g、FeSO4・7H2O2.8gを1Lの水に溶解し0.45μmフィルターで濾過滅菌し、4℃で保存した物を使用した。
購入したCSL(コーンスティープリカー)を冷却遠心分離(1℃、7000g×10分)後、セルロース、パーライトをろ剤としたフィルター(プレフィルター)、及びPESメンブラン(0.45μm)でろ過し、流加培地中で20%、基本培地(回分培地)中で0.5%として使用した。また、グルコース濃度は流加培地、基本培地中でそれぞれ20%、0.5%とした。
滅菌はグルコース及びその他の成分をそれぞれ別に滅菌して使用した。
表1組成中、カザミノ酸を規定濃度のリン酸アンモニウムで置き換えて使用した。
・菌数:ヘマチトメーターおよび赤血球測定装置(シスメックス F-520)
・菌量:菌体を遠心集菌後、水洗水分計で乾燥菌体量を測定
・培養温度:30℃
・攪拌速度:DO 8 ppmとなるようPID制御
・初発菌数:10×106個/mL
その他条件は各試験内容によって変更した。
装置はJarを用い、株は酵母(S. cervisiae)変異株Mを用い、培地はCSL/グルコース培地を用いた。設定呼吸商は1.3とした。制御の結果を図5に示す。図に示したとおり、磁場固定型質量分析計を用いた呼吸商を制御に用いた結果、培養全体を通して安定した呼吸商を得ることができた。また、流加曲線は指数関数的に増加し、酵母の増殖にあわせて流加できていることが明らかとなった。一方で同時に測定した炭酸ガス測定に赤外吸光分析を用いた呼吸商を示した。培養初期では回分培養状態であるため本来高い呼吸商を示すはずであるが、感度不足のため低い値を示していた。また絶対値としても常に低い値を出しており、制御に用いることは不可能であると思われた。
装置はJarを用い、酵母(S. cervisiae)変異株Rで目的物質Rを製造するための適切な呼吸商について探索した。培地はカザミノ酸含有合成培地を用い、設定呼吸商を1.1及び1.3で培養し、目的物質Rの経時的生産量を測定した。結果を図6に示した。
市販されている野生株であるIFO 10611、IFO 1089、IFO 1332を、カザミノ酸含有合成培地を用いて培養し、その増殖特性を評価した。設定呼吸商は1.1とした。結果を図7〜8に示した。
流加培地中の糖濃度と最終菌体密度の関係を調査するために、糖濃度の異なる培地での高密度培養を試みた。
培地にカザミノ酸含有合成培地を用い、グルコース濃度を20.0%、37.5%、40.0%と異なる培地を調製し(カザミノ酸含量はそれぞれ流加培地中で、1.0%、1.875%、2.0%)、設定呼吸商1.1でS.cerevisiaeの変異株であるM酵母を培養した。結果を図9に示した。グルコース濃度20%の培地では瞬時流加量が培養終了まで指数関数的に上昇しており、酵母菌体濃度が基質である糖の濃度に依存する培養条件であることが示された。それに対してグルコース濃度が37.5%、40.0%と高くなると、培養後期の瞬時流加量が指数関数的に上昇せず、一定となっていることが示された。これは、グルコース濃度が高くなると菌体密度が高くなり、培養系のKLa(酸素移動容量係数)が限界となるためである。一方、酵母菌体濃度は糖濃度にほぼ比例して増加していることが示された。このように、本呼吸商を用いた流加培地制御では、このような状況下でも対糖収率を落とすことなく流加培養を実施でき、他の制御法、特に指数関数的流加法では対応できず流加過剰となり、対糖収率を大きく低下させると考えられることから、本制御法に高い優位性があることが確認された。
異なる培地、もしくは異なる成分含量の培地を用い、同一菌株での流加培養を試みた。培地はカザミノ酸含有合成培地(カザミノ酸含有量1、3、及び5%)、CSL/グルコース培地、及びリン酸アンモニウム含有合成培地(リン酸アンモニウム含有量2%,及び5%を用い、菌株は酵母(S. cervisiae)変異株であるR酵母を用いた。設定呼吸商は菌株に合わせて1.3とした。その他の条件は他の試験と同様とした。結果を図10に示した。
500Lプラント(TP)及び5Lジャーファメンター(Jar)での培養を比較した。菌株は酵母(S. cervisiae)変異株Mを用い、培地はカザミノ酸含有合成培地を用いた。また設定呼吸商は1.1として菌体増殖を比較した。結果を図11に示した。
本発明によれば、本呼吸商を用いた培地流加制御は設備のKLaが変わった場合、すなわちスケールアップ等を行った場合でも有効な制御であり、目的菌体または目的物質を生産することができる。
500Lプラントでの連続培養に本呼吸商による培地流加制御の応用を試みた。容器は500L循環式発酵槽、菌株はS.cerevisiaeの変異株であるR酵母を用い、培地はカザミノ酸含有合成培地(カザミノ酸含量1.0%)、設定呼吸商1.3で、乾燥菌体約2.0%での定常状態に遷移させた。菌体量測定には誘電率計(Aber社製イーストモニター)を用いた。培養条件は連続培養状態(定常状態)において培地流加は呼吸商による制御で、引き抜きは誘電率計で制御し、系内の菌体量を一定に保つように連続培養状態(定常状態)を継続する方法(タービドスタット)を採用した。
流加培地中の糖濃度は20%で行い、引き抜き量と流加量を常時計算して無菌水を系内に加水して系内の液量のバランスをとった。培養開始後前述の呼吸商による培地流加制御を用いて菌体量を増加させ、目的とする乾燥菌体量2.0%となったところで定常状態に遷移させた(引き抜き及び加水を開始した)。培養結果を図12に示した。図に示される通り、定常状態ではイーストモニター計測値(誘電率からの換算値)及び乾燥菌体量を一定に制御することができた。
更に培養開始後125時間目以降、約24時間タップで設定菌体量を2.4%、2.7%、3.1%と上昇させたがそれぞれにおいて定常状態を保っており、連続培養における本制御法の高い有効性を確認することができた。
Claims (17)
- 呼吸商に基づいて基質流加の制御を行う微生物の流加培養方法であって、
前記呼吸商は、質量分析により求めた、流入気体及び排出気体中の酸素及び二酸化炭素濃度から算出することを特徴とする上記方法。 - 質量分析により、流入気体及び排出気体中の不活性ガス濃度もさらに求め、
得られた不活性ガス濃度を内部標準として前記呼吸商を算出する請求項1に記載の方法。 - 不活性ガスが、窒素、ヘリウム、ネオン、アルゴン、クリプトン、キセノン、またはラドンである請求項2に記載の方法。
- 基質流加の制御は、微生物の単位時間当たりの産生量が最大になるように行う請求項1〜3のいずれか1項に記載の方法。
- 基質流加の制御は、PID制御により行う請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。
- 質量分析が、磁場固定型質量分析計を用いるものである請求項1〜5のいずれか1項に記載の方法。
- 呼吸商に基づいて基質流加の制御を行う微生物の流加培養方法を用いて微生物の増殖特性を評価する方法であって、
前記呼吸商は、質量分析により求めた、流入気体及び排出気体中の酸素及び二酸化炭素濃度から算出することを特徴とする上記方法。 - 微生物の増殖特性の評価は、培養時間と微生物数との関係に基づいて行う請求項7に記載の方法。
- 呼吸商に基づいて基質流加の制御を行う微生物の流加培養方法を用いて培地の性能を評価する方法であって、
前記呼吸商は、質量分析により求めた、流入気体及び排出気体中の酸素及び二酸化炭素濃度から算出することを特徴とする上記方法。 - 培地の性能の評価は、培養時間と微生物数との関係に基づいて行う請求項9に記載の方法。
- 呼吸商に基づいて基質流加の制御を行う微生物の流加培養方法を用いて培養装置の性能を評価する方法であって、
前記呼吸商は、質量分析により求めた、流入気体及び排出気体中の酸素及び二酸化炭素濃度から算出することを特徴とする上記方法。 - 培養装置の性能の評価は、培養時間と微生物数との関係に基づいて行う請求項11に記載の方法。
- 微生物の培養容器、
前記培養容器に培地を流加するためのポンプ、
前記培養容器へ流入する気体中の酸素及び二酸化炭素濃度、並びに前記培養容器から排出される気体中の酸素及び二酸化炭素濃度を計測するための質量分析装置、並びに
前記流入気体及び排出気体中の酸素及び二酸化炭素濃度から呼吸商を算出し、かつ前記ポンプによる培地の流加を制御するための手段
を含む流加培養装置。 - 前記ポンプが、プランジャーポンプまたはペリスタポンプである請求項13に記載の装置。
- 前記質量分析装置が、磁場固定型質量分析計である請求項13または14に記載の装置。
- 前記質量分析装置は、流入気体及び排出気体中の不活性ガス濃度も計測できる請求項13または14に記載の装置。
- 培地流加制御は、PID制御により行う請求項13〜16のいずれか1項に記載の装置。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2005107093A JP2006288201A (ja) | 2005-04-04 | 2005-04-04 | 微生物の流加培養方法及び流加培養装置 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2005107093A JP2006288201A (ja) | 2005-04-04 | 2005-04-04 | 微生物の流加培養方法及び流加培養装置 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2006288201A true JP2006288201A (ja) | 2006-10-26 |
Family
ID=37409507
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2005107093A Pending JP2006288201A (ja) | 2005-04-04 | 2005-04-04 | 微生物の流加培養方法及び流加培養装置 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP2006288201A (ja) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2014145521A2 (en) * | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Alderbio Holdings Llc | Fermentation process for antibody production |
CN114196713A (zh) * | 2021-11-25 | 2022-03-18 | 山东润德生物科技有限公司 | 一种降低氨基葡萄糖发酵过程中二氧化碳排放量方法 |
US11773358B2 (en) | 2009-12-22 | 2023-10-03 | Cytiva Sweden Ab | Method for controlling culture parameters in a bioreactor |
Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5646825A (en) * | 1979-09-14 | 1981-04-28 | Raffinage Cie Francaise | Method of separating hydrocarbons from dienes and*or hydrocarbon fraction containing aromatic hydrocarbons by sulfonamide |
JPS61219379A (ja) * | 1985-03-25 | 1986-09-29 | Hitachi Ltd | 培養制御方法及び培養制御装置 |
JPH0686685A (ja) * | 1992-02-12 | 1994-03-29 | Nippon Oil Co Ltd | 酵母を宿主とする異種蛋白質の効率的製造法 |
JP2003235544A (ja) * | 2002-02-20 | 2003-08-26 | Hitachi Ltd | 生体細胞の培養制御方法及び培養装置の制御装置並びに培養装置 |
JP2004290788A (ja) * | 2003-03-26 | 2004-10-21 | Mitsubishi Electric Corp | 水の消毒システム |
WO2004108270A2 (en) * | 2003-06-05 | 2004-12-16 | Bioprocessors Corp. | System and method for process automation |
JP2005081346A (ja) * | 2003-09-04 | 2005-03-31 | Millipore Corp | 使い捨て混合システム |
-
2005
- 2005-04-04 JP JP2005107093A patent/JP2006288201A/ja active Pending
Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5646825A (en) * | 1979-09-14 | 1981-04-28 | Raffinage Cie Francaise | Method of separating hydrocarbons from dienes and*or hydrocarbon fraction containing aromatic hydrocarbons by sulfonamide |
JPS61219379A (ja) * | 1985-03-25 | 1986-09-29 | Hitachi Ltd | 培養制御方法及び培養制御装置 |
JPH0686685A (ja) * | 1992-02-12 | 1994-03-29 | Nippon Oil Co Ltd | 酵母を宿主とする異種蛋白質の効率的製造法 |
JP2003235544A (ja) * | 2002-02-20 | 2003-08-26 | Hitachi Ltd | 生体細胞の培養制御方法及び培養装置の制御装置並びに培養装置 |
JP2004290788A (ja) * | 2003-03-26 | 2004-10-21 | Mitsubishi Electric Corp | 水の消毒システム |
WO2004108270A2 (en) * | 2003-06-05 | 2004-12-16 | Bioprocessors Corp. | System and method for process automation |
JP2005081346A (ja) * | 2003-09-04 | 2005-03-31 | Millipore Corp | 使い捨て混合システム |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US11773358B2 (en) | 2009-12-22 | 2023-10-03 | Cytiva Sweden Ab | Method for controlling culture parameters in a bioreactor |
WO2014145521A2 (en) * | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Alderbio Holdings Llc | Fermentation process for antibody production |
WO2014145521A3 (en) * | 2013-03-15 | 2014-12-24 | Alderbio Holdings Llc | Fermentation process for antibody production |
US10189892B2 (en) | 2013-03-15 | 2019-01-29 | Alderbio Holdings Llc | Fermentation process for antibody production |
US11597758B2 (en) | 2013-03-15 | 2023-03-07 | H. Lundbeck A/S | Fermentation process for antibody production |
CN114196713A (zh) * | 2021-11-25 | 2022-03-18 | 山东润德生物科技有限公司 | 一种降低氨基葡萄糖发酵过程中二氧化碳排放量方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Luedeking et al. | A kinetic study of the lactic acid fermentation. Batch process at controlled pH | |
CN102333854B (zh) | 用于生物样品的细菌学研究的方法和相关设备 | |
JP2022064917A (ja) | バイオリアクターにおける状態逸脱のモニタリング | |
Holland et al. | The in‐line measurement of plant cell biomass using radio frequency impedance spectroscopy as a component of process analytical technology | |
Takahashi et al. | Monitoring of CO 2 and O 2 concentrations in the headspace of Sakaguchi flasks during liquid culture of microorganism | |
US20200190460A1 (en) | Method for Monitoring a Biotechnological Process | |
JP2006288201A (ja) | 微生物の流加培養方法及び流加培養装置 | |
CN109239141B (zh) | 一种基于醇类气体浓度在线检测的发酵过程反馈补料控制装置及方法 | |
Winder et al. | The use of continuous culture in systems biology investigations | |
Nikolajsen et al. | In-line flow injection analysis for monitoring lactic acid fermentations | |
Ibarra et al. | Quantitative analysis of Escherichia coli metabolic phenotypes within the context of phenotypic phase planes | |
Walker et al. | Magnesium-limited growth of Saccharomyces cerevisiae | |
Treffers et al. | The combined actions of chloramphenicol and of bactericidal antibody plus complement on Salmonella typhosa | |
Shibai et al. | Effects of oxygen and carbon dioxide on inosine fermentation | |
Lee et al. | Evaluation of semiconductor gas sensor system for on-line ethanol estimation | |
EP1780286B1 (en) | Bacterium counting method, bacterium counter, and cell used for the counter | |
Austin et al. | Monitoring and control of methanol concentration during polysaccharide fermentation using an on-line methanol sensor | |
Van der Aar et al. | Possible misconceptions about O2 consumption and CO2 production measurements in stirred microbial cultures | |
Karube | Possible developments in microbial and other sensors for fermentation control | |
Macauley‐Patrick et al. | Modes of fermenter operation | |
Schou et al. | Construction and performance of plug‐in membrane inlet mass spectrometer for fermentor monitoring | |
Ghaly et al. | Dehydrogenase activity measurement in yeast fermentation | |
Hospodka et al. | The polarographic determination of oxygen uptake and transfer rate in aerobic steady-state yeast cultivation on laboratory and production scale | |
CN110398529A (zh) | 一种bod水质监测方法 | |
JPH07177876A (ja) | 培養管理方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Effective date: 20070626 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Effective date: 20100713 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100910 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20110726 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110926 |
|
A02 | Decision of refusal |
Effective date: 20120529 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 |