JP2006204188A - Ｃｏ２インキュベータ - Google Patents

Abstract

【課題】本発明は、血液、検体等から採取された細胞の温度・湿度・雰囲気等を制御し、細胞の培養を行うＣＯ_２インキュベータに関するもので、ＣＯ_２濃度低下に即対応できるＣＯ_２インキュベータを提供する。
【解決手段】培養室１内へ供給するＣＯ_２ガスを一時充填しておくためのチャンバ１５と、培養室１内にＣＯ_２ガスを供給するための培養室電磁開閉弁１６と、チャンバ１５内にＣＯ_２ガスを供給するチャンバ電磁開閉弁１７と、チャンバ内のＣＯ_２ガスを培養室１内へ供給するＣＯ_２供給ファン１８とを備え、通常時にはチャンバ１５内にＣＯ_２ガスを充填させ、培養室１内のＣＯ_２ガス濃度が低下した際にはＣＯ_２供給ファン１８を動作してチャンバ１５内に充填されたＣＯ_２ガスを放出することで、ＣＯ_２濃度低下に対して即対応することができる。
【選択図】図１

Description

本発明は、血液、検体等から採取された細胞の温度・湿度・雰囲気等を制御し、細胞の培養を行うＣＯ_２インキュベータに関するものである。

近年のバイオ、再生医療関連の分野の発達に伴い、インキュベータを使用して細胞を培養する作業が増加傾向にある。細胞の培養を促進するためには、それぞれの細胞に適した培養空間の環境を整備する必要があり、従来より、培養空間内の温度制御、湿度制御、雰囲気制御を行うインキュベータが開発されている。

特に、培養条件として、ＣＯ_２ガス濃度の厳格な濃度条件を要求する細胞の培養を行う場合には、温度制御及び湿度制御を行うものに加えて、培養空間内のＣＯ_２ガス濃度を制御するものとしてＣＯ_２インキュベータが用いられている。

しかしながら、従来のＣＯ_２インキュベータでは、自動又は手動により扉の開閉が行われると、ＣＯ_２インキュベータの庫内からＣＯ_２が外部に漏出し、庫内のＣＯ_２ガス濃度が変動する。また、培養細胞の納出入に起因して扉の開閉が頻繁に行われると、庫内のＣＯ_２ガス濃度が所定の濃度に回復する前に、庫内のＣＯ_２ガス濃度が変動することとなる。そのため、細胞の培養空間の状態が不安定となり、細胞の生育に悪影響を及ぼすという問題がある。

例えば、培養空間の急激なＣＯ_２ガス濃度の変化に対し、迅速に対応することができるＣＯ_２インキュベータとして、ＣＯ_２ガス濃度検出手段及びＣＯ_２ガス濃度設定手段に基づき、培養空間内のＣＯ_２ガス濃度とＣＯ_２ガス濃度設定値との偏差から比例、又は、比例と積分、或いは、比例と積分と微分の演算を実行し、培養空間への単位時間当たりのＣＯ_２ガス供給時間及び停止時間を算出し、当該算出された供給時間及び停止時間に基づき、ＣＯ_２供給手段からの培養空間にＣＯ_２ガスを供給するものがある（例えば、特許文献１参照）。
特開２００４−１１３１５３号公報

しかしながら、上記特許文献１に記載の構成は、比例、微分、積分制御を用いて比較的迅速且つ正確なＣＯ_２の供給を実現しているが、ＣＯ_２供給手段から供給されるガスの流量自体が増減するわけではなく、例えば扉の開閉後に大量のＣＯ_２を供給する際には結局長時間ＣＯ_２供給手段を動作する術しか持たない。

また、予めＣＯ_２供給手段からのガスの流量を増加させれば、目標ガス濃度付近での精密な制御は非常に困難なものとなってしまう。

本発明は上記従来の問題点を解決するもので、培養室内へ供給するＣＯ_２ガスを一時充填しておくためのチャンバと、チャンバ内にＣＯ_２ガスを供給するガスボンベ及びチャンバ電磁開閉弁と、チャンバ内のＣＯ_２ガスを培養室内へ供給するＣＯ_２供給手段とを備え、通常時にはチャンバ内にＣＯ_２ガスを充填させ、培養室内のＣＯ_２ガス濃度が低下した際にはＣＯ_２供給手段を動作して、前記チャンバ内に充填されたＣＯ_２ガスを放出することで、短時間で大量のＣＯ_２ガスを培養室内に送り込むことを可能とするＣＯ_２インキュベータを提供するものである。

上記目的を達成するために本発明は、培養室内の培養物を培養するＣＯ_２インキュベータにおいて、前記培養室内へ供給するＣＯ_２ガスを一時チャンバ内に充填しておき、通常時には、チャンバ電磁開閉弁を開閉させて前記チャンバ内にＣＯ_２ガスを充填させ、前記培養室内のＣＯ_２ガス濃度が低下したときには、ＣＯ_２供給手段を動作してＣＯ_２を前記培養室内に供給する制御を行うものである。

これにより、培養室内のＣＯ_２ガス濃度が低下した際には、ＣＯ_２供給手段を動作してチャンバ内に充填されたＣＯ_２ガスを放出することで、短時間で大量のＣＯ_２ガスを培養室内に送り込むことが可能となる。

また、本発明は、ＣＯ_２インキュベータにおける扉の開閉を検出し、この扉の開閉動作を基準に前記ＣＯ_２供給手段を動作させるようにしたもので、前記培養室内のＣＯ_２ガス濃度低下の最大の要因であるドアの開閉動作に基づいて前記チャンバ内のＣＯ_２ガスを供給することで、培養室内の環境変化による培養条件の悪化を速やかに防止することができる。

本発明のＣＯ_２インキュベータは、培養室内へ供給するＣＯ_２ガスを一時充填しておくためのチャンバと、チャンバ内にＣＯ_２ガスを供給するガスボンベ及びチャンバ電磁開閉弁と、チャンバ内のＣＯ_２ガスを培養室内へ供給するＣＯ_２供給手段とを備え、通常時にはチャンバ内にＣＯ_２ガスを充填させ、培養室内のＣＯ_２ガス濃度が低下した際にはＣＯ_２供給手段を動作してチャンバ内に充填されたＣＯ_２ガスを放出することで、短時間で大量のＣＯ_２ガスを培養室内に送り込むことが可能となり、培養室内における細胞等の培養環境を逸早く復帰させ、ＣＯ_２インキュベータの信頼性を高めるものである。

請求項１に記載の発明は、扉と断熱箱とにより構成された培養室にて収容した培養物を培養するＣＯ_２インキュベータにおいて、前記培養室内へ供給するＣＯ_２ガスを一時充填しておくためのチャンバと、前記チャンバ内にＣＯ_２ガスを供給するガスボンベ、および前記ＣＯ_２ガスの供給を制御するチャンバ電磁開閉弁と、前記チャンバ内のＣＯ_２ガスを前記培養室内へ供給するＣＯ_２供給手段と、前記チャンバ電磁開閉弁および前記ＣＯ_２供給手段を制御する制御手段とを備え、前記制御手段は、通常時には前記チャンバ電磁開閉弁を開閉させて前記チャンバ内にＣＯ_２ガスを充填させ、前記培養室内のＣＯ_２ガス濃度が低下したときには前記ＣＯ_２供給手段を動作してＣＯ_２を前記培養室内に供給する制御を行うものである。

かかる構成とすることにより、培養室内のＣＯ_２ガス濃度が低下した際には、ＣＯ_２供給手段を動作してチャンバ内に充填されたＣＯ_２ガスを放出することで、短時間で大量のＣＯ_２ガスを培養室内に送り込むことが可能となる。

また、請求項２に記載の発明は、前記扉もしくは断熱箱に、前記扉の開閉を検出する扉開閉検知手段を設け、前記制御手段は、前記扉の開閉後に前記ＣＯ_２供給手段を動作させるようにしたもので、前記培養室内のＣＯ_２ガス濃度低下の最大の要因であるドア開閉後にチャンバ内のＣＯ_２ガスを供給することで、培養室内の環境変化による培養条件の悪化を防止することができる。

また、請求項３に記載の発明は、前記制御手段を、前記扉が所定の時間以上開かれた後に閉じられたとき、前記ＣＯ_２供給手段を動作させるようにしたものである。

これにより、培養環境が変化しない程度の極短時間のドア開閉後にＣＯ_２ガスを供給してしまうことを防止する。

また、請求項４に記載の発明は、前記培養室内のＣＯ_２ガス濃度を検知するＣＯ_２検知手段を設け、前記制御手段は、前記培養室内のＣＯ_２濃度が所定の濃度以下になったときに前記ＣＯ_２供給手段を動作させるものである。

かかる構成により、前記ＣＯ_２検知手段によってＣＯ_２ガスを供給すべきタイミングが確実に判定できる。

また、請求項５に記載の発明は、前記チャンバ電磁開閉弁とは別経路で、直接前記培養室内へＣＯ_２ガスを供給する培養室電磁開閉弁を設け、前記制御手段により、前記チャンバ電磁開閉弁と前記培養室電磁開閉弁とを個別または同時に動作させる制御を行うものである。

かかる構成とすることにより、通常はチャンバ電磁開閉弁がチャンバ内のＣＯ_２ガス充填を行い、培養室電磁開閉弁は培養室のＣＯ_２ガス供給を行う。そして、培養室内のＣＯ_２濃度に大きな変化があった際にのみチャンバ内に充填されたＣＯ_２ガスを培養室に供給することで、培養室電磁開閉弁による精密なＣＯ_２濃度制御と、チャンバによるＣＯ_２ガス濃度低下時の迅速な濃度回復を最適なタイミングで実現することにより、頻繁なドア開閉等が行われる環境下でも最適な培養環境を保つことができる。

また、請求項６に記載の発明は、前記培養室と前記チャンバとの容積比に基づき、前記ＣＯ_２供給手段を動作した後、即座に目標とする前記培養室内ＣＯ_２濃度に達する容積のＣＯ_２量を、前記制御手段により前記チャンバ内に充填させるものである。

かかる構成により、前記ＣＯ_２ガス濃度の復帰性をより高めることができる。

また、請求項７に記載の発明は、前記制御手段により、前記培養室電磁開閉弁と前記チャンバ電磁開閉弁とが同時に動作する際に、前記チャンバ電磁開閉弁の動作を一時停止させ、前記培養室電磁開閉弁の動作を優先させる制御を行うものである。

かかる構成とすることにより、前記培養室電磁開閉弁とチャンバ電磁開閉弁とが同時に動作した際の圧力減少による流量低下を防止することができ、精密なＣＯ_２ガス濃度環境を保つことができる。

また、請求項８に記載の発明は、前記制御手段により、必要に応じて前記ＣＯ_２供給手段の動作量を変化させるもので、培養室内に必要とされるＣＯ_２ガス量よりも、チャンバ内に充填されたＣＯ_２ガス量の方が多いときでも適当なＣＯ_２ガス量を培養室内に供給することができる。

以下、本発明の実施の形態について、図面を参照しながら説明する。なお、この実施の形態によってこの発明が限定されるものではない。

（実施の形態１）
図１は、本発明の実施の形態１におけるＣＯ_２インキュベータの側面断面図、図２は、同ＣＯ_２インキュベータの制御を行う制御ブロック図、図３は同ＣＯ_２インキュベータの制御動作の内容を示すフローチャートである。

図１及び図２において、培養室１は、断熱材が封入された扉２と断熱箱３とで構成され、この培養室１内に設けられたトレイ４上に細胞、菌、かび等の培養物が入ったシャーレー等（図示せず）を置き、前記培養対象物の培養を行う。培養室１内は、培養環境として、温度、ＣＯ_２ガス濃度、湿度を管理する必要がある。

制御手段５は、マイクロコンピュータを中心とする制御回路からなり、培養室１内に設けられた温度センサ６の検知温度に基づき、加熱手段として例えばヒータ７を、冷却手段として例えばペルチェユニット８を適宜動作し、培養室１内の環境温度を設定値に保つ。またペルチェユニット８の放熱部は、放熱ファン９によって冷却され、ペルチェユニット８から発生する熱を機体外部へ放熱させる。

培養室１内には、培養室１内の培養環境を均一にするために庫内ファン１０が設置されており、これにより培養室１内の空気（気体）を攪拌する。庫内ファン１０を回転するファンモータ１１は、回転軸を介して培養室１の外に設けられている。

さらに、培養室１内には、給水トレイ１２が設けられている。この給水トレイ１２に汲み入れられた水は自然気化し、培養室１内を常時高湿度に保つ。

また、断熱箱３の外部には、ＣＯ_２ガスが充填されたガスボンベ１３が設けられており、このガスボンベ１３は、培養室１内にＣＯ_２ガスを供給するガス供給経路１４に連結されている。さらに、ガス供給経路１４は、途中で二経路に分岐し、一方の経路１４ａは培養室１内に開口し、もう一方の経路１４ｂは培養室１の下部に設けられたチャンバ１５内に開口している。

ここで、チャンバ１５は、培養室１の容積の５〜１０％程度の容積を持ち、ＣＯ_２を一時充填しておくことができる。

培養室１及びチャンバ１５に連通するガス供給経路１４ａ、１４ｂには、培養室電磁開閉弁１６とチャンバ電磁開閉弁１７がそれぞれ設けられており、制御手段５はこれらを動作させることで、培養室１およびチャンバ１５へのＣＯ_２ガスの供給量を調整する。

チャンバ１５内に充填されたＣＯ_２ガスを、培養室１内に供給するＣＯ_２供給手段として、ＣＯ_２供給ファン１８を設け、これを回転することでＣＯ_２を培養室１内へと供給することができる。

培養室１内にはＣＯ_２センサ１９が設けられており、これによって培養室１内のＣＯ_２ガス濃度を検出する。培養室電磁開閉弁１６及びＣＯ_２供給ファン１８の培養室１内への２種類のＣＯ_２ガス供給手段は、ＣＯ_２センサ１９の検知ガス濃度に基づいて動作する制御手段５によって制御される。

培養室１内のＣＯ_２ガス濃度低下の最大の要因としては、扉２の開閉があげられる。特に、扉２の頻繁な開閉操作は、顕著であることも容易に理解でき得るところである。

したがって、扉２の開閉後にチャンバ１５内のＣＯ_２ガスを供給することは、培養室１内の空質を維持・確保する信頼性において有用であり、さらに、扉２の開閉を検知する手段があれば、ＣＯ_２の供給維持にも効果的である。すなわち、扉２を開いている間は、ＣＯ_２ガスを供給しても無駄となってしまうので、ＣＯ_２の供給を停止させる必要がある。このような制御を行う場合、扉２の開閉検知が重要となる。

かかる点から、ドアスイッチ２０は、断熱箱３の前面で扉２との接触部に設けられ、扉２を開いたときにはオフ、閉じたときにはオン動作する。ドアスイッチ２０の動作に基づく制御は、培養室１内への、ＣＯ_２の供給の他に、チャンバ１５内にＣＯ_２が充填されていないときは、扉２の開放に連動してチャンバ電磁開閉弁１７を開き、チャンバ１５への充填を行う制御も可能である。かかる制御は、培養室１内へのＣＯ_２の供給に際し、常に円滑に行えるもので、前述の如く培養室１内の空質を維持・確保する信頼性をさらに向上する。

培養室電磁開閉弁１７によるＣＯ_２ガス供給は、ガスボンベ１３からの圧力次第であるが、培養室１内のＣＯ_２ガス濃度が設定値に近い時の供給を考慮すれば、ガスボンベ１３からの圧力は微小にしておく必要がある。そのため、従来は、培養室内１のＣＯ_２ガス濃度が低下したときにも時間をかけてＣＯ_２ガスを供給しなければならなかった。

本発明ではチャンバ１５に一時的にＣＯ_２ガスを蓄えておき、培養室１内のＣＯ_２濃度が低下した際に、ＣＯ_２供給ファン１８を動作することで、短時間で大量のＣＯ_２ガスを供給することができる。

本実施の形態におけるＣＯ_２インキュベータの要部動作を図３のフローチャートに添って具体例を挙げながら説明する。

本実施の形態では培養室１内のＣＯ_２濃度を５％に設定し、培養室１内のＣＯ_２濃度が３％未満になったとき、チャンバ１５内に充填されたＣＯ_２ガスを培養室１内に供給する条件設定で説明する。

前記ＣＯ_２濃度の判定は、ＣＯ_２センサ１９の検出濃度によって行っているが、他の方法として、例えばドアスイッチ２０が所定の時間以上開かれた後に閉じられたときに、チャンバ１５内に充填されたＣＯ_２ガスを培養室１内に供給してもよい。または、これらを複合して判定すればなお望ましい。

図３において、まず、制御手段５は培養室１内のＣＯ_２濃度が３％未満であるか否かを判定する（ＳＴＥＰ１０１）。

培養室１内のＣＯ_２濃度が３％未満であった場合は、次に培養室電磁弁１６が動作中か否かを判定する（ＳＴＥＰ１０２）。これは培養室電磁開閉弁１６とＣＯ_２供給ファン１８が同時に動作することを防止するためである。本実施例では、チャンバ１５の容積が培養室１の容積の５％に設定されており、制御手段５はこのチャンバ１５内に充填されたＣＯ_２の何割を培養室１内に供給すれば、設定値である５％に到達できるかを計算している。よって、培養室電磁開閉弁１６とＣＯ_２供給ファン１８が同時に動作すると、この計算通りのＣＯ_２ガス供給ができずに、設定値に対してオーバーシュートしてしまう可能性がある。しかし、これらを同時に開いてもオーバーシュートすることなく設定値に到達させることができるような計算方法にしておけば、同時に開くことも可能である。

培養室電磁開閉弁１６が動作中であればこれを停止させ（ＳＴＥＰ１０３）、ＣＯ_２供給ファン１８によってチャンバ１５内に充填されたＣＯ_２ガスを培養室１内へと供給する（ＳＴＥＰ１０４）。

前述のＳＴＥＰ１０２にて培養室電磁開閉弁１６が動作していなかった場合は、直接ＳＴＥＰ１０４へと進み、ＣＯ_２ガスの供給を行う。ここでのＣＯ_２供給ファン１８の回転数と回転時間は培養室１内へ供給すべきＣＯ_２ガスの量によって変化させることができる。例えば設定値５％に対して培養室１内のＣＯ_２ガス濃度が２％であったときは、回転数５０％で２秒間、また、培養室１内のＣＯ_２ガス濃度が０％であったときは回転数１００％で５秒間とする。

そして、ＣＯ_２ガス供給後は、培養室１内のＣＯ_２ガス濃度が５％に到達しているか否かを確認し（ＳＴＥＰ１１２）、到達していなければＳＴＥＰ１０１へと戻る。

ＳＴＥＰ１０１にて培養室１内のＣＯ_２濃度が３％よりも大きかったとき、以下通常の培養室１内ＣＯ_２ガス濃度制御、及びチャンバ１５内のＣＯ_２ガス制御を行う。

まず、現在の培養室１内ＣＯ_２濃度と設定値とを比較する（ＳＴＥＰ１０５）。

培養室１内にＣＯ_２ガスを供給する必要があったと判定した場合、次にチャンバ電磁開閉弁１７が動作しているか否かを判定する（ＳＴＥＰ１０６）。これは、培養室電磁開閉弁１６とチャンバ電磁開閉弁１７が同時に動作することによって、それぞれのガスの圧力が低下し、ＣＯ_２の流量が減少してしまうことを防止するためである。

この際には培養室電磁開閉弁１６の動作を優先し、チャンバ電磁開閉弁１７を停止し（ＳＴＥＰ１０７）、培養室電磁開閉弁１６を動作して培養室１内へＣＯ_２ガスを供給する（ＳＴＥＰ１０８）。

また、前述のＳＴＥＰ１０６にてチャンバ電磁開閉弁１７が停止していた場合は、直接ＳＴＥＰ１０８へと進み、培養室電磁開閉弁１６を動作して培養室１内へＣＯ_２ガスを供給する。

ここで、培養室電磁開閉弁１６の動作は、設定値と培養室１内のＣＯ_２ガス濃度との偏差から、比例と、積分と、微分の演算によって決定、すなわちＰＩＤ演算制御によって行われるのが通常である。

ＣＯ_２ガス供給後は、培養室１内のＣＯ_２ガス濃度が５％に到達しているか否かを確認し（ＳＴＥＰ１１２）、到達していなければＳＴＥＰ１０１へと戻る。

そして、前述のＳＴＥＰ１０５にて培養室１内にＣＯ_２ガス供給の必要がないと判定したとき、次のようにしてチャンバ１５内へのＣＯ_２ガス充填制御を行う。

まず、チャンバ１５内にＣＯ_２ガスが充填されているか否かを判定する（ＳＴＥＰ１０９）。この判定は、チャンバ１５内にさらにＣＯ_２検知手段を設けて検知しても良いし、チャンバ電磁開閉弁１７が開いていた時間を積算して求めても良い。

チャンバ１５内にＣＯ_２ガスが充填されていると判定した場合は、ＳＴＥＰ１０１へと戻り、チャンバ１５内にＣＯ_２ガスが充填されていなかった場合は、次に培養室電磁開閉弁１６が動作中であるか否かを判定する（ＳＴＥＰ１１０）。これは、培養室電磁開閉弁１６とチャンバ電磁開閉弁１７が同時に動作することによって、それぞれのガスの圧力が低下し、ＣＯ_２の流量が減少してしまうことを防止するためである。

培養室電磁開閉弁１６が動作中でなければ、チャンバ電磁開閉弁１７を動作し、チャンバ１５内へＣＯ_２ガスの充填を行う（ＳＴＥＰ１１１）。また、ＳＴＥＰ１１０にて培養室電磁開閉弁１６が動作していた場合は、これが停止するまで待機する。

チャンバ１５内へのＣＯ_２ガスの充填終了後は、培養室１内のＣＯ_２ガス濃度が５％に到達しているか否かを確認し（ＳＴＥＰ１１２）、到達していなければＳＴＥＰ１０１へと戻る。

以上のように本実施の形態は、培養室１内へ供給するＣＯ_２ガスを一時充填しておくためのチャンバ１５と、培養室１内にＣＯ_２ガスを供給するための培養室電磁開閉弁１６と、チャンバ１５内にＣＯ_２ガスを供給するチャンバ電磁開閉弁１７と、チャンバ１５内のＣＯ_２ガスを培養室内へ供給するＣＯ_２供給ファン１８とを備え、通常時にはチャンバ１５内にＣＯ_２ガスを充填させ、培養室１内のＣＯ_２ガス濃度が低下した際にはＣＯ_２供給ファン１８を動作してチャンバ１５内に充填されたＣＯ_２ガスを放出することで、短時間で大量のＣＯ_２ガスを培養室内に送り込むことを可能とする。

本発明のＣＯ_２インキュベータは、ドア開閉時等の培養室内の培養環境変化、特にＣＯ_２ガス濃度変化に対して迅速に対応できるものである。再生医療関連の分野の発達に伴い、ＣＯ_２インキュベータの需要が高まると共に、本発明のＣＯ_２インキュベータのような培養物が損なわれないより安定した培養環境が求められ、本発明は、かかる要求に対応するものである。

本発明の実施の形態１におけるＣＯ_２インキュベータの側面断面図 同実施の形態におけるＣＯ_２インキュベータの制御ブロック図 同実施の形態におけるＣＯ_２インキュベータの制御動作を説明するフローチャート

符号の説明

１ 培養室
２ 扉
３ 断熱箱
４ トレイ
５ 制御手段
６ 温度センサ
７ ヒータ
８ ペルチェユニット
９ 放熱ファン
１０ 庫内ファン
１１ ファンモータ
１２ 給水トレイ
１３ ガスボンベ
１４ ガス供給経路
１５ チャンバ
１６ 培養室電磁開閉弁
１７ チャンバ電磁開閉弁
１８ ＣＯ_２供給ファン
１９ ＣＯ_２センサ
２０ ドアスイッチ

Claims (8)

1. 扉と断熱箱とにより構成された培養室にて収容した培養物を培養するＣＯ_２インキュベータにおいて、前記培養室内へ供給するＣＯ_２ガスを一時充填しておくためのチャンバと、前記チャンバ内にＣＯ_２ガスを供給するガスボンベ、および前記ＣＯ_２ガスの供給を制御するチャンバ電磁開閉弁と、前記チャンバ内のＣＯ_２ガスを前記培養室内へ供給するＣＯ_２供給手段と、前記チャンバ電磁開閉弁および前記ＣＯ_２供給手段を制御する制御手段とを備え、前記制御手段は、通常時には前記チャンバ電磁開閉弁を開閉させて前記チャンバ内にＣＯ_２ガスを充填させ、前記培養室内のＣＯ_２ガス濃度が低下したときには前記ＣＯ_２供給手段を動作してＣＯ_２を前記培養室内に供給する制御を行うＣＯ_２インキュベータ。
2. 前記扉もしくは断熱箱に、前記扉の開閉を検出する扉開閉検知手段を設け、前記制御手段は、前記扉の開閉後に前記ＣＯ_２供給手段を動作させる請求項１に記載のＣＯ_２インキュベータ。
3. 前記制御手段は、前記扉が所定の時間以上開かれた後に閉じられたとき、前記ＣＯ_２供給手段を動作させる請求項１または請求項２に記載のＣＯ_２インキュベータ。
4. 前記培養室内のＣＯ_２ガス濃度を検知するＣＯ_２検知手段を設け、前記制御手段は、前記培養室内のＣＯ_２濃度が所定の濃度以下になったときに前記ＣＯ_２供給手段を動作させる請求項１から３のいずれか一項に記載のＣＯ_２インキュベータ。
5. 前記チャンバ電磁開閉弁とは別経路で、直接前記培養室内へＣＯ_２ガスを供給する培養室電磁開閉弁を設け、前記制御手段は、前記チャンバ電磁開閉弁と前記培養室電磁開閉弁とを個別または同時に動作させる制御を行う請求項１から４のいずれか一項に記載のＣＯ_２インキュベータ。
6. 前記制御手段は、前記培養室と前記チャンバとの容積比に基づき、前記ＣＯ_２供給手段を動作した後、即座に目標とする前記培養室内ＣＯ_２濃度に達する容積のＣＯ_２量を前記チャンバ内に充填させる請求項１から５のいずれか一項に記載のＣＯ_２インキュベータ。
7. 前記制御手段は、前記培養室電磁開閉弁と前記チャンバ電磁開閉弁とが同時に動作する際に、前記チャンバ電磁開閉弁の動作を一時停止させ、前記培養室電磁開閉弁の動作を優先させる制御を行う請求項１から６のいずれか一項に記載のＣＯ_２インキュベータ。
8. 前記制御手段は、必要に応じて前記ＣＯ_２供給手段の動作量を変化させる請求項１から７のいずれか一項に記載のＣＯ_２インキュベータ。

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