JP2006141252A - Method for producing plant body - Google Patents

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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To improve a rooting rate by promoting rooting from a shoot of a plant, and thereby to improve the productivity of clone seedlings. <P>SOLUTION: The method for producing a plant body includes culturing a branch, a stem, an apical bud, an axillary bud, an adventitious bud, a leaf, a seed leaf, a hypocotyl, an adventive embryo, a shoot primordium or the like of the plant by using a medium for culturing a plant tissue to which a silver ion and an antioxidant are added. For example, silver thiosulfate and silver nitrate are used as the silver ion source, and ascorbic acid and a sulfite salt are used as the antioxidant. At the time, the culture is preferably carried out under the irradiation with a light including a component having 650-670 nm wavelength and a component including 450-470 nm wavelength in a ratio of (9:1) to (7:3). <P>COPYRIGHT: (C)2006,JPO&NCIPI

Description

本発明は、植物のシュートを発根させて行う植物体の生産方法に関する。   The present invention relates to a method for producing a plant by rooting a plant shoot.

目的に適った形質を持つ均質な植物体(苗)を大量に生産するステップは、農業生産、植林、育種、その他の目的で植物体を産業的に利用しようとする場合に、必ず要求される。このとき植物体の大量生産手段として有用なのが、伝統的な挿し木法や、近年のバイオテクノロジーの発達により生まれた組織培養法である。これらの方法によれば、単に、苗の大量生産ができるばかりではなく、同一の遺伝的性質を有する植物体、即ちクローン苗を大量かつ迅速に生産することができる。   The step of mass production of homogeneous plants (seedlings) with traits suitable for the purpose is always required when the plant is used industrially for agricultural production, afforestation, breeding and other purposes. . At this time, the traditional cutting method and the tissue culture method born by the development of biotechnology in recent years are useful as a means for mass production of plants. According to these methods, not only can mass production of seedlings be performed, but also plants having the same genetic properties, that is, clone seedlings can be produced in large quantities and rapidly.

挿し木法においては、増殖しようとする植物の個体から枝や茎、場合によっては頂芽、腋芽、葉、子葉又は胚軸等を切取って挿し穂とし、これを挿し床や培地に挿し付けて発根させ植物体を生産する。一方、組織培養法において植物を大量増殖しようとする場合には、増殖しようとする植物の個体から適当な組織を切取って培養し、不定芽、不定胚、苗条原基又はこれらの組織から伸長してくる茎葉を採取して発根させる。つまり、いずれの方法を用いてクローン苗を生産するにしても、発根という過程を経ることとなる。   In the cutting method, branches and stems, and in some cases, apical buds, axillary buds, leaves, cotyledons or hypocotyls, etc. are cut out from the individuals of the plant to be proliferated to form cuttings, which are then inserted into a bed or culture medium. Roots to produce plant bodies. On the other hand, when mass-growing a plant by the tissue culture method, an appropriate tissue is cut out from the individual plant to be proliferated, cultured, and expanded from adventitious buds, adventitious embryos, shoot primordia or these tissues. Collect stems and leaves to root. That is, regardless of which method is used to produce cloned seedlings, a process of rooting will be performed.

従って、植物組織の発根能は、クローン苗の生産性に大きな影響を与える。特に、これらのクローン苗を産業的に利用しようとする場合、発根能が低い植物種では、これは深刻な問題となる。   Therefore, the rooting ability of plant tissues has a great influence on the productivity of cloned seedlings. In particular, when these clone seedlings are to be used industrially, this is a serious problem for plant species with low rooting ability.

一方、植物組織からの発根を阻害する主たる要因として、植物組織自身が放出するエチレンの関与が考えられている。そこで、エチレンの発生を抑制するため、前記不定芽等の組織を培養するにあたり、培地中に銀イオンを添加することが試みられている(非特許文献1)。しかしながら、この方法では、植物組織の枯死率は、ある程度減少するものの、発根自体は抑制されたり、遅延したりしてしまうため、植物組織からの発根率に対しては、向上効果が小さいか、むしろ阻害的に働くものであった。   On the other hand, the involvement of ethylene released by the plant tissue itself is considered as a main factor inhibiting rooting from the plant tissue. Then, in order to suppress generation | occurrence | production of ethylene, when culture | cultivating structures | tissues, such as said adventitious bud, adding silver ion in a culture medium is tried (nonpatent literature 1). However, in this method, although the death rate of the plant tissue is reduced to some extent, the rooting itself is suppressed or delayed, so the effect of improving the rooting rate from the plant tissue is small. Or rather, it was an inhibitory one.

エドウィン F.ジョージ(Edwin F. George)、“組織培養による植物増殖(PLANT PROPAGATION by TISSUE CULTURE)”英国、1993年、p200Edwin F. Edwin F. George, “PLANT PROPAGATION by TISSUE CULTURE” UK, 1993, p200

本発明は、従来技術の上記問題点に鑑み、植物組織からの発根を促進して、その発根率を向上させること、それにより、クローン苗、特に発根能が低い植物種に属するクローン苗の生産性を向上させ、このようなクローン苗の大量かつ迅速な生産を可能として、その産業的利用に途を開くこと、を目的としてなされたものである。   In view of the above-mentioned problems of the prior art, the present invention promotes rooting from plant tissues and improves the rooting rate thereof, so that clone seedlings, particularly clones belonging to plant species with low rooting ability The aim was to improve the productivity of seedlings, enable mass and rapid production of such cloned seedlings, and open the way to their industrial use.

本発明者らは鋭意研究の結果、銀イオン及び抗酸化剤を含有する培地を用いて植物のシュートを培養すると、そのシュートからの発根が促進され、発根率が向上することを見出し、本発明を完成した。   As a result of diligent research, the present inventors have found that when a plant shoot is cultured using a medium containing silver ions and an antioxidant, rooting from the shoot is promoted, and the rooting rate is improved. The present invention has been completed.

すなわち、本発明は、植物のシュートを、銀イオン及び抗酸化剤を添加した培地を用いて培養し、発根させることを特徴とする、植物体の生産方法に関する。   That is, the present invention relates to a method for producing a plant body, characterized in that plant shoots are cultured and rooted using a medium to which silver ions and an antioxidant are added.

本発明によれば、植物のシュートからの発根が促進され、発根率が向上するので、挿し木法や組織培養法によるクローン苗の生産性が向上する。しかも、このような効果は、発根能が低い植物種で特に顕著である。   According to the present invention, rooting from plant shoots is promoted and the rooting rate is improved, so that the productivity of cloned seedlings by cutting methods and tissue culture methods is improved. Moreover, such an effect is particularly remarkable in plant species with low rooting ability.

従って、本発明は、発根能が低い植物種であっても、クローン苗を大量かつ迅速に生産することを可能とし、その産業的利用に途を開くものである。   Therefore, the present invention makes it possible to produce a large amount of clonal seedlings quickly even for plant species with low rooting ability, which opens the way for industrial use.

本発明は、どのような植物に対しても適用することができる。しかし、本発明は、草本植物よりも発根能が劣っている木本植物、例えば、ユーカリ、マツ、サクラ、アカシア、ヤマモモ、クヌギ、ブドウ、リンゴ、バラ、ツバキ、ウメ、ユスラウメ、ジャカランタ等に適用した場合に、より効果を発揮する。中でも特に、難発根性として知られるユーカリ、マツ、サクラ等に本発明を適用すれば、大きな効果が得られる。   The present invention can be applied to any plant. However, the present invention can be applied to woody plants having inferior rooting ability compared to herbaceous plants, such as eucalyptus, pine, cherry, acacia, bayberry, cucumber, grapes, apples, roses, camellia, ume, eusloume, jacaranta and the like. More effective when applied. In particular, if the present invention is applied to eucalyptus, pine, cherry, etc., which are known to be difficult to root, great effects can be obtained.

本発明においては、これらの植物から得られるシュートを、所定の培地で培養することにより発根させ、植物体を生産する。ここでシュートとは、枝、茎、頂芽、腋芽、不定芽、葉、子葉、胚軸、不定胚又は苗条原基等、発根能を有する組織全般を意味している。また、植物体とは、これらの組織が発根して得られるものを言い、苗やこれが生長した個体も含む意味で用いている。なお、不定芽は、多芽体より効率良く取得することができる。多芽体は、本発明を適用して植物体を生産しようとする植物から、頂芽や腋芽等を切取って、これを公知の条件・公知の方法により組織培養して誘導することができ、不定芽は、こうして誘導された多芽体から伸長してくる、個々の茎葉として得ることができる。   In the present invention, shoots obtained from these plants are rooted by culturing them in a predetermined medium to produce plants. Here, the shoot means all tissues having rooting ability such as branches, stems, apical buds, buds, adventitious buds, leaves, cotyledons, hypocotyls, adventitious embryos or shoot primordia. Moreover, a plant body means what is obtained by rooting of these structures | tissues, and is used by the meaning including the seedling and the individual | organism | solid which this grew. Adventitious buds can be obtained more efficiently than multi-buds. Multi-buds can be derived by cutting the top buds and buds from the plant to which the present invention is to be applied to produce them, and culturing them using known conditions and known methods. Adventitious shoots can be obtained as individual foliage that elongates from the polyblasts thus induced.

例えば、前記の木本植物から、多芽体を形成させて本願発明で使用するシュートを取得するには、概ね次のようにして行う。まず、材料とする植物から頂芽、腋芽等の組織を採取し、採取した組織について、有効塩素量0.5〜4%の次亜塩素酸ナトリウム水溶液又は有効塩素量5〜15%の過酸化水素水溶液に10〜20分間浸漬して表面殺菌を行う。次いで、これを滅菌水で洗浄し、固体培地に挿し付けて芽を開じょさせ、伸長してきた茎葉を同じ組成の培地で継代培養することにより、多芽体を形成させる。ユーカリ属やアカシア属の腋芽を用いる場合には、固体培地は、ショ糖1〜5重量%、植物ホルモンとしてベンジルアデニン(以下、BAと略す。)0.02〜1mg/l、ゲランガム0.2〜0.3重量%若しくは寒天0.5〜1重量%を含有するムラシゲスクーグ(以下、MSと略す。)培地又はこのMS培地の硝酸アンモニウム成分と硝酸カリウム成分とを半減させた改変MS培地を用いるのが好ましい。こうして形成された多芽体からは活発に不定芽が分化し、伸長してくる。多芽体自体は、適当に分割して多芽体形成に用いた培地と同一組成の培地で培養することにより維持し、増殖させることができる。   For example, in order to obtain a shoot used in the present invention by forming a multi-bud from the above-mentioned woody plant, it is generally performed as follows. First, tissues such as apical buds and axillary buds are collected from the plant as a material, and the collected tissues are sodium hypochlorite aqueous solution having an effective chlorine content of 0.5 to 4% or peroxidation having an effective chlorine content of 5 to 15% Surface sterilization is performed by immersing in an aqueous hydrogen solution for 10 to 20 minutes. Next, this is washed with sterilized water, inserted into a solid medium, the buds are opened, and the elongated foliage is subcultured in a medium having the same composition to form a multi-bud. When Eucalyptus or Acacia sprouts are used, the solid medium is 1 to 5% by weight of sucrose, benzyladenine (hereinafter abbreviated as BA) as a plant hormone, 0.02 to 1 mg / l, gellan gum 0.2 A Murashige scoog (hereinafter abbreviated as MS) medium containing ~ 0.3 wt% or agar 0.5-1 wt% or a modified MS medium in which the ammonium nitrate component and the potassium nitrate component of this MS medium are halved is used. preferable. Adventitious buds are actively differentiated from the multi-buds formed in this way and extend. The multiblasts themselves can be maintained and proliferated by appropriately dividing them and culturing them in a medium having the same composition as the medium used for the formation of the multibuds.

上記シュートを培養し、発根させるための培地(以下、単に発根培地とも記載する。)としては、銀イオン及び抗酸化剤を添加した培地を用いる。銀イオンは、チオ硫酸銀(以下、STSと略す。)や硝酸銀等の銀化合物として培地中に添加すればよい。中でもSTSは、これを培地中に添加してシュートを培養すると、健全な根の伸長が促進されるので、本発明で用いる銀イオン源として好ましい。これは、このSTSに由来する銀イオンが、培地中で、チオ硫酸銀イオンの形態を取り、マイナスに帯電しているためと考えられる。発根培地中に添加する銀イオンの濃度は、0.5μM〜10μMが好ましい。特に好ましくは、0.5μM〜2μMである。発根培地中の銀イオン濃度が0.5μM未満の場合は、その効果をほとんど得ることができず、また、10μMを超える場合は、銀イオンの発根抑制作用による影響が大きくなるため、発根が遅延し、更には、根の形態も不良となるからである。   As a medium for culturing and rooting the shoots (hereinafter also simply referred to as a rooting medium), a medium to which silver ions and an antioxidant are added is used. Silver ions may be added to the medium as a silver compound such as silver thiosulfate (hereinafter abbreviated as STS) or silver nitrate. Among them, STS is preferable as a silver ion source used in the present invention, because when this is added to a medium and shoots are cultured, healthy root elongation is promoted. This is presumably because the silver ions derived from STS take the form of silver thiosulfate ions in the medium and are negatively charged. The concentration of silver ions added to the rooting medium is preferably 0.5 μM to 10 μM. Particularly preferably, it is 0.5 μM to 2 μM. When the silver ion concentration in the rooting medium is less than 0.5 μM, the effect can hardly be obtained. When the silver ion concentration exceeds 10 μM, the influence of the silver ion rooting inhibitory effect becomes large, so This is because the root is delayed and the root form is also poor.

一方、抗酸化剤としては、例えば、アスコルビン酸や亜硫酸塩等、公知のものを用いることができる。中でもアスコルビン酸は、培地への残留性が低いので、本発明で用いる抗酸化剤として好ましい。発根培地中に添加する抗酸化剤の濃度は、5〜200mg/lが好ましい。特に好ましくは、5〜20mg/lである。発根培地中の抗酸化剤の濃度が5mg/l未満の場合は、その効果をほとんど得ることができず、また、200mg/lを超える場合は、かえって発根が抑制される傾向が観察され、また、シュートの先枯れ等が発生するおそれもあるからである。   On the other hand, as the antioxidant, for example, known ones such as ascorbic acid and sulfite can be used. Among them, ascorbic acid is preferable as an antioxidant used in the present invention because of its low persistence in the medium. The concentration of the antioxidant added to the rooting medium is preferably 5 to 200 mg / l. Most preferably, it is 5-20 mg / l. When the concentration of the antioxidant in the rooting medium is less than 5 mg / l, almost no effect can be obtained, and when it exceeds 200 mg / l, a tendency to suppress rooting is observed. This is also because there is a risk that the chute will wither.

本発明で用いる発根培地には、通常、上記成分に加え、植物組織培養用培地の成分として公知の成分、即ち、必須成分として無機成分、その他の成分として、炭素源、ビタミン類、アミノ酸類及び植物ホルモン等を添加する。   In addition to the above components, the rooting medium used in the present invention is generally a known component as a component of a plant tissue culture medium, that is, an inorganic component as an essential component, and a carbon source, vitamins, amino acids as other components. Add plant hormones.

この場合において、無機成分としては、窒素、リン、カリウム、硫黄、カルシウム、マグネシウム、鉄、マンガン、亜鉛、ホウ素、モリブデン、塩素、ヨウ素、コバルト等の元素を含む無機塩、例えば、硝酸カリウム、硝酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸ナトリウム、リン酸1水素カリウム、リン酸2水素ナトリウム、塩化カリウム、硫酸マグネシウム、硫酸第1鉄、硫酸第2鉄、硫酸マンガン、硫酸亜鉛、硫酸銅、硫酸ナトリウム、塩化カルシウム、塩化マグネシウム、ホウ酸、三酸化モリブデン、モリブデン酸ナトリウム、ヨウ化カリウム、塩化コバルト等を使用することができる。これら無機塩は、発根培地中の濃度が、それぞれ約0.1μM〜約100mMとなるよう添加することが好ましい。   In this case, as the inorganic component, inorganic salts containing elements such as nitrogen, phosphorus, potassium, sulfur, calcium, magnesium, iron, manganese, zinc, boron, molybdenum, chlorine, iodine, cobalt, etc., for example, potassium nitrate, ammonium nitrate, Ammonium chloride, sodium nitrate, potassium monohydrogen phosphate, sodium dihydrogen phosphate, potassium chloride, magnesium sulfate, ferrous sulfate, ferric sulfate, manganese sulfate, zinc sulfate, copper sulfate, sodium sulfate, calcium chloride, chloride Magnesium, boric acid, molybdenum trioxide, sodium molybdate, potassium iodide, cobalt chloride, and the like can be used. These inorganic salts are preferably added so that the concentration in the rooting medium is about 0.1 μM to about 100 mM, respectively.

炭素源としては、ショ糖等の炭水化物とその誘導体、脂肪酸等の有機酸及び/又はエタノール等の1級アルコールなどを使用することができる。これらは、発根培地中に約1〜100g/lとなるよう添加することが好ましい。もっとも、炭酸ガスも炭素源として使用することができる。この場合には、培地中にショ糖等の有機化合物を添加する必要はなく、炭酸ガスを培養環境中に、約300ppm以上、好ましくは1000ppm以上となるように供給するだけでよい。ショ糖等の有機化合物は微生物の炭素源ともなるので、これらを添加した培地を用いる場合には、無菌環境下で培養を行う必要があるが、培地にこれらの有機化合物を添加せず、炭酸ガスを炭素源として使用することで、非無菌環境下での培養が可能となる。   As the carbon source, carbohydrates such as sucrose and derivatives thereof, organic acids such as fatty acids, and / or primary alcohols such as ethanol can be used. These are preferably added to the rooting medium so as to be about 1 to 100 g / l. However, carbon dioxide can also be used as a carbon source. In this case, it is not necessary to add an organic compound such as sucrose to the medium, and it is only necessary to supply carbon dioxide gas to the culture environment so as to be about 300 ppm or more, preferably 1000 ppm or more. Organic compounds such as sucrose can also be used as a carbon source for microorganisms. Therefore, when using a medium supplemented with these, it is necessary to carry out the cultivation in a sterile environment. By using gas as a carbon source, culture in a non-sterile environment becomes possible.

ビタミン類としては、例えば、ビオチン、チアミン(ビタミンB1),ピリドキシン(ビタミンB4),ピリドキサール、ピリドキサミン、パントテン酸カルシウム、イノシトール、ニコチン酸、ニコチン酸アミド及び/又はリボフラビン(ビタミンB2)等を使用することができる。これらはそれぞれ、発根培地中に約0.1〜150mg/lとなるよう添加することが好ましい。アミノ酸類としては、例えば、グリシン、アラニン、グルタミン酸、システイン、フェニルアラニン及び/又はリジン等を使用することができ、これらはそれぞれ、発根培地中に約0〜1000mg/lとなるよう添加することが好ましい。   As vitamins, for example, biotin, thiamine (vitamin B1), pyridoxine (vitamin B4), pyridoxal, pyridoxamine, calcium pantothenate, inositol, nicotinic acid, nicotinic acid amide and / or riboflavin (vitamin B2) are used. Can do. Each of these is preferably added to the rooting medium at about 0.1 to 150 mg / l. As the amino acids, for example, glycine, alanine, glutamic acid, cysteine, phenylalanine and / or lysine can be used, and these can be added to the rooting medium so as to be about 0 to 1000 mg / l, respectively. preferable.

また、植物ホルモン類としては、例えば、オーキシン類及び/又はサイトカイニン類を使用することができる。オーキシン類としては、ナフタレン酢酸(NAA)、インドール酢酸(IAA)、p―クロロフェノキシ酢酸、2,4―ジクロロフェノキシ酢酸(2,4D)、インドール酪酸(IBA)及びこれらの誘導体等が、サイトカイニン類としてはベンジルアデニン(BA)、カイネチン、ゼアチン及びこれらの誘導体等が汎用される。これらの植物ホルモン類は、それぞれ、発根培地中に約0.01〜10mg/lとなるよう添加することが好ましい。   As plant hormones, for example, auxins and / or cytokinins can be used. Examples of auxins include naphthalene acetic acid (NAA), indole acetic acid (IAA), p-chlorophenoxyacetic acid, 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4D), indolebutyric acid (IBA) and their derivatives. As benzyladenine (BA), kinetin, zeatin, and derivatives thereof are widely used. These plant hormones are preferably added to the rooting medium so as to be about 0.01 to 10 mg / l, respectively.

なお、本発明においては、無機成分、ビタミン類及びアミノ酸類を所定の組成で含有する、植物組織培養用培地として公知の培地に、銀イオン、抗酸化剤、炭素源、植物ホルモン類を適宜添加等して、上記組成を有する発根培地として用いてもよい。かかる植物組織培養用培地としては、例えば、MS培地、リンスマイヤースクーグ培地、ホワイト培地、ガンボーグのB−5培地、ニッチニッチ培地等を挙げることができる。中でも、MS培地及びガンボーグのB5培−地は、本発明の発根培地として好ましい。   In the present invention, silver ions, antioxidants, carbon sources, and plant hormones are appropriately added to a medium known as a plant tissue culture medium containing inorganic components, vitamins, and amino acids in a predetermined composition. Equally, it may be used as a rooting medium having the above composition. Examples of such a plant tissue culture medium include MS medium, Rinsmeier Skoog medium, white medium, Gamborg B-5 medium, and niche niche medium. Among them, MS medium and Bamboo medium of Gamborg are preferable as the rooting medium of the present invention.

上記発根培地は、液体培地のままで使用することも、寒天又はゲランガム等の固化剤で固化させて、固体培地として使用することもできる。液体培地として使用する場合は、発泡フェノール樹脂、ロックウール等からなる多孔性支持体を、この発根培地で湿潤させたものにシュートの基部を挿し付けて培養し、固体培地として使用する場合は、例えば、上記発根培地に0.5〜1重量%の寒天、又は、0.2〜0.3重量%のゲランガムを加えて固化させたものにシュートの基部を挿し付けて培養すればよい。いずれの場合でも、通常は約2〜5週間で、シュートからの発根が観察されるようになる。   The rooting medium can be used as a liquid medium, or can be solidified with a solidifying agent such as agar or gellan gum and used as a solid medium. When used as a liquid medium, a porous support made of foamed phenol resin, rock wool, etc., is wetted with this rooting medium and cultivated by inserting the base of the chute and used as a solid medium For example, what is necessary is just to culture | cultivate by inserting the base of a chute | shoot into the thing which added 0.5 to 1weight% agar or 0.2 to 0.3weight% gellan gum to the said rooting medium, and was solidified. . In either case, rooting from the shoot is usually observed in about 2 to 5 weeks.

さらに、上記発根培地を用いたシュートの培養にあたっては、650〜670nmの波長成分と450〜470nmの波長成分とを9:1〜7:3、好ましくは8:2の割合で含む光の照射下で行うことが好ましい。かかる波長成分を含む光を照射して培養を行うことで、シュートからの発根がより促進されるからである。また、培養温度としては、23〜28℃程度が好ましい。   Further, in culturing shoots using the rooting medium, irradiation with light containing a wavelength component of 650 to 670 nm and a wavelength component of 450 to 470 nm in a ratio of 9: 1 to 7: 3, preferably 8: 2. It is preferable to carry out below. This is because rooting from shoots is further promoted by culturing by irradiating light containing such wavelength components. The culture temperature is preferably about 23 to 28 ° C.

以上のようにして、シュートからの発根苗が得られた後は、ある程度の期間、そのまま培養を続け、根を充実させてから、これを育苗容器又は苗畑等に移植して育成し、植林等の所定の目的に使用可能な苗とすることができる。この間の用土や、苗を育成する際の温度・光強度等の条件は、その植物に適するように適宜設定すればよい。なお、不定芽や苗条原基等、培養組織由来のシュートを発根させた場合には、通常、育苗容器等への移植の前に、順化の過程を経る必要がある。   After rooting seedlings from shoots are obtained as described above, cultivation is continued for a certain period of time, the roots are enriched, and then transplanted to a seedling container or a nursery, etc. It can be set as a seedling that can be used for a predetermined purpose. Conditions during this period, such as temperature and light intensity when growing seedlings, may be set as appropriate to suit the plant. In addition, when shoots derived from cultured tissues such as adventitious shoots and shoot primordia are rooted, it is usually necessary to undergo an acclimatization process before transplanting to a seedling container or the like.

[作用]
前記したように、植物培養用の培地に添加された銀イオンは、エチレンの発生を抑制して培養組織の枯死率を減少させるものの、発根に関しては負の方向に働く要素となるため、その培養組織の発根率に対する向上効果は期待できず、植物の種や系統によっては、むしろ阻害的に働くことすらあった。
[Action]
As described above, the silver ions added to the plant culture medium suppress the generation of ethylene and reduce the mortality rate of the cultured tissue. The improvement effect on the rooting rate of the cultured tissue could not be expected, and depending on the plant species and lineage, it could even act as an inhibitor.

ところが、本発明者らは、この銀イオンを抗酸化剤と共に培地に添加し、この培地を用いて植物のシュートを培養した場合には、シュートからの発根が著しく促進されて発根率が向上し、通常であれば、培地中に添加された銀イオンの働きにより、発根率の減少が予想される植物種・系統においても、銀イオン添加培地のみならず、銀イオン無添加の培地と比較して、シュートからの発根率が向上することを見出した。   However, when the present inventors added this silver ion together with an antioxidant to a medium and cultured plant shoots using this medium, rooting from the shoots was remarkably promoted and the rooting rate increased. Even if the plant species / lines are expected to decrease in rooting rate due to the action of silver ions added to the medium, not only the silver ion-added medium, but also the silver ion-free medium It was found that the rooting rate from the shoot is improved as compared with.

培地中に添加された抗酸化剤は、この培地に挿し付けられたシュートの基部に働き、そこにつけられた切り口や傷等の酸化を抑制することで、発根を促進すると考えられるが、それだけでは、銀イオンによる阻害作用を打ち消し、これを凌駕するような上記効果は説明できない。おそらくは、銀イオンによるエチレン発生抑制効果と、抗酸化剤によるシュート基部の酸化抑制効果があいまって、かかる効果を奏しているものと考えられる。   Antioxidants added to the medium are thought to promote rooting by acting on the base of the shoots inserted in the medium and suppressing oxidation of cuts and scratches attached to them. Then, the said effect which cancels the inhibitory effect by silver ion and surpasses this cannot be explained. Presumably, the effect of inhibiting the generation of ethylene by silver ions and the effect of inhibiting the oxidation of the shoot base by an antioxidant are combined, and this effect is considered to be achieved.

以下、実施例により本発明をさらに詳細に説明する。   Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to examples.

[実施例1]
ユーカリプタス・グロブラス(Eucalyptus globulus、以下、単にE.グロブラスと略記する。)系統1より、特開平8−228621に示す方法を用いて誘導した多芽体から、2〜5cm長さに伸長した不定芽を切取り、その基部を、銀イオン源としてSTS(AgS)2μM(銀イオンとしても2μM)、抗酸化剤としてアスコルビン酸20mg/l及び植物ホルモンとしてIBA2mg/lを添加した、4倍希釈MS培地にて湿潤した発泡フェノール樹脂製多孔性支持体(スミザースオアシス社製『オアシス』)に挿し付け、炭酸ガス濃度1000ppm、温度25℃、湿度60%に調節した培養室で、650〜670nmの波長成分と450〜470nmの波長成分とを8.2:1.8の割合で含む、光合成有効光量子束密度51.3μmol/m/Sの赤色光照射下で培養を行った。なお、このとき培養容器としては、最大寸法が縦11.5cm×横11.5cm×高さ10.0cmの、胴部がやや張出した形状の立方体のものを用いた。この培養容器の頂面には、孔径0.45μmのポリテトラフルオロエチレン製膜(ミリポア社製『ミリシール』)を貼り付けた円形開口部2個(各開口部の直径は1cm)が設けられている。不定芽は、この培養容器1個当たり25本を挿し付けた。
[Example 1]
Eucalyptus globulus (hereinafter simply abbreviated as E. globulae) line 1 from adventitious buds elongated from 2 to 5 cm in length by using the method described in JP-A-8-228621. 4 parts diluted by adding STS (AgS 4 O 6 ) 2 μM as a silver ion source (2 μM as a silver ion), ascorbic acid 20 mg / l as an antioxidant and IBA 2 mg / l as a plant hormone In a culture chamber adjusted to a carbon dioxide concentration of 1000 ppm, a temperature of 25 ° C., and a humidity of 60%, it was inserted into a porous support made of foamed phenol resin (“Oasis” manufactured by Smithers Oasis) wetted with MS medium. Photosynthesis effective photon flux density 51 including a wavelength component of 450 to 470 nm in a ratio of 8.2: 1.8 It was cultured in the red light under irradiation of 3μmol / m 2 / S. At this time, as the culture vessel, a cube having a maximum dimension of 11.5 cm in length, 11.5 cm in width, and 10.0 cm in height and having a slightly protruding body portion was used. The top surface of the culture vessel is provided with two circular openings (each opening has a diameter of 1 cm) to which a polytetrafluoroethylene film ("Milliseal" manufactured by Millipore) having a pore diameter of 0.45 μm is attached. Yes. 25 adventitious buds were inserted per one culture vessel.

結果を図1、図2及び表1に示す。これらの図表より明らかなように、本例においては、培養開始後13日目より、不定芽からの発根が観察され始め、培養開始後3週間目の時点で、その発根率は60%を示した。一方、枯死率は、やはり培養開始から3週間後の時点で0%であった。   The results are shown in FIGS. 1 and 2 and Table 1. As is apparent from these charts, in this example, rooting from adventitious buds began to be observed on day 13 after the start of culture, and the rooting rate was 60% at the third week after the start of culture. showed that. On the other hand, the death rate was 0% after 3 weeks from the start of the culture.

[比較例1]
培地中にSTS及びアスコルビン酸を添加しなかった以外は、実施例1と同様にして、E.グロブラスの不定芽を培養した。
[Comparative Example 1]
In the same manner as in Example 1, except that STS and ascorbic acid were not added to the medium, Gross adventitious buds were cultured.

結果を図1及び図2に示す。これらの図より明らかなように、本例においては、培養開始後14日目より、不定芽からの発根が観察され始めたが、培養開始後3週間目の時点で、その発根率はわずか16%、一方、枯死率は、やはり培養開始から3週間後の時点で64%を示した。   The results are shown in FIGS. As is clear from these figures, in this example, rooting from adventitious buds began to be observed from the 14th day after the start of the culture, but at the time of 3 weeks after the start of the culture, the rooting rate was Only 16%, while the death rate was 64% at 3 weeks after the start of the culture.

[比較例2]
培地中にアスコルビン酸を添加しなかった以外は、実施例1と同様にして、E.グロブラスの不定芽を培養した。
[Comparative Example 2]
In the same manner as in Example 1 except that no ascorbic acid was added to the medium, Gross adventitious buds were cultured.

結果を図1及び図2に示す。これらの図より明らかなように、本例においては、不定芽からの発根が観察され始めたのが培養開始後15日目であり、培養開始後3週間目の時点での発根率も48%に留まった。一方、枯死率は、実施例1と同様、培養開始から3週間後の時点でも0%であった。   The results are shown in FIGS. As is clear from these figures, in this example, rooting from adventitious buds began to be observed on the 15th day after the start of culture, and the rooting rate at the 3rd week after the start of culture was also observed. Only 48%. On the other hand, the death rate was 0% at the time point 3 weeks after the start of culture, as in Example 1.

[実施例2]
不定芽の培養を、650〜670nmの波長成分と450〜470nmの波長成分とを2.9:7.1の割合で含む、光合成有効光量子束密度68.9μmol/m/Sの白色光照射下で行った以外は、実施例1と同様にして、E.グロブラスの不定芽を培養した。
[Example 2]
Irradiation of adventitious buds with white light irradiation having a photosynthesis effective photon flux density of 68.9 μmol / m 2 / S, containing a wavelength component of 650 to 670 nm and a wavelength component of 450 to 470 nm in a ratio of 2.9: 7.1 Except as described below, E.E. Gross adventitious buds were cultured.

培養3週間後の結果を表1に示す。表1より明らかなように、本例においては、培養開始後3週間目の時点で、不定芽の発根率は32%を示した。一方、枯死率は、やはり培養開始から3週間後の時点で0%であった。   The results after 3 weeks of culture are shown in Table 1. As is clear from Table 1, in this example, the rooting rate of adventitious buds was 32% at the third week after the start of the culture. On the other hand, the death rate was 0% after 3 weeks from the start of the culture.

[比較例3]
培地中にSTS及びアスコルビン酸を添加しなかった以外は、実施例2と同様にして、E.グロブラスの不定芽を培養した。
[Comparative Example 3]
In the same manner as in Example 2, except that STS and ascorbic acid were not added to the medium, E. coli was used. Gross adventitious buds were cultured.

培養3週間後の結果を表1に示す。表1より明らかなように、本例においては、培養開始から3週間後の時点で不定芽はすべて枯死し、その枯死率は100%であった。   The results after 3 weeks of culture are shown in Table 1. As is apparent from Table 1, in this example, all adventitious buds died at the time point 3 weeks after the start of the culture, and the death rate was 100%.

[比較例4]
培地中にアスコルビン酸を添加しなかった以外は、実施例2と同様にして、E.グロブラスの不定芽を培養した。
[Comparative Example 4]
In the same manner as in Example 2, except that no ascorbic acid was added to the medium, E. coli was used. Gross adventitious buds were cultured.

培養3週間後の結果を表1に示す。表1より明らかなように、本例においては、培養開始後3週間目の時点での不定芽の発根率は24%に留まった。一方、枯死率は、実施例2と同様、培養開始から3週間後の時点でも0%であった。   The results after 3 weeks of culture are shown in Table 1. As is clear from Table 1, in this example, the rooting rate of adventitious buds at the time of 3 weeks after the start of the culture remained at 24%. On the other hand, as in Example 2, the death rate was 0% even after 3 weeks from the start of the culture.

Figure 2006141252
Figure 2006141252

[実施例3]
E.グロブラス系統2に由来する不定芽を用い、また、培地中に、銀イオン源として、STSの代わりに硝酸銀(AgNO)5μM(銀イオンとしても5μM)を添加した以外は、実施例1と同様にして、E.グロブラスの不定芽を培養した。
[Example 3]
E. Similar to Example 1 except that adventitious buds derived from the Globus line 2 were used, and silver nitrate (AgNO 3 ) 5 μM (also 5 μM as silver ions) was added as a silver ion source instead of STS in the medium. E. Gross adventitious buds were cultured.

結果を図3及び図4に示す。これらの図より明らかなように、本例においては、培養開始後12日目より、不定芽からの発根が観察され始め、培養開始後3週間目の時点で、その発根率は100%を示した。一方、枯死率は、やはり培養開始から3週間後の時点で0%であった。   The results are shown in FIGS. As is clear from these figures, in this example, rooting from adventitious buds began to be observed from the 12th day after the start of the culture, and at the time of 3 weeks after the start of the culture, the rooting rate was 100%. showed that. On the other hand, the death rate was 0% after 3 weeks from the start of the culture.

[比較例5]
培地中に硝酸銀及びアスコルビン酸を添加しなかった以外は、実施例3と同様にして、E.グロブラスの不定芽を培養した。
[Comparative Example 5]
In the same manner as in Example 3 except that silver nitrate and ascorbic acid were not added to the medium, E. coli was used. Gross adventitious buds were cultured.

結果を図3及び図4に示す。これらの図より明らかなように、本例においては、培養開始後12日目より、不定芽からの発根が観察され始め、培養開始後3週間目の時点で、その発根率は80%を示したが、このとき、枯死率も12%を示した。   The results are shown in FIGS. As is clear from these figures, in this example, rooting from adventitious buds began to be observed from the 12th day after the start of culture, and the rooting rate was 80% at 3 weeks after the start of culture. At this time, the death rate was 12%.

[比較例6]
培地中にアスコルビン酸を添加しなかった以外は、実施例3と同様にして、E.グロブラスの不定芽を培養した。
[Comparative Example 6]
In the same manner as in Example 3 except that no ascorbic acid was added to the medium, E. coli was used. Gross adventitious buds were cultured.

結果を図3及び図4に示す。これらの図より明らかなように、本例においては、不定芽からの発根が観察され始めたのが培養開始後15日目であり、培養開始後3週間目の時点での発根率も64%に留まった。これは、比較例5の場合よりも低い発根率である。一方、枯死率は、実施例3と同様、培養開始から3週間後の時点でも0%であった。   The results are shown in FIGS. As is clear from these figures, in this example, rooting from adventitious buds began to be observed on the 15th day after the start of culture, and the rooting rate at the 3rd week after the start of culture was also observed. Only 64%. This is a lower rooting rate than in the case of Comparative Example 5. On the other hand, the death rate was 0% even after 3 weeks from the start of the culture, as in Example 3.

[実施例4]
E.グロブラス系統3に由来する不定芽を用いた以外は、実施例1と同様にして、E.グロブラスの不定芽を培養した。
[Example 4]
E. In the same manner as in Example 1, except that adventitious buds derived from Globus line 3 were used, Gross adventitious buds were cultured.

結果を図5及び図6に示す。これらの図より明らかなように、本例においては、培養開始後12日目より、不定芽からの発根が観察され始め、培養開始後3週間目の時点で、その発根率は60%を示した。一方、枯死率は、やはり培養開始から3週間後の時点で12%であった。   The results are shown in FIGS. As is clear from these figures, in this example, rooting from adventitious buds began to be observed from the 12th day after the start of culture, and the rooting rate was 60% at 3 weeks after the start of culture. showed that. On the other hand, the death rate was 12% after 3 weeks from the start of the culture.

[比較例7]
培地中にSTS及びアスコルビン酸を添加しなかった以外は、実施例4と同様にして、E.グロブラスの不定芽を培養した。
[Comparative Example 7]
In the same manner as in Example 4 except that STS and ascorbic acid were not added to the medium, E. coli was used. Gross adventitious buds were cultured.

結果を図5及び図6に示す。これらの図より明らかなように、本例においては、培養開始後12日目より、不定芽からの発根が観察され始めたが、培養開始後3週間目の時点で、その発根率はわずか12%、一方、枯死率は、やはり培養開始から3週間後の時点で88%を示した。   The results are shown in FIGS. As is clear from these figures, in this example, rooting from adventitious buds began to be observed from the 12th day after the start of the culture, but at the time of 3 weeks after the start of the culture, the rooting rate was Only 12%, while the death rate was 88% after 3 weeks from the start of the culture.

[比較例8]
培地中にアスコルビン酸を添加しなかった以外は、実施例4と同様にして、E.グロブラスの不定芽を培養した。
[Comparative Example 8]
In the same manner as in Example 4 except that ascorbic acid was not added to the medium, Gross adventitious buds were cultured.

結果を図5及び図6に示す。これらの図より明らかなように、本例においては、培養開始後12日目より、不定芽からの発根が観察されたが、培養開始後3週間目の時点での発根率は20%に留まり、枯死率も、やはり培養開始から3週間後の時点で48%を示した。   The results are shown in FIGS. As is clear from these figures, in this example, rooting from adventitious buds was observed from the 12th day after the start of the culture, but the rooting rate at the 3rd week after the start of the culture was 20%. In addition, the death rate also showed 48% at the time point 3 weeks after the start of the culture.

[実施例5]
ユーカリプタス・シトリオドーラ(Eucalyptus citriodora、以下、単にE.シトリオドーラと略記する。)に由来する不定芽を用い、また、培地中に、銀イオン源として、STSの代わりに硝酸銀5μM(銀イオンとしても5μM)を添加した以外は、実施例1と同様にして不定芽を培養した。
[Example 5]
Adventitious buds derived from Eucalyptus citriodora (hereinafter simply abbreviated as E. citriodora ) are used, and in the medium, as a silver ion source, 5 μM silver nitrate instead of STS (5 μM as silver ions) Adventitious buds were cultured in the same manner as in Example 1 except that was added.

結果を図7及び図8に示す。これらの図より明らかなように、本例においては、培養開始後12日目より、不定芽からの発根が観察され始め、培養開始後3週間目の時点で、その発根率は88%を示した。一方、枯死率は、やはり培養開始から3週間後の時点で0%であった。   The results are shown in FIGS. As is clear from these figures, in this example, rooting from adventitious buds began to be observed from the 12th day after the start of the culture, and at 3 weeks after the start of the culture, the rooting rate was 88%. showed that. On the other hand, the death rate was 0% after 3 weeks from the start of the culture.

[比較例9]
培地中に硝酸銀及びアスコルビン酸を添加しなかった以外は、実施例5と同様にして、E.シトリオドーラの不定芽を培養した。
[Comparative Example 9]
In the same manner as in Example 5, except that silver nitrate and ascorbic acid were not added to the medium, E. coli was used. Citriodora adventitious buds were cultured.

結果を図7及び図8に示す。これらの図より明らかなように、本例においては、培養開始後12日目より、不定芽からの発根が観察され始め、培養開始後3週間目の時点で、その発根率は64%を示したが、このとき、枯死率も12%を示した。   The results are shown in FIGS. As is clear from these figures, in this example, rooting from adventitious buds began to be observed from the 12th day after the start of the culture, and the rooting rate was 64% at the 3rd week after the start of the culture. At this time, the death rate was 12%.

[比較例10]
培地中にアスコルビン酸を添加しなかった以外は、実施例5と同様にして、E.シトリオドーラの不定芽を培養した。
[Comparative Example 10]
In the same manner as in Example 5 except that no ascorbic acid was added to the medium, E. coli was used. Citriodora adventitious buds were cultured.

結果を図7及び図8に示す。これらの図より明らかなように、本例においては、培養開始後12日目より、不定芽からの発根が観察され始めたが、培養開始後3週間目の時点での発根率は48%に留まった。これは、比較例9の場合よりも低い発根率である。一方、枯死率は、実施例5と同様、培養開始から3週間後の時点でも0%であった。   The results are shown in FIGS. As is clear from these figures, in this example, rooting from adventitious buds began to be observed from the 12th day after the start of the culture, but the rooting rate at the 3rd week after the start of the culture was 48. % Remained. This is a lower rooting rate than in the case of Comparative Example 9. On the other hand, the death rate was 0% even after 3 weeks from the start of the culture, as in Example 5.

[実施例6]
バラ科に属するソメイヨシノ、リンゴ、ユスラウメ、及び、ノウゼンカズラ科に属するジャカランタの当年枝を採取し、それぞれ2〜5cm長さに調製した後、その基部を、銀イオン源としてSTS2μM(銀イオンとしても2μM)、抗酸化剤としてアスコルビン酸10mg/l及び植物ホルモンとしてIBA2mg/lを添加した、4倍希釈MS培地にて湿潤した発泡フェノール樹脂製多孔性支持体(スミザースオアシス社製『オアシス』)に挿し付け、炭酸ガス濃度1000ppm、温度25℃、湿度60%に調節した培養室で、650〜670nmの波長成分と450〜470nmの波長成分とを8.2:1.8の割合で含む、光合成有効光量子束密度51.3μmol/m/Sの赤色光照射下で培養を行った。なお、このとき培養容器としては、実施例1で用いたのと同様のものを用いた。また、不定芽は、この培養容器1個当り25本挿し付けた。
[Example 6]
After collecting the current branches of Yoshino cherry, apple, Yusurame, and Jakaranta belonging to the genus Rosaceae belonging to the family Rosaceae and preparing each 2 to 5 cm in length, the base is STS 2 μM as a silver ion source (2 μM also as silver ions) ), A porous support made of foamed phenolic resin ("Oasis" manufactured by Smithers Oasis) wetted with a 4-fold diluted MS medium supplemented with 10 mg / l ascorbic acid as an antioxidant and 2 mg / l IBA as a plant hormone Insertion and photosynthesis in a culture chamber adjusted to a carbon dioxide concentration of 1000 ppm, a temperature of 25 ° C., and a humidity of 60%, containing a wavelength component of 650-670 nm and a wavelength component of 450-470 nm in a ratio of 8.2: 1.8 Culturing was performed under irradiation with red light having an effective photon flux density of 51.3 μmol / m 2 / S. At this time, the same culture vessel as that used in Example 1 was used as the culture vessel. In addition, 25 adventitious buds were inserted per one culture vessel.

培養3週間後の結果を表2に示す。表2より明らかなように、本例においては、培養開始後3週間目の時点で、ソメイヨシノで92%、リンゴで80%、ユスラウメで60%、ジャカランタで76%の発根率を示した。一方、枯死率は、ソメイヨシノで0%、リンゴで4%、ユスラウメで8%、ジャカランタで4%であった。   The results after 3 weeks of culture are shown in Table 2. As is clear from Table 2, in this example, the rooting rate was 92% for Yoshino cherry, 80% for apple, 60% for Yusraume, and 76% for Jakaranta at the third week after the start of culture. On the other hand, the death rate was 0% for Yoshino cherry, 4% for apples, 8% for Yusraume, and 4% for Jakaranta.

[比較例11]
培地中にSTS及びアスコルビン酸を添加しなかった以外は、実施例6と同様にして、E.グロブラスの不定芽を培養した。
[Comparative Example 11]
In the same manner as in Example 6 except that STS and ascorbic acid were not added to the medium, E. coli was used. Gross adventitious buds were cultured.

培養3週間後の結果を表2に示す。表2より明らかなように、本例においては、培養開始後3週間目の時点で、ソメイヨシノで60%、リンゴで48%、ユスラウメで32%、ジャカランタで52%の発根率を示した。一方、枯死率は、ソメイヨシノで20%、リンゴで16%、ユスラウメで40%、ジャカランタで28%であった。   The results after 3 weeks of culture are shown in Table 2. As is clear from Table 2, in this example, the rooting rate was 60% for Yoshino cherry, 48% for apple, 32% for Yusraume, and 52% for Jakaranta at the third week after the start of culture. On the other hand, the death rate was 20% for Yoshino cherry, 16% for apples, 40% for Yusraume, and 28% for Jakaranta.

[比較例12]
培地中にアスコルビン酸を添加しなかった以外は、実施例6と同様にして、E.グロブラスの不定芽を培養した。
[Comparative Example 12]
In the same manner as in Example 6, except that ascorbic acid was not added to the medium, E. coli was used. Gross adventitious buds were cultured.

培養3週間後の結果を表2に示す。表2より明らかなように、本例においては、培養開始後3週間目の時点で、ソメイヨシノで80%、リンゴで60%、ユスラウメで52%、ジャカランタで64%の発根率を示した。一方、枯死率は、ソメイヨシノで8%、リンゴで4%、ユスラウメで16%、ジャカランタで4%であった。   The results after 3 weeks of culture are shown in Table 2. As is apparent from Table 2, in this example, the rooting rate was 80% for Yoshino cherry, 60% for apple, 52% for Yusraume, and 64% for Jakaranta at the third week after the start of culture. On the other hand, the death rate was 8% for Yoshino cherry, 4% for apples, 16% for Yusraume, and 4% for Jakaranta.

Figure 2006141252
Figure 2006141252

E.グロブラス系統1の不定芽について、発根率の経時的変化を示すグラフである。E. It is a graph which shows a time-dependent change of a rooting rate about the adventitious bud of the Globus line | system | group 1. FIG. E.グロブラス系統1の不定芽について、培養3週間後の発根率を示すグラフである。E. It is a graph which shows the rooting rate after 3 weeks culture | cultivation about the adventitious bud of the Globus line | system | group 1. FIG. E.グロブラス系統2の不定芽について、発根率の経時的変化を示すグラフである。E. It is a graph which shows a time-dependent change of a rooting rate about the adventitious bud of the Globus line | system | group 2. FIG. E.グロブラス系統2の不定芽について、培養3週間後の発根率を示すグラフである。E. It is a graph which shows the rooting rate after 3 weeks culture | cultivation about the adventitious bud of the Globus line | system | group 2. FIG. E.グロブラス系統3の不定芽について、発根率の経時的変化を示すグラフである。E. It is a graph which shows a time-dependent change of a rooting rate about the adventitious bud of the Globus line | system | group 3. FIG. E.グロブラス系統3の不定芽について、培養3週間後の発根率を示すグラフである。E. It is a graph which shows the rooting rate 3 weeks after culture | cultivation about the adventitious bud of the globula system | strain 3. E.シトリオドーラの不定芽について、発根率の経時的変化を示すグラフである。E. It is a graph which shows a time-dependent change of a rooting rate about the adventitious bud of Citriodora. E.シトリオドーラの不定芽について、培養3週間後の発根率を示すグラフである。E. It is a graph which shows the rooting rate after culture | cultivation 3 weeks about adventitious buds of a citriodora.

Claims (3)

植物のシュートを、銀イオン及び抗酸化剤を添加した培地を用いて培養し、発根させることを特徴とする、植物体の生産方法。 A method for producing a plant comprising culturing a plant shoot using a medium to which silver ions and an antioxidant are added and causing the plant to root. 植物のシュートを、650〜670nmの波長成分と450〜470nmの波長成分とを、9:1〜7:3の割合で含む光照射下で培養し、発根させることを特徴とする、請求項1に記載の植物体の生産方法。 The plant shoot is cultivated under light irradiation containing a wavelength component of 650 to 670 nm and a wavelength component of 450 to 470 nm in a ratio of 9: 1 to 7: 3, and rooted. 2. The method for producing a plant according to 1. 植物のシュートとして、木本植物のシュートを用いることを特徴とする、請求項1又は2に記載の植物体の生産方法。 The method for producing a plant according to claim 1 or 2, wherein a shoot of a woody plant is used as the shoot of the plant.
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Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103081807A (en) * 2013-02-01 2013-05-08 中国林业科学研究院亚热带林业研究所 Method for regenerating plant by use of callus of camellia japonica
CN103155872A (en) * 2013-04-12 2013-06-19 湛江师范学院 Eucalyptus urophylla*grandis embryoid induction seedling raising method
CN103283606A (en) * 2013-06-24 2013-09-11 四川农业大学 Novel isolated culture method for cherry intraspecies and intraspecific hybrid embryo
CN103461143A (en) * 2013-09-30 2013-12-25 中南林业科技大学 Method for tissue culture and rapid propagation of camellia oleifera
CN103548686A (en) * 2013-11-01 2014-02-05 重庆文理学院 Rooting culture medium for tissue culture seedling of camellia japonica
CN103621298A (en) * 2013-12-04 2014-03-12 胡宁 Cultivation method of small apple bonsai
CN104026001A (en) * 2014-05-28 2014-09-10 浙江大学 Method for performing cross breeding on water chestnut and Dongkui waxberry for waxberry cultivating variety
JP5612605B2 (en) * 2009-12-10 2014-10-22 日本製紙株式会社 Clone seedling production method
US9532519B2 (en) 2006-12-11 2017-01-03 Japan Science And Technology Agency Plant growth regulator and use thereof
US9930887B2 (en) 2011-12-12 2018-04-03 Okayama Prefecture Compound for increasing amino acid content in plant, and use thereof
CN109042319A (en) * 2018-07-20 2018-12-21 河南农业大学 A method of preventing the browning of apple tissue culture and adventitious bud inducing
US10745706B2 (en) * 2014-12-24 2020-08-18 Japan Tobacco Inc. Method for gene transfer into sorghum plant using Agrobacterium, and method for production of transgenic sorghum plant
CN112106663A (en) * 2020-10-23 2020-12-22 江苏省太湖常绿果树技术推广中心 Method for establishing waxberry seedling clone

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000036911A2 (en) * 1998-12-18 2000-06-29 Monsanto Technology Llc Method for the regeneration of cotton

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000036911A2 (en) * 1998-12-18 2000-06-29 Monsanto Technology Llc Method for the regeneration of cotton

Cited By (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9532519B2 (en) 2006-12-11 2017-01-03 Japan Science And Technology Agency Plant growth regulator and use thereof
US8927286B2 (en) 2009-12-10 2015-01-06 Okayama Prefecture Method for producing clone seedlings
JP5612605B2 (en) * 2009-12-10 2014-10-22 日本製紙株式会社 Clone seedling production method
US9930887B2 (en) 2011-12-12 2018-04-03 Okayama Prefecture Compound for increasing amino acid content in plant, and use thereof
CN103081807A (en) * 2013-02-01 2013-05-08 中国林业科学研究院亚热带林业研究所 Method for regenerating plant by use of callus of camellia japonica
CN103155872A (en) * 2013-04-12 2013-06-19 湛江师范学院 Eucalyptus urophylla*grandis embryoid induction seedling raising method
CN103283606A (en) * 2013-06-24 2013-09-11 四川农业大学 Novel isolated culture method for cherry intraspecies and intraspecific hybrid embryo
CN103461143A (en) * 2013-09-30 2013-12-25 中南林业科技大学 Method for tissue culture and rapid propagation of camellia oleifera
CN103548686A (en) * 2013-11-01 2014-02-05 重庆文理学院 Rooting culture medium for tissue culture seedling of camellia japonica
CN103621298A (en) * 2013-12-04 2014-03-12 胡宁 Cultivation method of small apple bonsai
CN104026001A (en) * 2014-05-28 2014-09-10 浙江大学 Method for performing cross breeding on water chestnut and Dongkui waxberry for waxberry cultivating variety
US10745706B2 (en) * 2014-12-24 2020-08-18 Japan Tobacco Inc. Method for gene transfer into sorghum plant using Agrobacterium, and method for production of transgenic sorghum plant
CN109042319A (en) * 2018-07-20 2018-12-21 河南农业大学 A method of preventing the browning of apple tissue culture and adventitious bud inducing
CN109042319B (en) * 2018-07-20 2021-10-19 河南农业大学 Method for preventing tissue culture browning and adventitious bud induction of apples
CN112106663A (en) * 2020-10-23 2020-12-22 江苏省太湖常绿果树技术推广中心 Method for establishing waxberry seedling clone
CN112106663B (en) * 2020-10-23 2021-08-13 江苏省太湖常绿果树技术推广中心 Method for establishing waxberry seedling clone

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