JP2006124337A - Plant disease controlling agent - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、微生物を用いた植物病害防除剤および植物の病害の防除方法に関する。 The present invention relates to a plant disease control agent and a plant disease control method using microorganisms.
植物を病虫害の攻撃から守り、植物の健全な生育および収穫を得るためには、種々の方法がある。最も一般的な方法は、化学剤を用いることである（化学的防除法）。しかし、化学剤を多用または連用すると、その化学剤に抵抗性を示す植物病原菌が出現する場合があり、多大な開発費をかけて開発した化学剤の効果が失われてしまうことがあった。また、化学剤を多用すると、自然環境に対して過大な負荷がかかり、生態系の破壊につながる。そこで、近年は化学剤のみに頼るのではなく、物理的、生物的な方法などの環境負荷の少ない防除法も組み合わせて用いる総合防除の考え方が広がってきた。
特に生物的な防除方法は、自然界の生物間の相互作用を利用するもので、環境に対する負荷が少ない。そのような生物的な防除方法としては、例えば、炭疽病菌と拮抗するタラロマイセス属細菌（糸状菌の一種）の胞子等を用いたイチゴ炭疽病の防除方法（特許文献１参照）が知られている。
There are various ways to protect plants from attack by pests and to obtain healthy growth and harvest of plants. The most common method is to use chemical agents (chemical control methods). However, if a chemical agent is used extensively or continuously, a plant pathogen that exhibits resistance to the chemical agent may appear, and the effect of the chemical agent developed by spending a great deal of development cost may be lost. In addition, excessive use of chemical agents puts an excessive load on the natural environment, leading to the destruction of the ecosystem. Therefore, in recent years, the concept of comprehensive control using not only chemical agents but also control methods with low environmental impact such as physical and biological methods has spread.
In particular, the biological control method uses an interaction between living organisms in the natural world and has a low environmental load. As such a biological control method, for example, a control method for strawberry anthracnose using a spore of a Tallomyces bacterium (a type of filamentous fungus) that antagonizes anthrax is known (see Patent Document 1). .
しかし、糸状菌の胞子、特に分生子は大量に作られ生産性は高いものの、化学剤に比べて外部環境の変化の影響を比較的受け易く、糸状菌の胞子等を含む防除剤の保存条件によっては糸状菌の胞子の生存期間が短縮されてしまうことがあった。そのため、糸状菌の胞子を含む植物病害の防除剤の取り扱いには、ある程度の注意を払う必要があった。胞子を長期間保存するためには、低温に保つ、水分含量を少なくする、酸素を絶つ等の方法があるが、防除剤を低温に保ったり、防除剤の周りの酸素を絶つためには、コストがかかり過ぎるため現実的ではない。また、胞子の水分含量を減らすことは通常行われているが、乾燥し過ぎたり、熱を加えて乾燥すると胞子は死滅してしまう。したがって、微生物を用いた植物病害の防除剤であって、より長期間常温でも安定して保存することのできる、より実用的な植物病害の防除剤が求められていた。 However, although spores of filamentous fungi, especially conidia, are produced in large quantities and are highly productive, they are relatively susceptible to changes in the external environment compared to chemical agents, and the storage conditions for the control agent including filamentous fungal spores etc. In some cases, the survival time of the filamentous fungal spores may be shortened. For this reason, it has been necessary to pay some attention to the handling of plant disease control agents containing filamentous fungal spores. In order to store spores for a long period of time, there are methods such as keeping the temperature low, reducing the water content, and removing oxygen, but in order to keep the control agent at a low temperature or to stop oxygen around the control agent, It's not realistic because it costs too much. In addition, it is usual to reduce the water content of the spore. However, if the spore is dried too much or dried by applying heat, the spore will die. Therefore, there has been a demand for a more practical plant disease control agent that is a plant disease control agent that uses microorganisms and that can be stably stored at room temperature for a longer period of time.
また、微生物を用いて植物病害を防除する場合は、その微生物を植物に散布等し、問題となっている病原菌と接触させなければならない。この場合、微生物を直接散布することもできるが、散布しやすい様に粘土鉱物等の補助成分に分散させ、界面活性剤を加えて水和剤に製剤し、使用時にその製剤を水に溶かして散布することが多い。しかし、このような水和剤として散布すると、剤の補助成分が作物の表面に残り、汚れのように見える場合があった。 Moreover, when controlling plant diseases using microorganisms, the microorganisms must be sprayed on plants and brought into contact with the pathogenic bacteria in question. In this case, microorganisms can be sprayed directly, but dispersed in auxiliary ingredients such as clay minerals to facilitate spraying, added with a surfactant and formulated into a wettable powder, dissolved in water at the time of use. Often sprayed. However, when sprayed as such a wettable powder, the auxiliary component of the drug may remain on the surface of the crop and look like dirt.
特許文献２には、昆虫病原性真菌の分生子を安定的に保持するためにパラフィン系軽油を用いた昆虫病原性組成物が開示されている（特許文献２参照）。しかし、特許文献２で用いられているのは、あくまでも昆虫病原性真菌であって、植物病原菌に拮抗する拮抗菌については何ら開示も示唆もされていない。
本発明は上記観点からなされたものであり、環境に対する負担が少なく、かつ、より長期間常温でも安定して保存することのできる、より実用的な植物病害の生物防除剤および防除方法を提供することを目的とする。 The present invention has been made from the above viewpoint, and provides a more practical plant disease biocontrol agent and control method that has less burden on the environment and can be stably stored at room temperature for a longer period of time. For the purpose.
本発明者らは、上記の課題を解決するために鋭意検討を重ねた結果、植物病原菌に対し拮抗作用を有する糸状菌の胞子と、その胞子の生存に悪影響を与えない鉱物油とを用いることにより、胞子を長期安定に保つ方法として胞子と酸素を絶ち、上記目的を達成し得ることを見い出し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明の要旨は以下の通りである。
（１）植物病原菌に対し拮抗作用を有する糸状菌の胞子、および、その胞子の生存に悪影響を与えない鉱物油を含有する植物病害防除剤。
（２）前記鉱物油が、白色鉱物油であることを特徴とする（１）に記載の植物病害防除剤。
（３）前記鉱物油が、水素添加して精製された流動パラフィンであることを特徴とする（１）に記載の植物病害防除剤。
（４）前記鉱物油が、水素添加し、さらに硫酸洗浄して精製された流動パラフィンであることを特徴とする（１）に記載の植物病害防除剤。
（５）前記植物病原菌に対し拮抗作用を有する糸状菌が、ペニシリウム属、タラロマイセス属、グリオクラデイウム属またはトリコデルマ属に属する糸状菌であることを特徴とする（１）に記載の植物病害防除剤。
（６）前記植物病原菌に対し拮抗作用を有する糸状菌が、ペニシリウム ワックスマニ、タラロマイセス フラバス、グリオクラデイウム ビレンスまたはトリコデルマ ビレンスであることを特徴とする（１）に記載の植物病害防除剤。
（７）前記植物病原菌に対し拮抗作用を有する糸状菌が、ペニシリウム ワックスマニ FERM P-19592、タラロマイセス フラバス FERM P-15816、グリオクラデイウム ビレンス FERM P-17381、トリコデルマ ビレンス ATCC13213、トリコデルマ ビレンス ATCC24290、またはそれらの変異体であることを特徴とする（１）に記載の植物病害防除剤。
（８）前記胞子が、分生子、子嚢胞子または厚膜胞子であることを特徴とする（１）に記載の植物病害防除剤。
（９）二酸化珪素をさらに含有することを特徴とする（１）〜（８）のいずれか１つに記載の植物病害防除剤。
（１０）植物を栽培する土壌または植物体に、（１）〜（９）のいずれか１つに記載の植物病害防除剤を施用することを特徴とする、植物の病害の防除方法。
（１１）培養菌体物から白色鉱物油で糸状菌の分生子を回収する方法。
As a result of intensive studies to solve the above problems, the present inventors use spores of filamentous fungi having an antagonistic action against phytopathogenic fungi and mineral oil that does not adversely affect the survival of the spores. Thus, as a method for keeping the spores stable for a long period of time, it was found that the above object could be achieved by cutting off the spores and oxygen, and the present invention was completed.
That is, the gist of the present invention is as follows.
(1) A plant disease control agent comprising spores of filamentous fungi having an antagonistic action against plant pathogens, and mineral oil that does not adversely affect the survival of the spores.
(2) The plant disease control agent according to (1), wherein the mineral oil is a white mineral oil.
(3) The plant disease control agent according to (1), wherein the mineral oil is liquid paraffin purified by hydrogenation.
(4) The plant disease control agent according to (1), wherein the mineral oil is liquid paraffin purified by hydrogenation and further washing with sulfuric acid.
(5) The plant disease control according to (1), wherein the filamentous fungus having an antagonistic action against the plant pathogen is a filamentous fungus belonging to the genus Penicillium, Tallaromyces, Gliocladium or Trichoderma Agent.
(6) The plant disease control agent according to (1), wherein the filamentous fungus having an antagonistic action against the plant pathogen is Penicillium waxmani, Talaromyces flavus, Gliocladium bilence or Trichoderma bilence.
(7) The filamentous fungus having an antagonistic action against the plant pathogen is Penicillium waxmani FERM P-19592, Talaromyces flavus FERM P-15816, Gliocladium bilens FERM P-17381, Trichoderma bilens ATCC13213, Trichoderma bilens ATCC24290, or The plant disease control agent according to (1), which is a mutant thereof.
(8) The plant disease control agent according to (1), wherein the spores are conidia, ascospores or thick film spores.
(9) The plant disease control agent according to any one of (1) to (8), further comprising silicon dioxide.
(10) A method for controlling plant diseases, which comprises applying the plant disease control agent according to any one of (1) to (9) to soil or a plant body for cultivating plants.
(11) A method for recovering the conidia of filamentous fungi from the cultured cells with white mineral oil.
本発明の防除剤および防除方法は、環境に対する負荷が少なく、かつ、土壌で実際に栽培されている植物の病害に対して十分な防除効果を持続的に発揮するという利点がある。また、本発明の防除剤中の糸状菌の胞子は、より長期間常温でも生存することができ、その結果、本発明の防除剤は、より長期間常温でも安定して保存することができるという利点がある。さらに、植物病原菌に対して拮抗作用を有する微生物を水和剤等に混和して散布した場合に比べ、本発明の防除剤を散布した場合は、剤の補助成分等による作物への汚れが少ないという利点がある。 The control agent and the control method of the present invention have an advantage that the environmental load is small and a sufficient control effect is continuously exerted against diseases of plants actually cultivated in soil. In addition, the spores of filamentous fungi in the control agent of the present invention can survive for a longer period of time at room temperature, and as a result, the control agent of the present invention can be stably stored for a longer period of time at room temperature. There are advantages. Furthermore, compared to the case where a microorganism having an antagonistic action against phytopathogenic fungi is mixed and dispersed in a wettable powder or the like, when the control agent of the present invention is sprayed, there is less contamination on the crops due to the auxiliary components of the agent. There is an advantage.
以下、本発明を詳細に説明する。
＜１＞植物病原菌に対し拮抗作用を有する糸状菌の胞子
本発明の植物病害防除剤は、植物病原菌に対し拮抗作用を有する糸状菌の胞子を含有する。本発明における「植物病原菌に対し拮抗作用を有する糸状菌」とは、植物の病害の病原菌のうち少なくとも１種の病原菌に対して拮抗作用を有する糸状菌を意味する。本発明の糸状菌は、病原菌に対して拮抗作用を発揮することにより、その病原菌により引き起こされる植物の病害を予防または治癒する。ここでいう「植物の病害を予防する」とは、病
原菌が感染していないか又は病徴が現れていない植物を、その糸状菌を施用すること以外は同じ好適な条件で栽培した場合に、その糸状菌を施用しなかった植物より、その糸状菌を施用した植物のその病害の度合いが低いことをいう。また、前述した「植物の病害を治癒する」とは、病原菌が感染して病徴が現れている植物を、その糸状菌を施用すること以外は同じ好適な条件で栽培した場合に、その糸状菌を施用した植物より、その糸状菌を施用しなかった植物における病害の度合いが低いことをいう。
Hereinafter, the present invention will be described in detail.
<1> Spores of filamentous fungi having antagonistic action against phytopathogenic fungi The plant disease controlling agent of the present invention contains spores of filamentous fungi having antagonism against phytopathogenic bacteria. The “filamentous fungus having an antagonistic action against plant pathogens” in the present invention means a filamentous fungus having an antagonistic action against at least one pathogenic fungus among plant pathogenic fungi. The filamentous fungus of the present invention exhibits an antagonistic action against a pathogenic bacterium, thereby preventing or curing a plant disease caused by the pathogenic bacterium. As used herein, “preventing plant diseases” means that a plant that is not infected with a pathogenic fungus or has no symptoms of symptoms is cultivated under the same suitable conditions except that the fungus is applied. The degree of the disease of the plant which applied the filamentous fungus is lower than the plant which did not apply the filamentous fungus. In addition, the above-mentioned “healing disease of a plant” means that when a plant in which a disease symptom appears due to infection with a pathogenic fungus is cultivated under the same suitable conditions except that the fungus is applied, the filamentous It means that the degree of the disease in the plant which did not apply the filamentous fungus is lower than the plant which applied the fungus.
本発明に用いる糸状菌としては、植物病原菌に対し拮抗作用を有する糸状菌であれば特に制限はないが、ペニシリウム（Penicillium）属、タラロマイセス（Talaromyces）属、グリオクラデイウム（Gliocladium）属またはトリコデルマ（Trichoderma）属に属する糸状菌であって、植物病原菌に対し拮抗作用を有する糸状菌が挙げられる。ペニシリウム属に属する糸状菌としては、ペニシリウム ワックスマニ（Penicillium waksmanii）RU-15000（FERM P-19592）またはその変異体が好ましく、タラロマイセス属に属する糸状菌としては、タラロマイセス フラバス（Talaromyces flavus）Y-9401（FERM P-15816）またはその変異体が好ましく、グリオクラデイウム属に属する糸状菌としては、グリオクラデイウム ビレンス（Gliocladium virens）G2（FERM P-17381）またはその変異体が好ましく、トリコデルマ属に属する糸状菌としては、トリコデルマ ビレンス（Trichoderma virens）ATCC13213、トリコデルマ ビレンス ATCC24290またはそれらの変異体が好ましい。 The filamentous fungus used in the present invention is not particularly limited as long as it is a filamentous fungus having an antagonistic action against phytopathogenic fungi. However, the genus Penicillium, Talaromyces, Gliocladium or Trichoderma A filamentous fungus belonging to the genus (Trichoderma), which has an antagonistic action against phytopathogenic fungi. As the filamentous fungi belonging to the genus Penicillium, Penicillium wax mani (Penicillium waksmanii) RU-15000 (FERM P-19592) or a variant thereof is preferable. (FERM P-15816) or a variant thereof is preferred, and the filamentous fungus belonging to the genus Gliocladium is preferably Gliocladium virens G2 (FERM P-17381) or a variant thereof, The filamentous fungi belonging to are preferably Trichoderma virens ATCC13213, Trichoderma virens ATCC24290 or variants thereof.
本発明における「ある菌株の変異体」には、その菌株と同様の菌学的性質を有し、かつ、植物病原菌に対して拮抗作用を有する菌株である限り、その菌株から誘導されたいかなる変異体も含まれる。変異には、自然変異または化学的変異剤や紫外線等による人工変異を含む。 The “variant of a certain strain” in the present invention includes any mutation derived from the strain as long as it has a mycological property similar to that of the strain and has an antagonistic action against a phytopathogenic fungus. The body is also included. The mutation includes natural mutation or chemical mutation, artificial mutation due to ultraviolet rays, and the like.
ペニシリウム ワックスマニ RU-15000は、本出願人が、平成１５年１１月２１日より、独立行政法人産業科学技術総合研究所 特許生物寄託センター（茨城県つくば市東１−１−１ 中央第６）に受託番号FERM P-19592で寄託しているものである。また、タラロマイセス フラバス Y-9401は、本出願人が、平成８年９月２日に通商産業省工業技術院生命工学技術研究所 特許微生物寄託センター（現独立行政法人産業科学技術総合研究所 特許生物寄託センター）に受託番号FERM P-15816で寄託しているものである。また、グリオクラデイウム ビレンス G2は、本出願人が、平成１１年４月３０日より、通商産業省工業技術院生命工学技術研究所 特許微生物寄託センター（現独立行政法人産業科学技術総合研究所 特許生物寄託センター）に受託番号FERM P-17381で寄託しているものである。
トリコデルマ ビレンス ATCC13213およびトリコデルマ ビレンス ATCC24290は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（アメリカ合衆国 ヴァージニア州 ２０１１０−２２０９ マナサス １０８０１ ユニバーシティブルバード）からそれぞれ入手することができる。
Penicillium Wax Mani RU-15000 has been approved by the applicant since November 21, 2003, at the National Institute of Advanced Industrial Science and Technology, Patent Biological Depositary Center (1-1-1 Higashi 1-1-1, Tsukuba City, Ibaraki Prefecture). Deposited under the accession number FERM P-19592. In addition, Talaromyces Flabus Y-9401 was filed by the applicant on September 2, 1996, at the Institute of Biotechnology, Institute of Industrial Science and Technology, Ministry of International Trade and Industry. Deposited with the deposit number FERM P-15816. In addition, since April 30, 1999, the applicant of Glyocladium Billens G2 has been registered with the Patent Microbiology Depositary Center of the Institute of Biotechnology, the Ministry of International Trade and Industry, Ministry of International Trade and Industry (National Institute of Advanced Industrial Science and Technology). Deposited with the Patent Biological Deposit Center) under the accession number FERM P-17381.
Trichoderma bilens ATCC 13213 and Trichoderma bilens ATCC 24290 can be obtained from the American Type Culture Collection (Virginia, USA 20110-2209 Manassas 10801 University Boulevard), respectively.
本発明の植物病害防除剤は、植物病原菌に対し拮抗作用を有する糸状菌を一種のみ含有するものであってもよいし、そのような糸状菌を二種以上同時に含有するものであってもよい。
また、本発明に用いる糸状菌は、例えば、市販の生菌剤などに含まれているものを用いてもよいし、市販の菌株を用いて培養したものを用いてもよい。
The plant disease control agent of the present invention may contain only one type of filamentous fungus having an antagonistic action against plant pathogens, or may contain two or more types of such filamentous fungi simultaneously. .
In addition, as the filamentous fungus used in the present invention, for example, one contained in a commercially available viable agent may be used, or one cultured using a commercially available strain may be used.
本発明に用いる胞子は、糸状菌の胞子であり、分生子、子嚢胞子、厚膜胞子が含まれる。本発明の植物病害防除剤に含まれる胞子の種類は、一種のみであってもよいし、二種以上であってもよい。
本発明の胞子は、上記糸状菌の培養物から得られる。
本発明の糸状菌の培養は、糸状菌の通常の培養方法と同様の方法により行うことができる。培養方法は、菌体が増殖する方法であれば、培地の種類や培養条件等を問わず、いずれの方法でもよいが、固体培養の場合は、ポテトデキストロース寒天培地、ツァペックドックス寒天培地、麦芽寒天培地等を用いて静置培養することができ、液体培養の場合は、ポテトデキストロース液体培地、ツァペックドックス液体培地、麦芽液体培地等を用いて振とう培養することができ、さらに、大量培養する場合は、フスマ、コムギ、オオムギ、大豆粉等を用いて静置培養することができる。
ただし、糸状菌を胞子化させるため、培地の組成、培地のｐＨ、培養温度、培養湿度、培養する際の酸素濃度などの培養条件を、その胞子形成条件に適合させるように調製することが好ましい。
The spores used in the present invention are filamentous fungal spores, and include conidia, ascospores, and thick film spores. The kind of spore contained in the plant disease control agent of the present invention may be only one kind or two or more kinds.
The spore of the present invention is obtained from the above-mentioned filamentous fungus culture.
The cultivation of the filamentous fungus of the present invention can be carried out by the same method as the usual cultivation method of the filamentous fungus. Any culture method may be used as long as the cells grow, regardless of the type of culture medium, culture conditions, etc. In the case of solid culture, potato dextrose agar medium, zapek dox agar medium, malt It can be statically cultured using an agar medium, etc. In the case of liquid culture, it can be cultured with shaking using a potato dextrose liquid medium, a zapek dox liquid medium, a malt liquid medium, etc. When doing so, it can be statically cultured using bran, wheat, barley, soybean flour, and the like.
However, in order to sporulate filamentous fungi, it is preferable to adjust the culture conditions such as the composition of the medium, the pH of the medium, the culture temperature, the culture humidity, and the oxygen concentration at the time of culturing so as to match the spore formation conditions. .
培養で得られた培養物は、固体培養物をフルイ機にかけたり、液体培養物を遠心分離するなどして胞子を分離・回収して用いる。 The culture obtained by culturing is used after separating and collecting spores by applying a solid culture to a sieve or centrifuging a liquid culture.
固体培養物からの胞子の回収方法については特に制限はないが、例えば、胞子を含む固体培養物を目開き０．２５ｍｍのフルイ機にかけ、培養担体を除いた胞子濃縮物を得る。あるいは、固体培養物を容器中の流動パラフィンに加えてよく攪拌した後、その溶液を綿布で絞り出し、胞子懸濁液を得ることもできる。また、綿布に残ったものを再度流動パラフィンに加えてよく攪拌した後、その溶液を綿布で絞り出すという操作を繰り返すことにより、糸状菌の培養物から回収される胞子の回収率を上げることができる。
なお、本発明の別の態様は、培養菌体物から白色鉱物油で糸状菌の分生子を回収する方法である。本方法は以下の通りである。
糸状菌の分生子を含む固体培養物を容器中の白色鉱物油に加えてよく攪拌した後、その溶液を綿布で絞り出し、分生子懸濁液を得ることもできる。また、綿布に残ったものを再度白色鉱物油に加えてよく攪拌した後、その溶液を綿布で絞り出すという操作を繰り返すことにより、糸状菌の培養物から回収される分生子の回収率を上げることができる。
The method for recovering the spore from the solid culture is not particularly limited. For example, the solid culture containing the spore is passed through a 0.25 mm sieve to obtain a spore concentrate excluding the culture carrier. Alternatively, the solid culture can be added to the liquid paraffin in the container and stirred well, and then the solution can be squeezed with a cotton cloth to obtain a spore suspension. Moreover, after adding the thing remaining on the cotton cloth again to liquid paraffin and stirring well, the operation of squeezing the solution with the cotton cloth can be repeated to increase the recovery rate of spores recovered from the filamentous fungus culture. .
In addition, another aspect of the present invention is a method for recovering conidia of filamentous fungi from cultured bacterial cells with white mineral oil. The method is as follows.
A solid culture containing conidia of filamentous fungi can be added to the white mineral oil in the container and stirred well, and then the solution can be squeezed with a cotton cloth to obtain a conidial suspension. In addition, increase the recovery rate of conidia recovered from the filamentous fungus culture by repeating the operation of adding the material remaining on the cotton cloth to the white mineral oil and stirring well, and then squeezing the solution with the cotton cloth. Can do.
＜２＞糸状菌の胞子の生存に悪影響を与えない鉱物油
本発明の植物病害防除剤は、上記の糸状菌の胞子と共に、その胞子の生存に悪影響を与えない鉱物油を含有している。
本発明に用いる鉱物油としては、上記の糸状菌の胞子の生存に悪影響を与えない鉱物油であれば特に制限はない。
本発明に用いる鉱物油としては、無色透明である白色鉱物油、より好ましくは水素添加して精製された流動パラフィン、または、水素添加し、さらに硫酸洗浄して精製された流動パラフィンが挙げられる。
上記の鉱物油はいずれも市販されており、一般に入手は容易である。
<2> Mineral oil that does not adversely affect the survival of filamentous fungal spores The plant disease control agent of the present invention contains the above-mentioned spores of the filamentous fungus and mineral oil that does not adversely affect the survival of the spores.
The mineral oil used in the present invention is not particularly limited as long as it is a mineral oil that does not adversely affect the survival of the above-mentioned filamentous fungal spores.
Examples of the mineral oil used in the present invention include colorless and transparent white mineral oil, more preferably liquid paraffin purified by hydrogenation, or liquid paraffin purified by hydrogenation and further washing with sulfuric acid.
All of the above-mentioned mineral oils are commercially available and are generally readily available.
本発明に用いる流動パラフィンは、白色鉱物油の一種で、４０℃の動粘度が３〜２０ｍｍ2／ｓの範囲内、沸点が２４０〜４００℃の範囲内にある。精製方法の違いによって、性質の若干異なる種々の流動パラフィンが得られる。例えば、溶剤洗浄や、高圧水添、硫酸洗浄等の工程を経ることにより成分中の芳香族成分を少なくすることができ、精製度の高い流動パラフィンを得ることができる。 The liquid paraffin used in the present invention is a kind of white mineral oil and has a kinematic viscosity at 40 ° C. in the range of 3 to 20 mm 2 / s and a boiling point in the range of 240 to 400 ° C. Depending on the purification method, various liquid paraffins with slightly different properties can be obtained. For example, aromatic components in the components can be reduced by passing through steps such as solvent washing, high-pressure hydrogenation, and sulfuric acid washing, and liquid paraffin with a high degree of purification can be obtained.
流動パラフィンは長年に渡って農業用途に用いられている上、食品添加物にも指定されており、安全性が十分に確認されている物質である。流動パラフィンは、その粘度の違いにより植物や動物に対する作用は異なることが知られており、動粘度が低くなれば草本類の軟らかい葉にも影響が少なくなる。また、粘度が高くなれば、昆虫やハダニに対する作用が高くなる。しかし、流動パラフィンの種類の違いが糸状菌の胞子に対して与える影響は少なく、本発明の植物病害防除剤においては種々の流動パラフィンを用いることができる。 Liquid paraffin has been used for agricultural applications for many years and has also been designated as a food additive, and is a substance that has been fully confirmed to be safe. Liquid paraffin is known to have different effects on plants and animals due to the difference in viscosity. If the kinematic viscosity is lowered, the effect on soft leaves of herbs is reduced. In addition, the higher the viscosity, the higher the action on insects and spider mites. However, the difference in the type of liquid paraffin has little influence on the spores of filamentous fungi, and various liquid paraffins can be used in the plant disease control agent of the present invention.
＜３＞植物病害防除剤
本発明の植物病害防除剤は、植物病原菌に対し拮抗作用を有する糸状菌の胞子、および、その胞子の生存に悪影響を与えない鉱物油を含有する植物病害防除剤を含有するものである。
<3> Plant Disease Control Agent The plant disease control agent of the present invention comprises a plant disease control agent containing a spore of a filamentous fungus having an antagonistic action against a phytopathogenic fungus, and a mineral oil that does not adversely affect the survival of the spore. It contains.
本発明の植物病害防除剤に含まれる上記の糸状菌の胞子濃度は、本発明の効果を損なわない限り特に制限はないが、胞子濃度に換算して、好ましくは１０4〜１０10 cfu/ml、より好ましくは１０6〜１０9 cfu/mlとすることができる。このような範囲であると、本発明の効果がより十分に発揮されるからである。 The spore concentration of the above-mentioned filamentous fungus contained in the plant disease control agent of the present invention is not particularly limited as long as the effect of the present invention is not impaired, but preferably 10 4 to 10 10 cfu / ml in terms of spore concentration. More preferably, it can be 10 6 to 10 9 cfu / ml. It is because the effect of this invention is more fully exhibited as it is such a range.
また、本発明の植物病害防除剤は、本発明の効果が発揮される限り、上記の鉱物油の含有量に特に制限はないが、防除剤全量に対して８０〜９９重量％含有することが好ましく、８５〜９５重量％含有することが特に好ましい。このような範囲であると、安定した製剤が得られるからである。
使用にあたっては、水で５００〜４０００倍に希釈して植物に散布することができる。また、本発明の植物病害防除剤は、本発明の効果を妨げない限り、上記糸状菌の胞子及び上記鉱物油以外に、任意の成分を含有していてもよい。そのような任意の成分として、二酸化珪素粉末、微細粘土鉱物等の添加剤、アニオン型、カチオン型、両性型等の界面活性剤が挙げられる。これらの添加剤、界面活性剤を含有させると、糸状菌の胞子が鉱物油内でより均一に分散し、本発明の植物病害防除剤の製品としての安定性がより向上する。
また、二酸化珪素粉末（例えば「カープレッックス」（デグッサ（Degussa）社製））は、保存中の製剤中で胞子の沈降を抑え、使用時にあたってボトルから製剤を取り扱い易くする。
本発明の防除剤の乳剤を製造する方法については特に制限はないが、例えば、界面活性剤を含有する本発明の鉱物油中に、採取したペニシリウム菌の胞子を混入させ、懸濁液を調製することにより製造することができる。
Moreover, as long as the effect of this invention is exhibited, the plant disease control agent of this invention does not have a restriction | limiting in particular in content of said mineral oil, However It is contained 80 to 99weight% with respect to the control agent whole quantity. The content is preferably 85 to 95% by weight. This is because in such a range, a stable preparation can be obtained.
In use, it can be diluted 500-4000 times with water and sprayed on plants. Moreover, the plant disease control agent of this invention may contain arbitrary components other than the spore of the said filamentous fungus, and the said mineral oil, unless the effect of this invention is disturbed. Examples of such optional components include additives such as silicon dioxide powder and fine clay minerals, and surfactants such as anion type, cation type and amphoteric type. When these additives and surfactants are contained, the spores of filamentous fungi are more uniformly dispersed in the mineral oil, and the stability of the plant disease control agent of the present invention is further improved.
In addition, silicon dioxide powder (eg, “Carplex” (Degussa)) suppresses spore settling in the formulation during storage, making it easier to handle the formulation from the bottle when in use.
The method for producing the emulsion of the control agent of the present invention is not particularly limited. For example, the collected Penicillium spores are mixed in the mineral oil of the present invention containing a surfactant to prepare a suspension. Can be manufactured.
この様にして得られる本発明の植物病害防除剤が適応される植物の病害は、本発明の糸状菌が拮抗作用を示す病原菌が植物に感染することよって引き起こされる植物の病害であれば特に制限はないが、本発明の糸状菌が拮抗作用を示す病原菌であって、かび類に属する病原菌が植物に感染することによって引き起こされる植物の病害が特に好ましい。 Plant diseases to which the plant disease control agent of the present invention obtained in this way is applied are particularly limited as long as they are plant diseases caused by infecting the plant with pathogenic bacteria to which the filamentous fungus of the present invention has an antagonistic action. However, the disease of the plant caused by the pathogenic fungus of the present invention having an antagonistic action and being caused by infecting the plant with the fungus belonging to the fungus is particularly preferable.
本発明の植物病害防除剤が適応される植物の病害として、例えば、ペニシリウム属、タラロマイセス属、グリオクラデイウム属またはトリコデルマ属に属する糸状菌が拮抗作用を示す病原菌が植物に感染することによって引き起こされる植物の病害が挙げられ、その中でもペニシリウム ワックスマニ、タラロマイセス フラバス、グリオクラデイウム ビレンスまたはトリコデルマ ビレンスが拮抗作用を示す病原菌が植物に感染することによって引き起こされる植物の病害が好ましく、その中でもペニシリウム ワックスマニ FERM P-19592、タラロマイセス フラバス FERM P-15816、グリオクラデイウム ビレンス FERM P-17381、トリコデルマ ビレンス ATCC13213またはトリコデルマ ビレンス ATCC24290が拮抗作用を示す病原菌が植物に感染することによって引き起こされる植物の病害が特に好ましい。 Plant diseases to which the plant disease control agent of the present invention is applied are caused by, for example, infecting a plant with a pathogenic fungus that exhibits an antagonistic action by a filamentous fungus belonging to the genus Penicillium, Tallaromyces, Gliocladium or Trichoderma. Among them, plant diseases caused by infecting a plant with a pathogenic fungus that is antagonistic to Penicillium wax mani, Talalomyces flavus, Glyocladium bilens or Trichoderma bilens are preferred, among which Penicillium wax Manifold FERM P-19592, Talalomyces flavus FERM P-15816, Glyocladium bilens FERM P-17381, Trichoderma bilens ATCC13213 or Trichoderma bilens ATCC24290 Plant diseases caused thereby are particularly preferred.
ペニシリウム ワックスマニが拮抗作用を示す病原菌が植物に感染することによって引き起こされる植物の病害としては、イチゴうどんこ病、ウリ類うどんこ病、バラうどんこ病等のうどんこ病、イチゴ炭疽病、ウリ類炭疽病、チャ炭疽病、マンゴー炭疽病、カキ炭疽病、核果類の炭疽病等の炭疽病、トマト葉かび病が挙げられる。
また、タラロマイセス フラバスが拮抗作用を示す病原菌が植物に感染することによって引き起こされる植物の病害としては、イチゴうどんこ病、トマト葉かび病、チャ炭疽病が
挙げられる。
Plant diseases caused by infecting plants with pathogenic bacteria with penicillium wax mani antagonism include powdery mildew such as strawberry powdery mildew, cucumber powdery mildew, rose powdery mildew, strawberry anthracnose, cucumber Examples include anthracnose, tea anthracnose, mango anthracnose, oyster anthracnose, anthracnose such as anthracnose, and tomato leaf mold.
Moreover, strawberry powdery mildew, tomato leaf mold, and tea anthracnose can be mentioned as plant diseases caused by infecting plants with pathogenic bacteria having an antagonistic action by Talalomyces flavus.
また、グリオクラデイウム ビレンスやトリコデルマ ビレンスが拮抗作用を示す病原菌が植物に感染することによって引き起こされる植物の病害としては、イネ科に属するコウライ芝のラージパッチ、ベントグラスのブラウンパッチおよびダラースポット、アブラナ科に属するブロッコリーの根こぶ病、ハクサイの根こぶ病、キャベツの苗立枯病および菌核病、ダイコンの萎黄病、ユリ科に属するネギの白絹病および萎凋病、タマネギの灰色腐敗病、アカザ科に属するホウレンソウの株腐病、立枯病および萎凋病、ヤマノイモ科に属するナガイモの褐色腐敗病、ナデシコ科に属するカーネーションの萎凋病、セリ科に属するパセリの萎凋病、キク科に属するレタスの根腐病、ナス科に属するトマトの萎凋病、根腐萎凋病、褐色根腐病および半身萎凋病、ナスの半身萎凋病、ジャガイモのそうか病、ウリ科に属するスイカのつる枯れ病、メロンのつる割病および黒点根腐病、ヒルガオ科に属するサツマイモの紫紋羽病、サトイモ科に属するコンニャクの根腐病、バラ科に属するイチゴの萎黄病、ナシの白紋羽病などが挙げられる。 Plant diseases caused by infecting plants with pathogenic fungi that are antagonized by Glyocladium bilens or Trichoderma bilens include large patches of mulberry grass, bentgrass brown patches and dollar spots, rape Broccoli root-knot disease belonging to the family, Chinese cabbage root-knot disease, cabbage seedling blight and mycorrhizal disease, Japanese radish wilt disease, leeks white silk disease and wilt disease belonging to the lily family, onion gray rot disease, Spinach stock rot, stem blight and wilt disease belonging to red crustaceae, brown rot disease of Chinese yam belonging to the genus Dioscorea, carnation wilt of carnation belonging to the physaceae, parsley wilt disease belonging to the celery family, lettuce belonging to the chrysanthemum family Root rot, Tomato wilt, Root wilt, Brown root rot and Semi Body wilt disease, eggplant half wilt disease, potato scab, watermelon vine blight, melon vine split disease, sunflower root rot, sunflower root rot, sweet potato purple herb disease, taro family Konjac root rot, strawberry yellow rot, pear white crest rot, and so on.
＜４＞本発明の植物病害防除剤の施用方法および本発明の植物病害防除剤を施用することによる植物の病害の防除方法
本発明の植物病害防除剤は、上記のような各種植物の各種病害を防除する目的で植物を栽培する土壌または植物体に施用することができるが、その施用方法に特に制限はなく、病害の種類や適用植物の種類等によって適宜選択される。例えば、本発明の防除剤を、植物を栽培する土壌に混和、散布または潅注等を行うことにより、本発明の防除剤を施用してもよく、あるいは、本発明の防除剤を植物体に直接塗布または散布等することにより、本発明の防除剤を施用してもよい。ここで、土壌に施用する場合は、本発明の防除剤を土壌に施用してから植物を植えてもよく、また、植物を土壌に植えた後でその土壌に施用してもよい。本発明の防除剤を散布処理する場合は、本発明の防除剤を適当量の水等で希釈して使用することができる。
<4> Method for Applying Plant Disease Control Agent of the Present Invention and Method for Controlling Plant Diseases by Applying the Plant Disease Control Agent of the Present Invention The plant disease control agent of the present invention is used for various diseases of various plants as described above. Although it can be applied to soil or plants where plants are cultivated for the purpose of controlling pests, the application method is not particularly limited, and is appropriately selected depending on the type of disease, the type of applied plant, and the like. For example, the control agent of the present invention may be applied by mixing, spraying, or irrigating the control agent of the present invention to the soil where the plant is cultivated, or the control agent of the present invention may be applied directly to the plant body. You may apply the control agent of this invention by apply | coating or spraying. Here, when applying to soil, a plant may be planted after applying the control agent of the present invention to soil, or after planting a plant in soil, it may be applied to the soil. When spraying the control agent of the present invention, the control agent of the present invention can be used after diluted with an appropriate amount of water or the like.
なお、本発明の植物病害防除剤の施用量は、病害の種類、適用植物の種類等によって異なるため一概には規定できないが、土壌に散布処理する場合は、１０ａ当たり、糸状菌の胞子濃度に換算して通常１０4〜１０6cfu/mlの防除剤溶液を５０〜３００Ｌ散布することができる。 In addition, since the application amount of the plant disease control agent of the present invention differs depending on the type of disease, the type of applied plant, etc., it cannot be defined unconditionally, but when spraying to the soil, the spore concentration of the filamentous fungus per 10a In conversion, 50 4 to 300 L of a control solution of 10 4 to 10 6 cfu / ml can be sprayed.
以下、本発明を実施例によりさらに具体的に説明する。
（糸状菌の培養）
（１）固体培養
ペニシリウム ワックスマニ FERM P-19592の胞子をＰＤＡ培地で５日間２５℃で静置培養した後、白金耳で一部をＰＤブロスに接種し、２５℃で一晩振とう培養した。次に、水分含量を５０重量％に予め調製した滅菌済みのフスマにＰＤブロス培養液の一部を接種し、混合した後、２５℃で固体静置培養を開始した。７日間培養した後、胞子数を計測したところ、フスマ１ｇ当たり１×１０10個の胞子が形成されていた。フスマを乾燥した後、フルイ機にかけることによりFERM P-19592の胞子を大量に回収することができた。
（２）液体培養
ペニシリウム ワックスマニ FERM P-19592をＰＤＡ培地で５日間２５℃で静置培養した後、白金耳で一部を麦芽エキス（ＤＩＦＣＯ社製）を用いた液体培地に接種し、２５℃で振とう培養を行った。７日間培養後、培養液中の胞子数を計測したところ、培養液１ｍｌ当たり１×１０8個の胞子が形成されていた。この培養液をガーゼでろ過し、遠心分離することによりFERM P-19592の胞子が大量に得られた。
Hereinafter, the present invention will be described more specifically with reference to examples.
(Cultivation of filamentous fungi)
(1) Solid culture After spore culture of Penicillium waxmani FERM P-19592 in a PDA medium for 5 days at 25 ° C., a portion was inoculated into PD broth with a platinum loop and cultured overnight at 25 ° C. with shaking. . Next, a portion of the PD broth culture solution was inoculated into a sterilized bran prepared in advance to a moisture content of 50% by weight, and after mixing, solid stationary culture was started at 25 ° C. After culturing for 7 days, the number of spores was counted. As a result, 1 × 10 10 spores were formed per 1 g of the bran. After drying the bran, it was possible to collect a large amount of FERM P-19592 spores by passing through a sieve.
(2) Liquid culture Penicillium waxmani FERM P-19592 was statically cultured in PDA medium for 5 days at 25 ° C., and a portion thereof was inoculated into a liquid medium using malt extract (manufactured by DIFCO) with platinum ears. Shake culture was performed at 0 ° C. After culturing for 7 days, the number of spores in the culture broth was counted. As a result, 1 × 10 8 spores were formed per 1 ml of the broth. The culture broth was filtered with gauze and centrifuged to obtain a large amount of FERM P-19592 spores.
（製剤例１〜３）
前述の実施例１（１）の方法で回収したペニシリウム ワックスマニ FERM P-19592の胞子１０重量部と、ポリオキシエチレンアルキルエーテル系界面活性剤５重量部に、８５重量部の流動パラフィンを加えて乳剤とした（製剤例１）。また、ペニシリウム ワックスマニ FERM P-19592に代えて、タラロマイセス フラバス FERM P-15816、グリオクラデイウム ビレンス FERM P-17381をそれぞれ用いて同様の操作を行って乳剤を得た（それぞれ製剤例２、製剤例３）。
製剤例１〜３の胞子濃度は、それぞれ５０×１０9cfu/g、１．５×１０9cfu/g、３．０×１０8cfu/gであった。
また、用いた流動パラフィンの性状は、比重０．８５６０（１５／４℃）、動粘度７．９８ｍｍ2／ｓ（４０℃）、引火点１６０℃である。
(Formulation examples 1 to 3)
85 parts by weight of liquid paraffin was added to 10 parts by weight of the spore of Penicillium wax mani FERM P-19592 recovered by the method of Example 1 (1) and 5 parts by weight of the polyoxyethylene alkyl ether surfactant. An emulsion was prepared (Formulation Example 1). Further, instead of Penicillium wax manifold FERM P-19592, emulsions were obtained in the same manner using Talaromyces flavus FERM P-15816 and Glyocladium bilence FERM P-17381, respectively (Formulation Example 2, Formulation respectively) Example 3).
The spore concentrations of Formulation Examples 1 to 3 were 50 × 10 9 cfu / g, 1.5 × 10 9 cfu / g, and 3.0 × 10 8 cfu / g, respectively.
The liquid paraffin used has a specific gravity of 0.8560 (15/4 ° C.), a kinematic viscosity of 7.98 mm 2 / s (40 ° C.), and a flash point of 160 ° C.
（イチゴうどんこ病に対する防除効果の確認）
ポット育苗したイチゴ苗（品種：さちのか）をビニールハウスに１０月２３日に定植した。その際、畦幅５０ｃｍ畦間５０ｃｍ、株間２０ｃｍで２条植えとした。冬季は最低１２℃で栽培した。試験開始前の時点ではうどんこ病の発生はなかった。
２月１０日より１週間間隔で４回、製剤例１を水道水で１０００倍に希釈したものを、１０ａ当り２５０Ｌ散布した。同様の操作を製剤例２についても行った。また、無処理区として、製剤例の代わりに水道水を用いて同様の操作を行った。上記の試験は１区２４株３連制で行った。最終散布から１週間後（３月９日）、自然発病で発生したうどんこ病の発病度合いを調査した。調査は、区の両端の４株を除く２０株について、上位３複葉の各小葉毎に以下の発病程度に合わせてスコア付けし、発病小葉率および発病度を求め、発病度より無処理区に対する防除価を求めた。２月１８日に無処理区にうどんこ病の初発を見た。
指数０；無発病 指数１；病斑面積率５％未満
指数２；病斑面積率が５％以上２５％未満 指数３；病斑面積率が２５％以上５０％未満指数４；病斑面積率が５０％以上
発病度＝Σ（程度別発病小葉数×指数）×１００／（調査小葉数）×４）
防除価＝（１−散布区の発病度／無処理区の発病度）×１００
以上の試験の結果を表１に示す。
(Confirmation of control effect against strawberry powdery mildew)
Strawberry seedlings (variety: Sachinoka) grown in pots were planted in a greenhouse on October 23. At that time, two rows were planted with a cocoon width of 50 cm and an intercostal space of 20 cm. Cultivated at least 12 ° C in winter. There was no powdery mildew before the start of the study.
From February 10, 4 times at weekly intervals, Formulation Example 1 diluted 1000 times with tap water was sprayed at 250 L per 10a. The same operation was performed for Formulation Example 2. Moreover, the same operation was performed using the tap water instead of the formulation example as an untreated section. The above test was carried out in 1 ward, 24 shares, 3 systems. One week after the final spraying (March 9), the incidence of powdery mildew caused by spontaneous disease was investigated. For the 20 strains excluding the 4 strains at both ends of the ward, score each lobule of the top 3 complex leaves according to the following disease severity, determine the morbidity and morbidity, and determine the morbidity rate for the untreated ward The control value was determined. On February 18th, I saw the first occurrence of powdery mildew in the untreated area.
Index 0; No disease index 1; Spot area ratio less than 5% Index 2; Spot area ratio is 5% or more and less than 25% Index 3; Spot area ratio is 25% or more and less than 50% Index 4; More than 50% Disease severity = Σ (number of diseased leaflets by index × index) × 100 / (number of leaflets surveyed) × 4)
Control value = (1-onset area / on-treatment area) × 100
The results of the above test are shown in Table 1.
表１の結果から明らかなように、無処理区に比べてペニシリウム ワックスマニ FERM P-19592散布区およびタラロマイセス フラバス FERM P-15816散布区では、イチゴうどんこ病の発病が抑制された。 As is clear from the results in Table 1, the occurrence of strawberry powdery mildew was suppressed in the Penicillium wax mani FERM P-19592 sprayed area and the Tallaromyces flavus FERM P-15816 sprayed area compared to the untreated group.
（トマト葉かび病に対する防除効果の確認）
５月１２日第１花房が開花しているトマト苗（品種：桃太郎）を畦幅１００ｃｍ、株間５０ｃｍでハウスに定植した。試験開始前の時点では葉かび病の発生はなかった。
５月２９日、６月５日、６月１２日に、製剤例１を水道水で１０００倍に希釈したものを、１０ａ当り１５０Ｌ散布した。同様の操作を製剤例２についても行った。また、無処理区として、製剤例の代わりに水道水を用いて同様の操作を行った。上記試験は、１区１２株３連制で行った。
６月１９日に各区の両端を除いた１０株の第２果房前後の１０複葉について病斑数を調査した。発病度、防除価等は、実施例３と同様に算出した。その結果を表２に示す。
(Confirmation of control effect against tomato leaf mold)
On May 12, a tomato seedling (variety: Momotaro) in which the first inflorescence was flowering was planted in a house at a cocoon width of 100 cm and a strain of 50 cm. There was no leaf mold disease before the start of the study.
On May 29, June 5, and June 12, Formulation Example 1 diluted 1000 times with tap water was sprayed at 150 L per 10a. The same operation was performed for Formulation Example 2. Moreover, the same operation was performed using the tap water instead of the formulation example as an untreated section. The above test was conducted in a 1-district, 12-stock, 3-running system.
On June 19, the number of lesions was investigated on 10 double leaves before and after the second fruit bunches of 10 strains excluding both ends of each section. Disease severity, control value and the like were calculated in the same manner as in Example 3. The results are shown in Table 2.
表２の結果から明らかなように、無処理区に比べてペニシリウム ワックスマニ FERM P-19592散布区およびタラロマイセス フラバス FERM P-15816散布区では、トマト葉かび病の発病が抑制された。 As is clear from the results in Table 2, the occurrence of tomato leaf mold was suppressed in the Penicillium wax mani FERM P-19592 sprayed area and the Tallalomyces flavus FERM P-15816 sprayed area compared to the untreated group.
（チャ炭疽病に対する防除効果の確認）
やぶきた１０年生の茶を用い、１区３０ｍ2、反復なしで、３番茶を対象とした。生育を整えるため７月２５日に整枝を行った。８月６日から７日毎に４回、製剤例１を水道水で１０００倍に希釈し、１０ａ当り３００Ｌ散布した。同様の操作を製剤例２についても行った。また、無処理区として、製剤例の代わりに水道水を用いて同様の操作を行った。最終散布から３週間後の９月１７日に、１ｍ2の範囲３ヶ所の中の病葉数をそれぞれ調査した。その結果を表３に示す。
(Confirmation of control effect against tea anthracnose)
Using 10-year-old tea from Yabukita, 30m 2 in 1 ward, No. 3 tea was targeted. In order to adjust the growth, the branches were trimmed on July 25. Formulation Example 1 was diluted 1000 times with tap water four times every 7 days from August 6 to 300 L per 10a. The same operation was performed for Formulation Example 2. Moreover, the same operation was performed using the tap water instead of the formulation example as an untreated section. On September 17th, 3 weeks after the final spraying, the number of diseased leaves in 3 areas of 1 m 2 was investigated. The results are shown in Table 3.
表３の結果から明らかなように、無処理区に比べてペニシリウム ワックスマニ FERM P-19592散布区およびタラロマイセス フラバス FERM P-15816散布区では、チャ炭疽病の発病が抑制された。 As is clear from the results in Table 3, the occurrence of anthracnose of Cha was suppressed in the Penicillium wax mani FERM P-19592 sprayed area and the Talaromyces flavus FERM P-15816 sprayed area compared to the untreated area.
（ネギ白絹病に対する防除効果の確認）
３月２５日に播種したネギ（品種：東京冬黒）の幼苗を５月１９日、株間２．７ｃｍ条間１ｍで定植した。試験開始前の時点ではネギ白絹病の発生はなかった。
６月２３日、７月１４日、８月１１日、９月２２日の４回の土寄せの内、最初の２回の土寄せ時に、水道水で５００倍に希釈した製造例３を１ｍ2当り０．５Ｌ株元に処理した。また、無処理区として、製剤例の代わりに水道水を用いて同様の操作を行った。この試験は、１区２０ｍ2（５×４ｍ）、３連制で行った。
１０月６日に試験区の中央２ｍの株を掘り取り、株元の菌核及び葉鞘部に菌糸の付着している株を調査し発病株を計数した。その結果を表４に示す。
(Confirmation of control effect against leeks)
Young seedlings of green onions (variety: Tokyo Fukuro) seeded on March 25 were planted on May 19 at a distance of 2.7 cm between the strains and 1 m. There was no onion white silk disease before the start of the study.
Of the four earth mounds on June 23, July 14, August 11 and September 22, the first 3 times moulded, Production Example 3 diluted 500 times with tap water per 1 m 2 Processed to 0.5L stock. Moreover, the same operation was performed using the tap water instead of the formulation example as an untreated section. This test was carried out in a 1-unit 20 m 2 (5 × 4 m), three-run system.
On October 6, a strain 2 m in the center of the test area was dug, and the strains with mycelia attached to the mycorrhiza and the leaf sheath of the strain were investigated and the number of diseased strains was counted. The results are shown in Table 4.
表４の結果から明らかなように、無処理区に比べてグリオクラデイウム ビレンス FERM P-17381散布区では、ネギ白絹病の発病が抑制された。 As is clear from the results in Table 4, the onion silkworm disease was suppressed in the Glyocladium bilens FERM P-17381 sprayed area compared to the untreated group.
（保存安定性試験）
前述の実施例１（１）の方法で、ペニシリウム ワックスマニ FERM P-19592、タラロマイセス フラバス FERM P-15816、グリオクラデイウム ビレンス FERM P-17381のそれぞれの分生子粉末を回収した。それらの分生子粉末と、実施例２に記載された製剤例１〜３を用いて、以下のような保存安定性試験を行った。
(Storage stability test)
The conidia powders of Penicillium wax mani FERM P-19592, Talaromyces flavus FERM P-15816, and Gliocladium vilens FERM P-17381 were collected by the method of Example 1 (1) described above. Using these conidia powders and Formulation Examples 1 to 3 described in Example 2, the following storage stability test was performed.
上述の分生子粉末と製剤例１〜３を、３５℃のインキュベーター内に置き、それぞれの胞子生存率を経時的に調べた。胞子生存率は、各製剤および分生子粉末を殺菌した０．０５％ツイーン２０水溶液で１０倍毎に希釈し、ポテトデキストロース寒天培地に菌を生育させて、生菌数を求めることにより測定した。その結果を表５に示す。 The above-mentioned conidial powder and Formulation Examples 1 to 3 were placed in an incubator at 35 ° C., and the spore survival rate was examined over time. The spore survival rate was measured by diluting each preparation and conidial powder with a sterilized 0.05% Tween 20 aqueous solution every 10 times, growing the bacteria on a potato dextrose agar medium, and determining the viable cell count. The results are shown in Table 5.
表５の結果から明らかなように、本発明の製剤は、保存安定性が高いことが示された。 As is apparent from the results in Table 5, the preparation of the present invention was shown to have high storage stability.
Claims (11)
ビレンス FERM P-17381、トリコデルマ ビレンス ATCC13213、トリコデルマ ビレンス ATCC24290、またはそれらの変異体であることを特徴とする請求項１に記載の植物病害防除剤。 Filamentous fungi having an antagonistic action against the above-mentioned plant pathogens are Penicillium wax mani FERM P-19592, Tallaromyces flavus FERM P-15816, Gliocladium bilens FERM P-17381, Trichoderma bilens ATCC13213, Trichoderma bilens ATCC24290, or mutations thereof The plant disease control agent according to claim 1, which is a body.
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